Những thay đổi về mức độ của phenylethanoid Glycosides, hoạt tính chống oxy hóa và các đặc tính chất lượng khác trong các lát Cistanche Deserticola bằng cách xử lý bằng hơi nước

Cistanche Deserticola Y. C. MA(Orobanchaceae), thường được gọi là "Nhân sâm sa mạc", từ lâu đã được sử dụng làm thuốc bổ ở Trung Quốc và Nhật Bản. Thân thịt được cắt thành lát để điều trị các bệnh khác nhau bao gồm bất lực, vô sinh nữ, cảm giác lạnh ở thắt lưng và đầu gối và táo bón ở người già. Trong những năm gần đây, một số nghiên cứu đã tiết lộ tính hiệu quả của nó trong các mô hình thí nghiệm liên quan đến rối loạn thần kinh, đặc biệt là bệnh Alzheimer và bệnh Parkinson.Thị trường thực phẩm sức khỏe ngày càng quan tâm đến loại thực phẩm bổ sung tự nhiên hữu ích này. Rượu và trà làm từ thân cây mọng nước là thực phẩm phổ biến cho sức khỏe, giúp giảm mệt mỏi, tăng cường học tập và trí nhớ.C. sa mạclà một nguồn phong phú của phenylethanoid glycoside, polysacarit và đường hòa tan, chủ yếu có tác dụng chống oxy hóa,bảo vệ thần kinh,bảo vệ gan,tăng cường miễn dịch,thuốc nhuận tràng,và chống lão hóa tác dụng, trong đó hoạt động chống oxy hóa được coi là cơ sở của các hành động dược lý khác. Echinacoside và Acteoside là các chất đánh dấu đại diện cho việc kiểm soát chất lượng của Cistanches Herba trong Dược điển Trung Quốc (ấn bản 2015), do tính phong phú vượt trội, tính đặc hiệu của giống và hoạt tính sinh học đáng chú ý. Việc xác định các chất chiết pha loãng hòa tan trong etanol cũng được thực hiện trong quá trình kiểm soát chất lượng của Cistanches Herba. Cistanoside A, isoacteoside và 2′-acetylacteoside cũng được báo cáo là có nhiều trongC. sa mạc. 

CHIẾT XUẤT CISTANCHE TỰ NHIÊN CHỐNG MỆT MỎI THỰC PHẨM BỔ SUNG PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Sự gia tăngnhu cầu về C. Deserticola đã kích thích rất nhiều việc trồng trọt của nó. C. Deserticola thuộc loại cây thân thảo ký sinh lâu năm, chủ yếu mọc ở những vùng khô cằn hoặc bán khô cằn phía tây bắc Trung Quốc. Ngay sau khi thu hoạch, những thân cây thô nặng, nhiều đường này phải được sấy khô để tránh mất chất dinh dưỡng và hư hỏng. Thân cây tươi thường chứa 75–85% nước và mực nước nên hạ xuống dưới 10% để bảo quản. Ở phần lớn các vùng sản xuất Cistanche, toàn bộ thân cây tươi được đặt ngoài đồng trong khoảng 2 tháng cho quá trình sấy khô sơ bộ. Nguyên liệu khô sau đó được vận chuyển đến các nhà máy, ngâm trong nước, cắt thành từng lát rồi sấy khô lại. Sự chậm trễ trong quá trình chế biến lát có thể là kết quả của những người nông dân có trình độ học vấn thấp hoặc trang bị kém. Tuy nhiên, vấn đề chính là thiếu kiến ​​thức và công nghệ để tạo ra một quy trình sản xuất hiệu quả.

