Phân lập và xác định Phenylethanoid Glycoside từ Aloysia Polystachya và hoạt động của nó như chất ức chế Monoamine Oxidase-A

Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Ana Maria S. Pereira1, Camila C. Guimarães1, Sarazete IV Pereira1, Eduardo J. Crevelin2, Gustavo HT Pinto1, Lucas JF Morel1, Bianca W. Bertoni1, Suzelei C. França1, Silvia H. Taleb-Contini1

Giới thiệu

Theo một báo cáo gần đây của Tổ chức Y tế Thế giới [1], hơn 320 triệu người (4,4% dân số thế giới) bị trầm cảm và rối loạn lo âu, với khoảng 800 nghìn vụ tự tử mỗi năm do những vấn đề tâm thần này. . Mặc dù đã có phương pháp điều trị bằng thuốc chống trầm cảm tổng hợp nhưng nhiều bệnh nhân bị các tác dụng phụ như khô miệng, táo bón, chóng mặt, mờ mắt, thèm ăn, tăng cân, mất ngủ và các vấn đề về thận [2]. Vì lý do này, các phương pháp sử dụng thuốc thay thế và bổ sung, bao gồm cả liệu pháp thực vật, đã được sử dụng trong điều trị một số dạng rối loạn tâm thần [3].

Nhiều nghiên cứu tiền lâm sàng và tiền lâm sàng khác nhau đã cung cấp bằng chứng ủng hộ lợi ích của các loại thuốc có nguồn gốc thực vật trong việc điều trị các chứng rối loạn lo âu nói chung và cụ thể [4, 5]. Mối quan tâm đặc biệt là các nghiên cứu về đặc tính giải lo âu của nấm mốc Aloysia polystachya (Griseb.) Moldenke (Verbenaceae), là một loài thơm được tìm thấy chủ yếu ở Argentina và Paraguay. Theo các nghiên cứu dân tộc học, người dân địa phương sử dụng loại cây này, thường được gọi là cây bìm bịp, như một loại thuốc bổ tiêu hóa, an thần và chống trầm cảm [6, 7]. Mặc dù các đặc tính chống lo âu và chống trầm cảm của các chất chiết xuất hydroethanolic từ A. polystachya đã được xác nhận bởi các nghiên cứu tiền lâm sàng [8-10], không có điều tra hóa thực vật nào được thực hiện với mục đích xác định các hợp chất liên quan đến các hoạt động này.

Trước đây người ta đã chỉ ra rằng các hoạt động chống trầm cảm của một số cây thuốc, ví dụ, Hypericum perforatum L. (Hy- pericaceae) và Peganum harmala L. (Nitrariaceae), có liên quan đến việc ức chế monoamine oxidase-A (MAO-A) [11–13]. Họ MAO phân bố khắp các hệ thống thần kinh trung ương và ngoại vi và sự biểu hiện quá mức của các enzym này thúc đẩy quá trình khử oxy hóa của các monoamine làm giảm mức độ dẫn truyền thần kinh serotonin, norepinephrine và dopamine, dẫn đến khởi phát các rối loạn tâm thần. Quá trình khử amin như vậy cũng tạo ra các chất như hydrogen peroxide, các gốc oxy tự do và andehit là nguyên nhân gây ra stress oxy hóa của tế bào. MAO tồn tại ở hai dạng đồng dạng chính khác nhau về sự phân bố, thành phố đặc trưng cơ chất và độ nhạy cảm với chất ức chế. Đồng dạng MAO-A đóng một vai trò quan trọng trong rối loạn trầm cảm và lo âu, trong khi MAO-B có liên quan đến các bệnh thoái hóa thần kinh [13–17].

Dựa trên những điều trên, chúng tôi đã đưa ra giả thuyết rằng các đặc tính giải lo âu và chống trầm cảm của A. polystachya, ít nhất một phần bắt nguồn từ sự hiện diện của các chất ức chế MAO-A. Để kiểm tra giả thuyết này, chúng tôi xác định các nguyên tắc hoạt động có trong dịch chiết hydro-etanolic từ lá A. polystachya và đánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thô và các thành phần chính được phân lập từ đó đối với hoạt động của MAO-A.

