Không phải tất cả Vaping đều giống nhau: Tác dụng khác biệt đối với phổi của Vaping Cannabidiol so với Nicotine
Sep 28, 2023
TRỪU TƯỢNG
Cơ sở lý luận Vaping đã trở thành một phương pháp phổ biến để hít các chất kích thích thần kinh khác nhau. Trong khi việc đánh giá tác động hô hấp của vaping chủ yếu tập trung vào các sản phẩm có chứa nicotine, thì vaping cannabidiol (CBD) ngày càng trở nên phổ biến. Hiện tại vẫn chưa biết liệu tác dụng sức khỏe của vaping nicotine và cannabinoids có giống nhau hay không.
Mục tiêu
Nghiên cứu này so sánh các tác động lên phổi của việc hít phải CBD bốc hơi cấp tính so với nicotine.
phương pháp
Các nghiên cứu về hít phải in vivo ở chuột và các thí nghiệm về độc tế bào trong ống nghiệm với tế bào người đã được thực hiện để đánh giá tác động gây tổn thương phổi của các khí dung CBD hoặc nicotine phát ra từ các thiết bị vaping.
lợi ích bổ sung cistanche-tăng khả năng miễn dịch
Các phép đo và kết quả chính
Tình trạng viêm phổi ở chuột được đánh giá bằng mô học, tế bào học dòng chảy và định lượng mức độ của các cytokine và chemokine tiền viêm. Tổn thương phổi được đánh giá bằng mô học, đo hoạt động của myeloperoxidase và nồng độ elastase bạch cầu trung tính trong dịch rửa phế quản phế nang và mô phổi. Tính toàn vẹn biểu mô/nội mô phổi được đánh giá bằng cách định lượng nồng độ protein BAL, rò rỉ albumin và rò rỉ FITC-dextran ở phổi. Căng thẳng oxy hóa được xác định bằng cách đo khả năng chống oxy hóa trong BAL và phổi. Tác dụng gây độc tế bào của CBD và khí dung nicotin đối với bạch cầu trung tính ở người và tế bào biểu mô đường dẫn khí nhỏ ở người được đánh giá bằng hệ thống giao diện không khí-lỏng trong ống nghiệm. Hít phải khí dung CBD dẫn đến những thay đổi về viêm nhiều hơn, tổn thương phổi nghiêm trọng hơn và căng thẳng oxy hóa cao hơn so với nicotine. Bình xịt CBD cũng cho thấy độc tính cao hơn đối với tế bào người so với nicotine.
Kết luận
Vaping CBD gây ra phản ứng viêm mạnh và dẫn đến nhiều thay đổi bệnh lý liên quan đến tổn thương phổi hơn so với vaping nicotine.
GIỚI THIỆU
Những năm 1990 như một phương thức sử dụng cần sa thay thế. Máy hóa hơi cần sa thường là những thiết bị lớn làm nóng thảo mộc cần sa khô đến mức cannabinoid bốc hơi. Vào đầu những năm 2000, các máy hóa hơi cầm tay nhỏ hơn nổi lên như 'thuốc lá điện tử' và đã trở thành một phương thức sử dụng nicotin phổ biến.1 Thuốc lá điện tử làm nóng nicotin trong dung dịch thay vì từ lá thuốc lá khô. Gần đây, các máy tạo hơi trên thị trường cần sa cũng có một quá trình chuyển đổi tương tự, với việc sử dụng nhiều hơn các chiết xuất cần sa dạng lỏng.2–7 Bình xịt phát ra từ các sản phẩm vaping không chỉ chứa các chất kích thích thần kinh như nicotin và cannabinoids (chủ yếu là tetrahydrocannabinol (THC) và cannabidiol (CBD)) mà còn cả các chất độc hại cho đường hô hấp (ví dụ: formaldehyde, acrolein, benzaldehyde).8–11 Nhiều thành phần hóa học liên quan đến nicotine và cannabinoids trong vaping là tương tự nhau, và những thành phần khác thì rất khác nhau, cho thấy tầm quan trọng của việc xem xét các vấn đề này trong bối cảnh hiểu được hậu quả về hô hấp của vaping cả hai chất. Ví dụ: dung môi được sử dụng trong các sản phẩm vape chứa nicotin và cannabinoid có thể khác nhau do đặc tính ưa mỡ của cannabinoid.12 Vitamin E acetate được xác định là chất phụ gia trong các sản phẩm vape chứa THC và đóng một vai trò quan trọng trong đợt bùng phát năm 2019 về thuốc lá điện tử và tổn thương phổi liên quan đến thuốc lá điện tử (VALI).13 14 Một số nghiên cứu hạn chế về tác động lên hô hấp của thuốc lá điện tử chủ yếu tập trung vào các sản phẩm có chứa nicotin. Các nghiên cứu trong ống nghiệm cho thấy rằng nicotine trong vape có thể kích hoạt các tế bào miễn dịch và làm suy giảm một số chức năng chính của chúng.15 Các nghiên cứu trên động vật cho thấy rằng việc tiếp xúc với nicotin từ thuốc lá điện tử sẽ ảnh hưởng xấu đến phản ứng miễn dịch.16 17 Các nghiên cứu quan sát ở người đã chỉ ra rằng nicotin trong vape có tác dụng ức chế các khía cạnh của hệ thống miễn dịch bẩm sinh trong các tế bào biểu mô mũi.18 19 Các nghiên cứu dịch tễ học đã báo cáo mối liên quan giữa vaping nicotine và các tình trạng hô hấp mãn tính (ho mãn tính, viêm phế quản, hen suyễn).20–24 Kể từ khi nghiên cứu về kết quả sức khỏe hô hấp và miễn dịch có liên quan với việc sử dụng cần sa chỉ tập trung vào cần sa hút,25–31 hiện vẫn chưa biết liệu tác động sức khỏe của vaping nicotine và cannabinoids có giống nhau hay không. Nghiên cứu này nhằm mục đích so sánh, theo một hình thức song song, tác động của việc hít phải cần sa bay hơi cấp tính so với nicotin.
Bảng 1 So sánh các hóa chất được phát hiện trong các sản phẩm vaping (chất lỏng không được làm nóng) được sử dụng trong các thí nghiệm phơi nhiễm in vivo và in vitro
NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
Các phương pháp được sử dụng được mô tả chi tiết hơn trong tệp bổ sung trực tuyến.
Sản phẩm vaping
Chúng tôi đã sử dụng hai sản phẩm vaping thương mại, một sản phẩm chứa CBD và sản phẩm còn lại chứa nicotine (viết tắt bằng số là CBD-vape và Nic-vape). Nhóm chứa CBD là CalmVape của The Kind Group LLC và nhóm chứa nicotine là Juul của Juul Labs. Cả hai sản phẩm đều được mua trực tuyến tại Hoa Kỳ vào ngày 2 tháng 11020. Vỏ CalmVape được dán nhãn chứa 50mg/mL CBD hòa tan trong hỗn hợp chất béo trung tính chuỗi trung bình (MCT) và có hương vị tự nhiên. Juul được dán nhãn chứa 5,0% nicotin hòa tan trong hỗn hợp propylene glycol (PG) glycerin thực vật (VG) và hương vị thuốc lá Virginia. Chúng tôi đã thử nghiệm các chất lỏng không được làm nóng và làm nóng cũng như lượng khí thải tạo ra từ cả hai sản phẩm bằng cách sử dụng các thử nghiệm sắc ký-khối phổ đã được xác thực đầy đủ và đã được công bố trước đó.32 Các thành phần chính được xác định trong chất lỏng của hai sản phẩm được liệt kê trong Bảng 1. Danh sách chi tiết các hóa chất được xác định trong các dung dịch đun nóng, bao gồm sản lượng của bốn hợp chất cacbonyl có khả năng gây độc (formaldehyde, acetaldehyd, axeton và acrolein) trong các sol khí phát ra được cung cấp trong các hình bổ sung trực tuyến E1–E4 và các bảng bổ sung trực tuyến E1 và E2.
lợi ích bổ sung cistanche-làm thế nào để tăng cường hệ thống miễn dịch
Chuột
Chuột đực và cái C57BL/6NCr 6 tuần tuổi được mua từ Phòng thí nghiệm Charles River (Wilmington, Massachusetts, Hoa Kỳ) và được nuôi trong điều kiện không có mầm bệnh cụ thể với chu kỳ sáng/tối là 12/12 giờ. Số lượng động vật trong mỗi nhóm phơi nhiễm là n=10 (5 con đực và 5 con cái, ngoại trừ Nic-vape có 5 con đực và 4 con cái; một con chuột cái có kích thước rất nhỏ và cần được tiêu hủy trước khi hoàn thành nghiên cứu ). Tất cả các thí nghiệm được thực hiện theo các hướng dẫn do Ủy ban Chăm sóc và Sử dụng Động vật Thể chế thiết lập và tuân thủ tất cả các quy định của tiểu bang, liên bang và NIH.
Điều kiện tiếp xúc với động vật
Bình xịt từ các sản phẩm thuốc lá điện tử được tạo ra bằng cách sử dụng máy tạo bình xịt thuốc lá điện tử được mô tả trước đây.14 33 Thiết bị Juul được sử dụng để tạo khí dung cho cả hai sản phẩm. Động vật được cho tiếp xúc trong buồng cảm ứng 15 L đã được sửa đổi mỗi ngày với tổng số 20 nhát xịt được tạo ra trong 1 giờ (1 nhát xịt mỗi 3 phút), 5 ngày/tuần trong 2 tuần. Mỗi lần xịt có thể tích 55mL và được khí dung trong thời gian 3 giây. Bình xịt từ mỗi sản phẩm vaping được tạo ra bằng cách sử dụng một giao thức phun hơi giống hệt nhau nhằm mục đích bắt chước hành vi vaping của những vaper nicotine có kinh nghiệm.34 Do thiếu các ấn phẩm mô tả hành vi vaping của các vaping CBD, chúng tôi đã tuân theo các quy trình phun hơi giống nhau cho cả hai sản phẩm. Mặc dù chúng tôi không đo CBD và nicotin trong không khí bên trong buồng tiếp xúc với động vật, nhưng chúng tôi đã ước tính dựa trên thể tích chất lỏng bốc hơi mỗi ngày, nồng độ CBD và nicotin trong chất lỏng, bình xịt và tốc độ dòng không khí mà động vật bị phơi nhiễm trung bình tới 20,5 mg/ m3 CBD và 22,8 mg/m3 nicotin. Động vật đối chứng được tiếp xúc với không khí đã lọc bằng cách sử dụng cùng một quy trình tiếp xúc.
