Nghiên cứu về độc tính cận trường diễn trong 13-tuần của 2-(l-menthoxy)etanol ở chuột F344

Giới thiệu

2-(1-menthoxy)etanol (số CAS 38618-23-4) là chất lỏng trong suốt, không màu, có mùi đặc trưng và được sử dụng rộng rãi làm chất tạo hương vị. Ủy ban chuyên gia chung của FAO/WHO về phụ gia thực phẩm (JECFA) đã đánh giá 2-(l-methoxy) ethanol như một chất tạo hương vị, được phân loại là các chất có cấu trúc liên quan đến tinh dầu bạc hà1. Dựa trên lớp cấu trúc của chất tạo hương vị, 2-(l-methoxy)etanol được xếp vào Loại I. Tại Hoa Kỳ và Châu Âu, mức tiêu thụ 2-(l-methoxy)etanol do con người thải ra được ước tính lần lượt là 12 ug/người/ngày và 0,01 ug/người/ngày, cả hai đều dưới ngưỡng Loại I là 1.800 ug/người/ngày. Dựa trên những ước tính này, có thể coi là 2-(1-menthoxy) ethanol có thể không gây lo ngại về an toàn trong quá trình sử dụng thường xuyên như một chất tạo hương vị.

CISTANCHE TUBULOSA TỰ NHIÊN ĐỂ CẢI THIỆN CHỨC NĂNG TÌNH DỤC PHGS75% ECH 30% ACT 12%

As part of the risk assessment, it has been revealed that 2-(1-menthoxy)ethanol was not mutagenic in the Ames test, and the only in vivo study performed to date was an oral acute toxicity study in male and female rats (LD50: >2,000 mg/kg trọng lượng cơ thể [BW])1. Mặc dù sử dụng 2-(1-menthoxy)etanol làm chất tạo hương vị nhưng hiện có rất ít dữ liệu về độc tính khi dùng liều lặp lại của hợp chất này. Phòng thí nghiệm của chúng tôi đã nghiên cứu độc tính của một số chất phụ gia thực phẩm, bao gồm các chất tạo hương vị đại diện cho từng loại, trong các mô hình gặm nhấm2–7. Để làm rõ đặc điểm độc tính và thiết lập mức tác dụng phụ không quan sát được (NOAEL), chúng tôi đã tiến hành một nghiên cứu độc tính cận trường diễn trong 13-tuần của 2-(1-menthoxy)etanol. dùng đường uống cho chuột F344 bằng ống thông.

Nguyên liệu và phương pháp

Kiểm tra hóa chất

2-(1-menthoxy)etanol (Lô số 5I0002, độ tinh khiết 99,9%) do Takasago Int sản xuất. Corp. (Tokyo, Nhật Bản) được cung cấp bởi Phòng Tiêu chuẩn và Đánh giá, Cục An toàn Thực phẩm, Bộ Y tế, Lao động và Phúc lợi Nhật Bản, với sự hỗ trợ của Hiệp hội Nguyên liệu Hương liệu & Hương liệu Nhật Bản (Tokyo, Nhật Bản). Mặc dù chất thử nghiệm được cung cấp dưới dạng hỗn hợp các đồng phân quang học (số CAS 38618-23-4), nhưng nó đã được nhà sản xuất xác nhận là l-enantiomer (số CAS 75443-64-0). Đường uống bằng dầu ngô (Wako Pure Chemical Industries, Osaka, Nhật Bản) là phương tiện được chọn làm đường dùng do tính không hòa tan trong nước và tính dễ bay hơi của etanol 2-(1-menthoxy). Dung dịch 2-(1-menthoxy)etanol được pha hàng ngày, ngay trước khi dùng. Sau khi bảo quản trong 2 giờ ở nhiệt độ phòng, tỷ lệ dư lượng của 2-(1-menthoxy) etanol trong dung dịch 4, 40 và 400 mg/mL được xác nhận là 96,8%, 99,8% và 96,5% , tương ứng, bằng sắc ký khí (Hiệp hội Thanh tra Thực phẩm và Môi trường Công nghiệp Thực phẩm Nhật Bản, Tokyo, Nhật Bản).

