Tác dụng của Glycoside của Cistanche đối với khả năng học tập và độ dẻo của khớp thần kinh ở chuột mô hình thiếu ngủ Ⅱ

2 kết quả

2． 1 Ảnh hưởng của GC đến khả năng học tập và trí nhớ ở chuột

2． 1． 1 Thí nghiệm điều hướng định vị

Khi số ngày huấn luyện định vị và điều hướng tăng lên, thời gian trốn thoát của chuột trong mỗi nhóm giảm xuống và mức giảm rõ rệt nhất là từ 2 đến 3 ngày. Thời gian trôi qua, độ trễ trốn thoát của chuột ở nhóm Model duy trì trạng thái ổn định, trong khi đó ở nhóm Control và PC. Độ trễ trốn thoát của chuột ở nhóm GC, nhóm Est giảm dần. Xem Hình 1.

BỔ SUNG GLYCOSIDE CISTANCHE CAO ĐỂ CẢI THIỆN TRÍ NHỚ

2． 1． 2 Thí nghiệm thám hiểm không gian

So với nhóm Kiểm soát, số lần chuột trong nhóm Mô hình vượt qua nền tảng và phần trăm thời gian dành cho góc phần tư mục tiêu đã giảm đáng kể (P < {{0}}.01). Không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa nhóm PC và nhóm Người mẫu, cho thấy mô hình thiếu ngủ đã thành công. So với nhóm Model, số lần chuột trong nhóm GC vượt qua nền tảng và tỷ lệ thời gian dành cho góc phần tư mục tiêu tăng đáng kể (P < 0..01), trong khi sự khác biệt ở nhóm Est không có ý nghĩa thống kê có ý nghĩa; so vớinhóm GC,số lần chuột trong nhóm Est vượt qua nền tảng tăng lên đáng kể (P < 0. 01). Vàtỷ lệ nơi cư trúthời gian trong góc phần tư mục tiêu đã giảm đáng kể (P < 0. 01). Xem Hình 2.

2． 2. Ảnh hưởng của GC đến hành vi lo âu ở chuột

Kết quả thí nghiệm ngoài đồng ruộng cho thấyCho thấy so với nhóm Control, số lần đứng và di chuyển của chuột ở nhóm Model làKhoảng cách tăng đáng kể (P ＜ {{0}}. 05), thời gian nghỉ giảm đáng kể (P ＞ 0. 01), và có không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa nhóm PC và nhóm Kiểm soát (P ＞ 0. 05). So với nhóm Mô hình, việc xử lý GC có thể làm giảm đáng kể tần suất đứng và khoảng cách di chuyển của chuột trong nhóm Mô hình (P ＜ 0,05) và tăng đáng kể thời gian bất động (P ＜ 0,05). Sau khi điều trị bằng Est, sự khác biệt giữa nhóm el so sánh Sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê (P > 0,05). Xem Bảng 2.

Hình 2 Kết quả thí nghiệm thám hiểm không gian

Ghi chú: A: số lần qua sân ga; B: phần trăm thời gian dành cho góc phần tư mục tiêu; được so sánh với nhóm Kiểm soát, ∗P < {0}}.05, ∗∗P < 0,01; so với nhóm Model, ＃＃P < 0,01

Bảng 2 Ảnh hưởng của GC đến hành vi lo âu ở chuột (x ± s)

Bảng 3 Ảnh hưởng của GC đến nồng độ MT huyết thanh ở chuột (x ± s)

2.4 Ảnh hưởng của GC đến hình thái và số lượng tế bào ở vùng CA1 của đồi hải mã ở chuột Trong nhóm Kiểm soát và nhóm PC, các tế bào thần kinh ở vùng CA1 của đồi hải mã được sắp xếp gọn gàng, với nhân rõ ràng, nhân nằm ở trung tâm và màu sắc đồng đều; so với nhóm Control, cơ thể Nissl của chuột trong nhóm Model được sắp xếp lỏng lẻo, có khoảng cách lớn hơn và số lượng ít hơn (P <{4}}.05), tế bào bị teo đi, số lượng không bào nhiều hơn và một số thể Nissl có hai nhân hoặc đa nhân; so với nhóm Model, sau khi xử lý bằng GC, các thể Nissl được sắp xếp gọn gàng, số lượng tăng lên và số lượng không bào nhìn thấy được ít; không có thay đổi đáng kể nào được quan sát thấy ở nhóm Est so với nhóm Model. Xem Hình 3, Bảng 4.