Điều kiện phơi nhiễm trong ống nghiệm
Các tế bào được sử dụng trong các thí nghiệm in vitro được tiếp xúc trực tiếp với các hơi mới được tạo ra trong hệ thống phơi nhiễm kín, trong đó các buồng tiếp xúc giữa không khí và chất lỏng (ALI) được giữ bên trong tủ ấm 37 độ. Đối với các thử nghiệm ALI, chúng tôi đã sử dụng các thiết bị vaping hệ thống khép kín tương tự và nạp lại các công thức chất lỏng như được sử dụng cho các thử nghiệm phơi nhiễm in vivo được mô tả ở trên. Chi tiết về phương pháp được cung cấp trong tệp bổ sung trực tuyến.
lợi ích cistanche cho nam giới - tăng cường hệ thống miễn dịch
Nhấn vào đây để xem các sản phẩm Tăng cường miễn dịch Cistanche
【Hỏi thêm] Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Đánh giá tình trạng viêm phổi
Tình trạng viêm phổi được đánh giá bằng phương pháp tế bào học dòng chảy, mô hóa học và bằng cách định lượng mức độ của cytokine và chemokine (hình bổ sung trực tuyến E5), 14 35 36 và chi tiết đầy đủ được cung cấp trong tệp bổ sung trực tuyến.
Đánh giá tổn thương phổi
Tính toàn vẹn của biểu mô/nội mô phổi được đánh giá bằng cách định lượng nồng độ protein bằng BCA và rò rỉ albumin hệ thống đến không gian phế quản phế nang bằng ELISA sử dụng mẫu BAL và phế quản phế nang để rò rỉ hệ thống bằng cách đo huỳnh quang huyết tương 1 giờ sau khi nhỏ đầu dò huỳnh quang vào khí quản. Mức elastase bạch cầu trung tính (NE),37 38 được đo trong BAL và mô phổi bằng cách sử dụng bộ ELISA NE từ hệ thống R&D (Cat. #DY4517-05) theo giao thức của nhà sản xuất. Hoạt tính myeloperoxidase (MPO) được đo bằng xét nghiệm đo nhiệt lượng trong BAL và mô phổi39 bằng cách sử dụng bộ xét nghiệm MPO của Abcam (Cat. #ab105136) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Thuốc nhuộm Oil Red O được sử dụng để hình dung các đại thực bào phế nang chứa đầy lipid.14 Chi tiết xét nghiệm được đưa ra trong tệp bổ sung trực tuyến. Đánh giá mô học ở các phần của phổi được nhà nghiên cứu bệnh học thú y phân loại như mô tả trước đây.40 41
Đo mức độ căng thẳng oxy hóa ở chuột BAL và phổi
Phản ứng viêm cấp tính nhanh chóng áp đảo các hệ thống chống oxy hóa để thúc đẩy tổn thương phổi.42–44 Căng thẳng oxy hóa được xác định bằng cách đo khả năng chống oxy hóa trong BAL và dịch ly giải phổi như được mô tả trong tệp bổ sung trực tuyến.
Xét nghiệm độc tế bào in vitro
Các tế bào biểu mô đường dẫn khí nhỏ ở người (hSAEC) từ LONZA và bạch cầu trung tính đã được tinh chế ở người đã tiếp xúc trực tiếp với các khí dung CBD và nicotine mới được tạo ra trong môi trường nuôi cấy giao diện chất lỏng-không khí. Giao thức tiếp xúc và chi tiết về phương pháp có trong tài liệu bổ sung trực tuyến. Độc tính gây độc tế bào được đo bằng cách sử dụng loại trừ thuốc nhuộm xanh trypan, sự hấp thu thuốc nhuộm màu đỏ trung tính và xét nghiệm apoptosis Phụ lục V-FITC như được mô tả trong tệp bổ sung trực tuyến.
Đo nồng độ NE trong môi trường nuôi cấy PMN
Mức NE trong môi trường nuôi cấy tế bào PMN tiếp xúc với khí dung sau giai đoạn phục hồi được định lượng bằng bộ ELISA từ hệ thống R&D (Cat. #DY4517-05) theo hướng dẫn của nhà sản xuất.
Xét nghiệm tính thấm FITC-dextran
Tính thấm của tế bào, qua một lớp SAEC của con người tiếp xúc với khí dung từ môi trường nuôi cấy ALI, đã được thực hiện để đánh giá tính toàn vẹn của hàng rào và các chi tiết được mô tả trong tệp bổ sung trực tuyến.
Phân tích thống kê
Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các giá trị xếp hạng trung bình của các nhóm phơi nhiễm khác nhau (CBD, nicotine và kiểm soát không khí) được xác định bằng cách thực hiện thử nghiệm phi tham số của Kruskal-Wallis. Giá trị P đã được hiệu chỉnh cho nhiều thử nghiệm bằng cách sử dụng phương pháp 'quy trình tăng cường tuyến tính hai giai đoạn của phương pháp tỷ lệ phát hiện sai (FDR) của Stewamini, Krieger và Yekutieli' và sự khác biệt giữa hai nhóm được coi là có ý nghĩa thống kê ở mức p<0.05when FDR was set at Q<0.1. We also evaluated if there were differences between male versus female mice in the responses to inhalation of CBD and nicotine aerosols in comparison with air. All statistical analyses were carried out using GraphPad Prism V.9.3.1 software (GraphPad; La Jolla, California, USA).
cistanche tubulosa-cải thiện hệ thống miễn dịch
KẾT QUẢ
Việc tiếp xúc với khí dung CBD dẫn đến sự tích tụ nhiều hơn các tế bào miễn dịch bẩm sinh và thích nghi trong phổi so với việc tiếp xúc với nicotin
Tổng số tế bào miễn dịch xâm nhập vào phổi của chuột sau khi hít phải khí dung CBD cao hơn đáng kể so với nicotin hoặc không khí được lọc (hình 1A). Bảy trong số 10 tập hợp tế bào miễn dịch được nghiên cứu bị ảnh hưởng nhiều hơn đáng kể sau khi tiếp xúc với CBD so với nicotine. Phân tích kiểu hình miễn dịch cho thấy sự xâm nhập có ý nghĩa thống kê của bạch cầu trung tính CD11b + Ly6G + trong phổi của chuột sau khi hít phải CBDaerosols (14488 so với 3674 bạch cầu trung tính trong không khí, p<0.05) as well as following nicotine aerosol exposure (15410 vs 3674 neutrophils in air, p<0.001) (figure 1B). Total numbers of CD11bCD- 11c+Siglec-F+ alveolar macrophages were significantly reduced following CBD-Vape or Nic-Vape inhalation as compared with air-exposed mice (15965 cells in CBD and 18834 cells in NicVape vs 43465 cells in air (p<0.05)) (figure 1C). Inhalation of both CBD and nicotine aerosols resulted in significantly lower numbers of pulmonary interstitial CD11bCD11c+CD206+ macrophages as compared with air-exposed control mice (11460 vs 47319 cells for CBD-Vape, p<0.0001) and 27727 vs 47319 cells for Nic-Vape, p<0.05). The reduction in the numbers of pulmonary interstitial macrophages was significantly greater following inhalation of CBD aerosols compared with nicotine (11460 cells in CBD-vape vs 27727 cells in Nic-Vape, p<0.05) (figure 1D). CD11bCD11c+arginase-1+ macrophages were significantly reduced following inhalation of both CBD-Vape and Nic-Vape compared with air-exposed control (13450 vs 44009 for CBD-Vape (p<0.001), and 24280 vs 44009 for Nic-Vape (p<0.05)) (figure 1E). However, the reduction in the numbers of CD11bD11c+arginase-1+ macrophages was significantly more following inhalation of CBD aerosols compared with Nic-Vape (13450 cells in CBD-vape vs 24280 cells in Nic-Vape (p<0.05). The number of CD19+ B cells was not statistically different (figure 1F). Following inhalation of CBD aerosols, the numbers of CD8+ and CD4+ T cells in the lungs were, respectively, 3.3-fold (p<0.001) and 5.6-fold (p<0.0001) higher than following nicotine inhalation (figure 1G, H). CD4+IL-17A+ T cells were not altered in the lungs following CBD-Vape or Nic-Vape exposures as compared with air control (figure 1I). CD4+RORγt + T cells, expressing the master transcription factor essential for the differentiation into proinflammatory Th17 cells, were significantly increased following inhalation of CBD aerosols as compared with both nicotine (11983 vs. 2015; p<0.001) and air exposure (11983 vs. 5887; p<0.05) (figure 1J). Furthermore, CBD aerosols resulted in markedly increased infiltration of CD4+Foxp3+ regulatory T cells into the lungs compared with nicotine (4401 cells in CBD-Vape vs 1688 cells in Nic-Vape; p<0.001) (figure 1K). There were no statistically significant differences observed between male and female mice concerning the infiltration of any of the innate and adaptive immune cells, regardless of the different exposure conditions (online supplemental figure E6A–K). Relatively more Oil Red O-positive lipid-laden macrophages were detected in BAL following CBD-aerosol inhalation compared with nicotine aerosol (0.66 vs 0.32; p<0.05) or air-exposure (0.66 vs 0.15; p<0.001) (figure 2A). Lung tissue sections of air-breathing mice contained rare (typically 1–2 positive cells in the entire lung lobe) lipid-containing, Oil Red O-positive intra-alveolar macrophages (online supplemental figure E7A). In contrast, lungs from CBD and nicotine-exposed animals regionally contained one or more Oil Red O-positive macrophages within multiple alveolar lumina that were often adjacent to one another (online supplemental figure E7B, C), with no obvious differences found in males versus females. Histological examination of H&E-stained lung tissue sections from filtered air-breathing control mice showed air-filled alveolar lumina bounded by thin alveolar walls (figure 2B). In contrast, peribronchiolar and/or intrabronchiolar, perivascular, alveolar infiltrates, and interstitial infiltrates of lymphocytes, macrophages, and granulocytes were the predominant findings in the CBD and nicotine-exposed mouse lungs (figure 2C–E). Small focal lesions and occasionally larger and more regionally extensive focal lesions were noted. Lesions were found primarily near terminal bronchioles and often subpleural. The frequency and severity of lesions were greater following CBD aerosol inhalation compared with nicotine. The male mice showed a greater frequency of most lesions as compared with female mice following inhalation of both CBD and nicotine.
