Ảnh hưởng của việc bổ sung Glycine trong chế độ ăn uống đối với hiệu suất tăng trưởng, các thông số chống oxy hóa miễn dịch và hồng cầu ở cá chép, Cyprinus Carpio
May 10, 2023
Tóm tắt đơn giản:
Axit amin có nhiều vai trò quan trọng khác nhau đối với sự tăng trưởng và sức khỏe của cá. Trong số đó, các axit amin không thiết yếu ít được nghiên cứu trong nuôi trồng thủy sản nhưng có nhiều vai trò sinh lý. Glycine là một axit amin không thiết yếu tham gia vào cấu trúc glutathione và cũng tham gia vào hệ thống chống oxy hóa ở cá. Hơn nữa, glycine kích thích hệ thống miễn dịch. Nghiên cứu này cho thấy rằng khoảng thời gian 8 tuần cho ăn với chế độ ăn bổ sung 5 g/kg glycine có thể cải thiện hiệu suất tăng trưởng, sự ổn định của hồng cầu và khả năng miễn dịch dịch thể và niêm mạc ở cá chép. Vì vậy, các kết quả hiện tại có thể được sử dụng trong sản xuất thức ăn cho cá chép để hỗ trợ tăng trưởng và sức khỏe cao hơn.
Trừu tượng:
Tác dụng của việc bổ sung glycine trong chế độ ăn uống, 0 (đối chứng), 5 (5 GL) và 10 (10 GL) g/kg, đã được nghiên cứu đối với hiệu suất tăng trưởng, các thông số huyết học, khả năng chống oxy hóa hồng cầu, miễn dịch dịch thể và niêm mạc ở cá chép Cyprinus carpio. Sau tám tuần cho ăn, nghiệm thức 5 GL cho thấy sự cải thiện đáng kể về năng suất tăng trưởng và hiệu quả sử dụng thức ăn so với nghiệm thức đối chứng. Số lượng hồng cầu (RBC) và bạch cầu (WBC), huyết sắc tố, hematocrit, bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân/tỷ lệ phần trăm, RBC giảm hàm lượng glutathione (GSH) và các hoạt động phosphatase kiềm, peroxidase, protease và lysozyme niêm mạc da là tương tự nhau ở cá được xử lý bằng glycine và cao hơn đáng kể so với nghiệm thức đối chứng. Tỷ lệ tế bào lympho trong máu giảm ở cá được xử lý bằng glycine, nhưng số lượng tế bào lympho lại tăng so với cá đối chứng. Các hoạt động của RBC glutathione reductase ở cá được xử lý bằng glycine là tương tự và thấp hơn đáng kể so với ở cá đối chứng. Lysozyme huyết tương cao nhất và các hoạt động bổ sung thay thế đã được quan sát thấy trong điều trị GL.
Cá được xử lý bằng glycine, đặc biệt là 5 GL, đã cải thiện đáng kể khả năng chống suy yếu thẩm thấu của hồng cầu. Glycine trong chế độ ăn uống không có tác dụng đáng kể đối với hoạt động peroxidase của glutathione hồng cầu, globulin miễn dịch huyết tương, tỷ lệ/số lượng bạch cầu ái toan và các chỉ số huyết học. Tóm lại, hầu hết các lợi ích của việc bổ sung glycine trong chế độ ăn uống có thể được trung gian bằng cách tăng tổng hợp glutathione và khả năng chống oxy hóa.
Từ khóa: axit amin; glutathione; dinh dưỡng; tế bào máu; niêm mạc da.
Globulin miễn dịch huyết tương là một trong những thành phần quan trọng nhất của hệ thống miễn dịch của cơ thể. Globulin miễn dịch có thể nhận biết và liên kết mầm bệnh, do đó thúc đẩy việc loại bỏ chúng, thực hiện các chức năng miễn dịch và duy trì sức khỏe. Globulin miễn dịch trong huyết tương chủ yếu bao gồm ba loại: IgG, IgM và IgA, hàm lượng và tỷ lệ của chúng có liên quan mật thiết đến khả năng miễn dịch của con người. Trong những trường hợp bình thường, hàm lượng globulin miễn dịch ở người khỏe mạnh tương đối cao và tỷ lệ này được phối hợp. Trạng thái cân bằng này có thể chống lại sự xâm nhập của mầm bệnh bên ngoài một cách hiệu quả. Khi cơ thể ở trạng thái miễn dịch, những thay đổi về hàm lượng và tỷ lệ của globulin miễn dịch có thể tạo cơ sở quan trọng cho việc phòng ngừa và điều trị bệnh. Ví dụ, IgM đóng một vai trò quan trọng trong việc nhận biết ban đầu và ràng buộc nhiễm trùng mầm bệnh cấp tính, do đó, sự gia tăng của nó có thể chỉ ra nhiễm trùng cấp tính hoặc giai đoạn phục hồi. Mức IgG duy trì và ổn định phản ánh rằng trạng thái sinh lý của cơ thể tốt hơn và nó có khả năng duy trì và cải thiện chức năng miễn dịch tốt hơn.
Do đó, khả năng miễn dịch của cơ thể có liên quan chặt chẽ đến hàm lượng và tỷ lệ của globulin miễn dịch trong huyết tương, và việc theo dõi và điều chỉnh cẩn thận hàm lượng và tỷ lệ của globulin miễn dịch trong huyết tương là một trong những biện pháp quan trọng để duy trì sức khỏe tốt và khả năng miễn dịch mạnh mẽ. Từ đó có thể thấy rằng chúng ta cần chú ý đến việc cải thiện khả năng miễn dịch của mình. Ngoài chế độ ăn uống lành mạnh và tập thể dục trong cuộc sống hàng ngày, cistache cũng có thể cải thiện khả năng miễn dịch. Cistanche chứa nhiều thành phần hoạt tính sinh học, chẳng hạn như polysacarit, nấm, Huangli, v.v. Những thành phần này có thể kích thích các tế bào khác nhau của hệ thống miễn dịch và tăng hoạt động miễn dịch của chúng.
Nhấp vào lợi ích sức khỏe của cistanche
1. Giới thiệu
Các axit amin trong khẩu phần ăn có vai trò quan trọng đối với sự tăng trưởng và sức khỏe của cá. Cá phụ thuộc vào nguồn cung cấp thức ăn để đáp ứng yêu cầu của một số axit amin, được gọi là axit amin thiết yếu. Các axit amin này không thể tổng hợp được trong cơ thể cá [1]. Tuy nhiên, các axit amin khác có thể được tổng hợp bởi cá, nếu có sẵn một số chất nền, enzyme và đồng yếu tố. Hầu hết các nghiên cứu về nhu cầu axit amin trong cá đều tập trung vào các axit amin thiết yếu, nhưng cũng nên tập trung vào các axit amin không thiết yếu. Các axit amin này, mặc dù có thể được tổng hợp trong cơ thể cá, nhưng có nhiều vai trò sinh lý quan trọng đối với sức khỏe và phúc lợi của cá [2,3]. Do đó, định nghĩa thông thường về axit amin thiết yếu/không thiết yếu gần đây đã bị thách thức bởi các nhà nghiên cứu.
