Liên hệ: emily.li@wecistanche.com

Ảnh hưởng của Cistanche Desertica Polysaccharides đối với chức năng học tập và trí nhớ và siêu cấu trúc của tế bào thần kinh não ở chuột lão hóa thực nghiệm

SUN Yun và cộng sự

Mục tiêu TÓM TẮTĐể quan sát ảnh hưởng củaCistanchesa mạcpolysaccharid(CDP) trênchức năng học tập và ghi nhớvà siêu cấu trúc não ở chuột già thí nghiệm. Phương pháp: CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)được sử dụng trong dạ dày 50 hoặc 100 mg / kg mỗi ngày trong 64 ngày liên tiếp cho những con chuột mô hình lão hóa thực nghiệm được gây ra bởi D-galactose, sau đóchức năng học tập và ghi nhớchuột được ước tính bằng thử nghiệm bước xuống và thử nghiệm mê cung Y; các bào quan của mô não và siêu cấu trúc não được quan sát bằng kính hiển vi điện tử truyền qua và sức mạnh thể chất được xác định bằng bài kiểm tra bơi lội. Kết quả: CDP rõ ràng có thể nâng caochức năng học tập và ghi nhớ(FV 0. 01) và kéo dài thời gian bơi (P<0. 05),="" de­crease="" the="" number="" of="" lipofuscins="" and="" slow="" down="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" in=""><0.05), and="" improve="" the="" degeneration="" of="" cerebral="" ultra-structure="" in="" aging="" mice.="" qmdusion:="" cdp="">(Cistanchesa mạcpolysaccharid)có thể cải thiện chức năng sinh lý bị suy giảm và làm giảm bớt sự thay đổi hình thái não ở chuột già thí nghiệm.

TỪ KHÓAsự lão hóa,chức năng học tập và ghi nhớ, Cistanche Destica polysaccharid, siêu cấu trúc, D-galactose

Cistanchesa mạc, một loại thảo dược được ca tụng là 'nhân sâm từ sa mạc', có tác dụng đặc biệt trong việc bồi bổ xương, tủy và kéo dài tuổi thọ, và tác dụng chống lão hóa của nó đã được các nghiên cứu dược lý hiện đại khẳng định "). Quá trình lão hóa tự nhiên bắt đầu từ việc học và suy giảm trí nhớ, tiếp theo là những thay đổi thoái hóa trong cấu trúc sinh học và hình thái học. Trong bài viết này, mô hình chuột lão hóa do D-galactose gây ra đã được sử dụng để quan sát tác động củaCistanchesa mạcpolysaccharid(CDP) trênchức năng học tập và ghi nhớvà sức mạnh thể chất cũng như siêu cấu trúc của các mô não. Kết quả được báo cáo như sau.

Cistanche có nhiều chức năng. Bấm vào đây để biết thêm

PHƯƠNG PHÁP

Động vật

Chuột ICR, 2 tháng tuổi, bằng kính trong, nửa đực nửa cái, nặng 20 - 22g, được mua từ Trung tâm Động vật Thực nghiệm của Đại học Dương Châu (Chứng nhận số 98002). Mười con chuột được nhốt trong mỗi buồng, và tất cả các con vật đều được tự do tiếp cận thức ăn và nước uống.

Thuốc thử

D-galactose, được mua từ Nhà máy Dược phẩm số 2 Thượng Hải, được trộn với nước muối thông thường thành 5 g / L và để trong tủ lạnh ở nhiệt độ 4 độ. CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)do Viện thực vật hoang dã Nam Kinh cung cấp, sử dụng nước cất để pha thành 2,5 g / L và 5. 0 g / L. Bộ dụng cụ bước xuống và thiết bị Y-mê cung là sản phẩm của Công ty Thiết bị Y tế Haodun Thượng Hải.