Hình 1 Tác động của việc tiếp xúc cấp tính với khí dung CBD hoặc nicotin đối với sự xâm nhập tế bào miễn dịch ở phổi. Tổng số bạch cầu (A), CD11b+ Ly6G+ bạch cầu trung tính (B), CD11b-CD11c+ Siglec-F + đại thực bào (C), đại thực bào CD11b- CD11c+ CD206+ (D), CD11b- CD11c+ arginase+ đại thực bào (E) và số lượng tế bào CD19+ B (F), CD8+ tế bào T (G), CD4+ tế bào T (H), CD4+ IL17A+ (I) và CD 4+ ROR t + tế bào T gây viêm (J) và CD4+ FOXP3+ Tế bào T (K) trong phổi của những con chuột tiếp xúc với không khí, nicotine hoặc khí dung CBD được xác định bằng dòng chảy phương pháp tế bào học bằng cách sử dụng các điểm đánh dấu cụ thể và tuân theo chiến lược chọn lọc như được mô tả trước đây và được hiển thị trong hình bổ sung trực tuyến 1. Dữ liệu được hiển thị dưới dạng ô hình hộp có râu ở mức tối thiểu và tối đa. Sự khác biệt giữa hai nhóm được coi là có ý nghĩa ở mức p<0.05, the statistical significance of the difference between the two groups is indicated with symbols *p<0.05; ***p<0.001; ****p<0.0001after performing non-parametric Kruskal-Wallis test with false discovery rate (FDR) correction for multiple comparisons by GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each exposure condition, n=10 mice (5 males+5 females) (n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape) were used. CBD, cannabidiol.
Bình xịt CBD có tác dụng điều chỉnh nồng độ cytokine mạnh hơn so với bình xịt nicotine
Chúng tôi nhận thấy rằng việc hít khí dung CBD đã làm tăng đáng kể nồng độ của các cytokine IL-5, IL-6 và G-CSF trong BAL so với cả phơi nhiễm nicotin và không khí (p<0.01) and enhanced the levels of chemokine KC compared with air-control only (p<0.001) (figure 3A–D). Levels of IL-2 were significantly lower following CBD and Nic-vape aerosol exposures compared with air (p<0.05) (figure 3E). IL-10 and IFN-γ levels were significantly reduced only after CBD aerosol exposure compared with air (p<0.05) (figure 3F, G). IL-1α levels were not significantly different, though there was a trend for the values to be lower following exposure to CBD-Vape aerosols (figure 3H). There were no statistically significant differences observed between male and female mice in the levels of these cytokines or chemokines (online supplemental figure E8A–H and online supplemental table E3).
Tiếp xúc với khí dung CBD dẫn đến tổn thương nội mô phổi nhiều hơn so với tiếp xúc với khí dung nicotin
Tổng lượng protein trong BAL đã tăng lên sau khi hít phải khí dung CBD khi so sánh với các biện pháp kiểm soát không khí (435µg/mL so với 287µg/mL; p<0.01) (figure 4A, left panel). Additionally, serum albumin levels leaking into the BAL were markedly increased following CBD aerosol inhalation when compared with both nicotine aerosol (70303ng/mL vs 32741ng/mL in NicVape; p<0.01) and air inhalation (70303ng/mL vs 26042ng/ mL in air control; p<0.0001) (figure 4B, left panel). The systemic leak of FITC-dextran from the lungs into the plasma was markedly higher following CBD aerosol inhalation than Nic-vape aerosol (469.9ng/mL vs 227.6ng/mL in Nic-Vape; p<0.01) or air exposures (469.9ng/mL vs 157.5ng/mL in air control; p<0.0001) (figure 4C, left panel). Furthermore, the FITC-dextran leak following Nic-vape aerosol exposure was not significantly different when compared with air control (227.6ng/mL vs 157.5ng/mL). There were no statistically significant differences observed in the levels of these markers when comparing male with female mice following any of the exposures (figure 4A–C, right panels and online supplemental table E3). It is known that elastase activity in inflammatory diseases increases and correlates with the levels of elastase proteins and neutrophil infiltrates as the disease progresses.45 46 NE levels in the BAL were markedly augmented following inhalation of CBD aerosols (1.8-fold vs air; p<0.001) and Nic-Vape aerosols (1.42-fold vs air; p<0.01) (figure 5A, left panel). The levels of NE measured in lung tissue were significantly increased following CBD-Vape as compared with both Nic-Vape (1.3-fold; p<0.01) and air (1.41-fold; p<0.001) (figure 5B, left panel). There were no statistically significant differences observed in NE levels between male and female mice, measured either in the BAL or lung tissues (figure 5A, B, right panels and online supplemental table E3). We detected higher MPO activity in lung tissues following inhalation of CBD aerosols compared with nicotine aerosols (~2fold; p<0.05) and air (~8.44fold; p<0.0001) (figure 6A). BAL MPO activity following CBD and nicotine aerosol-inhalation was equivalent, but greater than air controls (p<0.01) (online supplemental figure E9A). There were no statistically significant differences observed in MPO activity between male and female mice, either in lung tissue or in the BAL (figure 6B; online supplemental figure E9B and online supplemental table E3).
Hình 2 Những thay đổi viêm trong phổi sau khi hít phải khí dung CBD và nicotine. Khi kết thúc quá trình phơi nhiễm, chuột được tiêu hủy, khí quản được đóng ống để thu thập BAL trong 1% FBS trong PBS và phổi được thu hoạch. (A) Các tế bào BAL cytospin trên các phiến kính được nhuộm bằng dung dịch 0.5% Oil Red O và các tế bào dương tính với Oil Red O được tính như mô tả trong các phương pháp. Kết quả được mô tả dưới dạng ô vuông có râu ở mức tối thiểu và tối đa. Sự khác biệt giữa hai nhóm được coi là có ý nghĩa ở mức p<0.05 and indicated with the symbols *p<0.05; ***p<0.001 by performing non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons using GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each experiment n=10 (5 males+5 females) for CBD-vape and air exposure and n=9 (5 males+4 females) for Nic-vape). (B–E) Left lung lobes from all mice were embedded, sectioned and H&E stained as described in the methods. (B) (Air): Image of the histologically unremarkable lung from air-breathing control mouse showing air-filled alveolar lumina bounded by thin alveolar walls (arrows). H&E, ×20. (C) Nic-vape: Peribronchiolar lymphocytic, macrophagic (arrowhead) granulocytic infiltrate (circle). H&E, ×20 magnification. B=bronchiolar lumen. (D, E) CBD-vape: Perivascular infiltrates composed of mononuclear (lymphocytes and macrophages) and granulocytic infiltrates (arrows). Intra-alveolar granulocytes (circles) and macrophages (arrowheads) were also present. H&E, ×20 magnification. BD, cannabidiol; B, bronchiolar lumen; FDR, false discovery rate; PBS, phosphate-buffered saline; V, vessel lumen.
Tiếp xúc với CBD và khí dung nicotine làm giảm khả năng chống oxy hóa của phổi
Tổng khả năng chống oxy hóa đã giảm rõ rệt ở cả hai mô phổi (p<0.01vs air) and BAL (p=0.001vs air) following inhalation of CBD aerosols (figure 7A; online supplemental figure E10A). However, following nicotine aerosol exposure it was significantly reduced only in the BAL (p<0.01vs air) compared with air (online supplemental figure E10A). We did not observe any statistically significant differences in the antioxidant potential between male and female mice for each exposure group, either in lung tissue or in the BAL (figure 7B; online supplemental figure E10B and online supplemental table E3).
Hình 3 Sự điều biến môi trường cytokine/chemokine gây viêm trong chất lỏng BAL sau khi hít phải khí dung CBD và nicotin. Mức độ của các cytokine và chemokine khác nhau liên quan đến tình trạng viêm trong BAL (A–H) của chuột sau 2 tuần tiếp xúc với không khí, khí dung Nic-Vape hoặc khí dung CBD-Vape đã được định lượng bằng cách sử dụng MULTIPLEX MAP Kit như mô tả trong tài liệu và phương pháp. Dữ liệu được hiển thị dưới dạng ô hộp có râu ở mức tối thiểu và tối đa. Thử nghiệm Kruskal-Wallis không tham số với hiệu chỉnh FDR cho nhiều so sánh đã được thực hiện để xem liệu có tồn tại sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa hai nhóm bằng phần mềm GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, USA). Sự khác biệt giữa hai nhóm được coi là có ý nghĩa ở mức p<0.05 and is indicated with symbols *p<0.05; **p<0.01; ***p<0.001; ****p<0.0001. In each experiment n=10 for CBD-vape and air exposure (5 males+5 females) and n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape). CBD, cannabidiol.
