Đánh giá hoạt động kháng sinh và cơ chế của Galangin trong Silico và trong Vivo
Mar 29, 2022
Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
Ki Wung Chung, Hyeong Oh Jeong, Eun Kyeong Lee, Su Jeong Kim, Pusoon Chun, bHae Young Chung, *, a và Hyung Ryong Moon *, a
Sắc tố bất thường do tổng hợp quá nhiều melanin có thể dẫn đến các vấn đề nghiêm trọng như tàn nhang, đồi mồi và u hắc tố. Các chất ức chế tyrosinase là một mục tiêu thú vị để điều trị chứng tăng sắc tố vì tyrosinase là enzym giới hạn tốc độ tổng hợp melanin. Việc sàng lọc các chất ức chế tyrosinase mạnh dẫn đến việc tìm ra flavonoidgalanin, cho thấy tác dụng ức chế đáng chú ý đối với tyrosinase của nấm. Giá trị IC5 0 của galanin (3,55 ± 0,39 µM) thấp hơn giá trị của axit kojic (48,55 ± 1,79 µM), được sử dụng làm đối chứng dương tính. Trong mô phỏng gắn kết silico và các nghiên cứu cơ học đã chứng minh rằng galanin tương tác với các vị trí xúc tác của tyrosinase và cạnh tranh với tyrosine. Trong các tế bào u ác tính B16F10 được kích thích bằng hormone kích thích -melanocyte, galanin ức chế hoạt động của tyrosinase cũng như sản xuất melanin. Mặc dù liều lượng cao củagalaningây độc tế bào, không có tác dụng gây độc tế bào nào được quan sát ở liều thấp. Ngoài ra, hiệu quả in vivo của galanin đã được đánh giá ở những con chuột không có lông sở hữu melanin HRM2. Được đo bằng chỉ số làm trắng da và nhuộm sắc tố melanin, việc tiếp xúc với tia UVB lặp đi lặp lại làm tăng tổng hợp hắc tố da. Ứng dụng Galangin làm giảm đáng kể quá trình hình thành hắc tố do tiếp xúc với tia UVB. Nói chung, dữ liệu của chúng tôi chỉ ra rằnggalanincho thấy hoạt động ức chế tyrosinase mạnh mẽ, điều này cho thấy nó có thể là một chất làm trắng da hiệu quả.
Từ khóagalanin; tạo hắc tố; sắc tố da; tyrosinase
Galangin, một hợp chất flavonoid, được tìm thấy ở nồng độ cao ở Alpinia officinarum và Helichrysum) Các nghiên cứu trước đây đã chỉ ra rằng galangin có các hoạt động dược lý khác nhau, bảo vệ thực vật khỏi bức xạ UV, mầm bệnh và động vật ăn cỏ, đồng thời thực hiện các hoạt động chống vi khuẩn và kháng vi rút.2– 4) Tuy nhiên, nó cũng có đặc tính chống oxy hóa, được cho là do tác dụng có lợi của nó.5) Galangin cũng có tác dụng chống ung thư thông qua việc ức chế sự phát triển của tế bào ung thư.
Melanin là một sắc tố sinh học được tìm thấy trong hầu hết các sinh vật. Trong sinh học da, melanin được tạo ra bởi quá trình oxy hóa axit amin tyrosine. Trong sinh lý bình thường, melanin ngăn ngừa tổn thương da thông qua việc hấp thụ bức xạ UV có hại. cũng có thể gây ra các vấn đề về thẩm mỹ và các bệnh về da. Điều trị sắc tố da quá mức. Một số lượng enzym tham gia vào quá trình hình thành hắc tố. Trong số các enzym khác nhau này, tyrosinase, xúc tác quá trình oxy hóa L-tyrosine thành 3, 4- dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) và L-DOPA thành dopaquinone, là quan trọng nhất.12) Những quá trình này được trung gian bởi tyrosinase là các quy trình giới hạn tỷ lệ. Trong các điều kiện bất thường, sự tăng hoạt của tyrosinase đã được phát hiện với sự gia tăng tổng sản xuất melanin. các nguồn đã được phát triển. Nhiều chất ức chế tyrosinase, bao gồm hydroxyquinone, axit kojic và arbutin, trước đây đã được sử dụng trong ngành dược phẩm và mỹ phẩm. Mặc dù một số chất ức chế tyrosinase đã được phát triển trên thị trường, các tác dụng phụ gây độc tế bào đã trở nên rõ ràng.12) Do đó, cần có các chất làm trắng da hiệu quả và an toàn.
