Echinacoside thúc đẩy sự tăng sinh của tế bào biểu mô ống thận ở người bằng cách ngăn chặn con đường truyền tín hiệu qua trung gian NF ‑ κB của HBX / TREM2

Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

YuFan ZHanG, QinFanG Wu, liMin ZHonG, donGWei GonG

Trừu tượng.

Protein X (HBX) của virus viêm gan B cần thiết cho sự nhân lên của HBV và đóng một vai trò trong sự tiến triển của bệnh viêm gan ở người. Tuy nhiên, chức năng cơ bản của HBX trong quá trình viêm cầu thận mãn tính do HBV gây ra (HBV-Gn) vẫn chưa được biết rõ. (echinacoside từ cistanche)(ecH) là một glycoside phenylethanoid từ chi Cistanche, có các hoạt động chống nhiễm khuẩn và bảo vệ thần kinh mạnh mẽ. trong nghiên cứu này, chức năng của HBX và mối quan hệ giữa HBX và ecH trong tế bào biểu mô ống thận ở người (dòng tế bào rTecs; HK -2) đã được khám phá. Phân tích Pcr định lượng phiên mã ngược và phân tích Western blot được sử dụng để định lượng mức độ biểu hiện mRNA và protein của HBX trong tế bào HK -2 tương ứng. Thử nghiệm Bộ đếm tế bào -8 được thực hiện để phân tích sự tăng sinh của tế bào. Phân tích đo tế bào dòng chảy được sử dụng để xác định tỷ lệ apoptosis. HBX cho thấy tác dụng chống tăng sinh và proapoptotic trong tế bào HK -2 và có liên quan tích cực với thụ thể kích hoạt biểu hiện trên biểu hiện tế bào tủy 2 (TreM2). Hơn nữa, ECH làm gián đoạn chức năng của HBX trong tế bào HK -2, hoạt động như một bộ triệt tiêu HBX. Hơn nữa, một chất ức chế NF ‑ κB cụ thể, PdTc, đã được sử dụng để kiểm tra thêm mối quan hệ giữa HBX và nF-κB. Kết quả cho thấy nF-κB có liên quan đến lộ trình tín hiệu HBX / TreM2 và biểu hiện TreM2 được điều chỉnh tiêu cực trong RTECS. Nghiên cứu hiện tại đã cung cấp những hiểu biết mới về chức năng của HBX, và cũng chỉ ra giá trị tiềm năng của ECH như một tác nhân điều trị đối với HBV-Gn.

Giới thiệu

Virus viêm gan B (HBV) là một loại virus thuộc họ Hepadnaviridae, dẫn đến bệnh viêm gan cấp tính và mãn tính ở người (1). HBV, không chỉ gây nhiễm trùng dai dẳng hoặc thoáng qua ở gan mà còn lây nhiễm sang mô ngoài gan, bao gồm tuyến tụy, ống mật, hệ thống lympho và thận (2). Hơn nữa, nhiễm HBV có liên quan chặt chẽ với viêm cầu thận mãn tính (HBV-Gn); tuy nhiên, cơ chế phân tử của HBV trong quá trình HBV-Gn vẫn chưa được hiểu hoàn toàn (3,4).

