Tác dụng bảo vệ của glycoside cistanche đối với tổn thương thiếu máu cục bộ não-tái tưới máu
Mar 09, 2022
Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
Zhang Yanhui1, Ren Xiaoli1, Pei Feixiang2
Trừu tượng
Mục tiêu: Quan sát tác dụng củacistanche glycoside(GC) về các axit amin kích thích (EAA) và sự biểu hiện của NF-KB và protein ở vùng hải mã của chuột vớithiếu máu cục bộ não-tái tưới máuvà để khám phá các tác dụng phòng ngừa và điều trị củacistanche glycosidetrênthiếu máu cục bộ não-tái tưới máuChấn thương. Phương pháp: 60 con chuột SD được chia ngẫu nhiên thành nhóm giả, nhóm mô hình, liều thấpcistanche glycosidenhóm, liều caocistanche glycosidenhóm, và nhóm đối chứng, với 12 con chuột trong mỗi nhóm. Mô hình chuột củathiếu máu cục bộ não-tái tưới máuđã được chuẩn bị bằng phương pháp bu lông dây. Sau khi mô hình hóa thành công, những con chuột trong mỗi nhóm đã được điều trị bằng thuốc gavage. Ký ức thử nghiệm điều hướng mê cung nước đánh giá khả năng học tập không gian và trí nhớ của chuột, bằng nhóm thử nghiệm sắc ký lỏng hiệu suất cao (HPLC), chuột axit aspartic (Glu), axit glutamic (Asp), axit γ-aminobutyric (GABA), hàm lượng glycine (Gly), sử dụng phương pháp hóa học miễn dịch để phát hiện các vùng não vùng hồi hải mã chuột NF - KB, tau, P - tau, A β mức biểu hiện protein amyloid. Kết quả: Độ trễ thoát hiểm trung bình của chuột trong mỗi nhóm đã được rút ngắn xuống các mức độ khác nhau trong thử nghiệm định vị mê cung nước 5d trên biển. Độ trễ thoát của chuột ở liều caocistanche glycosidenhóm và nhóm đối chứng vào ngày 4 và 5 thấp hơn đáng kể so với nhóm trong nhóm mô hình (P< 0.05).="" after="" a="">thiếu máu cục bộ não-tái tưới máuchấn thương xảy ra, tổ chức hàm lượng EAA và chuột vùng não vùng hồi hải mã NF - KB, mức độ biểu hiện protein cao hơn đáng kể (P< 0.05),="" the="" use="" of="" the="" eaa="" content="" and="" drug="" intervention="" after="" rats="" had="" brain="" hippocampus="" nf="" -="" kb,="" the="" protein="" expression="" level="" in="" different="" degree="" of="" decline,="" high="" dose="">cistanche glycosidenhóm, hàm lượng EAA và chuột nhóm kiểm soát ma túy có vùng hải mã não NF - KB, mức độ biểu hiện protein thấp hơn đáng kể so với nhóm mô hình (P< 0.05).="" conclusion:="" in="" the="" process="">thiếu máu cục bộ não-tái tưới máu, hàm lượng axit amin kích thích (EAA) được điều chỉnh và việc kích hoạt các protein liên quan, ảnh hưởng đến chức năng nhận thức của chuột.Cglycoside istanchecó thể làm giảm mức độ biểu hiện EAA, NF-KB và protein trong não vùng hải mã của chuột, và do đó cải thiện chức năng nhận thức của chuột.
Từ khoá: Cistanche glycoside;Thiếu máu cục bộ não-tái tưới máu; Axit amin kích thích (EAA); NF - KB; Mức độ biểu hiện protein
1. Vật liệu và phương pháp
1.1 Động vật thí nghiệm
60 con chuột SD đực khỏe mạnh cấp SPF 8 tuần tuổi, nặng (200±20) g, được mua từ Trung tâm Động vật Thí nghiệm của Đại học Y An Huy, số giấy chứng nhận: 0001507. Nó phù hợp để chăn nuôi trong 1 tuần trong môi trường nhiệt độ phòng 22-24 °C và độ ẩm tương đối 45% ~ 55%. Trong thời gian này, bạn có thể ăn và uống thoải mái, và thay thế ánh sáng trong 12 giờ. Quá trình thử nghiệm tuân thủ nghiêm ngặt "Ý kiến hướng dẫn về điều trị động vật thí nghiệm".
