Lợi ích của acteoside - điều trị u nguyên bào thần kinh đệm

Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

TAE WOONG HWANG; DONG HUN KIM; DA BI KIM1; TAE WON JANG; GUN ‑ HWA KIM; MINHO MOON; KYUNG AH YOON; DAE EUN CHO; JAE HO PARK; JWA ‑ ​​JIN KIM

1. Giới thiệu

U nguyên bào đệmlà loại u não nguyên phát ác tính phổ biến nhất và là loại u não nguyên phát xâm lấn và tàn phá nhất (1,2), với tỷ lệ sống trung bình là ~ 18 tháng với liệu pháp đa phương thức tích cực. Các quyết định điều trị hiện tại còn hạn chế và bao gồm xạ trị, hóa trị và phẫu thuật kết hợp với chất kiềm hóa temozolomide (TMZ) (3,4). Bất chấp sự sẵn có của các liệu pháp điều trị tích cực, bệnh nhânu nguyên bào thần kinh đệmnói chung có tiên lượng xấu (5). TMZ là loại thuốc hóa trị liệu chính được sử dụng trong điều trị lâm sàng bệnh ác tínhu nguyên bào thần kinh đệm(6‑8); như một chất alkyl hóa trong loạt thuốc, nó có thể xuyên qua hàng rào máu não (9‑11). Trong quá trình u nguyên bào thần kinh đệm ác tính tiến triển và xâm lấn rộng khắp não, việc kháng thuốc đối với TMZ tăng dần đều làm giảm hiệu quả điều trị (12,13). Theo đó, các loại thuốc điều trị mới để chống lạiu nguyên bào thần kinh đệmđang được khẩn trương tìm kiếm.

Các nghiên cứu trước đây đã báo cáo rằng các tế bào u thần kinh đệm trải qua quá trình chết tế bào thông qua autophagy, hoặc tế bào chết theo chương trình loại II, để phản ứng với TMZ (14,15). Autophagy có thể bị ức chế bởi 3 ‑ methyladenine (3 ‑ MA) thông qua việc chuyển đổi protein liên kết với ống vi mô 1 chuỗi nhẹ 3 (LC3) ‑I thành LC3 ‑ II, do đó làm giảmu nguyên bào thần kinh đệmtế bào chết (16,17); tuy nhiên, vai trò của autophagy phụ thuộc vào ngữ cảnh của tế bào. Ngoại trừ vai trò gây độc tế bào trong quá trình hoạt động của TMZ, quá trình cảm ứng tự động do căng thẳng tế bào là một quá trình bảo vệ tế bào nhằm loại bỏ các tập hợp tế bào chất, bào quan và đại phân tử do căng thẳng gây ra trong tế bào động vật có vú thông qua hệ thống lysosome. Đổi lại, các tế bào liên quan đến việc duy trì cân bằng nội môi nhận năng lượng thông qua các quá trình dị hóa này (18,19). Các vai trò phức tạp của autophagy gợi ý rằng chất kích hoạt autophagy có thể có tác dụng chống ung thư kết hợp với điều trị TMZ bằng cách gâyu nguyên bào thần kinh đệmtự động của tế bào mà không gây ra các tác động có hại hoặc mang lại lợi ích cho các mô bình thường. Đáng lưu ý, TMZ đã thể hiện tác dụng điều trị hiệp đồng khi kết hợp với vitamin D, bao gồm khả năng tồn tại của tế bào bị ức chế và tăng cường khả năng tự động trongu nguyên bào thần kinh đệmtế bào. Hơn nữa, sự kết hợp của TMZ và vitamin D đã được chứng minh là có tác dụng chống ung thư in vivo, bao gồm giảm kích thước khối u và kéo dài tỷ lệ sống sót. Những nghiên cứu này gợi ý rằng điều trị phối hợp có thể có tác dụng hiệp đồng chống ung thư thông qua cơ chế tự thực trong TMZ dựa trênu nguyên bào thần kinh đệmliệu pháp (15).