Mục đích của nghiên cứu này là mô tả galangin như một chất ức chế tyrosinase mạnh bằng cách sử dụng các phương pháp thử nghiệm khác nhau. Trong quá trình tìm kiếm các chất ức chế tyrosinase từ các nguồn tự nhiên, chúng tôi nhận thấy rằng galangin làm giảm đáng kể hoạt động của tyrosinase với hiệu lực cao. Bởi vì tác dụng ức chế của galanin đối với tyrosinase đã được báo cáo, chúng tôi tập trung vào các cơ chế ức chế và hiệu lực trong các thí nghiệm trên tế bào và động vật.1) Sử dụng các thí nghiệm silico, in vitro và in vivo khác nhau, dữ liệu của chúng tôi chỉ ra rằng galangin có thể là một chất làm trắng da mạnh mẽ để điều trị sắc tố da.
lợi ích sức khỏe của cistanche tubolosa:Làm trắng da
NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
Vật liệu
Galangin, axit kojic, tyrosinase nấm, L-tyrosine, hormone kích thích -melanocyte (-MSH), và các thuốc thử hóa học khác được mua từ Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA).
Đo lường tác dụng ức chế tyrosinase và cơ chế ức chế trong hệ thống không có tế bào
Để đánh giá hiệu quả và cơ chế ức chế của galangin đối với tyrosinase, tyrosinase của nấm đã được sử dụng như đã mô tả trước đây. Một cách ngắn gọn, 1000 đơn vị tyrosinase của nấm được hòa tan trong 20 µL nước muối đệm photphat (PBS) và thêm vào 170 µL hỗn hợp xét nghiệm, chứa 1 mM L-tyrosine, 50 mM đệm photphat (pH 6,5) và 10 µL vật liệu thử nghiệm. Hỗn hợp được ủ ở nhiệt độ phòng (25 độ) trong 30 phút. Lượng dopachrome tạo ra được đo quang phổ ở bước sóng 492 nm (OD492) trong một đầu đọc vi tấm. IC50 được tính toán từ các lần lặp lại thí nghiệm ở các liều lượng galangin khác nhau. Để xác định cơ chế ức chế của galanin, một thử nghiệm động học tyrosinase đã được thực hiện. Các nồng độ khác nhau của L-tyrosine (1, 2, 4 và 8 mM) đã được sử dụng cho thử nghiệm ức chế. Sau khi kiểm tra, mỗi giá trị được chuyển đổi thành đối ứng của nó theo đồ thị Lineweaver – Burk. Kết quả cho thấy âm mưu của 1 / V so với 1 / [S]. Giao điểm của mỗi ô được sử dụng để xác định cơ chế ức chế.
Mô phỏng gắn đế
Đối với mô phỏng kết nối protein-phối tử silico, chúng tôi đã sử dụng AutoDock4.2. Sự liên kết thành công đã thu được giữa protein và phối tử. Cấu trúc ba chiều (3D) của tyrosinase được sử dụng trong cấu trúc tinh thể là từ nấm Agaricus bisporus (PDB ID: 2Y9X) và vị trí liên kết được xác định trước của tyrosine được sử dụng làm túi gắn đế.15) Các mô phỏng lắp ghép được thực hiện giữa tyrosinase và galangin / axit kojic. Các hợp chất được chuẩn bị để mô phỏng cập bến theo các bước sau: (1) Cấu trúc 2D được chuyển đổi thành cấu trúc 3D; (2) điện tích đã được tính toán, và (3) nguyên tử hydro được thêm vào bằng cách sử dụng chương trình ChemOffice. Dự đoán về dư lượng liên kết hydro có thể có giữa các hợp chất và tyrosinase và việc tạo ra các dược chất được tính toán bởi LigandScout 3. 0.
