Chiết xuất Herba Cistanche tăng cường trạng thái và hô hấp của Glutathione ty thể ở tim chuột, với khả năng cảm ứng protein tách rời

Ada Hoi-Ling Siu và Kam Ming Ko

Để trích dẫn bài báo này: Ada Hoi-Ling Siu & Kam Ming Ko (2010) Chiết xuất Herba Cistanche giúp tăng cường trạng thái và hô hấp của glutathione ty thể ở tim chuột, với khả năng cảm ứng các protein tách rời, Pharmaceutical Biology, 48: 5, 512-517, DOI: 10.3109 / 13880200903190985

Để liên kết đến bài viết này: https://doi.org/10.3109/13880200903190985

Tiếp xúc:joanna.jia@wecistanche.com

trừu tượng

HerbaCistanche, một loại thảo mộc Trung Quốc có nguồn gốc từ toàn bộ câyCistanchesa mạcYC Ma (Orobanchaceae), đã được chứng minh là tăng cường tạo ATP ti thể và bảo vệ chống lại tổn thương do thiếu máu cục bộ cơ tim / tái tưới máu (I / R) ex vivo ở chuột. Để xác định vai trò của ty thể trong hoạt động bảo vệ tim mạch của Herba Cistanche, chúng tôi đã nghiên cứu tác dụng của HerbaCistancheđiều trị về tình trạng glutathione ty thể và các thông số chức năng trong tim chuột. Xử lý bằng chiết xuất methanol của HerbaCistanchenâng cao tình trạng glutathione của ty thể, giảm hàm lượng Ca2 cộng của ty thể và tăng tiềm năng màng ty thể. Ngoài ra, sự gia tăng hô hấp ở Trạng thái 4, biểu hiện của hô hấp không liên kết, đã được quan sát thấy trong các ti thể được phân lập từ HerbaCistanche- lòng chuột đã qua xử lý. Sự tăng cường tình trạng glutathione của ty thể và khả năng chức năng, cũng như sự cảm ứng giả định của các protein tách rời, có thể liên quan đến việc bảo vệ tim mạch do Herba cung cấp.Cistancheđiều trị bảo vệ chống lại chấn thương I / R.

Cistanchecó nhiều lợi ích cho sức khỏe

Từ khóa:HerbaCistanche; ti thể; glutathione; can xi; điện thế màng; hô hấp ti thể; tách ra

Giới thiệu

Sự tái tưới máu của cơ tim bị thiếu máu cục bộ trước đó gây ra một loạt các thay đổi trong ty thể, bao gồm tăng sản xuất oxy phản ứng (ROS), quá tải Ca2 cộng với sự suy giảm sản xuất adenosine triphosphate (ATP), tất cả đều có thể dẫn đến hoại tử và / hoặc apoptosis- chết tế bào qua trung gian (Redegeld và cộng sự, 1992; Lemasters và cộng sự, 1998). Vì ty thể đóng một vai trò quan trọng trong việc xác định số phận của các tế bào cơ tim sau thử thách thiếu máu cục bộ / tái tưới máu (I / R), do đó, việc bảo vệ chống lại tổn thương I / R cơ tim nên được nhắm mục tiêu nhằm bảo tồn tính toàn vẹn cấu trúc và chức năng của ty thể. Việc duy trì chuyển hóa năng lượng của ty thể sau thử thách I / R là đặc biệt quan trọng vì chức năng co bóp của tim hầu như phụ thuộc hoàn toàn vào ATP do ty thể tạo ra. Các tế bào cơ tim còn sống nhưng không co lại thì rất ít được sử dụng.

Herba Cistanche, toàn cây khô của họ Cistanche Desticola YC Ma (Orobanchaceae), là một loài thực vật ký sinh mọc chủ yếu ở các vùng sa mạc phía bắc và đông bắc Trung Quốc. Herba Cistanche, được phân loại là một loại thảo mộc "tăng cường sinh lực" trong y học Trung Quốc, được kê đơn cho các trường hợp thiếu thận, vô sản phụ nữ và táo bón do khô ruột ở bệnh nhân già (Chen, 1998). Các nghiên cứu trước đây trong phòng thí nghiệm của chúng tôi đã chỉ ra rằng chiết xuất methanol của Herba Cistanche làm tăng khả năng tạo ATP của cơ tim (Leung & Ko, 2008) và bảo vệ chống lại tổn thương I / R cơ tim ở chuột (Leung, 2006). Trong khi kích thích khả năng tạo ATP song song với việc tăng cường vận chuyển điện tử ty thể (Leung & Ko, 2008), bảo vệ tim chống lại tổn thương I / R do điều trị Herba Cistanche có liên quan đến việc giảm sự cạn kiệt ATP của cơ tim (Leung, 2006). Trong nghiên cứu này, để xác định vai trò của ty thể trong hoạt động bảo vệ tim của Herba Cistanche, chúng tôi đã nghiên cứu tác động của việc điều trị Herba Cistanche đối với tình trạng glutathione của ty thể, hàm lượng Ca2 cộng, điện thế màng và tốc độ hô hấp ở tim chuột.

