Hoạt động chống oxy hóa, hồ sơ phenolic và tiềm năng bảo vệ thận của Anastatica Hierochuntica chiết xuất nước và dung dịch chống lại CCl 4- gây độc cho thận ở chuột

Xin vui lòng liên hệoscar.xiao@wecistanche.comđể biết thêm

Trừu tượng:Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica L.) được sử dụng rộng rãi để điều trị một loạt các vấn đề sức khỏe, đáng chú ý nhất là để giảm bớt việc sinh con và giảm bớt các rối loạn liên quan đến hệ thống sinh sản. Nghiên cứu này nhằm đánh giá ảnh hưởng của A. hierophantic ethanolic (KEE), và chiết xuất trong nước (KAE) CCl 4- gây ra stress oxy hóa và độc tính trên thận ở chuột bằng cách sử dụng các dấu hiệu sinh hóa đối với chức năng thận vàchất chống oxy hóatình trạng cũng như xét nghiệm mô bệnh học của mô thận.A. hierophantic chứa 67,49 mg GAE g − 1 trong tổng sốcác hợp chất phenolic(TPC), 3,51 µg g − 1 tổng số carotenoid (TC), và 49,78 và 17,45 mg QE g − 1 tổng số flavonoid (TF) và tổng số flavonols (TFL), tương ứng. Kết quả là 128,71 µmol TE g-1 của DPPH-RSA và 141,92 µmol TE g-1 của ABTS-RSA. A. hierophantic thể hiện hoạt động chống oxy hóa vượt trội bằng cách ức chế các gốc axit linoleic và các kim loại oxy hóa chelat. Phân tích HPLC cho kết quả là 9 và 21axit phenolicvà 6 và 2flavonoidtrong KEE và KAE với tỷ lệ chiếm ưu thế của axit sinapic và syringic, tương ứng. Tiêm bắp vit. E cộng với Se và uống KEE, KAE, và KEE cộng với KAE ở 250 mg kg-1 trọng lượng cơ thể đã khôi phục đáng kể nồng độ creatinine, urê, K, protein toàn phần và albumin huyết thanh. Ngoài ra, chúng làm giảm malondialdehyde (MOD), khôi phục lượng glutathione bị giảm (GSH) và tăng cường mức độ superoxide dismutase (SOD). KEE, KAE, và KEE cộng với KAE bảo vệ thận khỏi độc tính trên thận của CCl 4- vì chúng chủ yếu làm giảm bớt căng thẳng oxy hóa gây ra. Tổng bảo vệ thận lần lượt là khoảng 83,27 phần trăm, 97,62 phần trăm và 78,85 phần trăm đối với KEE, KAE và KEE cộng với KAE. Cả chiết xuất vit.E cộng với Se và A. hierophantic đều làm giảm sự thay đổi mô bệnh học ở chuột được điều trị bằng CCl 4-. Kết luận, A. hierophantic, đặc biệt là KAE, có khả năng khôi phục sự ổn định oxy hóa và cải thiện chức năng thận sau chấn thương thận cấp CCl4 tốt hơn KEE. Do đó, A. hierophantic có tiềm năng trở thành một tác nhân điều trị hữu ích trong điều trị ngộ độc thận do thuốc.

Từ khóa:Kaff-e-Maryam; polyphenol; hoạt tính sinh học; Chất chuyển hóa thứ cấp; dấu thận;các enzym chống oxy hóa; Rối loạn chức năng thận

Vui lòng bấm vào đây để biết thêm

Giới thiệu

Bệnh thận là nguyên nhân gây tử vong đứng hàng thứ 9 với hơn 1 trong 7 người, tức là 15% người lớn Hoa Kỳ hoặc 37 triệu người, được ước tính mắc bệnh thận mãn tính (CKD) [1]. Đáng chú ý, nguyên nhân phổ biến nhất của CKD được ghi nhận vào năm 2015 là đái tháo đường, sau đó là huyết áp cao và viêm cầu thận [2]. Các nguyên nhân khác của CKD bao gồm vô căn (thường kết hợp với thận nhỏ trên siêu âm thận) [3]. Trước đây, CCl4 được sử dụng để tẩy dầu mỡ kim loại, giặt khô, vết vải, chất lỏng chữa cháy và khử trùng ngũ cốc [4]. Nó gây ra các rối loạn nghiêm trọng ở gan, phổi và tinh hoàn cũng như trong máu bằng cách tạo ra các gốc tự do hoạt động [5]. Theo kết quả của Ogeturk et al. [6], tiếp xúc với dung môi này gây ra tổn thương thận cấp tính và mãn tính. Quá trình peroxy hóa lipid gây ra bởi các gốc tự do được cho là một trong những nguyên nhân chính gây tổn thương màng tế bào, dẫn đến một loạt các tình trạng bệnh lý [7]. Việc tạo ra các gốc phản ứng có liên quan đến độc tính trên thận gây ra CCl 4-, có liên quan đến quá trình peroxy hóa lipid và tích tụ các protein rối loạn chức năng, dẫn đến tổn thương ở thận [8]. Những công dụng tuyệt vời, truyền thống của cây thuốc đã phát triển trong những năm gần đây, và nhiều cuộc điều tra đã xác nhận vai trò điều trị của chúng đối với một số bệnh tật [9–12]. Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica) là một loại dược liệu sa mạc thuộc họ Brassicaceae. Nó phát triển ở nhiều khu vực khác nhau trên thế giới, đặc biệt là ở các nước Ả Rập (ví dụ: Ả Rập Saudi, Ai Cập, Oman, Libya, Iraq, Các Tiểu vương quốc Ả Rập Thống nhất, Kuwait) cũng như một số quốc gia châu Á, châu Âu và châu Phi. A. hierophantic được cho là có tiềm năng y tế vượt trội và tốt hơn là được sử dụng cho các tình trạng y tế khác nhau [13]. Nó chủ yếu được sử dụng để giảm bớt quá trình sinh đẻ và điều trị các rối loạn liên quan đến hệ thống sinh sản và rối loạn chuyển hóa, chủ yếu là bệnh đái tháo đường [14]. Nó được sử dụng làm thuốc giảm đau và điều trị chứng động kinh, rối loạn tiêu hóa, viêm khớp, hen phế quản, loét miệng, sốt rét và suy nhược tinh thần [15–17]. A. hierophantic chứa một lượng đáng kể các khoáng chất, chẳng hạn như Mg, Ca, Mn, Fe, Cu và Zn, có thể sánh ngang hoặc lớn hơn so với nhiều loại cây thảo mộc, có thể tạo ra các đặc tính tạo hóa kim loại [18]. Yoshikawa và cộng sự. [19] kết luận rằng sự hiện diện của flavanones, chẳng hạn như Anastasia A và B, tương quan với tác dụng bảo vệ gan mạnh mẽ bằng cách ức chế độc tế bào do D-galactosamine gây ra trong tế bào gan của chuột được nuôi cấy chính. Việc sản xuất các loại oxy phản ứng (ROS) và các cytokine như yếu tố hoại tử khối u và interleukin -1 của tế bào Kupffer trong gan góp phần phá hủy tế bào gan trong quá trình thải độc gan của D-galactosamine [20]. Các đặc tính chống oxy hóa và chống viêm của các thành phần A. hierophantic có thể giúp giảm độc tính trên gan do D-galactosamine gây ra [21]. A. hierophantic có thể đủ khả năng chiết xuất tùy thuộc vào khả năng bảo vệ chống lại CCl 4- độc tính trên gan [22]. Tuy nhiên, mặc dù các tài liệu cho thấy những tiềm năng đầy hứa hẹn liên quan đến việc sử dụng A. hierophantic, tiềm năng bảo vệ thận của A. hierophantic ethanolic (KEE) và các chất chiết xuất từ ​​nước (KAE) cần phải được kiểm tra cẩn thận. Hơn nữa, tổng quan tài liệu chủ yếu nhấn mạnh hiệu quả bảo vệ gan của A. hierophantic, nhưng tiềm năng bảo vệ thận vẫn chưa được nghiên cứu cho đến nay, do đó thúc đẩy công trình này. Do đó, nghiên cứu hiện tại nhằm mục đích quan sát những thay đổi trong các enzym bảo vệ chống oxy hóa, phát hiện những thay đổi của kính hiển vi thận sau khi sử dụng CCl4 ở chuột và điều tra tác dụng bảo vệ có thể có của chiết xuất A. hierophantic chống lại tổn thương thận do CCl 4- gây ra.