Glycine là một trong những axit amin không thiết yếu trong cá như các động vật khác, nhưng có nhiều chức năng sinh lý quan trọng [2]. Glycine tham gia vào quá trình hình thành collagen và 33% collagen được tạo ra từ axit amin này [4]. Hơn nữa, glycine, cùng với glutamate và cysteine, tham gia tổng hợp glutathione, một phân tử chống oxy hóa mạnh mẽ và quan trọng [5]. Do đó, glycine điều chỉnh hệ thống chống oxy hóa. Axit amin này có nhiều vai trò khác nhau trong chức năng miễn dịch. Người ta đã chứng minh rằng sự giảm nồng độ glycine trong huyết thanh làm tăng sức đề kháng trong huyết thanh đối với các mầm bệnh khác nhau ở người [6]. Một nghiên cứu về cá rô phi sông Nile, Oreochromis niloticus, đã tiết lộ rằng con đường chuyển hóa glycine là con đường quan trọng nhất trong việc ngăn ngừa tỷ lệ tử vong ở cá bị nhiễm Edwardsiella tarda [7].
Có một số nghiên cứu về tác động của glycine trong chế độ ăn uống đối với cá, nhưng kết quả không nhất quán. Ví dụ, cá rô phi sông Nile đã thể hiện sự gia tăng đáng kể về hiệu suất tăng trưởng, khi được cho ăn chế độ ăn có bổ sung 5 g/kg glycine. Glycine trong chế độ ăn uống không ảnh hưởng đến mức độ khác nhau của các chất chuyển hóa trong huyết tương và/hoặc gan, hoạt động của các enzym chống oxy hóa, hoạt động của lysozyme/myeloperoxidase và hàm lượng malondialdehyd (MDA). Thử thách thử nghiệm với Streptococcus iniae đã chỉ ra rằng glycine không thể cải thiện khả năng kháng bệnh và các phản ứng chống oxy hóa/miễn dịch khác tương tự như trước thử thách, ngoại trừ sự gia tăng superoxide dismutase huyết tương (SOD), glutathione reductase (GR) và myeloperoxidase hoạt động [8].
Một nghiên cứu về cá vược miệng rộng, Micropterus salmoides, đã tiết lộ rằng chế độ ăn dựa trên thực vật được bổ sung 20 g/kg glycine có lợi để ngăn ngừa tình trạng chậm phát triển và thiếu nhung mao ruột, so với chế độ ăn dựa trên bột cá. Tuy nhiên, không có sự thay đổi nào trong hoạt động của SOD ở gan và glutathione peroxidase (GPx) cũng như sự gia tăng hàm lượng MDA ở gan và hoạt tính alanine aminotransferase trong huyết tương cho thấy các vấn đề về gan có thể xảy ra ở cá [9]. Hoseini và Moghaddam [10] đã chỉ ra rằng việc bổ sung glycine không có tác động đáng kể đến năng suất sinh trưởng của beluga, Huso huso. Số lượng bạch cầu (WBC), nồng độ glutathione (GSH) trong huyết tương giảm, hoạt động GPx, lysozyme và bổ thể tăng ở mức 2,5 và/hoặc 5 g/kg glycine, ngụ ý tác dụng chống oxy hóa và điều hòa miễn dịch của glycine; tuy nhiên, sự gia tăng đáng kể hàm lượng MDA trong huyết tương ở mức 5 và 10 g/kg glycine khiến người ta khó tin vào tác dụng chống oxy hóa của glycine đối với loài này.
Nghiên cứu trước đây của chúng tôi về cá chép, Cyprinus carpio, đã chỉ ra rằng khoảng thời gian 3-tuần cho ăn 2,5–10 g/kg glycine có lợi trong việc cải thiện lysozyme huyết tương (5 và 10 g/kg glycine), GPx ( 2,5–10 g/kg glycine), hoạt động glutathione-s-transferase (GST; 10 g/kg glycine) và hàm lượng GSH (5 và 10 g/kg glycine), nhưng làm giảm catalase huyết tương (CAT; 5 và 10 g /kg glycine) và không có tác dụng đáng kể đối với MDA huyết tương [11]. Một 8-tuần cho ăn với cùng chế độ ăn đã cho thấy rằng glycine không có tác dụng thúc đẩy tăng trưởng đối với cá, mặc dù đã quan sát thấy những cải thiện về số lần lượt là ~10,5 và 12,5% về tốc độ tăng trưởng của cá và hiệu quả sử dụng thức ăn. SOD, CAT, GPx và GST huyết tương không thay đổi, nhưng GSH và MDA huyết tương tăng và giảm tương ứng [12]. Những nghiên cứu này chỉ ra rằng cần có những đánh giá sâu hơn để cải thiện kiến thức hiện tại về tác động của glycine trong chế độ ăn ở cá.
Ví dụ, các nghiên cứu nêu trên đã tập trung vào một số lượng hạn chế các thông số miễn dịch bẩm sinh dịch thể (lysozyme, bổ thể, myeloperoxidase, hoạt động bùng nổ hô hấp và WBC) và bỏ qua các thông số khác, chẳng hạn như các thông số miễn dịch niêm mạc da. Đây là một chủ đề quan trọng khi xem xét một số vai trò miễn dịch của glycine được báo cáo ở động vật có vú [13] và vai trò đặc biệt của nó đối với khả năng miễn dịch niêm mạc được quan sát thấy ở lợn [14]. Hơn nữa, tác dụng chống oxy hóa của glycine chỉ được đánh giá trong máu và gan cá, nhưng người ta đã chứng minh rằng các tế bào hồng cầu (RBC), cả ở động vật có vú và cá, tích cực bơm glycine vào tế bào chất của chúng [15,16] để hỗ trợ quá trình tổng hợp glutathione và duy trì khả năng chống oxy hóa bên trong. Glycine cũng là thành phần chính của quá trình tổng hợp heme bằng cách tham gia 5-sản xuất axit aminolevulinic; ức chế nhập khẩu glycine bởi hồng cầu dẫn đến sự tổng hợp heme bị gián đoạn ở động vật có vú [17].
Xem xét thông tin hạn chế về vai trò của glycine trong chế độ ăn ở cá (so với động vật có vú), nghiên cứu hiện tại được thiết kế để đánh giá tác động của glycine trong chế độ ăn đối với hiệu suất tăng trưởng, các thông số miễn dịch dịch thể và niêm mạc da, các thông số huyết học, khả năng chống oxy hóa của hồng cầu và xu hướng hiện tượng tan máu ở cá chép.
