Tính thấm của ruột và trầm cảm ở bệnh nhân mắc bệnh viêm ruộtⅠ

Tóm tắt: Trầm cảm là vấn đề sức khỏe toàn cầu cần được chẩn đoán sớm và chính xác để đảm bảo tiếp cận nhanh chóng phương pháp điều trị thích hợp. Sự chú ý gần đây đã tập trung vào việc phân tích trục hệ vi sinh vật não-ruột-trong số nhiều con đường bệnh lý tâm thần. Hàng rào ruột đóng vai trò quan trọng và các rối loạn chức năng xảy ra ở cấp độ này có ảnh hưởng đến sức khỏe tâm thần. Nghiên cứu hiện tại nhằm mục đích nghiên cứu vai trò của các dấu ấn sinh học về tính thấm của ruột, tức là calprotectin, zonulin, protein liên kết với lipopolysacarit (LBP) và protein liên kết với axit béo trong ruột (I-FAB), trong trầm cảm ở bệnh nhân mắc bệnh viêm ruột (IBD). ).

Click để nhuận tràng

Đây là nghiên cứu đầu tiên thuộc loại này diễn ra ở Romania, Đông Âu, tập trung vào các bệnh nhân mắc bệnh Crohn và viêm loét đại tràng. Mối tương quan được xác định giữa trầm cảm với calprotectin và trầm cảm và LBP có khả năng làm sáng tỏ quá trình chẩn đoán nhanh bệnh trầm cảm với sự trợ giúp của các dấu ấn sinh học. Vì trầm cảm có tương quan với việc giảm chất lượng cuộc sống của bệnh nhân nội trú mắc IBD nên nhu cầu tiếp cận các phương pháp điều trị thích hợp là rất cấp thiết.

1. Giới thiệu

Trầm cảm là một khuyết tật cá nhân, nghề nghiệp và xã hội liên quan đến bệnh lý cơ thể [1,2] và có nguy cơ tử vong cao do tự tử [3]. Tuy nhiên, việc tiếp cận các bác sĩ chuyên khoa, chẩn đoán chính xác và cách chữa trị hiệu quả còn hạn chế [4]. Chẩn đoán sớm và chính xác [5,6], cũng như lựa chọn phương pháp điều trị phù hợp với từng cá nhân [7], là cần thiết để giảm bớt nỗi đau khổ và gánh nặng tài chính của căn bệnh [3]. Theo tiêu chuẩn chẩn đoán trong Cẩm nang Chẩn đoán và Thống kê các Rối loạn Tâm thần (DSM V) [8], trầm cảm là một rối loạn cảm xúc với nhiều nhóm triệu chứng không đồng nhất. Để được chẩn đoán, cần phải có 5 trong số 9 triệu chứng sau đây: tâm trạng chán nản, thiếu khoái cảm, khó ngủ và thèm ăn, mức năng lượng thấp, thay đổi nhận thức, cảm giác tội lỗi và có ý định tự tử. cơ chế sinh lý bệnh để hưởng lợi từ việc điều trị hiệu quả vẫn chưa được biết đến. Một số cơ chế đã được đặt ra nghi vấn, nhưng các lý thuyết vẫn đang được phát triển.

Do đó, các rối loạn chức năng trên trục vùng dưới đồi-tuyến yên, chất dẫn truyền thần kinh, dây thần kinh phế vị, chất chuyển hóa axit béo chuỗi ngắn, tryptophan, các yếu tố gây viêm và trục não-ruột-hệ vi sinh vật đã được nghiên cứu [9-12]. Người ta đã chứng minh rằng không chỉ các rối loạn liên quan đến căng thẳng gây ra những thay đổi trong thành phần của hệ vi sinh vật đường ruột thông qua trục vùng dưới đồi – tuyến yên – tuyến thượng thận mà ruột cũng ảnh hưởng đến

hệ thần kinh trung ương thông qua kích thích dây thần kinh phế vị, tính thấm của ruột, giải phóng các hợp chất chống viêm và chống viêm cũng như thay đổi các chất tuần hoàn trong máu [13]. Trong hai thập kỷ qua, nghiên cứu về sự liên quan của trục não-ruột-hệ vi sinh vật trong các rối loạn tâm thần đã đạt được động lực [9,14]. Trong bối cảnh này, vai trò của hội chứng rò rỉ ruột đã nhận được nhiều sự chú ý hơn [15,16].