Bảng 4. Nhuộm Nissl và đếm số lượng tế bào thần kinh ở vùng CA1 hồi hải mã

2． 5 Ảnh hưởng của GC đến sự biểu hiện của các dấu hiệu phân tử liên quan đến khớp thần kinh ở chuột

2． 5． 1 Ảnh hưởng của GC đến biểu hiện protein BDNF, SYN và PSD{3}} ở hải mã chuột. Kết quả thí nghiệm Western blot cho thấy, với

So với nhóm Kiểm soát, mức độ biểu hiện protein BDNF, SYN và PSD{0}} trong nhóm Mô hình đã giảm đáng kể (P < 0. 01) và nhóm PC đã giảm đáng kể khác với nhóm C. Sự khác biệt giữa nhóm đối chứng và nhóm đối chứng không có ý nghĩa thống kê. So với nhóm Mô hình, GC có thể điều chỉnh tăng đáng kể biểu hiện protein BDNF, SYN và PSD{4}} (P < 0,01), trong khi việc điều trị bổ sung Est không ảnh hưởng đến BD. Không có thay đổi đáng kể trong sự biểu hiện của protein NF, SYN và PSD{7}}. Xem Hình 4.

2． 5． 2. Ảnh hưởng của GC đến biểu hiện mRNA BDNF, SYN và PSD{3}} ở hải mã chuột. Kết quả thử nghiệm RT-PCR cho thấy so với nhóm Đối chứng, Mức độ biểu hiện của BDNF, SYN và PSD-95 mR⁃ＮＡ ở nhóm Mô hình đã giảm đáng kể (P ＜ 0 .01), và không có sự khác biệt đáng kể giữa nhóm PC và nhóm Kiểm soát. So với nhóm Mô hình, GC có thể điều chỉnh tăng đáng kể mức độ biểu hiện của BDNF, SYN và PSD-95 mRNA (P<0. 01), while Est BDNF, SYN, and PSD - 95 mRNA table

Không có tác động đáng kể đến cấp độ. Xem Hình 5.

Lưu ý: A: Biểu hiện protein BDNF; B: Biểu hiện protein SYN; C: biểu hiện protein PSD{0}}; được so sánh với nhóm Kiểm soát, ∗P < 0.05, ∗∗P < 0.01; so với nhóm Mô hình, ＃P < 0,05, ＃#P < 0,01; so với nhóm GC, ※P < 0,05

3 Thảo luận

Ngủ ngon giúp cơ thể tăng trưởng và phát triển,nâng cao hiệu quả học tập, Vàthúc đẩy củng cố bộ nhớ [7]. Thiếu ngủcó thể dẫn đếnsuy giảm trí nhớ, phản ứng chậm, Vàsuy giảm nhận thức. Cistanche Deserticolalà một loại thuốc thảo dược cổ truyền quý giá của Trung Quốc, được mệnh danh là “nhân sâm sa mạc”. Thành phần hóa học của nó chủ yếu bao gồm phenyletanol glycoside, cyclopentane ether terpen, polysacarit và các thành phần dễ bay hơi. Trong số đó, polysaccharides đã thu hút được sự chú ý rộng rãi do các hoạt động sinh học của chúng như điều hòa hoạt động miễn dịch, chống lão hóa và chống khối u [8].