Acteosidelà một glycoside phenylethanoid được phân phối rộng rãi trong một số loại thuốc thảo dược truyền thống của Trung Quốc có tác dụng bổ trợ (20,21). Một số tác dụng dược lý, bao gồm các hoạt động chống oxy hóa, chống ung thư, chống viêm, chống thận và chống suy nhược, có liên quan đếnacteoside(22‑24). Các nghiên cứu trước đây đã chứng minh rằngacteosidecó tác dụng bảo vệ chống lại carbon tetrachloride‑ và D ‑ galactosamine gây ra tổn thương gan. Các cơ chế cơ bản của tác dụng bảo vệ của acteoside có thể liên quan đến khả năng của nó trong việc ức chế kích hoạt sinh học qua trung gian P450 và các hiệu ứng thu dọn gốc tự do gây ra khi tiếp xúc với carbon tetrachloride (25,26).

Do đó, bằng chứng cho thấy rằng cả haiacteosidevà TMZ gây ra tác dụng chống ung thư thông qua quá trình chết tế bào. Tuy nhiên, sự liên kết của chúng và tác dụng chống ung thư trong bối cảnhu nguyên bào thần kinh đệmvẫn còn được làm sáng tỏ. Do đó, mục tiêu của nghiên cứu này là xác minh tác dụng hiệp đồng chống ung thư củaacteosidekết hợp với TMZ trongu nguyên bào thần kinh đệmliệu pháp. Một thử nghiệm khả năng sống sót của tế bào đã được thực hiện để phân tích tác dụng chống ung thư của phương pháp điều trị kết hợp ở C6u nguyên bào thần kinh đệmtế bào (một con chuộtu nguyên bào thần kinh đệmdòng tế bào), và kết quả được so sánh với những người sau khi điều trị chỉ với TMZ. Để kiểm tra thêm cơ chế chết của tế bào do điều trị chung vớiacteosidevà TMZ, các gen liên quan đến quá trình apoptosis và autophagy trong các tế bào C6 đã được kiểm tra.

acteoside chống khối u

2. Vật liệu và phương pháp

Nuôi cấy tế bào:

Con chuột C6u nguyên bào thần kinh đệmdòng tế bào được mua từ American Type Culture Collection (Rockville, MD, USA). Các tế bào được nuôi cấy trong điều kiện vô trùng ở 37 ° C trong môi trường ẩm ướt với 5% CO2 trong môi trường Eagle's cải tiến của Dulbecco (DMEM) được bổ sung với 10% huyết thanh bò thai (FBS), và 1% kháng sinh và thuốc chống co rút (tất cả Welgene, Daegu , Hàn Quốc).

Nguyên liệu thực vật:

Abeliophyllum chưng cất Nakai [chứng từ số. Park1001 (ANH)] được thu thập tại Công viên giải trí Misun ‑ hyang, Rừng Giải trí Núi Seongbul, Hàn Quốc.

Cảm ứng mô sẹo:

Để tạo ra mô sẹo (27), người ta đã phân lập mẫu cấy lá 1 ‑ cm2 từ cây tươi. Mẫu cấy được nuôi cấy trên môi trường Murachige và Skoog (4 phần trăm sucrose, 0. Thạch 9 phần trăm được bổ sung với 1 mg / l axit naphthalene axetic và 1 mg / l 2,4 ‑ dichloro phenoxy axit axetic, pH 5,7) ở 25˚C. Vết chai được tạo ra 20 ngày sau đó. Một số lượng đủacteosidethu được thông qua nuôi cấy con để tách và tinh chếacteosidetừ mô sẹo (Hình 1). Các lô khác nhau của tinh khiếtacteosideđã được sử dụng trong mỗi thử nghiệm. Mỗi thí nghiệm được thực hiện ba lần bằng cách sử dụng một lô khác nhau.

Cô lập và thanh lọc:

Các phân đoạn etyl axetat được cô đặc trong chân không và được sử dụng làm mẫu để tinh chế acteoside.Acteosideđược phân lập và tinh chế bằng hệ thống Cô lập Sắc ký Gia tốc (Isolera ™ Spektra, Biotage, Uppsala, Thụy Điển) sử dụng SNAP KPHOSPHO ‑ SIL và SNAP Ultra Cartridges (Biotage). Cácacteosidetinh sạch từ mô sẹo được phân tích định lượng bằng cách sử dụng acteoside tiêu chuẩn bằng phân tích HPLC ‑ PDA. Cuối cùng, acteoside có độ tinh khiết lớn hơn hoặc bằng 95 phần trăm thu được từ mô sẹo và được sử dụng làm mẫu cho hóa trị của temozolomide ‑u nguyên bào thần kinh đệm.

