Xác định nhanh Saponin trong chế biến mật ong chiên của Rhizoma Cimicifugae bằng quang phổ phản xạ khuếch tán hồng ngoại gần

Tiếp xúc:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Lun Wu 1, †, Yang Su 2, †, Haoran Yu 1, Xiuhui Qian 1, Xueting Zhang 1, Qiuhong Wang 3, *, Haixue Kuang 2, * và Genhong Cheng 4

Trừu tượng:Mục tiêu: Mô hình Quang phổ phản xạ khuếch tán hồng ngoại gần (NIR-DRS) lần đầu tiên được thành lập để xác định hàm lượng Shengmaxinside I trong chế biến Rhizoma Cimicifuga chiên mật ong. Phương pháp: Hàm lượng Shengmaxinside I được xác định bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và dữ liệu của quá trình chế biến mật ong Rhizoma Cimicifugae từ các lô khác nhau có nguồn gốc khác nhau bằng NIR-DRS được thu thập bởi TQ Analyst 8. {{7 }}. Phân tích Hình vuông ít nhất một phần (PLS) được sử dụng để thiết lập một mô hình định lượng cận hồng ngoại. Kết quả: Hệ số xác định R- là {{1 0}}. 9878. Lỗi trung bình gốc xác thực chéo (RMSECV) là 0. 0193 phần trăm, xác thực mô hình bằng tập hợp xác thực. Sai số trung bình gốc của dự đoán (RMSEP) là 0,1064 phần trăm. Tỷ lệ giữa độ lệch chuẩn của các mẫu xác nhận với sai số chuẩn của dự đoán (RPD) là 5,5130. Kết luận: Phương pháp này thuận tiện và hiệu quả, mô hình được thiết lập bằng thực nghiệm có khả năng dự đoán tốt và có thể được sử dụng để xác định nhanh hàm lượng Shengmaxinside I trong chế biến Rhizoma Cimicifuga chiên mật ong.

Từ khóa:Rhizoma Cimicifugae; chế biến chiên mật ong, quang phổ cận hồng ngoại; mô hình định lượng

1. Giới thiệu

Rhizoma Cimicifugae có nguồn gốc chủ yếu từ Cimicifuga heracleifolia Kom., Cimicifuga dahurica (Tiurcz.) Maxim., Hoặc Cimicifuga foetida L. [1]. Nó là một loại thuốc mát và giải cảm thường được sử dụng trong y học cổ truyền Trung Quốc. Lần đầu tiên nó được ghi lại trong "Sheng Nong's thảo dược cổ điển" và xuất hiện như một loại thuốc "hàng đầu". Nó có tác dụng thanh nhiệt, giải độc, nâng dương [1]. Cimicifuga thích hợp trồng ở núi, rừng và đồng cỏ ven đường cao khoảng 2000 m so với mực nước biển, và vùng sản xuất chính của chúng là ở ba tỉnh đông bắc Trung Quốc [2l. Cimicifuga Simplex Wormsk là một loại thảo mộc sống lâu năm, thích hợp trồng ở vùng khí hậu ấm, ẩm và mùn hơi chua. Trong việc canh tác Cimicifugae, cần tránh cho đất bị khô hạn.

CISTANCHE ACTEOSIDE BỔ SUNGCÓNHIỀU HIỆU QUẢ

Ngoài ra, cây con của họ Cimicifugae sợ ánh sáng mạnh, nhưng thời kỳ ra hoa của nó cần có đủ ánh sáng mặt trời [3].

Cho đến nay, có báo cáo rằng Cimicifugae chủ yếu chứa triterpenoids, saponin triterpene, phenylpropanoids [4], chromone, dầu dễ bay hơi, và các hợp chất khác [5]. Một trong những hợp chất saponin triterpene là Shengmaxinside I có tác dụng hạ sốt và giảm đau [4. Ngoài ra, theo các nghiên cứu gần đây, saponin Cimicifugae còn có tác dụng chống khối u, chống viêm, chống virus, bảo vệ gan, chống vận chuyển nucleoside, chống loãng xương, chống oxy hóa [6].