cistanchelợi ích của sa mạc

Nguyên liệu và phương pháp

Nguyên liệu thảo mộc

Herba Cistanche được mua từ một đại lý thảo dược địa phương (có trụ sở tại Hồng Kông) (Lee Hoong Kee). Loại thảo mộc này đã được xác thực bởi nhà cung cấp và một mẫu chứng từ (HKUST00301) đã được gửi tại Khoa Hóa sinh, Đại học Khoa học & Công nghệ Hồng Kông (HKUST). Việc chiết xuất methanol của loại thảo mộc này đã được tiến hành, dựa trên các nghiên cứu trước đây chỉ ra rằng chiết xuất như vậy đã tăng cường tạo ATP ty thể và bảo vệ chống lại tổn thương I / R ở tim chuột (Leung, 2006; Leung & Ko, 2008). Tóm lại, Herba Cistanche (400 g) được cắt thành các miếng nhỏ và chiết xuất bằng cách đun nóng hồi lưu trong 300mL metanol ở 60 độ trong 2 giờ, như đã mô tả trước đây (Leung & Ko, 2008). Thủ tục được lặp lại hai lần. Dịch chiết gộp được làm khô bằng cách làm bay hơi dung môi dưới áp suất giảm; sản lượng là 42 phần trăm (w / w) liên quan đến lượng thảo mộc thô. Dịch chiết được bảo quản ở 4 độ cho đến khi sử dụng. Mặc dù các loại thảo mộc Trung Quốc theo truyền thống được chiết xuất trong nước để uống, methanol đã được sử dụng trong nghiên cứu trước đó của chúng tôi để thuận tiện cho quá trình xử lý và lưu trữ mẫu (Yim & Ko, 2002), và chúng tôi nhận thấy chiết xuất methanol đạt yêu cầu về mọi mặt.

Chăm sóc động vật và điều trị bằng thuốc

Chuột Sprague-Dawley cái trưởng thành (8–1 0 tuần tuổi; 2 {{1 0}} 0–230 g) được nhốt trong phòng được kiểm soát độ ẩm, với bóng tối / ánh sáng 12 giờ chu kỳ, ở khoảng 22 độ, và cho phép thức ăn và nước uống. Các con vật được phân chia ngẫu nhiên vào các nhóm khác nhau, với năm con vật trong mỗi nhóm. Chuột được chiết xuất Herba Cistanche qua đường dạ dày (0,2 g / mL trong nước) với liều 0,5g / kg hoặc 1,0 g / kg trong 3 ngày liên tiếp. Động vật đối chứng (chưa qua xử lý) chỉ nhận nước. Hai mươi bốn giờ sau lần dùng thuốc cuối cùng, mô tâm thất tim được lấy từ động vật được gây mê để phân tích sinh hóa. Tất cả các giao thức thử nghiệm đã được phê duyệt bởi Ủy ban Thực hành Nghiên cứu, HKUST.

Chuẩn bị phân số ti thể

Các mô tâm thất ở tim đã được băm nhỏ (~ {{0}}. 6g) được đồng nhất trong 10- lần (w / v) dung dịch đệm sacaroza lạnh băng [0,32M sacaroza, 1mM ethylene diamine axit tetraacetic (EDTA), Tris / HCl 50mM; pH 7,4] sử dụng thiết bị đồng hóa thủy tinh Teflon, ở tốc độ 4000 vòng / phút, với 25–30 hành trình. Các viên ty thể được chuẩn bị từ các chất đồng nhất của mô bằng cách ly tâm ở 800 × g ở 4 độ trong 30 phút, và độ tinh khiết được xác định bằng cách đo các hoạt động cụ thể tương đối của succinate dehydrogenase và lactate dehydrogenase trong phần nổi trên và viên, như đã mô tả trước đây (Evans, Năm 1992). Các viên ty thể được treo lơ lửng trong 1mL dung dịch đệm đồng nhất.