1.2 Dụng cụ và thuốc thử chính
Cistanche glycosideđến từ Sơn Tây Yuning Biotechnology Co., Ltd., đặc điểm kỹ thuật: 80%; Oxiracetam được mua từ CSPC Ouyi Dược Phẩm Co., Ltd.; Sản phẩm tiêu chuẩn EAA là từ American Sigma, Độ tinh khiết 99,9%; Sắc ký lỏng hiệu suất cao được cung cấp bởi Shimadzu, Nhật Bản, loại LC-6A; Bộ NF-KB, bộ protein tau, bộ protein P-tau, bộ protein Aβ amyloid đã được mua từ Shanghai Jingkang Biological Engineering Co., Ltd.
1.3 Nhóm và mô hình hóa
Theo phương pháp bảng số ngẫu nhiên, 60 con chuột đực SD được chia ngẫu nhiên thành nhóm giả, nhóm mô hình, liều thấpCistanche glycosidenhóm, liều caoCistanche glycosidenhóm, và nhóm kiểm soát ma túy, với 12 con chuột trong mỗi nhóm. Mô hình chuột củathiếu máu cục bộ não và tái tưới máuđã được nhân rộng bằng phương pháp khâu [6].
1.4 Điều trị hành chính
Theo "Bảng tỷ lệ liều tương đương của chuyển đổi bề mặt cơ thể người và động vật", liều lượng phân loại chuột đã được tính toán. Liều thấp và caocistanche glycosidecác nhóm đã có sẵn ở mức 2,5 mg / kg và 10 mg / kg tương ứng, và nhóm kiểm soát thuốc Theo liều 450mg / kg Oxiracetam, nhóm phẫu thuật giả và nhóm mô hình được cho cùng một lượng nước muối sinh lý bình thường trong khí quản, mỗi ngày một lần, trong 2 tuần điều trị liên tục.
1.5 Các chỉ số quan sát
Đánh giá chức năng nhận thức Thử nghiệm mê cung nước Morris đã được sử dụng để đánh giá chức năng nhận thức củathiếu máu cục bộ não-tái tưới máuchuột: Một hồ mê cung nước Morris hình tròn với đường kính trong là 30cm và đường kính trong là 160cm. Bức tường bên trong của hồ bơi được sơn màu đen và chia thành 4 góc phần tư với cùng diện tích. Một góc phần tư được chọn ngẫu nhiên để xây dựng một nền tảng ẩn 1cm dưới mặt nước. Một ngày sau khi chính quyền, thí nghiệm điều hướng định vị mê cung nước đã được bắt đầu. Đặt con chuột đối diện với tường hồ bơi từ điểm vào của góc phần tư ngẫu nhiên vào hồ bơi và ghi lại độ trễ thoát của chuột (thời gian cần thiết để chuột tìm và đứng trên nền tảng ẩn trong ít nhất 3 giây). Nếu con chuột không tìm thấy bục ẩn trong vòng 2 phút, hãy lấy một thanh gỗ để di chuyển âm đạo chuột đến bục và làm cho nó đứng trên bục trong những năm 30. Độ trễ thoát của chuột được ghi nhận là 120 giây và thí nghiệm được tiếp tục trong 5 ngày.