Cistanche để cải thiện tình dục

2. Vật liệu và phương pháp

2.1. Chuẩn bị mẫu Một mẫu của cây Kaff-e-Maryam (A. hierophantic L.) được mua từ một chợ bản địa ở thành phố Buraydah, vùng Qassim, Ả Rập Xê Út. Nguyên liệu thực vật đã được xác thực bởi Cục Sản xuất và Bảo vệ Thực vật, Trường Cao đẳng Nông nghiệp và Thú y, Đại học Qassim, Ả Rập Xê-út. Mẫu được rửa bằng nước máy sạch để loại bỏ cát và bụi bẩn trên lá và sau đó vật liệu thực vật được làm khô trong không khí (ở 28 ± 1 ◦C trong 48 giờ) thành bột cơ học và được giữ trong túi polyetylen trắng đục ở 4 ± 1 ◦C cho đến khi sử dụng. 2.2. Điều chế chiết xuất etanolic và dung dịch nước Khoảng 2 0 0 g A. hierophantic khô đã được chiết xuất với 3 {{1 {{1 0 6}} 4}} 0 mL 7 {{15 0}} phần trăm etanol trong máy chiết Soxhlet để chuẩn bị chiết etanolic (KEE). Dịch chiết được cô đặc bằng thiết bị cô quay ở 40 ◦C để làm bay hơi dung môi còn lại, sau đó làm khô dưới dòng N2. Quá trình chiết xuất dung dịch nước (KAE) được Asuzu [23] mô tả với những sửa đổi nhỏ. Hai trăm gam nguyên liệu thực vật khô được thêm vào 500 mL nước cất vô trùng nóng. Hỗn hợp này sau đó được lắc đều và để yên trong 1 giờ. Sau đó, một sinh hàn hồi lưu được gắn vào bình rồi đun nóng cho đến khi sôi nhẹ trong 10 phút, để nguội, lắc đều và lọc qua giấy lọc Whatman số 1. Dịch lọc được làm bay hơi bằng thiết bị cô quay, sau đó được làm khô dưới dòng N2. Các chất chiết xuất từ ​​cồn và nước (250 mg mL-1) mới được pha chế trong nước cất để sử dụng cho đường uống. 2.3. Tổng hàm lượng Phenolic (TPC) Hàm lượng TPC của A. hierophantic được xác định theo phương pháp đã điều chỉnh bởi Bettaieb et al. [24]. Kết quả được so sánh với đường cong chuẩn axit gallic (GA) được vẽ trong khoảng 50–500 mg mL-1 (R 2=0. 99), và TPC được tính bằng mg axit gallic tương đương (GAE ) mỗi gam A. hierophantic (mg GAE g − 1). 2.4. Tổng Carotenoid (TC), Tổng Flavonoid (TF) và Tổng Flavonols (TFL) Theo báo cáo của Al-Qabba et al. [10], 5 g A. hierophantic được chiết xuất nhiều lần bằng hỗn hợp axeton và ete dầu hỏa (1: 1, v / v). Tổng hàm lượng carotenoid (TC) được xác định bằng phương pháp đo quang phổ ở bước sóng 451 nm. TC được biểu thị bằng mg g-1 DW. Hàm lượng TF của A. hierophantic được khảo nghiệm theo quy trình được mô tả bởi Mohdaly và cộng sự. [25]. Hàm lượng TF được tính bằng mg quercetin tương đương (QE) trên 100 g -1 dw. Trong bối cảnh tương tự, nội dung TFL đã được thực hiện [26]. Độ hấp thụ ở bước sóng 440 nm được ghi lại, và TFL được tính bằng mg quercetin tương đương (QE) trên 100 g-1 DW. 2.5. Xác định khả năng chống oxy hóa Thử nghiệm quét gốc DPPH: RSA được thử nghiệm quang phổ tùy thuộc vào độ tẩy trắng của dung dịch màu tím DPPH theo một kỹ thuật đã được thay đổi của Lu et al. [27]. Khả năng phản truyền tín hiệu được trình bày dưới dạng µmol Trolox đương lượng (TE) trên một gam A. hierophantic (µmoL TE g-1). Hoạt động thu dọn gốc ABTS: RSA của A. hierophantic chống lại các gốc ABTS đã được kiểm tra bằng phương pháp điều chỉnh của Lu et al. [27]. Kết quả được biểu thị bằng µmoL TE g-1. Xét nghiệm tẩy trắng axit -carotene-linoleic: Tỷ lệ phần trăm chất chống oxy hóa của A. hierophantic được đánh giá về khả năng tẩy trắng -carotene so với hydroxyanisole butyl hóa (BHA) áp dụng quy trình đo quang phổ thích ứng được chỉ định bởi Koleva et al. [28]; kết quả được đưa ra dưới dạng tỷ lệ phần trăm liên quan đến BHA. Hoạt động tạo chelat của A. hierophantic đối với ion sắt: Hoạt động tạo chelat của A. hierophantic được đo lường theo quy trình của Zhao et al. [29]. Phần trăm ức chế của ferrozine – Fe2 cộng với sự tạo phức khi tác động tạo chelat kim loại được đo và được trình bày dưới dạng mg mL-1 khi sử dụng axit ethylenediaminetetraacetic (EDTA) như một đối chứng dương tính. 2.6. Hợp chất polyphenolic Phân đoạn phân đoạn của A. hierophantic Aqueous Aqueous and Ethanolic Extract Xác định polyphenol từ các chất chiết xuất từ ​​ethanolic và trong nước được thực hiện bởi hệ thống HPLC HP1100 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA) được trang bị bộ lấy mẫu tự động, bơm bậc bốn và dãy diode máy dò (Hewlett Packard 1050) sử dụng cột (Altima C 18 150 × 4,6 mm, 5 µm) với cột bảo vệ 5 mm Altima C18 (Alltech, Nettetal, Đức) theo Goupy et al. [30]. Hệ dung môi được sử dụng là một gradient của A (axit axetic 2,5%), B (axit axetic 8%) và C (axetonitril). Tốc độ đồng dung môi là 1 mL min-1, và quá trình phân tách được thực hiện ở 35 ◦C. Thể tích tiêm là 10 µL. Các hợp chất phenolic được kiểm tra bằng cách hiệu chuẩn bên ngoài và được biểu thị bằng mg g-1 DW đương lượng (cộng) -catechin đối với flavan -3- ols và coumarin tương đương đối với các hợp chất thơm phân cực. Độ biến thiên 8 phần trăm được xác định khi chiết xuất năm phenol từ cùng một mẫu. Tất cả các giá trị là giá trị trung bình của các lần tiêm trùng lặp. Polyphenol và các dẫn xuất của chúng được xác định và định lượng ở 280 và 320 nm, trong khi flavonoid được xác định ở 360 nm. 2.7. Thiết kế Thử nghiệm Tất cả các thử nghiệm đã được phê duyệt bởi Ủy ban Đạo đức Động vật Tổ chức (IAEC) của QU (số 15-4-2017), KSA, được quy định bởi Mục đích của Kiểm soát và Giám sát các Thử nghiệm trên Động vật (CPCSEA) thuộc Ủy ban Ủy ban Quốc gia về Đạo đức Sinh học (NCBE), Thực hiện các Quy định của Luật Đạo đức Nghiên cứu Sinh vật Sống. Tổng cộng 36 con chuột bạch tạng đực đã được sử dụng trong nghiên cứu hiện tại và được chia thành 6 nhóm, mỗi nhóm 6 con và được điều trị như sau: Nhóm I (Đối chứng) được tiêm vào màng bụng (ip) dầu ô liu (1,0 mL kg -1 hai lần một lần. tuần) và 0,5 mL nước cất uống / ngày trong 21 ngày liên tiếp. Nhóm II được tiêm một hỗn hợp tươi có thể tích bằng nhau của CCl4 và dầu ô liu (với liều lượng 1,0 mL kg -1 hai lần một tuần) và 0,5 mL nước cất uống / ngày theo