cistanche chốngPhiền muộn

Kết quả và thảo luận

Dịch chiết hydroethanolic từ lá của A. polystachya được đưa vào phép sắc ký lỏng siêu hiệu suất-khối phổ (UPLC-MS), và sắc ký đồ thu được như vậy được trình bày trong ▶ Hình. 1a. Các thành phần chính của dịch chiết đã được tinh chế bằng sắc ký cột và sắc ký lỏng hiệu năng cao pha đảo (RP-HPLC), và được xác định là acteoside (syn verbascoside), iso-acteoside, 6'-acetyl acteoside, và 4 ', 4 '' ', 5,5' '- tetrahydroxy -6, 6' ', 3' '' - trimethoxy- [C7 – O – C7 ''] - biflavone bằng cách so sánh 1H- và 13C-NMR của chúng, Dữ liệu HSQC, HMBC (▶ Bảng 1S, 2S, Thông tin hỗ trợ), và MS (▶ Hình 1b-e) với các giá trị được báo cáo trong tài liệu [18–20]. Nồng độ của acteoside trong dịch chiết hydroethanolic, được xác định bằng HPLC, là 108,65 ± 1,3 µg / mg dịch chiết khô. Điều này đại diện cho hồ sơ đầu tiên về các thành phần chiết xuất từ ​​lá A. polystachya, mặc dù tinh dầu của cây đã được phân tích trước đó và phát hiện có chứa các monoterpenes carvone và limonene là các thành phần chính [21].

Chiết xuất hydroethanolic thô từ lá A. polystachya ức chế hoạt động MAO-A theo cách phụ thuộc vào liều lượng (▶ Hình 2a) với IC5 0 là 9,2 µg / mL, trong khi chất ức chế MAO chọn lọc clorgyline biểu hiện IC5 0 0,06 µg / mL (0,22 µM). Acteoside tinh khiết cũng thể hiện các hoạt động ức chế chống lại MAO-A (▶ Hình 2b), với acteoside có giá trị IC50 thấp nhất là 5 µM (3,1 µg / mL), tiếp theo là iso-acteoside với IC50 là 10,1 µM (6,3 µg / mL) ) và 6'-acetyl acteoside với IC50 là 9,5 µM (6,3 µg / mL). Sự ức chế MAO-A dẫn đến sự tái lập mức serotonin, norepinephrine, dopamine và tyramine, là những chất dẫn truyền thần kinh quan trọng trong việc kiểm soát lo âu và trầm cảm [16]. Do đó, sự hiện diện của các chất ức chế MAO-A đa dạng trong lá của A. polystachya giải thích, ít nhất một phần, hoạt động chống trầm cảm và giải lo âu đã được báo cáo trước đây của loài này [8–10].

Việc sử dụng hỗn hợp thực vật đa thành phần có thể có lợi trong việc điều trị các bệnh có nguyên nhân phức tạp như lo lắng, trầm cảm và các tình trạng thần kinh khác. Hiện nay, việc sử dụng phytomedicines trong điều trị các bệnh ảnh hưởng đến hệ thần kinh dựa trên mô hình của các phối tử đa đích, tức là các dược phẩm có các hoạt động đa đích do sự hiện diện của các chất như polyphenol có tác dụng chống đặc tính chống viêm, chống oxy hóa và ức chế MAO có khả năng bảo vệ thần kinh [20, 22–25]. Tuy nhiên, điều đáng chú ý là đặc tính phân cực của các chất polyphenol có thể cản trở tương tác với các mục tiêu phân tử của chúng. Tuy nhiên, các nghiên cứu lâm sàng đã chứng minh rằng sự tiếp xúc giữa polyphenol và các chất chuyển hóa thứ cấp không phân cực có trong các chất chiết xuất có thể làm thay đổi tính thấm của màng tế bào và tạo điều kiện thuận lợi cho việc hấp thu các hợp chất phân cực [23]. Do đó, các hoạt chất phức tạp của thực vật có chứa các tác nhân đa mục tiêu tương tác với các thụ thể của chúng theo kiểu đa hướng tạo ra một hiệp đồng dược lý ảnh hưởng đến nhiều quá trình, bao gồm cả sự di chuyển của các chất chuyển hóa phân cực qua màng tế bào. Trong bối cảnh này, Li et al. [26] đã sử dụng mô hình ngựa vằn để chứng minh rằng acteoside có thể xuyên qua hàng rào máu não, và đề xuất rằng phenylethanoid glycoside có thể có tác dụng điều trị tiềm năng trong bệnh Parkinson.

thảo mộc cistanche

Chất dẫn truyền thần kinh monoaminergic là mục tiêu chính của thuốc chống trầm cảm hiện đại vì các chất dẫn truyền thần kinh của chúng là nguyên nhân gây ra các triệu chứng suy nhược của bệnh trầm cảm. Một nghiên cứu in vivo gần đây đã chứng minh rằng các chất chiết xuất từ ​​etanolic và dung dịch nước của Lippia citriodora (Verbenaceae) và thành phần chính của chúng là acteoside thể hiện tác dụng giải lo âu, thôi miên và giãn cơ, và những đặc tính này một phần là do tương tác với gamma loại A. Thụ thể -aminobutyric acid (GABAA) [27].

