Bảo vệ thần kinh của N-benzyl Eicosapentaenamide ở chuột sơ sinh sau khi bị thiếu chất độc - Tổn thương não do thiếu máu cục bộ

Tiếp xúc:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Trừu tượng:

Maca(Lepidium meyenii) đã nổi lên như một loại thực phẩm chức năng thực vật được nhiều người ưa chuộng vì dược tính và giá trị dinh dưỡng của nó.Macamide, vì các thành phần hoạt tính độc quyền được tìm thấy trongmaca, là một loạt các axit béo không phân cực, chuỗi dài N-benzyl amide với nhiều hoạt tính sinh học như các đặc tính chống mệt mỏi và cải thiện sức khỏe sinh sản. Trong nghiên cứu này, một loại tối đa hóa mới, N-benzyl eicosapentaenamide (NB-EPA), đã được xác định từmaca. Chúng tôi tiếp tục khám phá vai trò bảo vệ thần kinh tiềm năng của nó trong chấn thương não do thiếu oxy do thiếu máu cục bộ. Phát hiện của chúng tôi chỉ ra rằng điều trị bằng NB-EPA sinh tổng hợp làm giảm đáng kể kích thước của nhồi máu não và cải thiện các rối loạn hành vi thần kinh sau tổn thương não do thiếu oxy-thiếu máu cục bộ ở chuột sơ sinh. NB-EPA ức chế quá trình apoptosis của các tế bào thần kinh sau thử thách thiếu máu cục bộ. NB-EPA cải thiện sự sống sót và tăng sinh của tế bào thần kinh thông qua việc kích hoạt tín hiệu AKT được phosphoryl hóa. Lưu ý, đặc tính bảo vệ của NB-EPA chống lại tổn thương tế bào thần kinh do thiếu máu cục bộ phụ thuộc vào việc ức chế con đường p53 – PUMA. Tổng hợp lại, những phát hiện này cho thấy rằng NB-EPA có thể đại diện cho một chất bảo vệ thần kinh mới cho trẻ sơ sinh bị bệnh não thiếu oxy do thiếu máu cục bộ.

Từ khóa:maca; N-benzyl eicosapentaenamide; bệnh não thiếu oxy-thiếu máu cục bộ ở trẻ sơ sinh; bảo vệ thần kinh; PUMA

1. Giới thiệu

Bệnh não thiếu oxy-thiếu máu cục bộ ở trẻ sơ sinh (HIE) là nguyên nhân phổ biến của chấn thương não do thiếu oxy và giảm lưu lượng máu [1,2]. HIẾU cực kỳ ác cảm đối với sự phát triển của não bộ, là tác nhân chính gây ra rối loạn chức năng thần kinh ở trẻ em [3]. Các hậu quả phổ biến nhất của HIE bao gồm bại não, suy giảm nhận thức nghiêm trọng, suy giảm khả năng vận động và hành vi, dẫn đến hàng triệu trẻ sơ sinh tử vong hoặc tàn tật lâu dài mỗi năm [4]. Hạ thân nhiệt trị liệu là phương pháp điều trị phổ biến trên lâm sàng cho bệnh nhân HIE sơ sinh và đã được chứng minh là cải thiện kết quả thần kinh ở những trẻ sống sót [5]. Tuy nhiên, chỉ sử dụng phương pháp điều trị hạ thân nhiệt là không đủ để giảm tỷ lệ tử vong hoặc tránh các rối loạn phát triển thần kinh nghiêm trọng trong HIE nặng [6]. Mặc dù có những tiến bộ đáng kể trong công nghệ y tế hiện đại, không có phương pháp điều trị y tế hiệu quả nào đối với tổn thương dây thần kinh do HIE [7]. Liệu pháp bảo vệ thần kinh có ý nghĩa lớn đối với sự phục hồi lâu dài của chức năng não [8]. Vì vậy, cần phát triển các phương pháp điều trị bảo vệ thần kinh an toàn và hiệu quả.

tôi có thể mua vỏ cây kistanche ở đâu

Maca(Lepidium meyenii) là một loại thảo mộc hàng năm hoặc hai năm một lần thuộc họ cải Nam Mỹ, được xếp vào loại thực phẩm tài nguyên mới vào năm 2011 [9,10]. Một loạt các thành phần có tác dụng dược lý và dinh dưỡng đã được xác định trong maca, bao gồm polysaccharides, phytosterol, alkaloid, glucosinolate, macaenes, vàđá dăm[11,12]. Trong số các thành phần hoạt tính sinh học này, macamit, một nhóm các hợp chất axit béo N-benzyl amide chuỗi dài, không phân cực, được công nhận là thành phần đặc trưng đồng thời góp phần vào các hiệu quả chính của maca như chống mệt mỏi, chống loãng xương và cải thiện khả năng sinh sản [13 –15]. Macamit và các chất tương tự tổng hợp của chúng gần đây đã được báo cáo cho thấy hoạt động ức chế axit béo amide hydrolase (FAAH) riêng biệt, ngụ ý rằng các hợp chất này có các hoạt động bảo vệ thần kinh và chống viêm tiềm năng [16,17].

cistanche tubulosa

Trong nghiên cứu này, một loại mới tối đa hóa N-benzyl eicosapentaenamide (NB EPA) đã được xác định từmaca. Chúng tôi tiếp tục khám phá các hoạt động sinh học của nó đối với tổn thương não do thiếu oxy-thiếu máu cục bộ. Phát hiện của chúng tôi cho thấy NB-EPA cải thiện đáng kể chấn thương não ở trẻ sơ sinh qua trung gian HI thông qua việc cải thiện chứng nhồi máu não và rối loạn hành vi. Đáng chú ý, tác dụng bảo vệ thần kinh của NB-EPA đối với sự sống sót của tế bào thần kinh do thiếu máu cục bộ phụ thuộc vào việc ức chế con đường tín hiệu p53-PUMA.

2. Kết quả

2.1. Xác định và Tổng hợp N-benzyl Eicosapentaenamide

Macamidelà một nhóm các ancaloit amide được tạo thành bởi benzylamine và một gốc axit béo, được coi là các hợp chất đánh dấu đặc trưng củamaca. Ở đây, chúng tôi đã xác định được một chất cực đại mới, NB-EPA (công thức phân tử C27H37NO), từ maca. Như thể hiện trong Hình 1A, sắc ký lỏng hiệu năng cao với khối phổ ion hóa tia điện (HPLC-ESI-MS / MS) hiển thị hai cực đại được ghi lại trong sắc ký đồ ion tổng của m / z 392.3 với thời gian lưu là 7. {1 0}} phút và 9. 0 phút tương ứng. Phổ MS / MS chứng minh rằng thông tin về đoạn của pic với thời gian lưu 7 phút phù hợp với các đoạn lý thuyết của NB-EPA (Hình 1B). Đỉnh ion phân mảnh chính được phát hiện từ macamide mới này là m / z 91,1, tương ứng với benzyl [C7H7] cộng. Các pic ion phân đoạn MS / MS ở phía axit béo phù hợp với dữ liệu MS / MS được báo cáo của axit eicosapentaenoic trong Sách web Hóa học của Viện Tiêu chuẩn và Công nghệ Quốc gia (NIST) (SRD 69).