Theo nhu cầu điều trị bệnh lâm sàng, các loại thuốc Đông y phải được chế biến trước khi sử dụng để nâng cao tác dụng chữa bệnh và mở rộng phạm vi ứng dụng. Ngoài ra, các nhà y học Trung Quốc tin rằng mật ong có vị ngọt và tính bình, nó bổ phổi và làm dịu đi tiêu. Sau khi chế biến với mật ong, các loại thuốc Trung Quốc có thể có tác dụng tăng cường bổ tỳ khí, làm ẩm phổi, giảm ho, và nó có thể cải thiện hương vị của các loại thảo mộc [7]. Trong các ứng dụng lâm sàng, Rhizoma Cimicifuga thường được chế biến với mật ong để tăng cường các đặc tính của nó, làm cho nó thích hợp hơn để điều trị sa trực tràng, sa tử cung và các bệnh lý khác.

Tuy nhiên, cho đến nay, vẫn chưa có một phương pháp hoàn hảo để đánh giá các hợp chất hoạt tính của Rhizoma Cimicifuga đã được chiên với mật ong. Phương pháp truyền thống để xác định hàm lượng Shengmaxinside I là sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) hoặc sắc ký lỏng hiệu năng siêu cao với khối phổ tứ cực thời gian bay [8]. Tuy nhiên, quy trình chiết xuất trước đây rất rườm rà và mất nhiều thời gian [9] nên không đáp ứng được yêu cầu phân tích nhanh một lượng lớn dược liệu.

Trong những năm gần đây, Quang phổ phản xạ khuếch tán hồng ngoại gần đã có ứng dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực. Nó có ưu điểm là sử dụng đơn giản và thuận tiện, phân tích nhanh và không gây hư hỏng mẫu, là công nghệ phân tích không xâm lấn thân thiện với môi trường, nhanh chóng và tiện lợi [10]. Ví dụ, nó được sử dụng để đo nhanh độ ẩm của hạt cà phê [11], đo hàm lượng kim loại nặng trong đất [12], và xác định các chất gây ô nhiễm đồng và kẽm trong Ludwigia prostrata Roxb, v.v. [13]. Hơn nữa, nó cũng đã đạt được sự phát triển nhanh chóng trong phân tích y học cổ truyền Trung Quốc, ví dụ, sáu thành phần hoạt tính của Cistanche Desticola có thể được đo cùng một lúc bằng kỹ thuật này [14]. Kỹ thuật này phản ánh toàn diện thông tin tổng thể của các loại dược liệu và tạo điều kiện thuận lợi cho việc phân tích cụm vĩ mô [15]. Người ta đã báo cáo rằng saponin có thể được phát hiện bằng quang phổ phản xạ khuếch tán cận hồng ngoại, bao gồm Ginsenosides [16, Notoginsenoside [17], v.v. Có thể sử dụng quang phổ NIR để phân tích vật liệu trong Cimicifuga. Như đã báo cáo, NIR-DRS có thể xác định polyphenol và triterpene glycoside [18].

Trong các nghiên cứu trước đây, chúng tôi đã thiết lập thành công mô hình xác định axit ferulic trong Rhizoma Cimicifugae bằng phương pháp quang phổ cận hồng ngoại [19]. Mục đích của nghiên cứu này là nhanh chóng sử dụng kỹ thuật quang phổ cận hồng ngoại để đo hàm lượng ferit trong Cimicifuga. Việc phát hiện hàm lượng saponin bằng phương pháp quang phổ cận hồng ngoại có ý nghĩa thực tiễn rất lớn.

2. Vật liệu và phương pháp

2.1. Vật liệu

Quang phổ kế cận hồng ngoại biến đổi Fourier Antaris II (Thermo Scientific, Inc., Waltham, MA, USA); Agilent 1200 HPLC (Agilent Technologies, Inc., Palo Alto, CA, USA); Máy phát hiện bay hơi vô cực 1260 (Agilent Technologies, Inc., Palo Alto, CA, USA) G2070BA Workstation; Thiết bị bay hơi quay N -1100 (EYELA Shanghai Ai Lang Instrument Co., Shanghai, Ltd., Shanghai, China) đã được sử dụng. Axetonitril và axit formic cấp HPLC được mua từ Fisher Chemicals (Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Tất cả các thuốc thử khác là các lớp phân tích.

Cimicifuga được mua từ các lô khác nhau ở các khu vực sản xuất khác nhau trên khắp Trung Quốc. Tổng cộng 150 lô được sản xuất ở An Huy Bố Châu, Đại Đồng Sơn Tây, Cam Túc, Vân Nam, Sơn Tây, Tứ Xuyên, Hà Nam, Đông Bắc và những nơi khác được thể hiện trong Bảng 1.