Al-Qabba et al. [10] với những sửa đổi nhỏ. Nhóm III (nhóm tham chiếu) được tiêm bắp (im) 50 mg kg-1 vit. E cộng với Se (Selepherol, Vetoquinol Co., Magny-Vernois, Pháp) hai lần một tuần, theo Asuka et al. [31] và El-Desoky et al. [32], và 0,5 mL nước cất uống / ngày. Nhóm IV dùng như một thử nghiệm và nhận 250 mg kg-1 KEE uống / ngày cùng với CCl4 ip hai lần một tuần. Nhóm V nhận được 250 mg kg-1 KAE uống / ngày cùng với CCl4 ip hai lần một tuần. Nhóm VI nhận 250 mg kg-1 KEE cộng với KAE (1: 1) uống / ngày cùng với CCl4 ip hai lần một tuần. 24 giờ sau lần điều trị cuối cùng (ngày 21), những con chuột được gây mê bằng hỗn hợp (rượu: chloroform: ether, 1: 2: 3). Mẫu máu từ vết đâm thủng tim được thu thập cho tất cả các động vật và huyết thanh được tách bằng cách ly tâm ở tốc độ 4 000 vòng / phút trong 10 phút và giữ ở -20 ◦C để kiểm tra sinh hóa. 2.7.1. Phân tích sinh hóa thận Nồng độ creatinine, urê, tổng số protein và albumin trong huyết thanh được xác định bằng phương pháp đo quang phổ tự động (BM / Hitachi autoanalyzer -911; Boehringer Mannheim, Đức) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Mức độ kali được xác định bằng phép đo quang ngọn lửa ở bước sóng 766 nm. 2.7.2. Ước tính hoạt động chống oxy hóa của thận Sau khi thu thập mẫu máu, động vật thuộc tất cả các nhóm đều bị hiến tế; thận phải nhanh chóng được cô lập và rửa sạch bằng nước muối lạnh. Sau đó, mô được cắt nhỏ, rửa qua nước muối lạnh, thấm khô và đặt ngay trên đá. Sử dụng thiết bị đồng nhất mô điện, các phần của mô (1,0 g) được cân và đồng nhất với 9 thể tích đệm phosphate 0,05 M lạnh đá ở pH 7,4. Các mảnh vụn tế bào được loại bỏ bằng cách ly tâm ở 12.000 vòng / phút (4 ◦C) trong 20 phút để thu thập các chất nổi trên bề mặt để xác định nồng độ malondialdehyde (MDA) [33], hoạt tính superoxide dismutase (SOD) [34], và hàm lượng glutathione (GSH) giảm [ 35]. Nồng độ protein trong thận đồng nhất được xác định bằng phương pháp Bradford [36]. 2.7.3. Phần trăm bảo vệ thận Tỷ lệ phần trăm bảo vệ thận (F) của vit. E cộng với Se, KEE, KAE và KEE cộng với KAE được tính toán cho từng thông số sinh hóa riêng biệt theo Wakchaure et al. [37] sử dụng phương trình sau: F phần trăm=[1 - (T - N) (C - N)] × 100 (1) trong đó T=giá trị trung bình của nhóm điều trị, C {{ 171}} giá trị trung bình của nhóm kiểm soát tích cực và N=giá trị trung bình của nhóm kiểm soát tiêu cực. Hơn nữa, tổng phần trăm bảo vệ thận (phần trăm TFP) được so sánh với nó. E plus Seas theo phần trăm TFP=Tổng của F phần trăm của các thông số sinh hóa của mỗi chiết xuất tổng của F phần trăm của các thông số sinh hóa của nó. E cộng với Se × 100 (2) 2.7.4. Nghiên cứu mô bệnh học Các mẫu khám nghiệm tử thi được thu thập từ thận trái của các nhóm chuột riêng biệt và cố định trong dung dịch muối formalin 10% trong 24 giờ. Sau đó rửa bằng nước máy bằng cách khử nước bằng các dung dịch pha loãng nối tiếp rượu (metyl, etylic và etylic tuyệt đối). Các mẫu vật được làm sạch trong xylen và nhúng vào parafin trong 24 giờ ở 56 ◦C trong lò không khí nóng. Các khối mô bằng sáp ong parafin được chuẩn bị để cắt ở độ dày 4- micron bằng cách sử dụng microtome xe trượt tuyết. Các lát mô được thu thập trên lam kính, khử muối, và nhuộm với hematoxylin và eosin để kiểm tra thường xuyên dưới kính hiển vi điện nhẹ [38]. 2.8. Phân tích thống kê Kết quả được hiển thị dưới dạng sai số trung bình ± tiêu chuẩn (SE). Ý nghĩa của sự khác biệt giữa các phương tiện trong các nhóm khác nhau được kiểm tra bằng cách sử dụng phân tích phương sai một chiều (ANOVA), theo sau là thử nghiệm của Duncan, và giá trị p giữa các phương tiện được đưa ra ở mức p <0,05 [39].="" 3.="" kết="" quả="" 3.1.="" các="" chất="" hóa="" thực="" vật="" và="" khả="" năng="" chống="" oxy="" hóa="" của="" a.="" hierophantic="" người="" ta="" đã="" thực="" hiện="" phân="" tích="" định="" lượng="" hóa="" chất="" thực="" vật="" a.="" hierophantic="" và="" các="" hoạt="" động="" chống="" oxy="" hóa="" liên="" quan="" bằng="" cách="" sử="" dụng="" các="" hoạt="" động="" tẩy="" trắng="" gốc="" dpph="" và="" abts,="" các="" hoạt="" động="" tẩy="" trắng="" axit="" -carotene-linoleic="" và="" khả="" năng="" tạo="" chelating="" (ca).="" như="" có="" thể="" thấy="" rõ="" trong="" bảng="" 1,="" hàm="" lượng="" tpc="" là="" 67,49="" mg="" gae="" g-1.="" hàm="" lượng="" tc="" là="" 3,51="" µg="" g-1.="" hàm="" lượng="" tf="" và="" tl="" tương="" ứng="" là="" 49,78="" và="" 17,45="" mg="" qe="" g-1.="" hơn="" nữa,="" dpph-rsa="" và="" abts-rsa="" đã="" được="" sử="" dụng="" để="" đo="" lường="" sự="" tiến="" triển="" của="" các="" hoạt="" động="" chống="" oxy="" hóa.="" kết="" quả="" cho="" thấy="" lần="" lượt="" 128,71="" µmol="" te="" g-1="" và="" 141,92="" µmol="" te="" g-1="" đối="" với="" dpph-rsa="" và="" abts-rsa.="" ngoài="" ra,="" hoạt="" tính="" chống="" oxy="" hóa="" (aoa)="" của="" a.="" hierophantic="" được="" trình="" bày="" trong="" bảng="" 1.="" tỷ="" lệ="" ức="" chế="" của="" các="" gốc="" axit="" linoleic="" được="" tính="" là="" 45,74%="" so="" với="" bha="" sử="" dụng="" xét="" nghiệm="" tẩy="" trắng-caroten="" (-cb).="" hơn="" nữa,="" đánh="" giá="" hoạt="" tính="" tạo="" chelat="" kim="" loại="" cho="" thấy="" 42,89="" mg="" g="" −="" 1,="" có="" vẻ="" như="" rất="" thành="" thạo="" trong="" việc="" can="" thiệp="" vào="" sự="" hình="" thành="" phức="" fe2="" cộng="" –ferrozine,="" cho="" thấy="" khả="" năng="" chelate="" các="" kim="" loại="" oxy="" hóa="" của="" nó.="" bảng="" 1.="" tổng="" hàm="" lượng="" phenolic,="" tổng="" số="" carotenoid,="" tổng="" số="" flavonoid,="" tổng="" số="" flavonols,="" và="" các="" hoạt="" động="" chống="" oxy="" hóa="" tiềm="" năng="" tương="" đối="" của="" a.="" hierophantic="" (trung="" bình="" ±="" se),="" n="">