Đo nồng độ glutathione đã giảm của ty thể và glutathione bị oxy hóa

Mức độ glutathione giảm của ty thể (GSH) được xác định bằng enzym sử dụng 5, 59- dithiobis (2- axit nitrobenzoic) (DTNB) và glutathione reductase (GR), trong một giao thức được sửa đổi từ Griffith (198 {{17} }). Một phần nhỏ (21 0 µL) của phần ti thể được trộn với 9 0 µL của 1 0 phần trăm (v / v) 5- axit sulfosalicylic (SSA) và hỗn hợp được ly tâm ở 600 × g trong 10 phút. Để đo mức glutathione bị oxy hóa (GSSG), 100µL lượng chất nổi SSA được trộn với 10 µL 20% (w / v) 2- vinyl pyridin và 10 µL 60% (v / v) trietanolamin trong ống siêu nhỏ. Mỗi ống được để ở nhiệt độ phòng ít nhất 1 giờ. Một hỗn hợp phản ứng chứa 0,63mM DTNB và 0,053mM NADPH (nicotinamide adenin dinucleotide photphat đã khử) trong dung dịch đệm photphat (0,1M, với 5mM Na2 EDTA; pH 7,5) được ủ trước ở 30 độ trong 2 phút. Một phần (30 µL) của chất nổi trên mẫu SSA (tổng glutathione) hoặc mẫu GSSG được thêm vào giếng của đĩa microtiter 96- và 180 µL của hỗn hợp phản ứng đã được làm ấm trước, chứa 0,525U / mL GR, đã được thêm vào tiếp theo. Sự thay đổi độ hấp thụ ở bước sóng 412nm được theo dõi bằng quang phổ trong 5 phút. Nồng độ của GSH và GSSG được ước tính từ các đường chuẩn sử dụng GSH và GSSG [được hòa tan trong 3 phần trăm (w / v) SSA] làm chất chuẩn và được biểu thị bằng protein nmol / mg. Mức GSH được ước tính bằng cách trừ hai lần lượng GSSG của tổng GSH.

Đo hàm lượng Ca2 cộng trong ty thể

Hàm lượng Ca2 cộng của ty thể được đo bằng đầu dò huỳnh quang cảm ứng cộng Ca2, este Fluo -5 N AM (Đầu dò phân tử, Eugene, OR) sử dụng Bộ đếm đa nhãn Victor2 (Mẫu 142 0; PerkinElmer, Turku, Phần Lan), như được mô tả trong Menze et al. (2 0 05). Hằng số phân ly Ca2 cộng (giá trị Kd) được xác định bằng cách sử dụng bộ hiệu chuẩn Ca2 cộng có giá trị trong dải nồng độ 1–1000 µM; Giá trị Kd ước tính là 90–100 µM, với độ tin cậy cao, theo dữ liệu của nhà sản xuất bộ kit. Một phần (25µL) phân đoạn ty thể (0,5mg protein / mL nồng độ cuối cùng) được trộn với 25 µL đệm ủ {100mM KCl và 30mM MOPS [3- (N-morpholino) axit propan sulfonic]; pH7,2} trong đĩa microtiter màu đen 96-. Hỗn hợp được ủ ở 25 độ trong 15 phút; Sau đó, 25 µL digitonin (50 µg / mL) và 25 µL Fluo -5 N AM este (1 µM trong 0,005 phần trăm (w / v) Pluronic F -127) sau đó được thêm vào. Bằng cách tạo điều kiện cho sự thấm qua màng, digitonin qua trung gian ty thể xâm nhập vào chất nhuộm huỳnh quang. Chúng tôi nhận thấy rằng mức Fluo -5 N trong các chế phẩm ti thể của tim chuột đã tăng 20- lần khi có mặt digitonin. Hỗn hợp phản ứng được ủ ở 25 độ trong 30 phút, và các số đọc huỳnh quang được đo ở bước sóng kích thích 488nm và bước sóng phát xạ 532nm. Hàm lượng Ca2 cộng trong ty thể được ước tính bằng cách sử dụng đường chuẩn và được biểu thị bằng µmol / mg protein.

