Đánh giá đặc tính của các công thức khác nhau của kem chống lão hóa từ chiết xuất carotenoid của chủng vi khuẩn cộng sinh Virgibacillus Salarius

từ khóa:kem;hột cá;chất chống oxy hóa; kem chống nắng; vi khuẩn cộng sinh

Bấm vào đây để biết thêm về cistanche chống lão hóa

1. Giới thiệu

Lão hóa sớmlà một bệnh thoái hóa đặc trưng bởi da khô, nhăn nheo, thô rápvà đốm đen [1]. Hai yếu tố gây ra lão hóa sớm, đó là các yếu tố bên trong nhưnhư căng thẳng, sức chịu đựng, thay đổi nội tiết tố và sức khỏe cũng như các yếu tố bên ngoài bao gồmtia cực tím và các gốc tự do. Các gốc tự do là các phân tử chứa oxy màsự sắp xếp nguyên tử không ổn định và do đó, trải qua các phản ứng dây chuyền có thể xảy ra trongcơ thể và dẫn đến thiệt hại liên tục [2]. 

Các gốc tự do là những chất rất dễ phản ứng và nguy hiểm gây ra thiệt hại chocác mô của cơ thể có thể dẫn đến sự phát triển của các bệnh khác nhau ở tuổi già [3]. Tuy nhiên, các gốc tự do có thể khắc phục bằng cách sử dụng chất chống oxy hóa [4] dừng lạiphản ứng dây chuyền được kích hoạt bởi các gốc tự do bằng cách tặng điện tử cho các phân tử không ổn định.Ví dụ về các hợp chất chống oxy hóa bao gồm quả hồ trăn, vitamin C và vitamin E [5].

cistanche là những hợp chất được chứng minh là chất chống oxy hóa tiềm năng [6–10] như chúng chứamột hợp chất isopren chuỗi dài có liên kết đôi liên hợp [5,7,11]. liên hợpliên kết đôi loại bỏ oxy nhóm đơn và vô hiệu hóa các gốc tự do khác xảy ra thông quaquá trình chuyển điện tử [12,13]. Sau đó, các hợp chất đã liên hợp đôiliên kết có thể được tìm thấy trong các sinh vật trên cạn và dưới biển. Hợp chất từ ​​biểnsinh vật có đặc điểm độc đáo và một số khám phá về các hợp chất hoạt tính sinh học mớicho kháng sinh, chống ung thư, dược phẩm, mỹ phẩm, enzyme và sắc tốđã được lấy từ nhiều hệ sinh thái san hô, đặc biệt là san hô mềm.

Không nên tận dụng ồ ạt san hô mềm vì sẽ gây hại chohệ sinh thái. Sự cộng sinh của vi khuẩn liên quan đến san hô mềm có thể trở thành một tiềm năngthay thế tial tạo ra cistanche như một nguồn chất chống oxy hóa [14,15]. mỹ phẩmcông thức có thể được áp dụng dễ dàng và thoải mái được yêu cầu khi sử dụnghợp chất caroten. Do đó, công thức mỹ phẩm được ưa thích là ở dạngcủa kem. Kem là chế phẩm bán rắn được lựa chọn dễ dàng trải đều trên da,không gây bết dính, dễ làm sạch nên người tiêu dùng rất thoải mái khi sử dụng. Việc sử dụngvi khuẩn cộng sinh như một nguồn nguyên liệu mỹ phẩm là bước đột phá mới nhất màcần được phát triển.

2.1. Vật liệu và Công cụ

Cộng sinh vi khuẩnV. tiền lươngchủng 19.PP.Sc1.6 được phân lập từSinulariasp. xuất xứcó nguồn gốc từ Đảo Panjang, Jepara, Trung Java, Indonesia; điểm cụ thể nằm ở tọa độcủa "6◦340 37.3500 S", "110◦370 52.0100 E". Vật liệu cần thiết bao gồm metanol (chất phân tíchloại) mua từ Merck (Darmstadt, Đức);

2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl

(DPPH) từ Công ty Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Hoa Kỳ). Các thành phần khác được sử dụng trong công thức kemchẳng hạn như axit stearic, glycerin, Na tetraborate, triethanolamine (TEA), lanolin,dầu hướng dương, sáp ong, rượu cetyl, span 80, glycerol monostearate và Tween 80 làmua từ Merck (Darmstadt, Đức). Các thiết bị được sử dụng là một UV-visMáy quang phổ Shimadzu 1240 (Kyoto, Nhật Bản), Máy đo độ nhớt Brookfield LVDV-I Prime(Toronto, ON, Canada), máy đo pH kỹ thuật số USB Phs 3c 3d Rohs, máy ly tâm IEC Centra MP4R(Thermo Electron, Waltham, MA, USA) và máy lắc quỹ đạo Daihan SHO 2D ​​(Wonju, Hàn Quốc).