Sản phẩm tiêu chuẩn Shengmaxinside I (16, 17- didehydro -24 SO-acetylhydroshengmanol -3- O - - D-galactopyranoside) được điều chế trong phòng thí nghiệm và độ tinh khiết của nó đạt 95 phần trăm. Cấu trúc được thể hiện trong Hình 1. The'H-NMR cho thấy rằng các tín hiệu ma trận xiclopropan δH 0. 16 （1H, d, J =3. 8Hz） và H 0. 59 ( 1H, d, / =3. 8 Hz) và tín hiệu proton metylen có thể được nhìn thấy trong vùng trường cao. J =6. 8 Hz, 6 tín hiệu metyl proton, 4 tín hiệu proton oxo-metyl , 1 tín hiệu ma trận acetyl và 1 tín hiệu proton đầu cuối đường, cho thấy xương sống là 9, 19- saponin triterpenoid Cyclopentane. 13C-NMR cho thấy rằng từ các tín hiệu cacbon của bc 121,4 và 151. 0, liên kết đôi nằm ở vị trí C {38}} và 17, nghĩa là Dring của 25 bị khử nước ở C { Vị trí {41}} và C -17 để tạo thành một liên kết đôi, là một vòng loại hydroshengmanol của các saponin triterpene trong quả dứa.

2.2. Xác định Shengmaxinside I bằng HPLC

2.2.1. Điều kiện sắc ký

C18 cột kromasil (2 0 0 mm × 4,6 mm, 5 um), nhiệt độ cột 25 độ. Pha động: rửa giải theo độ dốc của axetonitril (A) và 0. 1 phần trăm axit formic trong nước (B) (0 đến 5 phút, 95 phần trăm B; 5 đến 20 phút, 95 phần trăm đến 60 phần trăm B; 20 đến 36 phút, 60 đến 45 phần trăm B; 36 ~ 41 phút, 45 phần trăm B; 41 ~ 45 phút, 45 ~ 0 phần trăm B), tốc độ dòng chảy: 1,0 mL · phút -1, phát hiện bằng máy dò tán xạ ánh sáng bay hơi, nhiệt độ ống trôi 80 độ, áp suất sóng mang 3,50 bar, và số đĩa lý thuyết không ít hơn 5000.

2.2.2. Phương pháp xác định

Dung dịch Shengmaxinside 20μL được tiêm vào HPLC trong 45 phút. Giải pháp thử nghiệm được xử lý theo cách tương tự.

2.2.3. Chuẩn bị dung dịch tham khảo

Hòa tan 1,53 mg mẫu Shengmaxinside I trong 10 mL dung dịch etanol 70% để thu được dung dịch chuẩn.

2.2.4. Chuẩn bị Giải pháp Kiểm tra

Chúng tôi đã cân chính xác Rhizoma Cimicifugae 1. 000 g trong một bình cầu đáy tròn. Sau khi chúng tôi thêm 4 0 mL dung dịch etanol 70 phần trăm và đun nóng, hồi lưu và chiết nó trong 2 giờ, và sau đó nó được lọc. Sau đó, chúng tôi thêm 40 mL dung dịch ethanol 70% một lần nữa và lặp lại thao tác trên hai lần. Các giải pháp được hợp nhất và sau đó bay hơi. Kết tủa thu được được hòa tan trong 50 mL etanol 70% và được lọc bằng màng vi xốp 0,22 um để lấy dung dịch thử.

2.2.5. Điều tra mối quan hệ tuyến tính

Chúng tôi đã hấp thụ chính xác 4. 0, 6. 0, 8. 0, 1 0. 0, 12. 0 và 14. Đã tiêm 0 μL dung dịch chuẩn ShengmaxinsideI vào 2 0 μL mẫu và diện tích pic （Y） được vẽ theo nồng độ của dung dịch đối chiếu (X). Đường cong chuẩn của Shengmaxinside I thu được là y =1. 5609x cộng với 5.1509 (r =0. 999), cho thấy mối quan hệ tuyến tính tốt giữa nồng độ và diện tích pic trong khoảng 0,0306 mg đến 0,1071 mg.

2.2.6. Thử nghiệm chính xác

20 μL dung dịch đối chiếu được dùng pipet chính xác và bơm liên tục 5 lần theo các điều kiện sắc ký ở trên. Giá trị RSD của Shengmaxinside I là 0. 91 phần trăm, được tính từ diện tích đỉnh, cho thấy rằng độ chính xác của thiết bị là tốt.