Động vật thí nghiệm

Tổng cộng, 40 con chuột đực và 40 con chuột không có mầm bệnh cụ thể (F344/DuCrlCrlj, 5 tuần) đã được mua từ Phòng thí nghiệm Charles River Nhật Bản (Yokohama, Nhật Bản) và được sử dụng sau khi thích nghi trong một tuần. Trong quá trình nghiên cứu, động vật được nhốt trong lồng polycarbonate với lớp lót chip mềm, được duy trì trong phòng có hệ thống rào chắn để kiểm soát chu kỳ sáng/tối (12 giờ), thông gió (tốc độ trao đổi không khí 18 lần/h), nhiệt độ ( 24 ± 1 độ) và độ ẩm tương đối (55 ± 5%). Chuồng và lớp lót chuồng được thay hai lần một tuần. Mỗi con vật đều được sử dụng miễn phí nước máy và chế độ ăn cơ bản (CRF{12}}; Oriental Yeast, Tokyo, Nhật Bản). Khi bắt đầu thí nghiệm, các con vật được phân ngẫu nhiên vào bốn nhóm, mỗi nhóm gồm 10 con chuột đực và cái, dựa trên trọng lượng cơ thể được đo ngay trước khi bắt đầu điều trị bằng hóa chất thử nghiệm.

Thiết kế nghiên cứu

Trong một nghiên cứu sơ bộ trong ngày {{0}}đánh giá 2-(1-menthoxy) ethanol được sử dụng ở các liều 0, 200, 400 và 800 mg/ kg BW/ ngày, trọng lượng gan tuyệt đối và tương đối tăng đáng kể ở tất cả các nhóm được điều trị ở cả hai giới (dữ liệu không được hiển thị). Dựa trên những kết quả này, chúng tôi đã chọn các liều ethanol 2-(1-menthoxy) là 0, 15, 60 và 250 mg/kg BW/ngày để sử dụng cho cả chuột đực và chuột cái trong {{ hiện tại 13}}tuần nghiên cứu độc tính.

Tình trạng chung và tỷ lệ tử vong được đánh giá hàng ngày. Trọng lượng cơ thể, cũng như lượng thức ăn được cung cấp và dư thừa, được đo mỗi tuần một lần trong thời gian thử nghiệm. Tất cả chuột được nhịn ăn qua đêm sau khi hoàn thành điều trị và các mẫu máu xét nghiệm huyết học và sinh hóa huyết thanh được thu thập từ động mạch chủ bụng dưới gây mê bằng đường hô hấp sâu bằng isoflurane. Thiết kế nghiên cứu được thực hiện theo Hướng dẫn chỉ định phụ gia thực phẩm và sửa đổi tiêu chuẩn sử dụng phụ gia thực phẩm của Nhật Bản (1996) và được Ủy ban sử dụng và chăm sóc động vật của Viện Khoa học sức khỏe quốc gia Nhật Bản phê duyệt.

Huyết học và sinh hóa huyết thanh

Các thông số huyết học sau đây được phân tích bằng máy phân tích huyết học tự động ProCyte Dx (Phòng thí nghiệm IDEXX, Westbrook, ME, Hoa Kỳ): số lượng bạch cầu (WBC), số lượng hồng cầu (RBC), nồng độ huyết sắc tố (HGB), hematocrit (HCT), thể tích tiểu cầu trung bình (MCV), huyết sắc tố trung bình trong tiểu cầu (MCH), nồng độ huyết sắc tố trung bình trong tiểu cầu (MCHC), số lượng tiểu cầu (PLT) và các tế bào bạch cầu biệt hóa, bao gồm bạch cầu trung tính (Neut), tế bào lympho (Bạch huyết), bạch cầu đơn nhân (Mono), bạch cầu ái toan (Eosino) và basophils (Baso). Phân tích sinh hóa huyết thanh được Oriental Yeast thực hiện với các thông số: protein tổng số (TP), albumin (Alb), tỷ lệ albumin/globulin (A/G), bilirubin tổng số (Bil), glucose, cholesterol toàn phần (T-Chol), chất béo trung tính (TG), nitơ urê (BUN), creatinine (Cre), canxi (Ca), phốt pho vô cơ (IP), natri (Na), kali (K), clo (Cl), aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), phosphatase kiềm (ALP) và -glutamyl transpeptidase ( -GTP).

