Các thành phần chống oxy hóa và chống mệt mỏi của đậu bắp
Mar 21, 2022
Để biết thêm thông tin:ali.ma@wecistanche.com
trừu tượng
Đậu bắp (Abelmoschus esculentus (L.) Moench), một loại rau tốt cho sức khỏe, được trồng phổ biến ở các khu vực nhiệt đới và cận nhiệt đới. Các nghiên cứu trước đây đã chứng minh rằng vỏ đậu bắp sở hữuhoạt động chống mệt mỏi,và mục đích của nghiên cứu này là làm rõchống mệt mỏicác chất cấu thành. Để đạt được điều này, chúng tôi chia vỏ đậu bắp (OPD) thành hạt (OSD) và vỏ (OSK) và so sánh hàm lượng của tổng số polysaccharid, tổng số polyphenol, tổng số flavonoid, isoquercitrin và quercetin -3- O-gentiobiose và chất chống oxy hóa hoạt động trong ống nghiệm vàhoạt động chống mệt mỏiin vivo giữa OSD và OSK. Hàm lượng của tổng số polyphenol và tổng số polysaccharid lần lượt là 29,5% và 14,8% trong OSD và 1,25% và 43,1% trong OSK. Tổng số flavonoid, isoquercitrin và quercetin -3- O-gentiobiose (tương ứng là 5,35 phần trăm, 2,067 phần trăm và 2,741 phần trăm) chỉ được phát hiện trong OSD. Các thử nghiệm chống oxy hóa, bao gồm nhặt rác 1- diphenyl -2- picrylhydrazyl (DPPH), khả năng chống oxy hóa khử sắt (FRAP) và thử nghiệm giảm công suất và thử nghiệm bơi có tải trọng cho thấy OSD sở hữu chất chống oxy hóa đáng kể vàtác dụng chống mệt mỏi. Hơn nữa, xác định sinh hóa tiết lộ rằnghoạt động chống mệt mỏiOSD là do giảm nồng độ axit lactic trong máu (BLA) và nitơ urê (BUN), tăng cường lưu trữ glycogen ở gan và thúc đẩy khả năng chống oxy hóa bằng cách giảm mức malondialdehyde (MDA) và tăng superoxide dismutase (SOD) và glutathione peroxidase (GSH- Px) các mức. Những kết quả này đã chứng minh hạt đậu bắp làchống mệt mỏimột phần vỏ đậu bắp và polyphenol và flavonoid là những thành phần có hoạt tính.

1. Giới thiệu
Mệt mỏi là một hiện tượng sinh lý phức tạp, được định nghĩa là khó bắt đầu hoặc duy trì các hoạt động tình nguyện [1]. Ngoài việc gia tăng theo tuổi tác và xuất hiện ở bệnh nhân ung thư, trầm cảm, nhiễm HIV, đa xơ cứng và bệnh Parkinson, mệt mỏi ngày càng trở thành một triệu chứng phổ biến ở người bình thường với nhịp độ ngày càng tăng của cuộc sống hiện đại [2–4]. Các cuộc điều tra cộng đồng lớn đã chỉ ra rằng hơn một nửa dân số trưởng thành phàn nàn về sự mệt mỏi [5,6]. Mệt mỏi mãn tính hoặc tích lũy lâu dài không chỉ làm giảm chất lượng cuộc sống mà còn dẫn đến hội chứng mệt mỏi mãn tính và các bệnh hữu cơ khác, thậm chí dẫn đến karoshi (tử vong bất thường do các bệnh tim mạch cấp tính do làm việc quá sức [7]). Có một số lý thuyết về nguyên nhân của sự mệt mỏi, chẳng hạn như lý thuyết kiệt sức, nói rằng mệt mỏi là do thiếu ATP để ghép nối actin-myosin, quá trình bơm Na` / K` và sự hấp thu Ca2` của lưới cơ chất [8–11 ]; lý thuyết rối loạn cân bằng nội môi, chỉ ra sự mệt mỏi là do sự tích tụ của các sản phẩm phụ chuyển hóa khác nhau [10,12]; và lý thuyết tai biến chỉ ra rằng sự mệt mỏi có thể phát triển do sự cố tại một hoặc một số vị trí dọc theo con đường sinh lực [13]. Trong số này, căng thẳng oxy hóa được cho là đóng một vai trò quan trọng trong căn nguyên của sự mệt mỏi [10,13–16]. Chất chống oxy hóa từ một số loại thảo mộc đã được chứng minh là có tác dụng chống mệt mỏi đáng kể, điều này chỉ ra rằng điều trị bằng chất chống oxy hóa có thể là một phương pháp trị liệu chống mệt mỏi có giá trị [17–20]. Do đó, người tiêu dùng đang tìm kiếm nhiều thành phần chống oxy hóa tự nhiên hơn trong chế độ ăn uống của họ để giảm tác hại oxy hóa và chống lại sự mệt mỏi. Đậu bắp (Abelmoschus esculentus (L.) Moench, Họ: Malvaceae), còn được gọi là ngón tay phụ nữ, bhindi, và gumbo, là một loại cây hàng năm có nguồn gốc từ Châu Phi và đã được trồng ở các nước khác nhau trên thế giới, chủ yếu ở vùng nhiệt đới, cận nhiệt đới, và các vùng ôn đới ấm áp.
