Tác dụng bảo vệ của chiết xuất Djulis (Chenopodium Formosanum) chống lại quá trình lão hóa da do tia cực tím và AGEs thông qua việc giảm căng thẳng oxy hóa và suy thoái collagen Phần 1

trừu tượng: Lão hóa da là một quá trình phức tạp liên quan đến lão hóa do ánh sáng và căng thẳng glycation, có chung một số con đường cơ bản và có các chất trung gian chung. Chúng có thể gây tổn thương da và thoái hóa collagen bằng cách gây ra stress oxy hóa và tích tụ các loại oxy phản ứng (ROS). Chenopodium formosanum (CF), còn được gọi là Djulis, là một loại ngũ cốc truyền thống ở Đài Loan. Nghiên cứu này đã điều tra các cơ chế bảo vệ của chiết xuất CF chống lại bức xạ tia cực tím (UV) và stress do các sản phẩm cuối glycation (AGEs) gây ra. Kết quả chỉ ra rằng chiết xuất CF có tác dụng chống oxy hóa mạnh và thu gom gốc tự do. Nó có thể làm giảm quá trình tạo ROS nội bào do tia cực tím gây ra và khởi động hệ thống phòng thủ chống oxy hóa bằng cách kích hoạt đường truyền tín hiệu hồng cầu 2-yếu tố liên quan đến yếu tố hạt nhân 2 (Nrf2)/heme oxygenase-1 (HO-1) trong nguyên bào sợi da người. Chiết xuất CF đã điều chế protein kinase kích hoạt bằng mitogen (MAPK) và chuyển đổi các con đường truyền tín hiệu của yếu tố tăng trưởng-beta (TGF-) để làm giảm lão hóa da do căng thẳng oxy hóa. Hơn nữa, kết quả cho thấy chiết xuất CF không chỉ thúc đẩy quá trình tổng hợp collagen mà còn cải thiện sự thoái hóa collagen do lão hóa. Chiết xuất CF làm suy giảm quá trình sản xuất ROS do AGEs gây ra và điều chỉnh lại các thụ thể cho AGEs (RAGE). Kết quả tổng thể cho thấy chiết xuất CF cung cấp một chiến lược chống lão hóa hiệu quả bằng cách ngăn ngừa tổn thương da do stress oxy hóa và mất collagen với các hoạt động chống oxy hóa, chống lão hóa và chống lão hóa mạnh.

Glycoside của cistanche cũng có thể làm tăng hoạt động của SOD trong các mô tim và gan, đồng thời làm giảm đáng kể hàm lượng lipofuscin và MDA trong mỗi mô, loại bỏ hiệu quả các gốc oxy phản ứng khác nhau (OH-, H₂O₂, v.v.) và bảo vệ chống lại tổn thương DNA gây ra bởi gốc OH. Cistanche phenylethanoid glycoside có khả năng loại bỏ gốc tự do mạnh mẽ, khả năng khử cao hơn vitamin C, cải thiện hoạt động của SOD trong huyền phù tinh trùng, giảm hàm lượng MDA và có tác dụng bảo vệ nhất định đối với chức năng màng tinh trùng. Cistanche polysacarit có thể tăng cường hoạt động của SOD và GSH-Px trong hồng cầu và mô phổi của chuột lão hóa thực nghiệm do D-galactose gây ra, cũng như làm giảm hàm lượng MDA và collagen trong phổi và huyết tương, đồng thời tăng hàm lượng elastin, có tác dụng nhặt rác tốt đối với DPPH, kéo dài thời gian thiếu oxy ở chuột già, cải thiện hoạt động của SOD trong huyết thanh và làm chậm quá trình thoái hóa sinh lý của phổi ở chuột già thực nghiệm. Với sự thoái hóa hình thái tế bào, các thí nghiệm đã chỉ ra rằng Cistanche có khả năng chống oxy hóa tốt và có tiềm năng trở thành dược phẩm ngăn ngừa và điều trị các bệnh lão hóa da. Đồng thời, echinacoside trong Cistanche có khả năng đáng kể trong việc loại bỏ các gốc tự do DPPH và có khả năng loại bỏ các loại oxy phản ứng và ngăn chặn sự thoái hóa collagen do gốc tự do gây ra, đồng thời cũng có tác dụng sửa chữa tốt đối với tổn thương anion gốc tự do của thymine.