Trọng lượng cơ quan và đánh giá mô bệnh học

Một cuộc khám nghiệm tử thi hoàn chỉnh đã được thực hiện cho tất cả các động vật, và não, tuyến ức, phổi, tim, lá lách, gan, tuyến thượng thận, thận, tinh hoàn và buồng trứng đã được cân. Các cơ quan này, cũng như các mô từ tủy sống, dây thần kinh sinh ba, tuyến yên, khoang mũi, tuyến nước bọt, lưỡi, thực quản, khí quản, động mạch chủ, tuyến giáp, tuyến cận giáp, tuyến tụy, dạ dày, ruột non và ruột già, dưới hàm và mạc treo các hạch bạch huyết, âm đạo, tử cung, bàng quang tiết niệu, tuyến tiền liệt, túi tinh, mào tinh hoàn, xương đùi và xương ức với tủy xương, đốt sống, cơ xương, dây thần kinh tọa, da và tuyến vú, được cố định trong formalin đệm trung tính 10%; sau đó, các phần được nhúng parafin được chuẩn bị và nhuộm bằng hematoxylin và eosin để kiểm tra mô bệnh học. Tinh hoàn và mắt có tuyến Harderian được cố định lần lượt trong dung dịch cố định Bouin và dung dịch Davidson. Các mô xương, bao gồm khoang mũi, đốt sống, xương ức và xương đùi, được khử keo bằng hỗn hợp axit formic 10% và formalin đệm 10% trong tối đa 2 tuần. Đánh giá mô bệnh học được thực hiện đối với tất cả các mô thu được từ động vật trong nhóm đối chứng và nhóm được dùng liều cao nhất trừ khi quan sát thấy bất kỳ tổn thương nào liên quan đến điều trị.

CISTANCHE TUBULOSA TỰ NHIÊN ĐỂ CẢI THIỆN MIỄN DỊCH PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Hóa mô miễn dịch cho 2u-globulin

Ở chuột đực, sự tích tụ 2u-globulin trong thận được kiểm tra bằng phân tích hóa mô miễn dịch của các phần được nhúng parafin. Để thu hồi kháng nguyên, các phần thu được từ 5 con chuột trong mỗi nhóm được ủ với proteinase K (DAKO, Glostrup, Đan Mạch) trong 1 phút ở nhiệt độ phòng. Tất cả các phần được ngâm trong dung dịch H2O2/metanol 3% trong 10 phút ở nhiệt độ phòng để vô hiệu hóa hoạt động peroxidase nội sinh. Sau khi ngăn chặn các phản ứng không đặc hiệu bằng 10% huyết thanh thỏ bình thường, các phần được ủ với kháng thể chính cho 2uglobulin (pha loãng 1:400; kháng thể 2u-globulin chống chuột; Hệ thống R&D, Minneapolis, MN, Hoa Kỳ) qua đêm ở 4 độ 8. Hình dung liên kết kháng thể được thực hiện bằng cách sử dụng VectaStain Elite ABC Kit (Phòng thí nghiệm Vector, Burlingame, CA, Hoa Kỳ) và 3,3′-diaminobenzidine. Tất cả các phần được thay thế bằng hematoxylin.

Phân tích thống kê

Sự khác biệt về giá trị dữ liệu về trọng lượng cơ thể trong thời gian thử nghiệm, cũng như về huyết học, sinh hóa huyết thanh và trọng lượng cơ quan, được đánh giá về tính đồng nhất bằng xét nghiệm Bartlett. Phân tích phương sai một chiều và thử nghiệm Kruskal-Wallis tương ứng được sử dụng cho dữ liệu đồng nhất và không đồng nhất. Để xác định sự khác biệt có ý nghĩa thống kê, thử nghiệm so sánh đa biến của Dunnett được sử dụng để so sánh nhóm đối chứng và nhóm điều trị. Việc so sánh tỷ lệ mắc và cấp độ mô bệnh học được phân tích bằng cách sử dụng phép thử xác suất chính xác của Fisher và phép thử U của Mann-Whitney tương ứng. giá trị P của<0.05 were considered statistically significant.

Kết quả

Các thông số trong cuộc sống, huyết học và sinh hóa huyết thanh

Không có dấu hiệu lâm sàng đáng kể nào được ghi nhận trong suốt thời gian thử nghiệm và tất cả các động vật đều sống sót cho đến khi khám nghiệm tử thi theo lịch trình. Hơn nữa, không có sự khác biệt đáng kể về trọng lượng cơ thể và lượng thức ăn hàng ngày được quan sát thấy ở chuột đực và chuột cái (Hình 1A và B).

