Các hoạt động chống trầm cảm và cải thiện nhận thức của thảo mộc truyền thống Trung Quốc Cistanche Ⅰ

Jun 23, 2022

trừu tượng

Hơn mười phần trăm số người bị ít nhất một giai đoạn trầm cảm và các rối loạn tâm thần liên quan trong đời, và trầm cảm và các rối loạn tâm thần liên quan là một trong những vấn đề sức khỏe cộng đồng lớn nhất thế giới. Một lý thuyết đa hệ thống cho rằng rối loạn điều hòa của nhiều hệ thống làm cơ sở cho bệnh sinh của trầm cảm và các rối loạn tâm thần liên quan, và các liệu pháp mới dựa trên lý thuyết rối loạn điều hòa đa hệ thống là cần thiết. Trong nghiên cứu này, tác dụng chống trầm cảm của nước sắc từ thảo mộcCistanche DesticolaYCMa vàCistanche tubulosađã được kiểm tra. Thảo mộcCistanchenước sắc làm giảm đáng kể thời gian bất động trong thử nghiệm treo đuôi chuột. Những con chuột được điều trị bằng nước sắc thảo mộc cho thấy khả năng học tập và ghi nhớ trong không gian được cải thiện trong thử nghiệm mê cung nước Morris. Các nhóm thuốc sắc từ thảo mộc được xử lý cho thấy hoạt động điều hòa monoamine oxidase (MAO); nồng độ dopamine (DA) trong não được điều chỉnh, cho thấy thảo mộcCistanchenước sắc cải thiện sự hưng phấn thần kinh; nồng độ corticosterone trong huyết thanh (CORT) được điều chỉnh giảm, cho thấy rằng chuột được hưởng lợi từ việc giảm mức độ căng thẳng. Do đó, hiệu quả chống trầm cảm và cơ chế củathảo mộc truyền thống của Trung QuốcCistancheđã được khám phá trong nghiên cứu này. Thảo mộcCistanchecho thấy một tiềm năng được phát triển như một liệu pháp bổ sung và thay thế cho bệnh trầm cảm.


1. Giới thiệu

Trầm cảm và các rối loạn tâm trạng liên quan, với ước tính khoảng 12 ~ 17 phần trăm dân số trải qua ít nhất một đợt trong đời, là một trong những nguyên nhân hàng đầu gây ra khuyết tật tâm thần và được coi là một trong những vấn đề sức khỏe cộng đồng lớn trên toàn thế giới. Đặc biệt, một tỷ lệ đáng kể bệnh nhân trầm cảm bị mất trí nhớ, khó tập trung, giảm năng lượng hoặc mệt mỏi, mất hứng thú hoặc niềm vui trong các sở thích và hoạt động, và khó ngủ, thức giấc vào sáng sớm hoặc ngủ quên. Mặc dù các cơ chất thần kinh cho sự bất thường trong trầm cảm và các hội chứng liên quan không rõ ràng, nhưng người ta thường chấp nhận rằng sự suy giảm tính linh hoạt thần kinh và khả năng phục hồi của tế bào làm phát sinh sinh lý bệnh của trầm cảm và việc điều trị thành công có thể phụ thuộc vào sự can thiệp của mức độ dẫn truyền thần kinh. Phương pháp tiếp cận thuốc điều trị trầm cảm về cơ bản dựa trên giả thuyết hệ thống monoamine cổ điển, trong đó tuyên bố rằng rối loạn điều hòa các monoamine đặc biệt là serotonin (5- HT) và norepinephrine (NE) góp phần vào cơ chế bệnh sinh trầm cảm và can thiệp vào hệ thống dẫn truyền thần kinh bằng dopamine chất chủ vận và chất điều hòa dopamine-noradrenergic sẽ làm giảm bớt các triệu chứng của rối loạn trầm cảm nặng. Mặc dù được kê đơn rộng rãi, nhưng hiệu quả điều trị của thuốc chống trầm cảm vẫn còn nhiều nghi vấn và tác dụng phụ không thể bỏ qua vì một tỷ lệ đáng kể bệnh nhân không đáp ứng với tác động của hệ thống monoamine. Gần đây, các lý thuyết mới về cơ chế bệnh sinh trầm cảm chỉ ra rằng nhiều hệ thống, bao gồm các con đường viêm, con đường stress oxy hóa, trục hạ đồi-tuyến yên-thượng thận (HPA), hệ thống trao đổi chất và sinh học, các con đường dưỡng thần kinh, hệ thống glutamate, hệ thống opioid, và hệ thống cholinergic, có liên quan chặt chẽ với sự xuất hiện trầm cảm. Các bằng chứng cho thấy can thiệp nhiều mục tiêu mang lại hiệu quả tốt hơn can thiệp một mục tiêu duy nhất. Các liệu pháp mới dựa trên lý thuyết rối loạn điều hòa nhiều hệ thống là cần thiết.

