Các Thành Phần Phenolic Với Các Hoạt Động Chống Oxy Hóa, Ức Chế Tyrosinase Và Chống Lão Hóa Từ Dendrobium Loddigesii Rolfe

trừu tượng

Dịch chiết ethanol trong nước của thân cây Dendrobium loddigesii dạng bột thu được ba hợp chất phenolic mới bao gồm ba-7-O-etyl-9-O-(4-hydroxyphenyl)propionyl -diacylglycerol (1), (R){{ 7}},5,4ʹ-trihydroxy-3,3ʹ, -trimethoxybibenzyl (2) và (S)-5,5′,7-trihydroxy-3′,4′ -dimethoxyfavanone (3), cùng với 11 chất tương tự đã biết. Cấu trúc của chúng được xác định bằng phân tích quang phổ mở rộng. Để xác định các chất chống oxy hóa, làm trắng và chống lão hóa tự nhiên, khả năng của các phenolic này được đánh giá để loại bỏ gốc 1,2-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), khả năng ức chế sản xuất tyrosinase của chúng và khả năng của chúng để kích thích sản xuất collagen bằng xét nghiệm nguyên bào sợi ở người trưởng thành (HDFa) ở người. Người ta phát hiện ra rằng các hợp chất 1, 4–8, 13 và 14 thể hiện các hoạt động nhặt gốc DPPH đáng kể, hợp chất 10 thể hiện hoạt tính ức chế tyrosinase (IC50 37.904 ug/mL) và hợp chất 9 thể hiện khả năng sản xuất collagen đáng kể với giá trị EC50 là 3,182 ug/mL. Những kết quả này cho thấy rằng các thành phần phenolic từ D. loddigesii có thể là chất chống oxy hóa, làm trắng da và/hoặc chất chống lão hóa.

Theo các nghiên cứu liên quan,hột cálà phổ biếnthảo mộcđược mệnh danh là “thần dược kéo dài tuổi thọ”. Thành phần chính của nó làCistanoside, có tác dụng khác nhau nhưchống oxy hóa, chống viêm, Vàxúc tiến chức năng miễn dịch. Cơ chế giữa cistanche vàLàm trắng danằm trong tác dụng chống oxy hóa củaglycoside cistanche. Melanin trong da người được tạo ra bởi quá trình oxy hóa củatyrosinđược xúc tác bởi tyrosinase và phản ứng oxy hóa cần có sự tham gia của oxy, vì vậy các gốc oxy tự do trong cơ thể trở thành yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến quá trình sản xuất melanin. Cistanche chứa cistanoside, một chất chống oxy hóa và có thể làm giảm sự hình thành các gốc tự do trong cơ thể, do đóức chế sản sinh hắc tố.

cistanche supplement review

Nhấp vào Bổ sung Cistanche Tubulosa

Để biết thêm thông tin:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

đồ họa trừu tượng

cistanche nedir

từ khóaDendrobium loddigesii · Thành phần phenolic · Chống oxy hóa · Ức chế tyrosinase · Chống lão hóa

1. Giới thiệu

Chi Dendrobium (Orchidaceae) chứa khoảng 1500 loài trên toàn cầu, trong đó có khoảng 80 loài mọc ở Trung Quốc [1]. Thân của một số loài thực vật trong chi này được gọi là "Shi-Hu", đã được sử dụng trong hàng ngàn năm như cả y học cổ truyền Trung Quốc và các phương thuốc dân gian để điều trị viêm teo dạ dày mãn tính, lão hóa da, sốt, bệnh tim mạch và một loại thuốc bổ để thúc đẩy sản xuất chất lỏng cơ thể [2]. Các nghiên cứu trước đây về chi này đã dẫn đến việc phân lập một loạt polysacarit, hợp chất phenolic, alkaloid và sesquiterpenoid [1, 3–5], một số trong đó có nhiều hoạt tính sinh học bao gồm chống viêm [6], kháng khuẩn [2], chống oxy hóa [7], chống khối u [8], chống kết tập tiểu cầu [9], điều hòa miễn dịch [10] và chống lại các hoạt động của cúm A [11].

