Ảnh hưởng của Cistanche đến tổn thương chức năng của phổi, gan và tuyến ức ở chuột bị nhiễm trùng huyết
Dec 05, 2021
trừu tượng
Mục tiêu: Nghiên cứu tác dụng của dịch chiết Cistanche đối với bệnh cấp tínhGan, tổn thương chức năng phổi và tuyến ức ở chuột bị sốc nhiễm trùng, và để khám phá cách điều trị sốc nhiễm trùng.
Phương pháp: Sử dụng phương pháp thắt và thủng manh tràng (CLP) để nhân rộng mô hình sốc nhiễm trùng, quan sát diễn biến bệnh lý củaGan, phổi và mô tuyến ức, đồng thời xác định các chỉ số sinh học của tổn thương gan, phổi và tuyến ức cấp tính và ảnh hưởng củaCistanchetrích xuất.
Kết quả: Sau CLP ở chuột, trạng thái III của ti thể, tỷ lệ P / O và tỷ lệ kiểm soát hô hấp của tế bào gan ở nhóm nước muối bình thường giảm đáng kể, và hoạt động natri-kali canxi magiê-ATPase của màng ti thể giảm đáng kể; tỷ lệ trọng lượng ướt / khô của phổi, thông tin phế nang Chỉ số thẩm thấu, tính thấm mao mạch phổi và malondialdehyde của mô phổi tăng lên đáng kể, và giảm rõ rệt superoxide dismutase; tỷ lệ apoptosis của tế bào giáp và phân mảnh DNA tăng lên đáng kể. bên trongCistanchenhóm điều trị, các chỉ số trên được cải thiện rõ rệt so với nhóm truyền nước muối sinh lý thông thường, đạt hoặc tiệm cận mức của nhóm phẫu thuật nhân tạo.
Sự kết luận:Cistanchecó tác dụng bảo vệ tốt đối với cấp tínhGan, phổi, vàchấn thương tuyến ứcở chuột bị sốc nhiễm trùng. Cơ chế của nó có thể là giảm tác hại của các gốc oxy tự do đối với các mô, cải thiện chức năng màng tế bào, cải thiện chức năng miễn dịch và khả năng căng thẳng của cơ thể.
Từ khóa:
chiết xuất thực vật / dược họcCistanchenhiễm trùng huyết sa mạc / dược lý / sốc biến chứng, nhiễm trùng huyết / chuột trị liệu thuốc bắc.
Nghiên cứu này đã quan sát những tác động củaCistanchetrên mô hình sốc nhiễm trùng ở chuột bị phổi cấp tính,Gan, và tổn thương tuyến ức và các cơ quan khác, cố gắng bảo vệ chức năng tế bào như một bước đột phá, hãy khám phá tác dụng và cơ chế củaCistanchetrong nhiễm trùng huyết, để phát triển các loại thuốc điều trị bảo vệ hiệu quả cho nhiễm trùng huyết Hãy khám phá hữu ích.
Vui lòng liên lạc để biết thêm thông tin:Joanna.jia@wecistanche.com
Cistanche tubulosa ngăn ngừa bệnh thận, bấm vào đây để lấy mẫu
1. Vật liệu và phương pháp
1.1 Thuốc, thuốc thử và thuốc dụng cụ:
Natri pentobarbital (Công ty Thuốc thử Hóa chất Thượng Hải của Tập đoàn Dược phẩm Quốc gia Trung Quốc), bộ dụng cụ malondialdehyde (MDA), bộ superoxide dismutase (SOD), thuốc thử ATPase (Viện Kỹ thuật Sinh học Nam Kinh Jiancheng),CistancheThẩm định bởi Tiến sĩ Wang Chizhi từ Khoa Y học Cổ truyền Trung Quốc, Đại học Tam Hiệp) Thuốc sắc nước, Evans Blue. Dụng cụ: Kính hiển vi điện tử truyền qua Hitachi H -600, máy đo tế bào dòng chảy (EPICS, Beckman Coulter), máy quang phổ loại 721.