Xét nghiệm 3‑ (4,5 ‑ Dimethylthiazol ‑ 2 ‑ l) -, 5 ‑ diphenyltetrazolium bromide (MTT):

Để xác định nồng độ ức chế nửa tối đa TMZ (giá trị IC50) chống lại các tế bào C6, tế bào 1x104 trong huyền phù đơn bào đã được gieo vào các giếng riêng lẻ của đĩa giếng 96 ‑ và ủ trong 24 giờ ở 37˚C trước khi xử lý TMZ theo chỉ định nồng độ (1, 5, 10 và 20 mM) ở 37˚C trong 24 giờ. Sau khi xác định giá trị TMZ IC50 là 5 mm, các tế bào được xử lý trong 24 giờ với 5 mM TMZ, 50 µMacteosidehoặc kết hợp cả hai (5 mM TMZ và 50 µMacteoside). Dung dịch MTT (5 mg / ml) được thêm vào mỗi giếng (10 µl) và nuôi cấy ở 37 ° C trong 2 giờ. Sau đó, môi trường được loại bỏ và DMSO được thêm vào với thể tích 200 µl mỗi môi trường và phản ứng ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. Độ hấp thụ ở bước sóng 595 nm được đo để xác định khả năng sống sót của tế bào.

Thử nghiệm chữa lành vết thương:

Hỗn dịch tế bào C6 trong 1 ml được nuôi cấy trong đĩa 12 giếng và phát triển đến hợp lưu. Các tế bào được xử lý bằng TMZ,acteosidehoặc TMZ plusacteosidevà sau đó gãi bằng đầu pipet 1 0 - µl vô trùng để tạo vết thương nhân tạo. Ở 0 và 24 giờ sau khi băng bó, hình ảnh kỹ thuật số của quá trình chữa lành vết thương được chụp bằng kính hiển vi đảo ngược. Sự di chuyển của tế bào được định lượng bằng cách đo kích thước của vết sẹo ở 0 và 24 giờ bằng phần mềm phân tích hình ảnh, phần mềm ImageJ 1.43u / Java1.6. 0_22 (NIH, Bethesda, Maryland, Hoa Kỳ). Mỗi thí nghiệm được thực hiện ba lần và các phép đo được thực hiện ba lần.

Kiểm tra miễn dịch:

Các tế bào C6 được xử lý bằng TMZ,acteosidehoặc TMZ plusacteosidetrong 24 giờ. Tế bào được ly giải trên băng bằng dung dịch đệm ly giải RIPA (25 mM Tris ‑ HCl, pH 7,5, 15 0 mM NaCl, 1% Nonidet P ‑ 4 0, 1% natri deoxycholat, 0,1% SDS) bổ sung với cocktail ức chế protease và phosphatase (Roche, Basel, Thụy Sĩ) trong 30 phút. Sau khi ly tâm ở 18,341 xg trong 15 phút ở 4˚C, phần nổi phía trên thu được. Nồng độ protein được xác định bằng cách sử dụng Bradford Protein Assays (Bio ‑ rad, Hercules, CA, USA). Một lượng bằng nhau của tổng số protein (30 µg) được nạp vào các giếng đơn và được phân đoạn qua điện di qua 10‑15 phần trăm SDS ‑ PAGE. Các protein được truyền điện sang màng polyvinylidene difluoride (EMD Millipore, Bedford, MA, USA). Sau khi ủ trong dung dịch chặn có chứa 5% sữa không béo trong dung dịch muối đệm Tween / Tris trong 30 phút ở nhiệt độ phòng. Các đốm màu được khảo sát với 1: 1, 000 - kháng thể chính pha loãng (cat. Số 9662, caspase 3; Công nghệ tín hiệu tế bào, Inc., Danvers, MA, Hoa Kỳ), u lympho tế bào B0 2 (sc‑ 7382, Bcl ‑ 2), protein X liên kết Bcl ‑ 2 ‑ (cat. Số 2772, Bax), phosphoryl hóa (p‑) p53 (sc ‑ 101762), tổng ‑ p53 (sc ‑ 6243), ‑actin (cat. số 4970; tất cả; Santa Cruz Biotechnology, Inc., Dallas, TX, USA), LC ‑ 3 (L8918, Sigma; Merck KGaA, Darmstadt, Germany), Rab7 (cat. no. 9367, Cell Signaling Technology, Inc. ), p62 (cat. no. 114), p ‑ p38 (cat. no. 9211), total ‑ p38 (cat. no. 9212), p ‑ c ‑ Jun N ‑ terminal kinase (cat. no. 9251, p ‑JNK), tổng ‑ JNK (con mèo. .) qua đêm ở 4˚C. Tiếp theo là ủ với kháng thể thứ cấp liên hợp với peroxidase ‑ của cải ngựa (1: 2, 000; LF ‑ SA8001A, Goat Anti Mouse IgG ‑ HRP) hoặc LF ‑ SA8002A (Goat Anti ‑ Rabbit IgG ‑ HRP), AB Frontier, Seoul, Korea.) Trong 2 giờ ở nhiệt độ phòng. Các protein sau đó được hình dung bằng cách tiếp xúc với Chemi ‑ Doc (Bio ‑ Rad Laboratories, Inc., Hercules, cA, USA).