Dendrobium loddigesii, một loại thảo mộc biểu sinh lâu năm, được phân bố rộng rãi ở khu vực phía tây nam của Trung Quốc, chẳng hạn như các tỉnh Quảng Tây, Quý Châu và Vân Nam [12]. Thân của nó đã được sử dụng trong y học dân gian để điều trị viêm dạ dày, sốt và chóng mặt [13]. Để tiếp tục tìm kiếm các sản phẩm tự nhiên đa dạng về cấu trúc và có hoạt tính sinh học từ chi này [1, 5, 14–17], một cuộc điều tra chuyên sâu về các thành phần có hoạt tính dược lý từ loài thực vật này đã được thực hiện ở đây. Kết quả là, ba hợp chất phenolic mới (1–3) cũng như mười một hợp chất đã biết (Hình 1) đã được phân lập từ chiết xuất etanol 80% của thân cây D. loddigesii. Việc phân lập, làm sáng tỏ cấu trúc và đánh giá sinh học của các hợp chất này được trình bày ở đây.

does cistanche work

2 Kết quả và Thảo luận

Hợp chất 1, thu được ở dạng chất rắn màu trắng, có công thức phân tử là C21H26O7 được xác định bởi ion (−)-HRESIMS ở m/z 389,1602 [M−H]− (calcd cho C21H25O7, 389,16{{ 28}}6) với 9 độ không bão hòa. Phổ 1 H NMR của 1 chứa bảy proton thơm ở δH 6,85 (1H, d, J=1.7 Hz), 6,75 (1H, d, J=8.0 Hz), 6,68 (1H , đ, J = 8.0, 1,7 Hz), 7,01 (2H, d, J = 8.5 Hz) và 6,68 (2H, d, J = 8.5 Hz), gợi ý về sự có mặt của vòng benzen ba thế 1,3,4-và vòng benzen bị thế 1,4-. Phổ 13C NMR của nó thể hiện 21 cộng hưởng carbon bao gồm hai methyl (một methoxy), bốn methylene béo, chín methine (hai sp3, bảy sp2) và sáu carbon bậc bốn (một carbonyl, năm olefinic bao gồm ba oxy hóa). Các tương quan HMBC (Hình 2) của H-7/C-1 (δC 131,6), C-2 (δC 111,7), C-6 (δC 121,4), C -8 (δC 74,2) và C-10 (δC 65,3); H-9/C-7 (δC 83,8) và C-8 (δC 74,2); H-10/C-11 (δC 15,6); 3-OMe (δH 3,81)/C-3 (δC 149,1), cùng với mối tương quan của H-7/H-8/H2-9 và H{{ 87}}/H3-11 từ phổ 1 H–1 H COZY (Hình 2) cho thấy sự có mặt của 7-O-ethylguaiacylglycerol [18]. Đã có báo cáo rằng J7,8 là khoảng 5 Hz đối với đồng phân erythro và 7 Hz đối với ba đồng phân trong trường hợp các dẫn xuất xi-lanh-glycerol và diacylglycerol. Do đó, hợp chất 1 được coi là ba đồng phân với J7,8 (6,5 Hz) [18]. Mối tương quan HMBC của H-7ʹ (δH 2,79, t, J = 7,5 Hz)/C-8ʹ (δC 37,1), C-1ʹ (δC 132,7), C-2ʹ, 6ʹ (δC 130,2) và C-9ʹ (δC 174,6), H-8ʹ (δH 2,59, t, J = 7,5 Hz)/C-7ʹ (δC 31,0), C-1ʹ và C-9ʹ, cùng với các đỉnh giao nhau COZY của H-8ʹ/H-7ʹ được biểu thị sự hiện diện của axit p-hydroxycoumaric [19]. Trên cơ sở bằng chứng được mô tả ở trên, 1 được đề xuất là có gốc 7-O-ethylguaiacylglycerol và axit p-hydroxy-coumaric thông qua liên kết este. Mối tương quan HMBC từ H-9 đến C-9ʹ cho thấy mối liên kết este nằm giữa C-9 và C-9ʹ. Do đó, cấu trúc của 1 đã được xác định như được hiển thị.

