Các mô hình xơ hóa thận khác nhau là dấu hiệu của tổn thương đối với các khoang thận riêng biệt

edmund.chen@wecistanche.com

Trừu tượng:Bệnh xơ hóa thận là một biểu hiện phổ biến và là dấu hiệu của một loạt các bệnh mãn tínhbệnh thận(CKD) xuất hiện ở các dạng hình thái khác nhau, cho thấy nguyên nhân gây bệnh riêng biệt. Sẹo rộng nhìn thấy được trên bề mặt là di chứng của tổn thương khu trú nghiêm trọng và sự phá hủy hoàn toàn nhu mô, phản ánh phản ứng lành vết thương do hậu quả của nhồi máu. bên trongquả thận,tổn thương cầu thận mãn tính dẫn đến teo ống tương ứng, thoái hóa nephron cụ thể này, và cuối cùng là xơ hóa mô kẽ / teo ống thận (IF / TA). So với sẹo thay thế khu trú do cầu thận gây ra, xơ hóa lan tỏa không phụ thuộc vào teo ống thận dường như là một quá trình gây bệnh khác.Quả thậnxơ hóa dường như phát triển theo cách đặc hiệu, nhưng liệu xơ hóa khu trú và lan tỏa có các đặc điểm riêng biệt liên quan đến các tổn thương mô cầu thận hoặc ống dẫn trứng khác hay không vẫn còn khó nắm bắt. Trong nghiên cứu này, chúng tôi nhằm mục đích phân tích các mô xơ thận liên quan đến tổn thương thận, góp phần trực tiếp vào quá trình hình thành xơ thận, để làm sáng tỏ các mô hình xơ và biểu hiện khi tổn thương các ngăn thận riêng biệt. Các mẫu củaquả thậnxơ hóa được phân tích trong các mô hình thực nghiệm của CKD và các bệnh lý thận khác nhau tương quan với các phát hiện mô bệnh học và siêu cấu trúc. Sau khi gây viêm cầu thận hình lưỡi liềm riêng biệt (GN) trong bệnh viêm thận-huyết thanh độc thận (NTN), tổn thương cầu thận mãn tính dẫn đến xơ hóa khu trú chủ yếu gần với các ống teo. Ngược lại, sử dụng tắc nghẽn niệu quản một bên (UUO) như một mô hình tổn thương nguyên phát đối với khoang ống dẫn trứng cho thấy xơ hóa lan tỏa là mô hình tổn thương mạn tính chủ yếu. Cuối cùng, bệnh thận do axit folic (FAN) như một mô hình tổn thương ống thận nguyên phát với teo ống liên tiếp không phụ thuộc vào tổn thương cầu thận mãn tính gây ra như nhau IF / TA khu trú chiếm ưu thế. Bằng cách phân tích một số bệnh lý thận, dữ liệu của chúng tôi cũng cho thấy xơ sợi khu trú và lan tỏa dường như góp phần làm tổn thương mãn tính trong phần lớn bệnh thận ở người, chủ yếu hiện diện trong kháng thể kháng tế bào chất (ANCA)-GN liên kết, viêm thận lupus và bệnh thận IgA ( IgAN). IF / TA khu trú tương quan với tổn thương cầu thận và tổn thương không hồi phục đối với nephron, trong khi xơ hóa lan tỏa trong ANCA GN có liên quan rõ ràng với viêm mô kẽ độc lập với tổn thương cầu thận và mất nephron. Phân tích siêu cấu trúc IF / TA khu trú so với xơ sợi lan tỏa cho thấy các thành phần ma trận riêng biệt, được hỗ trợ thêm bởi các chữ ký collagen khác nhau trong bộ dữ liệu bảng điểm. Đối với kết quả thận lâu dài, chỉ mức độ IF / TA khu trú tương quan với sự phát triển của giai đoạn cuốibệnh thận(ESKD) trong ANCA GN. Ngược lại, khuếch tánquả thậnxơ hóa không liên quan đến kết quả thận lâu dài. Tóm lại, ở đây chúng tôi cung cấp bằng chứng cho thấy mô hình tiêu điểm củaquả thậnxơ hóa dường như liên quan đến mất nephron và sẹo thay thế. Ngược lại, một mô hình lan tỏa củaquả thậnxơ hóa dường như là kết quả của tình trạng viêm và tổn thương mô kẽ nguyên phát.

Từ khóa:mô hình xơ hóa; xơ hóa thận; chấn thương thận; teo ống; viêm nhiễm; viêm mạch hệ thống