Vỏ đậu bắp từ lâu đã được sử dụng như một loại rau và một nguồn thuốc ăn kiêng. Trong y học cổ truyền châu Á và châu Phi, vỏ đậu bắp được sử dụng như một loại thực phẩm tạo chất nhầy để chống lại bệnh viêm dạ dày [21]. Các nghiên cứu dược lý đã tiết lộ rằng đậu bắp có các hoạt động chống oxy hóa, bảo vệ thần kinh, chống đái tháo đường, hạ lipid máu và chống mệt mỏi [22–26]. Mặc dù hoạt động chống mệt mỏi của vỏ đậu bắp đã được chứng minh trước đây [26], nhưng người ta vẫn biết rất ít về các thành phần và hoạt động chống mệt mỏi của nó. Các tài liệu trước đây đã báo cáo rằng vỏ đậu bắp chứa hàm lượng cao polysaccharid, polyphenol và flavonoid [27–34]. Nó cũng đã được chứng minh rằng polyphenol và flavonoid có tác dụng chống oxy hóa mạnh và chống mệt mỏi trong các nghiên cứu trước đây [15,18,20,35,36]. Hơn nữa, thí nghiệm định tính sơ bộ của chúng tôi, trong đó chúng tôi sử dụng dung dịch sắt clorua làm thuốc thử phát triển màu, cho thấy rằng chiết xuất hạt đậu bắp có phản ứng phenol mạnh; tuy nhiên, chiết xuất từ vỏ của nó hầu như không thể hiện phản ứng như vậy (Nguyên liệu bổ sung), điều này chứng tỏ rằng hạt đậu bắp chứa hàm lượng polyphenol và flavonoid cao hơn so với vỏ đậu bắp. Do đó, có thể suy đoán rằng hạt đậu bắp có thể là thành phần chống mệt mỏi của vỏ đậu bắp, và polyphenol và flavonoid có thể là thành phần hoạt động. Mục đích của nghiên cứu là làm rõ các thành phần chống mệt mỏi của vỏ đậu bắp. Để đạt được điều này, chúng tôi chia quả đậu bắp tươi thành hạt và vỏ và so sánh hàm lượng hóa học của tổng số polysaccharid, tổng số polyphenol, tổng số flavonoid, isoquercitrin và quercetin -3- O-gentiobiose, và các hoạt động chống oxy hóa trong ống nghiệm và chống các hoạt động in vivo giữa hạt và vỏ đậu bắp. Tất cả những kết quả này cho thấy rằng hạt đậu bắp là thành phần chống mệt mỏi của vỏ đậu bắp, và polyphenol và flavonoid là những thành phần tích cực. Các cơ chế tiềm năng của các hoạt động chống mệt mỏi trong đậu bắp cũng đã được nghiên cứu.
2. Phần thực nghiệm
2.1. Nguyên liệu thực vật và chiết xuất
Những quả đậu bắp tươi được mua từ một khu chợ (Tam Á, tỉnh Hải Nam, Trung Quốc) vào tháng 7 năm 2013. Loại cây này đã được xác thực bởi Giáo sư Bengang Zhang, Viện Dược liệu, Học viện Khoa học Y tế Trung Quốc và Đại học Y tế Liên hiệp Bắc Kinh, Bắc Kinh, Trung Quốc, nơi các mẫu vật chứng từ (số 20130705) đã được gửi tại Herbarium của viện. Hai phần 2,5 kg quả đậu bắp tươi đã được chuẩn bị. Một phần được đông khô trực tiếp để thu được quả đậu bắp khô (251,3 g). Phần còn lại được chia thành hạt đậu bắp và vỏ đậu bắp, đông khô để thu được lần lượt là hạt đậu bắp khô (50,1 g) và vỏ đậu bắp khô (200,5 g). Vỏ, hạt và vỏ đậu bắp được nghiền kỹ và chiết tách riêng với 1500 mL nước sôi trong 1 giờ (3 lần). Mỗi chất lỏng đã lọc được kết hợp và cô đặc trong chân không, để tạo ra phần bã của vỏ đậu bắp (OPD, 105,4 g), hạt đậu bắp (OSD, 20,5 g) và vỏ đậu bắp (OSK, 84,1 g), tương ứng. Do đó, tỷ lệ chiết xuất OPD: OSK: OSD là khoảng 5: 4: 1. Tất cả các mẫu được lưu trữ ở ´20 ˝C cho đến khi phân tích hóa học và các thí nghiệm trên động vật tiếp theo.

2.2. Hóa chất và Thuốc thử
2.3. Loài vật
Chuột ICR đực (20–22 g) được mua từ Phòng thí nghiệm sông Vital (Số đủ tiêu chuẩn: SCXK 2012-0001, Bắc Kinh, Trung Quốc). Những con chuột được nhốt theo nhóm 6 con mỗi lồng dưới nhiệt độ không đổi (23 ˝C ˘ 2 ˝C) và độ ẩm (50 phần trăm ˘ 10 phần trăm) theo chu kỳ sáng / tối 12 / 12- giờ (đèn bật từ 8: 00 sáng đến 8: 00 chiều). Các con vật được tiếp cận miễn phí với chế độ ăn tiêu chuẩn chow chow và nước uống tiệt trùng trong chuồng nuôi có SPF (Không có mầm bệnh cụ thể). Tất cả các quy trình thí nghiệm được tiến hành dưới sự giám sát và phê duyệt của Viện Động vật thí nghiệm thuộc Viện Phát triển Cây thuốc và tuân thủ nghiêm ngặt Hướng dẫn của NIH về Chăm sóc và Sử dụng Động vật Phòng thí nghiệm (Phiên bản thứ tám) [37].
2.4. Phân tích hóa học của OSD và OSK
2.4.1. Xác định tổng hàm lượng Flavonoid (TF)

2.4.2. Xác định tổng hàm lượng polyphenol (TP)
Hàm lượng TP được xác định bằng cách sử dụng Folin – phương pháp Ciocaiteu với một chút sửa đổi [38]. Tóm lại, 5 0 mg mẫu được trộn với 25 mL dung dịch metanol 5 0 phần trăm, sau đó 0,5 mL dung dịch mẫu, 0,3 mL thuốc thử Folin-Ciocaiteu và 10 mL natri cacbonat (10%) là đủ trộn, và sau đó thể tích được điều chỉnh đến 25 mL bằng nước cất. Hỗn hợp được để ở 50 ˝C trong bóng tối trong 1 giờ. Độ hấp thụ được đo ở bước sóng 765. Đường chuẩn của axit Gallic đã được chuẩn bị. Kết quả được biểu thị bằng mg đương lượng axit Gallic trên mg mẫu.
2.4.3. Xác định Isoquercitrin và Quercetin -3- O-Gentiobiose
2.4.4. Xác định tổng hàm lượng Polysaccharide (TPS)
Hàm lượng TPS được xác định bằng phương pháp axit phenol-sulfuric [39,4 0]. Tóm lại, 8 0 mg mẫu được hòa tan trong 50 mL nước cất, sau đó loại bỏ protein bằng phương pháp dã man (dung dịch mẫu: cloroform: N-butyl alcohol=20: 4: 1). Sau đó, một lượng gấp bốn lần etanol được thêm vào dung dịch nhớt thu được để kết tủa chiết xuất polysaccharide thô. Dung dịch etanol được ly tâm ở 617,4 ˆ g trong 30 phút để thu được kết tủa. Kết tủa được rửa liên tiếp bằng etanol, axeton và ete, và hòa tan trong 250 mL nước cất. Sau đó, 0,1 mL dung dịch polysaccharid được trộn với 0,9 mL nước cất, 1 mL dung dịch phenol 5%, và 5 mL axit sulfuric trong ống nghiệm, và giữ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. Độ hấp thụ được đo ở bước sóng 490 nm bằng máy quang phổ UV-VIS UNICO -2012 (Thượng Hải, Trung Quốc). Một đường chuẩn của glucose đã được thiết lập và hàm lượng TPS được xác định từ phương trình hồi quy của đường chuẩn. Kết quả được biểu thị bằng mg đương lượng glucose trên mg mẫu.