Hệ thống nuôi cấy tế bào
Tế bào u ác tính Murine B16F10 thu được từ Bộ sưu tập Văn hóa Loại Hoa Kỳ (Rockville, MD, Hoa Kỳ) lần đầu tiên được sử dụng để đánh giá tác động của galanin đối với sự ức chế tyrosinase. Các tế bào được nuôi cấy trong môi trường Eagle's đã sửa đổi của Dulbecco (DMEM; WELGENE Inc., Korea, LM 001-05) được bổ sung 10% huyết thanh bò thai (FBS; WELGENE Inc., S 101-01) và penicillin / streptomycin (100 IU / 50 µg / mL; WELGENE Inc., LS 202-02) ở 37 độ trong bầu không khí ẩm có chứa 5% CO2 trong không khí. Để đánh giá tác động của galangin đối với khả năng tồn tại của tế bào, một thử nghiệm về khả năng tồn tại của tế bào đã được tiến hành bằng cách sử dụng một bộ kit bán sẵn trên thị trường (EZ -1000, Dogen Bio, Korea). Tóm lại, các tế bào được nuôi cấy trong 96- đĩa giếng và được xử lý với các nồng độ galangin khác nhau. Sau thời gian chỉ định, độ hấp thụ được đọc ở bước sóng 450 nm bằng cách sử dụng đầu đọc vi tấm. Tất cả các thí nghiệm tế bào được thực hiện ít nhất ba lần để đảm bảo khả năng tái lập.
Hoạt động Tyrosinase
Hoạt động của tyrosinase trong tế bào B16F1 0 được kiểm tra thông qua phép đo tốc độ oxy hóa L-DOPA. Các tế bào được mạ trong đĩa 60π giếng, ủ trong điều kiện có hoặc không có 1 µM -MSH, và sau đó được xử lý trong 24 giờ với 5 và 10 µM galangin. Điều trị bằng axit kojic đã được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Các tế bào được ly giải trong 500 µL dung dịch đệm natri photphat 50 mM (pH 6,8) có chứa 25 µL 1 phần trăm Triton X -100 và 25 µL 0,1 mM phenylmethylsulfonyl florua và sau đó được đông lạnh ở -80 độ trong 30 phút. Sau khi rã đông và trộn, dịch ly tế bào được làm rõ bằng cách ly tâm ở 12000 × g trong 30 phút ở 4 độ. Phần nổi phía trên (80 µL) được đặt trong một đĩa giếng 96-, 20 µL L-DOPA (2 mg / mL) được thêm vào và độ hấp thụ được đọc ở 492 nm sau mỗi 10 phút trong 1 giờ ở 37 độ bằng cách sử dụng một máy đọc đĩa.
Chiết xuất Cistanche: ức chế biểu hiện tyrosinase
Nội dung Melanin
Trong nghiên cứu hiện tại, hàm lượng melanin được sử dụng như một chỉ số của quá trình hình thành hắc tố. Tóm lại, các tế bào B16 được mạ trong một đĩa 60π và được ủ trong điều kiện có hoặc không có 1 µM -MSH. Sau đó, các tế bào được ủ trong 24 giờ có hoặc không có galangin ở 5 và 10 µM. Việc điều trị bằng axit kojic được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Sau hai lần rửa với PBS, các mẫu được hòa tan trong 500 µL 1 NNaOH, ủ ở 60 độ trong 1 giờ, và trộn để hòa tan melanin. Độ hấp thụ ở bước sóng 405 nm được đo bằng cách sử dụng một đầu đọc vi tấm.