Nhấp vào Cistanche Herba để chống oxy hóa

【Để biết thêm thông tin:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

từ khóa: Chenopodium formosanum; Djulis; tia cực tím; sản phẩm cuối glycation tiên tiến; căng thẳng glycation; loài oxy phản ứng

1. Giới thiệu

Lão hóa được định nghĩa là kết quả của sự suy giảm dần chức năng sinh lý của các tế bào và mô trong cơ thể. Trong quá trình lão hóa, sự tích tụ các sản phẩm hư hỏng dần dần ảnh hưởng đến tổ chức và khả năng sửa chữa của mô. Da, là hàng rào bảo vệ cơ thể, thường xuyên phải chịu các yếu tố lão hóa bên trong và bên ngoài [1]. Yếu tố bên ngoài chủ yếu góp phần gây lão hóa da là do tiếp xúc với bức xạ tia cực tím trong ánh sáng mặt trời, được gọi là lão hóa do ánh sáng [2]. Bên cạnh các kích thích từ môi trường, sự tích tụ AGEs được coi là một yếu tố bên trong của quá trình lão hóa theo thời gian, kích hoạt quá trình lão hóa da thông qua stress glycation [3].

Cả ROS môi trường được tạo ra bởi tia UV và ROS nội sinh được hình thành bởi quá trình chuyển hóa oxy hóa đều điều chỉnh quá trình oxy hóa tế bào và phá hủy ma trận ngoại bào giàu collagen (ECM), đây không chỉ là dấu hiệu lão hóa mô liên kết của da mà còn là nguyên nhân chính khiến da bị suy giảm [ 4]. Tổn thương các liên kết ngang collagen làm suy yếu tính toàn vẹn của cấu trúc da và làm tăng độ cứng cũng như độ giòn của mạng lưới collagen, do đó thúc đẩy hình thành nếp nhăn, mất tính đàn hồi và khô da [5].

Tia UVB là dải sóng bức xạ mặt trời gây hại nhất đến trái đất, dẫn đến stress oxy hóa bằng cách kích thích sự hình thành ROS và liên quan đến chứng tăng sắc tố, viêm da, ức chế miễn dịch, lão hóa do ánh nắng và sinh ung thư [6,7]. Người ta biết rằng Nrf2 hoạt động như một chất điều chỉnh chính của quá trình bảo vệ chống oxy hóa tế bào chống lại sự tổn thương do ánh sáng ở da qua trung gian bức xạ UV. Các tế bào có thể loại bỏ stress oxy hóa và ngăn ngừa tổn thương bằng cách điều chỉnh đường truyền tín hiệu protein 1 (Keap1) liên kết với ECH giống như Nrf2/Kelch [8,9]. Sau khi tiếp xúc với tia cực tím, việc sản xuất ROS quá mức sẽ kích hoạt MAPK và yếu tố hạt nhân-kappa B (NF-κB), do đó, gây ra sự điều hòa lại của ma trận metallicopeptidase (MMP), dẫn đến sự thoái hóa của collagen và elastin. Ngoài ra, protein kích hoạt 1 (AP-1) ức chế tín hiệu TGF- và dẫn đến giảm tổng hợp procollagen [10,11].