Đo điện thế màng ty thể

Điện thế màng (ΔΨm) được đánh giá bằng một phương pháp được sửa đổi từ phương pháp của Bonavita và cộng sự. (2003), sử dụng thuốc nhuộm huỳnh quang, đầu dò cation ưa béo 5,596, 69- tetrachloro -1, 193, 39- tetraethyl benzimidazolylcarbocyanine iodide thường được gọi là JC -1. Phần nhỏ (50 µL) phân đoạn ty thể (được điều chỉnh thành 1mg protein / mL) được ủ ở 37 độ với 50 µL dung dịch cơ chất (chứa 6mM pyruvate và 6mM malate), 25 µL dung dịch adenosine diphosphat (ADP) (30mM) đã được xử lý trước, và 25 µL của 3 µM JC -1, trong bóng tối. Giá trị ΔΨm thu được bằng cách đo huỳnh quang ở bước sóng 535nm (FL1) so với 580nm (FL2), sử dụng Bộ đếm đa nhãn Victor2. JC -1 hình thành tập hợp trong ti thể, dẫn đến giá trị huỳnh quang FL2 cao và cho thấy tiềm năng ti thể bình thường. Mất ΔΨm dẫn đến giảm huỳnh quang FL2 (tổng hợp JC -1 ở mức độ thấp hơn) và đồng thời làm tăng huỳnh quang FL1 (từ các monome JC -1). Dữ liệu được biểu thị bằng tỷ lệ của các giá trị huỳnh quang FL1 / FL2. Carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP), một chất làm sập ΔΨm, được sử dụng để xác nhận xét nghiệm.

Đo hô hấp của ty thể

Tốc độ hô hấp của ty thể được đo ở 37 độ bằng thiết bị Hansatech Oxygraph-Plus được trang bị điện cực oxy kiểu Clark (Sarasota, FL, Hoa Kỳ). Các phân đoạn ti thể (0. 6mg protein / mL) bị lơ lửng trong đệm hô hấp có chứa 125mM KCl, 2 0 mM MOPS, 10mM Tris, 0,5mM ethylene glycol tetraacetic axit (EGTA) và 2mM KH2 PO4; pH 7,2. Sau khi ủ ở 37 độ trong 2 phút, mỗi mẫu nhận được 50 µL dung dịch cơ chất (5mM pyruvate và 5mM malate). Tốc độ hô hấp được đo khi có mặt (Trạng thái 3) 1mM ADP và sau khi phosphoryl hóa tất cả ADP thành ATP (Trạng thái 4). Tỷ lệ giữa tốc độ hô hấp Trạng thái 3: Trạng thái 4 là chỉ số kiểm soát hô hấp, chỉ số này cho biết sự chặt chẽ của sự kết hợp giữa hô hấp và quá trình phosphoryl hóa (Javadov và cộng sự, 2005; Kuwabara và cộng sự, 1997). Trước khi bổ sung dung dịch cơ chất, tốc độ hô hấp của Trạng thái 1 được đo cho đến khi bắt đầu hô hấp ở Trạng thái 2, và tốc độ hô hấp của Trạng thái 2 được ước tính trước khi bổ sung ADP.

Phân tích thống kê

Dữ liệu được phân tích bằng phương pháp phân tích một chiều (ANOVA) để so sánh nhiều nhóm. Giá trị chênh lệch ít có ý nghĩa nhất (LSD) được sử dụng để xác định sự khác biệt đáng kể giữa hai nhóm khi giá trị p <0.>

Cistanchecóthuốc chữa bệnhgiá trị

Kết quả

Như thể hiện trong Hình 1 và 2, việc điều trị bằng chiết xuất methanol của Herba Cistanche (0. 5 hoặc 1. {5}} g / kg / ngày × 3) đã tăng cường đáng kể tình trạng glutathione của ty thể trong tim chuột, như được chứng minh bằng sự gia tăng mức GSH phụ thuộc vào liều lượng (11–30 phần trăm) và giảm mức GSSG (31 phần trăm).

Liều điều trị Herba Cistanche làm giảm nồng độ Ca2 cộng với ty thể trong tim chuột một cách phụ thuộc so với nhóm chứng; ức chế là 41 phần trăm ở liều 1. 0 g / kg (Hình 3).