Thử nghiệm trong Vivo
Hiệu quả in vivo của galangin đã được đánh giá trong các thí nghiệm trên động vật. Các nghiên cứu trên động vật được thiết kế bởi Ngân hàng mô lão hóa, được Ủy ban chăm sóc động vật của Đại học Quốc gia Pusan phê duyệt và được thực hiện theo hướng dẫn thí nghiệm trên động vật do Đại học Quốc gia Pusan ban hành. Những con chuột đực không lông sở hữu melanin HRM2 sáu tuần tuổi được lấy từ Động vật trong Phòng thí nghiệm Hoshino (Yoshino, Saitama, Nhật Bản) và được nuôi trong điều kiện được kiểm soát (23 ± 1 độ, độ ẩm 55% ± 5%, 12- h ánh sáng / chu kỳ tối) với quyền sử dụng nước miễn phí và chế độ ăn tiêu chuẩn trong phòng thí nghiệm. Sau thời gian thích nghi 1 tuần, những con chuột được chia ngẫu nhiên thành 4 nhóm gồm 6 con. Galangin (1 0 µM) và axit kojic (50 µM) được điều chế trong dung dịch tạo thành từ propylen glycol và etanol (3: 7). Dung dịch hòa tan (200 µL) hoặc phương tiện được bôi tại chỗ lên da lưng của con vật mỗi ngày một lần. Các con vật được chiếu xạ bằng tia UVB từ CROSSLINKER (BEX -800, Ultra-Lum Inc., CA, USA) ở 50 mJ / cm2 phù hợp với lịch trình thí nghiệm trên động vật. Màu sắc của các vùng da được đo bằng cách sử dụng máy đo quang phổ CR -10 (Konica Minolta Sensing, Inc., Sakai, Osaka, Japan), trong đó màu sắc được mô tả bằng các giá trị L *, a * và b * của chúng phù hợp với hệ thống màu của Commission International de L'Eclairage. Sau khi các con vật bị hiến tế, da được thu thập, cố định trong 4% paraformaldehyde qua đêm ở nhiệt độ phòng, và nhuộm màu cho melanin bằng cách sử dụng bộ nhuộm Fontana – Masson của American Master * Tech Scientific, Inc. (Lodi, CA, Hoa Kỳ) tại phù hợp với hướng dẫn của nhà sản xuất. Một cách ngắn gọn, da cắt lát được nhuộm bằng dung dịch bạc amoniac trong 60 phút ở 60 độ, ủ trong 0,1% vàng clorua, và sau đó trong 5% natri thiosunfat.
Phân tích thống kê
Bài kiểm tra t của Sinh viên được sử dụng để phân tích sự khác biệt giữa hai nhóm và ANOVA được sử dụng để phân tích sự khác biệt giữa các nhóm. Giá trị của p<0.05 were="" considered="" statistically="" significant.="" the="" analysis="" was="" performed="" using="" graphpad="" prism="" 5="" (graphpad="" software,="" la="" jolla,="" ca,="">
cistanche tubolosa
KẾT QUẢ
Trong mô phỏng gắn kết silico của Galangin trên Tyrosinase
Galangin là một chất phytochemical tự nhiên và chứa một nhóm flavonoid trong cấu trúc của nó (Hình 1). Ban đầu, một mô phỏng gắn kết được thực hiện giữa tyrosinase của nấm (cấu trúc bậc ba) và các hợp chất (galangin, axit kojic và tyrosine). Vị trí gắn kết mà galangin và axit kojic được liên kết trước đây đã được xác định là vị trí hoạt động của tyrosinase.15) Mô phỏng này đã thành công và đạt được một điểm số đáng kể. Năng lượng liên kết giữa galangin và tyrosinase là −7,67 kcal / mol, được xác định bằng phân tích sử dụng Autodock4.2. Năng lượng liên kết giữa tyrosinase và axit kojic (đối chứng dương) là −4,09 kcal / mol, và −5,13 kcal / mol giữa tyrosinase và chất nền ban đầu, tyrosine (Bảng 1). Những kết quả này cho thấy rằng galangin liên kết với tyrosinase với ái lực cao hơn các tương tác khác. Dựa trên kết quả mô phỏng docking, chúng tôi đã tìm kiếm sự tương tác giữa tyrosinase và các hợp chất bằng cách sử dụng chương trình LigandScout. Chúng tôi nhận thấy rằng galangin tương tác với ASN -260, VAL -283, ALA -286 và PHE -292, trong khi axit kojic chỉ tương tác với ASN -260 và MET280 ( Hình 2, Bảng 1). Do đó, những tương tác này có thể là yếu tố quyết định chính của hoạt động của chất ức chế và có ảnh hưởng quan trọng đến điểm gắn kết.