Cistanche Benefits for anti-depression

Tìm kiếm thêm thông tin chi tiết về Lợi ích Cistanche

Các sản phẩm thảo dược được cho là đã tiêu thụ hơn một nửa dân số Hoa Kỳ; Mối quan tâm và nhu cầu về thảo mộc hoặc các sản phẩm thảo dược như một cách bổ sung để điều trị trầm cảm đang tăng lên trên khắp thế giới. Nhiều loại cây y học được tìm thấy để chứng minh tác dụng giảm trầm cảm có lợi. Các loại thảo mộc được báo cáo là có tác dụng ngăn chặn trầm cảm và cải thiện chức năng nhận thức bao gồm hắc mai biển,Bạch quả,Hồ tiêu,Hypericum perforatum,Griffonia simplicifolia. Việc sử dụng kết hợp axit ferulic và piperine cho thấy tác dụng hiệp đồng giống như thuốc chống trầm cảm ở chuột bằng cách điều khiển hệ thống monoaminergic. Albiflorin được đặc trưng bởi ái lực chọn lọc cao với các thụ thể và chất vận chuyển dẫn truyền thần kinh và làm tăng đáng kể nồng độ ngoại bào của 5- HT và NE trong vùng dưới đồi của chuột di chuyển tự do. Một loại thảo mộc y tếMelissa officinalisL. làm giảm hành vi trầm cảm của chuột bằng cách tác động lên mức chất dẫn truyền thần kinh serotonergic. Những loại thảo mộc hoặc thuốc sắc này, được phát triển như một phương pháp điều trị thay thế cho bệnh trầm cảm, giúp giảm bớt các triệu chứng của bệnh trầm cảm và cung cấp một nguồn mới để phát triển thuốc chống trầm cảm. Thảo mộcCistanchecác loài, phân bố ở các vùng đất khô cằn và sa mạc phía bắc Trung Quốc, là các loại thảo mộc y học cổ truyền của Trung Quốc và được sử dụng rộng rãi để điều trị các bệnh khác nhau trong hơn 1, 000 năm ở Trung Quốc. Hiệu quả đa dạng của thảo mộcCistanchephạm vi sắc giữa thuốc kích dục [], tăng cường miễn dịch [], chống oxy hóa [], và bảo vệ gan [] đặc tính.C. sa mạcthuốc sắc gây ra các enzym steroid sinh tinh hoàn [], thúc đẩy phản ứng cương dương của dương vật và rút ngắn thời gian chờ của phản ứng cương dương ở chuột bị thiến []. Thảo mộcCistancheđã được báo cáo là ức chế hoạt động của các tế bào thần kinh dopaminergic bằng cách điều chỉnh các gen ức chế apoptosis và các yếu tố dinh dưỡng thần kinh [].C. tubulosathuốc sắc đã sửa đổi chứng rối loạn chức năng nhận thức do A gây ra 1-42 thông qua việc ngăn chặn sự lắng đọng amyloid và hồi sinh chức năng tế bào thần kinh dopaminergic cholinergic và hồi hải mã []. Đặc tính bảo vệ thần kinh của thảo dượcCistanchengụ ý tiềm năng điều trị trong các bệnh liên quan đến nhận thức. Trầm cảm là một dạng phản ứng cảm xúc hỗn hợp phổ biến với sự hay quên và suy giảm nhận thức là các triệu chứng phổ biến []. Thảo mộcCistanchethường được sử dụng như một loại thuốc cổ truyền Trung Quốc để điều trị chứng hay quên; hơn nữa, một báo cáo gần đây cho thấy rằng một người trưởng thành sớm sử dụng bột ngô được bổ sung vớiC. tubulosacó lợi cho việc tăng tuổi thọ và học tập liên quan đến khứu giác và cải thiện trí nhớ ở động vật không xương sốngDrosophilangười mẫu []. Những sự kiện này cho thấy đặc tính cải thiện nhận thức của thảo mộcCistanche; ở đây trong nghiên cứu này, lần đầu tiên chúng tôi mô tả đặc tính chống trầm cảm và mối quan hệ của nó với các hoạt động cải thiện nhận thức ở mô hình động vật có vú bằng cách điều chỉnh hệ thống monoamine và trục HPA. Làm sáng tỏ đặc tính chống trầm cảm và cơ chế sơ bộ của thảo mộcCistanchecó thể mở rộng phạm vi ứng dụng của thảo mộcCistanche, có thể được phát triển như một phương thuốc thay thế cho bệnh trầm cảm.