1.6 Phương pháp thống kê Phần mềm thống kê SPSS22.0 đã được sử dụng để phân tích.
Dữ liệu đo được biểu diễn bằng (x ± s ), thường được phân phối và có phương sai đồng nhất. T-test mẫu độc lập được sử dụng để so sánh giữa các nhóm và t-test được ghép nối được sử dụng để so sánh giữa các nhóm. P<0.05 is="" considered="" as="" the="" difference="" is="" statistically="">
2. Kết quả
2.1 Tác dụng của glycoside cistanche đối với độ trễ thoát ra của thí nghiệm điều hướng định vị ở những con chuột bị tổn thương thiếu máu cục bộ não-tái tưới máu
Độ trễ thoát hiểm trung bình của chuột trong mỗi nhóm đã thay đổi đáng kể trong thí nghiệm điều hướng mê cung nước 5d. Khi thí nghiệm tiếp tục, độ trễ thoát hiểm của chuột trong mỗi nhóm cho thấy mức độ rút ngắn khác nhau. So với nhóm mô hình, độ trễ thoát của chuột ở liều thấp và liều caocistanche glycosidenhóm và nhóm kiểm soát ma túy đã được rút ngắn đáng kể, và độ trễ trốn thoát của những con chuột trong nhóm GCs liều cao và nhóm kiểm soát ma túy là đáng kể sau 4 và 5 ngày.
Thấp hơn đáng kể so với nhóm mô hình (P<>
Bảng 1 Tác dụng củacistanche glycosidevề độ trễ thoát hiểm của thí nghiệm điều hướng định vị ở những con chuột bị tổn thương thiếu máu cục bộ não-tái tưới máu (x ± s, s)
Lưu ý: So với nhóm hoạt động giả, △P<0,05; so="" với="" nhóm="" mô="" hình=""><>
2.2 Tác dụng của glycoside cistanche đối với hàm lượng EAA trong mô não của chuột bị tổn thương tưới máu cục bộ não.
Sau khithiếu máu cục bộ não-tái tưới máuchấn thương, hàm lượng EAA trong mô não của chuột tăng đáng kể (P<0.05). after="" drug="" intervention,="" the="" eaa="" content="" in="" the="" brain="" tissue="" of="" the="" rats="" decreased="" to="" varying="" degrees.="" compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" contents="" of="" eaa="" in="" the="" high-dose="">cistanche glycosidenhóm và nhóm kiểm soát ma túy đã giảm đáng kể (P<>
Bảng 2 Ảnh hưởng củacistanche glycosidevề hàm lượng EAA trong mô não của chuột bị tổn thương tưới máu cục bộ não (x ± s, μmol/g)
Lưu ý: So với nhóm hoạt động giả, △P<0,05; so="" với="" nhóm="" mô="" hình=""><>
2.3 Tác dụng của glycoside cistanche đối với sự biểu hiện của NF-KB và protein ở vùng hải mã của chuột bị tổn thương tưới máu thiếu máu cục bộ não
Hóa mô miễn dịch cho thấy 4 protein ở vùng hải mã của nhóm mô hình cho thấy biểu hiện cao, khác biệt đáng kể so với nhóm hoạt động giả (P<0,05). sau="" khi="" can="" thiệp="" thuốc,="" mức="" độ="" biểu="" hiện="" của="" 4="" protein="" trong="" não="" ngựa="" của="" chuột="" đã="" giảm,="" có="" sự="" khác="" biệt="" đáng="" kể="" giữa="" liều="">cistanche glycosidenhóm, nhóm kiểm soát ma túy và nhóm mô hình (P<>
3 Thảo luận
Thiếu máu cục bộ não-tái tưới máucó thể gây ra phản ứng viêm miễn dịch, giải phóng NO ồ ạt, tạo ra các gốc tự do oxy, quá tải canxi nội bào, tăng giải phóng EAA và các phản ứng khác, đồng thời gây thoái hóa và hoại tử tế bào thần kinh, ảnh hưởng nghiêm trọng đến chức năng bình thường của mô não [8]. NF-KB là một yếu tố điều hòa điều chỉnh các phản ứng miễn dịch và viêm. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng việc ức chế sự kích hoạt NF-KB trong nhân và tế bào chất có thể làm giảm hiệu quả quá trình chết rụng não của các tế bào thần kinh trong vùng tập trung nhồi máu [9]. EAA là một chất dẫn truyền thần kinh quan trọng được phân phối trong hệ thống thần kinh trung ương. Sauthiếu máu cục bộ não và tái tưới máu, các tế bào thần kinh trải qua quá trình khử cực và khả năng hấp thụ EAA của chúng giảm đáng kể, dẫn đến sự gia tăng bất thường về hàm lượng EAA trong mô não. Khi hàm lượng EAA quá cao, độc tính thần kinh của nó sẽ gây tổn thương liên tục cho mô não, tiếp tục gây ra quá trình chết rụng tế bào thần kinh và làm hỏng chức năng bình thường của mô não [10].