Xử lý nhiệt độ cao đã được sử dụng rộng rãi trên rau quả và có thể ức chế sự phát triển của vi sinh vật và kéo dài thời hạn sử dụng. Tuy nhiên, nó cũng có thể làm thay đổi hình thức và thành phần dinh dưỡng. Một số thành phần hoạt tính sinh học và các hoạt động dược lý như hoạt động chống oxy hóa đã được chứng minh là tăng cường dược liệu sau khi hấp. Vì vậy, hấp C. Deserticola có thể cải thiện một số lợi ích sức khỏe. Việc sử dụng phương pháp hấp hoặc chần đối với C. Deserticola cắt tươi cũng đã được báo cáo là làm tăng lượngechinacoside và Acteoside.19,20) Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu chi tiết nào được thực hiện để so sánh sự thay đổi các hợp chất có hoạt tính sinh học và hoạt tính chống oxy hóa của C. Deserticola tươi cắt miếng trong quá trình hấp. Do đó, mục đích của nghiên cứu này là kiểm tra ảnh hưởng của thời gian hấp (1, 3, 5, 7 phút) đến lượng phenylethanoid glycoside, polysaccharides, đường hòa tan, chiết xuất hòa tan trong ethanol loãng, giảm cân và đặc tính chống oxy hóa. ở các lát cắt C. Deserticola so với ba nhóm khác (tươi, sấy khô trực tiếp trong lò, chần).

Thực nghiệm

Hóa chất

Hóa chất cấp phân tích: metanol, ethanol, D-glucose, axit sulfuric, kali hydro photphat và kali dihydro photphat monohydrat được mua từ Công ty hóa chất Bắc Kinh (Bắc Kinh, Trung Quốc). Axit formic và phenol được mua từ Công ty thuốc thử hóa chất Sinopharm (Thượng Hải, Trung Quốc). Metanol cấp HPLC được mua từ Fisher Scientific (Toronto, Canada). Nước khử ion thu được bằng hệ thống Milli-Q (Millipore Corp., Bedford, MA, USA). 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) được cung cấp bởi Alfa Aesar (Ward Hill, MA, USA) và 2,2′-azobis(2-amino-propane) dihydrochloride (AAPH ) của Adamas-beta (Thượng Hải, Trung Quốc). 6-Methoxy-2,5,7,8- tetramethylchromane-2-axit cacboxylic (Trolox), 2,6-di-tertbutyl-p-cresol (BHT) và fluorescein (muối natri) (FL) được lấy từ TCI (Tokyo, Nhật Bản) và bộ xét nghiệm tổng khả năng chống oxy hóa (T-AOC) từ Viện Kỹ thuật Sinh học JianThành Nam Kinh (Nam Kinh, Trung Quốc). Các tiêu chuẩn về Acteoside (111530-200706) và echinacoside (111670-200503) được mua từ Viện Kiểm soát Thực phẩm và Dược phẩm Quốc gia (Bắc Kinh, Trung Quốc). Các tiêu chuẩn dành cho2′-acetylacteoside, cistanoside A và isoacteoside được Tiến sĩ Zhiguo Ma tặng làm quà. Độ tinh khiết của từng hợp chất tham chiếu được xác định là trên 98% bằng cách chuẩn hóa diện tích pic được phát hiện bởi máy dò mảng HPLC-diode (DAD).

Xử lý vật liệu và xác định hao hụt trọng lượng

Các mẫu được thu thập vào mùa xuân năm 2{{10}}14 tại đồn điền Cistanches Herba Ninh Hạ (106.08 độ N, 38,24 độ E, 1124,2 m ) ở Trung Quốc và được xác định bởi một người trong chúng tôi (Giáo sư Jun Chen). Mẫu chứng từ đã được lưu giữ tại Viện Phát triển Cây thuốc, Viện Khoa học Y tế Trung Quốc, Trường Cao đẳng Y tế Liên minh Bắc Kinh. Khoảng 3 kg thân cây C. Deserticola được thu gom ngẫu nhiên và rửa sạch bằng nước sạch. Các bộ phận của hoa được loại bỏ bằng dao gốm, sau đó thân cây được cắt thành lát 3 mm. Mỗi lát 100 g được đo theo trọng lượng (W0) dưới dạng bản sao. Bảy phương pháp điều trị thử nghiệm với ba lần lặp lại cho mỗi phương pháp điều trị đã được đánh giá. Để hấp, bốn mẻ lát được cho vào hơi nước 93 độ trong 1, 3, 5 hoặc 7 phút. Để chần, một lần xử lý được cho vào nước 96 độ trong 5 phút. Các lát tươi và sấy khô trực tiếp trong lò là hai phương pháp xử lý khác được báo cáo trong thí nghiệm này. Các lát đã xử lý được cân (W1) và sấy khô ở 60 độ trong lò. Sau đó, các lát khô được cân lại (W2), nghiền và nghiền thành bột (65 lưới). Bột mẫu được bảo quản trong túi chân không ở -20 độ cho đến ngày phân tích. Mức giảm cân được tính như sau: giảm cân sau khi xử lý ở nhiệt độ cao (%){{26}[(W0−W1)/ W0]×100, giảm cân sau khi sấy khô trong lò (%){{31}fer(W0 −W2)/W0]× 100, trong đó W0 là trọng lượng ban đầu và W1 và W2 lần lượt là các trọng lượng được đo sau khi xử lý nhiệt độ cao và sấy khô trong lò.

