Ảnh hưởng của đái tháo đường đến chức năng tình dục, mô hình học và biểu hiện cơ bắp cơ bắp trong cơ thể hang động của dương vật ở chuột
Mar 05, 2025
Tóm tắt:
Khách quan:Để quan sátChức năng tình dục của bệnh tiểu đườngChuột mô hình và khám phá cơ chế có thể của rối loạn chức năng tình dục thứ phát gây ra bởi tăng đường huyết.
Phương phápNhững con chuột thử nghiệm được chia ngẫu nhiên thành nhóm trống (n =5) vàNhóm bệnh tiểu đường(n =15). Sau khi mô hình động vật bệnh tiểu đường được xây dựng thành công, chức năng tình dục của hai nhóm đã được đánh giá. Các đặc điểm mô học của tinh hoàn trong hai nhóm đã được quan sát. Biểu hiện của cơ -mooth Actin (-SMA) trong mô dương vật của hai nhóm đã được đo. Kết quả mức độ hormone giới tính trong huyết thanh đã giảm đáng kể (p<0.01). Histomorphological observation showed that in the diabetes group the interstitial tissue of testis was disordered; Compared with the blank group, the number of smooth muscle cells in the penis tissue was reduced, and the degree of fibrosis was aggravated. The expression of α-SMA positive cells in the diabetes group was significantly decreased (P<0.01).
Phần kết luậnMức độ giảm của hormone giới tính, số lượng tế bào cơ trơn giảm trong cơ thể dương vật của dương vật, sự biểu hiện giảm của -sma trong cơ thể dương vật của dương vật, cấu trúc rối loạn của mô kẽ của tinh hoàn, sự thay đổi hình thái của các tế bào cơ trơn và sự mắc bệnh gây bệnh xơ hóa. Khám phá chẩn đoán và điều trị bệnh này với các đặc điểm kiểu hình này sẽ có ý nghĩa lớn.
Từ khóa:Bệnh tiểu đường;rối loạn cương dương; chức năng tình dục; Hormone giới tính; - Biểu hiện Actin cơ trơn
Bổ sung thảo dược cho rối loạn cương dương do bệnh tiểu đường
Liên hệ với chúng tôi ngay bây giờ
Bệnh tiểu đường (DM)Từ lâu đã là một tiêu điểm của sự chú ý cả trong nước và quốc tế do tỷ lệ và tỷ lệ lưu hành cao [1]. Các biến chứng khác nhau gây ra bởi DM ảnh hưởng đáng kể đến chất lượng cuộc sống của bệnh nhân. Trong số này, tỷ lệ mắcRối loạn cương dương (ED)ở namBệnh nhân DMđược nâng cao rõ rệt. Hiện tại, DM đã trở thành một nhóm có nguy cơ cao cho ED [2 trận3]. Do đó, tiến hành các nghiên cứu chuyên sâu vềED do DM gây ra (DMED)giữ ý nghĩa lớn. Nghiên cứu này nhằm mục đích quan sát các tác động của DM đối với chức năng cương dương, hormone giới tính, mức độ biểu hiện của cơ -mooth Actin (-SMA) trong cơ thể hang động dương vật và hình thái của kẽ tinh hoàn vàcơ bắp mịn màng dương vậtCác mô ở chuột, khám phá sơ bộ cơ sở bệnh lý tiềm năng của ED gây ra bởi DM.
1 vật liệu và phương pháp
1.1 Động vật và thuốc thử thí nghiệm
Hai mươi con chuột SD đực SPF người trưởng thành có trọng lượng cơ thể đồng đều đã được chọn. Các thuốc thử thí nghiệm chính bao gồm streptozotocin (STZ) và apomorphin (APO), cũng như các kháng thể cần thiết để phát hiện biểu hiện -SMA. Nghiên cứu này đã được phê duyệt bởi Ủy ban Đạo đức và Phúc lợi Động vật của Bệnh viện Dongzhimen, Đại học Y khoa Trung Quốc Bắc Kinh (số 17-04).
1.2 Phương pháp thử nghiệm
1.2.1 Thiết lập mô hình chuột mắc bệnh tiểu đường
Twenty experimental SD rats were randomly divided into a control group (5 rats) and a diabetes group (15 rats). STZ was dissolved in citrate buffer to prepare a 10 mg/mL solution. The diabetes group was intraperitoneally injected with STZ solution at a dose of 55 mg/kg to induce the DM model rats. Blood glucose levels >16,7 mmol/L bất cứ lúc nào sau 5 ngày tiêm trong màng bụng STZ được coi là tiêu chuẩn cho việc thành lập mô hình DM thành công [4].