Wang Lu và cộng sự [15] cho thấy rằng:Cistanche glycosidecó thể làm tăng tỷ lệ sống sót của các tế bào đốt sống trong khu vực CA1 của vùng hải mã và giảm MDA để tăng hoạt động của GSH-Px và SOD, xác nhận rằngCistanche glycosidecó thể nhặt rác hiệu quả các gốc tự do oxy và cải thiện chuột bệnh Alzheimer Học các chức năng nhận thức. Huang Huilian et al. [16] đã quan sát chức năng nhận thức của bệnh nhân sa sút trí tuệ mạch máu và phát hiện ra rằngCistanche glycosidecó thể làm giảm mức độ biểu hiện của protein P-tau huyết thanh ở bệnh nhân và cải thiện khả năng sống hàng ngày của bệnh nhân. Họ đề xuất rằngCistanche glycosidecó thể điều chỉnh mức độ biểu hiện protein của cơ thể, do đó làm giảm mức độ mất trí nhớ mạch máu của bệnh nhân tổn thương não. Tề Nguyệt và cộng sự [17] đã quan sáttác dụng của Cistanche glycosidelà loại thuốc chính về hành vi và biểu hiện protein tau của chuột mô hình bằng cách sao chép mô hình chuột bệnh Alzheimer và phát hiện ra rằng độ trễ thoát của chuột đã được rút ngắn và tau Biểu hiện của quá trình phosphoryl hóa protein đã bị ức chế, và sự suy giảm khả năng học tập và trí nhớ của chuột đã được cải thiện một cách hiệu quả. Có thể thấy rằngCistanche glycosidecó thể làm giảm tổn thương mô não và sửa chữa chức năng thần kinh thông qua các cơ chế như điều chỉnh mức độ biểu hiện protein và ức chế stress oxy hóa. Cơ chế có thể của chấn thương tái tưới máu.
Độ trễ thoát hiểm của chuột được điều trị bằngCistanche glycosideđã được rút ngắn xuống các mức độ khác nhau. Hàm lượng EAA trong mô não và sự biểu hiện của NF-KB và protein ở vùng hải mã đã được điều chỉnh xuống, cho thấy chức năng nhận thức của chuột đã được cải thiện một cách hiệu quả. Hàm lượng EAA trong mô não làm giảm độc tính thần kinh của nó và bảo vệ các tế bào thần kinh ở một mức độ nhất định. Ngoài raCistanche glycosidecó thể ức chế sự biểu hiện của protein NF-KB và cản trở quá trình kích hoạt của nó, do đó ngăn chặn quá trình truyền tín hiệu và làm giảm quá trình chết rụng tế bào thần kinh.Cistanche glycosidecó thể điều chỉnh giảm mức độ biểu hiện của protein tau, protein P-tau và Aβ amyloid ở vùng hải mã và ngăn chúng tích tụ quá mức trong các tế bào, do đó có thể làm hỏng tế bào thần kinh. Có thể thấy rằngCistanche glycosidecó thể giảmthiếu máu cục bộ não-tái tưới máuchấn thương thông qua EAA và điều hòa protein, do đó cải thiện chức năng mô não của cơ thể. So sánh tác dụng của các nhóm GCs liều thấp và cao ở chuột, có thể thấy rằng các GC liều cao có sự cải thiện tốt hơnảnh hưởng đến thiếu máu cục bộ não-tái tưới máuchấn thương ở chuột. Người ta suy đoán rằngCistanche glycosidecó một điều trị