Protein X (HBX) của virus viêm gan B điều hòa HBV cần thiết cho sự nhân lên của HBV (5,6). một số nghiên cứu đã báo cáo rằng HBX thúc đẩy tăng sinh tế bào trong ung thư biểu mô gan do nhiễm HBV (7-9). Tế bào biểu mô ống thận ở người (rTecs) là một phần chính của kẽ ống thận và đóng một vai trò tích cực trong quá trình viêm thận (10). Quá trình apoptosis rTec có liên quan chặt chẽ với sự rối loạn chức năng của trung gian ống, sau đó dẫn đến sự tiến triển của HBV-Gn (10). HBX chủ yếu được biểu hiện trong tế bào rTec và gây ra quá trình apoptosis rTec và tổn thương ống thận ở bệnh nhân HBV-Gn (11,12). Hơn nữa, HBX đã được báo cáo là ngăn chặn sự gia tăng của rTec chuột (13), và sự biểu hiện quá mức của HBX làm tăng tốc độ tiến triển chu kỳ tế bào từ pha G1 sang pha S trong rTec sơ cấp, dẫn đến ngừng chu kỳ tế bào ở pha S (14). Do đó, xác định một chất ức chế HBX có thể cung cấp một phương pháp điều trị mới cho HBV-Gn. Tuy nhiên, mạng lưới phân tử chính xác của HBX trong rTec của con người vẫn chưa được hiểu hoàn toàn.(echinacoside từ cistanche)(ecH) là một hợp chất tự nhiên được chiết xuất từCistanchethực vật, cho thấy tác dụng chống nhiễm trùng và chống viêm (15,16). Một nghiên cứu trước đây đã báo cáo rằng ecH gây ra sự tăng sinh và ngăn chặn quá trình apoptosis của các tế bào biểu mô ruột (17). Hơn nữa, ecH đã được báo cáo để đẩy nhanh quá trình tái tạo xương bằng cách tăng sự gia tăng của các tế bào nguyên bào xương (18). ecH cũng có thể làm giảm sự nhân lên của HBV, sự biểu hiện kháng nguyên và tình trạng viêm trong tế bào biểu mô ruột của chuột (16,19). Tuy nhiên, tác dụng sinh học của ecH đối với rTecs vẫn chưa được làm sáng tỏ đầy đủ.

Sự biểu hiện quá mức của TreM2 thúc đẩy sự tăng sinh của các tế bào u thần kinh đệm (22). Ngược lại, phản ứng hạ gục TreM2 làm giảm sự chuyển vị của nF-κB tới nhân trong các tế bào tủy sống nhân thoái hóa (23). Hơn nữa, TreM2 đã được xác định là một mục tiêu điều trị mới cho bệnh thoái hóa đĩa đệm ở người (23). Tuy nhiên, chức năng sinh học của TreM2 trong rTecs của con người chưa được báo cáo. trong nghiên cứu này, sự biểu hiện quá mức của HBX (oeHBX) được gây ra trong dòng tế bào rTec (HK -2 của con người) và sau đó, ảnh hưởng của ecH (echinacoside từ cistanche) trên các tế bào oeHBX được chuyển giao đã được khảo sát. Mục đích của nghiên cứu này là để điều tra các chức năng của HBX và giá trị tiềm năng của ecH như một tác nhân điều trị hiệu quả đối với HBV-Gn.

Vật liệu và phương pháp

Tế bào văn hóa.Dòng tế bào rTec của con người HK -2 được mua từ Shanghai Yaji Biotechnology co., Ltd. Tế bào HK -2 được nuôi cấy trong môi trường DME / F12 (mèo. SH30023.01B; Hyclone; cytiva) được bổ sung 10% huyết thanh bò thai (mèo. Số 16000‑044; Gibco; Thermo Fisher Scientific, inc .), 2 mM l-glutamine và 1 phần trăm penicillin / streptomycin (cat. No. P 1400-100; Beijing Solarbio Science & Technology co., Ltd.) ở 37˚C với 5 phần trăm CO2.