Xác định Cơ chế và Tác dụng Chống tạo hắc tố trong Tyrosinase của Nấm
Dựa trên kết quả nghiên cứu silic và các kết quả được báo cáo trước đây, chúng tôi đã đánh giá tác dụng và cơ chế kháng sinh của nấm khi sử dụng tyrosinase của nấm. Khi thử nghiệm với tyrosinase của nấm trong hệ thống tự do tế bào, hiệu quả ức chế của galangin mạnh hơn so với axit kojic (Hình 3A). Ngoài ra, liều lượng galangin làm giảm hoạt động của tyrosinase (Hình 3B). Giá trị IC5 0 của galangin và axit kojic đã được tính toán và được trình bày trong Bảng 2. Giá trị IC5 0 thấp của galangin (3,55 ± 0,39 µM) chỉ ra rằng hiệu lực cao hơn đáng kể so với kojic axit (48,55 ± 1,79 µM). Cơ chế ức chế của galangin được đánh giá thêm bằng cách sử dụng đồ thị đối ứng kép Lineweaver – Burk. Các nồng độ khác nhau của L-tyrosine (1, 2, 4, và 8 mM) và galangin (0, 7,5 và 15 µM) đã được sử dụng cho xét nghiệm ức chế. Những thay đổi phụ thuộc vào thời gian trong độ hấp thụ được đo và kết quả tương hỗ kép được vẽ biểu đồ (Hình 3C). Kết quả chỉ ra rằng đồ thị của 1 / V so với 1 / [S] tạo ra ba đường khác nhau có độ dốc khác nhau, giao nhau trên cùng một trục tung. Khi nồng độ của hợp chất tăng lên, giá trị Km tăng lên, nhưng giá trị Vmax vẫn giữ nguyên, điều này cho thấy rằng galangin là chất ức chế cạnh tranh liên kết với tyrosinase. Những dữ liệu này đồng ý với kết quả trong silico rằng galangin liên kết và ức chế vị trí hoạt động của tyrosinase.
Hình 1. Cấu trúc của Galangin, Axit Kojic và Tyrosine
Đánh giá hoạt động suy giảm của Galangin trong tế bào u ác tính Murine B16F10
Tiếp theo, hoạt động khử màu của galangin được đánh giá bằng cách sử dụng tế bào hắc tố chuột B16F10. Đầu tiên, tác dụng gây độc tế bào của galangin đối với các tế bào u ác tính của chuột B16F10 đã được thử nghiệm. Như thể hiện trong Hình 4A, galangin làm giảm đáng kể khả năng sống của tế bào ở liều trên 25 µM. Do đó, để tránh gây độc tế bào, chúng tôi đã sử dụng 5 µM và 10 µM galangin trong các thí nghiệm để đánh giá tác dụng kháng sinh. Tế bào B16F10 được xử lý bằng galangin với sự hiện diện của 1 µM -MSH. Tổng hợp melanin gây ra bởi điều trị -MSH có thể nhìn thấy bằng mắt thường và cho thấy rằng galangin ức chế mạnh sự tổng hợp melanin kích hoạt -MSH (Hình 4B). Điều trị -MSH làm tăng đáng kể hoạt động của tyrosinase và hàm lượng melanin của tế bào B16F10 (Hình 4C, D). Điều trị bằng galangin ức chế sự hình thành hắc tố tế bào, được tăng cường bởi -MSH theo cách phụ thuộc vào liều lượng (Hình 4C, D). Nói chung, những kết quả này chỉ ra rằng galangin có thể là một tác nhân mạnh để ức chế sự hình thành hắc tố thông qua việc ức chế tyrosinase.