Nhuộm huỳnh quang miễn dịch:

Protein màng liên kết với lysosome 1 (LAMP1) và LC3 là các chất đánh dấu cho lysosome và autophagy. Tế bào (1x105 tế bào / giếng) được chuẩn bị trên bìa thủy tinh đã khử trùng (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA) trong ba lần. Sau khi điều trị với TMZ,acteosidehoặc TMZ plusacteosidetrong 24 giờ, các tế bào được cố định trong 4 phần trăm paraformaldehyde trong 3 0 phút, được chặn bằng 5 phần trăm huyết thanh gà bình thường (S ‑ 3000; Vector Laboratories, Inc., Burlingame, CA, Hoa Kỳ), 0,1 phần trăm Triton X ‑100 và sau đó ủ trong 1 giờ để thẩm thấu và ngăn chặn các tương tác protein với protein không đặc hiệu. Sau đó, các tế bào được ủ với anti ‑ LAMP1 (1: 200; sc ‑ 19992, Santa Cruz Biotechnology, Inc.) và anti ‑ LC3 (1: 400; PM036, MBL International, Woburn, MA, USA) qua đêm ở 4˚ C. Sau đó, các tế bào được rửa hai lần bằng PBS và ủ thêm 2 giờ trong bóng tối với hỗn hợp của Alexa Fluor 488 và 594 kháng thể thứ cấp (1: 200; Alexa Fluor 488 (A ‑ 11008) và 594 (A ‑ 11007), Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA) và rửa lại bằng PBS. Các hạt nhân được nhuộm bằng cách sử dụng 4,6 ‑ diamidino ‑ 2 ‑ phenylindole (Sigma; Merck KGaA), và sau đó rửa hai lần bằng PBS. Sau đó, các slide được gắn và hình ảnh được chụp dưới kính hiển vi tiêu điểm laser LSM ‑ 700.

Hình 1. Cấu trúc hóa học của acteoside.

Đo tế bào dòng chảy.

Các tế bào được phân tích cho Mitotracker Green và MitoSOX bằng phương pháp đo tế bào dòng chảy sử dụng máy đo tế bào dòng FACSCanto II, theo chỉ định của nhà sản xuất (BD Biosciences). Sau hai lần rửa bằng PBS, các tế bào được cố định trong 4 phần trăm paraformaldehyde trong 3 0 phút ở nhiệt độ phòng và được thẩm thấu với 0,25 phần trăm Triton X ‑ 100 trong PBS trong 20 phút. Các tế bào được nhuộm bằng kháng thể sơ cấp qua đêm ở 4˚C (1: 200) và sau đó với kháng thể thứ cấp trong 1 giờ trên đá. Sau hai lần rửa bằng PBS, các tế bào được cố định trong 4% paraformaldehyde và được xét nghiệm ngay lập tức. Dữ liệu đo tế bào dòng chảy được thu thập bằng cách sử dụng 10, 000 ô và được phân tích bằng phần mềm FlowJo 7.6.1 (Tree Star, Inc., Ashland, OR, USA).