Do hàm lượng NB-EPA thấp trongmaca, sau đó chúng tôi tổng hợp NB-EPA bằng phương pháp ngưng tụ cacbodiimit. Hỗn hợp tổng hợp được tinh chế bằng hệ thống HPLC bán điều chế. Phần có thời gian lưu từ 23,5 đến 25,5 phút được thu thập, và độ tinh khiết của phần thu được đạt 98,2 phần trăm (Hình 1C, D). Phân tích HPLC-MS / MS chứng minh rằng NB-EPA sinh tổng hợp và NB-EPA tự nhiên có các đặc điểm phân tách sắc ký giống hệt nhau và thông tin về đoạn khối phổ thứ cấp (Hình 1E – G). Kết hợp với nhau, những dữ liệu này gợi ý rằng mộtmacamideNB-EPA được xác định từmacavà tổng hợp thành công.

2.2. NB-EPA làm giảm khối lượng nhồi máu và suy giảm vi thần kinh ở trẻ sơ sinh HI Tổn thương não

Sau đó, chúng tôi điều tra hoạt tính sinh học của NB-EPA ở chuột sơ sinh sau chấn thương não do thiếu oxy do thiếu máu cục bộ (HI). Hình ảnh xuất hiện não cho thấy mô não bị thiếu máu cục bộ trở nên trắng và sưng lên ở nhóm xe vào các ngày 1, 3, 7 và 14 sau HI (Hình 2A). Ngược lại, sử dụng NB-EPA với liều 250 µg / ngày trong 3 ngày làm giảm đáng kể tình trạng sưng não và hàm lượng nước trong não (Hình 2A, B). Nhuộm với 2,3, 5- triphenyl tetrazolium chloride (TTC) cho thấy điều trị NB-EPA (11,13 ± 2,58 phần trăm) làm giảm rõ ràng kích thước nhồi máu não 3 ngày sau HI so với phương pháp điều trị (37,01 ± 4,68 phần trăm) ) (Hình 2C). Các thử nghiệm hành vi thần kinh đã chứng minh rằng những con chuột trong nhóm xe có biểu hiện rối loạn hành vi thần kinh đáng kể ở 1, 3 và 7 ngày sau HI (Hình 2D – F). Ngược lại, điều trị NB-EPA cải thiện rõ ràng những khiếm khuyết thần kinh này (Hình 2D – F). Do đó, những dữ liệu này chỉ ra rằng NB-EPA bảo vệ chống lại tổn thương do thiếu máu cục bộ và thiếu hụt hành vi thần kinh ở chuột sơ sinh sau chấn thương não HI.

Hình 1. Sắc ký đồ và phổ MS / MS của NB-EPA tự nhiên và NB-EPA tổng hợp. (A) Sắc ký đồ tổng dòng ion đại diện (TIC) thu được ở chế độ giám sát ion (SIM) được lựa chọn dương cho một mẫu chiết xuất maca. (B) Phổ MS / MS của m / z3923 ([NB-EPA cộng với H] *) cho mẫu chiết xuất maca. (C) Sắc ký đồ HPLC bán chuẩn bị của vật liệu NB-EPA tổng hợp. (D) Sắc ký đồ HPLC của các phân đoạn NB-EPA (23. 5-25. 5 phút) được thu thập từ hệ thống HPLC bán chuẩn bị. (E) Sắc ký đồ TIC đại diện thu được ở chế độ SIM dương tính đối với mẫu NB-EPA tổng hợp. (F) Phổ MS / MS của m / z 392.3 cho mẫu NB-EPA sinh tổng hợp (G) Cấu trúc hóa học của NB-EPA.

2.3. NB-EPA Giảm tổn thương não do HI gây ra bằng cách ức chế quá trình chết thần kinh

Tiếp theo, chúng tôi tìm hiểu xem liệu sự bảo vệ của NB-EPA trong chấn thương sọ não do HI có liên quan đến việc điều chỉnh cái chết của tế bào thần kinh hay không. Nhuộm Hematoxylin-eosin (HE) cho thấy sự sắp xếp của nơ-ron trong vỏ não, vùng hồi hải mã (hippocampus dentate gyrus) (DG), vùng amoniac (CA) 1 và CA3 của Cornu bị rối loạn. và các sợi thần kinh đã bị nới lỏng và hút chân không trong não thiếu máu cục bộ sau chấn thương HI. Tuy nhiên, điều trị bằng NB-EPA đã loại bỏ rõ ràng tổn thương tế bào thần kinh (Hình 3A). Western blot xác nhận rằng NB-EPA làm giảm rõ rệt sự biểu hiện của các protein pro-apoptotic như p53, PUMA và Bax trong mô não thiếu máu cục bộ (Hình 3B, C). Ngoài ra, kháng nguyên nhân tế bào thần kinh (NeuN) và nhuộm kép TUNEL đã chứng minh sự giảm đáng kể số lượng tế bào TUNEL cộng với NeuN cộng với tế bào 7 ngày sau HI ở chuột được điều trị bằng NB-EPA (5,80 ± 1,35 phần trăm) so với xe (14,39 ± 2,55 phần trăm). (Hình 3D). Cùng với nhau, những dữ liệu này ngụ ý rằng tác dụng có lợi của NB-EPA trong việc xúc phạm não HI có liên quan đến việc ức chế quá trình apoptosis của tế bào thần kinh.

Hình 2. Sử dụng NB-EPA làm giảm nhồi máu não và các khuyết tật về hành vi ở chuột sơ sinh sau chấn thương sọ não do HI. (A) Hình ảnh đại diện về sự xuất hiện của não ở thời điểm 1,3,7 và 14 ngày sau HI. (B) Phân tích thống kê hàm lượng nước trong não từ mọi nhóm chuột ở 3 ngày sau Hl. (C) Hình ảnh đại diện của phần não hậu môn nhuộm TTC từ mỗi nhóm chuột ở 3 ngày sau HI và phân tích định lượng thể tích nhồi máu. (DF) Kết quả hành vi thần kinh của phản xạ geotaxis (D), phản ứng tránh vách đá (E) và kiểm tra độ bám (F) ở 1,3 và 7 ngày sau HI. Dữ liệu là trung bình ± sai số chuẩn của giá trị trung bình (SEM) ( n=8 mỗi nhóm). * p<0.05 compared="" to="">