Phenylethanoid Glycosides và đặc tính chống oxy hóa

Khai thác mẫu

Một mẫu bột {{0}}.5-g được chiết bằng 25 mL dung dịch nước metanol 60% bằng sóng siêu âm KQ-250DE (Công ty dụng cụ siêu âm Kunshan, Giang Tô, Trung Quốc) ở 40 kHz, 200 W và 40 độ trong 30 phút. Sau khi chiết, các mẫu đã xử lý được ly tâm trong 10 phút ở tốc độ 4600 × g (TD5; Hunan Herexi Instrument & Equipment Co., Hunan, Trung Quốc). Chất nổi phía trên được lọc qua bộ lọc kích thước lỗ 0,45-µm cho các phân tích tiếp theo.

Xác định Phenylethanoid Glycosit

Xác định echinacosid, cistanoside A,Acteoside, isoacteoside và 2′-acetylacteosidetừ các mẫu C. Deserticola được thực hiện theo mô tả của Ma et al.21) với một số sửa đổi. Phân tích được thực hiện bằng thiết bị HPLC 2695–2996 (Waters Corp., Milford, MA, USA) với độ hấp thụ tia cực tím được theo dõi ở bước sóng 33{12}} nm. Việc phân tách được thực hiện trên cột Merck Purospher® Star RP-C18 (250 mm×4,6 mm, 5 µm) vận hành ở 30 độ. Pha động ở tốc độ dòng 1 mL/phút bao gồm dung môi A (metanol) và dung môi B (0,1% axit formic trong nước, v/v). Quá trình rửa giải gradient được thực hiện như sau: 28% A ({{30}}–10 phút), 28–38% A (10–30 phút), 38% A (30– 45 phút) và thể tích tiêm là 10 µL. Dung dịch hỗn hợp chứa năm chất chuẩn đối chiếu được chuẩn bị bằng cách hòa tan chất chuẩn đối chiếu trong metanol 60% đến nồng độ cuối cùng là 0,20 mg/mL đối với echinacoside, 0,21 mg/mL đối với Acteoside, 0,20 mg/mL đối với 2′-acetylacteoside, 0,05 mg/ mL đối với cistanoside A và 0,05 mg/mL đối với isoacteoside. Dung dịch này sau đó được pha loãng đến bảy nồng độ khác nhau để thiết lập đường cong hiệu chuẩn. Nồng độ phenylethanoid glycoside của các mẫu được biểu thị bằng g/kg trọng lượng tươi (FW).

CHIẾT XUẤT CISTANCHE TỰ NHIÊN TĂNG CƯỜNG TRÍ NHỚ BỔ SUNG THỰC PHẨM PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Xác định khả năng hấp thụ gốc oxy (ORAC)

Xét nghiệm ORAC được tiến hành theo mô tả của Huang và cộng sự22) với một số sửa đổi. Chất chống oxy hóa tổng hợp BHT được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Tóm lại, 25 µL dịch chiết mẫu pha loãng và 160 µL FL được trộn trong đĩa vi giếng 96-. Hỗn hợp này được ủ ở 37 độ trong 15 phút, trước khi bổ sung 20 µL AAPH. Huỳnh quang được theo dõi bằng bước sóng 485 nm (kích thích) và 520 nm (phát xạ) ở khoảng thời gian 3- phút trong 72 phút bằng cách sử dụng Fluoroskan Ascent FL (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). Trolox (2,5–50,0 µmol/L) được sử dụng làm tiêu chuẩn tham chiếu và kết quả được biểu thị bằng micromol Trolox trên khối lượng lát tươi, µmol TE/g FW.