AGEs là một nhóm phân tử không đồng nhất được hình thành do quá trình glycation, một phản ứng phi enzyme tự phát giữa đường khử và nhóm amino của protein [3]. Sự tương tác giữa AGEs và một thụ thể cụ thể của AGEs (RAGE) kích hoạt việc tạo ra ROS và làm thay đổi biểu hiện gen trong các rối loạn liên quan đến AGEs, chẳng hạn như bệnh tiểu đường và suy thận [12,13]. AGEs tích lũy trong protein ECM khi lão hóa và Nε -(1-Carboxymethyl)-L-lysine (CML) được tạo ra bởi quá trình biến đổi oxy hóa là protein glycated chính ở người [14,15]. Trong quá trình lão hóa nội tại, AGEs được thể hiện ở lớp biểu bì và hạ bì, và có thể quan sát thấy sự tích tụ AGEs tăng lên đáng kể ở những vùng da tiếp xúc với ánh nắng mặt trời [16]. Ngoài ra, UV tăng cường sự lắng đọng AGEs thông qua quá trình glycation của mạng lưới sợi đàn hồi [17].

Chenopodium formosanum (CF), còn được gọi là Djulis, là một loại cây ăn được ở Đài Loan và thường được nấu với gạo hoặc kê làm lương thực chính. CF được coi là thực phẩm có giá trị dinh dưỡng cao và là nguồn cung cấp các hợp chất có hoạt tính sinh học cho sức khỏe con người [18]. Bên cạnh lượng chất xơ dồi dào, tinh bột, axit amin thiết yếu hạn chế trong ngũ cốc và polyphenol [19,20], CF còn chứa một loại hợp chất có lịch sử sử dụng lâu dài trong y học, được gọi là phytoecdysteroids [21–24]. Các nghiên cứu trước đây đã báo cáo rằng CF thể hiện một số hoạt động sinh học, bao gồm chống béo phì [21], hạ huyết áp [22], hạ đường huyết [25,26], bảo vệ gan [27–29], chống ung thư [23,24,30,31], và đặc tính chống lão hóa [19,32]. Tuy nhiên, cả tác dụng bảo vệ da chi tiết của chiết xuất CF cũng như các cơ chế cơ bản chống lại sự lão hóa bên trong và bên ngoài của da liên quan đến stress oxy hóa và glycation đã được tiết lộ cho đến nay. Mục đích của nghiên cứu này là làm rõ tác dụng chống oxy hóa của chiết xuất CF và điều tra các cơ chế bảo vệ chống lão hóa cơ bản của chiết xuất CF chống lại sự thoái hóa collagen bởi tia cực tím và AGEs trong nguyên bào sợi da người.

2. Kết quả

2.1. Phân tích Định lượng HPLC-ESI-MS/MS và MRM

Việc phân tích hàm lượng các hợp chất có hoạt tính sinh học mục tiêu trong dịch chiết CF được tiến hành bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)-Mass/MS và phương pháp giám sát đa phản ứng (MRM). Sắc ký ion MRM và phổ khối trên chế độ dương tính ion hóa phun điện (ESI) của 20-chất chuẩn hydroxyecdysone và rutin được trình bày trong Tài liệu bổ sung. Quá trình chuyển đổi từ ion tiền chất ở m/z 481 sang sản xuất ở m/z 371 đối với 20-hydroxyecdysone (Hình S1a) và quá trình chuyển đổi từ ion tiền chất ở m/z 611 sang sản xuất ở m/z 3 03 cho rutin (Hình S1b) được hiển thị. Hình S2 cho thấy sắc ký đồ ion tổng (TIC) và sắc ký đồ ion chiết xuất (EIC) của 20-hydroxyecdysone (m/z 481) và rutin (m/z 611) trong dịch chiết CF. Hàm lượng rutin và 20-hydroxyecdysone trong chiết xuất CF lần lượt là 14,5 ± 0,4 mg/g và 19,5 ± 0,6 mg/g.

2.2. Hoạt động chống oxy hóa và hiệu quả thu hồi gốc tự do của chiết xuất CF

2.2.1. Hoạt động nhặt gốc tự do DPPH

DPPH là thuốc thử thường được sử dụng để ước tính tổng hoạt động nhặt gốc tự do của chất chống oxy hóa bằng cách phát hiện khả năng cung cấp proton hydro của dịch chiết. Kết quả cho thấy chiết xuất CF thể hiện hoạt động nhặt rác mạnh 40,2% ± 3,3% ở 50 µg/mL và 89,1% ± 2,6% ở 500 µg/mL, trong khi hoạt tính nhặt rác của axit ascorbic là 96,6%. ± 2,3 phần trăm ở 10 µg/mL (Hình 1a). Nồng độ ức chế tối đa một nửa (IC50) của chiết xuất CF đối với việc loại bỏ gốc tự do DPPH là 84,7 ± 13,0 µg/mL.