Các nghiên cứu liên quan đã báo cáo rằng GC đóng vai trò bảo vệ thần kinh nhưchất chống oxy hóaVàchống apoptoticvà cải thiện hiệu quả chức năng thần kinh củachuột bị đột quỵ do thiếu máu cục bộ[9]. Ngày càng có nhiều nghiên cứu phát hiện ra rằng GC có tiềm năng rất lớn trongức chế sự tiến triển của bệnh thoái hóa thần kinh[10]. Các nghiên cứu liên quan đã báo cáo rằng Cistanche Deserticola phenylanol glycoside (PhGs) ức chế đường dẫn truyền tín hiệu TLR4/NF-κB, giảm viêm thần kinh, tăng cường biểu hiện p-CAMKII/CAMKII ở một mức độ nhất định, tăng mức độ biểu hiện của các protein liên quan đến khớp thần kinh, và cải thiện khả năng học tập và trí nhớ của chuột APP/PS1 [11].

Các nghiên cứu trước đây của nhóm nghiên cứu của chúng tôi cũng phát hiện ra rằng PhG có thể đóng vai trò chống oxy hóa, tăng mức độ biểu hiện protein của SYN và PSD-95, điều chỉnh độ dẻo của khớp thần kinh và do đó cải thiện các khiếm khuyết về học tập và nhận thức của chuột SAMP8 [4].

Thí nghiệm này đã xây dựng mô hình thiếu ngủ của chuột bằng cách cải tiến phương pháp môi trường nước đa nền tảng để khám phá xem liệu GC có ảnh hưởng đến độ dẻo của khớp thần kinh hay không bằng cách điều chỉnh sự biểu hiện của các dấu hiệu liên quan đến khớp thần kinh và do đó cải thiện chức năng học tập và nhận thức của chuột trong mô hình thiếu ngủ. Melatonin (MT) là một loại hormone nội tiết được tổng hợp và tiết ra bởi tuyến tùng trong điều kiện ánh sáng và bóng tối bình thường vào ban đêm có chức năng điều chỉnh nhịp sinh học. Nó đóng một chức năng sinh lý quan trọng trong việc kiểm soát giấc ngủ và nhịp sinh học. Rối loạn nhịp melatonin là yếu tố chính gây ra rối loạn giấc ngủ và nhịp sinh học [12].

Kết quả xét nghiệm ELISA huyết thanh trong thí nghiệm này cho thấy tình trạng thiếu ngủ làm giảm nồng độ MT ở chuột mô hình và làm gián đoạn nhịp ngủ của chuột và mô hình thiếu ngủ đã được thiết lập thành công. Nghiên cứu này cho thấy rằng GC có thể rút ngắn đáng kể độ trễ thoát khỏi của chuột mô hình thiếu ngủ và tăng số lần vượt qua nền tảng, cho thấy rằng GC có thể cải thiện hiệu quả chức năng học tập và trí nhớ của chuột mô hình thiếu ngủ. Các nghiên cứu trước đây đã báo cáo rằng SD không chỉ gây rối loạn chức năng nhận thức mà còn có thể làm tăng những cảm xúc tiêu cực như lo lắng và khó chịu ở chuột [13].

Kết quả của nghiên cứu này cho thấy thiếu ngủ có thể làm tăng số lần đứng và khoảng cách di chuyển của chuột, đồng thời làm trầm trọng thêm sự căng thẳng và lo lắng của chuột mô hình, điều này phù hợp với các báo cáo nghiên cứu trước đây. Sau khi can thiệp GC, số thời gian đứng của chuột giảm, thời gian bất động tăng lên và khoảng cách di chuyển giảm, điều này cho thấy GC có thể cải thiện hiệu quả sự lo lắng của chuột mô hình thiếu ngủ.

Các khớp thần kinh không thể tách rời khỏi chức năng học tập và nhận thức. Tính dẻo của cấu trúc và chức năng khớp thần kinh là cơ sở sinh học quan trọng đối với khả năng học tập và ghi nhớ của cơ thể [14]. Sự biểu hiện của các protein liên quan đến khớp thần kinh đóng vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh độ dẻo của khớp thần kinh. SYN là một glycoprotein đặc biệt của màng trước synap, có thể điều chỉnh sự mở rộng của các khớp thần kinh và thúc đẩy sự chuyển động về phía trước của các túi tiếp hợp. Nó được coi là một protein đánh dấu sự phát triển và hoạt động của màng trước synap [15].