Phân tích thống kê:

Tất cả dữ liệu được phân tích bằng GraphPad Prism 5. 0 và được trình bày dưới dạng sai số trung bình ± chuẩn của giá trị trung bình. Dữ liệu được phân tích bằng phân tích phương sai một chiều với phép so sánh nhiều lần của Tukey sau bài kiểm tra học tập để so sánh các giá trị trung bình giữa nhiều nhóm. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Cistanche Echinacoside: Chống apoptosis

3. Kết quả

3.1 Xử lý bằng thuốc ức chế TMZ và acteosideu nguyên bào thần kinh đệmsự tăng sinh và di cư của tế bào.

Điều trị kết hợp với TMZ vàacteosideức chế khả năng sống của tế bào C6. TMZ làm giảm khả năng tồn tại của tế bào theo cách phụ thuộc vào liều lượng (Hình 2A), trong khi riêng acteoside không có tác dụng đáng kể ở bất kỳ mức độ điều trị nào (Hình 2B). Sau khi ủ trong môi trường nuôi cấy có TMZ có hoặc không có acteoside trong 24 giờ, xét nghiệm MTT được thực hiện để so sánh độc tính tế bào của các mức độ xử lý khác nhau. TMZ ức chế đáng kể khả năng tồn tại của tế bào, trong khi acteoside không ngăn chặn đáng kể sự phát triển của tế bào. Điều trị kết hợp với TMZ và acteoside làm giảm đáng kể khả năng sống của tế bào (Hình 2C). Điều trị bằng TMZ hoặc acteoside được áp dụng một mình làm giảm khả năng chữa lành vết thương (Hình 3A). Khoảng cách vết thương (phần trăm) được đo bằng kết quả hiển thị trong Hình 3A với phần mềm ImageJ. Khoảng cách vết thương tăng lên đáng kể sau khi điều trị kết hợp (Hình 3B), so với điều trị riêng lẻ. Những kết quả này chỉ ra rằng điều trị chung với TMZ và acteoside là một chất ức chế hiệu quảu nguyên bào thần kinh đệmsự tăng sinh và di cư của tế bào.

3.2 Acteoside và TMZ tác động hiệp đồng apoptosis ở các tế bào C6.

Kết quả của phân tích Western blot cho thấy rằng mức độ phân cắt của caspase-3, Bax, và p53 được phosphoryl hóa cao hơn và mức độ Bcl-2 thấp hơn sau khi điều trị kết hợp với TMZ vàacteosideso với sau khi điều trị chỉ với TMZ (Hình 4A).ActeosideChức năng ti thể qua trung gian và sự tạo ra các loại oxy phản ứng (ROS), là những chất trung gian chính của tín hiệu apoptotic, sau đó được quan sát thấy trong các tế bào C6 được xử lý TMZ. Để xác minh khối lượng ti thể, phân tích phân loại tế bào kích hoạt huỳnh quang được thực hiện bằng cách sử dụng MitoTracker Green. Điều trị chung với TMZ vàacteosidedẫn đến khối lượng ty thể cao hơn so với điều trị chỉ với TMZ (Hình 4B). Việc tạo ROS cao hơn đáng kể sau khi điều trị chung với TMZ và acteoside so với điều trị chỉ với TMZ (Hình 4C). Những kết quả này cho thấy rằng sự tạo ROS và chức năng của ty thể rất quan trọng trong quá trình chết rụng gây ra khi điều trị bằng TMZ cộng với acteoside. Xử lý chung với TMZ và acteoside gây ra hiện tượng tự động ở các tế bào C6. TMZ đã được báo cáo là gây ra autophagy (28,29); do đó, nghiên cứu hiện tại đã kiểm tra mức độ gây ra hiện tượng autophagy bằng cách điều trị TMZ cộng với acteoside. Các tế bào C6 được xử lý bằng TMZ có hoặc không có acteoside; sau 24 giờ, và các tế bào được nhuộm cho miễn dịch huỳnh quang để phát hiện LAMP1 và LC3 là dấu hiệu của quá trình tự thực. Mức độ biểu hiện cao hơn của LAMP1 và LC3 đã được quan sát thấy sau khi điều trị kết hợp (Hình 5A). Sự biểu hiện protein liên quan đến autophagy cũng được kiểm tra, và người ta thấy rằng TMZ gây ra sự chuyển đổi LC3 ‑ I thành LC3 ‑ II, đây là một dấu hiệu của quá trình tạo autophagosome. Tỷ lệ chuyển đổi LC3 ‑ I thành LC3 ‑ II cao hơn được quan sát thấy sau khi điều trị chung với TMZ và acteoside so với điều trị chỉ với TMZ. Mức độ biểu hiện của Rab7 và p62 cho thấy sự cảm ứng tự động trong các tế bào được xử lý TMZ (Hình 5B). Những phát hiện này cho thấy rằng điều trị chung với TMZ và acteoside đã tăng cường quá trình tự thực trongu nguyên bào thần kinh đệmtế bào.