RNA sự cách ly và đảo ngược phiên mã ‑ định lượng PCR (RT ‑ qPCR).Tổng rna được trích xuất từ ​​các tế bào HK -2 bằng cách sử dụng Trizol® (cat. No. 1596 -026; Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, inc.), Theo giao thức của nhà sản xuất. RNA tổng số được phiên mã ngược thành cDNA bằng bộ kit Tổng hợp cDNA sợi thứ nhất theo quy trình của nhà sản xuất (cat. No. K1622; Thermo Fisher Scientific, Inc.). qPCR được thực hiện bằng cách sử dụng SYBr-Green premix theo giao thức của nhà sản xuất (cat. số K0223; Thermo Fisher Scientific, Inc.) trên máy dò thời gian thực ABI ‑ 7300 (Hệ thống sinh học ứng dụng; Thermo Fisher Scientific, Inc.). Các điều kiện của PCR là: 95˚C trong 10 phút sau đó là 40 chu kỳ ở 95˚C trong 15 giây, 60˚C trong 45 giây. Ba lần lặp lại là cần thiết cho mỗi phản ứng. Các cặp mồi sau đây được sử dụng cho qPCR: chuyển tiếp HBX, 5'-GGcTGcTaGGTTGTacTG -3 'và đảo ngược, 5'-caGaGGTGaaGcGaaGTG -3'; TreM2 tiến tới, 5'-TGGcacTcTcaccaTTacG -3 'và ngược lại, 5'-ccTccc aTcaTcTTccTTcac -3'; và GaPdH chuyển tiếp, 5'-AAT cccaTcaccaTcTTc -3 'và ngược lại, 5'-aGGcTGTTG TcaTacTTc -3'. mức mRNA được định lượng bằng phương pháp 2 ‑ ΔΔCq và chuẩn hóa thành gen tham chiếu bên trongGAPDH (24).

Biểu hiện quá mức và hạ gục.Để gây ra sự biểu hiện quá mức của HBX và TreM2, trình tự cDNA HBX hoặc TreM2 có chiều dài đầy đủ đã được chèn vào vectơ plVX-puro (phòng thí nghiệm cleantech, inc.) Bằng cách phân đôi (Hinđuiii vàEcoRI). Sau đó, plasmid tái tổ hợp (1,5 µg) được chuyển vào tế bào HK -2 (2x105). Plasmid giả (một vectơ trống, 1 µg) đã được truyền nhanh chóng vào tế bào HK -2 (2x105) dưới dạng đối chứng âm tính (oenc) bằng cách sử dụng lipofectamine® 2000 (cat. No. 11668-027, Invitrogen, Thermo Fisher Scientific, inc.). ecH(echinacoside từ cistanche)(cat. no. 82854-37-3; Biopurify Phytochemicals, ltd.) được hòa tan trong DMSO (cat. no. d2650; Sigma-Aldrich; Merck KGaa) ở nồng độ 1, 2,5, 5, 10, 20 và

50 mg / l tương ứng; và được thêm vào quá trình nuôi cấy các tế bào oeHBX hoặc oeTreM2 đã được chuyển nhiễm. Thử nghiệm tiếp theo bắt đầu 48 giờ sau đó.

Để loại bỏ biểu hiện TreM2, ba RNA can thiệp (si) nhỏ (siTreM 2-1, siTreM 2-2 và siTreM 2-3; 20 µM) nhắm mục tiêu TreM2 đã được tổng hợp (Shanghai Majorbio Bio-Pharm Technology co . ltd.) và sau đó được truyền vào tế bào HK -2 (2x105) bằng cách sử dụng lipofectamine® 2000 theo giao thức của nhà sản xuất (Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, Inc.). Trình tự siRNA xáo trộn không đặc hiệu (5'uucuccGaacGuGucacGu3, 25 nM) đối chứng si-âm (nc) được sử dụng làm đối chứng âm tính. Vị trí mục tiêu và trình tự của các sirô TreM2 được cung cấp trong Bảng Si. Thí nghiệm tiếp theo được thực hiện sau 48 giờ.