Điều trị Herba Cistanche làm tăng ΔΨm ty thể, bằng chứng là tỷ lệ FL1 / FL2 giảm (14–16 phần trăm). CCCP (100 µM) gây ra sự sụp đổ ΔΨm, như được chỉ ra bởi sự gia tăng tỷ lệ FL1 / FL2 (Hình 4).

Điều trị Herba Cistanche tăng cường hô hấp của ty thể, bằng chứng là tỷ lệ hô hấp Trạng thái 3 cao hơn đáng kể (84 phần trăm) ở động vật thử nghiệm so với đối chứng (Bảng 1). Mức độ hô hấp của Trạng thái 2 và Trạng thái 4 lần lượt tăng lên 47 và 80 phần trăm, nhưng sự kích thích hô hấp của Trạng thái 4 đã bị ức chế hoàn toàn bởi 1mM guanosine -5 '- diphosphate, một chất ức chế của protein tách 2/3. Điều trị Herba Cistanche không ảnh hưởng đến chỉ số kiểm soát hô hấp, được ước tính theo tỷ lệ giữa tỷ lệ hô hấp của Trạng thái 3 / Trạng thái 4.

Cistanchecóbảo vệ thần kinhđặc tính

Thảo luận

Ti thể phân lập từ tim chuột được điều trị bằng Herba Cistanche cho thấy tình trạng glutathione tăng cường, được chỉ ra bởi mức GSH tăng và mức GSSG giảm. Duy trì trạng thái oxy hóa khử glutathione của ty thể là rất quan trọng để bảo vệ tim chống lại chấn thương I / R (Chiu & Ko, 2 0 03). Hàm lượng Ca2 cộng trong cytosolic tăng lên trong thời kỳ thiếu máu cục bộ cơ tim, thông qua sự hấp thu của màng trong cùng Ca2 cộng với đơn vị tổ chức (Ataka và cộng sự, 1992; Grover và cộng sự, 1990), dẫn đến tích tụ cộng Ca2 trong ty lạp thể. Kết quả của chúng tôi chỉ ra rằng việc điều trị bằng chiết xuất Herba Cistanche đã tăng cường tình trạng oxy hóa khử glutathione của ty thể và giảm mức Ca2 cộng của ty thể, có khả năng bảo vệ chống lại tổn thương I / R cơ tim (Leung, 2006). Việc điều trị Herba Cistanche không có khả năng, ở liều cao hơn 1,0 g / kg, để giảm thêm hàm lượng GSSG và Ca2 cộng thêm có thể liên quan đến sự tồn tại của cơ chế điều chỉnh tự giới hạn ảnh hưởng đến tiềm năng oxy hóa khử glutathione và tình trạng canxi trong ty thể.

Ti thể tạo ra một gradient proton điện hóa qua màng trong, bằng cách vận chuyển điện tử. Gradient này được sử dụng bởi ATP synthase để phosphoryl hóa ADP thành ATP. Giảm điện thế màng ty thể, như trong tình trạng thiếu oxy / tái oxy hóa sau khi tế bào cơ tim được nuôi cấy bị tổn thương (Chiu và cộng sự, 2008), dẫn đến giảm tạo ATP. Điều trị Herba Cistanche, có thể làm tăng tiềm năng màng ty thể cơ tim, có thể tăng cường tạo ATP, đặc biệt là trong quá trình tái tưới máu sau thiếu máu cục bộ. Một lần nữa, sự tồn tại của cơ chế điều chỉnh tự giới hạn có thể giải thích tại sao tác dụng điều trị Herba Cistanche trên tiềm năng màng ty thể không phụ thuộc vào liều lượng.