CISTANCHE SẼ CẢI THIỆN NHIỄM SẮC KIDNEY / RENAL

Giới thiệu

Bệnh xơ hóa thận là một biểu hiện phổ biến và là dấu hiệu của một loạt các bệnh mãn tínhbệnh thận(CKD) dẫn đến giai đoạn cuốibệnh thận(ESKD), bất kể nguyên nhân cơ bản là gì [1]. Nói chung, xơ hóa thận (hay xơ hóa mô kẽ thận) thể hiện mô hình học của sự lắng đọng chất nền ngoại bào (ECM) trong tất cả các giai đoạn của bệnh thận mạn.Quả thậnxơ hóa có thể xuất hiện ở các dạng hình thái khác nhau, gợi ý các nguyên nhân gây bệnh khác [2]. Sẹo rộng có thể nhìn thấy được trên mặt vĩ mô là di chứng của tổn thương khu trú nghiêm trọng và sự phá hủy hoàn toàn nhu mô, phản ánh phản ứng lành vết thương do hậu quả của nhồi máu [3]. bên trongquả thận, tổn thương cầu thận mãn tính dẫn đến teo ống tương ứng, thoái hóa nephron cụ thể này, và cuối cùng là xơ hóa mô kẽ / teo ống thận (IF / TA) [4,5]. So với sẹo thay thế khu trú do cầu thận gây ra, xơ hóa độc lập với teo ống (sau đây gọi là xơ hóa lan tỏa) dường như là một quá trình gây bệnh khác [6,7]. Teo ống được định nghĩa là sự mất khả năng vận chuyển và trao đổi chất chuyên biệt và thường được đặc trưng bởi các ống nhỏ, các tế bào biểu mô với tế bào chất nhạt màu, hoặc các ống rất mỏng bị giãn ra. Trái ngược với hiểu biết của chúng ta về xơ hóa là mô sẹo đại diện cho quá trình sửa chữa thận không hoàn chỉnh, xơ hóa lan tỏa được coi là yếu tố góp phần tích cực vào sự tiến triển của bệnh thận mạn tính, về cơ bản dựa trên quan sát rằng sự suy giảm chức năng thận tương quan chặt chẽ hơn với xơ hóa mô kẽ ống dẫn trứng hơn là với tổn thương cầu thận [8–11]. Dựa trên các khái niệm trên,quả thậnxơ hóa được thảo luận hoặc là một cơ chế của sự không hoàn chỉnhquả thậnsửa chữa hoặc đóng góp tích cực vào sự tiến triển của CKD [12,13].Quả thậnxơ hóa dường như phát triển theo một cách cụ thể, nhưng liệu IF / TA khu trú hay xơ hóa lan tỏa có các đặc điểm riêng biệt liên quan đến các tổn thương mô cầu thận hoặc ống dẫn trứng khác hay không vẫn còn khó nắm bắt. Trong nghiên cứu này, chúng tôi nhằm mục đích phân tích các mô xơ thận liên quan đến các tổn thương thận nói trên (ví dụ, tổn thương cầu thận, ống thận và mô kẽ), góp phần trực tiếp vào quá trình hình thành xơ thận.

Nguyên liệu và phương pháp

2.1. Loài vậtTất cả các nghiên cứu trên động vật thử nghiệm đều được thực hiện với sự chấp thuận của Ủy ban chăm sóc và sử dụng động vật có tổ chức của Trung tâm Y tế Beth Israel Deaconess (BIDMC) và Trung tâm Y tế Đại học Göttingen tuân thủ các hướng dẫn ARRIVE [14]. Các giao thức thử nghiệm được trình bày chi tiết bên dưới. Kích thước mẫu gồm n=5 con chuột trong mỗi nhóm không được cấp nguồn chính thức hoặc không được chỉ định trước. 2.2. Huyết thanh độc thận-Viêm thận (NTN) Mỗi ​​con chuột ban đầu được tiêm chủng trước với 200 µg IgG cừu (Capralogics, Gilbertville, IA, USA) trong 200 µL tá dược Freund's hoàn chỉnh (Sigma, St. Louis, MO, Hoa Kỳ) tiêm tĩnh mạch 40 µL huyết thanh độc với thận ở các ngày thứ 5, 6 và 7 sau khi tiêm chủng trước. Các thí nghiệm kết thúc 63 ngày sau khi chủng ngừa [15,16]. 2.3. Tắc nghẽn niệu quản một bên (UUO) Những con chuột C57BL / 6 từ 8 đến 12 tuần tuổi được gây mê bằng cách hít isoflurane, và giảm đau được thực hiện bằng cách tiêm buprenorphine dưới da. Niệu quản được tách ra khỏi các mô xung quanh, và hai ống nối được đặt cách nhau khoảng 5 mm ở 2/3 trên của niệu quản của thận trái để có được sự cản trở đáng tin cậy. Thí nghiệm kết thúc mười ngày sau khi thắt niệu quản như đã mô tả trước đây [17].

CISTANCHE SẼ CẢI THIỆN BỆNH KIDNEY / RENAL

2.4. Bệnh thận do axit folic (FAN)Tổn thương thận được gây ra khi tiêm một lần vào màng bụng axit folic (250 mg / kg trọng lượng cơ thể trong PBS) ở chuột CD1. Các thí nghiệm kết thúc 96 ngày sau khi tiêm.