2.2.7. Thử nghiệm độ ổn định

Đối với cùng một dung dịch thử nghiệm, diện tích pic lần lượt được đo ở 0, 4, 8, 12 và 24 h theo các điều kiện sắc ký ở trên và RSD là 1,79 phần trăm, cho thấy rằng dung dịch thử nghiệm là ổn định trong vòng 24 giờ.

2.2.8. Thử nghiệm lặp lại

5 mẫu từ cùng một lô được cân chính xác và chuẩn bị theo phương pháp của dung dịch thử. Theo các điều kiện sắc ký ở trên, hàm lượng trung bình được xác định là 0. 425 phần trăm và RSD là 0. 89 phần trăm, cho thấy rằng phương pháp có độ lặp lại tốt.

2.2.9. Thử nghiệm khôi phục mẫu

Chúng tôi hấp thụ chính xác dung dịch mẫu và thêm vào dung dịch chuẩn của các gradient nồng độ cao, trung bình và thấp của Shengmaxinside I, sau đó nhiễm 20 uL của mỗi mẫu để xác định độ thu hồi của các thành phần tương ứng theo các điều kiện sắc ký trên. Tỷ lệ phục hồi trung bình là 99,14 phần trăm và RSD là 1,75 phần trăm.

2.3. Thu nhận quang phổ

Dải phổ quét là 12, 000-4000 cm -1 với tỷ lệ phân giải là 0. 5 cm -1. Hai gam bột thuốc được cho vào cốc đựng mẫu bằng thạch anh. Mỗi lô trong số 150 lô được tải lại và quét 3 lần. Mức trung bình sau đó đã được lấy. Các phổ được phát hiện được xếp chồng lên nhau (tất cả là 150), như thể hiện trong Hình 2.

2.4 Chỉ số đánh giá mô hình hồng ngoại gần và thiết lập các phương pháp mô hình hóa


When establishing a quantitative analysis model of NIR-DRS analysis, TQ Analyst 8.0 data processing software is used. Multi-linear regression (MLR), Step-wise Multi-linear regression (SMLR), Principal component regression (PCR), Partial Least Squares (PLS), and other methods can help establish the model. In the past, MLR was used for correction data. However, PCR and PLS have been widely used because the new generation of NIR spectrometers can collect spectra in all NIR bands. For the determination of complex sample systems, both PCR and PLS can be applied. Compared with MLR, PCR is slower and the understanding of the model is less intuitive. The most important thing is that it can identify the main factors that affect the system and can solve the problems of colinearity and the number of variables in the linear regression analysis. Relative to the former, PLS establishes a more robust model with the widest range of applications, and the resulting eigenvectors are directly related to sample properties [20]. Therefore, PLS was determined as an analytical method after a comprehensive comparison.
While establishing a quantitative analysis model, the performance of the model has to be evaluated. In the NIR-DRS analysis, there are two inspection indicators that are commonly used for quantitative analysis of model results. One is the Cross-Validation Root Mean Square Error(RMSECV), and the other is the determination coefficient (R>). Giá trị R càng gần 1 thì mối tương quan giữa giá trị dự đoán của mô hình và giá trị đo được của mẫu càng tốt; và RMSECV càng nhỏ, hiệu suất của mô hình càng ổn định và độ chính xác càng cao [21]. Các mẫu xác minh được sử dụng để xác minh mô hình định lượng NIR-DRS bằng cách lấy Dự đoán Lỗi bình phương gốc (RMSEP) làm chỉ số kiểm tra. RPD là tỷ số giữa độ lệch chuẩn của các mẫu xác nhận với sai số chuẩn của dự đoán, cũng là chỉ số kiểm tra.