2. Vật liệu và phương pháp
2.1. Chế độ ăn kiêng
Theo các nghiên cứu trước đây [11,12], chúng tôi đã chọn 5 (5 GL) và 10 (10 GL) g/kg glycine để bổ sung nhưng giảm mức glycine cơ bản (nội sinh) (từ 19,8 xuống 16,1 g/kg) bằng cách giảm lượng phụ phẩm gia cầm trong chế độ ăn để tìm xem liệu bổ sung glycine trong chế độ ăn dựa trên thực vật (ít phụ phẩm gia cầm) có thể hỗ trợ tăng trưởng tối đa hay không. Chế độ ăn kiểm soát không bổ sung glycine (CTL) cũng được đưa vào. Thức ăn chăn nuôi (bột ngô, bột mì, bột đậu nành, bột hạt bông, phụ phẩm đóng hộp cá và phụ phẩm gia cầm) được sàng (200 µ) và trộn theo tỷ lệ mong muốn (Bảng 1).
Sau đó, dầu đậu nành, hỗn hợp vitamin/khoáng chất, axit amin, cellulose và glycine được thêm vào hỗn hợp. Khoảng 400 mL/kg nước đã được thêm vào hỗn hợp và chuẩn bị bột nhào, được tạo thành viên bằng máy xay thịt. Thành phần gần đúng của chế độ ăn uống được xác định (ba mẫu cho mỗi chế độ ăn uống) dựa trên các phương pháp tiêu chuẩn (phương pháp Kjeldahl đối với protein; chiết xuất ether đối với lipid; sấy khô bằng lò ở nhiệt độ 70 ◦C đối với độ ẩm; đốt lò đối với tro và tiêu hóa axit/bazơ đối với chất xơ) như mô tả của Hoseini, Moghaddam [10]. Hồ sơ axit amin trong chế độ ăn uống được xác định bởi hệ thống HPLC (Waters Corporation, Milford, MA, USA). Các mẫu được khử chất béo bằng n-hexan và được phân hủy bằng HCl, tiếp theo là tạo dẫn xuất bằng phenyisothiocyanase, và phân tách bằng cột PICO.TAG, và phát hiện trong máy dò độ hấp thụ λ kép [10].
2.2. nuôi cá
Hai trăm con cá chép giống được mua từ một trang trại địa phương và thả vào một bể 1 m3 trong 7 ngày, trong thời gian đó chúng được cho ăn theo chế độ CTL. Sau đó, 90 con cá khỏe mạnh (24,5 ± 0,21 g) với kích thước đồng đều được chọn và phân bố ngẫu nhiên trong 9 bể kính. Bể chứa đầy nước máy 50-L đã khử clo, được sục khí liên tục. Mật độ thả giống dựa trên một nghiên cứu trước đây về cùng một loài cá [12]. Cá được cho ăn một trong hai chế độ ăn nêu trên, hai lần một ngày (2% sinh khối), trong 8 tuần. Mỗi tuần một lần, cá của mỗi bể cá được đánh bắt với số lượng lớn và đặt trong bể chứa đầy nước trên thang đo kỹ thuật số để ghi lại sinh khối bể và điều chỉnh lượng thức ăn. Nước của hồ được làm mới 30 phần trăm mỗi ngày và chất thải được hút ra ngoài. Nhiệt độ nước, độ pH, oxy hòa tan và tổng amoniac lần lượt là 23,8 ± 0,85 ◦C, 7,74 ± 0,68, 6,78 ± 0,74 mg/L và 1,53 ± 0,33 mg/L .
Sau 8 tuần nuôi, tăng trọng (WG), tốc độ tăng trọng riêng (SGR), hệ số chuyển hóa thức ăn (FCR) được ghi nhận như sau:
2.3. Thu thập và Xử lý Mẫu
Vào cuối giai đoạn nuôi, ba con cá được bắt từ mỗi bể nuôi và được gây mê bằng 100 µL/L eugenol. Sau đó, các mẫu máu (1 mL mỗi con) được lấy từ tĩnh mạch đuôi cá, sử dụng ống tiêm có chứa heparin. Một phần 300 µL mẫu máu tươi được sử dụng để kiểm tra huyết học. Một phần khác gồm 200 µL mẫu máu tươi được sử dụng để kiểm tra tính dễ vỡ thẩm thấu của hồng cầu. Để làm cho tế bào bị ly giải, RBC đóng gói của các mẫu được đông lạnh ở -70 ◦C và được thêm vào hai thể tích đệm phốt phát (pH 7,0). Sau khi xoáy, huyền phù được ly tâm (6000× g; 7 phút; 4 ◦C) và phần nổi phía trên được giữ ở -70 ◦C cho đến khi phân tích RBC GSH, GR và GPx. Để thu được huyết tương, 350 µL mẫu máu tươi được ly tâm (6000× g; 7 phút; 4 ◦C) và các mẫu huyết tương được giữ ở -70 ◦C cho đến khi phân tích lysozyme, bổ thể thay thế (ACH50) và globulin miễn dịch toàn phần (Ig).
Các mẫu chất nhầy trên da được thu thập từ ba con cá trong mỗi bể. Cá được gây mê như đã đề cập ở trên và các mẫu chất nhầy được thu thập từ bề mặt lưng bằng cách chà bằng thìa. Các mẫu chất nhầy thu thập được trộn với một thể tích tương đương dung dịch muối đệm Tris (TBS, 50 mM Tris–HCl, 150 mM NaCl, pH 8,0). Sau khi xoáy, hỗn hợp được ly tâm (13,000× g; 15 phút; 4 ◦C) và phần nổi phía trên được giữ ở -70 ◦C cho đến khi xét nghiệm miễn dịch niêm mạc.
2.4. Phân tích
2.4.1. Kiểm tra huyết học
Hồng cầu và bạch cầu được đếm bằng buồng Neubauer, sau khi pha loãng với dung dịch Dacie. Hematocrit (Hct) và huyết sắc tố (Hb) lần lượt được đo bằng phương pháp ly tâm và cyanomethemoglobin. Thể tích trung bình trong cơ thể (MCV), huyết sắc tố trung bình trong cơ thể (MCH) và nồng độ huyết sắc tố trung bình trong cơ thể (MCHC) được tính toán theo Dacie và Lewis [18]. Số lượng bạch cầu chênh lệch được thực hiện bằng cách chuẩn bị các phiến máu được nhuộm bởi Giemsa.
2.4.2. Thông số miễn dịch huyết tương
Hoạt tính của lysozyme trong huyết tương được xác định dựa trên phương pháp đo độ đục, như được mô tả bởi Ellis [19]. Micrococcus luteus đã được sử dụng làm mục tiêu và lơ lửng trong dung dịch đệm phốt phát (pH 6,2). Đối với 1 mL huyền phù này, 25 µL mẫu huyết tương được thêm vào và mật độ quang giảm trung bình mỗi phút được ghi lại trong 5 phút ở 450 nm. Mỗi 0,001 giảm mật độ quang mỗi phút được coi là một đơn vị hoạt động của lysozyme
Hoạt tính ACH50 trong huyết tương được đo dựa trên phương pháp tán huyết [20], sử dụng hồng cầu cừu làm mục tiêu trong dung dịch đệm cỏ roi ngựa có chứa magie và gelatin (pH 7,0). Các mẫu huyết tương pha loãng nghiêm trọng đã được thêm vào huyền phù của RBC trong bộ đệm và được ủ ở nhiệt độ phòng trong 60 phút. Lượng huyết tương dẫn đến 50% tán huyết đã được ước tính và được sử dụng để tính toán hoạt tính ACH50 trên mỗi mL huyết tương.