2.5. Dân số nghiên cứu Tổng số 112 trường hợp mắc các bệnh lý thận khác nhau bao gồm viêm thận kẽ cấp tính (AIN), kháng thể kháng tế bào chất kháng tế bào chất (ANCA GN), GN màng, viêm thận lupus, bệnh thận tăng huyết áp, bệnh thận IgA (IgAN), phân khu trú bệnh xơ cứng cầu thận (FSGS), và bệnh tiểu đườngbệnh thận(DKD) đã được bao gồm. Mặc dù không cần phê duyệt chính thức cho việc sử dụng dữ liệu lâm sàng thông thường, nhưng một ý kiến ​​thuận lợi đã được cấp bởi ủy ban đạo đức của Trung tâm Y tế Đại học Göttingen (số 22/2/14 và 28/9/17). Hơn nữa, tất cả bệnh nhân đều đồng ý thu thập dữ liệu như một phần của việc chăm sóc y tế thông thường của họ. 2.6. Định nghĩa Tỷ lệ lọc cầu thận ước tính (GFR) được tính toán bằng cách sử dụng Mãn tínhBệnh thậnPhương trình cộng tác dịch tễ học (CKD-EPI) [18]. Đối với các trường hợp ANCA GN, Điểm hoạt động mạch máu Birmingham (BVAS) phiên bản 3 được tính như đã mô tả trước đây [19]. BVAS được đánh giá trên thang điểm từ 0 đến 63, với 0 cho biết không có hoạt động bệnh và điểm số cao hơn cho thấy bệnh đang hoạt động. 2.7. Các quả thận được nhúng bằng parafin, cố định Trichrome của Masson được cắt ở 3 µm, và quá trình nhuộm được thực hiện tại Lõi Mô bệnh học BIDMC và Trung tâm Y tế Đại học Göttingen. 2.8. Mô bệnh học thận Các nhà bệnh lý học thận (LS, SH, và PS) đã đánh giá tất cả các sinh thiết và bị mù trong việc thu thập và phân tích dữ liệu lâm sàng. Tương tự với hệ thống tính điểm Banff, tỷ lệ phần trăm vùng vỏ não bị ảnh hưởng bởi tổng sốquả thậnxơ hóa và xơ hóa mô kẽ khu trú ở vùng teo ống thận (IF / TA) được đánh giá trong toàn bộ bệnh phẩm. Xơ hóa lan tỏa không liên quan đến teo ống thận được tính bằng phép trừ [20]. Ngoài ra, mỗi cầu thận được chấm điểm riêng biệt cho sự hiện diện của hoại tử, nốt sần và xơ cứng toàn cầu. Do đó, phần trăm cầu thận có bất kỳ đặc điểm nào trong số này được tính bằng một phần của tổng số cầu thận trong mỗi lần sinh thiết thận. Dựa trên các điểm số này, phân nhóm mô bệnh học theo Berden et al. (lớp khu trú, hình lưỡi liềm, hỗn hợp, hoặc lớp xơ cứng) và ARRS theo Brix et al. (nguy cơ thấp, trung bình hoặc cao) đã được thực hiện [21,22].

2.9. Trị liệu Cảm ứng Thuyên giảmGlucocorticoids (GCs) được sử dụng dưới dạng liệu pháp xung tĩnh mạch hoặc đường uống với lịch trình giảm dần. Trao đổi huyết tương (PEX) được thực hiện trong giai đoạn khởi phát theo quyết định của bác sĩ điều trị. Rituximab (RTX) được dùng bốn liều tiêm tĩnh mạch với liều 375 mg / m2 mỗi tuần; RTX không được sử dụng trong vòng 48 giờ trước khi điều trị PEX. Cyclophosphamide (CYC) được dùng ba liều tiêm tĩnh mạch lên đến 15 mg / kg mỗi hai tuần và ba tuần một lần sau đó, điều chỉnh theo tuổi và chức năng thận. Liệu pháp phối hợp được thực hiện với bốn liều tiêm tĩnh mạch với liều 375 mg / m2 RTX mỗi tuần và hai liều tiêm tĩnh mạch với liều lượng 15 mg / kg CYC hai tuần một lần. Theo quyết định của bác sĩ điều trị, liệu pháp kích thích thuyên giảm phụ thuộc vào các phác đồ trước đó và các yếu tố của từng bệnh nhân. RTX được ưa thích ở những bệnh nhân trẻ hơn, với độc tính là lý do chính cho sự lựa chọn này [23]. Dự phòng để ngăn ngừa nhiễm Pneumocystis jiroveci đã được đưa ra theo thông lệ địa phương.

CISTANCHE SẼ CẢI THIỆN KIDNEY / RENAL THẤT BẠI

2.10. Phân tích tập dữ liệu mảng khả dụng công khaiCác bộ dữ liệu có sẵn công khai đã được phân tích theo các khuyến nghị chung [24]. Dữ liệu mảng bảng điểm ở người được hiển thị dưới dạng cường độ trung bình trung bình log2 được trích xuất từ ​​cơ sở dữ liệu Nephroseq, bao gồm Ngân hàng cDNA Biobank của thận Châu Âu (ERCB) từ 170 bệnh nhân CKD và 31 người hiến tặng còn sống khỏe mạnh (số gia nhập GSE69438) [25].

2.11. Phương pháp thống kêCác biến đã được kiểm tra phân phối chuẩn bằng phép thử Shapiro – Wilk. Các biến liên tục không phân phối chuẩn được biểu thị dưới dạng phạm vi trung vị và liên phần (IQR), các biến phân loại được trình bày dưới dạng tần suất và tỷ lệ phần trăm. So sánh thống kê không được cung cấp chính thức hoặc xác định trước. Để so sánh giữa các nhóm, thử nghiệm Kruskal-Wallis đã được sử dụng. Để so sánh nhóm, kiểm định Mann – Whitney U được sử dụng để xác định sự khác biệt trong các trung bình. Các phép so sánh không tham số giữa các nhóm được thực hiện với phép thử chi bình phương của Pearson. Các mối tương quan được phân tích bằng hệ số tương quan thứ hạng của Spear man (Spearman's ρ), và phân tích dữ liệu được thực hiện với GraphPad Prism (phiên bản 8.4.3 cho macOS, GraphPad Software, San Diego, CA, USA).