2.5. Thử nghiệm chất chống oxy hóa trong ống nghiệm
Khả năng chống oxy hóa của OPD, OSK và OSD được phát hiện bằng ba phương pháp, bao gồm {{0}} diphenyl -2- picrylhydrazyl (DPPH), khả năng chống oxy hóa khử sắt (FRAP) và giảm công suất, theo tài liệu [19,41] với một chút sửa đổi. Trolox được sử dụng như một đối chứng tích cực, và kết quả được biểu thị dưới dạng khả năng chống oxy hóa tương đương Trolox. Vì OPD bao gồm OSK và OSD, để chiếu sáng các thành phần hoạt động của vỏ đậu bắp, nồng độ của OSK và OSD được sử dụng như OPD tương đương. Theo các thử nghiệm sơ bộ, phạm vi nồng độ của OPD, ODS, OSK là 0. 0 {{1 0}} 4 - 0. 8, {{17 }}. 0 {{2 0}} 32 - 0. 64 và 0. 0 0 0 8 - {{4 0}}. 16 mg / mL để xét nghiệm DPPH; 1. 0 - 4. 0, 0. 8–3,2 và {{5 0}}. 2–0,8 mg / mL cho xét nghiệm FRAP; và 0,1–4, 0,08–3,2 và 0,02–0,8 mg / mL đối với xét nghiệm giảm công suất, tương ứng Đối với xét nghiệm DPPH, dung dịch mẫu (50 µL) với phạm vi tỷ lệ (0,004–0,8 mg OPD / mL, 0,0032–0,64 mg OSK / mL và 0,0008–0,16 mg OSD / mL) được trộn với dung dịch DPPH (100 µL, 1,28 ˆ 10´4 mol / L) để đo hoạt tính thu gom gốc tự do (A1) và 95 phần trăm etanol (100 µL) để kiểm tra (A2). Nước cất (50 µL) được trộn với dung dịch DPPH (100 µL) cho mẫu trắng (A0). Độ hấp thụ được đo ở bước sóng 517 nm sau khi trộn các dung dịch và giữ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. Khả năng quét gốc DPPH được tính bằng công thức sau:

Hoạt động nhặt rác (phần trăm) {{0}} [1- (A 1- A2 / {A0] * 100 phần trăm. (1)
FRAP của ba dung dịch mẫu (1. 0 - 4. 0 mg OPD / mL, 0. 8–3,2 mg OSK / mL và 0. 2– {{1 0}}. 8 mg OSD / mL) được phát hiện theo hướng dẫn của Viện Công nghệ Sinh học Beyotime. Dung dịch mẫu đã pha loãng (5 µL) được trộn với dung dịch làm việc FRAP (18 0 µL) và giữ trong 5 phút ở 37 ˝C. Độ hấp thụ của hỗn hợp phản ứng sau đó được ghi lại ở bước sóng 593 nm. Đường chuẩn được chuẩn bị bằng cách sử dụng FeSO4, nằm trong khoảng từ 0. 15 đến 1,5 mm. Trong phép xác định công suất khử, dung dịch mẫu (0. 5 mL cho 0. 1–4 mg OPD / mL, 0. 0 8–3,2 mg OSK / mL và 0. 0 2 - {{5 0}}. 8 mg OSD / mL) được trộn với cùng một thể tích PBS (0. 2 mol / L , pH 6,6) và dung dịch kali ferricyanide (1 phần trăm, trọng lượng / thể tích), và quá trình ủ được thực hiện trong 20 phút ở 50 ˝C. Axit trichloroacetic (0,5 mL, 10%, w / v) được thêm vào hỗn hợp, được ly tâm ở 201,6 ˆ g trong 10 phút. Sau đó, lớp trên của dung dịch (0,5 mL) được pha loãng bằng nước cất (0,5 mL) và sau đó thêm clorua sắt (0,1 mL, 0,1%, w / v) vào đó. Độ hấp thụ được đo ở bước sóng 700 nm.
2.6. Tác dụng chống mệt mỏi của OPD, OSK và OSD và Phân tích sinh hóa
2.6.1. Kiểm tra trường mở
Để xác minh tác động của OPD, OSK và OSD đối với các hoạt động của vận động cơ địa, những con chuột đã được đánh giá tự động bằng cách sử dụng hệ thống điều khiển trường mở có sự hỗ trợ của máy tính do chúng tôi phát triển [42,43]. Bộ máy bao gồm bốn bể kim loại (đường kính 30 cm, cao 40 cm) với một máy quay video được cố định ở trên cùng. Các thí nghiệm được thực hiện trong một căn phòng yên tĩnh và thiết bị được chiếu sáng bằng nguồn sáng 120 Lux trên trần nhà. Một giờ sau khi định lượng, mỗi con chuột được đặt ở giữa thùng kim loại và được phép tự do khám phá trong 2 phút và quãng đường di chuyển được trong 4 phút, là chỉ số của hoạt động vận động, được tính toán bằng phần mềm. Bốn con chuột được thử nghiệm đồng thời.

2.6.2. Kiểm tra Bơi có tải trọng (WLST)
WLST được thực hiện để gây mỏi theo phương pháp được mô tả trước đây với một chút sửa đổi [19,44,45]. Một giờ sau khi dùng thuốc, những con chuột được nạp các tờ chì được gắn vào cùng vị trí của đuôi và nặng khoảng 3% trọng lượng cơ thể của chúng. Sau đó, những con chuột mang trọng lượng riêng lẻ bị buộc phải bơi trong bể nhận hình trụ (đường kính 40 cm), chúng chứa đầy nước (25 ˘ 1 ˝C) đến độ sâu 30 cm. Kiệt sức được phân loại là mất các chuyển động phối hợp và không thể trồi lên mặt nước trong vòng 10 s, và thời gian bơi được ghi lại ngay lập tức. Nước hồ bơi đã được thay sau mỗi buổi học.