Bản sao mô hình lão hóa và thiết kế thử nghiệm1,3,

Những con chuột ICR được chia ngẫu nhiên thành 4 nhóm: nhóm đối chứng (những con chuột bình thường), nhóm mô hình lão hóa; CDP liều cao(Cistanchesa mạcpolysaccharid)nhóm và CDP liều thấp(Cistanchesa mạcpolysaccharid)nhóm, 55 con chuột trong mỗi nhóm. Đối với nhóm đối chứng, 10 ml - kg -1. d _1 nước muối thông thường đã được tiêm dưới da cho mỗi con chuột. Đối với các nhóm khác là 50 mg. kg -1 - d _1 D-galactose được tiêm vào cơ thể mỗi con vật trong 42 ngày để nhân đôi mô hình lão hóa. Từ khi bắt đầu sao chép, 20 ml - kg -1 - d -1 nước muối thông thường đã được sử dụng trong dạ dày cho mỗi con vật thuộc nhóm mô hình già và 50 mg • kg -1 • d {{16 }} và 100 mg - kg -1 - d -1 CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)được tiêm trong dạ dày cho mỗi con chuột trong CDP liều thấp(Cistanchesa mạcpolysaccharid)nhóm (Nhóm điều trị I) và CDP liều cao(Cistanchesa mạcpolysaccharid)nhóm (Nhóm điều trị U) tương ứng trong 64 ngày.

Sáu giờ sau lần uống thuốc cuối cùng, 30 con chuột từ mỗi nhóm tương ứng được lấy để kiểm trachức năng học tập và ghi nhớbằng bài kiểm tra từng bước và bài kiểm tra Y-maze, 15 cho mỗi bài kiểm tra. Thử nghiệm bơi để đánh giá khả năng chịu đựng thể chất của chuột được tiến hành 2 giờ sau lần dùng thuốc cuối cùng với 15 con chuột từ mỗi nhóm. Bên cạnh đó, 10 con chuột từ nhóm đối chứng, nhóm mô hình và nhóm xử lý H lần lượt bị giết khi kết thúc thí nghiệm để kiểm tra hình thái mô.

Kiểm tra từng bước ⑷

Chuột được đưa vào buồng ứng phó để thích nghi với môi trường trong 3 phút, sau đó bắt đầu huấn luyện bằng cách nối điện vào buồng. Con chuột được an toàn khi ở trên bệ, nhưng khi nó nhảy xuống đáy buồng (một sai lầm), kích thích điện 36 V sẽ buộc chuột phải nhảy trở lại bệ. Quá trình đào tạo trải qua 5 phút, số lần phạm lỗi tích lũy trong vòng 5 phút đã được ghi lại. Thử nghiệm chính thức được thực hiện 24 giờ sau đó để kiểm tra khả năng của con chuột trong việc tìm kiếm khu vực an toàn để thoát khỏi kích thích điện. Con chuột đã được đặt trên nền tảng và thời gian tiềm ẩn trước khi mắc lỗi đầu tiên (thời gian ở lại nền tảng) và số lần mắc lỗi tích lũy trong vòng 5 phút đã được ghi lại.

Kiểm tra mê cung

Mê cung chữ Y là một mê cung có ba ngăn được sắp xếp xuyên tâm với đáy làm bằng các thanh đồng và mở vào nhau. Một đèn được đặt ở phía trên và một nguồn điện được nối với phía dưới của mỗi buồng. Đèn sẽ sáng khi mạch điện bị đứt, và khi đó buồng là khu vực an toàn đối với động vật. Đặc biệt, khi mạch điện được cấp điện, buồng tối sẽ trở thành vùng kích thích điện, sẽ gây tổn thương điện cho con vật. Đầu tiên, con chuột được đặt vào mê cung Y trong 2 phút để tự thích nghi với môi trường, sau đó mạch điện (36 —40 V) tại buồng chuột ở được kết nối để buộc con chuột phải thoát ra khu vực an toàn. Quá trình huấn luyện được lặp lại 15 lần để củng cố bộ nhớ vùng an toàn phụ thuộc vào ánh sáng trên chuột. Sau đó, số lần đúng và sai của 10 bài kiểm tra được ghi lại để ước tính tỷ lệ đúng.