2.5. Bộ phận Chỉnh sửa và Bộ phận Xác minh

Một trăm năm mươi quang phổ thu được bằng Máy quang phổ cận hồng ngoại biến đổi Antaris I Fourier. Bên cạnh đó, phần mềm xử lý dữ liệu TQ Analyst 8. 0 đã chọn ngẫu nhiên 12 0 phổ đại diện làm bộ hiệu chuẩn và 3 0 làm bộ xác nhận. Phạm vi nội dung tập hợp xác thực là 0,12 phần trăm -0. 52 phần trăm (w / w) và phạm vi nội dung tập hợp xác thực là 0,14 phần trăm -0. 50 phần trăm (w / w). Vì nội dung của Shengmaxinside Trong bộ mẫu xác minh nằm trong phạm vi nội dung bộ hiệu chuẩn, bộ hiệu chuẩn và bộ xác minh này có thể được sử dụng để lập mô hình. 3. Kết quả và kết luận 3.1. Hàm lượng Shengmaxinside I trong chiết xuất Rhizoma Cimicfugae Theo phương pháp trên, hàm lượng ShengmaxinsideI trong mẫu Rhizoma Cimicifugae được xác định. Sắc đồ như hình 3. Như hình 3: A. Chất đối chiếu; B.Mẫu; 1. Shengmaxinside I

Hình 3. Sắc ký đồ HPLC của hàm lượng Shengmaxinside I từ Rhizoma Cimicifuga. Để tính hàm lượng ShengmaxinsideI trong Rhizoma Cimicifugae, hàm lượng mẫu được tính dựa trên sản phẩm khô. Mỗi lô mẫu được đo song song và lấy giá trị trung bình. Kết quả cho thấy 15 0 mẫu dao động từ 0. 12 phần trăm đến 0,52 phần trăm (w / w), được hiển thị trong Bảng 2. Bảng 2.

3.2. Thiết lập và lựa chọn mô hình định lượng cận hồng ngoại

3.2.1. Điều tra về phương pháp cận hồng ngoại

Chúng tôi cân 2 g bột Cimicifugae và thu thập tín hiệu 9 lần trong cùng điều kiện quang phổ để tính toán độ chính xác. RSD là 1,09 phần trăm. Từ Hình 2, chúng ta có thể nhận được thông tin sau. Có một vài cực đại đặc trưng được hấp thụ trong dải số sóng 8500-12, 000 cm -1. Trong dải 4000-4200 cm -1, sự hấp thụ của sợi không phù hợp để lập mô hình vì nó chứa nhiều nhiễu hơn. Có các đỉnh hấp thụ đặc trưng riêng biệt trong phạm vi 4500-8500 cm-l, và do đó, mô hình hóa chọn lọc được chọn trong phạm vi dải này. Theo phổ NIR thô (Hình 2) của 150 mẫu ở các số dao động từ 4 000 đến 10.000 cm -1, có thể thấy một số đỉnh hấp thụ đặc trưng. Ví dụ, 4250 cm-! là độ giãn của CH / độ biến dạng CH, 4357 cm -1 là tổ hợp kéo dài và uốn của -CH2, 4762 cm -1 là hiệu suất của dao động kéo căng của các liên kết CC và C=C, 5168 cm-Do âm bội thứ hai của C=O kéo dài dải axetyl và có thể kéo dài và biến dạng liên kết OH, 5776 cm-Kết quả từ âm bội thứ nhất của việc kéo dài liên kết CH, và 6848 cm-là OH kéo dài âm bội thứ nhất. Ngoài ra, âm bội thứ hai của sự kéo dài CH phát sinh xung quanh 8248 cm-I [22-25. Những tín hiệu này có thể phản ánh thông tin hóa học của Shengmaxinside I.

3.2.2. Lựa chọn các phương pháp tiền xử lý quang phổ

Trong quá trình thu thập mẫu, do ảnh hưởng của kích thước hạt, màu sắc và phản ứng của thiết bị, phổ thô cận hồng ngoại thường chứa các yếu tố không liên quan đến bản chất của mẫu cần đo, dẫn đến nhiễu như như dịch chuyển hoặc trôi phổ hồng ngoại gần. Vì vậy, cần phải tiến hành tiền xử lý [2]. Về mặt RMSECV, RMSEP và giá trị của các chỉ số R- as, chúng ta cần kiểm tra phổ, đạo hàm bậc nhất (FD), đạo hàm bậc hai (SD), hiệu chỉnh nhiều tán xạ (MSC) và hiệu chỉnh biến chuẩn (SNV), lọc Savitzky-Golay (SG) cổ điển, lọc dẫn xuất Norris và nhiều phương pháp tiền xử lý khác. Với việc xử lý dữ liệu dưới dạng chỉ số, R2 và RMSECV được kiểm tra toàn diện. Như được trình bày trong Bảng 3, phương pháp tiền xử lý để xác định mô hình Shengmaxinside I là MSC cộng với SD cộng với SG. Bảng 3. Ảnh hưởng của các phương pháp tiền xử lý khác nhau đến mô hình định lượng (4500-8500 cm -1). Phương pháp R2 R2