(R){{0}},5,4ʹ-Trihydroxy-3,3ʹ, -trimethoxybibenzyl (2) thu được ở dạng chất rắn màu trắng. Phổ HRESIMS của 2 hiển thị đỉnh ion chuẩn phân tử ở m/z 319.1180 [M−H]− (calcd. cho C17H19O6, 319.1187) với 8 độ không bão hòa. Phổ 1 H NMR của 2 cho thấy ba nhóm methoxyl ở δH 3,75 (3H, s), 3,70 (3H, s) và 3,17 (3H, s); một proton methine oxy hóa ở δH 4.13 (1H, t, J=6.8 Hz, H- ); hai tín hiệu metylen ở δH 2,73 (1H, dd, J=13.5, 6,9 Hz) và 2,96 (1H, dd, J=13.5, 6,9 Hz); và năm proton thơm, xuất hiện dưới dạng vòng thơm 1,3,4,5-được thế bốn ở δH 6,28 (1H, d, J=1,8 Hz) và 6,34 (1H, d, J{{ 60}}.8 Hz) và vòng thơm ba thế 1,3,4-ở δH 6,49 (1H, d, J=2.0 Hz), 6,62 (1H, d, J=8.0 Hz) và 6,52 (1H, dd, J = 8.0, 2,0 Hz). Phổ 13CNMR và DEPT của 2 cho thấy ba oxymethylene, một methylene, một methine oxy hóa và 12 cacbon thơm (năm oxy hóa). So sánh dữ liệu NMR của nó (Bảng 1) với dữ liệu của dendrocandin C [20] cho thấy những điểm tương đồng lớn ngoại trừ sự hiện diện của một nhóm methoxyl nữa, nhóm này nằm ở C-3ʹ bởi các tương quan HMBC từ 3ʹ-OMe và H-5ʹ đến C-3ʹ (δC 148,4). Ngoài ra, nhiều tương tác HMBC (Hình 2) của 3-OMe và H-2/C-3 (δC 149,5); -OMe/C- (δC 86,9) đề xuất các nhóm methoxyl khác tại C-3 và C- , tương ứng. Cấu hình tuyệt đối tại C- được xác định là R trên cơ sở độ quay quang âm ([훼]26 D –12,46), tương tự với aphyllous D [훼]20 D –20,3, MeOH) [15]. Theo đó, cấu trúc của 2 được xác định như hình vẽ.

desert cistanche benefits

(S){{0}},7,5′-Trihydroxy-3′,4′-dimethoxyfavanone (3) thu được ở dạng bột vô định hình màu vàng và có phân tử C17H16O7 (1{{69} } chỉ số thiếu hydro) theo ion (-)-HRESIMS ở m/z 331,0819 [M – H]− (calcd 331,0823). Cực đại hấp thụ tia cực tím ở 206 và 294 nm cho thấy sự hiện diện của flavanone [21]. Phổ 1 H NMR (Bảng 1) cho thấy ba tín hiệu trong vùng không thơm được đặt ở δH 5,29 (1H, dd, J=12.7, 3.1, H-2), 3,04 (1H, dd, J=17.1, 12.7, H-3ax) và 2.71 (1H, dd, J=17.1, 3.1, H-3 eq), bốn proton thơm δH 5,87 (1H, d, J=2.2, H-6), 5,91 (1H, d, J=2.2, H-8), 6,62 (1H, d, J=2.0, H-2ʹ) và 6,61 (1H, d, J=2.0, H-6ʹ), hai nhóm methoxyl δH 3,83 (3H, s) và 3,77 (3H,s). Phổ 13C NMR và DEPT (Bảng 1) chứa các cộng hưởng của 17 nguyên tử cacbon bao gồm hai methoxy, một methylene, một methine, một carbonyl carbon và 12 nguyên tử cacbon thơm. Phân tích toàn diện về dữ liệu NMR của nó chỉ ra rằng cấu trúc phẳng của nó có liên quan chặt chẽ với cấu trúc phẳng của dihydro tricin [22], ngoại trừ các cộng hưởng OH-4ʹ và OCH3-5ʹ trong dihydro tricin được hoán vị trong 3. Điều này đã được xác nhận bởi HMBC cross- các đỉnh (Hình 2) từ H-2ʹ, H-6ʹ và OCH3-4ʹ đến C-4ʹ (δC 137,7), từ H-6ʹ đến C-5ʹ (δC 151,8). Cấu hình tuyệt đối tại C-2 được mặc định là ở dạng S trên cơ sở giá trị quay cụ thể âm (– 46,64, MeOH) trong phép quay quang học của nó [23]. Do đó, cấu trúc của hợp chất 3 do đó được chỉ định rõ ràng như được hiển thị.

Mười một hợp chất đã biết được xác định là trepidation 4 [24], mescalin 5 [25], 4,5,4′-trihydroxy- 3,3′-dimethoxybibenzyl 6 [26], 4′,5- dihydroxy-3,3′-dimethoxybibenzyl 7 [27], Tristin 8 [28], batatas trong III 9 [27], 3,5,3′-hydroxybibenzyl 10 [29], aphyllous C 11 [15], dentiform A 12 [30], dihydroconiferyl dihydro-p-coumarate 13 [31], p-hydroxyphenyl chuyển hóa lên men 14 [32] bằng phân tích quang phổ và so sánh dữ liệu quang phổ của chúng với tài liệu.