3.3 Acteoside gây ra biểu hiện gen theo con đường MAPK trong điều trị dựa trên TMZ.

Các nghiên cứu trước đây đã chứng minh rằng TMZ điều chỉnh con đường MAPK, bao gồm p38, JNK và ERK (30). Do đó, nghiên cứu hiện tại đã điều tra xem liệuacteosideảnh hưởng đến biểu hiện gen MAPK liên quan đến TMZ. Các tế bào C6 được xử lý bằng TMZ có hoặc không cóacteoside. Sau 24 giờ, điều trị TMZ dẫn đến mức độ biểu hiện của p ‑ p38, p ‑ JNK và p ‑ ERK cao hơn. Sự biểu hiện của các gen điều hòa TMZ cao hơn đáng kể sau khi điều trị TMZ cộng với acteoside so với điều trị chỉ với TMZ (Hình 6). Những quan sát này cho thấy rằngacteosideảnh hưởng đến cơ chế điều trị dựa trên TMZ thông qua con đường MAPK.

Acteoside chốngu nguyên bào thần kinh đệm

Thảo luận

Các kết quả của nghiên cứu này cho thấy việc điều trị kết hợp với TMZ vớiacteosidecung cấp tiềm năng điều trị chou nguyên bào thần kinh đệmđiều trị, và cung cấp bằng chứng rằng hóa trị liệu với sự kết hợp của TMZ vàacteosidecó thể xảy ra thông qua nâng cao autophagy. Như sự đột biến củau nguyên bào thần kinh đệmtế bào có thể dẫn đến sự bất hoạt của con đường apoptotic, gây ra hiện tượng autophagy bởi TMZ plusacteosideđiều trị chung có thể đại diện cho một phương pháp thay thế chou nguyên bào thần kinh đệmliệu pháp. Tuy nhiên, liệu autophagy có phải là cơ chế duy nhất đểu nguyên bào thần kinh đệmliệu pháp với TMZ plusacteosideđiều trị chung vẫn còn được làm sáng tỏ.

Autophagy là một cơ chế tế bào cần thiết để phân hủy protein và các bào quan trong tế bào chất. Lợi thế dị hóa của tự động hấp thụ gây ra có thể quan trọng trong điều kiện căng thẳng; do đó, sự khởi động của autophagy có thể là một cơ chế thích ứng để ngăn ngừa sự chết của tế bào (31‑33). Các nghiên cứu trước đây đã báo cáo rằng giảm tự động thở dốc có tương quan với bệnh ung thư (34‑36). Ngoài ra, một số protein và các con đường tín hiệu liên quan đến autophagy bị bãi bỏ điều tiết trong quá trình biến đổi ác tính, dẫn đến giảm hoạt động autophagic. Mức độ biểu hiện cao của LC3 cũng có liên quan đến việc tăng tỷ lệ sống sót ở bệnh nhânu nguyên bào thần kinh đệmvới điểm hiệu suất kém (37,38). Tương tự như vậy, kết quả của nghiên cứu này chỉ ra rằng việc khôi phục chế độ autophagy bình thường có thể là một chiến lược tiềm ẩn đểu nguyên bào thần kinh đệmvà có thể dùng như một cơ chế để hạn chế sự phát triển bất thường của tế bào khối u.

Trong quá trình tự thực bình thường, các thành phần tế bào chất cụ thể được phân lập trong thực bào tử cung, sau đó kết hợp với lysosome để bị phân hủy và tái chế (39,40). Khi autophagy được điều chỉnh, tỷ lệ hình thành autophagosome vượt qua tốc độ phân hủy lysosome; tình trạng này được gọi là căng thẳng tự thực. Nếu căng thẳng hoặc tự động bất thường tiếp tục, tế bào chết có thể xảy ra do cạn kiệt năng lượng hoặc thay đổi cân bằng beclin ‑ 1 / Bcl ‑ 2. Quá trình chết cũng có thể được kích hoạt bởi sự tăng động của autophagosome, nhấn chìm các bào quan trong tế bào chất bao gồm cả ty thể hoặc lưới nội chất (41). Người ta đã gợi ý rằng tự động chết chung có thể gây chết tế bào trong quá trình luân chuyển tế bào chất và bào quan bình thường ở các tế bào khỏe mạnh. Trong quá trình này, tế bào tự 'ăn thịt người' từ bên trong, một đặc điểm chính của quá trình chết tế bào theo chương trình loại II. Mặc dù các cơ chế màacteosidetăng cường hiệu quả điều trị của TMZ ‑u nguyên bào thần kinh đệmliệu pháp điều trị vẫn chưa được làm sáng tỏ đầy đủ, các tác dụng chống ung thư được thể hiện bởi điều trị kết hợp được kiểm tra trong nghiên cứu này có thể liên quan đến các cơ chế tự thực này.

