Phân lập và xác định glycoside Phenylethanol từ Cistanche Deserticola

Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Giới thiệu

Cistanche Desticolađược thu thập trong dược liệu Trung Quốc là thân cây thịt khô củaCistanche DesticolaThuộc họ Orobanchaceae, là một vị thuốc thường được sử dụng để bổ thận trong y học cổ truyền Trung Quốc. Có nhiều giống Cistanche Desticola, và có nhiều báo cáo nghiên cứu về Cistanche salsa vàCistanche tubulosatrong tài liệu, nhưng có rất ít nghiên cứu về các giống được thu thập trong Dược điển. Luo Shangfeng và những người khác đã thu được mannitol, 8- axit thượng vị và axit amin từ Cistanche Desticola. Để phát triển và nghiên cứu thêm về Cistanche, Khoa Dược, Trường Cao đẳng Y tế Tân Cương đã chiết xuất và tách các thành phần hòa tan trong nước của nó - glycoside phenyl ethanol. Kết quả cho thấy bốn thành phần đã được tách ra và xác định, chúngechinacoside, castanoside A,acteoside, và 2'-Acetylacteoside. Các thành phần trên có tác dụng dược lý như thúc đẩy các chức năng của thận vàchống lão hóa.

Phần thử nghiệm

Các dược liệu thử nghiệm được mua từ công ty dược liệu Urumqi và được sản xuất tại quận Jinghe. Các giống được xác định bởi Li Jiazheng, cộng sự nghiên cứu của Viện Y học dân tộc Tân Cương. Mô hình của nhựa macroporous là AB-B, là một sản phẩm hóa học của Đại học Nankai. Silica gel được sử dụng trong lớp cột là sản phẩm của nhà máy hóa chất hàng hải Thanh Đảo, Stephan-dex LH -20 là sản phẩm của nhà máy dược phẩm Changzheng Thượng Hải. Mô hình của máy quang phổ UV là Shimadzu UV -360. Máy quang phổ hồng ngoại là Shimadzu IR -440. Các mẫu dụng cụ H-NMR và C-NMR là Bruker MSL -300 (300 megacycle)

1. Chiết xuất và tách

Chiết xuất Cistanche Desticola10kg ba lần bằng cách hồi lưu etanol, kết hợp dịch chiết và cô đặc để dán dưới áp suất giảm, thêm một lượng nhỏ nước để tạo huyền phù, khử chất béo bằng etyl axetat, chiết bằng n-butanol, kết hợp dịch chiết, cô đặc đến khô. dưới áp suất giảm, thêm một lượng nhỏ nước để hòa tan, lần lượt thu và cô đặc phần metanol qua cột nhựa macroporous và cột polyamit (rửa bằng nước trước rồi đến metanol). Tổng số glycoside phenyl etanol thu được bởi lớp cột silica gel. Với sự rửa giải gradient CHCl 3- MeOH (10: 3 đến 10: 5), tổng cộng 78 dòng (khoảng 300ml mỗi dòng) đã được thu thập, trong đó 16-23 là các hợp chất thô IV (2,1g), 28-42 là hợp chất thô III (5,4g), 48-61 là hợp chất thô II (3,2g), 65-78 là hợp chất thô I (5,1g). Các thành phần trên được tinh chế bằng sắc ký cột silica gel (điều kiện rửa giải giống như trên) và sau đó được tinh chế bằng cột gel dextran LH -20. Rửa giải bằng CH3OH: H20 (l: 1) và thu lấy phần metanol thu được các hợp chất đơn chức IV (1,3g), III (3,5g), II (1,8g) và I (3,5g)

2. Nhận dạng

Hợp chất I: bột vô định hình màu vàng nhạt, phản ứng FeCl3 và - dương tính với phép thử naphthol, sắc ký lớp mỏng silica gel Giá trị Rf của 0. 3 (CHCl3: MeOH: H2O =6: 4: 1 giãn nở, 20 phần trăm phát hiện phun H2SO4), UV λ (MeOH / nm): 244, 292, 333. IR (KBr / MAX): cm -1: 3360, 1690, 1625, 1598, 1518. H-NMR (Metanol- d1) δ: 1,08 (3H, D, J =6 Hz, CH3), 2,79 (2H, t, J =7 Hz, Ar-CH 2- CH 2-) , 4,29, 4,39 (1H, D, J =8 Hz, hai proton đầu cuối glucose), 5,18 (1H, D, J =1 Hz, proton đầu cuối rhamnosyl), 6,28 (1H, J {{50 }} Hz, Ar-CH=CH-), 6. 5-7. 1 (6H, aryl H), 7,59 (1H, D, J =16 Hz, Ar-CH { {63}} CH-) Dữ liệu C-NMR được thể hiện trong Bảng 1. Dữ liệu phổ và phản ứng hóa học ở trên phù hợp với báo cáo củaechinacosidetrong văn học. Do đó, Hợp chất I được xác định là echinacoside.