3.2. Định lượng các hợp chất phenolic A. hierophantic Việc phân tích định lượng các hợp chất phenolic cho KEE và KAE bằng phân tích HPLC đã được thực hiện, và dữ liệu được lập bảng trong Bảng 2. Chín axit phenolic tách biệt và sáu flavonoid đã được xác định với lượng có thể phát hiện được từ KEE của A. học răng miệng. Các axit phenolic phong phú nhất là axit hydroxycinnamic như axit sinapic (28,7 0 4 mg 1 {{5 0}} 0 g − 1) tiếp theo là axit caffeic (6,621 mg 1 { {63}} 0 g − 1), axit rosmarinic (2,884 mg 1 0 0 g − 1), axit ferulic (1,854 mg 1 0 {{85} } g − 1), và axit cinnamic (0. 0 94 mg 100 g − 1); và axit hydroxy-benzoic như axit p-hydroxybenzoic (3,440 mg 100 g − 1), axit protocatechuic (1,811 mg 100 g − 1), axit vanillic (3,326 mg 100 g − 1) và axit syringic (1,083 mg 100 g −1). Các flavonoid như myricetin (16,269 mg 100 g − 1), D-catechin (2,410 mg 100 g − 1), kaempferol (0,434 mg 100 g − 1), rutin (0,539 mg 100 g − 1), apigenin {{58} } glucoside (0,192 mg 100 g − 1) và quercetin (0,184 mg 100 g − 1) đã được phát hiện. Các hợp chất phenolic trong KAE của A. hierophantic cũng được xác định, và dữ liệu được lập bảng trong Bảng 2. Axit syringic được ghi nhận là axit phenolic cao nhất trong số 21 phenol được xác định. Catechol và pyrogallol lần lượt là 2,526 và 1,589 mg 100 g − 1. Dữ liệu chỉ ra rằng một số axit phenolic như caffeic, catechin, chlorogenic, epicatechin, e-vanillic, p-hydroxybenzoic và axit protocatechuic đã được phát hiện với lượng vừa phải 0,725, 0,256, 0,136, 0,193, 0,443, 0,223 và 0,454 mg 100 g − 1 tương ứng. Trong cùng bối cảnh, lượng thấp 3,4, 5- trimethoxycinnamic, 4- aminobenzoic, benzoic, cinnamic, coumarin, ellagic, ferulic, gallic, iso-ferulic, -coumaric, p-coumaric và axit salicylic đã được định lượng sau khi được xác định. Epicatechin và D-catechin dưới dạng flavonoid cũng được định lượng trong KAE của A. hierophantic.