Xác định hoạt tính nhặt gốc tự do 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)

Xét nghiệm DPPH được thực hiện theo mô tả của Goupy et al.23) với một số sửa đổi. Chất chống oxy hóa tổng hợp BHT được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Tóm lại, 1 mL dịch chiết mẫu pha loãng được trộn với 1 mL dung dịch metanol DPPH 0,2 mmol/L. Các dung dịch được giữ trong bóng tối ở nhiệt độ 25 độ trong 9{9}} phút, sau đó đo độ hấp thụ ở bước sóng 517 nm. Trolox (4,0–119,5 µmol/L) được sử dụng làm chất chuẩn đối chiếu và kết quả được biểu thị bằng micromol Trolox trên khối lượng lát tươi, µmol TE/g FW.

Xác định đặc tính chống oxy hóa khử sắt (FRAP)

Xét nghiệm FRAP được thực hiện bằng bộ xét nghiệm T-AOC theo hướng dẫn của nhà sản xuất.

Đường hòa tan và Polysaccharides

Chuẩn bị mẫu đường hòa tan

Một 0.5-g mẫu bột được chiết bằng 25 mL dung dịch nước ethanol 80% bằng siêu âm KQ-250DE ở tần số 40 kHz, 150 W và 80 độ trong 30 phút. Dung dịch chiết đầu tiên được lọc và chuyển vào bình định mức 50-mL. Các cặn được chiết lại và dịch lọc được kết hợp với dung dịch chiết đầu tiên trong bình định mức 50-mL và đổ đầy đến vạch bằng dung dịch etanol 80%.

Sau đó, nhỏ 1 mL dung dịch này vào ống thủy tinh 10-mL để làm bay hơi etanol trong nồi cách thủy sôi. Nước cất (5 mL) được thêm vào để hòa tan cặn, sau đó chuyển phần cặn này vào bình định mức 100-mL và đổ đầy nước cất đến vạch. Cuối cùng, 2 mL dung dịch loãng này được sử dụng để xác định lượng đường hòa tan.

Chuẩn bị mẫu Polysaccharides

Cặn từ quá trình chiết đường hòa tan được làm khô trong không khí và được chiết bằng 25 mL nước cất bằng siêu âm KQ- 250DE ở tần số 40 kHz, 150 W và 80 độ trong 30 phút. Dung dịch chiết thứ nhất được lọc và chuyển vào bình định mức 50-mL. Cặn được chiết lại và dịch lọc được kết hợp với dung dịch chiết đầu tiên trong bình định mức 50-mL và đổ đầy nước cất đến vạch. Sau đó, nhỏ dung dịch 5-mL này vào bình định mức 50-mL và đổ đầy nước cất đến vạch. Cuối cùng, 2 mL dung dịch loãng này được sử dụng để xác định polysaccharide.

Xác định đường hòa tan và polysaccharid

Việc xác định đường hòa tan và polysacarit được thực hiện bằng phương pháp axit phenol-sulfuric, như mô tả của Wang và cộng sự.24) Một mililit dung dịch phenol 6% được thêm vào 2 mL dung dịch mẫu và trộn đều. Sau đó, nhanh chóng thêm 5 mL axit sulfuric đậm đặc và lắc trong 5 phút. Hỗn hợp này được chuyển sang nồi cách thủy sôi trong 15 phút và nhanh chóng làm nguội đến nhiệt độ phòng để phát hiện tia cực tím. Sự hấp thụ tia cực tím được theo dõi ở bước sóng 49{10}} nm trong máy quang phổ UV2550 (Shimadzu Co., Kyoto, Nhật Bản). Nước cất được sử dụng làm mẫu trắng. D-glucose khan tiêu chuẩn tham chiếu được cân chính xác và hòa tan trong nước cất đến nồng độ cuối cùng là 0,10 mg/mL. Sau đó, 1, 2, 3, 4, 5, 6 và 7 mL dung dịch gốc được bơm vào bảy bình định mức 10-mL và đổ đầy nước cất đến vạch. Sau đó, bảy nồng độ khác nhau của dung dịch chuẩn được sử dụng để thiết lập đường cong hiệu chuẩn.