2.4. NB-EPA Giảm tổn thương não do HI gây ra bằng cách ức chế quá trình chết thần kinh

Phương pháp nhuộm Nissl cho thấy một số lượng lớn tế bào thần kinh có biểu hiện teo, sưng và hẹp nhân, thậm chí chết cùng với sự biến mất của các thể Nissl trong não do thiếu máu cục bộ. Ngược lại, NB-EPA rõ ràng đã cải thiện khả năng sống sót của tế bào thần kinh và sắp xếp lại tế bào thần kinh sau chấn thương HI (Hình 4A, B). Western blot đã chứng minh rằng NB-EPA làm tăng mức AKT được phosphoryl hóa (p-AKT), hoạt động như tín hiệu ủng hộ sự sống sót, trong mô não thiếu máu cục bộ 7 ngày sau thử thách HI (Hình 4C, D). Doublecortin (DCX) là chất đánh dấu tiền chất tế bào thần kinh và tế bào thần kinh di cư trẻ [18], và Ki -67 là chất đánh dấu sự tăng sinh tế bào [19]. Điều trị NB-EPA (19,83 ± 1,25 tế bào / mm3) làm tăng đáng kể số lượng Ki -67 cộng với DCX cộng với các tế bào 7 ngày sau HI so với phương tiện (11,83 ± 1,08 tế bào / mm3) (Hình 4E). Do đó, những dữ liệu này ngụ ý rằng NB-EPA tạo điều kiện thuận lợi cho sự sống sót và tăng sinh tế bào thần kinh ở chuột sơ sinh sau chấn thương não HI.

Hình 3. NB-EPA ức chế quá trình chết tế bào thần kinh ở chuột sơ sinh sau chấn thương sọ não do HI. (A) Hình ảnh đại diện về nhuộm HE trong vỏ não, vùng hải mã DG, CA1 và CA3 từ mỗi nhóm chuột ở 7 ngày sau HI (Thanh tỷ lệ, 75 μm）. （B） Hình ảnh Western blot đại diện của p53, PUMA, và Bax từ mọi nhóm chuột vào 7 ngày sau HI. （C） Phân tích dữ liệu đo mật độ được hiển thị trong (B). (D) Hình ảnh đại diện của NeuN (đỏ) và TUNEL (xanh) từ mọi nhóm chuột vào 7 ngày sau- HI (trái, thanh Thang đo, 25 um) trong vỏ não; Định lượng các tế bào có nhãn kép NeuN và TUNEL ở 7 ngày sau HI (Phải). Dữ liệu là trung bình ± SEM (n =8 cho mỗi nhóm). *P<005 compared="" to="">

cistanche pdf

2.5. NB-EPA Giảm tổn thương não do HI gây ra bằng cách ức chế quá trình chết thần kinh

Dựa trên tác dụng bảo vệ ở trên của NB-EPA trong tổn thương não do HI ở trẻ sơ sinh, chúng tôi đánh giá thêm ảnh hưởng trực tiếp của NB-EPA đối với sự sống còn của tế bào thần kinh trong ống nghiệm. Các tế bào thần kinh vỏ não sơ cấp được nuôi cấy trong ống nghiệm trong 7 ngày có hình tròn và nhỏ, với các khớp thần kinh phong phú và mạng lưới liên kết với nhau (Hình 5A). Độ tinh khiết của tế bào thần kinh được xác định bằng phương pháp đo tế bào dòng chảy, và tỷ lệ dương tính là hơn 95% (Hình 5B). Tế bào thần kinh NeuN * cũng được xác định bằng phương pháp miễn dịch huỳnh quang (Hình 5C). Những kết quả này cho thấy các tế bào thần kinh vỏ não sơ cấp đã được nuôi cấy thành công.

Hình 4. NB-EPA cải thiện sự sống sót và tăng sinh tế bào thần kinh ở chuột sơ sinh sau chấn thương sọ não do HI. (A) Các bức ảnh đại diện về nhuộm Nissl trong vùng vỏ não, hồi hải mã DG, CAl và CA3 từ mỗi nhóm chuột ở 7 ngày sau HI （Scale bar, 75 μm）. （B） Phân tích thống kê số lượng tế bào thần kinh được thể hiện trong （A）. （C） Hình ảnh đại diện Western blot của p-AKT và AKT từ mọi nhóm chuột ở 7 ngày sau khi H. (D) Phân tích dữ liệu đo mật độ được thể hiện trong (C). (E) Hình ảnh đại diện của DCX (xanh lục) và Ki -67 (đỏ) từ mọi nhóm chuột ở 7 ngày sau HI (trái, thanh Thang đo, 25 um) trong vùng hippocampus DG; định lượng ô có nhãn kép DCX và Ki -67 ở 7 ngày sau HI (bên phải). Dữ liệu là trung bình ± SEM (n=8 trên mỗi nhóm). * p<0.05 compared="" to="">

Sau đó, các tế bào thần kinh bị thiếu oxy-glucose (OGD) trong 3 giờ và được điều trị với các nồng độ NB-EPA khác nhau. Các tế bào thần kinh giảm độc xuất hiện với sự teo nhỏ và bệnh nhân pyknosis trong các mẫu cấy được điều trị bằng PBS trên xe. Ngược lại, điều trị NB-EPA cải thiện đáng kể thời gian sống sót của tế bào thần kinh sau OGD (Hình 5D). Sự sống sót của nơron được đo trong 24 giờ sau đó bằng cách sử dụng xét nghiệm bộ đếm tế bào -8 (CCK -8). Như thể hiện trong Hình 5E, điều trị NB-EPA rõ ràng đã giải cứu được tỷ lệ sống sót của các tế bào thần kinh sau khi chết do OGD. Hiệu quả tối đa của NB-EPA đạt được ở 1 μM, được sử dụng cho tất cả các thí nghiệm in vitro sau đây. Phân tích lưu lượng tế bào xác nhận rằng số lượng tế bào thần kinh dương tính với annexin trong các mẫu cấy được xử lý NB-EPA đã giảm đáng kể so với các mẫu cấy được xử lý PBS trên xe (Hình 5F). Trong khi đó, điều trị NB-EPA cũng ức chế rõ rệt sự biểu hiện của các protein liên quan đến quá trình apoptosis, bao gồm p53, PUMA và Bax trong các tế bào thần kinh điều hòa OGD (Hình 5G, H). Do đó, những dữ liệu này ngụ ý rằng NB-EPA làm giảm tổn thương tế bào thần kinh thông qua việc điều chỉnh sự tồn tại của tế bào thần kinh trong khi ức chế quá trình chết rụng tế bào thần kinh.