cistanche and tongkat ali reddit

Các hợp chất phenolic, là một phần thiết yếu trong chế độ ăn uống của con người và được biết đến như là chất chống oxy hóa mạnh do hoạt động phá vỡ chuỗi mạnh mẽ của chúng và chúng có thể đóng góp trực tiếp vào hoạt động chống oxy hóa [33]. Thử nghiệm nhặt gốc tự do DPPH là một trong những phương pháp phổ biến nhất và tương đối nhanh chóng được sử dụng để đánh giá hoạt tính chống oxy hóa. Các hợp chất có thể tặng một nguyên tử hydro cho gốc DPPH và sau đó tạo ra dạng DPPH khử sẽ được coi là tác nhân chống oxy hóa tiềm năng. Tất cả các hợp chất đã được đánh giá cho các hoạt động nhặt gốc tự do DPPH của chúng. Các kết quả hiện tại (Bảng 2) cho thấy rằng phần lớn các hợp chất phenolic (1, 4–8, 13 và 14) cho thấy các hoạt động đáng kể với khả năng nhặt rác nằm trong khoảng từ 89,411 đến 94,278 phần trăm ở 100 ug/mL.

Mặt khác, tyrosinase là một loại enzyme có chứa đồng và đóng vai trò quan trọng trong việc kiểm soát quá trình sinh tổng hợp melanin trong tế bào hắc tố [34]. Do đó, chất ức chế tyrosinase trở thành thành phần quan trọng của mỹ phẩm hoặc dược phẩm để điều trị chứng tăng sắc tố da và phát triển các chất làm trắng da. Trong nghiên cứu hiện tại, tất cả các chủng phân lập được đánh giá về hoạt tính ức chế tyrosinase của chúng (Bảng 2). Axit Kojic, một chất làm sáng da có mục đích, đã được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. 3,5,3′-hydroxybibenzyl (10) bộc lộ hoạt tính ức chế đáng kể với giá trị IC50 là 37,904 ug/mL. Aphyllals C (11) cho thấy sự ức chế vừa phải (IC50, 152,56 ug/mL). Tất cả các hợp chất còn lại đều không hoạt động ở nồng độ lên tới 200 ug/mL. Trong nghiên cứu này, có thể kết luận rằng các hợp chất 10 và 11 có thể là một ứng cử viên tiềm năng để điều trị các bệnh về da liên quan đến sinh tổng hợp melanin.

cistanche gnc

Xem xét rằng loài này được sử dụng trong y học để chống lão hóa da, vì collagen rất quan trọng đối với sức mạnh và độ đàn hồi của da, và sự xuống cấp của nó dẫn đến các nếp nhăn đi kèm với lão hóa [35]. Do đó, tất cả các hợp chất cũng được đánh giá có chủ ý về tác dụng của chúng đối với việc sản xuất collagen trong HDFa. Kết quả (Bảng 2) cho thấy hợp chất 9 kích thích đáng kể hoạt động sản xuất collagen HDFa (EC50 3.182 ug/mL). Hợp chất 6 và 7 cho thấy hoạt động yếu hơn, với việc sản xuất collagen lần lượt là 33,062% và 29,157% ở mức 10 ug/mL. Các kết quả hiện tại không chỉ hỗ trợ việc sử dụng D. loddigesii theo dân tộc học mà còn cung cấp một khuôn mẫu cấu trúc đáng tin cậy để phát triển các bệnh liên quan đến thiếu hụt collagen như bỏng và loét.

3 Thực nghiệm

3.1 Quy trình thí nghiệm chung

Xoay quang học thu được trên máy đo phân cực kỹ thuật số JASCO P-1020 (Horiba, Tokyo, Nhật Bản). Phổ UV được đo bằng máy quang phổ PC Shimadzu UV-2401 (Shimadzu, Kyoto, Nhật Bản). Phổ hồng ngoại thu được trên máy quang phổ hồng ngoại Bruker Tensor 27 (Bruker Optics GmbH, Ettlingen, Đức) với các viên KBr. Phổ khối được thực hiện trên máy quang phổ thời gian chiến đấu API QSTAR (MDS Sciqaszex, Concord, Ontario, Canada) và máy quang phổ LCMSIT-TOF (Shimadzu, Kyoto, Nhật Bản). Phổ NMR được ghi lại trên các thiết bị DRX-500 và Av III-600 với TMS làm chuẩn nội (Bruker, Bremerhaven, Đức). Độ dịch chuyển hóa học được tính bằng δ (ppm) có liên quan đến tín hiệu dung môi. Sắc ký cột được thực hiện trên silica gel (200–300 và 300–400 mesh, Qingdao Marine Chemical Inc., Qingdao, China), Licroprep RP-18 gel (40–63 μm, Merck, Darmstadt, Đức), MCI gel CHP-20P (75–150 μm, Mitsubishi Chemical Corp., Tokyo, Nhật Bản), Sephadex LH-20 (20–150 μm, Amersham Bioscatics, Uppsala, Thụy Điển) và YMC*GEL ODS -AHG (50 μm, Công ty TNHH YMC Nhật Bản). Các phần được theo dõi bằng TLC, và các vết được hiển thị bằng ánh sáng tia cực tím và phun H2SO4 10% trong EtOH, sau đó đun nóng. 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), Trolox, tyrosinase nấm, L-Dopa và axit Kojic được mua từ Sigma (Hoa Kỳ); Biến đổi hệ số tăng trưởng beta (TGF- ) được lấy từ Peprotech (Mỹ); Môi trường tăng trưởng DMEM (glucose cao w / L-glut), dung dịch muối cân bằng của Hank, huyết thanh bào thai bò được mua từ HyClone (Hoa Kỳ); Bộ ELISA procollagen peptide được lấy từ TaKaRa (Nhật Bản). Tất cả các hóa chất và dung môi khác đều thuộc loại phân tích.