Hợp chất II: bột vô định hình màu vàng nhạt, phản ứng FeCl3 và - Thử nghiệm naphthol dương tính, và sắc ký lớp mỏng silica gel Rf 0. 35 (điều kiện phát triển và phát hiện giống như trên). Quang phổ UV và IR của nó rất giống với phổ củaechinacoside, nhưng H-NMR xuất hiện tín hiệu δ 3,84 (3H, s), C-NMR xuất hiện tín hiệu δ 56,5, cho thấy rằng cấu trúc có chứa 1 metoxy. UV λ (MeOH / nm): 246, 29 0, 333. IR (KBr / MAX) cm -1: 3350, 1655, 1620, 1596, 1508. H-NMR (metanol-d1) δ: 1,08 (3H, d, J =6 Hz, nhóm metyl trong rhamnose), 2. 86 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH 2- CH 2-), 3,84 (3H, s, OCH3), 4,28, 4,39 (1H, d, J =8 Hz, hai proton nhóm cuối glucose), 5,18 (1H, s, proton nhóm cuối của rhamnose), 6,27 (1H, d, J =16 Hz, Ar-CH=CH-), 6. 65-7. 1 (6H, aryl H), 7,60 (1H, d , J =16 Hz, Ar-CH=CH-). Xem Bảng 1 về dữ liệu C-NMR, dữ liệu phổ ở trên phù hợp với giá trị tài liệu của castanoside A. Do đó, hợp chất II được xác định là castanoside ACompound III: bột vô định hình màu vàng nhạt, sắc ký lớp mỏng silica gel Giá trị Rf là 0,40 (phát triển và điều kiện phát hiện giống như trên). Phổ UV và IR của nó cũng tương tự như phổ của echinacoside. Có một proton đầu cuối ít glucose hơn trong H-NMR và một tín hiệu glucose ít hơn trong C-NMR, cho thấy rằng nó là một disaccharide. UV λ (MeOH / nm): 247, 292, 334. IR (KBr / MAX): 3350, 1690, 1625, 1600, 1515. H-NMR (metanol-d1) δ: 1.10 (3H, d, J {{ 83}} Hz, metyl rhamnose), 2,79 (2H, t, J =7 Hz, Ar-CH 2- CH 2-), 4,38 (1H, d, J {{94} } Hz, proton đầu cuối glucose), 5,19 (1H, d, J =1 Hz, proton đầu cuối rhamnose), 6,28 (1H, d, J =16 Hz, Ar-CH=CH -), 6. 5-7. 1 (6H, aryl H), 7,59 (1H, d, J =16 Hz, Ar-CH=CH-). Dữ liệu C-NMR được thể hiện trong Bảng 1. Dữ liệu phổ trên phù hợp với các giá trị tài liệu củaacteoside, vì vậy hợp chất LII được xác định làacteoside.

Hợp chất IV: bột vô định hình màu vàng nhạt. Sắc ký lớp mỏng silica gel Giá trị Rf là 0. 42 (điều kiện phát triển và phát hiện giống như trên). Dữ liệu quang phổ của nó rất giống vớiacteoside. Có một đỉnh hấp thụ nữa là 1735cm -1 trong phổ hồng ngoại và H-NMR cho thấy các tín hiệu từ ma trận axetyl của δ1,98 (3H.S) và C-NMR cho thấy các tín hiệu từ các nhóm cacbon và metyl của δ171,5 và 20,9. Theo quy luật chuyển vị glucozơ, quá trình axetyl hóa nằm trên nhóm đường 2 'hydroxyl. λ (MeOH / nm): 247, 292, 333. IR (KBr / MAX): 3430, 1725, 1700, 1630, 1605. 1525. H-NMR (metanol-d1) δ: 1,08 (3H, d, J { {27}} Hz, rhamnose methyl), 1,98 (3H, s. OAc), 2,70 (2H, t, J =7 Hz, Ar-CH 2- CH 2-), 4,50 (1H, d =8 Hz, proton đầu cuối glucose), 5,19 (1H, d, proton đầu cuối rhamnose), 6,28 (1H, d, J =16 Hz, Ar-CH=CH -), 6. 5-7. 1 (6H, aryl H), 7,60 (1H, d, J =16 Hz, Ar-CH=CH-). Dữ liệu C-NMR được trình bày trong Bảng 1. Dữ liệu phổ trên phù hợp với giá trị tài liệu của 2 '- Acetylacteoside, vì vậy hợp chất IV được xác nhận là 2' - Acetylacteoside.