3.3. Mức độ Creatinine, Urê, K, Protein toàn phần và Albumin trong huyết thanh Tiêm CCl4 về cơ bản đã làm tăng đáng kể nồng độ creatinine, urê và k huyết thanh ở chuột GII khi so sánh với chuột đối chứng (GI). Ngược lại, tổng mức protein và albumin đã giảm đáng kể ở những con chuột được điều trị bằng CCl 4- (Bảng 3). Vit. E cộng với Se và chất chiết xuất từ ​​cây chùm ngây (G III, IV, V và VI) về cơ bản làm giảm đáng kể sự thay đổi creatinine và urê do tiêm CCl4, trong khi chúng làm tăng albumin và tổng số protein gần với giá trị bình thường trong GI (Bảng 3 ). Mức k huyết thanh tăng rõ rệt ở chuột được điều trị bằng CCl 4- (GII) khi so sánh với GI (Bảng 3). Việc tiêm vit. E cộng với Se và sử dụng các chất chiết xuất từ ​​cồn và nước của A. hierophantic (G IV, V và VI) cũng được cải thiện tích cực mức k khi so sánh với GI (Bảng 3).

3.4. Dấu ấn sinh học chống oxy hóa thận Như được trình bày trong Bảng 4, việc sử dụng CCl4 làm giảm đáng kể mức SOD và GSH và tăng mức MDA trong mô thận đồng nhất GII. Tuy nhiên, khi so sánh với GI, những con chuột được điều trị bằng cả hai vit. Chiết xuất E cộng với Se và A. hierophantic (GIII, VI, V và VI) cho thấy sự cải thiện đáng kể trong hoạt động của các enzym chống oxy hóa SOD và GSH, cũng như giảm mức MDA (Bảng 4). Chiết xuất cồn A. hierophantic (GIV) vượt trội hơn so với chiết xuất dung dịch nước A. hierophantic (GV) và kết hợp chiết xuất từ ​​cồn và nước của A. hierophantic trong việc làm giảm mức độ chống oxy hóa và chống lại quá trình tự oxy hóa dẫn đến mức MDA thấp khi so sánh với GI.

3.5. Tỷ lệ phần trăm bảo vệ thận Tỷ lệ phần trăm bảo vệ thận (so với nhóm kiểm soát âm tính (GI) và dương tính (GII)) của các chức năng thận như creatinine, urê, k, TP, và albumin cũng như các hoạt động chống oxy hóa trong thận đồng nhất (MDA, SOD, GSH ) được minh họa trong Bảng 5. Phần trăm bảo vệ thận ghi lại giá trị cao nhất như creatinine, urê, k trong GIII, TP và albumin trong GV, MDA, và GSH trong GIII và SOD trong GV (Bảng 5). Tổng phần trăm bảo vệ thận so với vit. Điều trị E cộng với Se đã đăng ký mức tối đa trong nhóm được điều trị KAE (GV, 97,62 phần trăm), sau đó là KEE (GIV, 83,27 phần trăm), và sau đó là KEE cộng với KAE (GVI, 78,85 phần trăm), như được tiết lộ trong Bảng 5.