2.2.2. Giảm khả năng

Khả năng khử của chiết xuất CF được quan sát thấy trong nghiên cứu hiện tại được thể hiện trong Hình 1b. Khả năng khử của chiết xuất CF là 51,3 phần trăm ± 1,0 phần trăm ở 100 µg/mL và 66,9 phần trăm ± 1,7 phần trăm ở 1000 µg/mL. Khả năng khử của axit ascorbic đối chứng so sánh (100 µg/mL) là 79,7 phần trăm ± 1,2 phần trăm .

2.2.3. Superoxide Anion Radical (O2 -) Hoạt động nhặt rác

Hoạt tính nhặt gốc anion superoxide là 82,2% ± 6,1% đối với 250 µg/mL BHA (đối chứng so sánh) và dao động từ 59,6% ± 3,5% đến 73,1% ± 2,6% đối với chiết xuất 100–1000 µg/mL CF (Hình 1c).

2.2.4. Hoạt động nhặt rác Hydrogen Peroxide (H2O2)

Hoạt tính nhặt sạch hydro peroxide nằm trong khoảng từ 10,3 phần trăm ± 1,1 phần trăm đến 61,1 phần trăm ± 2,3 phần trăm đối với chiết xuất CF 200–1500 µg/mL và là 96,3 phần trăm ± 2,0 phần trăm đối với BHA (250 µg/mL) ( Hình 1d). IC50 của chiết xuất CF là 956,5 ± 59,2 µg/mL đối với hoạt tính nhặt sạch hydro peroxide.

2.2.5. Hoạt động nhặt rác gốc hydroxyl (· OH)

Các hoạt động nhặt gốc hydroxyl của dịch chiết CF (100–1000 µg/mL) và mannitol đối chứng so sánh (µg/mL) được thể hiện trong Hình 1e. Hoạt tính thu hồi gốc hydroxyl của dịch chiết CF 1000 µg/mL là 63,3% ± 3,5% và của mannitol (2500 µg/mL) là 69,7% ± 2,2%. Tác dụng nhặt rác của chiết xuất CF tương tự như tác dụng của đối chứng so sánh và IC50 của CF đối với hoạt tính nhặt rác gốc hydroxyl là 240,7 ± 24,3 µg/mL.

2.2.6. Ion sắt (Fe2 cộng ) Hoạt động chelat hóa

Hình 1f cho thấy hoạt động thải sắt kim loại của chiết xuất CF và EDTA kiểm soát so sánh. Hoạt tính dao động từ 6,5 phần trăm ± 1,4 phần trăm đến 67,6 phần trăm ± 2,5 phần trăm đối với chiết xuất CF 100–1000 µg/mL và 97,5 phần trăm ± 2,0 phần trăm đối với 100 µM EDTA. IC50 của chiết xuất CF là 625,5 ± 46,0 µg/mL đối với thải sắt kim loại.

2.3. Chiết xuất CF làm giảm độc tính tế bào do tia cực tím gây ra trong các tế bào Hs68

Để đánh giá tác dụng gây độc tế bào của chiết xuất CF trong nguyên bào sợi da người (tế bào Hs68), khả năng tồn tại của các tế bào được điều trị bằng chiết xuất CF được đánh giá bằng xét nghiệm MTT. Như thể hiện trong Hình 2a, dịch chiết CF không gây độc tế bào trong các tế bào Hs68 trong khoảng nồng độ 50–250 µg/mL; do đó, các nồng độ này đã được chọn cho các thí nghiệm sau.