Bình xịt CBD độc hơn bình xịt nicotine đối với hSAEC và phá vỡ tính toàn vẹn hàng rào biểu mô của chúng
Chúng tôi quan sát thấy rằng khi SAEC của con người tiếp xúc trong ống nghiệm với khí dung CBD trong 1 giờ, hình thái tế bào biểu mô bị phá vỡ rõ rệt (hình 8A, B so với 8C). Sự chết tế bào trong hSAEC chỉ tăng đáng kể sau khi tiếp xúc với khí dung CBD khi so sánh với không khí (41% so với 12,5% trong kiểm soát không khí; p<0.05) (figure 8D, E). Even though the cell death following CBD-Vape exposure was higher compared with exposure to nicotine aerosols, it, however, did not reach statistical significance (41% vs. 16% in Nic-Vape). Additionally, exposure to CBD aerosols diminished the epithelial barrier integrity of human SAECs compared with air by 2.1-fold (p<0.05) and while the exposure to nicotine aerosols also showed an increased trend, it was not significantly different compared with air-control (1.7-fold decrease in Nic-Vape vs air control) (figure 8F).
cistanche thực vật tăng cường hệ thống miễn dịch
Khí dung CBD chứ không phải khí dung nicotine gây ra cái chết tế bào apoptotic trong bạch cầu trung tính đã được tinh chế ở người, nhưng cả hai đều tăng cường giải phóng NE
Phơi nhiễm cấp tính với khí dung CBD gây ra cái chết tế bào rõ rệt ở bạch cầu trung tính đã được tinh chế ở người (44,5% tế bào chết sau CBDVape so với 14% trong kiểm soát không khí; p<0.0001) and (44.5% vs 21%cell death in Nic-Vape; p<0.001) (figure 9A). CBD aerosol-induced neutrophil cell death was mainly due to increased apoptosis compared with air (29% vs. 10% in air control; p<0.0001) and compared with Nic-Vape (29% vs. 12% in Nic-Vape; p<0.001) (figure 9B). Furthermore, both CBD and nicotine aerosols lead to enhanced accumulation of NE levels in the neutrophil cell culture media as compared with air control (2-fold increase in CBD-Vape; p<0.001and 1.45-fold increase in Nic-Vape; p<0.05) (figure 9C). However, the levels were significantly higher following CBD versus nicotine exposure (CBD-Vape 1.4-fold higher than Nic-Vape; p<0.05) (figure 9C). Pictures of human neutrophils after ALI exposures and the 24-hour recovery period are provided in online supplemental figure E12. Importantly, an aliquot of purified neutrophils that were incubated in media (unexposed) for the duration of the experiment showed low cell death (~11%) that was equivalent to values noted in neutrophils exposed to air (~14%) in the ALI chambers (figure 9A), nor was apoptosis or increased NE levels induced (figure 9B, C).
Hình 4 Các dấu hiệu tổn thương phổi gây ra sau khi hít phải khí dung CBD và nicotine. Khi kết thúc quá trình phơi nhiễm, chuột được tiêu hóa, BAL được thu hoạch và mức (A) protein tổng số và (B) albumin trong BAL được định lượng như mô tả trong phần Vật liệu và Phương pháp. (C) Mức FITC-dextran rò rỉ vào huyết tương đã được định lượng. Các bảng bên trái trong mỗi hình biểu thị dữ liệu từ nam và nữ kết hợp, trong khi các bảng bên phải biểu thị dữ liệu là nam so với nữ. Kết quả được hiển thị dưới dạng ô vuông có râu ở mức tối thiểu và tối đa. Sự khác biệt giữa các nhóm được coi là có ý nghĩa ở mức p<0.05 and are indicated as symbols **p<0.01, ****p<0.0001, calculated after performing non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by employing GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each experiment n=10 (5 males+5 females) for air and CBD-vape exposures and n=9 (5 males+4 females) for the Nic-Vape group. CBD, cannabidiol.
Hình 5 Mức độ elastase bạch cầu trung tính trong phổi được đo sau khi tiếp xúc với khí dung CBD và nicotin. Vào cuối 2-tuần phơi nhiễm, chuột đã được tiêu hủy, BAL và phổi được thu hoạch cũng như chuẩn bị dịch ly giải mô. (A, B) Nồng độ NE trong dung dịch ly giải BAL và mô phổi được định lượng bằng ELISA. Các bảng bên trái trong mỗi hình hiển thị dữ liệu dưới dạng tổng hợp của nam giới, trong khi các bảng bên phải biểu thị dữ liệu dưới dạng nam giới so với Nữ giới. Kết quả được hiển thị dưới dạng ô vuông có râu ở mức tối thiểu và tối đa. Thử nghiệm Kruskal-Wallis không tham số với hiệu chỉnh FDR cho nhiều so sánh đã được sử dụng để xem liệu có tồn tại sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa hai nhóm bằng phần mềm GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, Hoa Kỳ) hay không. Sự khác biệt giữa hai nhóm được coi là có ý nghĩa ở mức p<0.05 and is indicated with symbols **p<0.01, ***p<0.001. In each experiment n=10 (5 males+5 females) for air and CBD-vape exposures each and n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape. CBD, cannabidiol; NE, neutrophil elastase.
CUỘC THẢO LUẬN
Phát hiện của chúng tôi cho thấy những tác động bất lợi lên hệ thống miễn dịch và tổn thương phổi sau khi tiếp xúc qua đường hô hấp với các sản phẩm vaping có chứa cannabinoid nghiêm trọng hơn so với sau khi tiếp xúc với khí dung từ thiết bị vaping có chứa nicotin. Chúng tôi đã phát hiện ra tác hại của CBD bốc hơi ảnh hưởng đến cân bằng nội môi miễn dịch phổi bằng cách sử dụng mô hình chuột thí nghiệm vaping và in vitro với tế bào người. Nghiên cứu của chúng tôi tiết lộ rằng vaping CBD tạo ra môi trường vi mô phổi tiền viêm, dẫn đến sự tích tụ rõ rệt của các tế bào miễn dịch viêm, biểu hiện hoạt động tăng cường của các yếu tố gây tổn thương mô như MPO và NE và dẫn đến tổn thương phổi thông qua các quá trình có thể bao gồm stress oxy hóa. Mặc dù một số nghiên cứu đã kiểm tra tác động hô hấp của vaping nicotine, nhưng theo hiểu biết của chúng tôi, đây là báo cáo đầu tiên chứng minh rằng ngay cả việc tiếp xúc ngắn hạn với CBD bốc hơi cũng làm thay đổi môi trường viêm trong phổi, dẫn đến tổn thương phổi. Điều quan trọng cần lưu ý là chúng tôi đã sử dụng các sản phẩm vaping có chứa CBD không có THC để loại bỏ mọi ảnh hưởng tiềm tàng của THC đối với tác dụng của phổi. Do những hạn chế pháp lý trong việc tiếp cận các sản phẩm thuốc lá điện tử có chứa THC, chúng tôi không thể tiến hành các thử nghiệm so sánh tác dụng của thuốc lá điện tử THC. Một nghiên cứu gần đây đã báo cáo rằng CBD trong các sản phẩm vaping có thể được coi là tiền thân của THC, do đó làm vấn đề trở nên phức tạp hơn bằng cách gây ra các tác động qua trung gian THC, độc lập với CBD liên quan đến việc sử dụng chung các sản phẩm vaping cần sa.47
Hơn nữa, bất kỳ tác động độc hại về đường hô hấp nào của vaping đều có thể trở nên trầm trọng hơn do sự hiện diện của các thành phần khác của sản phẩm vaping, bao gồm các dung môi khác nhau (MCT trong sản phẩm CBD và PG: VG trong các sản phẩm nicotine), các hương vị và terpen khác nhau có trong cả hai sản phẩm như được tiết lộ bởi phân tích sản phẩm. Nhiều sản phẩm phụ có khả năng phân hủy đã được phát hiện trong cả hai dung dịch được đun nóng, cho thấy cả hai sản phẩm đều nhạy cảm với nhiệt độ cao. Tuy nhiên, hàm lượng hợp chất carbonyl cao hơn đã được phát hiện trong bình xịt chứa CBD, cho thấy rằng sản phẩm vaping CBD được sử dụng trong nghiên cứu của chúng tôi có thể dễ bị phân hủy nhiệt hơn so với các sản phẩm nicotine. Điều này có thể là do sự khác biệt về thành phần hóa học của hai dung dịch và/hoặc sự khác biệt về điều kiện hóa hơi bên trong thiết bị vape. Nhiều dấu hiệu về tình trạng viêm và tổn thương phổi đo được trong nghiên cứu của chúng tôi luôn cao hơn sau khi tiếp xúc với các sản phẩm vaping có chứa CBD so với các thiết bị vaping có chứa nicotine. Ví dụ: chúng tôi báo cáo rằng việc hít phải dầu vape CBD dạng khí dung đã gây ra sự tăng cường mạnh mẽ hơn nhiều về số lượng tế bào T CD4+ và CD8+ cũng như số lượng bạch cầu trung tính cao trong phổi. Một cấu hình tương tự về việc tăng bạch cầu trung tính và điều chế tế bào T CD4+ và CD8+ đã được nhìn thấy trong phổi của một bệnh nhân đã hút dầu cần sa gây tổn thương phổi và suy hô hấp.3 Có một mối liên hệ chặt chẽ tồn tại giữa tế bào T gây viêm, các yếu tố huy động bạch cầu trung tính và tuyển dụng bạch cầu trung tính trong các rối loạn viêm phổi.48 Môi trường viêm gia tăng trong phổi sau khi tiếp xúc với khí dung CBD có thể điều phối sự tích tụ và/hoặc kích hoạt bạch cầu trung tính trong không gian phế quản phế nang một cách trực tiếp, thông qua việc giải phóng các chất cụ thể các yếu tố huy động bạch cầu trung tính như IL-6, G-CSF và KC (CXCL1) hoặc gián tiếp thông qua kích hoạt các đại thực bào phổi thường trú và tế bào biểu mô.49 50 Cũng có thể khí dung CBD có thể làm hỏng biểu mô phổi và bắt đầu một quá trình tuyển dụng và kích hoạt bạch cầu trung tính thông qua các cơ chế bao gồm tổn thương mô cục bộ.51 Thật vậy, chúng tôi chứng minh rằng khí dung CBD làm tổn thương tính toàn vẹn biểu mô và gây chết tế bào trong hSAEC, cho thấy rằng khí dung CBD có thể trực tiếp gây tổn thương mô phổi và kích hoạt DAMP để điều hòa viêm phổi . Sự thâm nhiễm bạch cầu trung tính và sự phá hủy mô phổi do NE gây ra được biết là có tác dụng làm trung gian cho tổn thương phổi do khói thuốc lá gây ra và làm tổn hại tính toàn vẹn của hàng rào biểu mô.52–56 Bạch cầu trung tính sau khi di chuyển đến phổi biểu hiện một kiểu hình được kích hoạt và kéo dài quá trình viêm,57 vì vậy chúng tôi lý luận rằng việc tăng số lượng bạch cầu trung tính tích tụ trong phổi của những con chuột tiếp xúc với khí