miền Tây thấm.Tổng số protein đã được chiết xuất từ ​​tế bào HK -2

sử dụng đệm ly giải RIPA (cat. số BYl40825; Jrdun Biotech Co., Ltd.). Tổng số protein được định lượng bằng cách sử dụng bộ xét nghiệm Axit Bicinchoninic (mèo. PICPI23223; Thermo Fisher Scientific, inc.) Theo quy trình của nhà sản xuất và 20 µg protein / làn được phân tách qua SDS-PaGe trên gel 15%. Phép đo mật độ của các mẫu được xác định bằng cách sử dụng đầu đọc vi tấm (dnM -9602, Pulangxin). Sau đó, các protein đã tách được chuyển vào màng PVDF. Sau khi ngăn bằng sữa khô không béo 5% trong 1 giờ ở nhiệt độ phòng, màng được ủ với kháng thể sơ cấp (Bảng SII) ở 4˚C qua đêm và ủ lại với kháng thể thứ cấp chống chuột igG (1: 1, 000, cat. No. A0216, Beyotime Institute of Biotechnology) trong 1 giờ ở 37˚C. Các dải protein phản ứng miễn dịch được hình dung bằng cách sử dụng hệ thống ecl (cytiva). Các khối đã được thực hiện trong ba lần.GAPDHvà H3 được sử dụng làm chất điều khiển tải đối với các protein tế bào chất và hạt nhân, tương ứng.

Kết quả

ECH (echinacoside từ cistanche)đàn áp chức năng của HBX Trong HK ‑ 2 tế bào.Để đánh giá

chức năng của HBX, sự biểu hiện quá mức của HBX được gây ra trong các ô HK -2. Nồng độ mrna và protein tương đối của HBX được điều chỉnh đáng kể trong tế bào oeHBX so với tế bào oenc (Hình 1a và B). Sau đó, tế bào oeHBX được nuôi cấy với các nồng độ ecH khác nhau (1, 2,5, 5, 10, 20 và 50 mg / l; e1, e2,5, e5, e10, e20 và e50, tương ứng). Sự biểu hiện quá mức của HBX làm giảm đáng kể sự tăng sinh của tế bào HK -2 và sự giảm này bị ecH đảo ngược theo cách phụ thuộc vào liều lượng ở 24 và 48 giờ (Hình 1c).

Hơn nữa, tốc độ tăng sinh của các tế bào oeHBX không có sự khác biệt đáng kể so với các tế bào được xử lý E1 (Hình 1c). Ngược lại, nghiệm thức e10 làm tăng đáng kể tỷ lệ tăng sinh của tế bào oeHBX so với nghiệm thức E20 và E50 không cho thấy sự khác biệt đáng kể (Hình 1c). Do đó, ảnh hưởng của ecH đối với quá trình chết rụng đã được kiểm tra trong các tế bào được xử lý e2.5, e5 và e 10-. Sự biểu hiện quá mức của HBX làm tăng đáng kể quá trình apoptosis của tế bào HK-2, và tỷ lệ apoptosis của tế bào oeHBX giảm khi điều trị ecH phụ thuộc vào liều lượng (Hình 1d). về tổng thể, kết quả cho thấy rằng ecH ức chế chức năng của HBX trong tế bào HK -2 theo cách phụ thuộc vào liều lượng.

TREM2 biểu hiện Là ức chế qua ECH(echinacoside từ cistanche) Trong được chuyển giao oeHBX

tế bào.rT-qPcr và Western blotting được sử dụng để kiểm tra mức độ biểu hiện mrna và protein tương đối của TreM2 trong các tế bào oeHBX tương ứng. TreM2 mrna và mức độ biểu hiện protein được điều chỉnh đáng kể trong tế bào oeHBX so với tế bào oenc (Hình 2a và B). Tuy nhiên, ecH làm giảm mức độ biểu hiện của TreM2 trong các tế bào oeHBX được truyền nhiễm theo cách phụ thuộc vào liều lượng (Hình 2a và B). Do đó, kết quả cho thấy biểu hiện HBX có liên quan tích cực với biểu hiện TreM2 và chỉ ra thêm tác dụng ức chế của ecH đối với HBX trong tế bào HK -2.