Các nghiên cứu lâm sàng đã tiết lộ rằng các loại thuốc có khả năng ngăn chặn các cytokine gây viêm, chẳng hạn như TNF- hoặc các thành phần khác của con đường truyền tín hiệu viêm, ví dụ, cyclooxyge-nase -2 (COX -2), có hiệu quả trong việc giảm các triệu chứng trầm cảm ở bệnh nhân viêm khớp dạng thấp, bệnh vẩy nến và ung thư, cũng như những người bị các rối loạn tâm thần nghiêm trọng [28]. Trong bối cảnh này, người ta đã báo cáo rằng acteoside có thể làm giảm sản xuất và giải phóng các phân tử gây viêm, chẳng hạn như oxit nitric (NO), TNF- và interleukin 12 (IL -12) trong lipopolysaccharide / interferon-gamma (LPS / IFN-)-đại thực bào được kích thích [29], cũng như histamine và axit arachidonic trong tế bào mast RBL -2 H3 [30]. Ngoài ra, acteoside có thể làm giảm mức TNF-, IL -1, IL -8, IL -6 và NO, và kích hoạt caspase -1, yếu tố hạt nhân -kappa-B (NF-κB), KHÔNG tổng hợp và protein hoạt hóa -1 [31] được tạo ra bởi IL -32 và / hoặc LPS trong TH -1 tế bào và đại thực bào [32]. Một số chất trung gian gây viêm này, chẳng hạn như IFNs, IL -6, IL -8 và IL -1, đã được tìm thấy ở mức độ bất thường trong cả mẫu mô ngoại vi và sau khi chết của những người bị trầm cảm , và có liên quan đến các triệu chứng của bệnh trầm cảm [33]. Việc kích hoạt các phân tử này bởi các tác nhân gây căng thẳng tâm lý xã hội có thể thúc đẩy những thay đổi chức năng đáng kể trong não, dẫn đến sự phát triển của hành vi trầm cảm và các rối loạn tâm thần khác. Ví dụ, IFNs, IL -1 và TNF- có thể làm tăng sự biểu hiện và chức năng của bơm thụ thể serotonin, noradrenaline và dopamine, do đó làm giảm khả năng cung cấp các chất dẫn truyền thần kinh này trong khe tiếp hợp [28]. Ngoài ra, IFN-, IL -6, TNF- và stress oxy hóa có thể kích hoạt indoleamine 2,3 dioxygenase (IDO), một loại enzyme chịu trách nhiệm phân hủy tryptophan và do đó làm giảm nồng độ của tiền chất chính của tổng hợp serotonin [34].

Acteoside, iso-acteoside và 6'-acetyl acteoside chứa các gốc hydroxy phenylethyl và caffeoyl được biết là có liên quan đến các đặc tính chống oxy hóa [35, 36], và bản thân acteoside thể hiện hoạt tính chống oxy hóa đáng kể [37]. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng acteoside ức chế sự tập hợp của peptide -amyloid (A) theo cách phụ thuộc vào liều lượng, hoạt động như một chất bảo vệ thần kinh và tăng cường trí nhớ, và những đặc tính này được cho là do hoạt động chống oxy hóa của chất này [38, 39] . Xem xét rằng nhiều loài giàu phenolic có đặc tính chống oxy hóa được sử dụng trong điều trị rối loạn thần kinh [15], người ta cho rằng tác dụng chống trầm cảm và giải lo âu của glycoside phenylethanoid được phân lập từ A. polystachya cũng có thể là kết quả của các hoạt động chống oxy hóa của chúng. Giả thiết này được hỗ trợ bởi Xu et al. [40], người đã trình bày bằng chứng liên quan đến mối quan hệ giữa sự gia tăng căng thẳng oxy hóa và trầm cảm / lo lắng.

Dựa trên những điều trên, chúng tôi kết luận rằng các đặc tính chống trầm cảm của chiết xuất hydroethanolic từ lá của A. polystachya, và của phenylethanoids tinh khiết được phân lập từ đó, có thể được giải thích bằng các phương thức tác động đa mục tiêu liên quan đến việc ức chế MAO-A, điều hòa giảm các phân tử gây viêm, và trung hòa các phản ứng oxy hóa. Do đó, các kết quả được trình bày ở đây ủng hộ giả thuyết ban đầu của chúng tôi rằng các hoạt động giải lo âu và chống trầm cảm của chiết xuất hydroethanolic của A. polystachya, ít nhất là một phần, từ sự ức chế MAO-A. Tuy nhiên, mối quan hệ cấu trúc-hoạt động của các glycoside phenylethanoid được xác định trong nghiên cứu này cần được chú ý thêm để các phân tử mới có thể được thiết kế để điều trị các rối loạn thần kinh cụ thể.