Dữ liệu huyết học và sinh hóa huyết thanh lần lượt được trình bày trong Bảng 1 và 2. Các phân tích huyết học cho thấy HGB, HCT, MCV và MCH giảm đáng kể đồng thời tăng PLT ở chuột đực được dùng 250 mg/kg BW/ngày 2-(1-menthoxy) ethanol (Bảng 1). Trong sinh hóa huyết thanh, sự gia tăng đáng kể về TP, T-Chol và Ca cũng như giảm Bil và ALP được ghi nhận ở nam giới thuộc nhóm 250 mg/kg (Bảng 2). Sự gia tăng đáng kể về Cre và giảm A/G được ghi nhận ở nam giới thuộc nhóm dùng liều 60 và 250 mg/kg. Ở nữ giới, sự gia tăng đáng kể về Ca và giảm ALP được ghi nhận ở nhóm dùng liều 60 và 250 mg/kg, trong khi đó T-Chol tăng và A/G, Bil, TG, AST và ALT giảm được phát hiện ở nhóm dùng liều 250 mg. /kg nhóm. Mặc dù sự gia tăng đáng kể về TG và sự giảm Cl được quan sát thấy ở nam giới dùng liều 60 mg/kg, việc thiếu bất kỳ mối quan hệ nào về liều cho thấy những khác biệt này không liên quan đến việc tiếp xúc với chất thử nghiệm.

Trọng lượng nội tạng

Dữ liệu về trọng lượng cơ quan được tóm tắt trong Bảng 3. Trọng lượng gan tuyệt đối và tương đối tăng đáng kể ở cả hai giới của nhóm dùng 250 mg/kg (Bảng 3). Đã quan sát thấy sự gia tăng đáng kể về trọng lượng gan tương đối ở nam giới thuộc nhóm dùng liều 60 mg/kg. Ở nam giới, trọng lượng thận tuyệt đối và tương đối tăng đáng kể ở nhóm dùng liều 60 và 250 mg/kg. Ở nhóm nam giới dùng liều 250 mg/kg, đã ghi nhận sự gia tăng đáng kể về trọng lượng tuyệt đối và tương đối của tuyến thượng thận cũng như trọng lượng tương đối của lá lách và tinh hoàn.

Mô bệnh học và hóa mô miễn dịch

Dữ liệu về các kết quả mô bệnh học và hóa mô miễn dịch được tóm tắt tương ứng trong Bảng 4 và 5. Các phát hiện mô bệnh học cho thấy tần suất tích tụ các hạt bạch cầu ái toan (Hình 2A–D), các ống bazơ và trụ hyaline, cũng như viêm kẽ khu trú ở thận, tăng đáng kể ở các nhóm điều trị toàn nam khi so sánh với nhóm đối chứng. nhóm (Bảng 4). Dựa trên các phân tích hóa mô miễn dịch, chuột đực được điều trị bằng chất thử nghiệm cho thấy sự gia tăng khả năng phản ứng miễn dịch 2u-globulin trong các tế bào biểu mô của ống lượn gần, chứng tỏ sự phụ thuộc rõ ràng vào liều lượng (Hình 2E–H) (Bảng 5).

Khi khám nghiệm tử thi, một con chuột đực trong nhóm dùng liều 250 mg/kg cho thấy thận phải bị phì đại nghiêm trọng do u nguyên bào thận đặc trưng về mặt mô học. Mặc dù u nguyên bào thận không phổ biến ở hầu hết các chủng chuột9, nhưng trường hợp này được coi là ngẫu nhiên vì không có động vật nào khác có biểu hiện tổn thương tương tự. Ngoài ra, trong các nghiên cứu về khả năng gây ung thư qua đường uống, tỷ lệ mắc u nguyên bào thận tự phát ở chuột đực F344/DuCrlCrlj được báo cáo là dao động trong khoảng 0–2,0%10. Mặc dù một số tổn thương được phát hiện lẻ tẻ ở các cơ quan khác, nhưng không có sự thay đổi đáng kể nào phụ thuộc vào điều trị về tỷ lệ mắc các tổn thương này.