Chiết xuất hòa tan trong Ethanol pha loãng

Các mẫu (4.0 g) được cân chính xác để xác định dịch chiết hòa tan trong etanol pha loãng của chúng, theo phương pháp được mô tả trong Dược điển Trung Quốc (ấn bản năm 2015).25) Cân mẫu dạng bột (W3) và chiết bằng 100 mL dung dịch nước etanol 50% cho vào bình nón 250-mL, thỉnh thoảng lắc trong 6 giờ và để yên trong 18 giờ. Dung dịch chiết được lọc và 20 mL dịch lọc được làm bay hơi đến khô, sấy khô ở 105 độ trong 3 giờ và làm nguội trong bình hút ẩm (silicagel) trong 30 phút. Cuối cùng, số lượng được cân chính xác (W4). Hàm lượng dịch chiết hòa tan trong ethanol pha loãng được biểu thị bằng g/kg FW của mẫu. Dịch chiết hòa tan trong etanol pha loãng được tính như sau: dịch chiết hòa tan trong etanol pha loãng (g/kg FW){{19}[(W4×5)/W3]×(100−W5)×10, trong đó W3 là trọng lượng ban đầu , W4 là khối lượng đo được sau khi chiết và W5 là khối lượng hao hụt sau khi sấy trong lò (%).

Phân tích thống kê

Để làm rõ mọi khác biệt giữa các nhóm điều trị, ANOVA một chiều đã được áp dụng bằng SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Sự khác biệt được đánh giá bằng phép thử Duncan với giới hạn ý nghĩa là 0,05. Dữ liệu được biểu thị dưới dạng độ lệch chuẩn (SD) (n=3).

Kết quả và thảo luận

Giảm cân

Trọng lượng của lát C. Deserticola quyết định trực tiếp giá trị thương mại của nó trên thị trường dược liệu. Như được trình bày trong Bảng 1, sự giảm trọng lượng của C. Deserticola được phân tích sau khi xử lý ở nhiệt độ cao và sấy khô trong lò. Mức độ giảm cân thấp hơn được nhận thấy khi các lát được sấy khô trực tiếp trong lò thay vì hấp hoặc chần. Các mẫu chần có mức độ giảm cân cao nhất. Các mẫu hấp có mức giảm khối lượng cao hơn và thời gian hấp lâu hơn. Bảy phút hấp, thời gian lâu nhất để các lát cắt tươi giữ được hình dạng, cho thấy rõ rệt (p<0.05) higher levels of weight loss after oven-drying than 5 min of steaming. Since phenylethanoid glycosides had been detected in the hot water (data not shown), it suggested that blanching/steaming promoted more water-soluble compounds to be dissolved in the hot water. Concerning weight loss after high-heat exposure, samples steamed for 1 minute exhibited extremely low weight loss. Therefore, 1 min of steaming was too short to make the Cistanche tissue brittle, so it was less able to release bioactive compounds (such as phenylethanoid glycosides) during the subsequent extraction procedure, compared with samples that had been steamed longer.

Glycoside phenylethaneoid

Nồng độ Echinacoside, cistanoside A, Acteoside, isoacteoside và 2′-acetylacteoside trong các lát C. Deserticola được xử lý bằng các phương pháp khác nhau được thể hiện trong Hình 1. Các mẫu được hấp trong 7 phút chứa 2,16 g/kg FW echinacoside và {{6} },29 g/kg FW của cistanoside A, tăng lần lượt là −140 và −6 lần so với các lát tươi. Hàm lượng phenylethanoid glycoside tăng mạnh khi mẫu tươi được xử lý ở nhiệt độ cao và sấy khô, đặc biệt làActeoside, isoacteoside và 2′-acetylacteoside,trong khi chúng không được phát hiện trong các mẫu tươi. Một lý do có thể cho điều này có thể là sự phân hủy glycosid phenylethanoid bởi peroxidase và -glucosidase. Các enzyme này sẽ bị bất hoạt trong các mẫu được sấy khô ở nhiệt độ cao và hàm lượng nước giảm, dẫn đến hàm lượng phenylethanoid glycoside cao được giữ lại trong dịch chiết. Hơn nữa, phenylethanoid glycoside là các hợp chất phenolic, sẽ được tổng hợp trong thực vật tươi để ứng phó với áp lực của nhiệt độ cao và mất độ ẩm.