2.2. Phân lập vi khuẩn cộng sinh Sinularia sp.

CácSilunariasp. các mô được đặt vào các đĩa petri vô trùng được lấp đầy một phần bằngnước biển tiệt trùng. Bề mặt của các mô san hô mềm đã bị cắt đi, và chỉ phần bên trongcủa mẫu được sử dụng để phân lập vi sinh vật. Để phân lập vi khuẩn, một loạt các dung dịch pha loãngđược tiến hành cho tất cả các mẫu. Từ mỗi đĩa petri, 10 mL mẫu được thu thập vớimột pipet vô trùng và đặt vào bình chứa 90 mL nước biển đã khử trùng để thu được10−1 pha loãng. từ ngày 10−1 pha loãng, 1 mL được chuyển vào ống chứa 9 mL dung dịch vô trùng.nước biển để có được 10−2 pha loãng. Quá trình pha loãng này được lặp lại cho đến khi đạt 10−5 pha loãngđã thu được. Một mẫu (1 mL) của mỗi dãy pha loãng được thu thập và đặt vào một ống vô trùng.đĩa petri chứa môi trường thạch Zobell 2216E (Himedia, Mumbai, India) để xác định vi khuẩnsự cách ly. Sau đó, các đĩa petri được ủ ở 30◦C trong 2 ngày. Vi khuẩn màu vàngkhuẩn lạc mọc trên bề mặt môi trường thạch được phân tách bằng phương pháp cấy vạch đểthu được chủng vi khuẩn thuần khiết.

2.3. Văn hóa cộng sinh vi khuẩn

vi khuẩnV. salariuschủng 19.PP.Sc1.6 [16] đã được cấy bằng cách chuyển 1 mLphân lập vào 2 L Zobell Marine Broth 2216 vô trùng (Himedia, Mumbai, Ấn Độ). đó làsau đó cho vào máy lắc 100 vòng/phút ở 27◦C cho đến khi môi trường chuyển sang màu vàng (±7 ngày).Sau đó, các vi khuẩn cộng sinh đã tạo ra cistanche đã được phân lập vàly tâm trong 15 phút với tốc độ 6000 vòng/phút, sau đó các viên được tách ra và sau đó được lọcsử dụng giấy lọc Whatman No 1 (Maidstone, UK).

2.4. Chiết xuất Carotenoid

Khai thác cistanche bằng phương pháp ngâm nhanh được thực hiện trong bóng tốiphòng. Methanol (loại phân tích) được mua từ Merck (Darmstadt, Đức) đượcđược thêm vào nuôi cấy viên và sau đó ly tâm trong 10 phút với tốc độ 6000 vòng / phút. Sau đó, mộtthu được dịch lọc chứa cistanche và viên ở dạng khối vi khuẩn,được lọc bằng giấy lọc Wahtman No 1, làm bay hơi và làm khô bằng khí N [14,15].

2.5. công thức kem

Công thức sử dụng ba công thức với các loại kem khác nhau, cụ thể là vs,ow, và wo [16–18]. Công thức được sử dụng như trong Bảng1.

Bảng 1.Công thức kem chiết xuất carotenoidV. tiền lươngchủng 19.PP.Sc1.6.

2.5.1. Công thức 1: Kem vs

Chúng tôi nấu chảy axit stearic và glycerin trong một cái bát. Na tetraborat và TEA làhòa tan trong một ít nước, sau đó cho vào dung dịch axit stearic và glycerin. Sau đó, chúng tôi khuấyvà đồng nhất, và thêm một ít nước để có kết quả tốt. Bước cuối cùng làđể thêm chiết xuất caroten và khuấy cho đến khi phân bố đều.2.5.2. Công thức 2: Kem owĐầu tiên, glycerol monostearate và rượu cetyl được nấu chảy trong cốc 1. Hướng dương vàTween 80 được trộn trong cốc 2. Sau đó, chúng tôi cho hỗn hợp ở cốc 2 vào cốc 1. Điều nàyđược khuấy cho đến khi đồng nhất với một ít nước nóng. Cuối cùng, chúng tôi đã thêm carotenchiết xuất và khuấy cho đến khi đồng nhất.