3.2.3. Lựa chọn dải phổ

Dựa vào phổ hấp thụ của từng nhóm chứa hiđro, người ta thu được hàm lượng của vật liệu trong các mẫu. Tuy nhiên, thông tin chứa trong các dải phổ khác nhau là khác nhau. Do đó, có thể thu được mô hình định lượng chính xác hơn bằng cách chọn mô hình khoảng phổ thích hợp [26]. Trong nghiên cứu này, phổ của sản phẩm tiêu chuẩn Shengmaxinside I được so sánh với nhiều phạm vi và R2, RMSECV, RPD và RMSEP được chọn làm các chỉ số toàn diện để kiểm tra. Như được trình bày trong Bảng 4, phổ được sử dụng để lập mô hình cuối cùng đã được xác định và các khoảng là 5200-6700 cm -1 và 7700-8800 cm -1. Có ít đỉnh đặc trưng bị hấp thụ trong dải bước sóng 8500-12, 000 cm -1.

3.2.4. Lựa chọn nhân tố chính tốt nhất

Khi thiết lập một mô hình cận hồng ngoại, điều đặc biệt quan trọng là phải xác định số lượng các yếu tố chính tốt nhất liên quan đến mô hình. Nếu các yếu tố chính quá ít, nhiều thông tin hữu ích của phổ ban đầu sẽ bị mất và sự phù hợp sẽ không đủ, điều này sẽ làm giảm độ chính xác dự đoán của mô hình; nếu quá nhiều, tiếng ồn đo sẽ quá cao. Hiện tượng overfitting xuất hiện làm giảm khả năng dự đoán của mô hình [23]. Số lượng các yếu tố PLS có thể được xác định từ Dự đoán Dư lượng Bình phương (PRESS) và RMSECV. Số lượng các yếu tố PLS được xác định là 6.

3.2.5. Xác minh mô hình

Mô hình được thiết lập bằng phương pháp PLS thông qua phần mềm TQ Analyst 8. 0 và phổ được xử lý trước bởi MSC plus SD plus SG. Phạm vi quang phổ là 5200-6700 cm -1 và 7700-8800 cm -1, và số lượng yếu tố là 6. Hệ số xác định của mô hình Shengmaxinside I là {{7} } .9878 phần trăm, lỗi bình phương trung bình đã sửa (RMSECV) là 0. 0193 phần trăm và RPD là 5,5130, như được hiển thị trong Bảng 5. Các mẫu thí nghiệm được chọn từ 500 mẫu và được chọn bởi phần mềm WinlSI4.3 để thu được 150 mẫu tuân theo phân bố "boxcar", và hàm lượng của mỗi mẫu được thể hiện trong Bảng 2. Mối tương quan giữa hàm lượng dự đoán và hàm lượng xác thực được hiển thị trong Hình 4.

Một trăm năm mươi bộ dữ liệu NIR-DRS thuộc bộ xác minh đã được thay thế vào mô hình, đồng thời thu được bản đồ phân bố lỗi và biểu đồ so sánh xu hướng tương đối giữa giá trị dự đoán NIR-DRS của bộ xác nhận và giá trị đo thực tế của phương pháp tham chiếu. Mô hình có RMSEP sai số trung bình được dự đoán là 0. 1064 phần trăm, được hiển thị trong Hình 5 và mô hình có khả năng dự đoán tốt.