2.6.3. Phân tích các thông số sinh hóa liên quan đến mệt mỏi
2.7. Phân tích thống kê
3. Kết quả
3.1. Phân tích hóa học của OSK và OSD
Như thể hiện trong Bảng 1, hàm lượng TF và TP trong OSD cao hơn nhiều so với trong PMNM, trong khi đó, hàm lượng TPS trong OSD thấp hơn nhiều so với OSK. Các hợp chất của isoquercitrin và quercetin -3- O-gentiobiose chỉ được phát hiện trong OSD bằng cách sử dụng HPLC (thể hiện trong Hình 1).


3.2. Hoạt động chống oxy hóa trong ống nghiệm của OPD, OSK và OSD
Như được trình bày trong Bảng 2, hoạt động chống oxy hóa của OPD và OSD đã được chứng minh bằng DPPH, FRAP, và giảm công suất thử nghiệm, và OSD cho thấy hoạt động chống oxy hóa tốt hơn nhiều so với OPD. Tuy nhiên, OSK cho thấy tác dụng yếu trong việc giảm công suất thử nghiệm và không có tác dụng trong các thử nghiệm DPPH và FRAP. Do đó, OSD là thành phần tích cực của vỏ đậu bắp cho hoạt động chống oxy hóa

3.3. Ảnh hưởng đến hoạt động định vị của OPD, OSK và OSD
Các hoạt động định vị của chuột được thử nghiệm vào ngày thứ 2 0 sau khi được điều trị bằng OSD. Như thể hiện trong Hình 2, nhóm OSD liều cao (0. 6 g / kg) làm giảm đáng kể tổng khoảng cách của chuột trong môi trường mới so với nhóm đối chứng (p=0. 04). Tuy nhiên, không có tác động đáng kể nào đối với các nhóm khác trên tổng khoảng cách được quan sát. Kết quả này cho thấy vỏ và hạt đậu bắp không có tác dụng hưng phấn hệ thần kinh trung ương. Hơn nữa, có thể suy ra rằng OSD có thể có tác dụng an thần nhẹ ở liều cao (0,6 g / kg).

3.4. Ảnh hưởng đến thời gian bơi hết cỡ của OPD, OSK và OSD (WLST)
Như thể hiện trong Hình 3, sau khi bổ sung OPD, OSK và OSD trong 21 ngày, điều trị OPD (3 g / kg) và OSD (0. 3 và 0. 6 g / kg) có thể kéo dài rõ rệt thời gian bơi của chuột, kéo dài lên đến 57,84 ˘ 12,37, 46,51 ˘ 5,82 và 7 0. 0 5 ˘ 12. 0 7 phút (p <0 .="" 0="" 5,="" p="">0><0. 0="" 5="" và="" p="">0.><0. {{7="" 0}}="" 1),="" dài="" hơn="" thế="" nhiều="" trong="" nhóm="" đối="" chứng="" (15,2="" 0="" ˘="" 1,49="" phút).="" trong="" khi="" đó,="" điều="" trị="" opd="" (0.="" 75="" và="" 1,5="" g="" kg),="" osd="" (0,15="" g="" kg)="" và="" osk="" (0,6,="" 1,2="" và="" 2,4="" g="" kg)="" không="" cho="" thấy="" sự="" gia="" tăng="" đáng="" kể="" thời="" gian="" bơi="" ở="" chuột="" (="" tương="" ứng="" là="" 14,73="" ˘="" 1,28,="" 23,96="" ˘="" 3,70="" và="" 27,34="" ˘="" 5,72="" phút)="" so="" với="" nhóm="" đối="" chứng="" (p="0." 897,="" p="0." 398="" và="" p="0." 268,="" tương="" ứng="" ),="" nhưng="" osd="" (0,15="" g="" kg)="" cho="" thấy="" xu="" hướng="" tăng="" thời="" gian="" bơi,="" nhưng="" không="" cho="" thấy="" sự="" khác="" biệt="" đáng="" kể="" (tr="0." 225).="" hơn="" nữa,="" anova="" một="" chiều="" cho="" thấy="" sự="" khác="" biệt="" đáng="" kể="" về="" thời="" gian="" bơi="" hết="" sức="" của="" chuột="" giữa="" các="" nhóm="" (f="" (3,="" 40)="12." 839,="" p="">0.><0,001). thời="" gian="" bơi="" của="" nhóm="" osd="" liều="" cao="" (0,6="" g="" kg)="" cho="" thấy="" sự="" khác="" biệt="" rõ="" rệt="" so="" với="" nhóm="" dùng="" liều="" trung="" bình="" (0,3="" g="" kg)="" (p="0." 019),="" và="" kết="" quả="" tương="" tự="" cũng="" được="" quan="" sát="" thấy="" giữa="" nhóm="" 0.="" 3-="" g="" kg="" đến="" 0.="" 15-="" g="" kg="" (p="0." 034),="" chứng="" tỏ="" osd="" có="" thể="" kéo="" dài="" thời="" gian="" bơi="" hết="" sức="" phụ="" thuộc="" vào="" liều="">0,001).>

3.5. Ảnh hưởng của OSD đến các thông số sinh hóa ở chuột sau khi kiểm tra bơi có trọng lượng
3.5.1. Ảnh hưởng của OSD lên BLA, BUN và HG
Sự khác biệt về nội dung BLA, BUN và HG giữa các nhóm là rất đáng kể (BLA: F (3, 4 0)=8. 257, p <{{1 0}}.="" {{="" 2="" 0}}="" 0="" 1;="" bun:="" f="" (3,="" 4="" 0)="8." 596,="" p="">{{1><0. {{3="" {{32="" }}}}="" 0="" 1;="" hg:="" f="" (3,="" 36)="6." 96="" 0,="" p="">0.><0. {{4="" 0}}="" 0="" 1).="" như="" được="" thể="" hiện="" trong="" bảng="" 3,="" mức="" bla="" và="" bun="" trong="" các="" nhóm="" osd="" thấp="" hơn="" đáng="" kể="" so="" với="" nhóm="" chứng="" trong="" 24="" giờ="" sau="" khi="" kiểm="" tra="" bơi="" có="" tải="" trọng="" (bla:="" p="">0.><0. 0="" 5,="" p="">0.><0. 05="" và="" p="">0.><0,01 tương="" ứng="" với="" 0,15,="" 0,3="" và="" 0,6="" g="" kg;="" bun:="" p="">0,01><0,01 cho="" 0,15,="" 0,3="" và="" 0,6="" g="" kg).="" mức="" độ="" hg="" ở="" nhóm="" osd="" cao="" hơn="" đáng="" kể="" so="" với="" nhóm="" chứng="" (p="">0,01><0,05, p="">0,05,><0,01 và="" p="">0,01><0,01 lần="" lượt="" là="" 0,15,="" 0,3="" và="" 0,6="" g="">0,01>

3.5.2. Ảnh hưởng của OSD lên GSH-PX, MDA và SOD