Kiểm tra Bơi lội (1)

Con chuột được đặt vào một cái thùng cao 28 cm và chứa đầy nước ở nhiệt độ 15 độ, nó sẽ bơi trong nước cho đến khi kiệt sức và chết đuối. Thời gian từ khi thả xuống nước đến khi ngập nước được tính là thời gian bơi, được sử dụng để đánh giá khả năng chịu đựng vật lý của chuột.

Chuẩn bị Mẫu Đánh giá Hình thái-Lịch sử ⑶

Mười con chuột được lấy từ nhóm đối chứng, nhóm mô hình lão hóa và nhóm Điều trị II lần lượt bị chặt đầu và vỏ não trái của mỗi con chuột được đưa ra ngoài, được cố định gấp đôi bởi 4% glutaral và 1% axit osmic, khử nước nhanh chóng bằng axeton, được nhúng bởi Epon 812, nhuộm bởi nhuộm Pb-U. Các bào quan chính được quan sát dưới kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM, Hitachi H -300, Nhật Bản).

Phân tích thống kê

Dữ liệu được biểu thị dưới dạng x cộng với s. So sánh thống kê các kết quả được thực hiện với kiểm định t theo cặp.

KẾT QUẢ

Ảnh hưởng của CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)về Chức năng Học tập và Trí nhớ

Kiểm tra bước xuống cho thấychức năng học tập và ghi nhớcủa những con chuột già giảm nhiều hơn đáng kể so với những con của nhóm đối chứng, biểu hiện là thời gian chờ rút ngắn và số lần mắc lỗi tích lũy tăng lên. Thời gian chờ kéo dài và số lần mắc lỗi tích lũy giảm ở nhóm điều trị I và U; một sự khác biệt đáng kể được tìm thấy khi so sánh với nhóm người mẫu già. Kết quả cho thấy CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)rõ ràng có thể cải thiệnchức năng học tập và ghi nhớ. Xem Bảng 1.

Kết quả của bài kiểm tra Y-mê cung tương tự như bài kiểm tra bước xuống, cho thấy tỷ lệ ghi nhớ an toàn chính xác đã giảm ở những con chuột già. Một sự khác biệt đáng kể tồn tại khi nhóm điều trị I và H được so sánh với nhóm mô hình, cho thấy tỷ lệ ghi nhớ an toàn đúng được tăng lên sau CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)sự đối đãi.

Ảnh hưởng của CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)về khả năng chịu đựng thể chất

Thời gian bơi ở chuột già đã rút ngắn đáng kể so với ở nhóm đối chứng. Nó được chỉ ra rằng chỉ một liều cao CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)có thể kéo dài đáng kể thời gian bơi, do đó, có chức năng chống mệt mỏi. Xem Bảng 2.

Ảnh hưởng của CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)trên các bào quan trong tế bào thần kinh não

Dưới kính hiển vi điện tử, 10 tế bào thần kinh của mỗi mẫu được quan sát và số lượng bào quan được đo⑷. Kết quả cho thấy nồng độ lipofuscin và lysosome tăng lên trong tế bào thần kinh, số lượng ty thể và phức hợp Golgi giảm ở nhóm người mẫu lão hóa. Hai tiêu chí đã được phục hồi ở một mức độ nhất định sau khi CDP liều lớn(Cistanchesa mạcpolysaccharid)sự đối đãi. Xem Bảng 3.

Ảnh hưởng của CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)trên Mô não Siêu cấu trúc

Nó được chỉ ra rằng các crista ti thể bị phá vỡ và phân bố thưa thớt với sự thoái hóa không bào. Số lượng cơ thể NissP bị giảm, và sự thoái hóa xuất hiện trong một số mạng lưới nội chất có bề mặt thô ráp, hạt glycogen bị giảm, túi Golgi dẹt.phức tạp hơi giãn ra, với số lượng synap giảm, và số lượng synapicle trong thành phần trước synap giảm. Xem Hình 1.