Nồng độ Ig tổng trong huyết tương được xác định sau khi kết tủa bằng polyetylen glycol [21]. Một lượng bằng nhau của dung dịch huyết tương và polyetylen glycol (12 phần trăm ) được trộn lẫn và giữ trong điều kiện khuấy trộn ở nhiệt độ phòng. Sau 2 giờ, hỗn hợp này được ly tâm (6000× g; 7 phút; 4 ◦C) để kết tủa Ig. Sự khác biệt về protein mẫu trước và sau khi ly tâm bằng với nồng độ Ig tổng của mẫu.
2.4.3. Enzyme chống oxy hóa hồng cầu
Các thông số chống oxy hóa RBC được đánh giá theo Yousefi và Hoseini [22]. Các dung dịch ly giải tế bào hồng cầu đã được làm tan băng và các dung dịch được ly tâm để kết tủa bất kỳ trận derby nào. Các chất nổi trên bề mặt được sử dụng cho các xét nghiệm enzyme. Các bộ dụng cụ thương mại (Zellbio Co., GmbH, Deutschland, Germany) đã được sử dụng để kiểm tra hoạt động của các enzym. Nồng độ GSH được đo dựa trên phản ứng với 5,50 -dithiobis-(2-axit nitrobenzoic) ở bước sóng 412 nm. Nguyên tắc của xét nghiệm GPx dựa trên việc thêm GSH vào các mẫu và chuyển đổi GSH thành glutathione oxy hóa (GSSG) bằng GPx mẫu. GSSG kết quả được tái chế thành GSH bằng hoạt động GR, sử dụng NADPH. Sự giảm nồng độ NADPH tỷ lệ thuận với hoạt động của GPx và có thể đo được ở bước sóng 340 nm. Giao thức tương tự được sử dụng để xác định hoạt động GR, nhưng GSSG được thêm vào các mẫu thay vì GSH. Mức độ huyết sắc tố trong dung dịch được đo và hoạt động của các enzym được thể hiện dựa trên đó.
2.4.4. Kiểm tra độ mong manh thẩm thấu
Theo Gao, Liu [23]. Tóm lại, 25 µL hồng cầu tươi được đóng gói đã được thêm vào 1 mL của 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, {{ 11}}.5, 0.6, 0.7, 0.85 phần trăm dung dịch natri clorua và để ở nhiệt độ phòng trong 90 phút. Sau đó, các huyền phù được ly tâm (6000 × g; 7 phút; 4 ◦C) và độ hấp thụ của phần nổi phía trên được đo ở bước sóng 492 nm. Mật độ quang được hiệu chỉnh dựa trên số lượng hồng cầu và MCH. Mật độ quang học cao nhất được coi là tán huyết 100 phần trăm và tỷ lệ tán huyết mật độ quang học khác được tính toán dựa trên nó.
2.4.5. Các thông số miễn dịch chất nhầy da
Nồng độ protein hòa tan của các mẫu chất nhầy trên da được xác định dựa trên Bradford [24]. Hoạt tính peroxidase của chất nhầy trên da được xác định theo Quade và Roth [25], sử dụng 3,30,5,50 -tetramethylbenzidine hydrochloride và hydrogen peroxide làm cơ chất ở bước sóng 450 nm. Hoạt tính protease của chất nhầy da được xác định theo Zhang, Hu [26], sử dụng AZOcasein làm cơ chất ở bước sóng 350 nm. Hoạt tính lysozyme của chất nhầy trên da được xác định như mô tả ở trên. Theo Hoseinifar, Roosta, hoạt tính của phosphatase kiềm kiềm (ALP) ở da được xác định bằng cách sử dụng bộ công cụ Parsazmun Co. (Tehran, Iran).
2.5. Phân tích thống kê
Trước khi phân tích, dữ liệu trung bình trên mỗi bể cá đã được tính toán và sử dụng để phân tích thống kê (n {{0}}). Sau khi xác nhận phân phối dữ liệu bình thường bằng thử nghiệm Shapiro– Wilk và tính đồng nhất phương sai bằng thử nghiệm Levene, dữ liệu đã được áp dụng ANOVA một chiều. Sự khác biệt đáng kể giữa các nghiệm thức được xác định bằng phép thử Tukey. p < 0,05 được coi là đáng kể và tất cả các phân tích được thực hiện trong SPSS v.22.
3. Kết quả
Hiệu suất tăng trưởng của cá được trình bày trong Bảng 2. FCR ở nghiệm thức 5 GL và 10 GL thấp hơn đáng kể so với nghiệm thức CTL. Trọng lượng cuối cùng, WG và SGR ở nghiệm thức 5 GL cao hơn đáng kể so với nghiệm thức CTL. Không có trường hợp tử vong trong số các phương pháp điều trị.
Các thông số chống oxy hóa của RBC được trình bày trong Bảng 3. Hàm lượng GSH tăng lên đáng kể, do hoạt động GR giảm đáng kể ở nghiệm thức 5 GL và 10 GL, so với nghiệm thức CTL. Không có sự khác biệt đáng kể trong hoạt động GPx giữa các phương pháp điều trị.
Kết quả của thử nghiệm tính dễ vỡ thẩm thấu được trình bày trong Bảng 4. Không có sự khác biệt đáng kể về tốc độ tán huyết giữa các phương pháp điều trị ở nồng độ NaCl là 0.1, 0.2, 0. 7 và 0.85 phần trăm . Ở nồng độ NaCl là 0.3–0.5% , tỷ lệ tán huyết của phương pháp điều trị 5 GL thấp hơn đáng kể so với phương pháp điều trị CTL. Tỷ lệ tán huyết của cá được xử lý bằng glycine ở nồng độ NaCl 0,6% thấp hơn đáng kể so với tỷ lệ của cá được xử lý bằng CTL.
Các thông số miễn dịch niêm mạc da của cá được trình bày trong Bảng 6. Không có sự khác biệt đáng kể về hàm lượng protein hòa tan trong niêm mạc, hoạt tính lysozyme, peroxidase, protease và ALP giữa các nghiệm thức 5 GL và 10 GL; cả hai đều thể hiện giá trị cao hơn đáng kể, so với điều trị CTL.
4. Thảo luận
Glycine góp phần tổng hợp protein cấu trúc và chiếm gần 9% protein toàn cơ thể ở cá chép [28]. Trong nghiên cứu hiện tại, việc bổ sung glycine trong chế độ ăn đã cải thiện đáng kể năng suất tăng trưởng và hiệu quả sử dụng thức ăn ở cá chép thông thường, điều này không giống với nghiên cứu trước đây của chúng tôi về cùng một loài [12]. Lý do chính xác cho sự khác biệt như vậy là không rõ ràng; người ta cho rằng mức glycine thấp hơn trong chế độ ăn kiêng đối chứng của nghiên cứu hiện tại (1,61 phần trăm ), so với chế độ ăn trước đó (1,98 phần trăm ), đã tạo ra sự khác biệt. Tuy nhiên, hiệu suất tăng trưởng của cá đối chứng trong hai nghiên cứu gần như tương tự nhau.