1.2 Chuẩn bị chiết xuất Cistanche Desticola
Trích xuất củaCistanche\ được chuẩn bị bằng phương pháp lọc. Lấy 200g khối lượng khô củaCistanche, cho vào cốc, thêm nước cất theo tỷ lệ 1: 1O, ngâm từ 30 phút đến 1 giờ, đun trên bếp điện trong 1 giờ, lọc, lặp lại quy trình 2 lần. Dịch lọc thu được được đun nóng để bay hơi và cô đặc đến 1g / mL, sau đó đậy kín và bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ 4 để sử dụng sau.
1.3 Động vật và mô hình động vật nhiễm trùng huyết
Những con chuột SD đực khỏe mạnh (do Trung tâm Động vật Thực nghiệm của Đại học Khoa học và Công nghệ Hoa Trung cung cấp, nặng 200 25 og. Các con vật này được chia ngẫu nhiên thành 3 nhóm, một nhóm hoạt động giả tạo (, z -8), nhóm kiểm soát độ mặn bình thường (, z -8) vàCistanchesa mạcnhóm (một 8). Nhóm vận hành giả và nhóm đối chứng được cung cấp nước muối bình thường (1. 0 mL / kg) theo thiết bị, và nhóm quản lý được cho 1 g / mL (liều dùng 200 mg / kg) củaCistanchebằng gavage, ld 2 lần, và cho ăn sinh lý trong 15 ngày. Nhóm kiểm soát mặn vàCistanche sa mạcnhóm sử dụng phương pháp thắt và thủng manh tràng để nhân rộng mô hình nhiễm trùng huyết. Trước khi mổ, các con vật được uống nước miễn phí và nhịn ăn trong 12 giờ.
1.4 Đo lường hoạt động ATPase của ty thể ở gan chuột và chức năng hô hấp của ty thể ở gan
16 giờ sau khi mổ, 6g chuộtGannhanh chóng được đặt trong môi trường phân tách {{0}} độ (25 {0 mmol sucrose, 2 mmol ethoxy-ethyl piperazine 2- axit ethyl sulfonic, 0,1 mmol axit etylendiaminetetraacetic, pH 7.4), sử dụng tỷ lệ khác biệt Ti thể chuột được chuẩn bị bằng cách tách ly tâm ở nhiệt độ thấp. Sử dụng phương pháp xác định photpho [2 để đo hoạt tính của ATPase. Phương pháp điện cực oxy Clark [3] được sử dụng để ghi lại đường cong phản ứng oxy hóa khử của ty thể với máy đo oxy hòa tan JYD-IA, và tốc độ hô hấp của giai đoạn III và giai đoạn IV, tốc độ kiểm soát hô hấp (RCR) và tỷ lệ phốt pho-oxy ( ADlP / 0) đã được tính toán.
1.5 Mô học phổi chuột và đo chức năng phổi
Sau 16 giờ, đã mở lồng ngực và đưa ra ngoài thùy phổi trái. Sau khi cân khối lượng ướt, nó được nướng trong lò (80 độ, 20h) cho đến khi khối lượng không đổi, và khối lượng khô được tính. Đối với hàm lượng protein, tính chỉ số tính thấm của phổi (protein dịch rửa phế nang / ga huyết tương protein, LPI). Theo phương pháp Evans blue tiêm vào tĩnh mạch được giới thiệu bởi Zhou et al. [4], những thay đổi trong tính thấm thành mạch phổi của chuột (PVP) đã được đo. Phương pháp Ls axit thiobarbituric (TBA) được sử dụng để xác định hoạt tính của malondialdehyde (MDA) trong mô phổi chuột. Sử dụng phương pháp xanthine oxidase [6 để xác định hoạt tính của SOD.