Bảng 1. Điểm kết dính và dư lượng tương tác chính của hợp chất
Ảnh hưởng của Galangin đối với sắc tố da trong Vivo
Tác dụng ức chế của galangin sau đó đã được kiểm tra ở những con chuột không có lông sở hữu sắc tố melanin được điều trị theo lịch trình được mô tả trong Hình 5A. Màu sắc của các vị trí da được đo chính xác bằng cách sử dụng máy quang phổ. Sự tiếp xúc với tia UVB của chuột dẫn đến giảm giá trị L *, giá trị này đại diện cho sắc tố (Hình 5B). Sự giảm giá trị L * do tia UVB gây ra đã bị chặn lại đáng kể ở động vật được điều trị bằng galanin so với ở động vật đối chứng được điều trị bằng phương tiện, điều này chứng tỏ hiệu quả làm giảm hiệu quả mạnh mẽ của galanin (Hình 5B). Giá trị ΔL * cũng chỉ ra hiệu lực của galangin trong các giai đoạn thử nghiệm (Hình 5C). Ngoài ra, màu da được phát hiện bằng mắt thường vào ngày thứ 14 cũng cho thấy hiệu lực kháng sinh của galangin (Hình 5D). Phương pháp nhuộm son Fontana – Mas, làm nổi bật hắc tố, đã xác minh tác dụng của galangin. Các mẫu da của động vật được chiếu tia UVB cho thấy các đốm sắc tố melanin tăng lên (Hình 5E). Phù hợp với dữ liệu số từ phép đo quang phổ, động vật được xử lý bằng galanin cho thấy sự giảm các đốm melanin nhuộm màu so với động vật đối chứng được chiếu tia UVB (Hình 5E). Nói chung, những dữ liệu này gợi ý rằnggalaninlà một tác nhân tạo mạch theo thời gian hiệu quả trong mô hình hình thành hắc tố in vivo do tia UVB gây ra.
Hình 2. Kết quả mô phỏng in silico Docking giữa Tyrosinase và các hợp chất ứng viên
THẢO LUẬN
Trước đây đã có báo cáo rằng galangin có nhiều tác dụng sinh học khác nhau, bao gồm cả bảo vệ tế bào. Mặc dù hoạt tính chống tyrosinase của galangin đã được nghiên cứu trước đây, nhưng cơ chế và hiệu quả chính xác trong hệ thống nuôi cấy tế bào vẫn chưa được mô tả hoàn toàn. Hiệu quả ức chế của galangin ban đầu được đánh giá bằng cách sử dụng trong mô phỏng gắn kết silico. Các mô phỏng gắn kết cho thấy liên kết của galangin với vị trí hoạt động của tyrosinase ổn định hơn so với liên kết của chất nền ban đầu (tyrosine) hoặc axit kojic (đối chứng tích cực). Hiệu quả và cơ chế ức chế cũng đã được xác nhận khi sử dụng nấm tyrosinase. Cuối cùng, hiệu quả ức chế của galangin chống lại sự hình thành hắc tố đã được đánh giá trong các tế bào u ác tính của chuột B16F10 được kích thích -MSH. Tóm lại, nghiên cứu hiện tại đã xác định galanin là một tác nhân mạnh.
