Ảnh hưởng của Cistanche đến sự thay đổi của ATPase trong ty thể gan của chuột nhiễm trùng huyết

Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Wang Zhiqiang Yin Gang

Tóm tắt: Mục tiêu:Để nghiên cứu sự thay đổi củaHoạt động ATPase của ty thể gan trong nhiễm trùng huyếtvà tác dụng củaCistanchetrên đó.Phương pháp:40 con chuột SD được chia ngẫu nhiên thành nhóm hoạt động giả mạo, 12- nhóm kiểm soát giờ, 12- nhóm kiểm soát giờ, 16- nhóm kiểm soát giờ và 16- nhóm quản lý giờ. Cácnhiễm trùng huyếtmô hình được nhân rộng bằng cách thắt và thủng manh tràng (C LP) và so sánh. Tỷ lệ sống sót của nhóm, áp lực động mạch trung bình (MAP), ganty thể ATPasethay đổi hoạt động.Kết quả:Sau khi những con chuột mô phỏng lại mô hình nhiễm trùng huyết,ATPasehoạt động của ganty thểđã giảm và tỷ lệ sống sót trong 24- giờ giảm đáng kể. CácATPasehoạt động của ty thể gan sau khi dùngCistancheđược cải thiện đáng kể so với nhóm chứng (P<0.05), which="" was="" significantly="" positively="" correlated="" with="" the="" reduction="" of="" rat="" mortality.="">Sự kết luận:Suy giảm ty thểHoạt động của ATPase trong nhiễm trùng huyết, quá tải canxi tế bào, phù nề và hoại tử là những nguyên nhân trực tiếp dẫn đến tử vong ởchuột tự hoại. Cistanche tăng cường hoạt động của ATPaselà một cơ chế quan trọng để điều trịnhiễm trùng huyết.

Từ khóa: Cistanche, cistanche sepsis ty thể enzym ATP

Nhiễm trùng huyếtlà một bệnh nguy kịch về mặt lâm sàng. Mặc dù thuốc kháng sinh đã được cập nhật trong 30 năm qua, tỷ lệ tử vong do nhiễm trùng huyết không giảm đáng kể và vẫn cao tới 50 phần trăm [1]. Điều trị bằng thuốc tây kháng khuẩn "trừ tà" đơn thuần không cải thiện được tiên lượng củanhiễm trùng huyết.Trong cơ chế bệnh sinh của bệnh TCM, nhiễm trùng huyết thuộc thể “chính tà thiếu tà”, việc điều trị phải dựa trên nguyên tắc “bồi bổ cơ thể” và “trừ tà”. Y học cổ truyền Trung Quốc đã cho thấy tiềm năng lớn trong điều trị nhiễm trùng huyết.Nhiễm trùng huyếtphức tạp bởi suy đa tạng là nguyên nhân sâu xa của tỷ lệ tử vong cao, và tổn thương cấu trúc tế bào là cơ sở bệnh lý vi thể của suy đa tạng [2]. Cistanche là một loại thuốc bổ truyền thống của Trung Quốc, các nghiên cứu dược lý hiện đại đã chỉ ra rằngCistanchecó tác dụng chống lại quá trình peroxy hóa este ở màng và bảo vệ chức năng của tế bào [3]. Chức năng củanăng lượng ti thểtrao đổi chất là một trong những chức năng cơ bản của tế bào, và hoạt động củaATPaselà một chỉ số quan trọng để đo lường chức năng củanăng lượng ti thểsự trao đổi chất. Trong thử nghiệm này, chúng tôi đã quan sát những thay đổi củaATPasehoạt động của tế bào gan trongchuột tự hoạivà mối quan hệ giữa các tác động củaCistanchetrên đó và tỷ lệ tử vong của chuột và nhằm mục đích cung cấp cơ sở lý thuyết và thăm dò hiệu quả cho việc điều trị "tăng cường" lâm sàngnhiễm trùng huyết.

Cistanche

1. Vật liệu và phương pháp

1.1 Thuốc thử

Cistancheđược mua từ Tân Cương (được xác định bởi Giáo sư Tan Defu của Trường Y Đại học Tam Hiệp). 200g Cistanche khô được lấy và sắc hai lần trong nước cất. Dịch lọc được làm bay hơi và cô đặc đến nồng độ 1g / ml. Natri Pentobarbital (001104), Tập đoàn Dược phẩm Quốc gia Trung Quốc Hóa chất Thượng HảiThuốc thửCông ty;Thuốc thử ATPase(20030108), Viện nghiên cứu kỹ thuật sinh học Nam Kinh Jiancheng.