Hình 1 Ti thể phình ra và khớp thần kinh của nó biến mất trong tế bào thần kinh. Nhóm mô hình lão hóa 10, 000

Những thay đổi thoái hóa đã giảm nhẹ sau CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)điều trị bằng cách tăng rõ ràng nucleopore, các cơ quan và quá trình NissPs, và giảm lipofuscin. Xem Hình 2 và 3.

Hình 2 Các cơ quan của tế bào thần kinh Nissl xuất hiện trở lại và một số lipofuscin vẫn có thể được nhìn thấy. Nhóm điều trị II, X 10, 000

Hình 3 Lỗ nhân tăng lên và có thể nhìn thấy nucleolus trong tế bào thần kinh, tế bào chất rất phong phú. Nhóm điều trị K, X 10, 000

THẢO LUẬN

The mechanism of E>-galactose trong việc gây lão hóa dựa trên lý thuyết gốc tự do gây lão hóa. Kết quả là, D-galactose có thể làm tăng hàm lượng gốc tự do trong sinh vật và làm suy giảm chức năng của các cơ quan do quá trình oxy hóa gây ra. Ti thể là "nhà máy sản xuất năng lượng" của tế bào, có thể tạo ra rất nhiều gốc tự do trong quá trình hô hấp, và nó có thể dễ dàng bị các gốc tự do này tấn công. Ti thể của một sinh vật già rất dễ bị tổn thương bởi các gốc tự do, tổn thương không thể sửa chữa được do không có khả năng sửa chữa.), Và sẽ ngày càng trầm trọng hơn cho đến khi chết cuối cùng. Lipofuscin là một dấu hiệu quan trọng của sự lão hóa, sự sản sinh của nó liên quan mật thiết đến tác hại của các gốc tự do, vì lý do này, nó thường được sử dụng như một tiêu chí trong việc đánh giá mức độ lão hóa.

Kết quả của nghiên cứu này cho thấy CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)với liều lượng cao có thể nâng cao khả năng chịu đựng thể chất ở chuột già và cải thiệnchức năng học tập và ghi nhớ, và làm giảm mức độ tổn thương của siêu cấu trúc não. Tất cả những kết quả này đều trùng hợp với nghiên cứu trước đây của chúng tôi (1,2) và chỉ ra rằng CDP(Cistanchesa mạcpolysaccharid)có thể kéo dài tuổi thọ, tác dụng chống lão hóa của nó có thể liên quan đến khả năng chống oxy hóa và tác dụng quét gốc tự do⑵ để ổn định hệ thống màng và giữ một môi trường nội bào ổn định.

Từ: 'Ảnh hưởng của Cistanche Desertica Polysaccharides lên chức năng học tập và trí nhớ và cấu trúc siêu tế bào thần kinh não ở chuột lão hóa thực nghiệm' của SUN Yun và cộng sự

--- CJIM2001; 7 (4) =288--292

NGƯỜI GIỚI THIỆU

1. MẶT TRỜI Y, LIN AP, ZHANG HQ. Nghiên cứu o £ Tân CươngCistanchesa mạcchống lại các tổn thương do quá trình oxy hóa gây ra bởi các gốc tự do. Trung Quốc J Vật liệu Trung Quốc Medica 1994; 19 (7): 433.

2. SUN Y, WANG DJ, SHEN SQ, et al. Quan sát Tân CươngCistanche sa mạctrên tế bào gan và vỏ não của chuột lão hóa bằng kính hiển vi điện tử truyền qua. Nghiên cứu Thuốc cổ truyền Trung Quốc 1997; 8 (1) * 30.

3. GONG GQ, XU FB. Nghiên cứu về mô hình lão hóa ở chuột. J Đại học Dược Trung Quốc 1991; 22 (2): 101.

4. LI YK. Phương pháp thực nghiệm thảo dược Trung Quốc trong Dược học. Thượng Hải: Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ thuật 1991: 172.

5. ZENG ZH, ZHANG ZY. Quá trình oxy hóa phá hủy DNA ty thể và lão hóa bởi các gốc tự do. Progr Biochem and Biophys 1995; 22 (5): 430.