2.5.3. Công thức 3: Kem wo

2.6. Đánh giá kem

Các đặc điểm của ba công thức kem đã được đánh giá; đánh giá ban đầuđược thực hiện là một thử nghiệm cảm quan. Trong các thử nghiệm cảm quan, các quan sát bao gồm những thay đổi trongmàu sắc, mùi (ôi), và cảm giác. Trong thử nghiệm cảm quan, 25 người được sử dụng làm người trả lời,gồm 15 người đã qua đào tạo và 10 người chưa qua đào tạo. Thử nghiệm sau đây là tính đồng nhất,được thực hiện bằng cách bôi kem lên đĩa thủy tinh và quan sát độ đồng đều củamàu sắc, cho dù nó có đồng đều hay không. Sau đó, trong bài kiểm tra độ pH, kem được lắng đọngvào cốc thủy tinh, và sau đó phép đo pH được thực hiện bằng máy đo pH cótrước đây đã được hiệu chuẩn bằng tiêu chuẩn Dappar (pH 4 và pH 7). sức mạnh phân tánthử nghiệm được thực hiện trên kính trong suốt đặt trên giấy kẻ ô vuông và 0.5 g kem được

đặt trên tấm kính và sau đó được phủ bằng một tấm kính trong suốt khác và để yên cho±5 giây tớiđược đường kính của khu vực được hình thành. Sau đó, các trọng số khác nhau của 50, 100, 150, 200, 250, 300,350, 400 và 450 g được đặt trên tấm kính trong suốt và đường kính của khu vực được tạo thànhđã được quan sát. Các thông số kỹ thuật nêu rõ rằng kem sẽ lan rộng dễ dàng và đồng đều.

Trong khi đó, phép thử độ nhớt của kem được xác định bằng máy Brookfield LVDV-I PrimeMáy đo độ nhớt Một thử nghiệm độ bám dính được thực hiện với một vật thủy tinh được đánh dấu là4 × 2,5cm, sau đó nhiều nhất là 0.25 g kem được đặt tại điểm giữa của khu vực và được phủ bằngcác đồ vật thủy tinh khác. Do đó, người ta đặt một tải trọng 1 kg trong 5 phút thì hai vật bằng thủy tinhđã được gắn vào được gắn trên thiết bị thử nghiệm được cho tải 80g. Sau đó, thời gian cần thiết để tách hai vật thủy tinh được ghi lại. quan sát chotất cả các bài kiểm tra được thực hiện hàng tuần trong 5 tuần.

2.7. Đo hoạt tính chống oxy hóa

Các loại kem hòa tan trong metanol được chuẩn bị thành một loạt các nồng độ. Do đó, mộttổng cộng 3 mL mẫu được pha loãng với 1 mL dung dịch 0.1 mM DPPH và cho phépđể yên trong 30 phút. Khi lắng, dung dịch được đồng nhất hóa và độ hấp thụ của nó làđược đo bằng máy quang phổ ở bước sóng 517 nm. Độ hấp thụ củadung dịch kiểm soát, nghĩa là DPPH không có dung dịch thử nghiệm, cũng được đọc. Hơn nữa, cáclượng hoạt động chống oxy hóa được đo bằng phương trình sau [19]: 

2.8. Đo chỉ số chống nắng (SPF)

Việc đo lường giá trị Hệ số Chống nắng (SPF) đã được thực hiệntrong ống nghiệm. chỉ số chống nắngthử nghiệm đã được thực hiện để xác định hoạt tính chống nắng của kem bằng cách sử dụng tia UV-Vismáy quang phổ. Mỗi loại kem, nặng 0.1 g, được hòa tan trong 100 mL metanol trong mộtbình định mức và lọc bằng Whatman No. 1. Tổng cộng 3 mL dung dịch được cho vàovào một cuvet để đo độ hấp thụ của nó bằng máy quang phổ UV-Vis. Sau đó,việc xác định giá trị SPF bằng máy đo quang phổ UV-Vis đã được biết từđặc điểm hấp thụ kem ở bước sóng 290 đến 320 nm với khoảng cách 5 nm.Tính toán giá trị SPF sử dụng phương trình sau [20,21]: 

abs=Độ hấp thụ của mẫu.

Hỏi thêm:

Email:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp cùng với 86 15292862950