cistanche bienfaits

3.2 Nguyên liệu thực vật

Thân của D. loddigesii được thu thập vào tháng 9 năm 2014 từ thành phố Văn Sơn, tỉnh Vân Nam, Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa và được xác định bởi Giáo sư Hong Yu (Đại học Vân Nam, Côn Minh, Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa). Mẫu chứng từ (số 20.140.829) đã được ký gửi tại Phòng thí nghiệm Trọng điểm Nhà nước về Hóa thực vật và Tài nguyên Thực vật ở Tây Trung Quốc, Viện Thực vật học Côn Minh, Viện Hàn lâm Khoa học Trung Quốc.

3.3 Khai thác và cô lập

Thân khô và dạng bột (10,2 kg) của D. loddigesii được chiết ba lần với 80 etanol ở nhiệt độ phòng và cô dưới áp suất giảm. Sau đó, phần cặn được huyền phù trong H2O và được phân tách bằng EtOAc để thu được phần EtOAc (220 g), phân đoạn này được xử lý bằng sắc ký cột silica gel được rửa giải bằng một dải ete dầu mỏ/axeton (15:1 đến { {110}}:1) để có 22 phân số (Fr.1–22). Fr.11 (6 g) được xử lý bằng silica gel CC được rửa giải bằng CHCl3/MeOH (300:1), sau đó là cột MCI (gradien MeOH/H2O, 60:40–95:5) và silica gel CC (CHCl3/ MeOH, 200:1) để thu được 12 (4 mg). Fr.13 (850 mg) được phân tách trên cột MCI (MeOH/H2O, 60:40 đến 95:5) để thu được 5 phần (Fr.13.1–Fr.13.5). Fr.13.4 (150 mg) thu được hợp chất 4 (3 mg) và 5 (5 mg) bằng cách điều chế HPLC (MeOH/H2O, 60:40). Fr.16 (19 g) được sắc ký trên cột silica gel rửa giải bằng CHCl3/MeOH (100:1 đến 20:1) để thu được 6 phân số con (Fr.16.1–Fr.16.6). Fr.16.4 (2,3 g) được áp dụng cột MCI được rửa giải bằng MeOH/H2O (50:50–100:0) và sau đó được phân đoạn tiếp trên cột Sephadex LH-20 (MeOH/H2O, 90:10) để mang lại 7 (716 mg) và 13 (39 mg). Bằng cách sử dụng các điều kiện tương tự của Fr.16.4, Fr.16.6 (240 mg) đã thu được hợp chất 9 (7 mg). Fr.18 (10 g) được phân tách bằng silica gel CC (CHCl3/MeOH, 100:1–20:1), sau đó được chuyển qua MCI (gradien MeOH/H2O, 50:50–100:0) và Sephadex LH{{ 96}} (MeOH/H2O, 90:10) để thu được 3 (25 mg) và 11 (4 mg). Fr.19 (20 g) được đưa vào cột MCI rửa giải bằng MeOH/H2O (30:70–100:0) để thu được bảy phần (Fr.19.1–Fr.19.7). Fr.19,5 (2,3 g) được phân tách bằng cột silica gel lặp lại (CHCl3/MeOH, 30:1) để thu được 8 (15 mg) và 10 (7 mg). Fr.19.6 (4,3 g) được phân đoạn trên cột silica gel (CHCl3/MeOH, 30:1) để tạo thành 5 phần phân đoạn (Fr.19.6.1– Fr.19.6.5). Fr.19.6.1 (1,2 g) được cho vào cột silica gel (CHCl3/MeOH, 30:1) và sau khi tinh chế bằng HPLC (MeOH/H2O, 45:55), thu được 1 (15 mg). Fr.19.6.3 (540 mg) được áp dụng cho cột Sephadex LH-20 được rửa giải bằng MeOH/H2O (90:10), và sau đó được tinh chế thêm bằng HPLC bán điều chế (MeOH/H2O, 45:55) để cung cấp 2 (6 mg) và 6 (5 mg). Fr.20 (12 g) được áp dụng cho bước sắc ký gel MCI (MeOH/H2O, 30:70–100:0) và sau đó được đưa vào silica gel CC (CHCl3/MeOH, 30:1) để thu được 14 (21 mg).ba{{0}}O-Etyl-9-O-(4-hydroxyphenyl) propionyl-diacylglycerol (1): chất rắn màu trắng; [ ]D 26 – 3,72 (c 0,51, MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 203 (4,53), 225 (4,17), 280 (3,66) nm; IR (KBr) νmax 3426, 1727, 1516, 829 cm−1; 1 H và 13C NMR (CD3OD), xem Bảng 1; ESIMS m/z 389 [M−H]−, HRESIMS m/z 389,1602 [M−H]− (tính toán cho C21H25O7, 389,1606).