4. Thảo luận

Trong giai đoạn đầu của thí nghiệm này, chúng tôi đã tìm hiểu phương pháp xác định Shengmaxinside In Cimicifugae bằng HPLC, phương pháp này có độ chính xác và độ chính xác cao. Trên cơ sở này, chúng tôi chiết xuất dược liệu cây mật nhân từ các lô khác nhau có nguồn gốc khác nhau và xác định hàm lượng Shengmaxinside I. Kết quả cho thấy sự khác biệt giữa các vùng ảnh hưởng đến hàm lượng của các thành phần này, tạo cơ sở cho khả năng ứng dụng rộng rãi của các thành phần tiếp theo. các mô hình định lượng. Đây là lần đầu tiên mô hình xác định hàm lượng thuốc bắc trong chế biến mật ong của NIR-DRS được xây dựng nên kết luận này đóng vai trò mẫu mực cho các nghiên cứu khác về chế biến thuốc bắc. Sử dụng quang phổ cận hồng ngoại kết hợp với các phương pháp đo hóa học, một mô hình định lượng của Dhengmaxinside I ở Cimicifugae đã được thiết lập. Trong quá trình xây dựng mô hình, hầu hết đều dựa vào phần mềm phân tích và các phương pháp thống kê để giảm thiểu sai số do con người vận hành. Ở một mức độ nhất định, nó dự đoán độ tin cậy và độ chính xác của kết quả và cải thiện hiệu quả của phép đo mẫu. Kết quả thực nghiệm cho thấy mô hình được thiết lập có khả năng dự báo tốt. Tuy nhiên, trong quá trình sản xuất và phân tích thực tế, cần có phương pháp nhanh hơn vì miễn là thu được phổ NIR bằng cách quét các mẫu bột trong mô hình phân tích định lượng cận hồng ngoại đã thiết lập, thì hàm lượng Dhengmaxinside I trong các mẫu Cimicifugae có thể nhanh chóng dự đoán. Do đó, trong nghiên cứu này, một mô hình định lượng gần hồng ngoại của Shengmaxinside I được thiết lập bởi NIR-DRS kết hợp với các phương pháp đo hóa học. So sánh hai phương pháp xác định hàm lượng, NIR-DRS thuận tiện hơn và nhanh hơn HPLC. Nó phù hợp để xác định các lô lớn dược liệu mà không làm hỏng mẫu và an toàn và thân thiện với môi trường. Tuy nhiên, một hạn chế là nó đòi hỏi phải thiết lập một mô hình định lượng và một phương pháp đo lường hóa học xác định được yêu cầu làm chất lót, điều này không phù hợp để xác định một mẫu nhỏ hoặc một liều lượng nhỏ của một loại thuốc chưa được làm mẫu. Hơn nữa, các nguồn Cimicifuga được sử dụng để thiết lập mô hình này đều từ Trung Quốc, do đó có thể có những hạn chế trong việc phân tích Cimicifuga từ các khu vực khác. Mặc dù công nghệ quang phổ cận hồng ngoại rất tiện lợi và nhanh chóng nhưng quá trình thiết lập mô hình ở giai đoạn đầu rất phức tạp và cần dựa trên các phương pháp hóa học truyền thống và không thể thay thế hoàn toàn. Do đó, để khai thác triệt để thế mạnh của phương pháp NIR-DRS, các nghiên cứu tiếp theo sẽ được dành để thiết lập một thư viện rộng lớn về các mô hình cận hồng ngoại y học cổ truyền Trung Quốc. Đóng góp của Tác giả: Đóng góp của LW và YSmade vào Quản lý dữ liệu, Mua lại tài trợ, Phân tích chính thức, Điều tra, Phương pháp luận; HYmade đóng góp cho Phân tích chính thức, Viết bản thảo gốc, Viết-đánh giá & chỉnh sửa; XQand XZ đóng góp vào Xác thực, Viết-đánh giá & chỉnh sửa; QWand HK đóng góp vào việc lên ý tưởng, quản lý dự án, giám sát; GCmade đóng góp cho Tài nguyên. Kinh phí: Nghiên cứu này được tài trợ bởi Quỹ Khoa học Tự nhiên Quốc gia Trung Quốc (Khoản tài trợ số 81603416, 81603418), bởi Quỹ Khoa học Hậu tiến sĩ Trung Quốc (Khoản tài trợ số 2016M600267) và bởi Quỹ Hậu tiến sĩ Hắc Long Giang thứ bảy (Khoản tài trợ số LBH-TZ1619 , LBH-Q17167), và bởi Chương trình Điều dưỡng Đại học dành cho Học giả Trẻ có Tài năng Sáng tạo ở Tỉnh Hắc Long Giang (Số tài trợ UNPYSCT -2016207 UNPYSCT -2016075), và bởi Quỹ Khoa học Tự nhiên của Tỉnh Hắc Long Giang (Số Tài trợ . H2016062). Xung đột lợi ích: Các tác giả tuyên bố không có xung đột lợi ích. Bài báo này không chứa bất kỳ nghiên cứu nào với người tham gia hoặc động vật được thực hiện bởi bất kỳ tác giả nào.