Vì vậy, các yếu tố khác có thể góp phần vào sự khác biệt như vậy. Một lời giải thích có thể là sự thay đổi trong thành phần axit amin trong chế độ ăn uống giữa hai nghiên cứu. Lysine và methionine, hai axit amin hạn chế tăng trưởng chính, trong nghiên cứu hiện tại cao hơn so với nghiên cứu trước đó và mức khẩu phần ăn dưới mức tối ưu của các axit amin này dẫn đến việc giữ lại nitơ, axit amin và glycine thấp hơn [29,30] . Các kết quả hiện tại phù hợp với các nghiên cứu trước đây về cá rô phi sông Nile [8] và cá vược miệng rộng [9] rằng việc bổ sung glycine trong chế độ ăn đã cải thiện năng suất tăng trưởng của cá. Mặc dù các axit amin không thiết yếu có thể được tổng hợp trong cơ thể cá, tốc độ tổng hợp của chúng có thể không đủ để đáp ứng các yêu cầu sinh học. Do đó, hiệu suất tăng trưởng được cải thiện trong các phương pháp điều trị bằng glycine trong nghiên cứu hiện tại có thể là do lượng glycine sẵn có cao hơn để đáp ứng các yêu cầu về tăng trưởng và duy trì.
Các nghiên cứu về huyết học cung cấp thông tin về sức khỏe của cá và tình trạng huy động khí. Việc giảm số lượng hồng cầu và hàm lượng huyết sắc tố cản trở quá trình oxy hóa mô và thanh thải carbon dioxide [31]. Do đó, một số nghiên cứu đã đánh giá vai trò của các thao tác dinh dưỡng [32–34], bao gồm bổ sung axit amin [35–37], đối với các thông số huyết học ở các loài cá khác nhau. Người ta biết rất ít về vai trò của glycine đối với các thông số huyết học ở cá. Một nghiên cứu trên cá da trơn, Ictalurus punctatus, đã tiết lộ rằng RBC tích cực vận chuyển glycine vào tế bào chất, có thể được sử dụng để tổng hợp glutathione [15], như đã quan sát thấy ở động vật có vú [17]. Do sự hiện diện của huyết sắc tố, hồng cầu thường xuyên bị đe dọa bởi quá trình oxy hóa và glutathione có một vai trò quan trọng trong việc ngăn ngừa stress oxy hóa hồng cầu [15].
Theo kết quả hiện tại, sự cải thiện các thông số chống oxy hóa liên quan đến glutathione (tăng hàm lượng GSH và giảm hoạt động GR) có thể là nguyên nhân làm tăng số lượng hồng cầu và khả năng chống tan máu ở cá được điều trị bằng glycine. Người ta đã tiết lộ rằng hồng cầu của cá rất nhạy cảm với các điều kiện oxy hóa, theo đó hàm lượng GSH giảm đáng kể (do quá trình oxy hóa) và sự gia tăng GPx, peroxy hóa lipid và tan máu xảy ra [38–40]. Không có thay đổi nào trong hoạt động GPx trong nghiên cứu hiện tại cho thấy có lẽ không có sự khác biệt về điều kiện oxy hóa giữa các phương pháp điều trị. Do đó, hàm lượng GSH cao hơn trong các phương pháp điều trị 5 GL và 10 GL có thể là do quá trình tổng hợp glutathione được cải thiện khi có sẵn glycine. Sự gia tăng tổng hợp GSH có thể đáp ứng yêu cầu sinh học của tế bào, do đó không cần tái chế GSSG nữa, điều này giải thích sự giảm hoạt động GR trong các phương pháp điều trị 5 GL và 10 GL.
Bạch cầu là tế bào miễn dịch quan trọng với các chức năng đa dạng giúp vật chủ chống lại vi trùng lạ [41]. Sự gia tăng bạch cầu sau khi bổ sung chế độ ăn uống đã được chứng minh là làm tăng khả năng kháng bệnh ở các loài cá khác nhau [42,43]. Về glycine, bổ sung chế độ ăn uống đã được tìm thấy để tăng bạch cầu trong beluga [10], tương tự như kết quả hiện tại. Bạch cầu trung tính là bạch cầu bảo vệ đầu tiên khi cá gặp sự tấn công của mầm bệnh. Chúng tiêu diệt mầm bệnh bằng quá trình thực bào, dẫn đến hình thành các phân tử phản ứng [44]. Bạch cầu đơn nhân là các tế bào miễn dịch khác có chức năng thực bào [45].
Do các tế bào này sản xuất các phân tử tiền oxy hóa khác nhau nên chúng cần một hệ thống chống oxy hóa mạnh để tồn tại. Các nghiên cứu về tế bào người đã tiết lộ rằng glutathione cực kỳ cần thiết cho khả năng tồn tại và chức năng của bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân [46,47], nhưng có rất ít thông tin về chủ đề này ở cá. Các nghiên cứu về cá chép đã tiết lộ rằng hàm lượng glutathione tăng trong bạch cầu trung tính trong quá trình thực bào hoặc cảm ứng lipopolysacarit [48]. Sự tiếp xúc của các tế bào đơn nhân cá rô phi với một tác nhân tiền oxy hóa (hạt nano đồng) đã gây ra quá trình chết theo chương trình, stress oxy hóa và sự suy giảm hàm lượng GSH [45].
Theo đó, người ta suy đoán rằng số lượng/tỷ lệ bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân trong máu cao hơn ở cá được điều trị bằng glycine trong nghiên cứu hiện tại là kết quả của việc cải thiện hàm lượng GSH của tế bào. Tuy nhiên, glycine không có tác dụng đáng kể đối với quần thể tế bào lympho trong máu và việc giảm tỷ lệ tế bào lympho ở cá được điều trị bằng glycine là kết quả của sự gia tăng tỷ lệ phần trăm của các loại bạch cầu khác. Nhìn chung, những kết quả này cho thấy việc bổ sung glycine trong chế độ ăn uống giúp cải thiện sức mạnh của hệ thống miễn dịch bẩm sinh.
Lysozyme hoạt động như một tác nhân diệt khuẩn được tiết ra bởi bạch cầu trung tính trong máu trong tuần hoàn [49]. Do đó, người ta suy đoán rằng sự gia tăng lysozyme trong huyết tương ở cá được xử lý bằng glycine là do sự gia tăng dân số bạch cầu trung tính trong máu hoặc quá trình sản xuất lysozyme của chúng. Tương tự như vậy, sự gia tăng hoạt động lysozyme trong huyết tương đi kèm với sự gia tăng dân số bạch cầu trung tính trong máu, sau khi bổ sung các chất phụ gia thức ăn khác nhau vào chế độ ăn của cá [50,51].