Sự khác biệt của các hoạt động SOD, GSH-PX và MDA tương đương giữa các nhóm là đáng kể (MDA: F (3, 4 0)=8. 355, p <0. {{18}="" }="" 0="" 1;="" sod:="" f="" (3,="" 42)="9." 876,="" p="">0.><0. 0="" 0="" 1;="" gsh-px:="" f="" (="" 3,="" 4="" 0)="7." 959,="" p="">0.><0. 0="" 0="" 1).="" như="" được="" thể="" hiện="" trong="" bảng="" 4,="" mda="" tương="" đương="" trong="" các="" nhóm="" osd="" thấp="" hơn="" đáng="" kể="" so="" với="" nhóm="" chứng="" sau="" khi="" kiểm="" tra="" bơi="" có="" tải="" trọng="" (p="">0.><0. 0="" 1,="" p="">0.><0. {="" {45}}="" 1="" và="" p="">0.><0. 0="" 1="" cho="" 0.="" tương="" ứng="" là="" 15,="" 0,3="" và="" 0,6="" g="" kg).="" hơn="" nữa,="" mức="" độ="" sod="" và="" gsh-px="" ở="" nhóm="" osd="" cao="" hơn="" đáng="" kể="" so="" với="" nhóm="" chứng="" (sod:="" p="">0.><0,01, p="">0,01,><0,01 và="" p="">0,01><0,01; gsh-px:="" p="">0,01;><0,05, p="">0,05,><0,01 và="" p="">0,01>< 0,01="" cho="" 0,15,="" 0,3="" và="" 0,6="" g="" kg,="" tương="">

4. Thảo luận
Quả đậu bắp non là một loại rau lành mạnh được tiêu thụ ở hầu hết các khu vực trên thế giới. Các nghiên cứu trước đây đã báo cáo rằng vỏ đậu bắp chưa trưởng thành có tác dụng chống oxy hóa và chống mệt mỏi [25,46], nhưng các thành phần hoạt động và cơ chế tiềm năng của nó không rõ ràng. Để khảo sát các hoạt động chống oxy hóa và chống mệt mỏi của vỏ đậu bắp, chúng tôi chia vỏ đậu bắp tươi thành hạt và vỏ và thu được OSD, OSK và OPD thông qua một quá trình chiết xuất, sau đó là hoạt động chống oxy hóa in vitro của OSD, OSK, và OPD được phát hiện với DPPH, FRAP và giảm công suất và hiệu quả chống mệt mỏi in vivo của OSD, OSK và OPD được nghiên cứu bằng cách sử dụng thử nghiệm bơi có tải trọng. Kết quả của chúng tôi cho thấy OSD không chỉ có hoạt tính chống oxy hóa tốt trong ống nghiệm mà còn kéo dài đáng kể thời gian bơi của chuột so với nhóm đối chứng, trong khi OSK không có tác dụng gì ở cả hai. Thời gian bơi cạn là thước đo trực tiếp phản ánh khách quan sức chịu đựng khi tập luyện của cơ thể [47], và việc thúc đẩy sức bền tập luyện có tương quan với thời gian bơi dài hơn. Do đó, phần chống oxy hóa và chống mệt mỏi của OPD nên được coi là hạt của nó. Hơn nữa, trong nghiên cứu này, OSD (0. 3 {{1 0}}, 0,60 g / kg) có thể kéo dài đáng kể thời gian bơi của chuột và liều lượng tương đương của con người đối với hạt đậu bắp có thể là 0,9 ~ 1,8 g / kg (4,5 ~ 8,9 g / kg đối với vỏ đậu bắp) theo diện tích bề mặt cơ thể [48]. Những liều lượng này có thể đạt được bởi một khẩu phần rau của con người. Tuy nhiên, các thành phần hoạt tính của đậu bắp vẫn chưa rõ ràng. Kết quả phân tích hóa học trong nghiên cứu này cho thấy hàm lượng polyphenol trong OSD nhiều gấp 24 lần trong OSK, nhưng hàm lượng polysaccharid trong OSD thấp hơn nhiều so với OSK (Bảng 1).
Moreover, total flavonoids content and two compounds of isoquercitrin and quercetin-3-O-gentiobiose were only detected in OSD and were not detected in OSK (Table 1). It has been proven that okra seeds contained epigallocatechin oligomers, catechin, and its oligomers, isoquercitrin, quercetin-3-O-gentiobiose, and other catechin and quercetin derivatives [27–29]. Furthermore, previous studies have reported that polyphenols like catechin and flavonoids like quercetin possess anti-fatigue activity due to their antioxidant activity [35,36,49–51]. Therefore, we deduced that polyphenols and flavonoids of OSD might be the antioxidant and anti-fatigue constituents. As for the reason that the effect of OPD was less than the effect of OSD, it might be that the high content of mucilaginous polysaccharides can affect the assimilation of polyphenols and flavonoids in OPD, which needs to be researched in the future. When it comes to the anti-fatigue mechanism of OSD, an open-field test showed that OSD had no central nerve stimulation in mice, which proved that the anti-fatigue of OSD was not through central excitation. Apart from this, it was likely that OSD possessed a slight sedative effect in high doses (>0. 6 g / kg). Cần có thêm dữ liệu để chứng minh điều này vì sự giảm vận động nhỏ cũng có thể là kết quả của việc giảm động lực khám phá hoặc một hiệu ứng gây lo lắng có thể xảy ra. Tuy nhiên, trong nghiên cứu này, thử nghiệm trường mở đã được sử dụng để loại trừ khả năng OSD thực hiện hoạt động chống mệt mỏi do tác động kích thích lên hệ thần kinh trung ương và nhiều dữ liệu hơn để chứng minh tác dụng an thần của OSD không có. Hơn nữa, các loại oxit phản ứng quá mức (ROS) được tạo ra trong quá trình tập thể dục hết sức đã được chứng minh là thành phần chính của sự mệt mỏi về thể chất. ROS quá mức có thể ảnh hưởng đến các quá trình trao đổi chất và enzym khác nhau bằng cách tấn công các axit béo không bão hòa đa để tạo ra MDA và dẫn đến rối loạn chức năng của màng sinh học [13,52].