3. Kết quả

3.1. Tổn thương các khoang thận riêng biệt dẫn đến các dạng xơ hóa thận khác nhauĐể làm rõ các cơ chế bệnh tiềm ẩn tiềm ẩn trong sự phát triển IF / TA khu trú và xơ hóa lan tỏa do tổn thương cầu thận hoặc ống thận, đầu tiên chúng tôi đã thử thách chuột với các mô hình thực nghiệm về tổn thương cầu thận nguyên phát dẫn đến xơ cứng cầu thận do viêm thận-huyết thanh độc thận (NTN) , tổn thương mô kẽ ống thận lan tỏa do suy thượng thận với những thay đổi huyết động và chuyển hóa ở thận do tắc nghẽn niệu quản một bên (UUO), và một mô hình cụ thể của tổn thương ống dẫn đến teo ống do bệnh thận do axit folic (FAN, Hình 1A) [26–28 ]. Thận trong các mô hình thử nghiệm này củachấn thương thậnđược đánh giá bằng phương pháp nhuộm tam sắc của Masson cho thấy tổn thương cầu thận mãn tính ở NTN dẫn đến IF / TA khu trú chủ yếu tiếp giáp với các ống teo (Hình 1B, C và Bảng 1). Ngược lại, sử dụng UUO như một mô hình tổn thương ban đầu cho khoang mô kẽ với các tổn thương viêm liên quan cho thấy xơ sợi lan tỏa là mô hình hàng đầu của các tổn thương mãn tính (Hình 1B, C và Bảng 1). Điều thú vị là FAN như một mô hình tổn thương ống thận nguyên phát với sự teo ống liên tiếp không phụ thuộc vào tổn thương cầu thận mãn tính đều gây ra IF / TA khu trú chiếm ưu thế (Hình 1B, C và Bảng 1), do đó nhấn mạnh vai trò của tổn thương ống và teo ống đối với sự phát triển của mô hình xơ hóa tiêu điểm này.

3.2. Phân bố IF / TA đầu mối và xơ hóa lan tỏa trong các bệnh lý ở ngườiĐể xác minh xem các dạng khác biệt của xơ hóa thận có phải là cơ chế tiến triển của bệnh chung để đáp ứng với tổn thương mãn tính và được quan sát trong các bệnh lý thận hay không, tiếp theo chúng tôi phân tích sự xuất hiện và phân bố của IF / TA khu trú và xơ hóa lan tỏa ở nhiều người khácbệnh thận.Trong tổng số 67 ca sinh thiết thận với các bệnh lý thận khác nhau, bao gồm cả viêm cầu thận liên quan đến kháng thể kháng tế bào chất kháng tế bào chất (ANCA GN), viêm thận kẽ cấp tính (AIN), GN màng, viêm thận lupus, bệnh thận tăng huyết áp, bệnh thận IgA (IgAN), phân khu trú bệnh xơ cứng cầu thận (FSGS), và bệnh tiểu đườngbệnh thận(DKD), IF / TA khu trú và xơ hóa lan tỏa có thể được quan sát ở các mức độ khác nhau (Hình 2A – C và Bảng 2). Điều thú vị là, xơ sợi lan tỏa chủ yếu xuất hiện trong các trường hợp ANCA GN, viêm thận lupus, và IgAN nhưbệnh thậnvới tổn thương cầu thận và mô kẽ (Hình 2C). Những phát hiện này cho thấy rằng các dạng xơ hóa thận khác nhau có trong các bệnh lý thận khác nhau, bao gồm ANCA GN, và ANCA GN có thể dùng như một bệnh mẫu để nghiên cứu các cơ chế tổn thương do viêm và thoái hóa ở các khoang thận khác nhau [29].