(R)-4,5,4′-Trihydroxy-3,3ʹ, -trimethoxybibenzyl (2): bột vô định hình màu trắng; [ ]D 26 –12,46 (c 1,07, MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 204 (4,59), 286 (3,75) nm; IR (KBr) νmax 3418, 1607, 1517, 1455, 1434, 796 cm−1; 1 H và 13C NMR (CD3OD), xem Bảng 1; ESIMS m/z 319 [M−H]−, HRESIMS m/z 319,1180 [M−H]− (tính toán cho C17H19O6, 319,1187).

(2S)-5,7,3ʹ-Trihydroxy-6,4,5-trimethoxyfavone (3): bột vô định hình màu vàng; [ ]D 26 – 46,64 (c 0.46, MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 206 (4,70), 294 (4,17) nm; IR (KBr) νmax 3335, 2940, 1641, 1514, 1462, 1345, 1434, 1182, 1091, 998, 833 cm−1; 1 H và 13C NMR (CD3OD), xem Bảng 1; ESIMS m/z 331 [M−H]−, HRESIMS m/z 331,0819 [M−H]− (tính toán cho C17H15O7, 331,0823).

3.4 Thử nghiệm hoạt động nhặt gốc tự do DPPH

Thử nghiệm hoạt động nhặt gốc tự do được thực hiện theo phương pháp trước đây [36] với một số sửa đổi. Tóm lại, 30 μL mẫu (1000 ug/mL, hòa tan trong etanol) và Trolox (1 mM) đã được thêm vào 270 μL dung dịch DPPH (100 μM, hòa tan trong metanol), tương ứng. Phản ứng diễn ra trong 1 giờ ở 37 độ trên khay vi mạch giếng 96-. Độ hấp thụ sau đó được đọc ở bước sóng 515 nm và tỷ lệ phần trăm của tổng hoạt động nhặt gốc tự do được tính bằng công thức sau: phần trăm ức chế =[(A0− A1)/A0]×100 phần trăm , trong đó A0 là độ hấp thụ của DPPH không có mẫu (phản ứng đối chứng) và A1 là độ hấp thụ của DPPH được ủ với các mẫu. Tất cả các thử nghiệm được tiến hành ba lần và Trolox được sử dụng như một tác nhân kiểm soát tích cực.

maca ginseng cistanche

3.5 Xét nghiệm ức chế Tyrosinase của nấm

Sự ức chế hoạt động tyrosinase được xác định bằng đo quang phổ theo phương pháp được mô tả trước đây [36] với một số sửa đổi. Tóm lại, nồng độ khác nhau của các hợp chất thử nghiệm đã được chuẩn bị trong 10 phần trăm DMSO. Từng dung dịch mẫu (20 μM) được trộn với L-Dopa (1,25 mM) và được pha loãng với 970 μL dung dịch đệm natri photphat 0.05 mM (PBS, pH 6,8) trong các ống nghiệm. Phản ứng được bắt đầu bằng cách thêm tyrosinase của nấm (25 U/mL). Hỗn hợp phản ứng được ủ trong 5 phút ở nhiệt độ phòng. Lượng Dopachrom trong hỗn hợp được xác định bằng phép đo độ hấp thụ của từng giếng ở bước sóng 490 nm. Axit Kojic đã được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Phần trăm ức chế của tyrosinase được tính toán theo phương trình sau: Phần trăm ức chế=[(A0− A1)/A0] × 100 phần trăm , trong đó A0 là độ hấp thụ của Dopachrom không có hợp chất thử nghiệm (phản ứng đối chứng) và A1 là độ hấp thụ của Dopachrom được ủ với các hợp chất thử nghiệm.