Knockdown và biểu hiện quá mức của TREM2 Trong HK ‑ 2 tế bào.Để đánh giá thêm chức năng của TreM2, TreM2 bị đánh sập và biểu hiện quá mức đã được gây ra trong các ô HK -2 bằng cách sử dụng giao thoa rna và vectơ lentiviral, tương ứng. Đối với thử nghiệm hạ gục, ba siRNA nhắm mục tiêu vào gen ngườiTREM2(siTreM 2-1, siTreM 2-2 và siTreM 2-3) đã được chuyển vào các ô HK ‑ 2 và siRNA không cụ thể được sử dụng làm kiểm soát âm tính (sinc). cả ba sirô TreM2 đã loại bỏ thành công biểu hiện nội sinh của TreM2 trong các ô HK -2 (Hình 3a và B). Tuy nhiên, mức độ biểu hiện TreM2 mrna và protein tương đối thấp nhất đã được quan sát thấy trong các tế bào được truyền siTreM 2-1 và siTreM 2-2- (Hình 3a và B), do đó, siTreM 2-1 và siTreM {{13 }} tế bào được chuyển giao đã được chọn để thử nghiệm tiếp theo. Đối với các thí nghiệm biểu hiện quá mức, một plasmid chứa trình tự TreM2cdna của người có chiều dài đầy đủ đã được xây dựng và sau đó được chuyển vào tế bào HK -2 (oeTreM2). một

plasmid giả đóng vai trò là một đối chứng âm tính (oenc). Mức độ biểu hiện TREM2 đã tăng lên đáng kể trong các tế bào oeTREM2 so với các tế bào oenc (Hình 3c và d). Do đó, các tế bào oeTreM2 đã được sử dụng cho các thí nghiệm tiếp theo.

TREM2 im lặng giảm các sự chết tế bào của oeHBX tế bào.Hồ sơ apoptosis của các tế bào oeHBX được truyền bằng siTREM2 hoặc sinc đã được đánh giá. Tỷ lệ apoptosis của tế bào oeHBX cộng với tế bào sinc cao hơn đáng kể so với tế bào mở. Tuy nhiên, tỷ lệ apoptosis đã giảm đáng kể ở tế bào oeHBX cộng với siTreM 2-1 hoặc siTreM 2-2 so với tế bào oeHBX cộng với tế bào sinc (Hình 4a). Kết quả cho thấy rằng TreM2 bị hạ gục đã ức chế chức năng của HBX trong quá trình apoptosis của tế bào HK -2.

Survivin thuộc về chất ức chế của một họ protein apoptosis, ức chế hoạt động apoptotic và ngăn chặn sự chết của tế bào (25). Nhắm mục tiêu Survivin đã được xác định là một phương pháp mới để điều trị ung thư biểu mô tế bào thận (26). nF-κB cũng là một chất ức chế quá trình apoptosis có vai trò trong các quá trình kháng khối u (27). Hơn nữa, hoạt hóa caspase3 có liên quan chặt chẽ với quá trình apoptosis (28). Trong nghiên cứu này, hàm lượng protein của TreM2, Survivin và caspase3 phân cắt trong tế bào HK ‑ 2 đã được định lượng. Mức độ biểu hiện TREM2 đã giảm đáng kể trong ô oeHBX cộng với siTreM 2-1 / 2 so với ô oeHBX cộng với ô sinc (Hình 4B). Mức độ biểu hiện Survivin đã tăng lên đáng kể trong các ô oeHBX cộng với siTreM 2-1 / 2 so với các ô oeHBX. ngoài ra, mức độ biểu hiện caspase3 bị phân cắt đã giảm đáng kể trong các tế bào oeHBX cộng với siTreM 2-1 / 2 so với các tế bào oeHBX cộng với sinc (Hình 4B). Hơn nữa, oeHBX làm giảm đáng kể sự chuyển vị của NF ‑ κB vào hạt nhân, và sự chuyển nạp siTREM2‑1 / 2 làm tăng đáng kể sự chuyển vị của hạt nhân nF-κB (Hình 4B). Kết hợp lại với nhau, các kết quả cho thấy TreM2 là một yếu tố cuối cùng của HBX trong tế bào HK -2, do đó, HBX có thể thúc đẩy quá trình apoptosis bằng cách điều chỉnh sự biểu hiện TreM2 trong rTec của người.