3.3. IF / TA khu trú và xơ hóa lan tỏa là dấu hiệu của tổn thương các khoang thận riêng biệt trong ANCA GNBởi vì chúng tôi nhận thấy rằng các mô hình xơ hóa thận khác nhau hiện diện trong các bệnh lý thận khác nhau, bao gồm ANCA GN là bệnh thận với tổn thương mô cầu thận và viêm mô kẽ với sự phân bố bằng nhau của IF / TA khu trú và xơ hóa lan tỏa, chúng tôi đã phân tích các mô hình khác nhau của xơ hóa thận liên quan với các phát hiện lâm sàng, xét nghiệm và mô bệnh học trong tổng số 49 mẫu sinh thiết thận với ANCA GN được xác nhận (Bảng 3) [30–36]. Mức độ xơ hóa toàn bộ tương quan với sự suy giảm nghiêm trọng của chức năng thận, được phản ánh bằng sự gia tăng creatinin huyết thanh và giảm mức lọc cầu thận (GFR, Hình 3B). Bằng cách cho điểm ANCA GN một cách có hệ thống, toàn bộ xơ hóa tương quan với một phần giảm của cầu thận bình thường được cho là do các vết lõm tăng tốc và bệnh xơ cứng cầu thận toàn thể (Hình 3C). Trong số các tổn thương viêm, tình trạng xơ hóa toàn bộ tương quan với tình trạng viêm toàn bộ trong ANCA GN không rõ ràng là do viêm mô kẽ bên ngoài các vùng IF / TA hoặc viêm ở các vùng xơ hóa kẽ và teo ống (i-IF / TA, Hình 3C). Tiếp theo, chúng tôi phân tích xơ hóa thận thành IF / TA khu trú và xơ hóa lan tỏa xung quanh các ống còn nguyên vẹn mà không có dấu hiệu teo ống nổi bật để phân tích riêng biệt (Hình 3D). Điều thú vị là chúng tôi không quan sát thấy mối tương quan trực tiếp giữa IF / TA khu trú và xơ hóa lan tỏa (Hình 3E), cho thấy các đặc điểm riêng biệt của từng tổn thương trong ANCA GN. Như chúng ta đã quan sát trước đây đối với xơ hóa toàn bộ, IF / TA tương quan với giảm một phần cầu thận bình thường, chủ yếu là do bệnh xơ cứng cầu thận toàn thể (Hình 3E), xác nhận cơ chế được thiết lập mà tổn thương cầu thận mãn tính dẫn đến thoái hóa các ống tương ứng với teo ống và sẹo xơ khu trú [4]. Ngược lại, xơ hóa lan tỏa không tương quan với tổn thương cầu thận mãn tính nhưng với cầu thận hình lưỡi liềm (Hình 3E), ngụ ý rằng xơ hóa lan tỏa (không liên quan đến teo ống thận) là cơ sở chưa được biết rõ, không phụ thuộc vào tổn thương cầu thận mãn tính và mất nephron. Việc chấm điểm hệ thống về tình trạng viêm thận cho thấy xơ sợi lan tỏa có liên quan cụ thể với viêm mô kẽ ở những vùng không có xơ (Hình 3E), trong khi IF / TA khu trú tương quan với tình trạng viêm toàn bộ vỏ não không đặc biệt do viêm mô kẽ hoặc i-IF / TA ( Hình 3E). Đáng chú ý, cả hai tổn thương đều tương quan với sự suy giảm chức năng thận trầm trọng hơn (Hình 3F), hỗ trợ thêm cho nhận xét rằng mỗi tổn thương là yếu tố góp phần thiết yếu vào kết quả và tổn thương thận.

Hình 3. IF / TA khu trú và xơ hóa lan tỏa là dấu hiệu của tổn thương các ngăn thận riêng biệt trong ANCA GN. (A) Hình ảnh chụp ảnh đại diện của phần thận được nhuộm trichrome của Masson trong ANCA GN (vạch chia độ: 2 0 0 µm). (B) Mối liên quan giữa xơ toàn bộ thận, các phát hiện lâm sàng và phòng thí nghiệm trong ANCA GN được thể hiện bằng bản đồ nhiệt phản ánh các giá trị trung bình của Spearman's ρ, dấu hoa thị biểu thị p <0. 0="" 5.="" (c)="" mối="" liên="" quan="" giữa="" tổng="" số="" xơ="" hóa="" thận,="" cầu="" thận="" và="" phát="" hiện="" viêm="" trong="" anca="" gn="" được="" thể="" hiện="" bằng="" bản="" đồ="" nhiệt="" phản="" ánh="" giá="" trị="" trung="" bình="" của="" spearman's="" ρ,="" dấu="" hoa="" thị="" cho="" biết="" p=""><0,05. (d)="" hình="" ảnh="" chụp="" ảnh="" đại="" diện="" của="" phần="" thận="" được="" nhuộm="" trichrome="" của="" masson="" trong="" anca="" gn="" với="" if="" ta="" tiêu="" điểm="" (bảng="" trên)="" và="" xơ="" sợi="" lan="" tỏa="" (bảng="" dưới)="" được="" hiển="" thị="" (vạch="" chia="" độ:="" 40="" µm).="" (e)="" mối="" liên="" hệ="" giữa="" if="" ta="" khu="" trú="" và="" xơ="" hóa="" lan="" tỏa="" với="" các="" phát="" hiện="" viêm="" và="" cầu="" thận="" được="" minh="" họa="" bằng="" bản="" đồ="" nhiệt="" phản="" ánh="" giá="" trị="" trung="" bình="" của="" spearman's="" ρ,="" dấu="" hoa="" thị="" cho="" thấy="" p=""><0,05. (f)="" mối="" liên="" hệ="" giữa="" if="" ta="" khu="" trú="" và="" xơ="" sợi="" lan="" tỏa="" với="" các="" phát="" hiện="" lâm="" sàng="" và="" phòng="" thí="" nghiệm="" trong="" anca="" gn="" được="" thể="" hiện="" bằng="" bản="" đồ="" nhiệt="" phản="" ánh="" các="" giá="" trị="" trung="" bình="" của="" spearman's="" ρ,="" dấu="" hoa="" thị="" cho="" thấy="" p=""><0,05. viết="" tắt:="" anca="" gn="" —="" viêm="" cầu="" thận="" kháng="" thể="" kháng="" tế="" bào="" chất="" kháng="" tế="" bào="" chất;="" bvas="" —="" điểm="" hoạt="" động="" viêm="" mạch="" ở="" birmingham;="" crp-c="" protein="" phản="" ứng;="" gfr="" -="" tốc="" độ="" lọc="" cầu="" thận;="" if="" ta="" —="" xơ="" hóa="" kẽ="" teo="" ống="" thận;="" iqr="" —="" phạm="" vi="" liên="" phần="" tư;="" mpo="" —="" myeloperoxidase;="" acr="" -="" tỷ="" lệ="" albumin="" creatinine="" nước="" tiểu;="" upcr="" -="" tỷ="" lệ="" protein="" creatinine="" nước="">