Do đó, ROS không chỉ ảnh hưởng trực tiếp đến hoạt động của enzym trong quá trình cung cấp năng lượng và quá trình kết hợp kích thích-co lại mà còn làm tăng tốc độ tích tụ chất thải bao gồm BLA và BUN. Hơn nữa, mức BLA ngày càng tăng là nguyên nhân quan trọng gây ra mệt mỏi vì độ pH trong các mô thấp hơn, và hàm lượng BUN cao hơn cho thấy sức bền tập luyện thấp hơn. Do đó, nó không chỉ có thể tăng cường sức bền tập thể dục mà còn làm giảm bớt sự mệt mỏi về thể chất và thúc đẩy phục hồi bằng cách thúc đẩy hoạt động của hệ thống enzym chống oxy hóa bao gồm SOD và GSH-PX, hoặc bổ sung trực tiếp chất chống oxy hóa. Trong nghiên cứu này, việc xác định các thông số sinh hóa được tiến hành 24 giờ sau khi kiểm tra bơi lội cho thấy điều trị OSD làm giảm đáng kể mức BLA và BUN trong máu, MDA trong gan và tăng mức HG, SOD và GSH trong gan trong quá trình hồi phục mệt mỏi, điều này đã chứng minh rằng OSD có thể làm giảm bớt sự mệt mỏi về thể chất và thúc đẩy quá trình hồi phục. Xem xét kết quả của các thử nghiệm chất chống oxy hóa in vitro trong nghiên cứu của chúng tôi, có thể suy ra rằng OSD có tác dụng chống mệt mỏi không chỉ thông qua việc loại bỏ các gốc tự do một cách trực tiếp mà còn bằng cách thúc đẩy hoạt động của các enzym chống oxy hóa bao gồm SOD và GSH-PX.
Bấm vào hình để Cistanche Uk chống mệt mỏi
5. Kết Luận
Người giới thiệu
1. Chaudhuri, A.; Behan, PO Mệt mỏi trong rối loạn thần kinh. Lancet 2004, 363, 978–988. [CrossRef]
2. Belluardo, N.; Westerblad, H.; Mudó, G.; Casabona, A. .; Bruton, J .; Caniglia, G .; Pastoris, O .; Grassi, F.; Ibáñez, CF Tháo khớp nối thần kinh cơ và mỏi cơ ở chuột thiếu neurotrophin -4. Mol. Tế bào. Tế bào thần kinh. 2001, 18, 56–67. [CrossRef] [PubMed]
3. Tharakan, B.; Dhanasekaran, M.; Brown-Borg, HM; Manyam, BV Trichopus zeylanicus chống lại sự mệt mỏi mà không cần hoạt động giả amphetamine. Phytother. Res. PTR 2006, 20, 165–168. [CrossRef] [PubMed]
4. Huang, L.-Z; Huang, B.-K .; Ye, Q .; Qin, L.-P. Phân đoạn có hướng dẫn hoạt tính sinh học cho đặc tính chống mệt mỏi của acanthopanax senticosus. J. Ethnopharmacol. 2011, 133, 213–219. [CrossRef] [PubMed]
5. Pawlikowska, T.; Già hơn, T.; Hirsch, SR; Wallace, P.; Được rồi, DJ; Wessely, SC Nghiên cứu dựa trên dân số về sự mệt mỏi và đau khổ tâm lý. BMJ 1994, 308, 763–766. [CrossRef] [PubMed]
6. Li, G. Tình trạng mệt mỏi của 2823 người khỏe mạnh cần kiểm tra sức khỏe và mối tương quan của nó với các chỉ số thể chất; Đại học Y khoa Bắc Kinh: Bắc Kinh, Trung Quốc, 2013.
7. Uehata, T. Karoshi, chết do làm việc quá sức. Nippon Rinsho Jpn. J. Clin. Med. 2005, 63, 1249–1253.
8. Layzer, RB Chuyển hóa cơ khi mệt mỏi và làm việc. Bailliere's Clin. Nội tiết tố. Metab. 1990, 4, 441–459. [CrossRef]
9. Hultman, E.; Bergstrom, M.; Spriet, LL; Söderlund, K. Chuyển hóa năng lượng và Mệt mỏi; Động học con người: Champaign, IL, Hoa Kỳ, 1990.
10. Glaister, M. Multiple sprint: Các phản ứng sinh lý, cơ chế của sự mệt mỏi và ảnh hưởng của việc tập thể dục nhịp điệu. Thể thao Med. 2005, 35, 757–777. [CrossRef] [PubMed]
11. Nozaki, S.; Mizuma, H.; Tanaka, M.; Jin, G.; Tahara, T.; Mizuno, K .; Yamato, M.; Okuyama, K .; Eguchi, A. .; Akimoto, K .; et al. Thiamine tetrahydrofuran disulfide cải thiện quá trình chuyển hóa năng lượng và hoạt động thể chất trong quá trình nạp mệt mỏi về thể chất ở chuột. Nutr. Res. 2009, 29, 867 - 872. [CrossRef] [PubMed]
12. McCully, KK; Authier, B.; Ô liu, J.; Clark, BJ, thứ 3. Cơ mỏi: Vai trò của quá trình trao đổi chất. Có thể. J. Appl. Physiol. 2002, 27, 70–82. [CrossRef] [PubMed]
13. Carter, GT Mệt mỏi. Trong Encyclopedia of the Neurological Sciences, xuất bản lần thứ 2; Aminoff, MJ, Daroff, RB, Eds .; Nhà xuất bản Học thuật: Oxford, Vương quốc Anh, 2014; trang 276–280.