dung CBD (14488 so với 3674 trong không khí) có thể gây ra hậu quả sinh học do trạng thái kích hoạt của chúng. Các tế bào bạch cầu hạt này là nguồn gốc của hai yếu tố quan trọng là myeloperoxidase và NE có liên quan đến hoạt động diệt vi khuẩn và tái cấu trúc phổi. Mức MPO tăng cao, như được quan sát trong nghiên cứu của chúng tôi, được coi là dấu hiệu viêm và căng thẳng oxy hóa đáng kể trong một số bệnh bao gồm cả tổn thương phổi.39 58 Protein MPO được giải phóng từ bạch cầu trung tính đã hoạt hóa hoạt động như một bộ điều biến tự tiết, biểu hiện giống như cytokine tiền viêm các đặc tính để kích hoạt PMN, theo cách độc lập với hoạt động xúc tác MPO.59 Do đó, dựa trên các báo cáo này và những phát hiện hiện tại của chúng tôi, chúng tôi thừa nhận rằng việc hít phải khí dung CBD mãn tính có thể tạo ra một môi trường vi mô tiền viêm mạnh có thể gây bất lợi hơn cho phổi cân bằng nội môi và có thể làm trầm trọng thêm các bệnh phổi hiện có. Sự thâm nhập bạch cầu trung tính vào phổi sau khi hít khí dung CBD có thể được gây ra bởi sự điều hòa tăng của các chemokine hòa tan như KC, và do đó có thể là nguyên nhân làm tăng mức NE được tìm thấy trong BAL và mô phổi. Vì việc tiếp xúc với khí dung CBD gây ra sự giải phóng NE từ bạch cầu trung tính ở người trong ống nghiệm, điều này ủng hộ kết luận rằng khí dung CBD có khả năng kích hoạt trực tiếp bạch cầu trung tính in vivo và làm tăng tình trạng viêm phổi ở người dùng. Khi mức NE và hoạt động liên quan tăng lên trong các phản ứng viêm qua trung gian bạch cầu trung tính, do đó chúng tôi chỉ đo mức NE như một chỉ số hoạt động của nó. Ngoài ra, tác động bất lợi của CBD trong vape có thể trở nên trầm trọng hơn do hệ thống chống oxy hóa bị suy yếu như chúng tôi đã quan sát, trong đó các yếu tố như MPO do CBD-Vape gây ra có thể đóng vai trò quan trọng.39 58 CD4+Tế bào ROR t + T , biểu thị yếu tố phiên mã chính cần thiết cho sự biệt hóa thành các tế bào Th17 tiền viêm, đã được tăng cường và dự đoán một môi trường vi mô tiền viêm do khí dung CBD gây ra. Việc tăng cường tạo ra các tế bào điều hòa CD4+FoxP3+ T (Tregs) có thể là một cơ chế mà vaping CBD có thể gây ra ức chế miễn dịch. Tregs ngăn chặn sự kích hoạt, tăng sinh và sản xuất cytokine của các tế bào T CD4+ và CD8+ và có liên quan đến việc ức chế các tế bào đuôi gai thông qua việc điều hòa các phân tử có giá trị điều hòa.60 Tregs biểu hiện chuỗi thụ thể IL-2 , điều này tạo điều kiện thuận lợi cho việc tiêu thụ IL-2 và do đó có thể làm mất đi khả năng sẵn có của IL{43}} của các tế bào T tác động, góp phần ức chế tế bào tác động T.61 Do đó, mức IL-2 trong BAL giảm do CBD Sự gia tăng Tregs do khí dung gây ra có thể làm trung gian cho rối loạn chức năng tế bào T và ức chế khả năng miễn dịch thích nghi ở phổi, làm tăng tính nhạy cảm với các bệnh nhiễm trùng đường hô hấp và gây ra kết quả kém khi tiêm chủng dự phòng. Chúng tôi quan sát thấy số lượng đại thực bào kẽ phổi giảm đáng kể sau khi tiếp xúc với CBD. Siglec-F+, thường được coi là chất đánh dấu bạch cầu ái toan, được biểu hiện cao trong các đại thực bào phế nang ở chuột và khi được sử dụng kết hợp với CD11c, sẽ cung cấp khả năng nhận dạng chính xác nhất các đại thực bào phế nang trong phổi chuột. Việc giảm đáng kể số lượng CD11b CD11c + Siglec-F + đại thực bào phế nang quan sát thấy ở chuột tiếp xúc với CBD đã được hỗ trợ bởi các nghiên cứu trước đây.62 Một nghiên cứu trước đó đã báo cáo rằng phơi nhiễm EC ở chuột gây ra rối loạn chức năng đại thực bào phế nang liên quan đến sự hấp thu mầm bệnh kém, đồng thời tăng cường gánh nặng mầm bệnh phổi tương quan với thời gian hồi phục chậm và tỷ lệ tử vong tăng sau khi nhiễm trùng.16 Sự giảm rõ rệt về số lượng arginase phổi chống viêm-1+ đại thực bào M2 sau khi hít phải khí dung CBD có thể góp phần gây ra tổn thương và cân bằng nội môi miễn dịch phổi bị rối loạn điều hòa .63 Môi trường vi mô tiền viêm tăng cao được phát hiện trong phổi sau khi hít phải CBD có thể một phần là do số lượng đại thực bào phổi M2 chống viêm giảm. Số lượng đại thực bào giảm đi có thể tác động đáng kể đến phản ứng của phổi đối với nhiễm trùng đường hô hấp, có thể trở nên phức tạp hơn do quá trình thực bào đại thực bào bị rối loạn chức năng. Do đó, việc tiếp xúc với khí dung từ thuốc lá điện tử có chứa nicotin đã gây ra sự giảm khả năng thực bào của Haemophilus cúm (NTHI) không xác định được bởi đại thực bào, phần lớn là do sự hiện diện của hương liệu thuốc lá điện tử.64 Vì các hương liệu phổ biến cũng được sử dụng cho các công thức CBD, nên nó làm tăng khả năng rối loạn chức năng đại thực bào do khí dung CBD có thể được tăng cường khi bổ sung các loại hóa chất tạo hương vị khác nhau.
Hình 6 Sự gia tăng hoạt động của myeloperoxidase (MPO) trong phổi sau khi tiếp xúc với khí dung CBD và nicotine. (A, B) Chúng tôi đã đo hoạt động MPO trong mô phổi của động vật tiếp xúc với khí dung nicotin hoặc CBD bằng cách sử dụng bộ xét nghiệm MPO của Abcam như được mô tả chi tiết trong phần tài liệu bổ sung. Bảng bên trái mô tả dữ liệu là nam, trong khi bảng bên phải biểu thị dữ liệu là nam so với nữ. Dữ liệu được hiển thị dưới dạng ô hộp có râu ở mức tối thiểu và tối đa. Thử nghiệm Kruskal-Wallis không tham số với hiệu chỉnh FDR cho nhiều so sánh đã được thực hiện để xem liệu có tồn tại sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa hai nhóm bằng phần mềm GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, USA). Sự khác biệt giữa hai nhóm được coi là có ý nghĩa ở mức p<0.05 and is indicated with the symbols *p<0.05, ****p<0.0001. In each experiment n=10 mice for air and CBD-vape exposures each (5 males+5 females) and n=9 for Nic-Vape group (5 males+4 females). CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate
Hình 7 Những thay đổi về khả năng chống oxy hóa trong phổi sau khi tiếp xúc với khí dung CBD và nicotine. Khi kết thúc quá trình tiếp xúc với khí dung nicotin hoặc CBD, chuột đã được tiêu hủy và dung dịch ly giải mô phổi đã được chuẩn bị. (A, B) Tổng mức chất chống oxy hóa trong dung dịch ly giải mô phổi được định lượng bằng cách sử dụng bộ xét nghiệm chất chống oxy hóa của Cayman (Cat# 709001) như được mô tả chi tiết trong phần tài liệu bổ sung trực tuyến. Bảng bên trái mô tả dữ liệu dưới dạng kết hợp giữa nam và nữ, trong khi bảng bên phải biểu thị dữ liệu dưới dạng nam so với nữ. Dữ liệu được hiển thị dưới dạng ô hộp có râu ở mức tối thiểu và tối đa. Thử nghiệm Kruskal-Wallis không tham số với hiệu chỉnh FDR cho nhiều so sánh đã được sử dụng để xem liệu có tồn tại sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa hai nhóm bằng phần mềm GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, Hoa Kỳ) hay không. Sự khác biệt giữa hai nhóm được coi là có ý nghĩa ở mức p<0.05 and is indicated by the symbol **p<0.01. In each experiment, n=10 mice for air and CBD-vape exposures each (5 males+5 females) and n=9 for the Nic-Vape group (5 males+4 females). CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate.
Hình 8 Hình thái tế bào biểu mô, độc tính tế bào và tính toàn vẹn của hàng rào biểu mô của tế bào biểu mô đường dẫn khí nhỏ ở người (SAEC) sau khi tiếp xúc với CBD và khí dung nicotin. SAEC của con người (0,5 triệu tế bào/bộ cấy cấy ở 6-định dạng đĩa giếng) được nuôi cấy trong môi trường phát triển hoàn chỉnh qua đêm và ngày hôm sau được tiếp xúc trực tiếp tại bề mặt tiếp xúc không khí-lỏng (ALI) với 110 hơi không khí, khí dung chứa nicotin (50mg/mL nicotin) hoặc CBD (50mg/mL) như được mô tả trong các phương pháp. Tất cả các khí dung được tạo ra ở thể tích hơi 55mL như được mô tả trong phần Phương pháp. Khi kết thúc quá trình phơi nhiễm, các tế bào được lấy ra khỏi buồng ALI và được ủ trong môi trường phát triển hoàn chỉnh trong 24 giờ ở nhiệt độ 37 độ. Sau khi giai đoạn phục hồi kết thúc, các tế bào được chụp ảnh lần đầu tiên (A–C) ở độ phân giải ×200 trong kính hiển vi tương phản pha (Olympus IX73) và sau đó xét nghiệm độc tính tế bào bằng phương pháp (D) trypan blue (được đo bằng phần trăm tế bào chết) hoặc (E ) phương pháp hấp thụ màu đỏ trung tính (được biểu thị bằng phần trăm kiểm soát không khí) đã được thực hiện. Đối với (F) xét nghiệm tính thấm FITC-dextran, 1 triệu SAEC/mẫu cấy cấy của con người được nuôi cấy qua đêm và ngày hôm sau tiếp xúc trực tiếp tại ALI với 110 hơi khí, chứa nicotin (50mg/mL nicotin) hoặc CBD (50mg/mL) bình xịt. Sau khi hoàn thành quá trình phơi nhiễm, FITC-dextran ở nồng độ 10mg/mL được thêm vào buồng đỉnh và ủ trong 2,5 giờ. các mẫu được lấy từ buồng đáy bên và đo huỳnh quang bằng bước sóng Exci485/Emi528 trong đầu đọc tấm lai H1 tổng hợp (BioTek). Nồng độ FITC-dextran trong khoang cơ bản được tính toán bằng đường cong chuẩn. Sự khác biệt giữa hai nhóm được coi là có ý nghĩa ở mức p<0.05 and is indicated with the symbol *p<0.05, calculated using non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by GraphPad prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). Results are depicted as box plots with whiskers at min and max from three independent experiments each performed in triplicate as described in online supplemental methods. CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate; SAECs, small airway epithelial cells.