Cistanche Benefits for anti-depression

2. Vật liệu và Phương pháp Chức năng Chống Trầm cảm của Cistanche

2.1. Nguyên liệu thực vật và Chuẩn bị thuốc sắc của Cistanche

C. sa mạcYCMa được lấy từ Khu tự trị Nei Mongol, Trung Quốc;C. tubulosađược lấy từ Khu tự trị Tân Cương, Trung Quốc. Trước khi sắc, vị thuốc (C. sa mạcYCMa hoặcC. tubulosa) đã được kiểm tra để phát hiện hàm lượng echinacoside và verbascoside bằng cách sử dụng HPLC (sắc ký lỏng hiệu năng cao) (Milford, MA, Waters, Hoa Kỳ) và sản phẩm đủ điều kiện (theo Dược điển của Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa) đã được sử dụng cho các thí nghiệm trên động vật . Nước sắc được thu nhận dựa trên phương pháp làm bốc hơi nước do Trung tâm Nghiên cứu Kỹ thuật Thực phẩm và Sức khỏe thuộc Bộ Giáo dục Nhà nước, Đại học Sun Yat-sen phát triển. KhôCistanche DesticolaYCMa 125 g được đập và sàng bằng lưới lọc 120-, sau đó bột được hòa tan trong nước siêu tinh khiết 3 L, đun nóng ở 1 0 0 độ trong 2 giờ, sau đó làm nguội đến nhiệt độ phòng và sàng ; phần nổi phía trên đã được tái chế. Sau đó, trầm tích được hòa tan trong nước siêu tinh khiết 2 L và sau đó được đun nóng trong 1,5 giờ và làm nguội như đã đề cập ở trên để tái chế phần nổi phía trên; trầm tích sau đó được sử dụng để tái chế phần nổi phía trên. Nội dung của tất cả phần nổi phía trên được làm giàu bằng thiết bị cô quay chân không ở 60 độ; cuối cùng nồng độ thuốc thô được thiết lập là 0,5 g / ml và sản phẩm được bảo quản ở -20 độ.