Mô phỏng kết nối máy tính đã được thiết lập như một công cụ mạnh mẽ để sàng lọc và đánh giá các tác nhân dược lý mới.17) Kết quả mô phỏng gắn kết cung cấp không chỉ các vị trí liên kết mà còn cung cấp ái lực liên kết giữa hợp chất và enzym, cung cấp thông tin ban đầu mà không cần vật lý 18) Mặc dù các dự đoán không phải lúc nào cũng chính xác và cần thêm các thí nghiệm, nhưng mô phỏng lắp ghép làm giảm các vật liệu và nguồn lực cần thiết và cũng có thể hỗ trợ các dữ liệu thí nghiệm sinh học. Mô phỏng docking tính toán của chúng tôi chỉ ra rằng galangin có thể liên kết mạnh hơn với tyrosinase hơn tyrosine hoặc axit kojic. Hơn nữa, số lượng dư lượng tương tác giữa galangin và tyrosinase lớn hơn so với tyrosine hoặc axit kojic. Dữ liệu đầu vào được xác minh thêm bằng cách sử dụng xét nghiệm enzym tyrosinase, cho thấy IC50 của galangin thấp hơn axit kojic; do đó, tác dụng ức chế của galangin đối với tyrosinase mạnh hơn axit kojic.
Cơ chế ức chế của galangin đối với tyrosinase đã được nghiên cứu thêm bằng cách sử dụng tyrosinase nấm. Bởi vì dữ liệu mô phỏng docking gợi ý rằng galangin liên kết với cùng một vị trí hoạt động mà tyrosinase liên kết, nên người ta dự đoán rằng galangin có thể là chất ức chế cạnh tranh của tyrosinase. Kết quả thí nghiệm cho thấy galangin ức chế cạnh tranh tyrosinase liên kết với chất nền ban đầu của nó, tyrosine, điều này đã xác nhận kết quả mô phỏng docking. Nói chung, các kết quả đã chứng minh độ tin cậy của mô phỏng docking tính toán và khả năng sàng lọc các chất ức chế của nó.
Hiệu quả của galangin cũng được đánh giá trong các tế bào u ác tính ở chuột B16F10. Galangin cho thấy tác dụng gây độc tế bào đáng kể ở tế bào B16F10 khi dùng liều cao. Điều này phù hợp với các báo cáo trước đây về hoạt tính chống ung thư của galangin trong một số dòng tế bào ung thư. Tuy nhiên, giá trị IC50 của galangin rất thấp khi thử nghiệm trong hệ thống không có tế bào cho thấy không có tác dụng gây độc tế bào. Thật vậy, hiệu quả của galangin trong việc ức chế hình thành hắc tố có thể chấp nhận được ở liều thấp mà không gây độc tế bào. Liều lượng thấp của galangin làm giảm hiệu quả hàm lượng melanin, cũng như hoạt động của tyrosinase, trong hệ thống nuôi cấy tế bào. Cùng với hệ thống không di động,galaninđã được chứng minh là có tác dụng ức chế mạnh tyrosinase trong hệ thống nuôi cấy tế bào.
Cuối cùng, tác dụng kháng sinh của galangin được đánh giá bằng cách sử dụng chuột không lông HRM2. Mô hình chuột không lông HRM2 cung cấp cơ sở hữu ích cho các thí nghiệm hình thành hắc tố in vivo, vì chuột có thể tạo ra melanin, đặc biệt là dưới áp lực của môi trường. Theo hiểu biết của chúng tôi, đây là nghiên cứu đầu tiên cho thấy hiệu quả kháng sinh của galangin bằng cách sử dụng mô hình tạo hắc tố in vivo. Điều quan trọng là phải thiết lập hiệu quả in vivo vì nhiều chất ức chế tạo hắc tố khác đã không hoạt động trong cơ thể do chúng không có khả năng vượt qua lớp sừng của da. Tóm tắt,galaninđược xác định là một tác nhân gây mạch mạnh cho động vật in vivo. Chúng tôi kết luận rằng chất ức chế tyrosinase galangin cung cấp một ứng cử viên thuốc mới để điều trị rối loạn tăng sắc tố.
viên nang cistanche