Cuộc thảo luận

Cho đến nay, 24 chất tạo hương vị, bao gồm cả ethanol 2-(1-menthoxy), đã được JECFA đánh giá là các chất có cấu trúc liên quan đến tinh dầu bạc hà và tất cả đều được liệt kê là "không có mối lo ngại về an toàn" ở mức ước tính hiện tại lượng tiêu thụ1, 11. 2-(1-Menthoxy)etanol được phân loại vào nhóm nhỏ rượu alicycle hoặc ete và được coi là liên hợp chủ yếu với axit glucuronic, sau đó được bài tiết qua nước tiểu1. Mặc dù giá trị LD50 qua đường uống của các chất này ở loài gặm nhấm tương đối cao nhưng dữ liệu từ các nghiên cứu về độc tính liều lặp lại vẫn còn hạn chế. Một nghiên cứu về độc tính liều lặp lại trong 13-tuần đã tiết lộ rằng menthyl pyrrolidone carboxylate (CAS No. 68127-22-0), một hợp chất có cấu trúc liên quan đến tinh dầu bạc hà, có thể liên quan đến việc tăng trọng lượng gan và thận tương đối ở nam và nữ Chuột Wistar. Sự tích lũy 2u-globulin trong ống lượn gần của chuột đực cũng được quan sát thấy ở liều 1.111 mg/kg thể trọng/ngày và NOAEL được xác định là 109 mg/kg thể trọng/ngày1.

Trong nghiên cứu độc tính cận trường diễn trong 13-tuần hiện tại của 2-(1-menthoxy) ethanol, không quan sát thấy sự thay đổi độc tính nào trong tình trạng chung, trọng lượng cơ thể và lượng thức ăn ăn vào. Sau khi đánh giá huyết học, chúng tôi quan sát thấy sự giảm HGB (96,6% so với giá trị trung bình đối chứng), HCT (96,3%), MCV (98,4%) và MCH (98,2%) và tăng PLT (111%) ở nam giới. Nhóm 250 mg/kg, được coi là có ảnh hưởng độc tính khi xử lý bằng etanol 2-(1-menthoxy). Cả trọng lượng gan tuyệt đối (115% ở cả hai giới) và tương đối (119% ở nam và 111% ở nữ) đều tăng đáng kể ở cả hai giới trong nhóm dùng 250 mg/kg. Mặc dù không có thay đổi mô bệnh học ở gan, nồng độ T-Chol huyết thanh tăng (110% ở nam và 121% ở nữ) và TP (105% ở nam) và giảm TG (60,1% ở nữ) ở 250 người. nhóm mg/kg cho thấy những thay đổi độc hại liên quan đến chuyển hóa lipid và tổng hợp protein ở gan. Người ta cũng phát hiện thấy HGB và MCH giảm, đồng thời tăng PLT, T-Chol và TP ở nam giới, đồng thời giảm TG và tăng trọng lượng gan tuyệt đối và tương đối ở cả hai giới, có ý nghĩa thống kê trong nghiên cứu sơ bộ trong ngày 28-(dữ liệu không được hiển thị ), chứng thực rằng những thông số sinh hóa huyết thanh và huyết thanh bị thay đổi này, cũng như trọng lượng của gan, không phải là ngẫu nhiên mà là những tác động liên quan đến chất thử nghiệm. Ngược lại, sự gia tăng đáng kể về trọng lượng gan tương đối được phát hiện ở nhóm nam giới dùng liều 60 mg/kg trong nghiên cứu này không đi kèm với sự gia tăng trọng lượng tuyệt đối hoặc những thay đổi trong các thông số sinh hóa liên quan, cho thấy rằng sự gia tăng này là một sự thay đổi thích nghi.