Thảo luận

chất chống oxy hóa vượt trội. Các chất polyphenolic được cho là có đặc tính chống ung thư và chống đột biến gen ở người [40]. Hàm lượng TPC có giá trị trong A. hierophantic cao hơn một chút so với Mohamed et al. [21] là 51,97 mg GAE g-1 trong thảo mộc A. hierochuntica và bởi AlGamdi et al. [41], người đã tìm thấy 4 mmol L-1 GAE trong hạt A. hierophantic. Gần đây, Zin et al. [42] chỉ ra sự hiện diện của tannin trong A. hierophantic như một hợp chất hoạt tính sinh học và khuyến nghị hoạt tính sinh học của nó, cần được nghiên cứu sâu. Hàm lượng -carotene, như một phần của tổng số carotenoid, là 2,27 µg g-1 như đã được Mohamed et al đề cập. [21], và thậm chí các kết quả hiện tại cho thấy tổng số carotenoid là 3,51 µg g − 1. Những phát hiện tương tự về hàm lượng flavonoid và flavonol đã được chỉ ra bởi Mohamed et al. [21]. Các thành phần hoạt tính sinh học, chẳng hạn như các hợp chất phenolic, thể hiện hoạt tính chống oxy hóa khi phá vỡ chuỗi phản ứng oxy hóa lipid bằng cách cung cấp hydro cho các gốc tự do hoạt động. Tiềm năng thu nhặt này của phenol để ức chế các gốc đã được làm sáng tỏ bởi các nhóm hydroxyl phenol của chúng [8,10,22]. Axit phenolic này đã được mô tả là một thành phần chống oxy hóa hiệu quả, bao gồm hydrogen peroxide, gốc hydroxyl và anion superoxide [43]. Hoạt động chelat hóa kim loại của A. hierophantic dường như thành thạo trong việc can thiệp vào cấu tạo phức "Fe2 cộng –ferrozine", cho thấy khả năng bắt giữ các ion "sắt" trước "ferrozine" của nó. Mối quan hệ tích cực giữa sự gia tăng hàm lượng các hợp chất phenolic được chỉ ra trực tiếp với khả năng chống oxy hóa của chúng [42]. Andjelković và cộng sự. [44] thiết lập hoạt động của nhiều axit phenolic để tạo phức với kim loại. TPC có giá trị và các hoạt động chống oxy hóa có liên quan bằng cách sử dụng các phương pháp đo khác nhau cung cấp một bảng rõ ràng và xác nhận hoạt tính sinh học của A. hierochuntica như một loại dược thảo cho các ứng dụng thực phẩm hoặc đồ uống. Các thành phần hoạt tính sinh học, chẳng hạn như các hợp chất phenolic, thể hiện hoạt tính chống oxy hóa khi phá vỡ chuỗi phản ứng oxy hóa lipid bằng cách tặng hydro cho các gốc tự do hoạt động [45]. Tiềm năng thu nhặt này của phenol để ức chế các gốc đã được làm sáng tỏ