Cistanche Benefits for anti-depression

2.2. Xét nghiệm Echinacoside và Verbascoside bằng Phân tích HPLC

HPLC (sắc ký lỏng hiệu năng cao) được sử dụng để đo định tính và định lượng echinacoside và verbascoside; verbascoside (độ tinh khiết> 93%) và echinacoside (độ tinh khiết> 93%) được mua từ Viện Kiểm soát Thực phẩm và Dược phẩm Quốc gia (Bắc Kinh, Trung Quốc) và được sử dụng như một chất kiểm soát tiêu chuẩn.

2.3. Tiến hành Thử nghiệm và Chăm sóc Động vật ở Cistanche

Đối tượng là những con chuột Côn Minh đực có SPF (không có mầm bệnh cụ thể) nặng 21 ~ 25 gram, do Trung tâm Động vật Thí nghiệm Y tế tỉnh Quảng Đông cung cấp. Các con vật được nhốt trong lồng nhựa (mười con mỗi lồng); điều kiện môi trường được thiết lập như sau: độ ẩm 40 ~ 70 phần trăm, nhiệt độ phòng 21 ± 1 độ và khoảng thời gian sáng-tối 12 giờ: 12 giờ. Tất cả các thí nghiệm trên động vật đã được sự chấp thuận của Ủy ban Đạo đức Động vật của Đại học Tôn Trung Sơn.

2.4. Kiểm tra hệ thống treo đuôi ở Cistanche

Kiểm tra hệ thống treo đuôi được thực hiện theo quy trình được Cryan et al mô tả. [] với những thay đổi khiêm tốn. Tóm lại, vào ngày 21, những con chuột bị treo đuôi bằng cách sử dụng giá treo cổ bằng kim loại được buộc bằng ống thông nylon, với đầu ở độ cao 50 mm tính từ sàn nhà. Những con chuột được treo vào móc trên các băng dính cách cực 10 ~ 20 mm của đuôi và được cách ly về mặt âm thanh và thị giác bằng các tấm ván. Các chuyển động cơ thể của chuột được ghi lại và các chuyển động hô hấp bị bỏ qua. Trước ngày thử nghiệm, những con chuột bị đình chỉ trong 8 phút để thích nghi.

2.5. Thử nghiệm mê cung nước Morris ở Cistanche

Thử nghiệm mê cung nước được thực hiện theo mô tả của Vorhees et al. [] sử dụng thiết bị do Học viện Khoa học Y tế Trung Quốc phát triển. Một bể bơi hình tròn (đường kính 150 cm) chứa đầy nước (26 ± 1 độ; chiều cao vành (khoảng cách mặt nước đến mép tường): 10 cm) đã được sử dụng, bệ cứu hộ hình tròn (đường kính: 11 cm; khoảng cách giữa điểm trung tâm của bệ và bể bơi tường: 27 cm) được đặt chìm dưới mặt nước 1–1,5 cm và khu vực thử nghiệm được chiếu sáng bằng ánh sáng gián tiếp (50 ± 10 lux) để tránh phản xạ. Bốn địa điểm bắt đầu đã được sử dụng, N, S, E và W. Đối với bài kiểm tra khả năng học tập trong không gian, động vật được huấn luyện hàng ngày vào các ngày 9–11 tại địa điểm xuất phát cố định. Khoảng thời gian chờ thoát được đo để hiển thị trí nhớ không gian và khả năng học tập của chuột. Nếu chuột không thể tìm thấy hoặc leo lên bệ, chuột sẽ được dẫn đến bệ và ở lại trong 10 s. Sau khi nghỉ ngơi trong 60 giây, buổi tập tiếp theo sẽ được bắt đầu. Dữ liệu thu được từ bài kiểm tra học tập không gian gần đây nhất được sử dụng làm giá trị cơ sở để đúc. Vào các ngày 23-28, thử nghiệm điều hướng vị trí và thăm dò không gian đã được thực hiện. Thử nghiệm điều hướng địa điểm kéo dài trong 6 ngày và được thực hiện vào 1 giờ chiều, động vật được đặt xuống nước với đầu hướng vào thành bể theo chiều kim đồng hồ, và khoảng thời gian chờ (trong vòng 2 phút) được ghi lại. Sau khi kiểm tra điều hướng địa điểm được thực hiện, nền tảng đã bị xóa. Các con chuột được thả vào trong nước với đầu hướng vào thành bể bơi tại một vị trí ngẫu nhiên, và dấu vết chuyển động và tần suất chuột bơi qua nơi có nền tảng trong vòng 2 phút đã được ghi lại. Dấu vết chuyển động được ghi lại bằng máy ghi tự động đa chức năng về chuyển động của chuột (YLS -1 A, Yiyan Technology, Tế Nam, Trung Quốc).