Các tế bào Hs68 được tiếp xúc với bức xạ UVB và khả năng tồn tại của tế bào được xác định để đánh giá hiệu quả bảo vệ của chiết xuất CF chống lại sự hư hại do ánh sáng. Kết quả cho thấy khả năng gây độc tế bào do bức xạ UVB (20–100 mJ/cm2 ) trong các tế bào Hs68 theo cách phụ thuộc vào liều lượng (Hình 2b). Tuy nhiên, các tế bào Hs68 được tiếp xúc với UVB (80 mJ/cm2 ) và sau đó được xử lý bằng chiết xuất CF (100, 150, 200 và 250 µg/mL) trong 24 giờ; Chiết xuất CF làm giảm đáng kể độc tính tế bào do tia cực tím gây ra (Hình 2c).

2.4. Chiết xuất CF làm giảm thế hệ ROS nội bào do tia cực tím gây ra trong các tế bào Hs68

ROS có thể tạo ra protein liên quan đến lão hóa da và truyền tín hiệu xuôi dòng bằng cách gây ra stress oxy hóa nội bào ở da người. Thuốc nhuộm fluorogen đo lượng gốc tự do oxy hóa trong tế bào. Sau khi chiếu tia UVB (80 mJ/cm2 ) trong 2 giờ, quá trình sản xuất ROS trong các tế bào Hs68 tăng gấp 2,16-so với ở nhóm không chiếu xạ. Tuy nhiên, xử lý với chiết xuất CF 100–250 µg/mL làm giảm đáng kể quá trình tạo ROS. ROS đã được điều chỉnh giảm 1,64-gấp so với nhóm bức xạ bằng chiết xuất CF ở 250 µg/mL (Hình 3).

2.5. Chiết xuất CF đã khởi xướng hệ thống phòng thủ chống oxy hóa bằng cách kích hoạt đường dẫn tín hiệu Nrf2/HO-1 trong các tế bào Hs68

2.5.1. Ảnh hưởng của chiết xuất CF đối với sự biểu hiện do tia cực tím của Nrf2/HO-1

Trong điều kiện bình thường, Keap1 tạo thành một phức hợp với Nrf2 và thúc đẩy sự phổ biến và suy thoái của Nrf2. Tuy nhiên, đường truyền tín hiệu Nrf2 được bắt đầu khi các tế bào bị kích thích bởi stress oxy hóa môi trường. Trong nghiên cứu này, các tế bào Hs68 được xử lý bằng chiết xuất CF để quan sát tác động của nó đối với đường truyền tín hiệu Nrf2 sau bức xạ UV. Như được hiển thị trong Hình 4, biểu hiện Nrf2 do bức xạ UVB (40 mJ/cm2 ) và giảm biểu hiện Keap1, trong khi chiết xuất CF (250 µg/mL) gây ra biểu hiện Nrf2 đáng kể gấp 2,4-so với nhóm bức xạ . Sau khi chiếu tia UV và xử lý bằng chiết xuất CF ở 250 µg/mL, biểu hiện protein của H O-1 tăng gấp 2,5-lần. Kết quả chỉ ra rằng chiết xuất CF có thể bắt đầu cơ chế bảo vệ chống oxy hóa thông qua đường truyền tín hiệu Nrf2/HO-1 và bảo vệ các tế bào khỏi stress oxy hóa trong một hệ thống sinh học.

2.5.2. Tác dụng của chiết xuất CF đối với sự chuyển vị hạt nhân do tia cực tím của Nrf2

Bức xạ UV thúc đẩy kích hoạt và chuyển Nrf2 vào nhân tế bào. Trong nghiên cứu này, xét nghiệm nhuộm miễn dịch huỳnh quang Nrf2 trong nguyên bào sợi da người được thực hiện để xác định mức độ kích hoạt Nrf2. Sự chuyển vị của Nrf2 từ tế bào chất sang nhân tăng lên sau bức xạ UVB, trong khi đó sự chuyển vị cũng được tăng cường sau khi xử lý chiết xuất CF (Hình 5). Kết quả của xét nghiệm nhuộm miễn dịch huỳnh quang phù hợp với biểu hiện Nrf2 trong Hình 4.