1.6 Mô tuyến ức
Kiểm tra thực thể và xác định tỷ lệ chết của tế bào 2 đến 3 con chuột trong mỗi nhóm được hiến tế tại thời điểm tương ứng sau khi phẫu thuật, tuyến ức nguyên vẹn được phân lập, và làm các đoạn parafin thường quy, nhuộm HE và quan sát dưới kính hiển vi ánh sáng; 2.5 Cố định glutaraldehyde, Làm mặt cắt kính hiển vi điện tử và quan sát bằng kính hiển vi điện tử truyền qua. Một sự chuẩn bị khác của huyền phù tế bào thymocyte, phát hiện dòng chảy tế bào của số lượng tế bào nằm trong vùng apoptotic, lấy phần trăm tế bào apoptotic. Theo Burton và cộng sự. Phương pháp L7] (phương pháp diphenylamine), đầu đọc vi tấm phát hiện và tính toán tỷ lệ phân mảnh DNA bộ gen của tế bào thymocyte.
1.7 Xử lý thống kê
Dữ liệu thực nghiệm được biểu thị dưới dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn ± s). Phần mềm SPSS thực hiện phân tích một chiều phương sai và phân tích tương quan. P<0.05 indicates="" a="" statistical="">
2. Kết quả
2.1 Những thay đổi về trạng thái ty thể gan, RCR và nhóm kiểm soát tỷ lệ P / O
Nhịp thở ở trạng thái III thấp hơn đáng kể so với nhịp thở của nhóm vận hành giả (P<0.01). the="" breathing="" rate="" of="" state="" iv="" was="" not="" significantly="" changed="" compared="" with="" that="" of="" the="" sham="" operation="" group.="" as="" a="" result,="" the="" rcr="" of="" the="" control="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" of="" the="" sham="" operation="" group=""><0.01). the="" rcr="" in="" the="">Cistanchenhóm điều trị gần gũi hơn với nhóm hoạt động giả mạo. Tỷ lệ ADP / 0 ở nhóm đối chứng giảm và tỷ lệ của nhóm điều trị Cistanche hồi phục. So với nhóm hoạt động giả mạo, có một sự khác biệt đáng kể (P<>
2.2 Tác dụng của Cistanche đối với hoạt động của ATPase ty thể
Hoạt động canxi-ATPase, natri-kali ATPase, magie-ATPase và canxi-magie-ATPase của màng ti thể của tế bào gan trong nhóm đối chứng thấp hơn đáng kể so với nhóm hoạt động giả. Các hoạt động enzyme củaCistanchenhóm điều trị cao hơn đáng kể so với nhóm chứng tương ứng, đạt mức của nhóm hoạt động giả.
2.3 Tác dụng của Cistanche đối với quá trình apoptosis của tế bào tuyến giáp
Kết quả đo tế bào dòng chảy cho thấy so với nhóm phẫu thuật giả, quá trình apoptosis của tế bào tuyến giáp trong nhóm đối chứng tăng đáng kể sau khi phẫu thuật, trong khiCistancheChiết xuất từ sa mạc mạc có thể làm giảm hiệu quả tỷ lệ apoptosis, và tỷ lệ phân mảnh DNA tương tự như tỷ lệ được phát hiện bằng phương pháp đo tế bào dòng chảy. Kết quả về cơ bản là giống nhau (Bảng 4).
2.4 Ảnh hưởng của Cistanche đối với những thay đổi mô học của tuyến ức
Quan sát tuyến ức bằng parafin trong nhóm phẫu thuật giả cho thấy không có thay đổi bệnh lý rõ ràng. Tế bào tuyến giáp phân bố dày đặc trong vỏ tuyến ức, nhân tròn, màu xanh đậm, ít bào tương; sau khi chuyển sang tủy, nhân dần trở nên lớn hơn, và chiếm ưu thế hơn cả là các tế bào lưới biểu mô bắt màu nhạt. Trong nhóm đối chứng, vỏ não của động vật được cấu tạo thưa thớt bởi các tế bào, tế bào lympho giảm và đại thực bào tăng lên. Khu trú hoại tử và các mảnh tế bào rải rác được nhìn thấy tại chỗ. Các tế bào tủy của tuyến ức giảm không đáng kể, và các tế bào này phân bố dày đặc hơn vùng vỏ, tạo thành hiện tượng gọi là “đảo ngược vỏ não - tủy”. Các mảnh tế bào hình giáp của các động vật trongCistanchenhóm -administered đã giảm đáng kể, và hiện tượng "đảo ngược vỏ não và bột giấy" cũng được cải thiện đáng kể.