thành phần chống oxy hóa hiệu quả, bao gồm hydrogen peroxide, gốc hydroxyl, và anion superoxide [43,45,47]. Các hợp chất được xác định và định lượng bằng HPLC trong KAE của A. hierophantic cao hơn số lượng các hợp chất được xác định trong KEE, nhưng các hợp chất được xác định trong KEE của A. hierophantic được trình bày với số lượng cao hơn [22]. Các kết quả phản ánh rằng A. hierophantic tiêu thụ có thể có nhiều thành phần ở cả dạng phân cực và không phân cực. Những kết quả này được trình bày tương tự bởi AlGamdi et al. [41] khi họ xác định và định lượng 20 hợp chất polyphenolic trong hạt của A. Rentrochuntica. Chiết xuất chứa axit chlorogenic và axit hydroxybenzoic, nhưng các thành phần chính là flavone C-glycoside, C-glycoside, O-glycoside và O-glycoside-C-glycoside chủ yếu xảy ra dưới dạng liên hợp luteolin. Ngoài ra, 14 trong số 20 hợp chất trong chiết xuất A. hierophantic thể hiện hoạt tính chống oxy hóa bằng cách sử dụng hệ thống phát hiện chất chống oxy hóa trực tuyến HPLC [41]. Thật thú vị, dữ liệu hiện tại đã xác nhận rằng A. hierophantic rất giàu các hợp chất phytochemical và là một nguồn chất chống oxy hóa tự nhiên tốt với những lợi ích sức khỏe tiềm năng, như trước đây hiếm khi được làm nổi bật trong hạt [41]. Do đó, chè được chế biến từ bột toàn cây là hình thức tiêu dùng truyền thống; dữ liệu minh họa các hợp chất hoạt tính sinh học mới được xác định trong KEE và KAE của A. Rentrochuntica, khác với những hợp chất được tìm thấy trong AlGamdi et al. [41] Trong nhiều nghiên cứu, độc tính gây ra cho thận của CCl 4- được sử dụng như một hệ thống mô hình để thử nghiệm tác dụng bảo vệ thận của các chất chiết xuất / thuốc từ thực vật [48,49]. Nghiên cứu hiện tại đã xem xét tác động của chiết xuất từ ​​cây chùm ngây đối với CCl 4- gây tổn thương thận, cũng như khả năng bảo vệ thận và chống oxy hóa của nó ở chuột. Trong nghiên cứu hiện tại, nhóm điều trị CCl4 (GII) đã tăng đáng kể nồng độ creatinine, urê và k và giảm nồng độ protein và albumin toàn phần khi so sánh với GI. Điều này có thể là do nhiễm độc CCl4 là nguồn sản xuất gốc tự do chính trong nhiều cơ quan, bao gồm gan, thận, phổi, não và máu [50]. Người ta cũng quan sát thấy rằng sau khi tiêm CCl4 ở chuột, nồng độ CCl4 được phân bố đều trong thận hơn ở gan [51], vì thận có ái lực cao với CCl4 và chứa cytochrom P450, chủ yếu ở vỏ não. Các gốc tự do phổ biến nhất từ ​​CCl4 là gốc trichloromethyl (CCl3 •) và trichloromethyl peroxyl (CCl3O2 •) [52]. Các gốc này gắn vào protein nội bào, lipid màng tế bào và DNA, gây ra biến tính protein, peroxy hóa lipid và tổn thương DNA do oxy hóa dẫn đến chết tế bào [53]. Ngược lại, điều trị chuột bằng CCl 4- bằng nó. E cộng với Se (GIII) và chiết xuất A. hierophantic (GVI: VI) đã làm giảm hiệu quả sự gia tăng nồng độ creatinine và urê cũng như tăng albumin huyết thanh và tổng số protein rất gần với mức của chúng trong GI. Điều này có thể là do các đặc tính chống oxy hóa và hàm lượng phenolic phong phú của chất chiết xuất từ ​​A. hierophantic và khả năng chống oxy hóa và hoạt động tạo chelating của nó. E cộng với Se, loại bỏ các gốc tự do do đó ức chế tổn thương thận. Chất phytochemical là chất loại bỏ gốc tự do hiệu quả cao nhất và được coi là chất chống oxy hóa vượt trội từ thực vật [54]. Các hợp chất phenolic phong phú nhất là axit hydroxycinnamic, chẳng hạn như axit sinapic, trong số chín hợp chất phenolic được xác định trong KEE, trong khi axit syringic là axit phenolic cao nhất trong số 21 axit phenolic được xác định trong KAE. Sáu flavonoid đã được xác định trong KEE và hai trong KAE bằng cách sử dụng phân tích HPLC [55]. Hơn nữa, như một chất chống oxy hóa, nó. E được cho là có thể bảo vệ các mô khỏi tác hại của các chất chuyển hóa oxy phản ứng. Selen cũng được công nhận là một khoáng chất vi lượng cần thiết cho sức khỏe con người, bảo vệ tế bào khỏi tác hại của các gốc tự do [22]. Trong nghiên cứu hiện tại, việc sử dụng CCl4 làm giảm đáng kể GSH và SOD và tăng mức MDA trong thận đồng nhất so với GI. Vit. Chiết xuất E cộng với Se và A. hierophantic cải thiện các tác dụng đa dạng của CCl4 bằng cách khôi phục hoạt động đã thay đổi của các chất chống oxy hóa như SOD và GSH và có thể vô hiệu hóa quá trình sản xuất MDA, như đã được báo cáo gần đây [15,21,40,41] . GSH là một chất chống oxy hóa không phải enzym được tìm thấy trong tất cả các tế bào của động vật có vú. Với dạng oxy hóa của nó, GSSG, GSH hoạt động như một đồng yếu tố cho nhiều enzym giải độc (GPx, GST, và các enzym khác) chống lại stress oxy hóa và duy trì sự cân bằng oxy hóa khử của tế bào [47]. Phát hiện này phù hợp với kết quả của Khan và Siddique [56] và Makni et al. [57], người đã báo cáo rằng CCl4 làm giảm mức GSH trong thận chuột. Điều trị với nó. E cộng với Se và chiết xuất A. hierophantic cho thấy sự bảo vệ chống lại sự giảm mức GSH do CCl4 kích hoạt. Trong cùng một bối cảnh, SOD xúc tác sự phân hủy hai phân tử anion superoxide (* O2) thành hydrogen peroxide (H2O2) và oxy phân tử (O2), do đó làm cho anion superoxide có hại ít nguy hiểm hơn [58,59]. Nhiễm độc CCl4 làm thay đổi mức độ biểu hiện gen bằng cách làm cạn kiệt SOD ở thận [60]. Giảm hoạt động của SOD là một chỉ số nhạy cảm về tổn thương tế bào. Các chất chiết xuất từ ​​A. hierophantic đã được thử nghiệm của chúng tôi cải thiện độc tính trên thận bằng cách làm giảm mức độ SOD. Nó tham gia vào các quá trình enzym khác nhau để giảm nồng độ của các phản ứng khử axit [61]. MDA là sản phẩm đầu tiên của quá trình peroxy hóa lipid và là một trong những dấu hiệu quan trọng của stress oxy hóa. Chất chiết xuất từ ​​cây hierophantic làm giảm sự gia tăng mức MDA và khôi phục toàn bộ sức mạnh chống oxy hóa trong thận chuột được xử lý CCl 4-. Những tác dụng bảo vệ này có thể là do hoạt tính chống oxy hóa mạnh mẽ của các chất chiết xuất từ ​​A. hierophantic [15,21,40,41]. Những kết quả này cũng cho thấy rằng chiết xuất từ ​​cây chùm ngây có thể làm giảm stress oxy hóa bằng cách giảm mức độ lipid peroxide trong CCl 4- tiếp xúc với thận chuột và ngăn ngừa tổn thương thận. Những kết quả này đồng ý với kết quả của các hoạt động chống oxy hóa của Zn trên CCl 4- gây ra độc tính trên thận cấp tính [62,63]. Các chất chiết xuất từ ​​A. Rentrochuntica đã trình bày khả năng bảo vệ thận có giá trị liên quan đến các xét nghiệm chức năng thận (creatinine, urê, K, TP, và albumin) và các hoạt động chống oxy hóa đồng nhất của thận (GSH, SOD, MDA) trong GIV, V và IV, tương ứng. Tổng phần trăm bảo vệ thận so với vit. Điều trị E cộng với Se đã đăng ký mức tối đa trong nhóm được điều trị KAE (GV, 97,62 phần trăm), sau đó KEE (GIV, 83,27 phần trăm), và sau đó KEE cộng với KAE (GVI, 78,85 phần trăm), theo thứ tự giảm dần. Điều này có thể là do sự khác biệt về số lượng và chất lượng của hàm lượng phenolic và chất chống oxy hóa của các chất chiết xuất từ ​​A. Rentrochuntica, có liên quan đến khả năng chống oxy hóa [15,19,22,40,42]. Các phát hiện mô bệnh học ở thận phù hợp với các ước tính sinh hóa của các nhóm thực nghiệm được điều tra. Sử dụng CCl4 (GII) gây ra tổn thương cầu thận và ống dẫn đến tắc nghẽn mạch máu ở thận. Dogukan và cộng sự. [64] đã phát hiện ra một kiểu mô học tương tự trong mô thận của chuột để đáp ứng với điều trị CCl4 kéo dài. Người ta cũng coi rằng những thay đổi mô học là do quá tải chức năng của nephron, dẫn đến rối loạn chức năng thận [65], và / hoặc do sự phá hủy mô do tạo ra gốc tự do thông qua chuyển hóa CCl4 [56,66] . Tác dụng của nó. E cộng với Se và chiết xuất A. hierophantic để sửa chữa và phục hồi tác dụng phá hủy thận của CCl4 là đáng chú ý. Điều này có thể là do nó. E cộng với Se (như một chất chống oxy hóa mạnh) hoạt động trên ROS gây ra bởi CCl4 [67]. Các chất chiết xuất từ ​​A. hierophantic ngăn chặn CCl 4- gây ra độc tính thận cấp tính do vai trò chống oxy hóa và các đặc tính quét gốc tự do của các hợp chất phenolic có trong chất chiết xuất từ ​​A. Rentrochuntica [22]. Phát hiện của chúng tôi phù hợp với kết quả của các nhà nghiên cứu khác đã chỉ ra rằng các dẫn xuất thực vật khác nhau có tác dụng dược lý bằng cách loại bỏ lạm dụng CCl4 và khôi phục lại trạng thái bình thường [6].