1.2.2 Kiểm tra chức năng cương dương ở chuột
Sau khi xác nhận mô hình DM thành công, những con chuột đã được cân và đặt trong một hộp thủy tinh trong suốt. Dung môi APO (100 UG/kg) được tiêm dưới da ở phía sau cổ dựa trên trọng lượng cơ thể. Môi trường xung quanh được giữ yên tĩnh, và ánh sáng trong nhà được điều chỉnh đến mức vừa đủ để quan sát sự cương cứng dương vật ở chuột. Số lượng cương dương dương vật trong vòng 30 phút sau khi tiêm và ghi lại dưới da. Tiêu chí cho sự cương cứng dương vật: Mở rộng dương vật, rút lại bao quy đầu, tiếp xúc với các glans kèm theo tăng huyết áp và đỏ, và khả năng hiển thị của các phân đoạn giữa và thấp hơn của dương vật.
1.2.3 Đo lường hormone giới tính ở chuột
Nồng độ hormone giới tính trong huyết thanh của hai nhóm được đo bằng phương pháp miễn dịch phóng xạ, theo các quy trình cụ thể được nêu trong các hướng dẫn bộ dụng cụ miễn dịch phóng xạ.
1.2.4 Quan sát mô bệnh học của mô kẽ tinh hoàn
Sau khi thu thập máu từ động mạch chủ bụng của chuột, tinh hoàn phải được chiết xuất đồng đều. Tinh hoàn được rửa bằng đệm PBS và cố định hoàn toàn trong paraformaldehyd trong 72 giờ. Các mô được nhúng trong parafin, được cắt, nhuộm bằng hematoxylin-eosin (H & E), và được quan sát cho các đặc điểm mô học.
1.2.5 Quan sát xơ hóa hình hang dương vật ở chuột
Sau khi thu thập máu từ động mạch chủ bụng, mô dương vật được cắt bỏ và rửa bằng đệm PBS. Các mô được cố định hoàn toàn trong paraformaldehyd trong 72 giờ, được nhúng vào parafin, cắt và nhuộm bằng trichrom của Masson. Hàm lượng tương đối của các sợi cơ/collagen mịn trong mô hang dương vật của mỗi nhóm được quan sát dưới kính hiển vi.
1.2.6 Đo lường mức độ biểu hiện -SMA trong mô hang dương vật
Các mô hang dương vật đã được khử trùng thường xuyên vào nước, được rửa bằng đệm PBS trong 5 phút và được sửa chữa nhiệt vi sóng trong bộ đệm citrate (pH 6. 0) trong 20 phút. Sau khi làm mát đến nhiệt độ phòng, mô được rửa ba lần bằng PBS, 3 phút mỗi lần. Một dung dịch hydro peroxide 3% được áp dụng trong phòng tối ở nhiệt độ phòng trong 15 phút, sau đó là rửa PBS. Kháng thể -SMA sau đó đã được thêm vào, và mô được ủ qua đêm ở 4 độ. Sau khi trở về nhiệt độ phòng, mô được rửa bằng PBS, được ủ bằng kháng thể thứ cấp ở 37 độ trong 30 phút và rửa lại bằng PBS. DAB được áp dụng để phát triển màu sắc trong bóng tối và phản ứng bị chấm dứt bằng nước. PBS đã được sử dụng để thay thế cho kháng thể chính như một biện pháp kiểm soát âm tính và phân tích định lượng được thực hiện với máy phân tích hình ảnh.
1.3 Phương pháp thống kê
Dữ liệu được thu thập trong nghiên cứu này được tổ chức bằng Microsoft Excel và sau đó được phân tích bằng SPSS 25. 0 để kiểm tra thống kê. Dữ liệu của mỗi nhóm được biểu thị dưới dạng trung bình ± độ lệch chuẩn (x̄ ± s). Một giá trị p nhỏ hơn 0. 0 5 (p <0,05) được coi là có ý nghĩa thống kê.
2 Kết quả
2.1 So sánh trọng lượng cơ thể và đường huyết thay đổi giữa hai nhóm
Tham khảo Bảng 1.
2.2 So sánh tỷ lệ cương cứng của dương vật giữa hai nhóm
Tham khảo Bảng 2.
2.3 So sánh nồng độ hormone tình dục trong huyết thanh giữa hai nhóm
Tham khảo Bảng 3.