phụ thuộc vào nồng độ nhất định củathiếu máu cục bộ não-tái tưới máuChấn thươngvà liều caocistanche glycosidecó không ít hơn hiệu quả điều trị của Oxiracetam. Có thể thấy rằngCistanche ·là một loại thuốc thảo dược trung quốc với cơ chế ứng dụng lâm sàng cao. Cơ chế hoạt động của nó tương đối phức tạp và cơ chế hoạt động của nó rất rộng. Nó đặc biệt liên quan đến protein, tế bào và các lĩnh vực khác. Nó có thể được sử dụng để phát triển các loại thuốc mới như bệnh Parkinson và bệnh Alzheimer. Các vật liệu chính. Tuy nhiên, nghiên cứu hiện tại vềCistanche ·tương đối yếu, và dược lý và cơ chế hoạt động chưa biết và đủ khác nhau của nó cần được làm sáng tỏ thêm. Chúng tôi đã bắt đầu nghiên cứu đa cấp về protein, gen, tế bào, phân tử, v.v., để làm rõ các mục tiêu của các thành phần hiệu quả khác nhau. Việc điều trị các bệnh tâm thần kinh trong tương lai có triển vọng ứng dụng rộng rãi.
Tóm lại,thiếu máu cục bộ não và tái tưới máucó thể gây ra biểu hiện bất thường của EAA, NF-KB và protein ở vùng hải mã của chuột, đồng thời làm nặng thêm chấn thương não và rối loạn chức năng nhận thức.Cistanche glycosidecó thể ức chế hiệu quả sự biểu hiện của NF-KB và giảm mức độ biểu hiện của protein tau, protein P-tau và Aβ amyloid trong EAA và vùng hải mã của các mô não chuột, có thể được sử dụng như một cách mới để điều trịthiếu máu cục bộbệnh mạch máu não.
Cistanche glycoside điều trị thiếu máu cục bộ não-tái tưới máu
Tham khảo
[1] Yuan Lingyue, Zhai Dongyu. Ketamine làm giảm phản ứng viêm củathiếu máu cục bộ não-tái tưới máuchấn thương ở chuột và nghiên cứu tương quan về con đường tín hiệu NF-κB [J]. Dược sĩ Trung Quốc, 2020, 23 (4): 614-619.
[2] Li Ping, Yu Jingping, Chen Yixuan, et al. Ảnh hưởng củathiếu máu cục bộ não-tái tưới máuchấn thương về hình thái bệnh lý của tổn thương thần kinh ở khu vực EPL của vỏ não và vùng đồi hải mã CA1 ở chuột [J]. Tạp chí Y học cổ truyền Trung Quốc Trung Quốc, 2020, 35 (3):1488-1492.
[3] Ôn Yến, Vũ Quan. Vai trò của hàng rào máu não trong cơ chế bệnh sinh của bệnh Alzheimer [J]. Tạp chí Y khoa Trùng Khánh, 2016, 45 (8): 1116-1118. [4] Li Chuanwen, Zhang Rong, Hou Liang, et al. Con đường SIRT1 / NF-kB tham gia vào resveratrol để cải thiện phản ứng viêm củathiếu máu cục bộ não-tái tưới máuchấn thương ở chuột[J]. Tạp chí của Đại học Y An Huy, 2018,53 (1): 6-9.
[5] Yin Shuiling, Wang Haibo, Yang Shuo. Bảo vệ thần kinhtác dụng của Cistanchepolysacarit bằng cách kích hoạt con đường truyền tín hiệu Wnt / β-catenin trên chuột bệnh Parkinson do 6-HODA gây ra [J]. Tạp chí Tích hợp Trung Quốc cổ truyền và y học phương Tây trong bệnh tim mạch máu não, 2020,18 (8): 1227-1230.