Hình 5. NB-EPA làm giảm tổn thương tế bào thần kinh do thiếu máu cục bộ sau OGDchallenge. (A) Hình ảnh đại diện của các tế bào thần kinh vỏ não sơ cấp được nuôi cấy ở 1,3 và 7 ngày （Thanh tỷ lệ, 25 μm）. （B） Tỷ lệ phần trăm NeuN cộng với các tế bào từ tế bào thần kinh vỏ não sơ cấp được nuôi cấy trong 7 ngày trong ống nghiệm. (C) Hình ảnh đại diện của NeuN (xanh lục) và 4 ', 6- diamidino -2- phenylindole (DAPI) ( màu xanh lam) từ các tế bào thần kinh vỏ não sơ cấp được nuôi cấy trong ống nghiệm 7 ngày (Thanh tỷ lệ, 10 um). (D) Hình ảnh đại diện của tế bào thần kinh vỏ não sơ cấp từ mọi nhóm ở 24 giờ nuôi cấy sau 3 giờ OGD （Thanh tỷ lệ, 25 μm）. Xét nghiệm （E） CCK -8 trong môi trường nuôi cấy được làm giàu neutron trong điều kiện kiểm soát OGDor trong 3 giờ, sau đó xử lý với một loạt các nồng độ NB-EPA trong 24 giờ nữa. (F) Tỷ lệ phần trăm sáp nhập tế bào thần kinh ở 24 giờ nuôi cấy sau 3 giờ OGD. (G) Hình ảnh Western blot đại diện của p53, PUMA và Bax từ mọi nhóm ở 24 giờ nuôi cấy sau 3 giờ OGD. (H) Phân tích tỷ trọng dữ liệu được trình bày trong (G). Dữ liệu có giá trị trung bình ± SEM (n =3 trong mỗi nhóm). * P<0.05 compared="" to="">

2.6. NB-EPA bảo vệ tế bào thần kinh khỏi quá trình chết bằng cách ức chế p 53- PUMA

Phát tín hiệu Con đường p53 – PUMA được biết là tham gia vào quá trình chết rụng tế bào thần kinh não do thiếu máu cục bộ / tái tưới máu [20]. Ở đây, chúng tôi đã tìm hiểu xem liệu việc bảo vệ NB-EPA chống lại sự chết của tế bào thần kinh có liên quan đến việc ức chế con đường p53 – PUMA hay không. Như thể hiện trong Hình 6A, NB-EPA loại bỏ quá trình chết rụng của tế bào được điều hòa OGD nhưng không có tác dụng trên các mẫu được xử lý trước bằng Pififithrin- (PFT), một chất ức chế p53. Trong khi đó, điều trị NB-EPA ức chế rõ rệt sự biểu hiện của protein Bax pro-apoptotic trong các tế bào thần kinh điều hòa OGD nhưng không có tác dụng đối với những người được xử lý trước với PFT (Hình 6B). Biểu hiện PUMA được tăng cường rõ rệt trong các tế bào thần kinh sau thử thách OGD, trong khi biểu hiện mRNA và protein PUMA không thay đổi trong các tế bào thần kinh được xử lý bằng PFT, cho thấy rằng cảm ứng PUMA trong tế bào thần kinh phụ thuộc p 53- (Hình 6C). Điều trị NB-EPA ức chế sự biểu hiện PUMA do OGD gây ra ở tế bào thần kinh nhưng không có tác dụng trên tế bào thần kinh được điều trị bằng PFT (Hình 6C). Các tế bào thần kinh não có PUMA im lặng cụ thể cho thấy tỷ lệ tế bào apoptotic thấp hơn (Hình 6D) và giảm biểu hiện của protein Bax (Hình 6E) ở 24 giờ sau thử thách OGD so với các tế bào thần kinh biểu hiện PUMA. Do đó, những dữ liệu này chỉ ra rằng sự ức chế qua trung gian NB-EPA đối với quá trình chết rụng tế bào thần kinh do OGD gây ra phần lớn phụ thuộc vào sự ức chế của con đường p53-PUMA.

Hình 6. NB-EPA làm giảm quá trình chết rụng tế bào thần kinh thông qua việc ức chế con đường p 53- PUMA. (A) Phần trăm annexin cộng với tế bào thần kinh có hoặc không có ức chế p53 ở 24 giờ nuôi cấy có hoặc không có NB-EPA và sau 3 giờ OGD. (B) Hình ảnh Western blot đại diện của Bax có hoặc không có ức chế p53 ở 24 giờ nuôi cấy có hoặc không có NB-EPA và sau 3 giờ OGD (trái); phân tích mật độ biểu hiện protein Bax (bên phải). (C) Biểu hiện mRNA PUMA trong tế bào thần kinh lúc 12 giờ nuôi cấy có hoặc không có NB-EPA và sau 3 giờ OGD (trái); phần trăm trung bình của biểu hiện protein PUMA trong tế bào thần kinh tại 24 giờ nuôi cấy có hoặc không có NB-EPA và sau 3 giờ OGD (bên phải). (D) Tỷ lệ phần trăm tế bào thần kinh annexin có hoặc không có PUMA hạ gục ở 24 giờ nuôi cấy có hoặc không có NB-EPA và sau 3 giờ OD. (E) Hình ảnh Western blot đại diện của Bax có hoặc không có PUMA bị hạ gục ở 24 giờ nuôi cấy với hoặc không có NB-EPA và sau 3 giờ OGD (trái); phân tích mật độ biểu hiện protein Bax (phải). Dữ liệu là trung bình ± SEM (n=3 trên mỗi nhóm). * p< 0.05="" compared="" to="" vehicle.="" n.s.="" not="">

3. Thảo luận

Tổn thương thiếu oxy-thiếu máu cục bộ ở trẻ sơ sinh do ngạt chu sinh là một trong những bệnh thường gặp ở giai đoạn sơ sinh. Thiếu các biện pháp can thiệp điều trị bằng dược phẩm hiệu quả để giảm chấn thương não hoặc cải thiện chức năng thần kinh ở trẻ sơ sinh [21]. Trong nghiên cứu này, chúng tôi phát hiện ra rằng việc điều trị bằng macamide NB-EPA mới đã làm giảm đáng kể chấn thương não do thiếu oxy-thiếu máu cục bộ ở chuột sơ sinh. Sự bảo vệ thần kinh của NB-EPA có liên quan đến việc điều chỉnh sự tồn tại của tế bào thần kinh trong khi ức chế sự chết của tế bào thần kinh. Đáng chú ý, cơ chế chống nhiễm trùng qua trung gian NB-EPA phụ thuộc vào việc ức chế tín hiệu p 53- PUMA. Macamit, được gọi là hợp chất đánh dấu đặc trưng của maca, bao gồm benzylamine và một gốc axit béo chuỗi dài với mức độ không bão hòa thay đổi [22].