Bài báo

Xác định nhanh Saponin trong chế biến mật ong Rhizoma Cimicifugae bằng Quang phổ phản xạ khuếch tán hồng ngoại gần

Lun Wu1t, Yang Su2t, Haoran Yu1, Xiuhui Qian1, Xueting Zhang1, Qiuhong Wang 3, *, Haixue Kuang2 và Genhong Cheng 4

1 Viện Y học Cổ truyền Trung Quốc, Đại học Y học Trung Quốc Hắc Long Giang, Cáp Nhĩ Tân 150040,

Trung Quốc; wulun2012@163.com (LW); yuhaoran94@163.com (HY); qxh _1027 @ 126.com (XQ); 18845055847@163.com (XZ)

2 Khoa Dược, Đại học Y khoa Hắc Long Giang, Phòng thí nghiệm Trọng điểm về Dược liệu,

Chinese Academy of Sciences, Harbin 150040, China; suyanggo@163.com

3 Khoa Y học Cổ truyền Trung Quốc, Đại học Dược Quảng Đông, Quảng Châu 510000, Trung Quốc 4 Khoa Vi sinh và Di truyền Miễn dịch, Đại học California, Los Angeles, CA 90095, Hoa Kỳ;

gcheng@mednet.ucla.edu

Nhận: 8 tháng 6 năm 2018; Được chấp nhận: ngày 29 tháng 6 năm 2018; Xuất bản: 3 tháng 7, 2018

Người giới thiệu

1. Ủy ban Dược điển Quốc gia. Dược điển của Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa. Phần I; Nhà xuất bản Khoa học và Công nghệ Y tế Trung Quốc: Bắc Kinh, Trung Quốc, 2015; trang 73–74.

2. Yu, Y.-E. Thành phần hóa học của Cimicifuga. Luận văn Thạc sĩ, Đại học Chiết Giang, Chiết Giang, Trung Quốc, 2017.

3. Rong, G.; Chen, Y. Rong, G. Nghiên cứu về công nghệ canh tác nhân tạo của Cimicifuga. Nông nghiệp. Nhà phát triển. Trang bị. 2015, 2, 124–125.

4. Liu, Y.; Chen, D.; Chen, X. Các nghiên cứu hóa học, dược lý và lâm sàng của Cimicifuga. Med nước ngoài. Thuốc thực vật Sect. 2001, 16, 55–58.

5. Gao, C.-C.; Peng, Y. Yang, M.-S. Một nghiên cứu sơ bộ về khả năng chữa bệnh của các cây Siberi thuộc họ Ranunculaceae. J. Gen thực vật. 2008, 46, 516–536.

6. CN, Q.; Zuo, A. .; Zhang, T. Tiến độ nghiên cứu về thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và ứng dụng lâm sàng của Cimicifuga. Cái cằm. Truyền thống. Thảo mộc. Thuốc 2017, 48, 3005–3016.

7. Ma, C.; Vương, X.; Xin, Y .; Ngụy, Y. Cao, G.; Yang, P. Tổng quan về nghiên cứu hiện đại về lý thuyết chế biến truyền thống của y học cổ truyền Trung Quốc. Cái cằm. Truyền thống. Thảo mộc. Thuốc 2018, 49, 512–520.

8. Quạt, M.; Tần, K.; Fei, D.; Hoàng, Y .; Vương, X.; Cai, B. Xác định và phân biệt các thành phần chính trong ba loài thuốc thô "sheng-ma" khác nhau bằng uplc / q-of-ms. Acta Pharm. Tội. B 2017, 7, 185.

9. Vương, Q.; Su, Y.; Ngô, L.; Wang, Z .; Yang, B.; Jin, H. Tối ưu hóa quy trình chiết xuất cimicifuga bằng phương pháp thiết kế-bề mặt phản ứng điểm sao. Trung Quốc J. Exp. Truyền thống. Med. Công thức. 2012, 18, 24–27.

10. Liu, X.; CN, F.; Jin, Y .; Ngô, Y .; Chàng.; Zhu, L. .; Yan, D. Ứng dụng quang phổ cận hồng ngoại kết hợp với bình phương nhỏ nhất tối ưu hóa bầy hạt hỗ trợ thuật toán máy vectơ trong việc kiểm tra chất lượng dược liệu Hawthorn. Cái cằm. J. Pharm. Khoa học. 2015, 50, 1645–1651.