2.6. Chiết xuất CF Con đường truyền tín hiệu tế bào liên quan đến lão hóa da do quang hóa trong các tế bào Hs68

2.6.1. Ảnh hưởng của chiết xuất CF đối với biểu hiện do tia cực tím của MMP-1, -3, -9 và TIMP-1

Bức xạ UV gây ra quá trình phosphoryl hóa MAPK, quá trình này kích hoạt quá trình truyền tín hiệu xuôi dòng để kích hoạt yếu tố phiên mã AP{{0}} và tăng cường biểu hiện MMP. Khi da tiếp xúc với stress oxy hóa, các MMP được điều chỉnh lại, sau đó gây ra sự thoái hóa collagen và hình thành nếp nhăn. Như được hiển thị trong Hình 6, bức xạ UVB làm tăng đáng kể biểu thức MMP-1, -3 và -9 (2.2-lần, 1.3-lần và 1.5-gấp tương ứng so với nhóm kiểm soát), trong khi trích xuất CF làm giảm biểu thức của MMP. Xử lý chiết xuất CF ở 250 µg/mL đã ngăn chặn đáng kể mức độ biểu hiện MMP-1, MMP-3 và MMP-9 do UVB gây ra bằng 1.1-lần, 0 .9-lần lượt và 1.1-lần so với nhóm kiểm soát.

Chất ức chế mô của metallicoproteinase (TIMPs) là chất ức chế MMPs thể hiện trong mô liên kết của da. Biểu hiện TIMP-1 đã giảm sau khi bức xạ UVB và được tăng cường bởi chiết xuất CF (100–250 µg/mL) (Hình 6). Những kết quả này đã chứng minh rằng việc xử lý chiết xuất CF đã ngăn chặn sự gia tăng mức MMP-1, -3 và -9 do tia cực tím gây ra và giảm TIMP-1; do đó, chiết xuất CF có thể làm giảm sự phá vỡ ma trận ngoại bào do tia cực tím gây ra và duy trì tính toàn vẹn cấu trúc trong lớp hạ bì.

2.6.2. Ảnh hưởng của chiết xuất CF đối với biểu hiện do tia cực tím của AP-1 và MAPK

Bức xạ UVB điều chỉnh tăng biểu hiện của pc-Jun và c-Fos (gấp 2.4- và 1.2-so với nhóm đối chứng), trong khi chúng được điều hòa giảm bởi chiết xuất CF (100–250 µg/ mL). Xử lý bằng chiết xuất CF làm giảm đáng kể biểu hiện của pc-Jun và c-Fos ở mức 250 µg/mL (Hình 7a). Hình 7b cho thấy việc tiếp xúc với tia UVB làm tăng biểu hiện phosphoryl hóa p38 và ERK lên 2.1- và 1.5-gấp so với tổng mức protein trong các tế bào Hs68. Tuy nhiên, điều trị bằng chiết xuất CF (100–250 µg/mL) đã ức chế đáng kể sự biểu hiện quá mức MAPK do UVB gây ra. Quá trình phosphoryl hóa p38 và ERK đã bị ức chế đến mức cơ bản với nồng độ 250 µg/mL của chiết xuất CF. Hơn nữa, chiết xuất CF có thể ức chế sự biểu hiện quá mức của AP-1 do tia cực tím gây ra, bảo vệ da khỏi lão hóa do ánh nắng.

2.6.3. Tác dụng của chiết xuất CF đối với biểu hiện ức chế tia cực tím của TGF- và Smad3

TGF- đóng vai trò trung tâm trong tổng hợp ma trận ngoại bào và kiểm soát cân bằng nội môi collagen trong lớp hạ bì của con người. Tăng ROS trong nguyên bào sợi làm suy yếu tín hiệu TGF- bằng cách điều chỉnh giảm biểu hiện TGF- và Smad3, dẫn đến mất collagen và phá hủy mô da ở da già. Tương tự như vậy, trong nghiên cứu của chúng tôi, bức xạ UVB đã điều chỉnh quá mức sự biểu hiện của TGF- và Smad3 để ức chế quá trình tổng hợp collagen. So với nhóm đối chứng, biểu hiện TGF- và Smad3 thấp hơn ở nhóm chiếu tia UVB; tuy nhiên, chiết xuất CF (100–250 µg/mL) đã phục hồi đáng kể biểu hiện protein (Hình 8).