3.4. Phân tích IF / TA tiêu điểm so với xơ hóa lan tỏa cho thấy các thành phần ma trận riêng biệtTiếp theo, chúng tôi phân tích các đặc điểm hình thái của IF / TA khu trú và xơ sợi lan tỏa trong ANCA GN một cách chi tiết hơn. Các phần Semithin cho thấy IF / TA khu trú xung quanh các ống teo nhỏ cô đặc hơn các mô sợi sắp xếp lỏng lẻo xung quanh các ống nguyên vẹn được bảo tồn (Hình 4A). Kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM) làm sáng tỏ các bó collagen được nhúng trong một ma trận mô đệm dày đặc (Hình 4B). Ngược lại, phân tích siêu cấu trúc của xơ sợi lan tỏa cho thấy các ống gần như nguyên vẹn được bao quanh bởi một vùng nội mạc phù nề mở rộng với các bó sợi ghép khu trú tiết lộ một loại mô xơ không hoàn chỉnh (Hình 4B). Những quan sát này cho thấy IF / TA khu trú và xơ hóa thận lan tỏa có thể khác nhau về thành phần và tổ chức ECM.

3.5. Bảng điểm mô tế bào ống liên quan đến teo ống tiết lộ các dấu hiệu collagen khác biệt trong bệnh xơ hóa thậnTiếp theo, chúng tôi phân tích thành phần ECM được phản ánh bởi các chữ ký collagen trong bộ dữ liệu phiên mã từ các khoang mô tubulin bị cắt vi mô ở 170 bệnh nhân CKD và 31 người hiến tặng còn sống khỏe mạnh (cơ sở dữ liệu Nephroseq) để tìm mối liên hệ với các dấu hiệu đã được thiết lập của chứng teo ống, bao gồm cytokeratin -7 (được mã hóa bởi KRT7), -18 (KRT18) và -19 (KRT19) [25,37]. Trong các khoang mô đệm có biểu hiện cao của các dấu hiệu tổn thương ống, các collagens COL1A1, COL1A2, COL3A1, COL4A1, COL4A2, COL5A2, COL6A3, COL16A1 và COL18A1 được biểu hiện chủ yếu (Hình 5). Ngược lại, mối tương quan nghịch đảo được quan sát thấy đối với COL2A1, COL5A3, COL6A1, COL8A2, COL11A1, COL11A2, COL17A1 và COL19A1 (Hình 5). Những kết quả này ám chỉ rằng bệnh xơ hóa thận có thể có các dấu hiệu collagen riêng biệt trong các dấu hiệu của tổn thương ống thận.

3.6. IF / TA đầu mối có liên quan đến kết quả dài hạn tồi tệ hơn trong ANCA GNĐể hiểu rõ hơn liệu các dạng xơ hóa thận khác nhau có liên quan đến kết quả thận lâu dài hay không, tiếp theo, chúng tôi so sánh toàn bộ, IF / TA khu trú và xơ hóa thận lan tỏa trong ANCA GN với sự phát triển của ESKD. Toàn bộ xơ hóa thận trong ANCA GN tương quan với kết quả thận lâu dài xấu hơn (Bảng 4). Điều thú vị là chỉ mức độ xơ hóa thận khu trú mới tương quan với kết quả thận (Bảng 4). Ngược lại, xơ hóa thận lan tỏa không liên quan đến kết quả thận lâu dài (Bảng 4), ngụ ý rằng các mô hình xơ hóa riêng biệt cũng có thể ảnh hưởng đến sự tiến triển của bệnh và khả năng đáp ứng điều trị.

Thảo luận

Cho đến nay, sự phát triển của xơ hóa thận có thể được tách thành hai khái niệm: một mặt, tài liệu cung cấp bằng chứng chắc chắn rằng xơ hóa thận là hậu quả đơn giản của tổn thương không thể phục hồi đối với nephron, hoặc do tổn thương cầu thận hoặc ống mãn tính, cả hai đều dẫn đến trong teo ống và xơ hóa mô kẽ khu trú xung quanh các nephron bị tổn thương [12,13]. Do đó, IF / TA khu trú liên quan đến teo ống thận góp phần sửa chữa thận bằng cách đóng vai trò như mô sẹo, do đó thay thế các nephron đã bị mất [12]. Mặt khác, xơ hóa thận có thể được coi là một quá trình tái tạo mô hình tích cực, tiến triển và gây tổn hại cho các kẽ thận. Trong quá trình này, nguyên bào sợi góp phần trực tiếp vào tổn thương biểu mô, cho thấy một cơ chế tiến triển bệnh thận mạn tính ở mô kẽ thực sự [13]. Theo hiểu biết của chúng tôi, đây là nghiên cứu đầu tiên phân chia xơ hóa thận một cách có hệ thống thành hai biểu hiện riêng biệt và độc lập với các mô hình mô học khu trú hoặc lan tỏa, từ đó làm sáng tỏ hai con đường gây bệnh khác nhau của những tổn thương này. Để cung cấp những hiểu biết mới về lĩnh vực hình thành xơ thận, sự phát triển và số phận của xơ hóa thận, chúng tôi đã kiểm tra ba mô hình chuột khác nhau với các thực thể đã biết của xơ hóa thận để làm sáng tỏ các mô hình và biểu hiện xơ hóa khi tổn thương các ngăn thận riêng biệt. Cảm ứng GN hình lưỡi liềm riêng biệt trong NTN, và tổn thương cầu thận mãn tính, dẫn đến chủ yếu là xơ hóa khu trú lân cận với các ống teo [26]. Những quan sát này ủng hộ khái niệm tổn thương nephron không thể đảo ngược dẫn đến IF / TA khu trú xung quanh nephron bị tổn thương [12,13]. Ngược lại, sử dụng UUO như một mô hình tổn thương ban đầu cho khoang mô kẽ với các tổn thương viêm liên quan cho thấy xơ sợi lan tỏa là mô hình hàng đầu của các tổn thương mãn tính [27]. Bệnh xơ hóa thận ở chuột UUO được đặc trưng bởi các sợi collagen mỏng manh bao quanh các ống gần như nguyên vẹn.