Hàng rào ruột có vai trò chính trong quá trình tiêu hóa và hấp thu chất dinh dưỡng; thứ yếu, nó kiểm soát chặt chẽ việc vận chuyển các kháng nguyên từ lòng ruột vào lớp dưới niêm mạc và duy trì sự cân bằng giữa khả năng chịu đựng và phản ứng miễn dịch gây viêm. Tính toàn vẹn của hàng rào ruột có thể bị ảnh hưởng bởi chế độ ăn uống, rối loạn hệ vi sinh vật đường ruột hoặc bởi các yếu tố khác. Chúng có khả năng gây ra sự kích hoạt miễn dịch bằng cách dịch chuyển các kháng nguyên và chất chuyển hóa của vi sinh vật. Hiện tại, zonulin huyết thanh, protein liên kết với axit béo trong ruột (IFABP/FABP2) vàLBP, cũng như albumin trong phân, calprotectin và zonulin đã được phân tích là khả năng thấm vào ruột. dấu hiệu [17].Calprotectin là một protein liên kết với canxi và kẽm, ban đầu được phân lập từ bạch cầu; nó rất hữu ích trong việc phân biệt bệnh viêm ruột với hội chứng ruột kích thích. Nó đóng vai trò chính trong quá trình viêm và được coi là protein giai đoạn cấp tính [18] ].

Giá trị bình thường nằm trong khoảng từ 10 đến 50 hoặc 60 (ug/g). Giá trị trên 200 (ug/g) có thể chỉ ra bệnh viêm nhiễm và giá trị trên 500–600 (ug/g) chắc chắn cho thấy sự tồn tại của bệnh đường ruột [19]. Protein gắn với lipopolysacarit (LBP) là thành phần lipid thiết yếu của màng ngoài của vi khuẩn gram âm [20], gây nhiễm độc nội độc tố [21]. LBP được sản xuất bởi tế bào gan, mô mỡ và tế bào ruột có chức năng như một protein pha cấp I và đóng vai trò quan trọng trong phản ứng miễn dịch [22]. LBP hiện diện trong huyết thanh ở nồng độ 5–15 mg/mL và tăng 10 đến 50 lần trong phản ứng pha cấp. Chức năng rào cản được duy trì bởi zonulin, được biết đến như là chất điều biến sinh lý duy nhất của các mối nối nội bào chặt chẽ (TJ) [15,23, 24]. Zonulin mở TJ một cách thuận nghịch, tác động lên thụ thể được kích hoạt protease 2 nằm trong khoang nội bào của phức hợp nối [25]. Giá trị trung bình của zonulin là 34 ng/mL [26].

Protein liên kết với axit béo trong ruột (I-FABP/FABP2) là một trong chín loại FABP khác nhau được xác định, thuộc về một siêu họ protein liên kết với lipid. Vai trò chính là vận chuyển nội bào và điều hòa sự hấp thu axit béo [27]. Khi xảy ra tổn thương hàng rào biểu mô ruột, I-FABP được giải phóng vào tuần hoàn và nồng độ trong huyết tương của nó tăng lên [28]. Giá trị ngưỡng của I-FAPB được coi là 2 ng/mL. Trong bối cảnh này, chúng tôi nhằm mục đích nghiên cứu vai trò của sự ức chế dấu ấn sinh học thấm qua ruột ở bệnh nhân mắc bệnh viêm ruột (IBD) bằng cách (i) kiểm tra mối quan hệ giữa calprotectin, zonulin, LBP , IFABP/FABP2 và trầm cảm và bằng cách (ii) đánh giá ảnh hưởng của trầm cảm đến chất lượng cuộc sống.

2. Vật liệu và phương pháp

2.1. Học nhóm

Nhóm ban đầu bao gồm 60 bệnh nhân từ Phòng khám Tiêu hóa của Bệnh viện Lâm sàng Quận Constanta trong khoảng thời gian từ tháng 4 đến tháng 6 năm 2021. Tiêu chí thu nhận bao gồm chẩn đoán bệnh IBD, từ 18 tuổi trở lên, kiến ​​thức về đọc và viết và đồng ý tham gia nghiên cứu. Các tiêu chí loại trừ là từ chối sự đồng ý, trầm cảm nặng hoặc các rối loạn tâm thần nghiêm trọng khác mà họ được chuyển đến dịch vụ tâm thần chuyên biệt. Sau khi có sự đồng ý, bệnh nhân đã được nhà nghiên cứu liên hệ qua điện thoại để áp dụng bảng câu hỏi nhân khẩu học xã hội về trầm cảm và bảng câu hỏi về chất lượng của cuộc sống. Bao gồm trong nghiên cứu là 30 bệnh nhân đã trải qua tất cả các giai đoạn của nghiên cứu.