1.2 Mô hình và phân nhóm động vật thí nghiệm

40 con chuột đực SD (mua từ Trung tâm Động vật Thực nghiệm của Trường Cao đẳng Y tế Đồng Tế, Đại học Khoa học và Công nghệ Hoa Trung), được chia ngẫu nhiên thành 5 nhóm: nhóm hoạt động giả tạo (n =8), kiểm soát 12- giờ nhóm (n =8), nhóm quản lý 12- giờ (n =8), nhóm kiểm soát 16- giờ (n =8), 16- giờ nhóm quản trị (n =8). Nhóm phẫu thuật giả và nhóm đối chứng được cho uống nước muối sinh lý thông thường bằng cách gavage, và nhóm quản lý được gavage với 1 g / ml Cistanche, hai lần một ngày, trong tối đa 15 ngày. Cácmô hình nhiễm trùng huyếtđược tái tạo bằng cách thắt và thủng manh tràng [4]. Trước khi mổ, các con vật được uống nước tự do và nhịn ăn trong 12 giờ.

1.3 Xác định áp lực động mạch trung bình

Kim tĩnh mạch được đưa vào bằng kim da đầu, heparin được sử dụng để chống đông máu, động mạch cảnh chung bên trái được nối với cung động mạch chủ, và ống thông tự tạo được kết nối với thiết bị đa kênh sinh học, và trung bìnháp lực động mạch(MAP) đã được ghi lại. Thử nghiệm sau khi MAP ổn định.

1.4 Xác định hoạt tính ATPase của ty thể

Lấy 6g gan chuột và nhanh chóng cho vào 0 môi trường tách độ [25 0 mmol sacaroza, 2 mmol ethoxy-ethyl piperazine 2- axit ethyl sulfonic, 0,1 mmol axit etylendiamintetraacetic, pH7,4], mở nó ra và rửa sạch tạp chất, Tách huyền phù môi trường (1: 10), đồng nhất bằng máy đồng hóa điện Teflon (1200r / phút), ly tâm ở 2000r / min trong 10 phút, giữ lại phần nổi phía trên, ly tâm ở 10000r / min trong 15 phút, loại bỏ phần nổi phía trên, Lấy kết tủa và huyền phù trong 2ml môi trường tách để thu đượcđình chỉ ty thể. Toàn bộ quá trình được thực hiện ở 0 đến 4 độ. Phương pháp xác định phốt pho [5] được sử dụng để đoHoạt động ATPase(Bộ dụng cụ được mua từ Viện Kỹ thuật Sinh học Nam Kinh Jiancheng).

1.5 Xử lý thống kê

Dữ liệu thực nghiệm đều được thể hiện dưới dạng trung bình ± độ lệch chuẩn (X ± S), và phần mềm SPSS thực hiện phân tích một chiều phương sai và phân tích tương quan.

Chiết xuất cistanche

2. kết quả

2.1 Ảnh hưởng của Cistanche đối với áp lực động mạch trung bình và tỷ lệ tử vong ở chuột 24- giờ

Huyết áp của nhóm chứng giảm đáng kể vào 12 giờ sau khi thắt và thủng manh tràng, và rõ ràng hơn vào 16 giờ. So với nhóm hoạt động giả mạo, có một sự khác biệt đáng kể. Huyết áp củaĐiều trị Cistanchenhóm đã được cải thiện. Tỷ lệ tử vong của nhóm chứng cao hơn đáng kể so với nhóm điều hành giả và tỷ lệ tử vong của nhóm điều trị thấp hơn đáng kể so với nhóm đối chứng tương ứng.

2.2 Ảnh hưởng của Cistanche đối với hoạt động ATPase của ty thể

Các hoạt động củanatri-kali ATPase, canxi ATPase, magie ATPase và canxi-magie ATPasetrong nhóm điều hành cao hơn đáng kể so với nhóm đối chứng tương ứng, đạt đến mức của nhóm hoạt động giả mạo, có tương quan thuận đáng kể với việc giảmtỷ lệ chết của chuột (r=0.834) ).

Cistanche

3. Thảo luận

Na plus -K plus -ATPase, còn được gọi là bơm natri-kali, đóng vai trò sinh lý quan trọng trong việc duy trì các hoạt động sinh lý của tế bào, nhiệt độ cơ thể và quá trình trao đổi chất diễn ra bình thường, điều hòa sự cân bằng của các ion trong và ngoài tế bào.Trong nhiễm trùng huyết, có rối loạn chức năng bơm natri nghiêm trọng ở màng trong ty thể, gây raty thểphù nề. CácNa cộng -K cộng -ATPEnzyme bị hư hỏng, sự mất cân bằng củaty thểnồng độ ion tăng, hoạt động của enzym chuyển hóa năng lượng bị ức chế, nguồn cung cấp năng lượng cho tế bào bị cạn kiệt và gây ra phù nề do nhiễm độc tế bào. Đồng thời, tính thấm của màng tăng lên, cuối cùng dẫn đến chết tế bào. Trong thí nghiệm, chúng tôi phát hiện ra rằng ty thểNa plus -K plus -ATPasehoạt động của các tế bào gan tự hoại giảm đáng kể (P<0.01), indicating="" that="" the="" liver="" tissue="" is="" seriously="" damaged.="" after="" administration="" of="" cistanche,="" the="">Na plus -K plus -ATPasehoạt động củaty thể ganđã tăng lên đáng kể (P<0.05), and="" the="" mortality="" of="">chuột tự hoạiđã giảm đáng kể. Các kết quả thử nghiệm cho thấy rằng sự giảmNa plus -K plus -ATPase hoạt độngcó tương quan thuận đáng kể với sự phát triển củanhiễm trùng huyết ở chuột. Sự ức chế củaNa plus -K plus -ATPase hoạt động, phù nề tế bào, và chết dẫn đến suy đa cơ quan có thể là sự phát triển nhanh chóng của nhiễm trùng huyết. Một trong những cơ chế quan trọng. Trong những năm gần đây, đã có nhiều báo cáo vềNa plus -K plus -ATPasevà nhiều bệnh, đã thu hút sự quan tâm của người lao động lâm sàng và cơ bản. Việc nghiên cứu quy luật thay đổi trong hoạt động củaNa plus -K plus -ATPasevà quy định của nó [6]. Người ta biết rất ít về cơ chế cụ thể củaNa plus -K plus -ATPasetrong sự phát triển và kết quả củanhiễm trùng huyết,và nghiên cứu thêm là cần thiết.