Tương tự như nghiên cứu hiện tại, việc bổ sung glycine trong chế độ ăn uống đã làm tăng đáng kể hoạt tính lysozyme trong huyết tương ở cá beluga [10] và cá chép thông thường [11]. Hệ thống bổ sung hoạt động như một tác nhân diệt vi trùng và opsonizing trong cá bao gồm một số protein được sản xuất trong gan [52]. Bổ sung glycine trong chế độ ăn uống đã được phát hiện là làm tăng hoạt tính ACH50 trong huyết tương ở beluga [10]; tuy nhiên, một thời gian ngắn cho ăn bằng chế độ ăn bổ sung glycine không gây ra thay đổi đáng kể nào trong hoạt động ACH50 huyết tương ở cá chép [11]. Cơ chế chính xác mà glycine cải thiện hoạt động ACH50 trong huyết tương vẫn chưa rõ ràng, nhưng GSH có thể đóng góp, vì việc bổ sung glutathione trong chế độ ăn uống đã làm tăng đáng kể nồng độ protein bổ sung trong tan máu của cua găng, Eriocheir sinensis, đây có thể là kết quả của sức khỏe gan tụy cao hơn và tổng hợp protein do GSH sẵn có [53].
Do đó, người ta suy đoán rằng glycine trong chế độ ăn uống có thể làm tăng nồng độ GSH, do đó có thể chịu trách nhiệm cho hoạt động ACH50 cao hơn trong nghiên cứu hiện tại. Hơn nữa, Properdin, một phân tử giàu glycine điều chỉnh tăng hoạt động của bổ thể, đã được xác định trong các mô khác nhau của cá như gan, da, bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân [54,55]. Phân tử này đã được xác định trong cá chép thông thường [56], do đó, người ta suy đoán rằng sự sẵn có của glycine có thể hỗ trợ sản xuất Properdin cao hơn và tăng hoạt động ACH50 trong nghiên cứu hiện tại.
Miễn dịch niêm mạc da là rất quan trọng để ngăn ngừa bệnh trong thực hành nuôi trồng thủy sản, vì nước đóng vai trò là vật truyền mầm bệnh chính và khả năng miễn dịch niêm mạc mạnh có thể ngăn chặn sự xâm nhập của mầm bệnh vào cá mới [57]. Lysozyme niêm mạc da hoạt động như một tác nhân diệt khuẩn, tương tự như lysozyme huyết tương [49]. Protease trong chất nhầy của da tiêu diệt mầm bệnh, làm giảm tính toàn vẹn của chất nhầy, làm bong tróc lớp chất nhầy và kích hoạt các thông số miễn dịch khác [58]. Peroxidase niêm mạc da tham gia vào sự hình thành phức hợp peroxidase– H2O2–halogenua, một tác nhân diệt khuẩn và gây độc tế bào mạnh [58]. Hoạt động của ALP trong chất nhầy của da có thể giải độc các hợp chất gây viêm do vi khuẩn tạo ra [59]. Không có nghiên cứu tương tự để so sánh, nhưng kết quả hiện tại cho thấy việc bổ sung glycine trong chế độ ăn uống có thể cải thiện khả năng miễn dịch niêm mạc da ở cá chép.
5. Kết Luận
Tóm lại, bổ sung glycine trong chế độ ăn uống có thể hỗ trợ tổng hợp GSH, giúp cải thiện khả năng chống oxy hóa và khả năng chống tan máu trong RBC. Hơn nữa, việc bổ sung glycine trong chế độ ăn uống làm tăng số lượng bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân trong máu, điều này có thể là do vai trò bảo vệ của GSH trong các tế bào này. Thật thú vị, glycine có thể cải thiện khả năng xâm nhập vào cơ thể cá. Dựa trên những lợi ích này, khuyến nghị bổ sung 5 g/kg glycine trong khẩu phần ăn để bổ sung thức ăn cho cá chép thông thường.
Sự đóng góp của tác giả:
Khái niệm hóa, ATM, SMH và HVD; phương pháp luận, MA và HR; phần mềm, SHH; phân tích chính thức, SHH và SMH; điều tra, MA và SMH; quản lý dữ liệu, ATM; viết—chuẩn bị bản thảo gốc, MA và SMH; viết—đánh giá và chỉnh sửa, SMH; trực quan, nhân sự; giám sát, SMH; quản trị dự án, ATM, SMH; mua tài trợ, HVD Tất cả các tác giả đã đọc và đồng ý với phiên bản đã xuất bản của bản thảo.
Kinh phí:
Không có tiền đã được nhận cho nghiên cứu này.
Tuyên bố của Ủy ban Đánh giá Thể chế:
Quy trình nghiên cứu trên động vật đã được phê duyệt bởi Hội đồng Đánh giá Thể chế của Trung tâm Nghiên cứu Tài nguyên Thủy sản Vùng nước Nội địa (ET.CG/2; ngày 9 tháng 9 năm 2021)." đối với các nghiên cứu liên quan đến động vật.
Tuyên bố đồng ý có hiểu biết:
Không áp dụng.
Tuyên bố về tính khả dụng của dữ liệu:
Dữ liệu của nghiên cứu này có sẵn theo yêu cầu từ tác giả tương ứng.
Sự nhìn nhận:
Công việc nghiên cứu này được hỗ trợ một phần bởi Đại học Chiang Mai.
Xung đột lợi ích:
Các tác giả tuyên bố không có xung đột lợi ích.
Người giới thiệu
1. Mai, K.; Xue, M.; Anh ấy, G.; Xie, SQ; Kaushik, SJ Chương 4—Protein và axit amin. Trong Dinh dưỡng cá, tái bản lần thứ 4; Hardy, RW, Kaushik, SJ, Eds.; Nhà xuất bản Học thuật: Oxford, Vương quốc Anh, 2022; trang 181–302.
2. Lý, P.; Mai, KS; Trushenski, J.; Wu, GY Những phát triển mới về dinh dưỡng axit amin cho cá: Hướng tới các loại thức ăn thủy sản có chức năng và thân thiện với môi trường. axit amin. 2009, 37, 43–53. [CrossRef] [PubMed]
3. Hoseini, SM; Reverer, M. Tác dụng tăng cường sức khỏe của axit amin trong cá. Trong Tiến bộ công nghệ sinh học trong quản lý sức khỏe nuôi trồng thủy sản; Gupta, SK, Giri, SS, Eds.; Springer Singapore: Singapore, 2021; trang 493–533.
