Xác định đồng thời Echinacoside và 2,3,5,4'-tetrahydroxy Stilbene-2-Ο- -D-glucoside trong chất lỏng uống Congrong Tongbian bằng HPLC

Trừu tượng:Mục tiêu là xác định đồng thời echinacoside và 2,3,5,4'-tetrahydroxy stilbene-2-Ο- -D-glucoside trong dịch tiêu hóa Congrong bằng HPLC. Cột Tech Mate C18-ST (4,6 mm×250.0 mm, 5 μm) được sử dụng với quá trình rửa giải gradient bằng dung dịch axit formic acetonitril-0.2%; bước sóng phát hiện là 33{27}}nm; tốc độ dòng chảy là 1.0 mL/phút. Kết quả cho thấy echinacoside và 2,3,5,4'-tetrahydroxy stilbene-2-Ο- -D-glucoside trong mẫu có độ phân giải tốt từ các pic sắc ký liền kề với mối quan hệ tuyến tính tốt trong khoảng 0 .159 3-0.955 8 ug và 0.385 3-4.623 5 ug. Phương pháp đã được thiết lập rất đơn giản và chính xác và có thể được sử dụng để xác định echinacoside vàstilbene glycoside trong dịch tiêu hóa Congrong.

Từ khóa:Dung dịch uống tiêu hóa Congrong;echinacoside; 2,3,5,4'-tetrahydroxystilbene-2-Ο- -D-glucoside; HPLC

CHIẾT XUẤT CISTANCHE HỮU CƠ VỚI 30% ECHINACOSIDE VÀ 12% ACTEOSIDE

Tiêu chuẩn chất lượng hiện nay củaCistanche RongDung dịch uống tiêu hóa có các vấn đề như hạng mục kiểm tra đơn giản, khả năng hoạt động kém, thao tác rườm rà và tốn thời gian. Ngoài các hạng mục kiểm tra chung, tiêu chuẩn chỉ có các hạng mục nhận dạng lớp mỏng cho Polygonum multiflorum và Citrus aurantium, và Polygonum multiflorum và Citrus aurantium. Phương pháp nhận dạng sắc ký lớp mỏng thực tế không đủ nghiêm ngặt và khả năng hoạt động kém. Mục xác định hàm lượng sử dụng phương pháp quang phổ tia cực tím để phát hiện 1,8-dihydroxyanthraquinone trong chất lỏng uống Cistanche purpurea. Vì phương pháp này yêu cầu chiết hồi lưu nhiều lần nên thao tác rất cồng kềnh và tốn thời gian, độ tái lập và độ chính xác kém. Chất lượng của dược liệu gốc không thể được kiểm soát và việc kiểm soát chất lượng của thuốc vua Cistanche Deserticola còn thiếu. Trong công trình nghiên cứu tiêu chuẩn này, việc xác địnhechinaceaside ở Cistanche DeserticolaVàstilbene glycoside trong Polygonum multiflorumtrong chất lỏng uống Cistanche Deserticola đã được nghiên cứu. Dựa trên thành phần của công thức và đặc điểm của quy trình, pha lỏng hiệu suất cao đã được thiết lập. Phương pháp sắc ký được sử dụng để xác định echinacoside và stilbene glycoside trong Dung dịch uống tiêu hóa Cistanche Rong và giới hạn hàm lượng của nó được xây dựng để cải thiện và cải thiện hơn nữa các tiêu chuẩn kiểm soát chất lượng. Phương pháp xác định đơn giản và nhanh chóng, giới hạn hàm lượng được xây dựng hợp lý. Sau khi xác minh về mặt phương pháp, độ chính xác, độ chính xác, độ tuyến tính, độ bền và độ chính xác phạm vi là tốt và chúng có thể được sử dụng để xác định hàm lượng của Chất lỏng uống Cistanche Rong Tongbang [1-5].

1 Dụng cụ và thuốc thử

1.1 Dụng cụ

Máy sắc ký lỏng hiệu năng cao nước (2695 và ARC); Cân điện tử 1/100,000 (MS205DU), cân điện tử 1/10,000 (ME204E, Mettler-Toledo).

1.2 Thuốc thử và thuốc thử

Phía Echinacea (số lô 110670-201706, độ tinh khiết 89,7%); stilbene glycoside (số lô 110844-201915, độ tinh khiết 90,7%), tất cả đều do Viện Kiểm soát Thực phẩm và Dược phẩm Trung Quốc cung cấp; Chất lỏng uống Cistanche purpurea (số lô 20191204, 20191205, 20191206, 20200404, 20200405, 20200406, 20200407, 20200408, 20200409, 20200410), được cung cấp bởi một công ty dược phẩm ở Cam Túc; metanol, v.v... có độ tinh khiết về mặt sắc ký; nước là nước siêu tinh khiết; các thuốc thử khác là loại phân tích.

2 Phương pháp và kết quả

2.1 Điều kiện sắc ký

Sử dụng Tech Mate C{{0}}ST (4,6 mm × 250.0 mm, 5 μm) làm cột sắc ký, sử dụng acetonitril làm pha động A và sử dụng Dung dịch axit formic 0,2% làm pha động B. Tiến hành rửa giải gradient theo quy định tại Bảng 1; nhiệt độ cột Nhiệt độ là 35 độ; bước sóng phát hiện là 330 nm; tốc độ dòng là 1,0 mL/phút; thể tích tiêm của mẫu thử và chất đối chiếu là 10 µL mỗi loại; số lượng đĩa lý thuyết không được ít hơn 4000 dựa trên đỉnh echinaceaside.