Sự ổn định của canxi và magiê nội bào là cơ sở vật chất cần thiết để duy trì phản ứng giải phóng nội bào và truyền thông tin [7]. Trong thử nghiệm, việc giảmCa2 cộng với -ATPase hoạt độngtrong nhóm đối chứng ảnh hưởng trực tiếp đến hoạt động của bơm canxi, và việc giảm hoạt động của bơm canxi làm suy yếu vai trò củaty thểbơm canxi để đào thải Ca2 cộng ra khỏi tế bào, và Ca2 cộng với quá tải trongty thể. Quá tải canxi trong ty thể là một nguyên nhân quan trọng củaty thểrối loạn phosphoryl oxy hóa, tổn thương cấu trúc và hoại tử tế bào [8, 9]. Ca2 cộng với quá tải làm giảm điện thế màng ty thể và hàm lượng ATP trong mô [10], và việc sử dụng năng lượng của tế bào mô bị suy giảm. Ca2 cộng với có thể kích hoạt men phospholipase trên ty thể, gây ra thiệt hại chomàng ti thể, phá hủy chức năng tổng hợp ATP bình thường của ty thể, và cản trở quá trình sản xuất năng lượng của ty thể [11]. Rối loạn củachuyển hóa canxi ty thểcó thể ảnh hưởng trực tiếpchức năng hô hấp của ti thể, gây raoxy ty thểsự hấp thu và rối loạn oxy hóa proton trong chuỗi vận chuyển điện tử [12]. Đồng thời, sự gia tăng của Ca2 cộng có thể làm trầm trọng thêm sự phá hủy quá trình peroxy hóa este đối với ti thể [13]. Tất cả những điều này trực tiếp hoặc gián tiếp dẫn đến sự thất bại trong việc cung cấp năng lượng cho tế bào và làm chết các mô và cơ quan và đẩy nhanh sự phát triển của các thay đổi bệnh lý trong nhiễm trùng huyết. Trong thử nghiệm, chúng tôi cũng nhận thấy rằng các hoạt động củaM g2 plus -ATPase và Ca2 plus -M g2 plus -ATPase ở chuột tự hoạicũng đã giảm đáng kể.Mg2 cộng -ATPase và Ca2 cộng -M g2 cộng -ATPaselà những chất quan trọng để duy trì sự cân bằng canxi và magiê trong tế bào. Widner đã báo cáo rằng sự giảm các ion magiê nội bào là yếu tố gây ra tổn thương tế bào không thể phục hồi, và tỷ lệ Mg 2 cộng / Ca2 cộng là một chỉ số quan trọng phản ánh tổn thương không thể phục hồi của tế bào [14]. CácMg2 cộng -ATPase và Ca2 cộng -M g2 cộng -ATPasehoạt động củaCistanchenhóm -administered đã được tăng cường, A TPase là một sulfhydrylase, vàCistanchecó tác dụng peroxy hóa peroxy hóa este chống màng, có thể là do sự tăng cường củaATPasehoạt động của Cistanche Cơ sở Hóa học và Cơ sở Dược lý [15].

Trong nhiễm trùng huyết, ty thểrối loạn chuyển hóa năng lượng, giảmHoạt động của enzym ATP, phù nề ty thể, quá tải canxi trong tế bào, và rối loạn cân bằng canxi - magie là những nguyên nhân trực tiếp gây chết tế bào nhiễm trùng huyết và suy đa cơ quan.Cistancheđối kháng với quá trình peroxy hóa este màng, tăng cường hoạt động của ATPase, duy trì cân bằng nội môi canxi và magiê trong tế bào, và bảo vệ hoạt động bình thường của các chức năng tế bào.Cistanchelà một cơ chế quan trọng để giảm tỷ lệ tử vong củachuột tự hoại. Nó cho thấy triển vọng tốt củaCistanche trong điều trị nhiễm trùng huyết