Quan sát bằng kính hiển vi điện tử của nhóm chứng cho thấy hầu hết thể tích tế bào đều giảm, bề mặt tế bào bị co lại, phồng rộp, chất nhiễm sắc kết tụ, một số tế bào hình lưỡi liềm, hình thành thể apoptotic, thường gặp hiện tượng hoại tử và ly giải tế bào. bên trongCistanchenhóm điều trị, sự thay đổi hình thái tế bào giảm rõ rệt, cải thiện rõ rệt hiện tượng hoại tử và ly giải tế bào.
3. Thảo luận
Các hội chứng rối loạn chức năng đa cơ quan là nguyên nhân cơ bản dẫn đến tình trạng không hồi phục và tỷ lệ tử vong cao ở giai đoạn muộn của sốc nhiễm trùng. Bảo vệ chức năng cơ quan có ý nghĩa to lớn để giảm tỷ lệ tử vong lâm sàng cao do sốc nhiễm trùng. Cistanche là một loại thuốc nam truyền thống của Trung Quốc của nước ta. Nó được xuất bản lần đầu tiên trong "Shenlong Materia Medica". Là một trong những vị thuốc Đông y nổi tiếng trong việc bồi bổ nguyên khí, dưỡng huyết, bổ thận, tráng dương. Các nghiên cứu dược lý hiện đại đã chỉ ra rằng nó có thể cải thiện chức năng miễn dịch của cơ thể và căng thẳng, thúc đẩy tổng hợp DNA, chống lại bức xạ 7, chống lão hóa, tăng tốc độ tổng hợp DNA của tế bào và bảo vệ tế bào mô. Các thành phần chính chứa trong nó bao gồm Cistanche Polysaccharide (cDPS) và D-mannitol, có khả năng loại bỏ các gốc tự do hiệu quả.Cistanchepolysaccharides cũng có thể thúc đẩy sự gia tăng của tế bào lympho T và B, và có thể đồng thời kích thích sự gia tăng của tế bào giáp chuột với ConA và PHA. Thí nghiệm này dựa trên quan điểm cơ bản là cải thiện và bảo vệ chức năng của các cơ quan quan trọng quan trọng trong sốc nhiễm trùng và ý tưởng về việc tăng cường cơ thể TCM, sử dụng các phương pháp phát hiện khách quan và nhạy cảm để quan sát tác động củaCistancheở trạng thái Ⅲ củaGanty thể ở chuột sốc nhiễm trùng, tỷ lệ kiểm soát hô hấp (RCR), tỷ lệ P / O, ATPase màng và chỉ số tính thấm của phổi, tính thấm thành mạch phổi, MDA mô phổi, hoạt động SOD, apoptosis của tế bào giáp. Kết quả thực nghiệm cho thấyCistancheCó thể tăng lênGanRCR ty thể, tỷ lệ P / O, tăng cườngGanchức năng hô hấp của ti thể, đẩy nhanh sự chuyển điện tử trong chuỗi hô hấp của ti thể, tăng mức độ kết hợp của quá trình phosphoryl hóa oxy hóa và hoạt động ATPase của màng, và tăng tổng hợp ATP nội bào. Trong nhóm dùng Cistanche, chỉ số tính thấm của phổi và tính thấm thành mạch phổi giảm đáng kể, hoạt tính malondialdehyde của mô phổi giảm, và superoxide dismutase tăng lên đáng kể. Người ta cho rằng Cistanche có thể làm giảm tác hại của các gốc oxy tự do đối với các tế bào mô phổi thông qua tác dụng chống oxy hóa của nó, và có tác dụng bảo vệ tốt đối với tổn thương phổi. Trong sốc nhiễm trùng, các tế bào tuyến giáp, đặc biệt là các tế bào lympho T chưa trưởng thành, một