4. Lý, P.; Wu, G. Vai trò của glycine, proline và hydroxyproline trong chế độ ăn kiêng trong quá trình tổng hợp collagen và tăng trưởng động vật. axit amin. 2018, 50, 29–38. [CrossRef] [PubMed]
5. Pérez-Torres, I.; María Zuniga-Munoz, A.; Guarner-Lans, V. Tác dụng có lợi của axit amin glycine. nhỏ. Linh mục Med. hóa. 2017, 17, 15–32. [CrossRef] [PubMed]
6. Kou, T.-S.; Wu, J.-H.; Chen, X.-W.; Chen, Z.-G.; Trịnh, J.; Peng, B. Glycine ngoại sinh thúc đẩy quá trình oxy hóa glutathione và khôi phục độ nhạy cảm của mầm bệnh vi khuẩn đối với sự chết tế bào do huyết thanh gây ra. Redox Biol. 2022, 58, 102512. [CrossRef]
7. Dương, D.-X.; Yang, M.-J.; Âm, Y.; Kou, T.-S.; Bành, L.-T.; Chen, Z.-G. Chuyển hóa huyết thanh điều chỉnh các phản ứng miễn dịch để thúc đẩy sự sống sót của Oreochromis niloticus khi nhiễm Edwardsiella tarda. mSystems. 2021, 6, e00426-21. [Tham khảo chéo]
8. Xie, S.; Chu, W.; Thiên, L.; Nữu, J.; Liu, Y. Ảnh hưởng của việc bổ sung N-acetyl cysteine và glycine đến hiệu suất tăng trưởng, tổng hợp glutathione, khả năng chống oxy hóa và miễn dịch của cá rô phi sông Nile, Oreochromis niloticus. Cá Sò. miễn dịch. 2016, 55, 233–241. [Tham khảo chéo]
9. Rossi, W., Jr.; Allen, KM; Habte-Tsion, H.-M.; Meesala, K.-M. Bổ sung glycine, prebiotic và nucleotide trong chế độ ăn dựa trên bột đậu nành cho cá vược miệng rộng (Micropterus salmoides): Ảnh hưởng đến năng suất sản xuất, thành phần và khả năng duy trì dinh dưỡng toàn cơ thể cũng như mô bệnh học đường ruột. Nuôi trồng thủy sản 2021, 532, 736031. [CrossRef]
10. Hoseini, SM; Moghaddam, AA; Ghelichpour, M.; Pagheh, E.; Haghpanah, A.; Gharavi, B. Bổ sung glycine trong chế độ ăn uống điều chỉnh các phản ứng chống oxy hóa và miễn dịch của cá beluga, Huso huso, cá con. nước. Dân biểu 2022, 23, 101026. [CrossRef]
11. Hoseini, SM; Paolucci, M.; Arghideh, M.; Hosseinpour Delavar, F.; Zavvar, F.; Hoseinifar, SH Ảnh hưởng của việc sử dụng glycine trong chế độ ăn uống đối với các phản ứng sinh hóa đối với độc tính amoniac ở cá chép thông thường, Cyprinus carpio. nước. độ phân giải 2022, 53, 2185–2194. [Tham khảo chéo]
12. Hoseini, SM; Majidiyan, N.; Mirghaed, AT; Hoseinifar, SH; Van Doan, H. Bổ sung glycine trong chế độ ăn làm giảm căng thẳng do vận chuyển gây ra ở cá chép, Cyprinus carpio. nuôi trồng thủy sản. 2022, 551, 737959. [CrossRef]
13. Lý, P.; Âm, Y.-L.; Nắp.; Woo Kim, S.; Wu, G. Axit amin và chức năng miễn dịch. anh J. Dinh dưỡng. 2007, 98, 237–252. [Tham khảo chéo]
14. Kỷ, Y.; Quạt, X.; Trương, Y.; Lý, J.; Đại, Z.; Wu, Z. Glycine điều chỉnh khả năng miễn dịch niêm mạc và thành phần vi khuẩn đường ruột ở heo con cai sữa. axit amin. 2021, 54, 385–398. [CrossRef] [PubMed]
15. Angermeier, SM; Shepard, MD; Tunnicliff, G. Glycine vận chuyển bởi các tế bào màu đỏ của cá da trơn kênh. Có thể. J. Zool. 1996, 74, 688–692. [Tham khảo chéo]
16. Kim, Kim; Kingsmore, SF; Hân, H.; Dương-Phong, TL; Godinot, N.; Seldin, MF Nhân bản chất vận chuyển glycine của người loại 1: Đặc tính phân tử và dược lý của các biến thể đồng dạng mới và định vị nhiễm sắc thể của gen trong bộ gen của người và chuột. mol. dược phẩm. 1994, 45, 608.
17. Mùa đông, M.; Funk, J.; Korner, A.; Alberati, D.; Christen, F.; Schmitt, G. Tác dụng ức chế GlyT1 đối với tạo hồng cầu và cân bằng nội môi sắt ở chuột. hết hạn máu tụ. 2016, 44, 964–974.e4. [Tham khảo chéo]
18. Dacie, J.; Lewis, S. Huyết học thực hành; Churchill và Livingston: Luân Đôn, Vương quốc Anh, 1996.
19. Ellis, xét nghiệm AE Lysozyme. Trong Kỹ thuật miễn dịch cá; Bị đánh cắp, JS, Ed.; Ấn phẩm SOS: Fair Haven, NJ, USA, 1990; trang 101–103.
20. Yano, T. Xét nghiệm hoạt động bổ sung tán huyết. Trong Kỹ thuật miễn dịch cá; Bị đánh cắp, JS, Ed.; Ấn phẩm SOS: Fair Haven, NJ, USA, 1992; trang 131–141.
21. Siwicki, A.; Anderson, D. Thử nghiệm cơ chế bảo vệ không đặc hiệu ở cá: II. Khả năng tiêu diệt hoạt động của bạch cầu trung tính và đại thực bào, hoạt động của lysozyme trong huyết thanh và các cơ quan, và tổng mức globulin miễn dịch trong huyết thanh. Trong các phương pháp chẩn đoán và phòng ngừa bệnh cá; Siwicki, A., Anderson, D., Waluga, J., Eds.; Wydawnictwo Instytutu Rybactwa Srodladowego: Olsztyn, Ba Lan, 1993; trang 105–112.