Điều trị bằng Herba Cistanche làm tăng đáng kể tốc độ hô hấp của Trạng thái 3 trong ti thể tim chuột, được đánh giá bằng mức tiêu thụ oxy. Phát hiện này phù hợp với kết quả thu được từ các phép đo in vitro và đo tại chỗ về khả năng tạo ATP của ty thể (Leung & Ko, 2008). Điều thú vị là, mặc dù điều trị Herba Cistanche làm giảm mức độ ổn định của ATP trong cơ tim (dữ liệu không được hiển thị), việc điều trị đã tăng cường tạo ATP ti thể. Sự tham gia của quá trình hô hấp không phân đôi có thể giải thích những quan sát khác biệt này. Quá trình phosphoryl hóa oxy hóa không liên kết xảy ra khi các proton được di chuyển qua màng trong của ty thể trở lại chất nền của ty thể, do đó làm tiêu hao điện thế màng được hình thành bởi chuỗi vận chuyển điện tử. Điều này dẫn đến việc giảm động lực proton thúc đẩy sự hình thành ATP (Garvey, 2003). Kết quả là, nồng độ Ca2 cộng và sản xuất ROS trong ti thể bị suy giảm đáng kể (Teshima và cộng sự, 2003). Đề xuất này phù hợp với kết quả của nghiên cứu hiện tại, cho thấy sự giảm nồng độ Ca2 cộng với ty thể ở những trái tim được điều trị bằng Herba Cistanche. Liên quan đến quá trình hô hấp không tách đôi, sự tổng hợp của các protein không tách đôi (UCP) có thể được gây ra bởi điều trị Herba Cistanche. UCP được biết đến với khả năng phosphoryl hóa oxy hóa không kép, và sự biểu hiện của UCP1 trong tim chuột chuyển gen được bảo vệ chống lại tổn thương cơ tim do I / R gây ra (Hoerter và cộng sự, 2004). Tác dụng tách rời của UCPs bị ức chế bởi các diphosphat nucleotide purine và triphosphat (như ADP, ATP, guanosine diphosphate (GDP) và GTP) (Echtay và cộng sự, 2002). Trong nghiên cứu này, các thông số của ty thể như điện thế màng và tốc độ hô hấp được đo khi có ADP (như chất nền); do đó, hiệu ứng tách rời của UCPs đã bị ức chế. Tuy nhiên, khi đo tỷ lệ hô hấp ở trạng thái 4 của ty thể trong điều kiện không có ADP, tỷ lệ này ở các ty thể được chuẩn bị từ trái tim được điều trị Herba Cistanche cao hơn so với tim của nhóm đối chứng không được điều trị. Tốc độ hô hấp Trạng thái 4 phản ánh sự tiêu thụ oxy của ti thể khi các proton rò rỉ trở lại chất nền ti thể thông qua một cơ chế không liên quan đến F1F 0 - ATPase (Garvey, 2003). Sự tham gia có thể có của UCP trong sự gia tăng hô hấp ở Trạng thái 4 do Herba Cistanche gây ra được hỗ trợ bởi phát hiện ra rằng sự tăng cường này đã bị GDP ngăn chặn (Bento và cộng sự, 2007).

Kết luận, điều trị bằng Herba Cistanche có thể nâng cao tình trạng glutathione của ty thể, giảm mức độ cộng Ca2 của ty thể, và tăng tiềm năng màng ty thể và tốc độ hô hấp ở tim chuột. Việc tăng cường tình trạng và khả năng hoạt động của glutathione ty thể, và cảm ứng giả định của UCP, có thể liên quan đến việc bảo vệ tim mạch được thực hiện bởi điều trị Herba Cistanche sau chấn thương I / R.

CistancheCó thể tăng lênty thểhô hấp tỷ lệ

Khai báo lãi suất

Các tác giả báo cáo không có xung đột lợi ích. Các tác giả chịu trách nhiệm về nội dung và cách viết của bài báo.

Người giới thiệu

Ataka K, Chen D, Levitsky S, Jimenez E, Feinberg H (1992): Ảnh hưởng của lão hóa lên Ca2 cộng với nội bào, pHi, và sự co bóp trong quá trình thiếu máu cục bộ và tái tưới máu. Tuần hoàn 86 II371 – II376.

Bento LM, Fagian MM, Vercesi AE, Gontijo JA (2007): Ảnh hưởng của nhiễm toan chuyển hóa toàn thân do NH4 Cl gây ra trên sự kết hợp ty thể thận và vận chuyển canxi ở chuột.

Cấy ghép quay số Nephrol 22: 2817–2823. Bonavita F, Stefanelli C. FEBS Lett 536: 85–91.

Chen P (1998): Thuốc bổ thảo mộc. Dòng TCM nâng cao. Bắc Kinh, Nhà xuất bản Khoa học, trang 233–320.

Chiu PY, Ko KM (2003): Sự tăng cường phụ thuộc vào thời gian trong tình trạng glutathione của ty thể và khả năng tạo ATP bằng cách điều trị bằng schismdrin B làm giảm tính nhạy cảm của tim chuột đối với tổn thương do thiếu máu cục bộ tái tưới máu.