2.2. Bảng câu hỏi được sử dụng

Bảng câu hỏi về sức khỏe bệnh nhân-9 (PHQ-9) [29] đã được áp dụng cho những người tham gia để đánh giá mức độ trầm cảm mà họ bị ảnh hưởng. Bảng câu hỏi tiêu chuẩn này bao gồm chín mục cần được trả lời dựa trên các triệu chứng mà bệnh nhân gặp phải trong 14 ngày qua. Điểm số được phân loại như sau: 1–4 trầm cảm tối thiểu, 5–9 trầm cảm nhẹ, 10–14 trầm cảm vừa phải, 15–19 trầm cảm nặng vừa phải và 20–27 trầm cảm nặng Tương tự như vậy, chúng tôi áp dụng bảng câu hỏi về chất lượng cuộc sống (EQ{{ 14}}D) [30,31] để thu thập dữ liệu liên quan đến chất lượng cuộc sống. Các mục trong công cụ này là khả năng di chuyển của bệnh nhân, khả năng tự chăm sóc, tham gia vào các hoạt động thông thường, đau đớn hoặc khó chịu và lo lắng hoặc trầm cảm đã trải qua. Các mục được trả lời theo thang điểm năm cấp độ.

2.3. Lấy mẫu và phân tích trong phòng thí nghiệm

Các mẫu huyết thanh tìm zonulin, IFABP/FABP2, LBP và mẫu phân tìm calprotectin được thu thập theo quy trình thu thập và vận chuyển các mẫu sinh học có khả năng lây nhiễm. Các mẫu huyết thanh được thu thập bằng cách chọc tĩnh mạch, nhịn ăn và cho vào máy hút bụi bằng vải hoạt hóa. Các mẫu phân được thu thập từ phân thải ra tự nhiên trong các thùng chứa không có môi trường mang. Huyết thanh đã được kiểm tra zonulin bằng MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, USA). và IFABP/FABP2 và LBP với Bộ công cụ Công nghệ sinh học Vũ Hán Fine (Vũ Hán, Trung Quốc). Các mẫu đã được kiểm tra calprotectin bằng bộ công cụ EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG. Tất cả các xét nghiệm được thực hiện bằng xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên quan đến enzyme (ELISA) trên Máy phân tích ADALTIS GEN-4 và Victor X4 theo hướng dẫn của nhà sản xuất bộ sản phẩm.

Khoảng giá trị bình thường được nhà sản xuất bộ sản phẩm chỉ dành cho calprotectin xác định như sau: Nhỏ hơn hoặc bằng 50.0 mcg/g như bình thường, 50.1– 120,0 mcg/g là giá trị giới hạn và Lớn hơn hoặc bằng 120,1 mcg/g là dương tính với bệnh đường ruột. Đối với zonulin, nhà sản xuất bộ phản ứng không chỉ định bất kỳ giới hạn phát hiện thấp hơn nào. Giới hạn phát hiện thấp hơn đối với bộ IFABP/FABP2 là 0,156 ng/mL, 3,125 ng/mL đối với LBP và 3,125 ng/mL đối với calprotectin. Đối với zonulin, I-FABP/FABP2 và LBS/LBP, nhà sản xuất bộ sản phẩm không thông báo một loạt các giá trị bình thường và các giá trị được các tác giả khác sử dụng trong nghiên cứu của họ đã được sử dụng. Huyết thanh được chiết xuất từ ​​​​mỗi mẫu máu bằng cách ly tâm ở tốc độ 3000× g trong 30 phút bằng máy ly tâm Thermo Scientific SL16R.

Tất cả huyết thanh thu được được giữ đông lạnh ở -200 ◦C cho đến khi tiến hành phân tích. Đối với IFABP/FABP2 và LBP, các mẫu được pha loãng đến 1/2 bằng dung dịch đệm pha loãng mẫu trước khi thử nghiệm. Các mẫu phân được giữ ở nhiệt độ -20 ◦C cho đến ngày xét nghiệm. Việc chiết mẫu phân được thực hiện bằng cách sử dụng dung dịch đệm 980 iuextraction cùng với 20 mg phân, khuấy trong 30 giây và sau đó ly tâm ở tốc độ 2000 × g trong 10 phút bằng máy ly tâm Thermo Scientific SL16R. Sau đó, việc pha loãng các mẫu được thực hiện với 980 iu dung dịch đệm mẫu và 20 iu dịch nổi phía trên.

Đối với bốn điểm đánh dấu, các đĩa vi mô có 96 giếng được phủ kháng thể bắt giữ đã được sử dụng: kháng thể kháng calprotectin, kháng thể kháng IFABP/FABP2, kháng thể kháng LBP hoặc kháng thể kháng zonulin. Các nguyên tắc của xét nghiệm đều giống nhau dựa trên công nghệ xét nghiệm miễn dịch liên quan đến enzyme (ELISA). Các mẫu chuẩn, mẫu xét nghiệm và kháng thể phát hiện liên hợp biotin sau đó được thêm vào giếng. Chất nền TMB (3,30,5,50-tetramethylbenzidine) được sử dụng để hình dung phản ứng enzymHRP (peroxidase cải ngựa). HRP xúc tác TMB để tạo ra sản phẩm màu xanh lam chuyển sang màu vàng sau khi thêm dung dịch dừng axit.