số lượng lớn quá trình apoptosis có thể làm giảm sự giải phóng các tế bào lympho trưởng thành vào các cơ quan lympho ngoại vi, và sau đó trực tiếp hoặc gián tiếp làm hỏng chức năng miễn dịch của cơ thể. Điều chỉnh quá trình apoptosis bất thường của tế bào thymocyte trong sốc nhiễm trùng có lợi cho việc nâng cao khả năng miễn dịch của cơ thể. Nghiên cứu thử nghiệm này cho thấy rằngCistanchechiết xuất có thể cải thiện đáng kể quá trình apoptosis của tế bào tuyến giáp, và có tác dụng bảo vệ đáng kể đối với tế bào tuyến giáp của động vật nhiễm trùng huyết. Hơn nữa, nó tăng cường khả năng miễn dịch của cơ thể trong quá trình nhiễm trùng và làm giảm tác hại của ngoại độc tố đối với các cơ quan quan trọng. Chúng tôi cũng nhận thấy rằng huyết áp của nhóm thuốc được cải thiện đáng kể, và tỷ lệ tử vong giảm đáng kể. Cistanche và Cistanche tăng cường chức năng của các tế bào gan và phổi và làm giảm quá trình apoptosis của các tế bào tuyến giáp. Có một mối tương quan tích cực đáng kể, cho thấy rằngCistanchecó thể cải thiện chức năng của các cơ quan quan trọng của cơ thể và tăng cường khả năng miễn dịch của cơ thể có thể là cơ sở dược lý quan trọng của Cistanche trong điều trị sốc nhiễm trùng.
Cistanchecó tác dụng bảo vệ đáng kể đối với tổn thương cơ quan cấp tính, và cơ chế của nó có thể là: ① chống lại quá trình peroxy hóa este màng, tăng cường tính ổn định của màng, và giảm tác hại của các gốc tự do đối với cấu trúc màng. ② Thúc đẩy quá trình tổng hợp axit nucleic của mô và làm chậm quá trình phân hủy và phá hủy axit nucleic, thúc đẩy quá trình tổng hợp protein, đẩy nhanh quá trình sửa chữa và tái tạo tế bào mô. ③Tăng cường chức năng miễn dịch của cơ thể và giảm các tổn thương cho cơ thể do các yếu tố gây bệnh gây ra. ④ Ức chế quá trình chết rụng của tế bào mô. ⑤Cải thiện vi tuần hoàn của cơ thể và đảm bảo cung cấp máu cho các cơ quan quan trọng.
Người giới thiệu
[1] Jin Huiming, mô hình nhiễm trùng huyết sau khi thắt và thủng manh tràng [J]. Tạp chí Sinh lý học Bệnh Trung Quốc, 1990, 6 (2): 126.
[2] 3 Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Các phương pháp thực nghiệm y học hiện đại [M]. Bắc Kinh: Nhà xuất bản Sức khỏe Nhân dân, l997: 342.
[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Phương pháp thực nghiệm y học hiện đại [M3. Bắc Bắc Kinh: Nhà xuất bản Sức khỏe Nhân dân, 1997: 508-510.
[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing, v.v. Kiểm tra sinh hóa lâm sàng hiện đại
[5]. Bắc Kinh: Nhà xuất bản Quân y Nhân dân, 2001: 896-899.
[6] He Weijing, Li Wei, Bi Zheng, v.v ... Phát hiện quá trình apoptosis ở tế bào bệnh bạch cầu Phương pháp Diphenylamine [J]. Tạp chí Kiểm tra Y tế Thượng Hải, 2001, 16 (3): 160.