23 loại macamit đã được báo cáo trong chiết xuất maca, trong đó N-benzylhexadecanamide là hợp chất phổ biến nhất trong maca từ Peru, trong khi N-benzyl -9 Z, 12Z-octadecadienamide là hợp chất phong phú nhất trong maca Vân Nam [23]. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã xác định được một loại macamide mới NB-EPA trong maca từ Vân Nam. Macamide NB-EPA bao gồm benzylamine và axit eicosapentaenoic (EPA; 20: 5, n -3), một trong những thành phần chính của axit béo không bão hòa đa omega -3 (n -3 PUFA ). n -3 PUFAs và các chất chuyển hóa của chúng đã được báo cáo là tồn tại trong hệ thần kinh trung ương và đóng những vai trò quan trọng trong chức năng não và bệnh tật, chẳng hạn như dẫn truyền thần kinh, hình thành thần kinh và viêm thần kinh [24]. Đáng lưu ý, một số nghiên cứu đã gợi ý rằng EPA, thay vì n -3 PUFA và axit docosahexaenoic (DHA; 22: 6, n -3), có liên quan đến việc giảm nguy cơ mắc hầu hết các loại đột quỵ do thiếu máu cục bộ [25 ]. Đồng tình với những phát hiện này, chúng tôi đã chứng minh rằng loại macamide NB-EPA mới này không chỉ làm giảm chấn thương não mà còn cải thiện tình trạng thiếu hụt hành vi thần kinh sau chấn thương HI. Tế bào thần kinh là đơn vị cấu trúc và chức năng cơ bản nhất của hệ thần kinh, có chức năng kết nối và tích hợp thông tin đầu vào và gửi thông tin ra ngoài. Khi não bị tổn thương, do thiếu oxy và thiếu máu cục bộ, một số lượng lớn tế bào thần kinh bị tổn thương, từ đó gây ra rối loạn chức năng thần kinh. p53, một chất điều chỉnh chính của phản ứng căng thẳng của tế bào, có thể được kích hoạt ở các vùng thiếu máu cục bộ sau chấn thương não [26]. Nó có thể thúc đẩy quá trình chết rụng tế bào thần kinh, và sự thiếu hụt p53 hoặc việc áp dụng các chất ức chế p53 có thể làm giảm đáng kể tổn thương não trong các mô hình đột quỵ khác nhau [27]. Quá trình tự chết qua trung gian p 53- xảy ra thông qua nhiều cơ chế phân tử khác nhau, trong đó PUMA, ap 53- và bộ điều biến nâng cao của quá trình apoptosis, là một gen proapoptotic mạnh ở hạ nguồn của p53 [28]. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng con đường p53 – PUMA liên quan đến quá trình chết rụng tế bào thần kinh thể vân do chất ức chế ty thể gây ra ở chuột [29].

chấn thương và bệnh thậncistanche propiedades

Sự ức chế kích hoạt vòng phản hồi p53 – PUMA bởi các chất ức chế p53 và PUMA siRNA có thể làm giảm quá trình apoptosis tế bào thần kinh và quá trình thâm nhiễm do thiếu máu cục bộ tái tưới máu gây ra [30]. Ở đây, những phát hiện của chúng tôi phù hợp với những nghiên cứu này cho thấy PUMA là một chất thực thi mạnh mẽ quá trình chết rụng qua trung gian p 53- ở tế bào thần kinh sau chấn thương sọ não. Điều trị NB-EPA ức chế sự gia tăng PUMA do HI gây ra trong tế bào thần kinh. Hơn nữa, tác dụng bảo vệ của NB-EPA đối với sự sống còn của tế bào thần kinh phụ thuộc phần lớn vào việc ức chế tín hiệu PUMA. Bằng chứng ngày càng tăng cho thấy n -3 PUFAs góp phần vào sự tồn tại của tế bào thần kinh và sự hình thành thần kinh sau tổn thương não do thiếu máu cục bộ [31,32]. Chúng có thể cải thiện tiên lượng đột quỵ và hạn chế tổn thương thêm tế bào thần kinh [33]. Mặc dù đột quỵ do thiếu máu cục bộ gây ra sự tăng sinh và biệt hóa của các tế bào tiền thân thần kinh trong vùng dưới não thất (SVZ), hầu hết các tế bào thần kinh mới được tạo ra đã chết ngay sau đột quỵ [34]. n -3 PUFAs đã được báo cáo không chỉ để tăng cường sự tồn tại của các tế bào thần kinh chưa trưởng thành mà còn tạo điều kiện cho sự trưởng thành của chúng trong nhu mô vỏ não sau tổn thương đột quỵ [35]. Gần đây, một số nghiên cứu cũng cho thấy tác dụng có lợi của macamit trong việc cải thiện tổn thương tế bào thần kinh, có liên quan đến việc cải thiện chức năng hô hấp của ty thể [36,37].

Con đường dẫn truyền tín hiệu AKT đóng một vai trò quan trọng trong cơ chế chống chết rụng. Khi não bị chấn thương, con đường AKT được kích hoạt, và cơ thể bắt đầu tự bảo vệ và sửa chữa chấn thương, dẫn đến gia tăng các biểu hiện của p-AKT [38–41]. Cùng với những phát hiện này, chúng tôi nhận thấy rằng điều trị bằng NB-EPA bảo vệ sự sống sót của tế bào thần kinh chống lại chấn thương não qua trung gian HI thông qua việc kích hoạt tín hiệu AKT ủng hộ sự sống sót trong khi ức chế con đường tiền chết.

Trong một thời gian dài, các nhà sinh học thần kinh tin rằng các tế bào gốc thần kinh (NSC) đã biến mất ngay trước hoặc sau khi sinh, và quá trình hình thành thần kinh đã dừng lại vào thời điểm đó. Quan điểm cho rằng không có tế bào thần kinh mới nào trong não trưởng thành bắt đầu thay đổi vào những năm 196 0. Với sự phát triển của nghiên cứu, người ta nhận thấy rằng NSCs trưởng thành chủ yếu tồn tại trong SVZ và vùng dưới hạt (SGZ) của hồi hải mã [42–44]. Hơn nữa, sau đó người ta đã xác nhận rằng NSC cũng tồn tại trong các khu vực rộng lớn khác của hệ thần kinh trung ương (CNS) [45]. Các nghiên cứu gần đây đã chỉ ra rằng NSC nội sinh trong vỏ não có thể được kích hoạt sau chấn thương não để góp phần sửa chữa chấn thương não do thiếu oxy do thiếu máu cục bộ thông qua quá trình tự đổi mới, tăng sinh và tạo ra các tế bào thần kinh mới, tế bào hình sao và tế bào đầu xương [46,47] . DCX góp phần sửa chữa tế bào thần kinh bằng cách ổn định các vi ống trong tế bào thần kinh và đại diện cho dấu hiệu để theo dõi sự di chuyển của các tế bào thần kinh mới vào các vị trí bị thương của não [48]. Chấn thương sọ não do thiếu máu cục bộ và chấn thương sọ não nặng làm tăng sản xuất các tế bào thần kinh thể vân mới biểu hiện DCX [49]. Ki -67 là một kháng nguyên nhân liên kết với các tế bào tăng sinh, bao gồm mọi chu kỳ tăng sinh khác với pha G0. Trong nghiên cứu này, việc sử dụng NB-EPA dường như thúc đẩy quá trình hình thành thần kinh, có liên quan đến việc điều chỉnh các tế bào Ki -67 cộng với DCX cộng với HI sau chấn thương não. Tuy nhiên, liệu sự gia tăng số lượng tế bào Ki -67 cộng với DCX có liên quan đến sự tăng sinh và biệt hóa của tế bào gốc thần kinh do NB-EPA gây ra hay không vẫn cần được nghiên cứu thêm.