CISTANCHE TUBULOSA TỰ NHIÊN CẢI THIỆN CHỨC NĂNG THẬN PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Cả việc hấp và chần C. Deserticola tươi cắt đều được báo cáo là làm tăng hàm lượng echinacoside và Acteoside.19,20) Tuy nhiên, trong nghiên cứu hiện tại, chần đã mang lại hiệu quả đáng kể (p<0.05) lower concentration of acteoside and cistanoside A than drying directly. Regarding the total concentration of the five phenylethanoid glycosides, the blanched samples were still lower than the directly oven-dried ones (1.73, 2.35 g/kg FW, respectively). Slices steamed for 5 and 7 min contained significantly (p<0.05) higher amounts of acteoside, isoacteoside, and 2′-acetylacteoside than directly oven-dried samples. In general, the highest levels of phenylethanoid glycosides were found in the steamed samples, suggesting that the above-mentioned pharmacological activities produced by glycoside phenylethanoidtrong các lát cắt của C. Deserticola có thể được tăng cường bằng cách xử lý hấp.

Hơn nữa, chúng tôi nhận thấy rằng thời gian hấp rất quan trọng trong việc xác định hàm lượng phenylethanoid glycoside. Echinacoside, cistanoside A, Acteoside và isoacteoside cho thấy xu hướng tăng tương tự trong quá trình hấp, tăng mạnh (ở mức 1, 3 phút) và đạt mức tối đa sau 7 phút. Không có thay đổi đáng kể nào được quan sát thấy ở bốn glycosid phenylethanoid nêu trên trong quá trình hấp từ 3 đến 7 phút. Ngược lại, 2′-acetylacteoside tăng đáng kể (p<0.05) with processing time. Notably, the levels of phenylethanoid glycosides in slices steamed for 1 min were significantly (p<0.05) lower than in directly oven-dried slices, except isoacteoside. Therefore, 1 min steaming of 3-mm fresh-cut C. deserticola was not long enough to inactivate the above-mentioned enzymes. Higher total levels of the five phenylethanoid glycosides were observed when the slices were steamed for 5 and 7 min (3.20, 3.52 g/kg FW, respectively) rather than directly oven drying. Steaming from 5 to 7 min more effectively promoted the extraction of phenylethanoid glycosides from C. deserticola, leading to a higher level of phenylethanoid glycosides in the extracts.

Hình 1. Nồng độ (g/kg FW) của Echinacoside (A), Cistanoside A (B), Acteoside (C), Isoacteoside (D) và 2′-Acetylacteoside (E) trong các lát Cistanche Deserticola theo các phương pháp chế biến khác nhau Các chữ cái khác nhau (a–e) biểu thị sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các nghiệm thức (Thử nghiệm Duncan, p<0.05, n=3).

Hoạt động chống oxy hóa

Đặc tính chống oxy hóa của các lát cắt, được thử nghiệm bằng ORAC, DPPH và FRAP, được trình bày trong Hình 2. Đúng như dự đoán, các giá trị ORAC cho thấy sự khác biệt lớn giữa các mẫu, từ 13,34 µmol TE/g FW trong các mẫu tươi, đến 108,62 µmol TE/g FW sau 7 phút hấp. Trong quá trình hấp, giá trị ORAC tăng 4-gấp từ 1 đến 7 phút hấp. Xu hướng tương tự cũng được quan sát thấy trong cả hai xét nghiệm DPPH và FRAP, cho thấy sự gia tăng nhanh chóng trong quá trình xử lý bằng hơi nước. Mặc dù các mẫu được xử lý bằng hơi nước ban đầu có giá trị chống oxy hóa thấp hơn (ở thời điểm 1 phút), nhưng chúng cho thấy khả năng duy trì khả năng chống oxy hóa tốt hơn nhiều trong suốt quá trình. Trong trường hợp chần, không có sự khác biệt đáng kể về đặc tính chống oxy hóa được quan sát so với sấy khô trực tiếp.