TREM2 biểu hiện quá mức đàn áp các sự chuyển vị củaNF‑κB đến các nhân tế bào Trong HK ‑ 2 tế bào.Tác dụng của ecH(echinacoside từ cistanche)trên oeTreM 2- tế bào được truyền đã được phân tích. Sự biểu hiện quá mức của TreM2 đã thúc đẩy quá trình apoptosis của tế bào HK -2 (Hình 5a). Quá trình apoptosis của các tế bào oeTREM2 đã giảm đáng kể khi điều trị bằng ECH (E10; Hình. 5A). Hơn nữa, ECH làm giảm đáng kể sự biểu hiện của TreM2 trong các tế bào oeTreM2. Sự biểu hiện quá mức của TREM2 làm giảm đáng kể mức độ biểu hiện của Survivin, tuy nhiên, sự giảm biểu hiện này đã bị ecH đảo ngược. ngoài ra, mức độ biểu hiện protein của caspase3 bị phân cắt đã tăng lên đáng kể trong tế bào oeTreM2 so với tế bào oenc; một hiệu ứng đã giảm đáng kể khi điều trị bằng ECH. Hơn nữa, ecH thúc đẩy sự chuyển vị của nF-κB vào nhân trong tế bào oeTreM2 (Hình 5B). Tổng hợp lại, các kết quả chỉ ra rằng ecH cũng ngăn chặn chức năng của TreM2 trong các tế bào rTec của con người.

Chức năng HBX là bị đàn áp qua các NF‑κB chất ức chế PDTCTrong Nhân loại RTEC.Để đánh giá thêm mối quan hệ giữa

Tế bào HBX và nF-κB, HK-2 được nuôi cấy với chất ức chế nF-κB cụ thể, PdTc (10 µmol / l; P10). Tỷ lệ apoptosis của tế bào oeHBX đã tăng lên đáng kể so với tế bào oenc (Hình 6a). Tuy nhiên, tế bào oeHBX cộng với tế bào PdTc cho thấy tỷ lệ apoptosis tăng lên đáng kể so với tế bào oeHBX. Hơn nữa, mức độ biểu hiện mRNA và protein tương đối của TreM2 đã giảm trong tế bào oeHBX cộng với PdTc so với tế bào oeHBX (Hình 6B). Do đó, kết quả

đề xuất rằng nF-κB biểu hiện TreM2 điều hòa âm tính trong các tế bào được chuyển gen oeHBX.

NF‑κB chất ức chế PDTC đàn áp TREM2 người ủng hộ hoạt động Trong oeHBX tế bào.một trình báo cáo luciferase (pGl 3- booster-luc2) có chứa trình tự promoter kiểu dại của TreM2 (pGl 3- Enhanceer-luc 2- pTreM2) được xây dựng và sau đó được chuyển thành oenc, oeHBX và oeHBX cộng với tế bào nuôi cấy P10.

Hoạt động luciferase của vector báo cáo có chứa promoter TREM2 kiểu hoang dã đã tăng lên đáng kể trong tế bào oeHBX so với tế bào oenc. Tuy nhiên, PdTc đã ngăn chặn đáng kể hoạt động luciferase của phóng viên trong các tế bào oeHBX (Hình 7). Nhìn chung, kết quả chỉ ra rằng PdTc ức chế sự phiên mã của TreM2 bằng cách ngăn chặn hoạt động của promoter TreM2 trong các tế bào oeHBX.

Thảo luận

HBX chủ yếu được biểu hiện trong rTec của bệnh nhân HBV-Gn, và có chức năng như một yếu tố quyết định cơ chế bệnh sinh của virus (11,29). Do đó, việc nâng cao kiến ​​thức về chức năng của mạng lưới phân tử HBX là một bước quan trọng trong việc phát triển một phương pháp mới để điều trị HBV-Gn. Mục đích của nghiên cứu này là để kiểm tra thêm chức năng của HBX và khám phá mạng lưới phân tử tiềm năng của nó trong rTec của con người.