Người giới thiệu

1 Thornton, C.; Rousset, C.; Kichev, A.; Miyakuni, Y. Vontell, R .; Baburamani, AA; Fleiss, B.; Gressens, P.; Hagberg, H. Cơ chế phân tử của chấn thương sọ não ở trẻ sơ sinh. Neurol. Res. Int. 2012, 2012, 506320. [CrossRef]

2. Ma, Q.; Zhang, L. Lập trình biểu sinh của bệnh não thiếu oxy-thiếu máu cục bộ để đáp ứng với tình trạng thiếu oxy của thai nhi. Ăn xin. Neurobiol. 2015, 124, 28–48. [CrossRef] [PubMed]

3. Conforti M, HD; Deniz, BF; de Almeida, W .; Miguel, PM; Bronaugh, L.; Vieira, MC; de Oliveira, BC; Pereira, LO Thiếu oxy-thiếu máu cục bộ ở trẻ sơ sinh gây ra rối loạn chức năng vận động nhẹ, được phục hồi bằng cách huấn luyện nhào lộn, mà không ảnh hưởng đến cấu trúc hình thái liên quan đến kiểm soát vận động ở chuột. Brain Res. 2019, 1707, 27–44. [CrossRef]

4. Yıldız, EP; Ekici, B.; Tatlı, B. Bệnh não thiếu oxy-thiếu máu cục bộ ở trẻ sơ sinh: Cập nhật về cơ chế bệnh sinh và điều trị. Chuyên gia. Rev. Neurother. 2017, 17, 449–459. [CrossRef]

5. Azzopardi, ĐV; Strohm, B.; Edwards, AD; Dyet, L.; Halliday, HL; Juszczak, E.; Kapellou, O .; Levene, M.; Marlow, N. .; Porter, E.; et al. Hạ thân nhiệt vừa phải để điều trị bệnh não ngạt chu sinh. N. Engl. J. Med. 2009, 361, 1349–1358. [CrossRef] [PubMed]

6. Tagin, MA; Woolcott, CG; Vincer, MJ; Whyte, RK; Stinson, DA Hạ thân nhiệt cho bệnh não thiếu oxy-thiếu máu cục bộ ở trẻ sơ sinh: Một tổng quan hệ thống cập nhật và phân tích tổng hợp. Vòm. Nhi khoa. Vị thành niên. Med. 2012, 166, 558–566. [CrossRef] [PubMed]

7. Thoresen, M.; Sabir, H. Động kinh: Động kinh ở trẻ sơ sinh vẫn chưa có phương pháp điều trị an toàn và hiệu quả. Nat Rev Neurol. 2015, 11, 311–312. [CrossRef] [PubMed]

8. Nair, J.; Kumar, VHS Các liệu pháp hiện tại và mới nổi trong điều trị bệnh não thiếu máu cục bộ do thiếu độc tố ở trẻ sơ sinh. Trẻ em 2018, 5, 99. [CrossRef] [PubMed]

9. Gonzales, GF; Gonzales, C.; Gonzales-Castañeda, C. Lepidium meyenii (Maca): Một loài thực vật từ vùng cao nguyên của Peru - từ truyền thống đến khoa học. Forsch. Chưa hoàn thành. 2009, 16, 373–380. [CrossRef]

10. Chen, L.; Li, J .; Fan, L. Thành phần dinh dưỡng của maca trong thân rễ (Lepidium meyenii Walp.) Được trồng ở các vùng khác nhau của Trung Quốc. J. Chất lượng thực phẩm 2017, 2017, 3749627. [CrossRef]

11. Balick, MJ; Lee, R. Maca: Từ cây lương thực truyền thống đến năng lượng và chất kích thích ham muốn. Altern. Họ. Y tế y tế. 2002, 8, 96.

12. Chen, SX; Li, KK; Quán rượu, D.; Giang, SP; Chen, B.; Chen, LR; Yang, Z .; Ma, C.; Gong, XJ Tối ưu hóa chiết xuất hỗ trợ bằng sóng siêu âm, HPLC và UHPLC-ESI-Q-TOF-MS / MS Phân tích các chất Macamit chính và Macaenes từ cây Maca (Cultivars of Lepidium meyenii Walp). Molecules 2017, 22, 2196. [CrossRef]

13. Yang, Q.; Jin, W .; Lv, X.; Đại, P.; Ao, Y.; Ngô, M.; Đặng, W .; Yu, L. Ảnh hưởng của macamit đến khả năng chịu đựng và đặc tính chống mệt mỏi ở chuột bơi trong thời gian dài. Dược phẩm. Biol. 2016, 54, 827–834. [CrossRef] [PubMed]

14. Vương, T.; CN, CH; Zhong, HB; Công, Y .; Cui, ZK; Xie, J .; Wang, YP; Lương, C.; Cao, HH; Chen, XR; et al. N - (3- methoxybenzyl) - (9Z, 12Z, 15Z) -octadecatrienamide thúc đẩy sự hình thành xương thông qua con đường tín hiệu Wnt / -catenin chuẩn. Phytother. Res. 2019, 33, 1074–1083. [CrossRef]

15. Uchiyama, F.; Jikyo, T.; Takeda, R .; Ogata, M. Lepidium meyenii (Maca) tăng cường nồng độ hormone tạo hoàng thể trong huyết thanh ở chuột cái. J. Ethnopharmacol. 2014, 151, 897–902. [CrossRef] [PubMed]

16. Alasmari, M.; Böhlke, M.; Kelley, C.; Maher, T.; Pino-Figueroa, A. Ức chế Axit béo Amide Hydrolase (FAAH) bởi Macamide. Mol Neurobiol. 2019, 56, 1770–1781. [CrossRef]

17. Hoàng, YJ; Peng, XR; Qiu, MH Tiến bộ về các thành phần hóa học Có nguồn gốc từ Glucosinolate trong Maca (Lepidium meyenii). Nat. Sản phẩm. Biểu đồ sinh học. 2018, 8, 405–412. [CrossRef] [PubMed]

18. Bánh, M.; Muller, M.; Bodson, M.; Baudouin, G.; Plumier, JC Một vùng khởi động ngược dòng ngắn làm trung gian điều hòa phiên mã của gen doublecortin của chuột trong việc biệt hóa các tế bào thần kinh. BMC. Tế bào thần kinh. 2010, 11, 64. [CrossRef]