3.6 Sản xuất collagen bằng xét nghiệm HDFa

Dòng tế bào HDFa được lấy từ Cascade Biologics. Các tế bào HDFa được cấy vào các đĩa giếng {{0}}chứa DMEM với 10 phần trăm FBS trong môi trường ẩm có 5 phần trăm CO2 ở 37 độ . Sau 24 giờ ủ, các tế bào được xử lý bằng các mẫu thử nghiệm trong 72 giờ (37 độ , 5 phần trăm CO2). TGF- đã được sử dụng làm đối chứng dương. Môi trường (50 PhaL) được thu thập từ mỗi giếng và được đông lạnh ở -80 độ cho đến khi nó được thử nghiệm bằng bộ ELISA procollagen peptide. Nồng độ của pro-collagen thu được bằng cách đo độ hấp thụ ở bước sóng 450nm trên đầu đọc vi bản. Lấy tất cả môi trường ra khỏi tế bào và thêm 100 µL thuốc thử MTS đã pha loãng vào mỗi giếng. Phản ứng được ủ trong 40 phút ở 37 độ. Độ hấp thụ được đo ở bước sóng 490nm bằng đầu đọc vi bản. Tỷ lệ sản xuất collagen I tăng lên được tính toán theo phương trình sau: khả năng sống của tế bào ( phần trăm ) =(Mẫu OD490 trung bình/Kiểm soát OD490 trung bình); mức tăng phần trăm sản xuất collagen=(A1/B/A0 − 1) × 100 phần trăm . Trong đó A1 là độ hấp thụ có mẫu, A0 là độ hấp thụ không có mẫu (phản ứng đối chứng) và B là khả năng sống của tế bào.

Lời cảm ơn Dự án này được hỗ trợ tài chính bởi Sở Khoa học và Công nghệ tỉnh Vân Nam (Số 2017ZF003-04, 2015HB093 và 2019HA001). Các tác giả rất biết ơn các nhân viên của nhóm phân tích của Phòng thí nghiệm hóa thực vật và tài nguyên thực vật trọng điểm ở Tây Trung Quốc, Viện Thực vật học Côn Minh, Viện Hàn lâm Khoa học Trung Quốc, đã đo tất cả các quang phổ.

cistanche portugal

Tuân thủ các tiêu chuẩn đạo đức

Xung đột lợi íchKhông có xung đột lợi ích tiềm tàng nào được báo cáo bởi các tác giả trong bản thảo này.

Truy cập mởBài viết này được phân phối theo các điều khoản của Creative Commons Attribution 4.0 Giấy phép quốc tế, cho phép sử dụng, phân phối và sao chép không hạn chế trong bất kỳ phương tiện nào, miễn là bạn cung cấp tín dụng phù hợp cho (các) tác giả gốc và nguồn , cung cấp liên kết đến giấy phép Creative Commons và cho biết liệu các thay đổi có được thực hiện hay không.

Người giới thiệu

1. D. Yang, ZQ Cheng, L. Yang, B. Hou, J. Yang, XN Li, CT Zi, FW Dong, ZH Liu, J. Zhou, ZT Ding, JM Hu, J. Nat. sản xuất. 81, 227–235 (2018)

2. XM Zhou, CJ Zheng, LS Gan, GY Chen, XP Zhang, XP Song, GN Li, CG Sun, J. Nat. sản xuất. 79, 1791–1797 (2016)

3. TB He, YP Huang, L. Yang, TT Liu, WY Gong, XJ Wang, J. Sheng, JM Hu, Int. J. Sinh học. Macromol. 83, 34–41 (2016)

4. Y. Hu, C. Zhang, X. Zhao, Y. Wang, D. Feng, M. Zhang, H. Xie, J. Nat. sản xuất. 79, 252–256 (2016)

5. WW Fan, FQ Xu, FW Dong, XN Li, Y. Li, YQ Liu, J. Zhou, JM Hu, Nat. sản xuất. triển vọng sinh học. 3, 89–92 (2013)

6. Y. Lin, F. Wang, LJ Yang, Z. Chun, JK Bao, GL Zhang, Phytochemy 95, 242–251 (2013)

7. M. Moretti, L. Cossignani, F. Messina, L. Dominici, M. Villarini, M. Curini, MC Marcotullio, Food Chem. 140, 660–665 (2013)