Mật độ của đốm vàng tỷ lệ thuận với lượng mẫu thu được trong đĩa. Cường độ màu được đo ở bước sóng 450 nm trong máy đọc đĩa vi thể, sau đó tính toán nồng độ mục tiêu.

2.4. Phân tích thống kê

Phân tích thống kê được thực hiện bằng phần mềm thống kê IBM SPSS phiên bản 23 (Armonk, NY, USA: IBM Corp.). Dữ liệu được trình bày dưới dạng trung vị và IQR (liên tứ phân vịphạm vi P75–P25) cho các biến liên tục trong trường hợp phân phối bị lệch hoặc dưới dạng phần trăm cho các biến phân loại.

Do thử nghiệm Shapiro–Wilk về tính chuẩn đã chỉ ra, trong trường hợp các biến liên tục được phân tích, các giá trị thống kê của thử nghiệm có xác suất (p) thấp hơn mức ý nghĩa {{0}}.05, điều kiện của tính quy tắc không được đáp ứng, ngoại trừ các biến LBP và PHQ 9, với p >=0.05. Chúng tôi cho rằng cách tiếp cận phi tham số để nghiên cứu mối tương quan giữa các biến được đề cập, với việc trình bày hệ số tương quan Spearman's rho (ρ) và xác suất (p) liên quan đến nó, là phù hợp hơn. Mức ý nghĩa được đặt ở mức 0,05.

Thuốc thảo dược tự nhiên giúp giảm táo bón-Cistanche

Cistanche là một chi thực vật ký sinh thuộc họ Orobanchaceae. Những loại cây này được biết đến với đặc tính chữa bệnh và đã được sử dụng trong Y học cổ truyền Trung Quốc (TCM) trong nhiều thế kỷ. Các loài Cistanche chủ yếu được tìm thấy ở các vùng khô cằn và sa mạc ở Trung Quốc, Mông Cổ và các khu vực khác ở Trung Á. Cây Cistanche có đặc điểm là có thân màu vàng, nhiều thịt và được đánh giá cao vì lợi ích tiềm tàng cho sức khỏe. Trong TCM, Cistanche được cho là có đặc tính bổ và thường được sử dụng để nuôi dưỡng thận, tăng cường sinh lực và hỗ trợ chức năng tình dục. Nó cũng được sử dụng để giải quyết các vấn đề liên quan đến lão hóa, mệt mỏi và sức khỏe tổng thể. Trong khi Cistanche có lịch sử sử dụng lâu dài trong y học cổ truyền, nghiên cứu khoa học về hiệu quả và độ an toàn của nó vẫn đang được tiến hành và còn hạn chế. Tuy nhiên, nó được biết là có chứa nhiều hợp chất hoạt tính sinh học khác nhau như phenylethanoid glycoside, iridoids, lignan và polysaccharides, có thể góp phần vào tác dụng chữa bệnh của nó.

Wecistanche'sbột cistanche, viên cistanche, viên nang cistanchevà các sản phẩm khác được phát triển bằng cách sử dụngsa mạcbể chứa nướclàm nguyên liệu đều có tác dụng tốt trong việc giảm táo bón. Cơ chế cụ thể như sau: Cistanche được cho là có lợi ích tiềm năng trong việc giảm táo bón dựa trên cách sử dụng truyền thống và một số hợp chất nhất định mà nó chứa. Mặc dù nghiên cứu khoa học cụ thể về tác dụng của Cistanche đối với táo bón còn hạn chế, nhưng nó được cho là có nhiều cơ chế có thể góp phần tạo nên tiềm năng giảm táo bón. Tác dụng nhuận tràng:Cistanchetừ lâu đã được sử dụng trong Y học cổ truyền Trung Quốc như một phương thuốc chữa táo bón. Nó được cho là có tác dụng nhuận tràng nhẹ, có thể giúp thúc đẩy nhu động ruột và gây táo bón. Tác dụng này có thể là do các hợp chất khác nhau trong Cistanche, chẳng hạn như glycoside phenylethanoid và polysacarit. Làm ẩm đường ruột: Dựa trên cách sử dụng truyền thống, Cistanche được coi là có đặc tính giữ ẩm, đặc biệt nhắm vào đường ruột. Thúc đẩy quá trình hydrat hóa và bôi trơn ruột có thể giúp làm mềm các công cụ và tạo điều kiện cho việc đi lại dễ dàng hơn, từ đó làm giảm táo bón. Tác dụng chống viêm: Táo bón đôi khi có thể liên quan đến tình trạng viêm ở đường tiêu hóa. Cistanche chứa một số hợp chất nhất định, bao gồm phenylethanoid glycoside và lignan, được cho là có đặc tính chống viêm. Bằng cách giảm viêm trong ruột, nó có thể giúp cải thiện nhu động ruột đều đặn và giảm táo bón.