2.7. Trích xuất CF Suy giảm sản xuất ROS do AGEs gây ra và Biểu hiện RAGE trong các tế bào Hs68

Để nghiên cứu ảnh hưởng của chiết xuất CF đối với stress glycation, các tế bào Hs68 đã được xử lý bằng CML. Sau khi xử lý các tế bào bằng CML (100 µg/mL) trong 6 giờ, lượng ROS được tạo ra là 1.92-cao hơn gấp 1 lần so với lượng ở nhóm không được xử lý. Tuy nhiên, xử lý bằng chiết xuất CF (100–250 µg/mL) làm giảm đáng kể quá trình sản xuất ROS. ROS đã được điều chỉnh giảm 1,30-gấp so với nhóm được xử lý CML bằng dịch chiết CF ở 250 µg/mL (Hình 9). Hơn nữa, CML (100 µg/mL) tăng đáng kể biểu hiện RAGE lên 2.2-gấp so với nhóm đối chứng, nhưng nó bị suy giảm khi xử lý bằng chiết xuất CF (Hình 10), cho thấy rằng chiết xuất CF chủ yếu làm giảm cảm ứng CML gây ra.

2.8. Chiết xuất CF thúc đẩy quá trình tổng hợp collagen và cải thiện sự thoái hóa collagen do lão hóa trong các tế bào Hs68

2.8.1. Tác dụng của chiết xuất CF đối với quá trình tổng hợp collagen

Các tế bào Hs68 được xử lý bằng chiết xuất CF (50–250 µg/mL) trong 24 giờ và biểu hiện procollagen loại I được đo bằng phương pháp làm mờ phương Tây. Sau khi điều trị bằng chiết xuất CF, biểu hiện procollagen loại I được điều chỉnh tăng đáng kể (gấp 1,7-so với nhóm đối chứng) (Hình 11a). Tổng hàm lượng collagen trong nhóm đối chứng là 14,93 ± 1,27 µg/mL, tăng lên 39.00 ± 2,39 µg/mL sau khi điều trị bằng chiết xuất CF 250 µg/mL (Hình 11b). Kết quả biểu hiện procollagen loại I và tổng hàm lượng collagen chỉ ra rằng chiết xuất CF thúc đẩy quá trình tổng hợp và sản xuất collagen.

2.8.2. Tác dụng của chiết xuất CF đối với sự thoái hóa collagen do tia cực tím và AGEs gây ra

Các tế bào Hs68 tiếp xúc với bức xạ UVB (40 mJ/cm2 ) hoặc được xử lý bằng CML (100 µg/mL) được xử lý bằng chiết xuất CF trong 24 giờ. Như thể hiện trong Hình 12a, tổng hàm lượng collagen đã giảm đáng kể sau khi chiếu tia UVB, và điều trị bằng chiết xuất CF đã phục hồi collagen và tăng đáng kể sự hình thành collagen ở mức 250 µg/mL. Các kết quả tương tự cũng được thể hiện trong quá trình sản xuất collagen được xử lý bằng CML và một loạt chiết xuất CF. Chiết xuất CF làm suy yếu quá trình giảm collagen tổng số được điều trị bằng CML (Hình 12b).

Xét nghiệm nhuộm miễn dịch huỳnh quang được sử dụng để xác định mức độ collagen trong các tế bào nguyên bào sợi (Hình 12c). Cả bức xạ UVB và điều trị CML đều làm giảm hàm lượng collagen, trong khi chiết xuất CF cải thiện sự thoái hóa collagen. Kết quả của xét nghiệm nhuộm màu miễn dịch huỳnh quang của chiết xuất CF trên collagen phù hợp với hàm lượng collagen trong Hình 11b và 12a, b.

【Để biết thêm thông tin:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】