Điều thú vị là các kẽ của chuột UUO không chỉ cho thấy xơ sợi lan tỏa mà còn có nhiều tế bào viêm. Vì viêm là một phản ứng với chấn thương, điều quan trọng là phải thảo luận xem liệu viêm kẽ có do tổn thương trực tiếp đến khoang kẽ độc lập với nephron lân cận hay không. Do đó, xơ hóa lan tỏa là kết quả của bệnh viêm thận mô kẽ riêng lẻ mà không có tổn thương ban đầu đối với nhu mô biểu mô thận, có thể xảy ra trong các giai đoạn tiến triển sau của bệnh như viêm thận mô ống thận, và có thể dẫn đến teo thận. Sự tắc nghẽn nước tiểu trong hệ thống biểu mô ống là thủ phạm chính trong mô hình UUO, dẫn đến xơ hóa lan tỏa, huyết động thận và thay đổi chuyển hóa [27]. Vì mọi sự tắc nghẽn của nhu mô đều dẫn đến phù nề vùng kẽ xung quanh, tổn thương phù nề lan tỏa của kẽ thận có thể giải thích mức độ viêm và xơ hóa lan tỏa ở chuột UUO. Cuối cùng, FAN như một mô hình của tổn thương ống thận nguyên phát với sự teo ống liên tiếp không phụ thuộc vào tổn thương cầu thận mãn tính gây ra IF / TA khu trú chiếm ưu thế như nhau, do đó nhấn mạnh vai trò của tổn thương ống và teo ống đối với sự phát triển của IF / TA khu trú [28]. Trong mô hình này, nhiều nephron lân cận dường như bị thương do nhiễm độc trực tiếp ở ống, dẫn đến teo ống kéo dài mà không có tổn thương cầu thận.

Sau khi phân tích một số bệnh lý thận, dữ liệu của chúng tôi cũng cho thấy IF / TA khu trú và xơ hóa lan tỏa dường như góp phần là tổn thương mãn tính trong phần lớn bệnh thận ở người. IF / TA khu trú và xơ hóa lan tỏa chủ yếu hiện diện trong ANCA GN và nhấn mạnh cơ chế được công nhận của tổn thương kẽ trực tiếp là nguyên nhân của xơ hóa lan tỏa. Trong ANCA GN là bệnh thận có tổn thương cầu thận (hình thành lưỡi liềm, xơ cứng cầu thận và mất nephron) và tổn thương mô kẽ (do viêm), ở đây chúng tôi cung cấp bằng chứng cho thấy bệnh xơ hóa mô kẽ có liên quan đến tổn thương thận (phụ thuộc hoặc độc lập với sẹo cầu thận) hoặc tổn thương kẽ nguyên phát (dẫn đến tái tạo mô kẽ sợi lan tỏa) [22,38–41]. Hơn nữa, dữ liệu của chúng tôi cho thấy IF / TA khu trú trong ANCA GN tương quan với bệnh xơ cứng cầu thận toàn cầu, dẫn đến xơ cứng cầu thận và mất nephron [26]. Ở đây, chúng tôi cũng có thể tiết lộ rằng sẹo thận khu trú đại diện cho mô hình trung tâm của xơ hóa thận, xác nhận rất nhiều tài liệu mô tả rằng tổn thương cầu thận mãn tính dẫn đến thoái hóa ống tương ứng với teo ống, mất nephron cụ thể này và sửa chữa thận không hoàn toàn. bằng sẹo thay thế khu trú [12]. Do đó, dữ liệu của chúng tôi xác nhận rằng IF / TA khu trú có liên quan đến tổn thương nephron không hồi phục, phụ thuộc hoặc độc lập với tổn thương cầu thận. Các mẫu IF / TA tiêu điểm trong sinh thiết người dường như có nguồn gốc tương tự, phản ánh quá trình sửa chữa thận. Ngược lại, xơ hóa lan tỏa trong ANCA GN có liên quan đặc biệt với viêm mô kẽ. Các phần Semithin tiết lộ mô sợi với các sợi collagen sắp xếp lỏng lẻo bao quanh các ống gần như hoàn toàn nguyên vẹn, không có dấu hiệu teo thực sự. Đáng chú ý, phân tích TEM cho thấy các bó collagen được sắp xếp rất thưa thớt trong một kẽ được tổ chức rất lỏng lẻo, cho thấy những thay đổi phù nề ở kẽ. Vì ANCA GN là một bệnh viêm mạch ảnh hưởng đến các mạch nhỏ, viêm mô kẽ và xơ sợi lan tỏa có thể được giải thích là do viêm mạch kẽ với rò rỉ mao mạch kèm theo; do đó, phù nề và viêm mô kẽ làm trầm trọng thêm tình trạng xơ hóa mô kẽ lan tỏa [42].