2.6. Phát hiện Hoạt động MAO

Hoạt động MAO được đo bằng bộ phát hiện MAO (A034, Viện kỹ thuật sinh học Nam Kinh Jiancheng, Nam Kinh, Trung Quốc) và việc phát hiện được thực hiện theo quy trình của nhà sản xuất. Đồng nhất từ ​​mô não đã được thu được; 500μTôi đã trộn với 300μl của Đại lý 1 và 300μl của Chất 2, được ủ trong 3 giờ ở 37 độ, và sau đó được thêm liên tiếp với 300μl, của Chất 3, 3 ml Chất 4, và xoáy trong 2 phút. Hỗn hợp phản ứng được ly tâm 3, 000 vòng / phút trong 10 phút và mật độ quang của lớp nổi trên mặt được xác định bằng máy quang phổ tử ngoại và quang phổ khả kiến ​​(Lambda 25, PerkinElmer, Hoa Kỳ) sử dụng ánh sáng kích thích 242 nm.

2.7. Thử nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme của chất dẫn truyền thần kinh và ACTH và CORT

Bộ công cụ phát hiện xét nghiệm miễn dịch liên kết enzym (ELISA) cho dopamine (DA), norepinephrine (NE) và 5- hydroxytryptamine (5- HT) đã được mua từ BLUE GENE, Thượng Hải. Bộ dụng cụ phát hiện ELISA được mua từ Qiyun Biotech, Quảng Châu.

Các quy trình như sau: thí nghiệm được tiến hành ở nhiệt độ phòng. Phủ lên các giếng một tấm microtiter PVC với kháng thể bắt giữ ở 1–10μnồng độ g / mL trong đệm cacbonat / bicacbonat (pH 9,6). Đậy kín đĩa và ủ qua đêm 4 độ; rửa đĩa bằng PBS / tween 3 lần, và các vị trí liên kết không đặc hiệu bị Block Solution chặn lại; sau đó rửa đĩa bằng PBS / tween 3 lần. Các chất chuẩn và mẫu được pha loãng trong Dung dịch chặn và 100μl được thêm vào trong giếng của đĩa, và đĩa được đậy kín và ủ ở 37 độ trong 1 h. Thêm 100μl pha loãng kháng thể phát hiện và ủ đĩa ở 37 độ trong 1 h; rửa đĩa bằng PBS / Tween 3 lần. Thêm 50μl dung dịch phát triển màu và để đĩa tránh ánh sáng và ủ ở nhiệt độ phòng trong 15 min; 50μl đệm dừng được thêm vào để dừng phản ứng. Đo mật độ quang học (OD) cho mỗi giếng bằng đầu đọc vi tấm được đặt thành 405 nm trong 30 phút.

Cistanche Benefits for anti-depression

2.8. Phân tích thống kê

Tất cả dữ liệu được biểu diễn dưới dạng trung bình ± SEM (sai số chuẩn của giá trị trung bình), sự khác biệt đáng kể được phân tích bằng t-kiểm tra ANOVA một chiều hoặc một chiều, theo sau là kiểm tra nhiều phạm vi của Duncan bằng cách sử dụng SPSS 16. 0 và sự khác biệt giữa các nhóm vớiP<0. 05 được coi là có ý nghĩa thống kê.


Bạn cũng có thể thích