22. Yousefi, M.; Ôsin, SM; Vatnikov, YA; Nikishov, AA; Kulikov, EV Thymol như một loại thuốc gây mê mới ở cá chép (Cyprinus carpio): Hiệu quả và tác dụng sinh lý so với eugenol. Nuôi trồng thủy sản 2018, 495, 376–383. [Tham khảo chéo]
23. Gao, Y.-J.; Liu, Y.-J.; Chen, X.-Q.; Yang, H.-J.; Li, X.-F.; Thiên, L.-X. Ảnh hưởng của các mức độ phân loại của histidine đối với hiệu suất tăng trưởng, hoạt động của các enzym tiêu hóa, tính dễ vỡ thẩm thấu của hồng cầu và khả năng chịu đựng tình trạng thiếu oxy của cá trắm cỏ con Ctenopharyngodon idella. Nuôi trồng thủy sản 2016, 452, 388–394. [Tham khảo chéo]
24. Bradford, MM Một phương pháp nhanh và nhạy để định lượng lượng microgam protein sử dụng nguyên tắc liên kết protein-thuốc nhuộm. Sinh học hậu môn. 1976, 72, 248–254. [Tham khảo chéo]
25. Quade, MJ; Roth, JA Một xét nghiệm trực tiếp, nhanh chóng để đo sự thoái hóa của các hạt sơ cấp bạch cầu trung tính ở bò. Miễn dịch thú y. bệnh lý miễn dịch. 1997, 58, 239–248. [Tham khảo chéo]
26. Zhang, W.-W.; Hu, Y.-H.; Wang, H.-L.; Sun, L. Xác định và mô tả đặc điểm của protease liên quan đến độc lực từ chủng Pseudomonas fluorescens gây bệnh. Vi sinh thú y. 2009, 139, 183–188. [Tham khảo chéo]
27. Hoseinifar, SH; Rosta, Z.; Hajimoradloo, A.; Vakili, F. Tác dụng của Lactobacillus acidophilus như một chất bổ sung thức ăn đối với các thông số miễn dịch niêm mạc da, hệ vi sinh vật đường ruột, khả năng chống lại căng thẳng và hiệu suất tăng trưởng của cá kiếm đuôi đen (Xiphophorus helleri). Miễn dịch động vật có vỏ cá. 2015, 42, 533–538. [CrossRef] [PubMed]
28. Phúc, C.; Cui, Y.; Hùng, SSO; Zhu, Z. Mẫu axit amin toàn cơ thể của cá chép đỏ chuyển gen-hormone tăng trưởng của con người F4 (Cyprinus carpio) được cho ăn các chế độ ăn có mức protein khác nhau. Nuôi trồng thủy sản 2000, 189, 287–292. [Tham khảo chéo]
29. Gan, L.; Lưu, YJ; Thiên, LX; Yue, YR; Dương, HJ; Liu, FJ Ảnh hưởng của oxy hòa tan và mức lysine trong khẩu phần đối với năng suất sinh trưởng, hệ số chuyển đổi thức ăn và thành phần cơ thể của cá trắm cỏ, Ctenopharyngodon idella. nuôi trồng thủy sản. Dinh dưỡng. 2013, 19, 860–869. [Tham khảo chéo]
30. Vân, Y.; Bài hát, D.; Anh ấy, Z.; Mi, J.; Vương, L.; Nie, G. Ảnh hưởng của việc bổ sung methionine trong chế độ ăn dựa trên protein thực vật đối với năng suất sinh trưởng và chất lượng phi lê của cá chép sông Hoàng Hà (Cyprinus carpio haematopterus) con. Nuôi trồng thủy sản 2022, 549, 737810. [CrossRef]
31. Fazio, F. Phân tích huyết học cá như một công cụ quan trọng trong nuôi trồng thủy sản: Đánh giá. Nuôi trồng thủy sản 2019, 500, 237–242. [Tham khảo chéo]
32. Mohseni, M.; Hamidoghli, A.; Bai, SC Chế độ ăn uống kẽm hữu cơ và vô cơ trong cá tầm beluga (Huso huso): Ảnh hưởng đến sự tăng trưởng, huyết học, nồng độ mô và khả năng oxy hóa. Nuôi trồng thủy sản 2021, 539, 736672. [CrossRef]
33. Mohseni, M.; Saltanat, NL; Rastravan, TÔI; Golalipour, Y. Ảnh hưởng của việc bổ sung betaine trong chế độ ăn dựa trên protein thực vật đối với hiệu suất tăng trưởng, các thông số miễn dịch huyết học, tình trạng chống oxy hóa và hoạt động của enzyme tiêu hóa của cá hồi Caspian con (Salmo trutta, Kessler, 1877). nuôi trồng thủy sản. Dinh dưỡng. 2021, 27, 2132–2141. [Tham khảo chéo]
34. Aftabgard, M.; Salarzadeh, A.; Mohseni, M.; Bahri Shabanipour, AH; Zorriehzahra, MEJ Hiệu quả kết hợp của isomaltooligosaccharides trong chế độ ăn uống và Bacillus spp. về các chỉ số sinh trưởng, huyết thanh học và hệ vi sinh vật đường ruột của cá hồi nâu Caspian (Salmo trutta caspius Kessler, 1877). Men vi sinh Antimicrob. Protein 2019, 11, 198–206. [Tham khảo chéo]
35. Michelato, M.; Zaminhan, M.; Boscolo, WR; Nogaroto, V.; Vicari, M.; Artoni, RF Yêu cầu về histidine trong khẩu phần ăn của cá rô phi sông Nile non dựa trên hiệu suất tăng trưởng, biểu hiện của các gen liên quan đến tăng trưởng cơ bắp và phản ứng huyết học. Nuôi trồng thủy sản 2017, 467, 63–70. [Tham khảo chéo]
36. Machado, M.; Azeredo, R.; Fontinha, F.; Fernández-Boo, S.; Conceição, LEC; Dias, J. Methionine trong chế độ ăn uống giúp cải thiện tình trạng miễn dịch, phản ứng viêm và khả năng kháng bệnh của cá chẽm châu Âu (Dicentrarchus labrax). Đằng trước. miễn dịch. 2018, 9, 2672. [CrossRef]
37. Cá mập, Y.; Khan, MA Yêu cầu của cá giống Channa punctatus (Bloch) đối với lysine trong chế độ ăn dựa trên tốc độ tăng trưởng, chuyển đổi thức ăn và hiệu quả duy trì lysine, tỷ lệ RNA/DNA, các thông số huyết học và hoạt động chống oxy hóa trong huyết thanh. nuôi trồng thủy sản. Dinh dưỡng. 2021, 27, 140–150. [Tham khảo chéo]
38. Li, H.-T.; Phong, L.; Jiang, W.-D.; Lưu, Y.; Giang, J.; Lý, S.-H. Các thông số căng thẳng oxy hóa và phản ứng chống apoptotic đối với các gốc hydroxyl trong hồng cầu của cá: Tác dụng bảo vệ của glutamine, alanine, citrulline và proline. thủy. chất độc. 2013, 126, 169–179. [CrossRef] [PubMed]
39. Gwo´zdzi ´ski, K.; Roche, H.; Pérès, G. So sánh tác động của các ion kim loại nặng đối với hoạt động của enzyme chống oxy hóa trong hồng cầu Dicentrarchus labrax của người và cá. Hợp phần hóa sinh. vật lý. Phần C Tổng hợp dược phẩm. 1992, 102, 57–60. [CrossRef] [PubMed]
40. Janssens, BJ; Le Gall, R.; Rees, JF Sự tán huyết hồng cầu do peroxide kích hoạt như một mô hình cho nghiên cứu về tổn thương oxy hóa ở cá biển. J. Sinh học Cá. 2002, 61, 71–84. [Tham khảo chéo]
41. Maisey, K.; Imarai, M. Sự đa dạng của các phân tử bạch cầu teleost: Vai trò của sự ghép nối thay thế. Miễn dịch động vật có vỏ cá. 2011, 31, 663–672. [CrossRef] [PubMed]
42. Koch, JFA; de Oliveira, CAF; Zanuzzo, FS Dietary -glucan (MacroGard®) cải thiện phản ứng miễn dịch bẩm sinh và khả năng kháng bệnh ở cá rô phi sông Nile bất kể thời gian sử dụng. Miễn dịch động vật có vỏ cá. 2021, 112, 56–63. [Tham khảo chéo]
For more information:1950477648nn@gmail.com