8. S. Charoenrungruang, P. Chanvorachote, B. Sritularak, V. Pongrakhananon, J. Nat. sản xuất. 77, 1359–1366 (2014)

9. CC Chen, LG Wu, FN Ko, CM Teng, J. Nat. sản xuất. 57, 1271–1274 (1994)

10. Y. Deng, M. Li, LX Chen, XQ Chen, JH Lu, J. Zhao, SP Li, Carbohyd. polyme. 180, 238–245 (2018)

11. R. Li, T. Liu, M. Liu, F. Chen, S. Liu, J. Yang, J. Agric. Hóa chất thực phẩm 65, 3665–3674 (2017)

12. Ban Biên tập Flora Republicae Popularis Sinicae, (Academic Press. Beijing 19, 104 (1999)

13. Y. Lu, M. Kuang, GP Hu, RB Wu, J. Wang, L. Liu, YC Lin, Phân tử 19, 8544–8555 (2014)

14. C. Zhang, SJ Liu, L. Yang, MY Yuan, JY Li, B. Hou, HM Li, XZ Yang, CC Ding, JM Hu, Fitoterapia 122, 76–79 (2017)

15. D. Yang, LY Liu, ZQ Cheng, FQ Xu, WW Fan, CT Zi, FW Dong, J. Zhou, ZT Ding, JM Hu, Fitoterapia 100, 11–18 (2015)

16. WW Fan, FQ Xu, FW Dong, XN Li, XY Wei, J. Zhou, JM Hu, Tetrahedron Lett. 54, 1928–1930 (2013)

17. FQ Xu, FC Xu, B. Hou, WW Fan, CT Zi, Y. Li, FW Dong, YQ Liu, J. Sheng, ZL Zuo, JM Hu, Bioorg. y tế. hóa học. Hãy để. 24 , 5268–5273 (2014)

18. CL Chang, LJ Zhang, RY Chen, CC Wu, HC Huang, MC Roy, JP Huang, YC Wu, YH Kuo, Bioorg. y tế. hóa học. 18, 518–525 (2010)

19. J. Cai, C. Yang, T. Chen, L. Zhao, Nat. sản xuất. độ phân giải tự nhiên sản xuất. độ phân giải 32, 1600–1604 (2018)

20. Y. Li, CL Wang, YJ Wang, SX Guo, JS Yang, XM Chen, PG Xiao, Chem. dược phẩm. Bò đực. 57, 218–219 (2009)

21. CL Chang, GJ Wang, LJ Zhang, WJ Tsai, RY Chen, YC Wu, YH Kuo, Phytochemy 71, 271–279 (2010)

22. K. Šmejkal, L. Grycová, R. Marek, F. Lemière, D. Jankovská, H. Forejtniková, J. Vančo, V. suchý, J. Nat. sản xuất. 70, 1244–1248 (2007)

23. D. Slade, D. Ferreira, JPJ Marais, Hóa thực vật 66, 2177–2215 (2005)

24. PL Majumder, S. Chatterjee, Hóa thực vật 28, 1986–1988 (1989)

25. PL Majumder, RC Sen, Hóa thực vật 26, 2121–2124 (1987)

26. B. Sritularak, N. Duangrak, K. Likhitwitayawuid, Z. Naturforsch. C 66, 205–208 (2011)

27. YW Leong, CC Kang, LJ Harrison, AD Powell, Hóa thực vật 44, 157–165 (1996)

28. PL Majumder, S. Pal, Hóa thực vật 32, 1561–1565 (1993)

29. CF Xie, HQ Yuan, JB Qu, J. Xing, BB Lue, XN Wang, M. Ji, HX Lou, Chem. Đa dạng sinh học 6, 1193–1201 (2009)

30. Fan CQ, WM Zhao, GW Qin, Chin. hóa học. Hãy để. 11, 705–706 (2000)

31. Y. Tezuka, Y. Yoshida, T. Kikuchi, GJ Xu, Chem. dược phẩm. Bò đực. 41, 1346–1349 (1993)

32. FMM Darwish, MG Reinecke, Hóa thực vật 62, 1179–1184 (2003)

33. O. Demirkiran, T. Sabudak, M. Ozturk, G. Topcu, J. Agric. Hóa chất thực phẩm 61, 12598–12603 (2013)

34. KH Lee, FHA Aziz, A. Syahida, F. Abas, K. Shaari, DA Israf, NH Lajis, Eur. J. Med. hóa học. 44, 3195–3200 (2009)

35. HI Choi, HJ Kim, JI Park, EH Shin, DW Kim, SS Kim, Bioorg. y tế. hóa học. Hãy để. 19, 2079–2082 (2009)

36. T. Sabudak, O. Demirkiran, M. Ozturk, G. Topcu, Hóa thực vật 96, 305–311 (2013)

Để biết thêm thông tin: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501