19. Rahmanzadeh, R .; Hüttmann, G.; Gerdes, J .; Scholzen, T. Sự bất hoạt của ánh sáng được hỗ trợ bởi Chromophore của PKI -67 dẫn đến sự ức chế tổng hợp RNA ribosome. Tế bào Prolif. 2007, 40, 422–430. [CrossRef]

20. Hong, bãi đáp; Zhao, XY; Zhang, HL p 53- chết tế bào thần kinh qua trung gian trong chấn thương sọ não do thiếu máu cục bộ. Thần kinh Bull. 2010, 26, 232–240. [CrossRef]

21. Wachtel, EV; Verma, S.; Mally, PV Cập nhật tình hình xử trí trẻ sơ sinh mắc bệnh não sơ sinh hiện nay. Curr Probl Pediatr. Vị thành niên. Chăm sóc sức khỏe 2019, 49, 100636. [CrossRef] [PubMed]

22. Vương, S.; Zhu, F. Thành phần hóa học và tác dụng đối với sức khỏe của cây maca (Lepidium meyenii). Chem chép thực phẩm. 2019, 288, 422–443. [CrossRef]

23. Carvalho, FV; Ribeiro, PR Đa dạng cấu trúc, các khía cạnh sinh tổng hợp và tổng hợp dữ liệu LC-HRMS để xác định các hợp chất hoạt tính sinh học của Lepidium meyenii. Thực phẩm Res. Int. 2019, 125, 108615. [CrossRef]

24. Bazinet, RP; Layé, S. Axit béo không bão hòa đa và các chất chuyển hóa của chúng trong chức năng não và bệnh tật. Nat. Rev. Neurosci. 2014, 15, 771–785. [CrossRef] [PubMed]

25. Venø, SK; Bork, CS; Jakobsen, MU; Lundbye-Christensen, S.; McLennan, PL; Bach, FW; Overvad, K. Schmidt, EB Marine n -3 Axit béo không bão hòa đa và nguy cơ đột quỵ do thiếu máu cục bộ. Đột quỵ 2019, 50, 274–282. [CrossRef]

26. Yonekura, tôi; Takai, K .; Asai, A.; Kawahara, N. .; Kirino, T. p53 làm tăng khả năng chết tế bào thần kinh hồi hải mã do thiếu máu cục bộ toàn cầu. J. Cereb. Lưu lượng máu. Metab. 2006, 26, 1332–1340. [CrossRef] [PubMed]

27. Xie, YL; Zhang, B.; Jing, L. MiR -125 b chặn đường dẫn tín hiệu apoptotic Bax / Cytochrome C / Caspase -3 ở mô hình chuột về chấn thương tái tưới máu do thiếu máu cục bộ não bằng cách nhắm mục tiêu. Neurol. Res. 2018, 40, 828–837. [CrossRef] [PubMed] 28. Chen, H.; Tian, ​​M.; Jin, L.; Jia, H.; Jin, Y. PUMA liên quan đến quá trình apoptosis do thiếu máu cục bộ / tái tưới máu của tế bào hình sao não chuột. Khoa học thần kinh 2015, 284, 824–832. [CrossRef] [PubMed]

29. Zhang, XD; Vương, Y. Vương, Y. Zhang, X. .; Hán, R.; Wu, JC; Liang, ZQ; Gu, ZL; Han, F.; Fukunaga, K .; et al. p53 làm trung gian cho quá trình hoạt hóa autophagy do rối loạn chức năng ty thể gây ra và làm chết tế bào ở thể vân chuột. Autophagy 2009, 5, 339–350. [CrossRef] [PubMed]

30. Li, XQ; Yu, Q .; Chen, FS; Tan, WF; Zhang, ZL; Ma, H. Ức chế sự kích hoạt vòng phản hồi PUMA aberrant p 53- làm giảm sự thiếu máu cục bộ gây ra tái tưới máu thần kinh và viêm thần kinh ở chuột bằng cách điều hòa caspase 3 và con đường cytokine NF-κB. J. Neuroinflflamm. 2018, 15, 250. [CrossRef] [PubMed]

31. Shi, Z; Ren, H.; Luo, C.; Yao, X.; Li, P.; Anh ấy, C.; Kang, JX; Wan, JB; Nhân dân tệ, TF; Su, H. Phong phú Omega nội sinh -3 Axit béo không bão hòa đa bảo vệ tế bào thần kinh vỏ não khỏi chấn thương do thiếu máu cục bộ thực nghiệm. Mol Neurobiol. 2016, 53, 6482–6488. [CrossRef] [PubMed]

32. Belayev, L.; Hồng, SH; Menghani, H.; Marcell, SJ; Obenaus, A.; Freitas, RS; Khoutorova, L.; Balaszczuk, V; Tháng 6, B.; Oriá, RB; et al. Docosanoids thúc đẩy sự hình thành thần kinh và hình thành mạch, tính toàn vẹn của rào cản máu-não, bảo vệ Penumbra và phục hồi hệ thần kinh sau khi thực nghiệm đột quỵ do thiếu máu cục bộ. Mol Neurobiol. 2018, 55, 7090–7106. [CrossRef]

33. Zendedel, A.; Habib, P.; Dang, J .; Lammerding, L.; Hoffmann, S.; Beyer, C.; Slowik, A. Axit béo không bão hòa đa Omega -3 cải thiện tình trạng viêm thần kinh và giảm thiểu tổn thương đột quỵ do thiếu máu cục bộ thông qua tương tác với tế bào hình sao và tế bào vi mô. J. Neuroimmunol. 2015, 278, 200–211. [CrossRef]

34. Ohab, JJ; Fleming, S.; Blesch, A.; Carmichael, ST Một ngách mạch máu thần kinh để hình thành thần kinh sau đột quỵ. J. Tế bào thần kinh. 2006, 26, 13007–13016. [CrossRef] [PubMed]

35. Zhang, W .; Vương, H.; Zhang, H.; Rò rỉ, RK; Shi, Y .; Hu, X.; Gao, Y. Chen, J. Việc bổ sung chế độ ăn uống với axit béo không bão hòa đa omega -3 thúc đẩy mạnh mẽ động lực phục hồi mạch máu thần kinh và cải thiện các chức năng thần kinh sau đột quỵ. Hết hạn. Neurol. 2015, 272, 170–180. [CrossRef]

36. Gugnani, KS; Vũ, N.; Rondón-Ortiz, AN; Böhlke, M.; Maher, TJ; Pino-Figueroa, AJ Hoạt động bảo vệ thần kinh của macamit đối với sự phá vỡ ty thể do mangan gây ra trong tế bào u nguyên bào đệm U -87 MG. Toxicol. Appl. Pharmacol. 2018, 340, 67–76. [CrossRef]