Kết luận

Kết quả của nghiên cứu này đã chứng minh rõ ràng rằng thực vật A. hierophantic rất giàu các hợp chất phenolic phân cực và không phân cực có khả năng chống oxy hóa vượt trội, liên quan trực tiếp đến hàm lượng phytochemical. A. hierophantic (chiết xuất đặc biệt trong nước) bảo vệ chuột chống lại stress oxy hóa do CCl 4- gây ra và tổn thương thận cấp tính, bằng chứng là mức MDA giảm đáng kể và tăng hoạt động GSH và SOD, cũng như ngừng hoạt động sinh hóa và mô học thay đổi trong thận. Hiệu quả bảo vệ toàn diện bắt nguồn từ tính chất chống oxy hóa và quét gốc tự do của các hợp chất phenolic có trong các chất chiết xuất từ ​​A. hierophantic. Những đặc điểm này giúp giải thích hiệu quả làm thuốc của cây như một loại thuốc thảo dược. Nghiên cứu thêm là cần thiết để mô tả đầy đủ các nguyên tắc hoạt động trong A. hierophantic, và nghiên cứu này nhằm mục đích kích thích các nghiên cứu liên quan toàn diện hơn để cung cấp đủ dữ liệu và khuyến nghị để xác định cơ chế và liều lượng an toàn.

Người giới thiệu

1. Thống kê, KD Bệnh thận mãn tính ở Hoa Kỳ. 2021. Có sẵn trực tuyến: https://www.cdc.gov/kidneydisease/pdf/ Chronic-Kidney-Disease-in-the-US -2021- h.pdf (truy cập vào ngày 20 tháng 7 năm 2021).
2. Ku, E.; Glidden, ĐV; Johansen, KL; Sarnak, M.; Tighiouart, H.; Grimes, B.; Hiệp hội Hsu, CY giữa kiểm soát huyết áp nghiêm ngặt trong bệnh thận mãn tính và giảm tỷ lệ tử vong sau khi khởi phát bệnh thận giai đoạn cuối. Thận Int. 2015, 87, 1055–1060. [CrossRef] [PubMed]
3. Tumlin, JA; Madaio, Nghị sĩ; Hennigar, R. Bệnh thận IgA vô căn: Sinh bệnh học, mô bệnh học và các lựa chọn điều trị. Clin. Mứt. Soc. Nephrol. 2007, 2, 1054–1061. [CrossRef] [PubMed]
4. Olah, G.; Reddy, VP; Prakash, GS; Reactions, FC Kirk-Othmer bách khoa toàn thư về công nghệ hóa học. Kính áp tròng 1978, 720–742.
5. Ozturk, F.; Ucar, M.; Ozturk, IC; Vardi, N.; Batcioglu, K. Độc tính trên thận do carbon tetrachloride gây ra và tác dụng bảo vệ của betaine ở chuột Sprague-Dawley. Tiết niệu 2003, 62, 353–356. [CrossRef]
6. Ogeturk, M.; Kus, tôi; Colakoglu, N.; Zararsiz, tôi; Ilhan, N.; Sarsilmaz, M. Caffeic axit phenethyl ester bảo vệ thận chống lại độc tính carbon tetrachloride ở chuột. J. Ethnopharmacol. 2005, 97, 273–280. [CrossRef]
7. Cơ chế cấp phát tự do Slater, TF trong chấn thương mô. Trong Chức năng Tế bào và Bệnh tật; Cañedo, LE, Todd, LE, Packer, L., Jaz, J., Eds .; Springer: Boston, MA, USA, 1988; trang 209–218. [CrossRef]
8. Khan, ÔNG; Rizvi, W .; Khan, GN; Khan, RA; Shaheen, S. Độc tính trên thận do carbon tetrachloride gây ra ở chuột: Vai trò bảo vệ của Digera muricata. J. Ethnopharmacol. 2009, 122, 91–99. [CrossRef]
9. Afsar, T.; Khan, ÔNG; Razak, S.; Ullah, S .; Mirza, B. Hoạt động hạ sốt, chống viêm và giảm đau của Acacia hydaspica R. Parker và phân tích hóa thực vật của nó. BMC bổ sung. Altern. Med. 2015, 15, 1–12. [CrossRef]
10. Al-Qabba, MM; El-Mowafy, MA; Althwab, SA; Alfheeaid, HA; Aljutaily, T.; Hồ sơ Barakat, H. Phenolic, hoạt động chống oxy hóa và hiệu quả cải thiện của mầm hạt diêm mạch Chenopodium chống lại stress oxy hóa gây ra CCl 4 - ở chuột. Chất dinh dưỡng 2020, 12, 2904. [CrossRef]