Hình 9 Sự chết tế bào theo chương trình trong bạch cầu trung tính đã được tinh chế ở người và mức độ elastase bạch cầu trung tính (NE) được giải phóng sau khi tiếp xúc với CBD và khí dung nicotin. Bạch cầu trung tính ở người được tinh chế từ máu toàn phần được gieo vào 0,8 triệu tế bào/cấy cấy ở 6-định dạng đĩa giếng và ngay lập tức tiếp xúc với 110 hơi khí, nicotin (50mg/mL nicotin) hoặc CBD ( 50mg/mL) khí dung chứa ở bề mặt không khí-lỏng với thể tích phun 55mL như được mô tả trong phần Phương pháp. Khi kết thúc quá trình phơi nhiễm, các tế bào được lấy ra khỏi buồng ALI và được phục hồi trong môi trường phát triển hoàn chỉnh trong 24 giờ. Tiếp theo, mức độ chết của tế bào được đo bằng cách sử dụng (A) xét nghiệm loại trừ thuốc nhuộm xanh trypan và (B) phụ lục V-FITC apoptosis như đã đề cập chi tiết trong phần Phương pháp. Ngay sau khi phân lập, một phần bạch cầu trung tính đã tinh chế được giữ trong môi trường hoàn chỉnh trong tủ ấm CO2 dưới dạng 'đối chứng không tiếp xúc' âm tính trong toàn bộ thời gian xét nghiệm, để ước tính mức độ chết tế bào, gây ra apoptosis hoặc mức NE trong sự vắng mặt của bất kỳ tiếp xúc. (C) Mức NE được định lượng trong môi trường điều hòa được thu hoạch sau khi giai đoạn phục hồi kết thúc bằng cách thực hiện NE ELISA như đã thảo luận trong phần Phương pháp. Dữ liệu được mô tả dưới dạng ô hình hộp có râu ở mức tối thiểu và tối đa từ các thử nghiệm độc lập, mỗi thử nghiệm được thực hiện ba lần. Đối với xét nghiệm apoptosis: dữ liệu trung bình từ n{13}} người hiến tặng mỗi nhóm. Đối với phương pháp trypan blue: dữ liệu trung bình từ các nhà tài trợ n{14}} kiểm soát không tiếp xúc, các nhà tài trợ kiểm soát không khí và Nic-Vape n=7 cũng như các nhà tài trợ CBD-Vape n{18}}. Đối với dữ liệu trung bình xét nghiệm NE từ n=6 nhà tài trợ cho mỗi nhóm). Sự khác biệt giữa hai nhóm được coi là có ý nghĩa ở mức p<0.05 which is indicated by the symbols *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001 calculated using non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). ALI, air–liquid interface; CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate.
Bảng 2 So sánh các dấu hiệu khác nhau của kết quả nghiên cứu sau khi tiếp xúc với sản phẩm vaping có chứa CBD (CBD-vape) và sản phẩm vaping có chứa nicotine (Nic-vape)
Sự hiện diện của các đại thực bào trong phế nang chứa đầy lipid được quan sát thấy trong các tế bào được phục hồi từ BAL của chuột sau khi hít phải khí dung CBD trong nghiên cứu của chúng tôi chứng thực với một báo cáo trước đó cho thấy sự khởi phát của bệnh viêm phổi do lipid ngoại sinh ở một bệnh nhân hút dầu cần sa và bị nhiễm lipid. -laden đại thực bào phổi.65 Vì viêm phổi do lipid ngoại sinh với đại thực bào phổi chứa đầy lipid là một dấu hiệu đặc trưng của EVALI, do đó, điều đó cho thấy rằng việc hít phải dầu vape CBD có thể không có rủi ro và có thể dẫn đến tổn thương phổi ở những người sử dụng cần sa. Các trường hợp được trình bày trong các báo cáo lâm sàng của EVALI cho thấy mối liên hệ căn nguyên mạnh mẽ hơn giữa vaping cần sa và suy hô hấp so với vaping nicotine.65–68 Ngược lại với các nghiên cứu trước đây của chúng tôi trên những con chuột hít VEA (nguyên nhân có thể gây ra EVALI), trong nghiên cứu này, chúng tôi không quan sát thấy sự hiện diện của đại thực bào bọt.14 Mặc dù nguy cơ chung về biến chứng phổi liên quan đến vaping có thể thấp hơn so với hút thuốc lá, nhưng vaping dường như gây ra nguy cơ sức khỏe hô hấp, đặc biệt là ở những người sử dụng cần sa trong thời gian dài. Tóm lại, nghiên cứu của chúng tôi chứng minh rõ ràng rằng môi trường tiền viêm trong phổi do hít phải khí dung CBD lớn hơn môi trường do khí dung nicotin gây ra và điều này được phản ánh qua sự phá vỡ tính toàn vẹn của hàng rào phổi và tổn thương phổi (được tóm tắt trong Bảng 2). Điều này cho thấy rằng vaping cần sa có khả năng dẫn đến những kết quả nghiêm trọng hơn, bao gồm tăng khả năng bị nhiễm trùng đường hô hấp, phản ứng kém với tiêm chủng dự phòng và các triệu chứng trầm trọng hơn ở những bệnh nhân mắc các bệnh viêm phổi tiềm ẩn.16–19 35 36 69 70 Chúng tôi không quan sát thấy bất kỳ triệu chứng nào những thay đổi có thể nhìn thấy trong hành vi của động vật trong hoặc sau khi phơi nhiễm, cũng như những thay đổi về trọng lượng so với kiểm soát không khí (hình bổ sung trực tuyến E11). Trong nghiên cứu này, việc tiếp xúc với khí dung nicotine không tạo ra mức độ của các cytokine/chemokine khác nhau trong BAL ở cùng mức độ khi so sánh với nghiên cứu trước đó.71 Lý do cho sự khác biệt này có thể là do các tác giả này đã đo mức độ phiên mã của các cytokine khác nhau trong phổi chất đồng nhất sau khi tiếp xúc với nicotin-khí dung và mức độ phiên mã đôi khi không chuyển thành những thay đổi khi được đo ở mức protein như chúng tôi đã thực hiện. Hơn nữa, cấu hình cytokine và sự điều chế hệ thống miễn dịch phụ thuộc vào chất lỏng điện tử cụ thể, phương pháp tạo ra/thời gian tiếp xúc với khí dung và hóa chất tạo hương vị được thêm vào. Mặc dù cần sa đã chứng minh những lợi ích sức khỏe trong việc kiểm soát cơn đau, giấc ngủ và làm giảm các triệu chứng buồn nôn/nôn do hóa trị liệu ở bệnh nhân ung thư và ở những bệnh nhân bị co giật,72–76 đơn giản là thiếu bằng chứng chắc chắn về sự an toàn của cần sa khi sử dụng vape. các sản phẩm. Về vấn đề này, nghiên cứu của chúng tôi rất mới và xác định vai trò của việc hít khí dung CBD trong việc gây viêm phổi và tổn thương phổi.
cistanche tubulosa-cải thiện hệ thống miễn dịch
Vì nghiên cứu của chúng tôi sử dụng mô hình phơi nhiễm trên động vật và trong ống nghiệm, nên cần xem xét một số hạn chế khi ngoại suy các kết quả được trình bày về phơi nhiễm ngoài đời thực ở người. Một hạn chế của nghiên cứu này là nó chỉ tập trung vào việc tiếp xúc ngắn hạn. Kết quả của việc tiếp xúc lâu dài với khí dung CBD và tác động của chúng đối với phản ứng với nhiễm trùng đường hô hấp và/hoặc tiêm chủng phòng ngừa là rất quan trọng. Phương pháp tiếp xúc với động vật của chúng tôi dựa trên hệ thống tiếp xúc toàn cơ thể và việc tiếp xúc chỉ bằng mũi có lẽ phù hợp hơn để mô phỏng sự tiếp xúc của những vaper có kinh nghiệm. Mặc dù sử dụng hệ thống phơi nhiễm toàn cơ thể, chúng tôi đã xác minh rằng sự lắng đọng trên lông động vật (và thành lồng) không góp phần vào việc nuốt phải các hạt khi chải lông động vật và do đó ảnh hưởng đến độc tính quan sát được. Chúng tôi sử dụng một số lượng chuột hạn chế cho mỗi nhóm tiếp xúc; có khả năng số lượng chuột lớn hơn có thể củng cố hơn nữa kết luận nghiên cứu của chúng tôi. Mặc dù mô hình ALI trong ống nghiệm cung cấp cách tiếp cận cụ thể đối với phơi nhiễm qua đường hô hấp để thực hiện nghiên cứu sinh học về ảnh hưởng sức khỏe liên quan đến việc sử dụng các sản phẩm thuốc lá điện tử, việc ngoại suy dữ liệu từ các nghiên cứu trong ống nghiệm đến rủi ro ở con người vẫn chỉ là giả thuyết. Cần có các nghiên cứu quan sát và thử nghiệm trong tương lai với những người sử dụng thường xuyên các sản phẩm vaping có chứa CBD và nicotine để xác nhận những phát hiện của chúng tôi. Cuối cùng, trong các thí nghiệm của chúng tôi, động vật và tế bào được tiếp xúc với khí dung từ cả hai sản phẩm được tạo ra theo cách giống hệt nhau. Tuy nhiên, người dùng các sản phẩm vape làm từ cần sa có thể sử dụng những sản phẩm này theo cách rất khác so với vaper nicotine (ví dụ: ít thường xuyên hơn). Khi dữ liệu từ các nghiên cứu quan sát giữa những người sử dụng cần sa xuất hiện, những khác biệt tiềm ẩn trong mô hình sử dụng sản phẩm được quan sát trong điều kiện thực tế cần được xem xét khi mô phỏng phơi nhiễm trên động vật và trong ống nghiệm trong môi trường phòng thí nghiệm. Các nghiên cứu trong tương lai nên điều tra tác động lên hệ hô hấp của các sản phẩm thuốc lá điện tử có chứa nhiều loại cannabinoid, bao gồm cả THC.