Yếu tố sinh học 19: 43–51. Chiu PY, Luk KF, Leung HY, Ng KM, Ko KM (2008): Các chất đồng phân lập thể Schisandrin B bảo vệ chống lại quá trình apoptosis gây ra bởi thiếu oxy / tái oxy hóa và ức chế những thay đổi liên quan trong quá trình chuyển đổi tính thấm ty thể do Ca2 cộng thêm và tiềm năng màng ty thể trong tế bào cơ tim H9c2. Khoa học cuộc sống 82: 1092–1101.

Echtay KS, Roussel D, St Pierre J, Jekabsons MB, Cadenas S, Stuart JA, Harper JA, Roebuck SJ, Morrison A, Pickering S, Clapham JC, Brand MD (2002): Superoxide kích hoạt protein tách rời ty thể. Bản chất 415: 96–99.

Evans WH (1992): Phân lập và xác định đặc điểm của màng và các bào quan của tế bào. Trong: Rickwood D, ed., Máy ly tâm chuẩn bị. Một cách tiếp cận thực tế. New York, Nhà xuất bản Đại học Oxford, trang 233–270.

Garvey WT (2003): Vai trò của protein 3 tách rời trong sinh lý con người. J Clin Đầu tư 111: 438–441. Griffith OW (1980): Xác định glutathione và glutathione disulfide bằng cách sử dụng glutathione reductase và 2- vinyl pyridine.

Sinh hóa hậu môn 106: 207–212. Grover GJ, Dzwonczyk S, Sleph PG (1990): Ruthenium đỏ cải thiện chức năng co bóp sau thiếu máu cục bộ ở tim chuột biệt lập. J Cardiovasc Pharmacol 16: 783–789.

Hoerter J, Gonzalez-Barroso MD, Couplan E, Mateo P, Gelly C, Cassard-Doulcier AM, Diolez P, Bouillaud F (2004): Protein tách rời ty thể 1 biểu hiện trong tim của chuột chuyển gen bảo vệ chống lại tổn thương do thiếu máu cục bộ tái tưới máu. Lưu hành 110: 528–533.

Javadov S. J Mol Cell Cardiol 38: 135–143.

Kuwabara M, Takenaka H, ​​Maruyama H, Onitsuka T, Hamada M (1997): Ảnh hưởng của thiếu máu cục bộ hạ thân nhiệt kéo dài và tái tưới máu đến tiêu thụ oxy và tổng năng lượng cơ học trong cơ tim chuột: tham gia vào quá trình phosphoryl oxy hóa ty thể. Cấy ghép 64: 577–583.

Lemasters JJ, Nieminen AL, Qian T, Trost LC, Elmore SP, Nishimura Y, Crowe RA, Cascio WE, Bradham CA, Brenner DA, Herman B (1998): Sự chuyển đổi tính thấm của ty thể trong quá trình chết của tế bào: một cơ chế phổ biến trong hoại tử, apoptosis và autophagy. Biochim Biophys Acta 1366: 177–196.

Leung HY (2006): Tác dụng của Herba Cistanche trên sự tạo ATP của ty thể: một cơ sở dược lý của "Yang-invigoration". MPhil Thesis, Đại học Khoa học và Công nghệ Hồng Kông, trang 67–69.

Leung HY, Ko KM (2008): Chiết xuất Herba Cistanche tăng cường tạo ATP ti thể trong tim chuột và tế bào H9C2. Pharma Biol 46: 418–424.

Menze MA, Hutchinson K, Laborde SM, Hand SC (2005): Quá trình chuyển đổi tính thấm của ty thể ở động vật giáp xác Artemia franciscana: không có lỗ điều chỉnh canxi do dự trữ canxi nhiều. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 289: R68 – R76.

Redegeld FA, Moison RM, Koster AS, Noordhoek J (1992): Sự cạn kiệt ATP nhưng không có GSH ảnh hưởng đến khả năng tồn tại của tế bào gan chuột. Eur J Pharmacol 228: 229–236.

Teshima Y, Akao M, Jones SP, Marban E (2003): Protein tách rời -2 biểu hiện quá mức ức chế con đường chết của ty thể trong tế bào cơ tim. Circ Res 93: 192–200.

Yim TK, Ko KM (2002): Mối quan hệ hoạt động chống oxy hóa và điều hòa miễn dịch của các loại thảo mộc bổ sung dưỡng chất Trung Quốc. Pharm Biol 40: 329–335.