Hình 2. Mức (µmol TE/g FW) của Khả năng hấp thụ gốc oxy (ORAC) (A), 2,2-Diphenyl-1-Hoạt động nhặt gốc tự do picrylhydrazyl (DPPH) (B), và Đặc tính chống oxy hóa khử sắt (FRAP) (C) của các lát Cistanche Deserticola Theo các phương pháp chế biến khác nhau Các chữ cái khác nhau (a–f) biểu thị sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các phương pháp điều trị (Thử nghiệm Duncan, p<0.05, n=3).

Hoạt tính chống oxy hóa ORAC ở thân hoặc lát sống của C. Deserticola chưa được báo cáo trước đây. Tuy nhiên, chiết xuất ethanol từ thân cây C. Deserticola thô đã được đo lường trong các thử nghiệm DPPH và FRAP,28) cho thấy hoạt tính chống oxy hóa cao, thấp hơn một chút so với 2(3)-t-butyl-4-hydroxyanisole (BHA) và cao hơn BHT. Hơn nữa, phenylethanoid glycoside phân lập từ C. Deserticola thể hiện hoạt tính thu hồi DPPH mạnh, thấp hơn một chút so với axit ascorbic29) và cao hơn -tocopherol.2) C. Deserticola có thể là nguồn tiềm năng của chất chống oxy hóa tự nhiên, vì đặc tính chống oxy hóa của các hợp chất tinh khiết được phân lập từ C. Deserticola cao hơn so với một số chất chống oxy hóa tổng hợp. Như thể hiện trong Bảng 2, BHT thể hiện đáng kể (p<0.05) higher antioxidant properties than C. deserticola slices steamed for 7 min. Therefore, there is still a big gap between C. deserticola slices and synthetic antioxidants of equal quality.

Xét nghiệm DPPH sử dụng cả cơ chế chuyển nguyên tử hydro (HAT) và chuyển điện tử đơn (SET), trong khi xét nghiệm ORAC và FRAP tuân theo các nguyên tắc của phản ứng HAT và SET tương ứng.30) Trong nghiên cứu hiện tại, xu hướng chung về khả năng chống oxy hóa được đánh giá bởi ba xét nghiệm là rất giống nhau. Do đó, chúng tôi xác nhận rằng các lát C. Deserticola khô (hấp, sấy khô trực tiếp trong lò và chần) có giá trị đáng kể (p<0.05) higher levels of antioxidant activity than fresh ones. Furthermore, steaming for 5 and 7 min significantly (p<0.05) enhanced levels of antioxidant activity compared with direct oven drying and blanching. Overall, our results showed that steaming fresh-cut C. deserticola slices was effective in preserving phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity.

Đường hòa tan, Polysacarit và chiết xuất hòa tan Ethanol loãng

As shown in Fig. 3, levels of soluble sugars and polysaccharides exhibited the following descending order: fresh>directly oven-dried>steamed>trắng bệch. Các lát chần có hàm lượng đường hòa tan, polysaccharides và chiết xuất hòa tan trong ethanol rất thấp, tương ứng.thấy tốt với việc giảm cân cao của họ. Các mẫu tươi có giá trị đáng kể (p<0.05) higher content of soluble sugars (62.89 g/kg FW) and polysaccharides (17.36 g/kg FW) than the other samples, suggesting that heat treatment (oven drying, steaming, blanching) on fresh-cut samples would reduce the extraction of soluble sugars and polysaccharides. Heat treatment inhibited the hydrolysis of phenylethanoid glycosides to release the glucose, rhamnose, and so on. Moreover, heat treatment, used as an abiotic stress factors on fresh slices, gave rise to the synthesis of several phenylpropanoid compounds including phenylethanoid glycosides.27) Particularly, sugars contained in the slices were dissolved in the hot water to different extents by steaming or blanching. Thus, it is not surprising to see that the content of soluble sugars decreased by 23.88% in steaming and by 60.82% in blanching, while the content of polysaccharides decreased by 41.33% in steaming and by 53.83% in blanching, compared with fresh slices. It has been reported that the steaming process can increase reducing sugars and acidic polysaccharides in Ginseng Radix et Rhizoma,18) and mono sugars, including galactose and glucose, in Rehmanniae Radix.17) However, the whole dried crude drugs studied in the above-mentioned literature were quite different from the fresh-cut slices used in the present study.