2.4 Quan sát bệnh lý của mô kẽ tinh hoàn giữa hai nhóm
Các mô kẽ tinh hoàn của nhóm đối chứng xuất hiện bình thường. Các tế bào kẽ có hình tròn hoặc hình bầu dục, với hình thái thường xuyên, khoảng cách giữa các tế bào bình thường, sự sắp xếp có trật tự và không giảm đáng kể số lượng tế bào. Ngược lại, nhóm tiểu đường cho thấy phù kẽ tinh hoàn, hình thái tế bào không đều, không gian liên bào lỏng lẻo, sắp xếp rối loạn, phá vỡ cấu trúc nội bào và dấu hiệu phân tán trong một số tế bào, mất các đặc điểm cấu trúc. Tham khảo Hình 1.
| Nhóm | Cỡ mẫu (n) | Trọng lượng cơ thể cơ bản (g) | Trọng lượng cơ thể 5 ngày sau khi mô hình hóa (G) | Đường huyết 5 ngày sau khi mô hình hóa (MMOL/L) | Trọng lượng cơ thể trước khi hy sinh (g) | Đường huyết trước khi hy sinh (MMOL/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Nhóm bệnh tiểu đường | 15 | 220.4 ± 5.5 | 264.2 ± 10.8** | 24.3 ± 5.0** | 316.7 ± 16.4** | 25.2 ± 5.1** |
| Nhóm kiểm soát | 5 | 220.0 ± 5.2 | 286.2 ± 10.1 | 4.9 ± 1.3 | 319.1 ± 13.9 | 6.8 ± 1.2 |
Ghi chú: So với nhóm kiểm soát,P <0. 01.
Bảng 2: So sánh tỷ lệ cương cứng của dương vật giữa hai nhóm
| Nhóm | Cỡ mẫu (n) | Các trường hợp tích cực trong kiểm tra cương cứng (n) | Tỷ lệ cương cứng (%) |
|---|---|---|---|
| Nhóm bệnh tiểu đường | 15 | 5 | 33.3** |
| Nhóm kiểm soát | 5 | 4 | 80.0 |
Ghi chú: So với nhóm kiểm soát,P <0. 01.
Bảng 3: So sánh nồng độ hormone tình dục trong huyết thanh giữa hai nhóm (X̄ ± s)
| Nhóm | Cỡ mẫu (n) | T (nmol /l⁻⁻) | Fsh (iu · l⁻) | LH (ng · L⁻) |
|---|---|---|---|---|
| Nhóm bệnh tiểu đường | 15 | 3.38 ± 0.87** | 8.49 ± 3.06** | 489 ± 50.12** |
| Nhóm kiểm soát | 5 | 6.04 ± 1.26 | 5.98 ± 1.03 | 386 ± 40.73 |
Ghi chú: So với nhóm kiểm soát,P <0. 01.
2.4 Quan sát bệnh lý của mô kẽ tinh hoàn giữa hai nhóm
Trong nhóm đối chứng, mô kẽ tinh hoàn xuất hiện bình thường, với các tế bào kẽ có hình tròn hoặc hình bầu dục, cho thấy hình thái thường xuyên, không gian liên bào bình thường và sự sắp xếp có trật tự. Số lượng tế bào không cho thấy bất kỳ giảm đáng kể. So với nhóm đối chứng, nhóm tiểu đường thể hiện phù thủy tinh hoàn, các tế bào có hình dạng không đều, không gian liên bào lỏng lẻo, sự sắp xếp rối loạn, phá vỡ cấu trúc nội bào và các dấu hiệu phân tán trong một số tế bào, mất đi các đặc điểm cấu trúc của chúng. Tham khảo Hình 1.
2.5 Quan sát bệnh xơ hình dương vật giữa hai nhóm
Nhuộm của Masson được sử dụng để quan sát sự khác biệt về mức độ xơ hóa trong mô hang dương vật giữa hai nhóm. Trong nhóm tiểu đường, tỷ lệ sợi collagen cao hơn đáng kể, với sự gia tăng hàm lượng tương đối, trong khi tỷ lệ các tế bào cơ trơn nhỏ hơn, với sự giảm hàm lượng tương đối. Tham khảo Hình 2.
Hình 1, anh ta nhuộm kết quả của tinh hoàn trong hai nhóm (× 10, n=3))
Hình 2 Kết quả nhuộm Masson của Corpora cavernosa trong hai nhóm (× 4, n=3))
2.6 Biểu hiện của -SMA trong các tế bào cơ trơn Corpus cavernosum trong hai nhóm
Hóa mô miễn dịch đã được sử dụng để phát hiện biểu hiện của -SMA trong hai nhóm. So với nhóm trống, phần nhuộm màu vàng nâu trong nhóm tiểu đường đã giảm đáng kể, nghĩa là biểu hiện tế bào dương tính của -SMA ở nhóm tiểu đường đã giảm đáng kể. Xem Hình 3.
Hình 3 Kết quả hóa mô miễn dịch của Corpus cavernosum trong hai nhóm (× 10, n=3))