[6] Li Zhenzong, Zhao Yumei, Yuan Hui. Sửa đổi mô hình chuột của tiêu điểmthiếu máu cục bộ nãovới phương pháp khâu[J]. Tạp chí Phẫu thuật Thần kinh Xâm lấn Tối thiểu Trung Quốc, 2018, 23 (9): 419-422.
[7] Longa E Z, Weinstein P R, Carlson S, et al. Tắc động mạch não giữa có thể đảo ngược mà không cần cắt bỏ craniectomy ở chuột. [J]. Đột quỵ; một tạp chí về tuần hoàn não, 1989, 20 (1): 84.
[8] Xie Lihua, Liêu Jun. Nghiên cứu về Định luật kết hợp y học Trung Quốc trong điều trịThiếu máu não-ReperfusitrênChấn thương dựa trên quy tắc liên kết[J]. Tạp chí Y học Cổ truyền Trung Quốc Hồ Nam của Đại học Dược phẩm, 2020, 40 (1): 65-69.
[9] Lý Phàm. Curcumin làm giảm thiệt hại của tế bào thần kinh não ở chuột ngang bệnh Alzheimer bằng cách ức chế con đường tín hiệu TLR4 / NF-kB [J]. Nghiên cứu giải phẫu, 2017, 39 (2): 102-105.
[10] Wang Weiyao, Chen Ling, Yue Xueling, et al. Ảnh hưởng của căng thẳng kiềm chế mãn tính đối với việc học tập và trí nhớ không gian và mức độ axit amin kích thích trong răng cưa hải mã của chuột già [J]. Tạp chí của Đại học Cát Lâm (Ấn bản Y khoa), 2018,44 (1): 8-12.
[11] Yang Jianhua, Mai Wu Judan Alifu, Ju Bowie, et al. Nghiên cứu về quá trình chiết xuất và dược lực học của các bộ phận hiệu quả nhuận tràng củaCistanche ·[J]. Tạp chí Kiểm tra Chất lượng và An toàn Thực phẩm, 2019, 10 (15) ): 5069-5075.
[12] Tiếng Ailadan· Maimaiti Aili, Yang Ting, Yuan Jie, et al. Công nghệ chiết xuất và hoạt động chống oxy hóa in vitro của polysacarit từCistanche ·cặn bã[J]. Hóa học và Kỹ thuật sinh học, 2020, 37 (2) ): 36-41.
[13] Mã Tiểu Thanh, Wang Jie, Hu Junping, et al. Dược lực học củaCistanche phenylethanoid glycosidevề tổn thương thận cấp tính do gentamicin gây ra ở chuột[J]. Tạp chí của Đại học Y tân cương, 2020, 43 (7): 942 -946,950.
[14] Đặng Nam, Shen Yajuan, Đinh Huệ, et al. Tiến bộ nghiên cứu về tác dụng dược lý củaCistanche ·thành phần polysaccharide sa mạc[J]. Tạp chí của Đại học Y học cổ truyền Trung Quốc Liêu Ninh, 2020, 22 (6): 67-71.
[15] Wang Lu, Bai Yumeng, Li Xiaoyu, et al. Ảnh hưởng củaGlycoside Cistanchevề học tập chức năng nhận thức và stress oxy hóa ở chuột mô hình bệnh Alzheimer[J]. Tạp chí Giải phẫu, 2020, 43 (3): 194-199, bìa sau 3.
[16] Huang Huilian, Chen Li. Ảnh hưởng củaGlycoside Cistanchevề chức năng nhận thức và biểu hiện protein p-tau huyết thanh ở bệnh nhân sa sút trí tuệ mạch máu [J]. Tạp chí Tích hợp Trung Quốc cổ truyền và Tây y Bệnh tim mạch máu não, 2019, 17 (8): 1248- 1250.