NGƯỜI GIỚI THIỆU
1 Bộ Y tế Hoa Kỳ và. Việc sử dụng thuốc lá điện tử trong thanh niên và thanh niên: báo cáo của bác sĩ phẫu thuật tổng quát [PDF–8,47 MB]PDF icon. Atlanta, GA: Bộ Y tế và Dịch vụ Nhân sinh Hoa Kỳ, CDC, 2016.
2 Borodovsky JT, Crosier BS, Lee DC, và cộng sự. Hút thuốc, vaping, ăn uống: việc hợp pháp hóa có ảnh hưởng đến cách mọi người sử dụng cần sa không? Chính sách thuốc của Int J 2016;36:141–7.
3 He T, Oks M, Esposito M, et al. "Cây nở hoa": tổn thương phổi cấp tính nghiêm trọng do vaping dầu cần sa. Ann Am Thorac Sóc 2017;14:468–70.
4 Knapp AA, Lee DC, Borodovsky JT, và cộng sự. Xu hướng mới nổi trong việc quản lý cần sa ở những người sử dụng cần sa ở tuổi vị thành niên. J Sức khỏe vị thành niên 2019;64:487–93.
5 Kriegel D. Vaping cần sa so với hút thuốc: có người chiến thắng? 2021. Có sẵn: https:// vaping360.com/learn/vaping-vs- smoking-weed/ [Truy cập ngày 15 tháng 9 năm 2021].
6 ROLow ND, Baler RD, Compton WM, và những người khác. Ảnh hưởng xấu đến sức khoẻ của việc sử dụng cần sa. N Engl J Med 2014;370:2219–27.
7 Pahr K, Carter A. Hướng dẫn về CBD cho người mới bắt đầu. đường dây sức khỏe. 2019. Có sẵn: https://www. healthline.com/health/your-cbd-guide [Truy cập ngày 19 tháng 8 năm 2021].
8 Suleiman SA. Độc tính hydrocarbon dầu mỏ trong ống nghiệm: tác dụng của n-alkan, benzen và toluene đối với đại thực bào phế nang phổi và enzyme lysosomal của phổi. Arch Toxicol 1987;59:402–7.
9 Lachenmeier DW, Kuballa T, Reusch H, và cộng sự. Benzen trong nước ép cà rốt dành cho trẻ sơ sinh: hiểu biết sâu hơn về cơ chế hình thành và đánh giá rủi ro bao gồm dữ liệu tiêu thụ từ nghiên cứu Donald. Hóa chất thực phẩm Toxicol 2010;48:291–7.
10 Li YS, Li YF, Li QN, et al. Độc tính cấp tính ở phổi ở chuột gây ra bởi ống nano cacbon đa vách, benzen và sự kết hợp của chúng. Chất độc môi trường 2010;25:409–17.
11 Anderson RP, Zechar K. Chấn thương phổi do hít phải dầu băm butan giống như bệnh viêm phổi. Đại diện trường hợp Respir Med 2019;26:171–3.
12 Holt AK, Poklis JL, MR Hòa bình. Một phân tích hồi cứu về các thành phần hóa học trong chất lỏng thuốc lá điện tử được quản lý và không được kiểm soát. Mặt trận hóa học 2021;9:752342.
13 Blount BC, Karwowski MP, Shields PG, và cộng sự. Vitamin E axetat trong dịch rửa phế quản phế nang liên quan đến EVALI. N Engl J Med 2020;382:697–705.
14 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN và cộng sự. Một mô hình động vật hít vitamin E axetat và tổn thương phổi giống EVALI. N Engl J Med 2020;382:1175–7.
15 Merecz-Sadowska A, Sitarek P, Zielinska-Blizniewska H, et al. Bản tóm tắt các nghiên cứu in vitro và in vivo đánh giá tác động của việc tiếp xúc với thuốc lá điện tử đối với các sinh vật sống và môi trường. Int J Mol Sci 2020;21:652.
16 Sussan TE, Gajghate S, Thimmulappa RK, và cộng sự. Tiếp xúc với thuốc lá điện tử làm suy yếu khả năng phòng vệ chống vi khuẩn và chống vi-rút của phổi trên mô hình chuột. PLoS One 2015;10:e0116861.
17 Hwang JH, Lyes M, Sladewski K, và cộng sự. Hít phải thuốc lá điện tử làm thay đổi khả năng miễn dịch bẩm sinh và các cytokine đường thở đồng thời làm tăng độc lực của vi khuẩn xâm chiếm. J Mol Med (Berl) 2016;94:667–79.
18 Martin EM, Clapp PW, Rebuli ME, và cộng sự. Việc sử dụng thuốc lá điện tử dẫn đến ức chế các gen miễn dịch và phản ứng viêm trong tế bào biểu mô mũi tương tự như khói thuốc lá. Am J Physiol Tế bào phổi Mol Physiol 2016;311:L135–44.
19 Rebuli ME, Glista-Baker E, Hoffman JR, và cộng sự. Sử dụng thuốc lá điện tử làm thay đổi phản ứng miễn dịch niêm mạc mũi đối với virus cúm sống giảm độc lực. Một thử nghiệm lâm sàng. Tế bào hô hấp Am J Mol Biol 2021;64:126–37.
20 Bloom JW, Kaltenborn WT, Paoletti P, và cộng sự. Tác dụng hô hấp của thuốc lá không thuốc lá. Br Med J (Clin Res Ed) 1987;295:1516–8.
21 Wills TA, Pagano I, Williams RJ, và những người khác. Sử dụng thuốc lá điện tử và rối loạn hô hấp ở mẫu người lớn. Tỷ lệ nghiện rượu ma túy 2019;194:363–70.
22 Xie W, Kathuria H, Galiatsatos P, và cộng sự. Mối liên quan giữa việc sử dụng thuốc lá điện tử với các tình trạng hô hấp xảy ra ở người trưởng thành ở Hoa Kỳ từ năm 2013 đến năm 2018. JAMA Netw Open 2020;3:e2020816.
23 Bhatta DN, Glantz SA. Mối liên quan giữa việc sử dụng thuốc lá điện tử với bệnh hô hấp ở người lớn: phân tích theo chiều dọc. Am J Trước Med 2020;58:182–90.
24 Li D, Sundar IK, McIntosh S, và cộng sự. Mối liên quan giữa việc hút thuốc và sử dụng thuốc lá điện tử với chứng thở khò khè và các triệu chứng hô hấp liên quan ở người lớn: kết quả cắt ngang từ nghiên cứu đánh giá dân số về thuốc lá và sức khỏe (đường dẫn), đợt 2. Kiểm soát Tob 2020;29:140–7.
25 Tashkin DP, Coulson AH, Clark VA, và cộng sự. Các triệu chứng hô hấp và chức năng phổi ở những người thường xuyên hút cần sa, hút cần sa và thuốc lá, chỉ hút thuốc lá và những người không hút thuốc. Am Rev Respir Dis 1987;135:209–16.
26 Tashkin DP. Hút cần sa là nguyên nhân gây tổn thương phổi. Monaldi Arch Chest Dis 2005;63:93–100.
27 Tashkin DP. Tác dụng của việc hút cần sa đối với phổi. Ann Am Thorac Sóc 2013;10:239–47.
28 Baldwin GC, Tashkin DP, Buckley DM, và cộng sự. Cần sa và cocaine làm suy yếu chức năng đại thực bào phế nang và sản xuất cytokine. Am J Respir Crit Care Med 1997;156:1606–13.
29 Taylor DR, Poulton R, Moffitt TE, và những người khác. Ảnh hưởng hô hấp của sự phụ thuộc cần sa ở thanh niên. Nghiện 2000;95:1669–77.
30 Aldington S, Williams M, Nowitz M, và cộng sự. Tác dụng của cần sa đối với cấu trúc, chức năng và triệu chứng của phổi. Thorax 2007;62:1058–63.
31 Moore BA, Augustson EM, Moser RP, và cộng sự. Tác dụng hô hấp của việc sử dụng cần sa và thuốc lá trong một mẫu ở Hoa Kỳ. J Gen Intern Med 2005;20:33–7.
32 Goniewicz ML, Knysak J, Gawron M, và cộng sự. Mức độ các chất gây ung thư và chất độc được lựa chọn trong hơi từ thuốc lá điện tử. Kiểm soát Tob 2014;23:133–9.
33 Bhat TA, Kalathil SG, Leigh N, và cộng sự. Tác động cấp tính của việc hít phải khí dung của sản phẩm thuốc lá đun nóng (IQOS) đối với tổn thương mô phổi và những thay đổi về tình trạng viêm trong phổi. Nicotine Tob Res 2021;23:1160–7.
34 Kosmider L, Jackson A, Leigh N, và cộng sự. Hành vi phun thuốc sinh học và địa hình của những người sử dụng thuốc lá điện tử. Tob Regul Sci 2018;4:41–9.
35 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN và cộng sự. Khói thuốc thụ động gây viêm và làm suy giảm khả năng miễn dịch đối với các bệnh nhiễm trùng đường hô hấp. J Immunol 2018;200:2927–40.