Acteosidelà một glycoside phenylethanoid có nguồn gốc từ thực vật (22,26). Các nghiên cứu trước đây đã báo cáo về các hoạt động sinh học khác nhau của acteoside. Những thay đổi về mức độ biểu hiện của caspase phân cắt ‑ 3 và LC3 trong nghiên cứu này chứng minh rằng điều trị với sự kết hợp của TMZ vàacteosidegây ra apoptosis và autophagy ở các tế bào C6 (Hình 4 và 5). Việc điều trị kết hợp đã được chứng minh là có tác dụng hiệp đồng trênu nguyên bào thần kinh đệmtế bào. Mặc dù các cơ chế có thể có khác của những tác động hiệp đồng này vẫn chưa được làm sáng tỏ, nhưng nghiên cứu hiện tại đã xác định sự cảm ứng của autophagy là một cơ chế gây tử vong quan trọng củaacteosidehóa trị nhạy cảm trong quá trình dựa trên TMZu nguyên bào thần kinh đệmliệu pháp.

Acteoside điều trị u nguyên bào thần kinh đệm

Người giới thiệu

1. Friedman HS, Kerby T, và Calvert H: Temozolomide và điều trị u thần kinh đệm ác tính. Clin Cancer Res 6: 2585‑2597, 2000.

2. Mrugala MM và Chamberlain MC: Cơ chế gây bệnh: Temozolomide vàu nguyên bào thần kinh đệm‑Tương lai. Nat Clin Pract Oncol 5: 476‑486, năm 2008.

3. Agarwala SS và Kirkwood JM: Temozolomide, một chất alkyl hóa mới có hoạt tính trong hệ thần kinh trung ương, có thể cải thiện việc điều trị ung thư hắc tố di căn tiến triển. Bác sĩ ung thư 5: 144‑151, 2000.

4.Stevens MF, Hickman JA, Stone R, Gibson NW, Baig GU, Lunt E và Newton cG: Antitumor imidazotetrazines. 1. Tổng hợp và hóa học 8 ‑ carbamoyl ‑ 3‑ (2 ‑ chloroethyl) imidazo [5,1 ‑ d] ‑1,2,3, 5 ‑ tetrazine ‑ 4 (3 H) ‑one, một chất chống u phổ rộng mới đại lý. J Med Chem 27: 196‑201, 1984.

5. Fulda S: Điều trị dựa trên tế bào chết củau nguyên bào thần kinh đệm. Cell Death dis 9: 121, 2018.

6. Chen PH, Shen WL, Shih CM, Ho KH, Cheng CH, Lin CW, Lee CC, Liu AJ và Chen KC: Con đường Notch3 bị ức chế CHAC1 có liên quan đến độc tính tế bào gây u thần kinh đệm do temozolomide ‑. Thần kinh học 116: 300‑314, năm 2017.

7. Oshiro S, Tsugu H, Komatsu F, Ohmura T, Ohta M, Sakamoto S, Fukushima T và Inoue T: Hiệu quả của điều trị temozolomide ở bệnh nhân u thần kinh đệm cấp độ cao. Chống ung thư Res 29: 911‑917, 2009.

8. Van den Bent MJ: Điều trị bổ trợ u thần kinh đệm cấp cao. Ann Oncol 17 (Suppl 10): x186 ‑ x190, năm 2006.

9. Shen W, Hu JA, và Zheng JS: Cơ chế của tác dụng kháng u do temozolomide ‑ gây ra trên các tế bào u thần kinh đệm. J Int Med Res 42: 164-172, 2014.

10.Barciszewska AM, Gurda D, Głodowicz P, Nowak S và Naskręt ‑ Barciszewska MZ: Một cơ chế biểu sinh mới của hoạt động temozolomide trong tế bào u thần kinh đệm. PLoS One 10: e0136669, năm 2015.