Hình 3. Nồng độ (g/kg FW) của Đường hòa tan (A), Polysaccharides (B) và Chiết xuất hòa tan Ethanol loãng (C) của các lát Cistanche Deserticola Theo các phương pháp chế biến khác nhau Các chữ cái khác nhau (a-e) biểu thị thống kê sự khác biệt đáng kể giữa các phương pháp điều trị (thử nghiệm Duncan, p<0.05, n=3).

Các lát được sấy khô trực tiếp trong lò có hàm lượng chiết xuất hòa tan trong ethanol loãng cao nhất (89,26 g/kg FW), trong khi các lát chần có hàm lượng thấp nhất (47,60 g/kg FW). Mặc dù tất cả các lát C. Deserticola đã qua chế biến đều đáp ứng tiêu chuẩn của Dược điển Trung Quốc (ấn bản 2015) để đủ tiêu chuẩn là Cistanches Herba, nhưng các lát chần sẽ mang lại ít lợi ích sức khỏe hơn so với các mẫu sấy khô trực tiếp trong lò do mất đi chất hòa tan trong etanol loãng nghiêm trọng. chiết xuất. Về quá trình hấp, xu hướng của đường hòa tan rất giống với xu hướng quan sát được đối với dịch chiết hòa tan trong etanol pha loãng, giảm dần mà không có thay đổi đáng kể nào từ 3 đến 7 phút. Nồng độ polysaccharides dao động với mức tăng nhẹ trong suốt thời gian hấp. Đáng chú ý, hấp 7 phút cho thấy khả năng bảo quản tốt các polysacarit nhưng làm mất nhiều đường hòa tan, trong khi hấp 5 phút cho thấy kết quả ngược lại so với sấy trực tiếp trong lò.

Phần kết luận

Lần đầu tiên chúng tôi đã báo cáo tác dụng của việc hấp đối với các hợp chất hoạt tính sinh học và hoạt động chống oxy hóa ở C. Deserticola tươi cắt, đồng thời cung cấp thông tin quan trọng để phát triển các quy trình hiệu quả xử lý thân cây C. Deserticola sau thu hoạch. Các lát tươi cho thấy hiệu quả kém nhất trong việc chiết xuất phenylethanoid glycoside và các hợp chất chống oxy hóa, cho thấy những chất này dễ bị phân hủy bởi enzyme. Ngược lại, các mẫu hấp có hàm lượng phenylethanoid glycoside và hoạt tính chống oxy hóa cao nhất. Mặc dù quá trình chần làm tăng nhẹ hàm lượng Acteoside, isoacteoside và 2′-acetylacteoside so với sấy trực tiếp trong lò, các giá trị về trọng lượng, đường hòa tan, polysaccharides và chiết xuất hòa tan trong ethanol pha loãng đều giảm đáng kể. Đối với quá trình hấp, hàm lượng phenylethanoid glycoside và polysaccharides tăng nhẹ theo thời gian. Hấp trong 5 và 7 phút đáng kể (p<0.05) enhanced total levels of the five phenylethanoid glycosides than directly oven drying. However, the longer the steaming process, the greater the decrease in weight, soluble sugars, and dilute ethanol-soluble extracts. No significant decrease in soluble sugars was observed when slices were steamed from 1 to 5 min compared with directly oven-dried samples. The steaming time had a consistent effect on the antioxidant properties, with a significant increase evaluated by the DPPH, ORAC, and FRAP assays. It was concluded that C. deserticola slices can be successfully treated with 5 to 7 min of steaming to improve the phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity while preserving the amounts of soluble sđường, polysaccharid và dịch chiết hòa tan trong etanol loãng.

Cistanche TUBULOSA CHỐNG MỆT MỆT CHỐNG OXY HÓA PHGS75% ECH 30% ACT 12%