14. Chất làm đầy, K.; Lyon, D.; Bennett, J .; McCain, N. .; Elswick, R.; Lukkahatai, N. .; Saligan, LN Hiệp hội rối loạn chức năng ty thể và mệt mỏi: Một đánh giá của tài liệu. BBA Clin. 2014, 1, 12–23. [CrossRef] [PubMed]
15. Lin, Y.; Liu, H.-L.; Fang, J.; Yu, C.-H .; Xiong, Y.-K .; Yuan, K. Tác dụng chống mệt mỏi và bảo vệ mạch của quercetin -3- O-gentiobiose đối với stress oxy hóa và rối loạn chức năng nội mô mạch máu gây ra khi bơi bền bỉ ở chuột. Chem chép thực phẩm. Toxicol. 2014, 68, 290–296. [CrossRef] [PubMed]
16. Edwards, RH Chức năng cơ của con người và sự mệt mỏi. Đã tìm thấy Ciba. Symp. 1981, 82, 1–18. [PubMed]
17. Gupta, A.; Vij, G.; Sharma, S.; Tirkey, N.; Rishi, P.; Chopra, K. Curcumin, một chất chống oxy hóa polyphenolic, làm giảm hội chứng mệt mỏi mãn tính trong mô hình căng thẳng ngâm nước ở sông. Sinh học miễn dịch 2009, 214, 33–39. [CrossRef] [PubMed]
18. Ngô, CY; Chen, R.; Wang, XS; Shen, B.; Yue, W .; Wu, Q. Các hoạt động chống oxy hóa và chống mệt mỏi của chiết xuất phenolic từ vỏ hạt của Euryale Ferox salisb. Và xác định ba hợp chất phenolic bằng lc-esi-ms / ms. Phân tử 2013, 18, 11003–11021. [CrossRef] [PubMed]
19. Jiang, D.-Q .; Guo, Y. Xu, D.-H.; Huang, Y.-S .; Nhân dân tệ, K .; Lv, Z.-Q. Tác dụng chống oxy hóa và chống mệt mỏi của anthocyanins của tinh lọc nước dâu tằm (MJP) và tinh lọc marc dâu tằm (MMP) từ các giống dâu tằm khác nhau ở Trung Quốc. Chem chép thực phẩm. Toxicol. 2013, 59, 1–7. [CrossRef] [PubMed]
20. Swamy, MSL; Naveen, S.; Singsit, D.; Naika, M.; Khanum, F. Tác dụng chống mệt mỏi của polyphenol chiết xuất từ vỏ quả lựu. Int. J. Integr. Biol. 2011, 11, 69–72.
21. Lộn xộn, J.; Thole, C.; Niehues, M.; Shevtsova, A. .; Glocker, E.; Boren, T.; Hensel, A. Đặc tính chống kết dính của chiết xuất trái cây chưa trưởng thành Abelmoschus esculentus (Đậu bắp) chống lại sự bám dính của vi khuẩn helicobacter pylori. PLoS ONE 2014, 9, e84836. [CrossRef] [PubMed]
22. Tongjaroenbuangam, W .; Ruksee, N.; Chantiratikul, P.; Pakdeenarong, N.; Kongbuntad, W .; Govitrapong, P. Tác dụng bảo vệ thần kinh của quercetin, rutin và đậu bắp (Abelmoschus esculentus Linn.) Ở chuột được điều trị bằng dexamethasone. Thuốc thần kinh. Int. 2011, 59, 677–685. [CrossRef] [PubMed]
23. Quạt, S.; Zhang, Y. CN, Q.; Yu, L.; Li, M.; Zheng, B.; Ngô, X.; Yang, B.; Li, Y. Huang, C. Chiết xuất từ đậu bắp làm giảm lượng đường trong máu và lipid huyết thanh ở những con chuột C57Bl / 6 béo phì do chế độ ăn giàu chất béo gây ra. J. Nutr. Hóa sinh. 2014, 25, 702–709. [CrossRef] [PubMed]
24. Vương, H.; Chen, G.; Ren, D.; Yang, ST Hoạt động giảm axit trong máu của Đậu bắp được trung gian thông qua việc ức chế quá trình tạo mỡ và điều hòa sự thoái hóa cholesterol. Phytother. Res. PTR 2014, 28, 268–273. [CrossRef] [PubMed]
25. Hu, L.; Yu, W .; Li, Y. Prasad, N.; Tang, Z. Hoạt tính chống oxy hóa của chiết xuất và các thành phần chính của nó từ hạt đậu bắp trên tế bào gan chuột bị thương bởi carbon tetrachloride. BioMed Res. Int. 2014, 2014, 341291. [CrossRef] [PubMed]
26. Dương, Y. Jin, Z .; Mao, P.; Jin, J .; Huang, J .; Yang, M. Nghiên cứu tác dụng chống mệt mỏi của chất chiết xuất từ đậu bắp. Cái cằm. J. Mod. Appl. Dược phẩm. 2012, 29, 4. [CrossRef]
27. Arapitsas, P. Xác định và định lượng các hợp chất polyphenol từ hạt và vỏ đậu bắp. Chem chép thực phẩm. 2008, 110, 1041–1045. [CrossRef] [PubMed].
28. Sengkhamparn, N. .; Sagis, LMC; de Vries, R .; Schols, HA; Sajjaanantakul, T.; Voragen, AGJ Đặc tính hóa lý của pectins từ đậu bắp (Abelmoschus esculentus (L.) Moench). Thực phẩm Hydrocoll. 2010, 24, 35–41. [CrossRef]
29. Karakoltsidis, PA; Constantinides, SM Hạt đậu bắp: Một nguồn protein mới. J. Agric. Chem chép thực phẩm. 1975, 23, 1204–1207. [CrossRef] [PubMed]
30. Chu, Y.; Jia, X. .; Shi, J .; Xu, Y .; Jing, L.; Jia, L. Hai triterpen năm vòng mới từ Abelmoschus esculentus. Helv. Chim. Acta 2013, 96, 533–537. [CrossRef]
31. Jia, L.; Zhong, LJ; Li, HF; Jing, LL Các thành phần hóa học trong phần nước của Abelmoschus esculentus. Cái cằm. Truyền thống. Thảo mộc. Thuốc 2011, 42, 2186–2188.
32. Jia, L.; Guo, M.; Nắp.; Jing, L. Các thành phần hóa học từ phần ete dầu mỏ của Abelmoschus esculentus II. Zhongguo Zhong Yao Zazhi 2011, 36, 891–895. [CrossRef] [PubMed]
33. Jia, L.; Li, HF; Jing, LL Các thành phần hóa học trong chiết xuất N-butanol của Abelmoschus esculentus L. Chin. Truyền thống. Thảo mộc. Thuốc 2010, 41, 1771–1773.