CISTANCHE SẼ CẢI THIỆN PHÂN TÍCH KIDNEY / RENAL

Bộ dữ liệu phiên mã từ các khoang kẽ ống dẫn trứng bị cắt vi mô cho thấy các dấu hiệu collagen riêng biệt liên quan đến IF / TA khu trú liên quan đến teo ống và xơ hóa lan tỏa không liên quan đến teo ống, ngụ ý rằng IF / TA khu trú và xơ hóa thận lan tỏa có thể khác nhau về thành phần ECM. Collagen là một protein dạng sợi dồi dào chính trong chất nền ngoại bào. Collagens tạo thành yếu tố cấu trúc chính của ECM và cung cấp độ bền kéo, điều chỉnh độ kết dính của tế bào, hỗ trợ quá trình hóa học và di chuyển, đồng thời trực tiếp phát triển mô [43]. Cho đến nay, 28 loại collagen đã được mô tả. Các loại collagen chính được tìm thấy trong các mô liên kết là loại I, II, III, V và XI. Trong các khoang kẽ ống dẫn trứng bị tổn thương vi mô, xơ hóa khu trú liên quan đến dấu hiệu teo ống chủ yếu chứa collagen loại I, III, IV và V. Ngược lại, chúng tôi xác định được mối tương quan nghịch với collagen loại II và XI, ngụ ý rằng IF / TA khu trú và thận lan tỏa. xơ hóa có thể khác nhau ở các dấu hiệu collagen riêng biệt. Cuối cùng, chúng tôi ở đây cho thấy toàn bộ xơ hóa thận trong ANCA GN tương quan với kết quả thận lâu dài xấu hơn, như đã mô tả trước đây [22]. Điều thú vị là chỉ mức độ xơ hóa thận khu trú mới tương quan với kết quả thận. Ngược lại, xơ hóa thận lan tỏa không liên quan đến kết quả thận lâu dài. Những quan sát này ngụ ý rằng các mô hình xơ hóa riêng biệt cũng có thể ảnh hưởng đến sự tiến triển của bệnh và khả năng đáp ứng điều trị.

Tổng hợp lại, chúng tôi ở đây cung cấp bằng chứng cho thấy phần lớn bệnh xơ hóa thận dường như có liên quan đến mất nephron và sẹo thay thế, đại diện cho việc sửa chữa mô không hoàn chỉnh. Ngược lại, xơ hóa lan tỏa dường như là kết quả của tình trạng viêm và tổn thương mô kẽ nguyên phát mà không có tổn thương ngăn biểu mô của thận. Điều thú vị là cả hai mô hình xơ hóa đều tương quan với sự suy giảm nghiêm trọng hơn của chức năng thận, ngụ ý rằng mỗi tổn thương xơ hóa kẽ là một yếu tố đóng góp thiết yếu vào kết quả. Đồng thời, khái niệm về sự mất nhu mô chức năng dẫn đến xơ hóa thay thế khu trú và xơ hóa lan tỏa các cơ chế thay thế cơ bản vẫn chưa được mô tả một cách có hệ thống ở thận. Tuy nhiên, những cơ chế như vậy đã được báo cáo trong bệnh xơ hóa tim. Xơ hóa thay thế (xơ hóa sẹo) là khu trú và xảy ra sau khi hoại tử tế bào cơ tim, ví dụ, sau nhồi máu cơ tim, và được coi là không thể phục hồi để ngăn ngừa vỡ cơ tim sau nhồi máu [44]. Mặt khác, xơ sợi lan tỏa có liên quan đến sự lan truyền lan tỏa của collagen ngoại bào mà không có hoại tử tế bào cơ tim và được cho là có thể đảo ngược về nguyên tắc [45-48].

Các hạn chế chính của nghiên cứu của chúng tôi là số lượng sinh thiết thận hạn chế trong một số bệnh lý thận, thiết kế hồi cứu và khả năng chuyển giao hạn chế của các mô hình thực nghiệm về chấn thương thận sang người. Tuy nhiên, phát hiện chính của chúng tôi rằng IF / TA khu trú và bệnh xơ hóa lan tỏa là các mô hình xơ hóa thận độc lập trong ANCA GN (và các bệnh thận mãn tính khác) ngụ ý rằng mỗi tổn thương có các đặc điểm riêng biệt và có lẽ là các cơ chế trong ANCA GN. Hơn nữa, những quan sát này mở rộng hơn nữa kiến ​​thức hiện tại của chúng ta về mối tương tác giữa viêm, tổn thương thận và xơ hóa, góp phần hiểu chính xác hơn về các phản ứng viêm và các chiến lược điều trị mới tiềm năng để điều chỉnh các biểu hiện riêng biệt của xơ hóa thận.

Kết luận

Kết luận, chúng tôi ở đây cung cấp bằng chứng cho thấy mô hình tiêu điểm của xơ hóa thận dường như có liên quan đến mất nephron và sẹo thay thế. Ngược lại, mô hình lan tỏa của thận, xơ hóa dường như là kết quả của tổn thương và viêm mô kẽ nguyên phát