37. Chu, Y.; Vương, H.; Guo, F.; Tội.; Brantner, A.; Yang, J .; Han, L.; Ngụy, X.; Zhao, H.; Bian, B. Tổng hợp Proteomics và Lipidomics Điều tra Cơ chế Cơ bản Tác dụng Bảo vệ Thần kinh của N-benzylhexadecanamide. Molecules 2018, 23, 2929. [CrossRef] [PubMed]

38. Lưu, Y.; Liu, Y. Jin, H.; Công, P.; Zhang, Y. Tống, C.; Shi, X.; Liu, X.; Tống, Z; Shi, L.; et al. Chấn thương não do căng thẳng lạnh điều chỉnh các kênh TRPV1 và đường truyền tín hiệu PI3K / AKT. Brain Res. 2017, 1670, 201–207. [CrossRef]

39. Xu, W .; Li, T.; Gao, L.; Lenahan, C.; Zheng, J .; Yan, J .; Shao, A. .; Zhang, J. Sodium Benzoate làm giảm chấn thương não thứ cấp bằng cách ức chế quá trình chết thần kinh và giảm căng thẳng oxy hóa qua trung gian ty thể ở mô hình chuột bị xuất huyết nội não: Có thể có sự tham gia của DJ -1 / Akt / IKK / NFκB Pathway. Đổi diện. Mol Tế bào thần kinh. 2019, 12, 105. [CrossRef]

40. Li, J.; Không tí nào.; Wang, JN; Âm, XP; Chu, H.; Wang, YS Curcumin nhắm mục tiêu vào các yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu thông qua việc kích hoạt đường truyền tín hiệu PI3K / Akt và cải thiện tình trạng tổn thương thiếu oxy-thiếu máu cục bộ não ở chuột sơ sinh. Hàn Quốc. J. Physiol. Pharmacol. 2020, 24, 423–431. [CrossRef]

41. Li, T.; Xu, W .; Gao, L.; Quan, G.; Zhang, Z .; Anh ấy, P.; Xu, H.; Quạt, L.; Yan, F.; Chen, G. Yếu tố nuôi dưỡng thần kinh có nguồn gốc từ tế bào hình sao màng não bảo vệ thần kinh đối với tổn thương não sớm do xuất huyết dưới nhện gây ra bằng cách kích hoạt con đường thuận nghịch phụ thuộc Akt và bảo vệ tính toàn vẹn của hàng rào máu não. FASEB J. 2019, 33, 1727–1741. [CrossRef]

42. Morshead, CM; Reynolds, Cử nhân; Craig, CG; McBurney, MW; Staines, WA; Morassutti, D.; Weiss, S .; van der Kooy, D. Tế bào gốc thần kinh ở não trước của động vật có vú trưởng thành: Một quần thể tế bào cận tiêu tương đối tĩnh lặng. Nơron 1994, 13, 1071–1082. [CrossRef]

43. Chiasson, BJ; Tropepe, V; Morshead, CM; van der Kooy, D. Tế bào phụ và tế bào phụ ở não trước của động vật có vú trưởng thành chứng tỏ tiềm năng tăng sinh, nhưng chỉ các tế bào dưới đệm mới có đặc điểm tế bào gốc thần kinh. J. Tế bào thần kinh. 1999, 19, 4462–4471. [CrossRef] 44. Alvarez-Buylla, A. .; Lim, DA Về lâu dài: Duy trì các hốc mầm trong não người lớn. Nơron 2004, 41, 683–686. [CrossRef]

45. Vescovi, AL; Snyder, Sự thành lập EY và các đặc tính của dòng tế bào gốc thần kinh: Tính dẻo trong ống nghiệm và in vivo. Thuốc bổ não. 1999, 9, 569–598. [CrossRef] [PubMed] 46. Buffo, A. .; Nghi thức, tôi; Tripathi, P.; Leiper, A. .; Colak, D.; Horn, AP; Mori, T.; Götz, M. Nguồn gốc và thế hệ con cháu của bệnh thần kinh đệm phản ứng: Một nguồn tế bào đa năng trong não bị thương. Proc. Natl. Acad. Khoa học. Hoa Kỳ 2008, 105, 3581–3586. [CrossRef]

47. Ahmed, AI; Shtaya, AB; Zaben, MJ; Owens, EV; Kiecker, C.; Màu xám, WP Tế bào gốc thần kinh nội sinh dương tính với GFAP trong vỏ não chuột sau khi sinh được kích hoạt sau chấn thương sọ não. J. Neurotrauma 2012, 29, 828–842. [CrossRef] [PubMed] 48. Horesh, D.; Sapir, T.; Francis, F.; Sói, SG; Caspi, M.; Elbaum, M.; Chelly, J.; Reiner, O. Doublecortin, một chất ổn định các vi ống. Ầm ầm. Mol Genet. 1999, 8, 1599–1610. [CrossRef] [PubMed]

49. Ong, J.; Máy bay, JM; Cha mẹ, JM; Silverstein, FS Tổn thương thiếu máu cục bộ do thiếu độc tố kích thích tăng sinh vùng dưới não thất và hình thành thần kinh ở chuột sơ sinh. Nhi khoa. Res. 2005, 58, 600–606. [CrossRef] [PubMed]

50. Shao, Y.; Li, Y. Liu, T. Nghiên cứu tối ưu hóa quy trình chiết xuất macamit chính từ Maca (Lepidium meyenii Walp.). Món ăn. Res. Nhà phát triển. 2017, 38, 35–39.

51. Skorupskaite, V; Makareviciene, V; Gumbyte, M. Cơ hội khai thác dầu đồng thời và chuyển hóa trong quá trình sản xuất nhiên liệu diesel sinh học từ vi tảo: Đánh giá. Nhiên liệu. Quá trình. Technol. 2016, 150, 78–87. [CrossRef]

52. Gạo, JE, thứ 3; Vannucci, RC; Brierley, JB Ảnh hưởng của việc chưa trưởng thành đến tổn thương não do thiếu oxy do thiếu máu cục bộ ở chuột. Ann. Neurol. 1981, 9, 131–141. [CrossRef] [PubMed]

53. Xiao, AJ; Chen, W .; Xu, B.; Liu, R.; Turlova, E.; Barszczyk, A.; CN, CL; Liu, L.; Deurloo, M.; Wang, GL; et al. Hợp chất biển xyloketal B làm giảm chấn thương sọ não do thiếu oxy ở trẻ sơ sinh. Ma túy tháng 3 năm 2014, 13, 29–47. [CrossRef] [PubMed]

54. Jiao, M.; Li, X.; Chen, L.; Vương, X.; Nhân dân tệ, B.; Liu, T.; Đồng, Q.; Mei, H.; Yin, H. Tác dụng bảo vệ thần kinh của IL có nguồn gốc tế bào hình sao -33 trong chấn thương sọ não do thiếu oxy-thiếu máu cục bộ ở trẻ sơ sinh. J. Neuroinflflamm. 2020, 17, 251. [CrossRef] [PubMed]