34. Jia, L.; Nắp.; Jing, LL; Guo, MM Nghiên cứu về các thành phần hóa học từ phần ete dầu mỏ của Abelmoschus esculentus. J. Chin. Med. Mater. 2010, 33, 1262–1265.
35. Kobori, M.; Takahashi, Y. Akimoto, Y .; Sakurai, M.; Matsunaga, tôi; Nishimura, H.; Ippoushi, K .; Oike, H.; Ohnishi-Kameyama, M. Uống nhiều quercetin mãn tính làm giảm stress oxy hóa và gây ra sự biểu hiện của các enzym chống oxy hóa trong gan và các mô mỡ nội tạng ở chuột. J. Funct. Thực phẩm 2015, 15, 551–560. [CrossRef]
36. Nogueira, L .; Ramirez-Sanchez, tôi; Perkins, GA; Murphy, A.; Taub, PR; Ceballos, G .; Villarreal, FJ; Hogan, MC; Malek, MH (-) - epicatechin giúp tăng cường khả năng chống mệt mỏi và khả năng oxy hóa trong cơ chuột. J. Physiol. 2011, 589, 4615–4631. [CrossRef] [PubMed].
37. Ủy ban Cập nhật Hướng dẫn Chăm sóc và Sử dụng Động vật Phòng thí nghiệm. Hướng dẫn chăm sóc và sử dụng động vật thí nghiệm, xuất bản lần thứ 8; Nhà xuất bản Học viện Quốc gia: Washington, DC, Hoa Kỳ, 2011.
38. Liao, H.; Đồng, W .; Shi, X.; Lưu, H.; Yuan, K. Phân tích và so sánh các thành phần hoạt tính và hoạt động chống oxy hóa của các chất chiết xuất từ Abelmoschus esculentus L. Pharmacogn. Mag. 2012, 8, 156–161. [PubMed]
39. Zhu, Z .; Li, N. Nghiên cứu phương pháp xác định hàm lượng polysaccharid của đậu bắp. Giang Tô Agric. Khoa học. 2012, 40, 2. [CrossRef]
40. DuBois, M.; Gilles, KA; Hamilton, JK; Rebers, PA; Smith, F. Phương pháp so màu để xác định đường và các chất liên quan. Hậu môn. Chèm. Năm 1956, 28, 350–356. [CrossRef]
41. Luo, J.; Li, L.; Kong, L. Tách chế phẩm phenylpropanoid glyxerit từ củ của hoa Lilium lancifolium bằng phương pháp sắc ký ngược dòng tốc độ cao và đánh giá các hoạt động chống oxy hóa của chúng. Chem chép thực phẩm. 2012, 131, 1056–1062. [CrossRef]
42. Dang, H.; Chen, Y. Liu, X.; Vương, Q.; Vương, L.; Jia, W .; Wang, Y. Nhân giường của đầu cuối vân: Giải phẫu, sinh lý, chức năng của nhân giường. Ăn xin. Neuro-Psychopharmacol. Biol. Tâm thần học 2009, 33, 1417–1424. [CrossRef] [PubMed]
43. Vương, Q.; Mai, WL; Li, YH; Chen, SG; Wang, LW; Phong, ZQ; Zhu, YF; Liu, XM Thành lập hệ thống xử lý hình ảnh dựa trên máy tính để kiểm tra hoạt động vận động của động vật và xác minh thuốc an thần bằng bột kaixin. Cái cằm. Truyền thống. Thảo mộc. Thuốc 2009, 40, 1773–1779.
44. Khí, B.; Liu, L.; Zhang, H.; Zhou, G.-X.; Vương, S.; Duẩn, X.-Z; Bai, X.-Y.; Wang, S.-M.; Zhao, D.-Q. Tác dụng chống mệt mỏi của protein phân lập từ Panax quinquefolium. J. Ethnopharmacol. 2014, 153, 430–434. [CrossRef] [PubMed]
45. Tân, W .; Yu, KQ; Liu, YY; Ouyang, MZ; Yan, MH; Luo, R.; Zhao, XS Hoạt động chống mệt mỏi của polysaccharid chiết xuất từ cây xạ đen Rehmannia preparata. Int. J. Biol. Macromol. 2012, 50, 59–62. [CrossRef] [PubMed]
46. Vương, J.; Zhou, J.; Tang, G. Một nghiên cứu về tác dụng chống mệt mỏi của Đậu bắp. Cái cằm. J. Mod. Appl. Dược phẩm. 2003, 20, 2. [CrossRef]
47. Contarteze, RV; Manchado Fde, B.; Gobatto, CA; de Mello, MA Các dấu hiệu sinh học về căng thẳng ở chuột đã thực hiện các bài tập bơi và chạy trên máy chạy bộ. Comp. Hóa sinh. Physiol. Một Mol. Integr. Physiol. 2008, 151, 415–422. [CrossRef] [PubMed]
48. Xu, SY Phương pháp thực nghiệm dược lý học; Nhà xuất bản Y học Nhân dân: Bắc Kinh, Trung Quốc, 2002.
49. Zanwar, AA; Badole, SL; Shende, PS; Hegde, MV; Bodhankar, SL Vai trò chống oxy hóa của catechin đối với sức khỏe và bệnh tật. Trong Polyphenol trong Sức khỏe con người và Bệnh tật; Watson, RR, Preedy, VR, Eds .; Nhà xuất bản: San Diego, CA, Hoa Kỳ, 2014; trang 267–271.
50. Jadhav, SB; Liên hợp Singhal, RS Laccase-gum tiếng Ả Rập để điều chế oligomer hòa tan trong nước của catechin với hoạt tính chống oxy hóa tăng cường. Chem chép thực phẩm. 2014, 150, 9–16. [CrossRef] [PubMed]
51. Liudong, F.; Feng, Z .; Daoxing, S.; Xiufang, Q.; Xiaolong, F.; Haipeng, L. Đánh giá đặc tính chống oxy hóa và tác dụng chống mệt mỏi của polyphenol trong trà xanh. Khoa học. Res. Tiểu luận 2011, 6, 2624–2629.
52. Bạn, L.; Zhao, M.; Regenstein, JM; Ren, J. Hoạt động chống oxy hóa in vitro và tác dụng chống mệt mỏi in vivo của peptit chạch (misgurnus anguillicaudatus) được điều chế bằng cách tiêu hóa papain. Chem chép thực phẩm. 2011, 124, 188–194. [CrossRef]