BDNF là một trong những yếu tố dinh dưỡng thần kinh đặc trưng nhất. Nó điều chỉnh sự phát triển và biệt hóa của tế bào thần kinh và đóng một vai trò quan trọng trong việc hình thành tính dẻo của khớp thần kinh [16]. PSD{1}} đóng vai trò không thể thiếu trong việc duy trì sự ổn định của cấu trúc khớp thần kinh và phát huy hiệu quả truyền dẫn qua khớp thần kinh [17]. Các tài liệu trước đây báo cáo rằng thiếu ngủ có thể gây tổn thương oxy hóa cho các tế bào thần kinh vùng đồi thị và biểu hiện bất thường các protein liên quan đến khớp thần kinh, dẫn đến giảm độ dẻo của khớp thần kinh và gây ra rối loạn chức năng học tập và nhận thức [18].

Nghiên cứu thực nghiệm này cho thấy mức độ biểu hiện của SYN, PSD{0}} và BDNF ở vùng hải mã của chuột trong mô hình thiếu ngủ đã giảm đáng kể, điều này phù hợp với kết quả của các nghiên cứu trước đây. Sau khi sử dụng GC, mức độ biểu hiện của SYN, PSD{1}} và BDNF đã tăng lên, cho thấy rằng GC có thể tăng mức độ biểu hiện của các protein liên quan đến khớp thần kinh và do đó cải thiện độ dẻo của khớp thần kinh và chức năng bộ nhớ của chuột mô hình.

Tóm lại, GC có thể ảnh hưởng đến độ dẻo của khớp thần kinh bằng cách điều chỉnh sự biểu hiện của các dấu hiệu liên quan đến khớp thần kinh, từ đó cải thiện chức năng nhận thức và học tập do SD gây ra, điều này sẽ cung cấp các ý tưởng và giải pháp điều trị mới cho GC để điều trị suy giảm khả năng học tập và nhận thức do rối loạn giấc ngủ.

Tài liệu tham khảo

[1] Liew SC, Aung T. Thiếu ngủ và mối liên hệ với bệnh tật - một bài đánh giá［J］． Sleep Med, 2021, 77: 192-204.

[2] Chellelappa SL, Aeschbach D. Giấc ngủ và sự lo lắng: từ cơ học đến can thiệp ［J］． Sleep Med Rev, 2022, 61: 101583.

[3] Wang Lu, Zhang Shibin, Hua Zhipeng, và những người khác. Tiến trình nghiên cứu về cơ chế bệnh sinh của tổn thương tái tưới máu do thiếu máu cục bộ não [J]. Tạp chí Đột quỵ và Bệnh thần kinh, 2023, 40(2) 168 － 170．

[４] Jia ＪＸ, Yan ＸＳ, Song Ｗ, et al． Cơ chế bảo vệ làm cơ sở cho hoạt động của phenyl eethanoicglycoside (PHG) đối với độ dẻo của khớp thần kinh trong mô hình bệnh Alzheimer ở ​​chuột do beta-amyloid gây ra {{2}[J]. J Toxicol En⁃ vvirionHealth A, 2018, 81 (21): 1098 - 1107.

［５］ Ye Mao, Zhang Ying, Wang Qiang và những người khác. Tác dụng của dexmedetomidine đối với khả năng ghi nhớ và độ dẻo của khớp thần kinh ở chuột thiếu ngủ [J]. Tạp chí Gây mê Lâm sàng,2023, 39(5): 519-523．

[6] Diao Huaqiong, Zhang Jing, Wang Min, và cộng sự. Ứng dụng và đánh giá phương pháp cải tiến môi trường nước đa nền tảng trên mô hình động vật thiếu ngủ[J]. Tạp chí Khoa học Động vật Thực nghiệm Trung Quốc, 2023, 31(1): 120-128