2.2 Chuẩn bị dung dịch

Chuẩn bị dung dịch đối chiếu: Lấy một lượng thích hợp chất đối chiếu echinaceaside và chất đối chiếu stilbene glycoside, cân chính xác và thêm 70% metanol để chuẩn bị dung dịch hỗn hợp chứa 70 ug echinaceaside và 150 ug stilbene glycoside trên 1 mL. , đó là nó. Chuẩn bị dung dịch thử: Lắc đều sản phẩm, lấy khoảng 0,3 g, cân chính xác, cho vào bình định mức màu nâu 25 mL, thêm một lượng thích hợp metanol 70%, siêu âm trong 30 phút, để nguội, thêm 70 Pha loãng % metanol đến vạch, lắc đều, lọc, lấy phần dịch lọc còn lại thu được. Chuẩn bị dung dịch mẫu âm tính: Cân chính xác khoảng 0,3 g mẫu âm tính và chuẩn bị theo phương pháp chuẩn bị dung dịch thử.

Hình 1 Sắc ký đồ HPLC của dịch tiêu hóa Congrong

2.3 Đánh giá phương pháp luận

2.3.1 Đường cong làm việc và phạm vi tuyến tính

Vẽ chính xác dung dịch tham chiếu hỗn hợp và thêm 70% metanol để chuẩn bị một loạt dung dịch tham chiếu hỗn hợp. Rút chính xác 1{{20}} µL của mỗi dãy dung dịch đối chứng trên, bơm vào máy sắc ký lỏng và đo giá trị tích phân diện tích pic. Lấy nồng độ của dung dịch đối chiếu (µg/mL) làm tọa độ (x) và giá trị tích phân diện tích pic làm hoành độ (y). Vẽ đồ thị để có đường thẳng đi qua gốc tọa độ. Phương trình hồi quy là y1=1.510 4×106x-1.177 2×105 (r=0.999 9), {{10} }.644 0×106x-6.3836×105 (r=0.999 9). Kết quả cho thấy echinaceaside và stilbene glycoside có mối quan hệ tuyến tính tốt trong phạm vi khối lượng từ 0.159 3 đến 0.955 8 ug và 0.385 3 đến 4.623 5 ừ.

Cistanche Tubulosa

2.3.2 Kiểm tra độ chính xác

Rút chính xác 10 µL dung dịch đối chiếu hỗn hợp và lặp lại bơm 6 lần trong điều kiện sắc ký "2.1". RSD của diện tích pic của echinacoside và stilbene glycoside được đo tương ứng là 0,66% và 0,59%, cho thấy độ chính xác của thiết bị là tốt.

2.3.3 Kiểm tra độ ổn định

Theo phương pháp ở phần "2.1", lấy sản phẩm này (lô số 20191205) pha dung dịch thử, tiêm mẫu để đo vào lúc 0 h, 4 h, 8 h, 12 h, 20 h và 24 h sau khi chuẩn bị và ghi lại diện tích pic. , độ lệch chuẩn tương đối là từ 2,37% đến 2,79%. Kết quả cho thấy dung dịch thử ổn định trong vòng 24 giờ.

2.3.4 Kiểm tra độ lặp lại

Lấy 6 phần mẫu thử của cùng một mẻ mẫu (số lô 20191205) và bơm mẫu để đo theo các điều kiện sắc ký trong mục “2.1”. Kết quả Độ lệch chuẩn tương đối của echinaceaside là 1,48%, có độ lặp lại tốt; độ lệch chuẩn tương đối của stilbene glycoside là 1,10%, có độ lặp lại tốt.

Cistanche Tubulosa

2.3.5 Xác định tỷ lệ thu hồi

Áp dụng việc bổ sung và thu hồi mẫu để cung cấp 50% lượng mẫu (0.3 g) của mẫu thử nghiệm và nội dung lấy mẫu của 1.0:0 .5, 1.{{10}}:1.0, 1.0:1.5, tương ứng và hấp thụ chính xác dung dịch dự trữ chất tham chiếu 1 (hàm lượng echinacea glycoside là 0.431 5 mg/mL) 1.0 mL, 2.0 mL, và 3,0 mL mỗi loại, sau đó thêm chính xác dung dịch gốc chất đối chiếu 2 (stilbene glycoside nồng độ khối lượng 0.8678 mg/mL) lần lượt là 1,25 mL, 2,50 mL và 3,75 mL. Thêm vào bình định mức 25 mL tương ứng, sử dụng

Thổi khô bằng máy thổi nitơ. Sau đó, cân chính xác 9 mẫu của cùng một lô đã biết hàm lượng (mẻ số 20191205, hàm lượng echinaceaside là 7.810 2 mg/g, hàm lượng stilbene glycoside là 14.232 4 mg/ g) và lượng lấy mẫu của mỗi mẫu là Lượng mẫu của mẫu thử là khoảng 0,15 g. Thêm nó vào bình định mức ở trên tương ứng. Chuẩn bị nó theo phương pháp trong dung dịch thử. Đo lường nó theo pháp luật. Tính tỷ lệ thu hồi. Kết quả thật dễ dàng.

Độ thu hồi trung bình của stilbene glycoside và stilbene glycoside lần lượt là 98,28% và 98,43%, và RSD lần lượt là 1,56% và 0,97%, cho thấy độ chính xác của thiết bị tốt.

NẾU BẠN QUAN TÂM BÀI VIẾT NÀY, BẠN CÓ THỂ LIÊN HỆ VỚI CHÚNG TÔI:

Email:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Điện thoại:+86 15292862950

Mua sắm để biết thêm thông số kỹ thuật

https://www.xjcistanche.com/cistanche-cửa hàng