chất chống oxy hóa:chiết xuất cistanche

Người giới thiệu

[1] Tổ chức Y tế Thế giới. Trầm cảm và các bệnh tâm thần thông thường khác

Rối loạn: Ước tính Sức khỏe Toàn cầu. Geneva: WHO; 2017

[2] Ferguson JM. Thuốc chống trầm cảm SSRI: Tác dụng ngoại ý và khả năng dung nạp. Người đồng hành chăm sóc ban đầu J Clin Psychiatry 2001; 3: 22–27

[3] van der Watt G, Laugharne J, Janca A. Thuốc bổ sung và thay thế trong điều trị lo âu và trầm cảm. Curr Opin Psychiatry 2008; 21: 37–42

[4] Sarris J, McIntyre E, DA trường Cam. Thuốc có nguồn gốc thực vật cho chứng rối loạn lo âu:cistanche, phần 1: Tổng quan về các nghiên cứu tiền lâm sàng. Thuốc CNS 2013; 27: 207–219

[5] Sarris J, McIntyre E, DA trường Cam. Thuốc có nguồn gốc thực vật cho chứng rối loạn lo âu, phần 2: Đánh giá các nghiên cứu lâm sàng với bằng chứng tiền lâm sàng hỗ trợ. Thuốc CNS 2013; 27: 301–319

[6] Del Vitto LA, Petenatti EM, Petenatti TÔI. Recursos herbolarios de San Luis (República Argentina). Primera parte: Plantas Nativas. Multequina 1997; 6: 49–66

[7] González Y, Arrúa RD, Rojas GD, García MG. Etnofarmacobotánica foliar de "burrito", Aloysia polystachya (Griseb.) Moldenke (Verben- aceae), canh tác ở Paraguay. Rojasiana năm 2014; 13: 31–41

[8] Mora S, Díaz-Véliz G, Millán R, Lungenstrass H, Quirós S, Coto-Morales T, Hellión-Ibarrola MC. Tác dụng giống như thuốc giải lo âu và chống trầm cảm của chiết xuất hydroalcoholic từ Aloysia polystachya ở chuột. Pharmacol Biochem Behav 2005; 82: 373–378

[9] Hellión-Ibarrola MC, Ibarrola DA, Montalbetti Y, Kennedy ML, Heinichen O, Campuzano M, Tortoriello J, Fernández S, Wasowski C, Marder M, De Lima TCM, Mora S. Tác dụng giống như giải lo âu của Aloysia polystachya (Griseb.) Moldenke (Verbenaceae) ở chuột. J Ethnopharma- col 2006; 105: 400–408

[10] Hellión-Ibarrola MC, Ibarrola DA, Montalbetti Y, Kennedy ML, Heinichen O, Campuzano M, Ferro EA, Alvarenga N, Tortoriello J,

De Lima TCM, Mora S. Các tác dụng giống như thuốc chống trầm cảm của Aloysia polystachya (Griseb.) Moldenke (Verbenaceae) ở chuột. Phytomedicine 2008; 15: 478–483

[11] Herraiz T, González D, Ancín-Azpilicueta C, Arán VJ, Guillén H.

-Carboline alkaloids trong Peganum harmala và ức chế monoamine oxidase ở người (MAO). Thực phẩm Chem Toxicol 2010; 48: 839–845

[12] Herraiz T, Guillén H, Arán VJ, Salgado A. Xác định, sự xuất hiện và hoạt động của quinazoline alkaloids trong Peganum harmala. Thực phẩm Chem Toxicol 2017; 103: 261–269

[13] Herraiz T, Guillén H. Ức chế monoamine oxidase-A và hoạt động chống oxy hóa liên quan trong chiết xuất thực vật có khả năng chống trầm cảm. Bio Med Res Int 2018; 1018: 4810394

[14] Carradori S, D'Ascenzio M, Chimenti P, Secci D, Bolasco A. Thuốc ức chế MAO-B có chọn lọc: Bài học từ các sản phẩm tự nhiên. Mol Divers 2014; 18: 219–243

[15] Fajemiroye JO, Silva DM, Oliveira DR, Costa EA. Trị lo âu, phiền muộn: Cây thuốc hồi hương. Fundam Clin Pharmacol 2016; 30: 198–215

[16] Fišar Z. Thuốc liên quan đến hoạt động của monoamine oxidase. Prog Neuropsy- chopharmacol Biol Psychiatry 2016; 69: 112–124

[17] Naoi M, Maruyama W, Shamoto-Nagai M. Monoamine oxidase và serotonin loại A có liên quan phối hợp đến rối loạn trầm cảm: Từ mất cân bằng dẫn truyền thần kinh đến suy giảm hình thành thần kinh. J Neural Transm 2017; 125: 53–66

bổ sung cistanche: chất chống oxy hóa