HBX ức chế sự gia tăng của rTecs (11). Trong nghiên cứu hiện tại, các chức năng chống tăng sinh và pro-apoptosis của HBX trong RTEC ở người đã được xác định, cho thấy rằng HBX ngăn chặn sự phát triển của rTec ở người. một nghiên cứu trước đây chỉ ra rằng ecH(echinacoside từ cistanche)ức chế sự nhân lên của HBV và biểu hiện kháng nguyên (19). trong nghiên cứu hiện tại, ecH(echinacoside từ cistanche)việc điều trị làm gián đoạn chức năng của HBX trong tế bào HK -2, do đó, HBX có thể bị ảnh hưởng bởi ecH trong tế bào HK -2.

Y học phân tử rePorTS 22: 1137-1144, 2020 1143

Hơn nữa, kết quả cho thấy rằng ecH(echinacoside từ cistanche)có thể đóng vai trò như một tác nhân điều trị tiềm năng đối với HBV-Gn.

TreM2 là một thụ thể miễn dịch bẩm sinh có vai trò trong phản ứng viêm (30). Trong nghiên cứu này, biểu hiện HBX có liên quan tích cực với biểu hiện TreM2 trong RTECS ở người. Hơn nữa, việc hạ gục TREM2 làm giảm đáng kể tỷ lệ apoptosis của các tế bào oeHBX và ecH(echinacoside từ cistanche)điều trị làm giảm tác dụng của oeTreM2 đối với quá trình tự chết của tế bào. Tổng hợp lại, những kết quả này gợi ý rằng TreM2 đã được HBX nhắm mục tiêu trong các ô HK -2. Do đó, ecH(echinacoside từ cistanche)có thể ức chế quá trình apoptosis của rTec ở người bằng cách ngăn chặn hoạt động của con đường tín hiệu HBX / TreM2.

Một báo cáo trước đây đã chứng minh rằng nF-κB, không chỉ đóng một vai trò trong quá trình tự chết của tế bào mà còn tham gia vào việc điều chỉnh các phản ứng miễn dịch và phản ứng viêm (31). Hơn nữa, TreM2 được trung gian bởi microRNA nhạy cảm với nF-κB -34 a trong bệnh Alzheimer và thoái hóa điểm vàng (32,33). trong nghiên cứu hiện tại, tỷ lệ apoptotic của các tế bào oeHBX đã tăng lên đáng kể khi có PdTc. Theo hiểu biết tốt nhất của chúng tôi, nghiên cứu này lần đầu tiên đề xuất rằng chất ức chế NF ‑ κB PdTc đã ngăn chặn hoạt động của promoter TreM2. Hơn nữa, các kết quả cho thấy TreM2 điều chỉnh tiêu cực sự chuyển vị của nF-κB vào nhân trong tế bào HK -2, nhưng có liên quan tích cực với các mức biểu hiện caspase3 bị phân cắt. TreM2 đóng một vai trò ngược lại trong tế bào HK -2 với vai trò của nó trong tế bào u tủy xương và u thần kinh đệm ở nhân thoái hóa ở người (22,23). Do đó, nghiên cứu này cho rằng TreM2 có thể có các chức năng khác nhau trong các loại tế bào khác nhau của con người.

Kết hợp lại, nghiên cứu này không chỉ chỉ ra rằng nF-κB là một thành phần mới của lộ trình tín hiệu HBX / TreM2 mà còn gợi ý rằng nF-κB điều chỉnh tiêu cực sự biểu hiện TreM2 trong rTec của con người. Tuy nhiên, những hạn chế chính của nghiên cứu này là thiếuTrong vivothí nghiệm và dữ liệu lâm sàng. Do đó, xa hơnTrong vivovà các nghiên cứu lâm sàng được yêu cầu để xác nhận những phát hiện của nghiên cứu này.

trong nghiên cứu này, chức năng của ecH(echinacoside từ cistanche)đã được nghiên cứu và kết quả cho thấy những tác động tiềm tàng của ecH(echinacoside từ cistanche)trên các con đường tín hiệu trong rTec của con người. Hơn nữa, nghiên cứu hiện tại đã nâng cao kiến ​​thức hiện có về chức năng sinh học của ecH trong tế bào rTec của con người và cũng cho thấy tiềm năng của nó như một tác nhân điều trị mới cho HBV-Gn.