CISTANCHE TUBULOSA TỰ NHIÊN ĐỂ CẢI THIỆN CHỨC NĂNG TÌNH DỤC PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Trọng lượng tuyệt đối (120%) và tương đối (118%) của tuyến thượng thận ở nam giới dùng 250 mg/kg tăng đáng kể được coi là có liên quan đến hóa chất thử nghiệm. Hơn nữa, trọng lượng tuyệt đối và tương đối của tuyến thượng thận tăng lên ở cả hai giới cho thấy sự phụ thuộc rõ ràng vào liều lượng trong nghiên cứu sơ bộ ngày 28-(dữ liệu không được hiển thị), cho thấy mối liên quan với việc điều trị bằng hóa chất thử nghiệm. Mặc dù chứng phì đại tuyến thượng thận có thể là do căng thẳng, nhưng không có phát hiện nào cho thấy căng thẳng, chẳng hạn như giảm trọng lượng cơ thể hoặc teo tuyến ức và các cơ quan bạch huyết khác, trong cả nghiên cứu hiện tại và nghiên cứu sơ bộ. Vì có thể không có thay đổi mô bệnh học ở tuyến thượng thận ngay cả khi sản xuất glucocorticoid bị suy giảm trong trường hợp ức chế các enzym liên quan đến sự hình thành steroid12, nên không thể loại trừ khả năng trọng lượng tuyến thượng thận tăng lên là một phát hiện độc hại. Ngược lại, trọng lượng tương đối của lá lách và tinh hoàn tăng lên ở nhóm nam giới dùng liều 250 mg/kg, không được quan sát thấy trong nghiên cứu sơ bộ, được coi là không đáng kể về mặt độc tính do không có tổn thương mô bệnh học hoặc trọng lượng tuyệt đối tăng đáng kể. Tương tự, sinh hóa huyết thanh cho thấy sự giảm A/G và tăng Ca ở cả hai giới, được coi là không có ý nghĩa độc tính, vì không phát hiện thấy bất thường nào trong các thông số liên quan. Hơn nữa, mức Bil và ALP giảm ở cả hai giới và giảm AST và ALT ở nữ trái ngược với tác dụng độc hại dự kiến ​​và được coi là không có ý nghĩa.

Bệnh thận mãn tính đặc trưng bởi các ống thận bazơ, trụ trong suốt và viêm kẽ khu trú đã được quan sát thấy có ý nghĩa thống kê ở nam giới thuộc tất cả các nhóm được điều trị. Ngoài ra, tăng Cre huyết thanh và trọng lượng thận tuyệt đối và tương đối được phát hiện ở nhóm nam giới dùng liều 60 và 250 mg/kg; những thay đổi này không được quan sát thấy ở nhóm điều trị nữ. Trong những trường hợp này, mức độ tích tụ các hạt bạch cầu ái toan trong các tế bào biểu mô ống lượn gần tăng lên rõ ràng phụ thuộc vào liều lượng. Những hạt này được xác nhận là 2u-globulin bằng phương pháp hóa mô miễn dịch, cho thấy sự xuất hiện của bệnh thận do 2u-globulin. 2u-Globulin liên kết với một số hóa chất nhất định, chẳng hạn như d-limonene, tích tụ trong lysosome và được quan sát thấy ở ống lượn gần dưới dạng hạt ưa eosin hoặc hạt hyaline9. Sự tích tụ này có thể làm tổn thương các tế bào biểu mô, dẫn đến bệnh thận tiến triển mãn tính và hậu quả là hình thành khối u. Do đó, mặc dù chưa xác định được NOAEL của 2-(1-menthoxy) ethanol liên quan đến bệnh thận 2u-globulin ở thận chuột đực, nhưng loại bệnh thận này được cho là đặc trưng ở chuột đực và do đó không liên quan đến con người. đánh giá rủi ro13. Việc tăng nguy cơ suy thận qua trung gian thông qua các cơ chế liên quan đến tích lũy 2u-globulin là rất khó xảy ra, vì protein này không có ở người14. Do đó, việc loại trừ những thay đổi liên quan đến bệnh thận mãn tính quan sát thấy ở nam giới khỏi việc xác định NOAEL được coi là hợp lý.

Tóm lại, nghiên cứu về độc tính cận mãn tính trong 13-tuần hiện tại đã chứng minh rằng việc xử lý bằng ethanol 250 mg/kg BW/ngày 2-(1-menthoxy) gây ra những thay đổi độc hại về huyết học, sinh hóa huyết thanh và trọng lượng cơ quan ở chuột F344 đực và cái. Dựa trên các kết quả quan sát được, NOAEL của 2-(1-menthoxy)etanolđược đánh giá là 60 mg/kg BW/ngày cho cả hai giới.

CISTANCHE TUBULOSA TỰ NHIÊN ĐỂ CẢI THIỆN CHỨC NĂNG TÌNH DỤC PHGS75% ECH 30% ACT 12%