36 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN, và cộng sự. AT-rvd1 làm giảm tình trạng viêm phổi do khói thuốc thụ động làm trầm trọng thêm và phục hồi khả năng miễn dịch kháng khuẩn bị ức chế bởi khói thuốc thụ động. J Immunol 2021;206:1348–60.
37 Carden D, Xiao F, Moak C, và cộng sự. Neutrophil elastase thúc đẩy tổn thương vi mạch phổi và phân giải protein của cadherin nội mô. Tạp chí Sinh lý học-Tim và Tuần hoàn Sinh lý học Hoa Kỳ 1998;275:H385–92.
38 Kawabata K, Hagio T, Matsuoka S. Vai trò của bạch cầu trung tính elastase trong tổn thương phổi cấp tính. Eur J Pharmacol 2002;451:1–10.
39 Khan AA, Alsahli MA, Rahmani AH. Myeloperoxidase như một dấu ấn sinh học của bệnh đang hoạt động: các quan điểm sinh hóa và bệnh lý gần đây. Khoa học y tế (Basel) 2018;6:33.
40 Dietert K, Gutbier B, Wienhold SM, và cộng sự. Phổ các mô bệnh học đặc hiệu của mầm bệnh và mô hình trong mô hình chuột bị viêm phổi cấp tính. PLoS One 2017;12:e0188251.
41 Mông YM, Smith ML, Tazelaar HD, và cộng sự. Bệnh lý tổn thương phổi liên quan đến vaping. N Engl J Med 2019;381:1780–1.
42 Lee WL, Downey GP. Kích hoạt bạch cầu trung tính và tổn thương phổi cấp tính. Curr Opin Crit Care 2001;7:1–7.
43 nghị sĩ Fink. Vai trò của các loại oxy và nitơ phản ứng trong hội chứng suy hô hấp cấp tính. Curr Opin Crit Care 2002;8:6–11.
44 Abraham E. Bạch cầu trung tính và tổn thương phổi cấp tính. Crit Care Med 2003;31:S195–9.
45 Phạm CTN. Protease serine bạch cầu trung tính điều chỉnh phản ứng viêm. Int J Biochem Cell Biol 2008;40:1317–33.
46 Arecco N, Clarke CJ, Jones FK, và cộng sự. Mức độ và hoạt động của Elastase tăng lên ở cơ loạn dưỡng và làm suy giảm khả năng sống sót, tăng sinh và biệt hóa của tế bào nguyên bào cơ. Đại diện khoa học 2016;6:24708.
47 Czégény Z, Nagy G, Babinszki B, et al. CBD, là tiền thân của THC trong thuốc lá điện tử. Đại diện khoa học 2021;11:8951.
48 Lindén A, Laan M, Anderson GP. Bạch cầu trung tính, interleukin-17A và bệnh phổi. Eur Respir J 2005;25:159–72.
49 Ma K, Yang L, Shen R, và cộng sự. Tế bào Th17 điều chỉnh việc sản xuất CXCL1 trong ung thư vú. Int Immunopharmacol 2018;56:320–9.
50 Becker S, Quay J, Koren HS và cộng sự. Biểu hiện MCP-1, GRO alpha, beta và gamma cấu thành và được kích thích trong biểu mô đường thở và đại thực bào phế quản phế nang của con người. Am J Physiol 1994;266:L278–86.
51 Potey PM, Rossi AG, Lucas CD, và cộng sự. Bạch cầu trung tính trong việc bắt đầu và giải quyết tình trạng viêm phổi cấp tính: hiểu biết về chức năng sinh học và tiềm năng điều trị. J Pathol 2019;247:672–85.
52 Heijink IH, Brandenburg SM, Postma DS, và cộng sự. Khói thuốc lá làm suy yếu chức năng hàng rào biểu mô đường thở và phục hồi tiếp xúc tế bào-tế bào. Eur Respir J 2012;39:419–28.
53 Aghapour M, Raee P, Moghaddam SJ, và cộng sự. Rối loạn chức năng hàng rào biểu mô đường thở trong bệnh phổi tắc nghẽn mãn tính: vai trò của việc tiếp xúc với khói thuốc lá. Tế bào hô hấp Am J Mol Biol 2018;58:157–69.
54 Shapiro SD, Goldstein NM, Houghton AM, và cộng sự. Neutrophil elastase góp phần gây ra bệnh khí thũng do khói thuốc lá ở chuột. Am J Pathol 2003;163:2329–35.
55 Antunes MA, Rocco PRM. Tràn khí phổi do Elastase gây ra: hiểu biết sâu sắc từ các mô hình thí nghiệm. An Acad Bras Cienc 2011;83:1385–96.
56 Ghosh A, Coakley RD, Ghio AJ, và cộng sự. Sử dụng thuốc lá điện tử mãn tính làm tăng mức độ elastase bạch cầu trung tính và ma trận metallicoprotease trong phổi. Am J Respir Crit Care Med 2019;200:1392–401.
57 Fortunati E, Kazemier KM, Grutters JC, và cộng sự. Bạch cầu trung tính ở người chuyển sang kiểu hình được kích hoạt sau khi di chuyển đến phổi bất kể bệnh viêm nhiễm. Clin Exp Immunol 2009;155:559–66.
58 Faith M, Sukumaran A, Pulimod AB, và cộng sự. Hoạt động của myeloperoxidase là dấu hiệu đáng tin cậy của tình trạng viêm như thế nào? Lâm sàng Chim Acta 2008;396:23–5.
59 Lau D, Mollnau H, Eiserich JP, và cộng sự. Myeloperoxidase làm trung gian kích hoạt bạch cầu trung tính bằng cách liên kết với các integrin CD11b/CD18. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:431–6.
60 Schmidt A, Oberle N, Krammer PH. Cơ chế phân tử ức chế tế bào T qua trung gian treg. Mặt Trận Miễn Dịch 2012;3:51.
61 Thornton AM, Shevach EM. Tế bào T điều hòa miễn dịch CD4+CD{2}} ngăn chặn sự kích hoạt tế bào T đa dòng trong ống nghiệm bằng cách ức chế sản xuất interleukin 2. J Exp Med 1998;188:287–96.
62 Kalininskiy A, Kittel J, Nacca NE, và cộng sự. Phơi nhiễm thuốc lá điện tử, nhiễm trùng đường hô hấp và suy giảm khả năng miễn dịch bẩm sinh: đánh giá tường thuật. Pediatr Med 2021;4:5.
63 Lucas R, Czikora I, Sridhar S, và cộng sự. Arginase 1: một chất trung gian bất ngờ của rối loạn chức năng hàng rào mao mạch phổi trong các mô hình tổn thương phổi cấp tính. Mặt trận miễn dịch 2013;4:228.
64 Ween MP, Whittall JJ, Hamon R, và cộng sự. Thực bào và viêm: khám phá tác động của các thành phần của hơi thuốc lá điện tử lên đại thực bào. Đại diện Physiol 2017;5:e13370.
65 Gay B, Field Z, Patel S, và cộng sự. Chấn thương phổi do vaping: một trường hợp viêm phổi do lipid liên quan đến thuốc lá điện tử có chứa cần sa. Đại diện trường hợp Pulmonol 2020;2020:7151834.
66 Abeles M, Popofsky S, Wen A, và cộng sự. Chấn thương phổi liên quan đến vaping do hít phải dầu cần sa. Pediatr Pulmonol 2020;55:226–8.
67 Adapa S, Gayam V, Konala VM, và cộng sự. Độc tính phổi cấp tính do hút thuốc lá điện tử gây ra: loạt trường hợp và tổng quan tài liệu. Đại diện trường hợp tác động cao của J Investig Med 2020;8:2324709620947267.
68 Conuel EJ, Chieng HC, Fantauzzi J, và cộng sự. Chấn thương phổi liên quan đến vaping dầu cannabinoid và hình ảnh X quang của nó. Am J Med 2020;133:865–7.
69 Lugade AA, Bogner PN, Thatcher TH, và cộng sự. Tiếp xúc với khói thuốc lá làm trầm trọng thêm tình trạng viêm phổi và làm suy giảm khả năng miễn dịch đối với nhiễm trùng do vi khuẩn. J Immunol 2014;192:5226–35.
70 Bhat TA, Kalathil SG, Miller A, và cộng sự. Các chất trung gian chuyên biệt giúp giải quyết vấn đề khắc phục tình trạng ức chế miễn dịch do tiếp xúc với khói thuốc lá thụ động. J Immunol 2020;205:3205–17.
71 Garcia-Arcos I, Geraghty P, Baumlin N, và cộng sự. Phơi nhiễm thuốc lá điện tử mãn tính ở chuột gây ra các đặc điểm của COPD theo cách phụ thuộc vào nicotin. Thorax 2016;71:1119–29.
72 Booz GW. Cannabidiol là một chiến lược trị liệu mới nổi nhằm giảm bớt tác động của tình trạng viêm đối với stress oxy hóa. Radic Biol Med miễn phí 2011;51:1054–61.
73 Rosenberg EC, Tsien RW, Whalley BJ, và cộng sự. Cannabinoids và bệnh động kinh. Trị liệu thần kinh 2015;12:747–68.
74 Viện Hàn lâm Khoa học, Kỹ thuật, Y học Quốc gia; Phòng Y tế và Y tế. Tác dụng điều trị của cần sa và cannabinoids. Trong: Tác dụng sức khỏe của cần sa và cannabinoids: Hiện trạng bằng chứng và khuyến nghị cho nghiên cứu. Nhà xuất bản Học viện Quốc gia, 2017.
75 Thiele EA, Marsh ED, JA Pháp, và cộng sự. Cannabidiol ở những bệnh nhân bị co giật liên quan đến hội chứng Lennox-gestalt (GWPCARE4): thử nghiệm giai đoạn 3 ngẫu nhiên, mù đôi, kiểm soát giả dược. Lancet 2018;391:1085–96.
76 Cục Quản lý Thực phẩm và Dược phẩm Hoa Kỳ. FDA chấp thuận loại thuốc đầu tiên chứa hoạt chất có nguồn gốc từ cần sa để điều trị các dạng động kinh nghiêm trọng, hiếm gặp. 2018. Có sẵn: https://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ucm611046.htm [Truy cập ngày 15 tháng 9 năm 2021].