Người giới thiệu

1. Karayiannis P: Virus viêm gan B: virus học, sinh học phân tử, vòng đời và sự lây lan trong gan. Hepatology quốc tế 11: 1-9, 2017.

2. Seeger c và Mason WS: Sinh học vi rút viêm gan B. Microbiol Mol Biol phiên bản 64: 51-68, 2000.

3. Usama e, ana Maria S, W ray K và Fervenza Fc: Điều trị bệnh thận do virus viêm gan B. nephron clin Đoạn 119: c 41- c49, 2011.

4. Zhang Y, li J, Peng W, Yu G, Wang l, chen J và Zheng F: Viêm cầu thận cấp tính nhiễm trùng do HBV: báo cáo 10 trường hợp. PloS one 11: e0160626, 2016.

5. Slagle Bl và Bouchard MJ: Virus viêm gan B X và quy định biểu hiện gen của virus. Lạnh Xuân Harb Perspect Med 6: a021402, 2016.

6. Guerrieri F, Belloni l, d'andrea d, Pediconi n, le Pera l, Testoni B, Scisciani c, Floriot o, Zoulim F, Tramontano a,et al: Xác định toàn bộ hệ gen của các mục tiêu gen HBx trực tiếp. Bộ gen BMc 18: 184, 2017.

7. Shi T, Hua Q, Ma Z và lv Q: sự điều hòa giảm của mir -200 a -3 p do protein X (HBx) của virus viêm gan B gây ra thúc đẩy sự tăng sinh và xâm nhập tế bào trong liên quan đến nhiễm HBV ung thư biểu mô gan. Pathol resract Pract 213: 1464-1469, 2017.

8. Tian Y, Xiao X, Gong X, Peng F, Xu Y, Jiang Y và Gong G: HBx thúc đẩy tăng sinh tế bào bằng cách làm xáo trộn cuộc nói chuyện chéo giữa mir -181 a và PTen. Đại diện khoa học 7: 40089, 2017.

9. Idris Me, Hachem H, Koering c, Merle P, Thénoz M, Montreux F, và Wattel e: HBx kích hoạt lão hóa tế bào hoặc tăng sinh tế bào tùy thuộc vào kiểu hình tế bào. J Vi-rút Gan 23: 130-138, 2016.

10. Wang X, Wang l, Zhu n, Zhou Y, Gu lJ và Yuan WJ: Protein X của virus viêm gan B điều chỉnh các phản ứng của tế bào T và đại thực bào gây ra biểu mô ống thận. Tế bào Immunol Biol 94: 266-273, 2016.

11. He P, Zhang d, li H, Yang X, li d, Zhai Y, Ma l và Feng G: Protein X của virus viêm gan B điều chỉnh quá trình apoptosis trong tế bào biểu mô ống thận ở người bằng cách kích hoạt con đường tín hiệu JaK2 / STaT3. int J Mol Med 31: 1017-1029, năm 2013.

12. Yang Y, Wang X, Zhang Y và Yuan W: Protein X của virus viêm gan B và các cytokine tiền viêm kết hợp với nhau để tăng cường quá trình apoptosis do tế bào ống thận gây ra bằng cách điều chỉnh dr4. int J Biochem cell Biol 97: 62-72, 2018.

13. He P, Zhou G, Qu d, Zhang B, Wang Y và li d: HBx ức chế sự tăng sinh và gây apoptosis thông qua điều hòa Fas / Fasl trong tế bào biểu mô ống thận chuột. J nephrol 26: 1033, 2013.

14. Han W, luo M, He M, Zhu Y, Zhong Y, ding H, Hu G, liu l, chen Q và lu Y: Chuyển gen HBx ảnh hưởng đến chu kỳ của tế bào biểu mô ống thận sơ cấp thông qua điều hòa sự biểu hiện cyclin. Mol Med đại diện 18: 1947-1954, 2018.