Tác dụng điều trị của Cistanoside A đối với sự trao đổi chất ở xương của chuột đã cắt trứng

Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

trừu tượng

Cistanoside A (Cis A), là một glycoside phenylethanoid hoạt tính được phân lập từCistanche Desticola YC Mađã nhận được sự chú ý của chúng tôi vì vai trò có thể có của nó trong việc điều trịloãng xương. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã đánh giá tác động của Cis A trên mô hình chuột được kích thích bằng buồng trứng (OVX) và nghiên cứu các cơ chế hoạt động phân tử cơ bản của nó. Sau 12 tuần can thiệp bằng đường uống, Cis A (20, 40 và 80 mg / kg trọng lượng cơ thể / ngày) cho thấy tác dụng chống loãng xương đáng kể trên chuột OVX, bằng chứng là tăng cường sức mạnh của xương, mật độ khoáng của xương và cải thiện vi kiến ​​trúc xương trabecular. Trong khi đó, hoạt động của các dấu hiệu tiêu xương, bao gồm phosphatase acid kháng tartrat (TRAP), deoxypyridinoline (DPD), và cathepsin K, bị giảm, và hoạt tính sinh học của dấu hiệu tạo xương alkaline phosphatase (ALP) được tăng lên. Về mặt cơ học, Cis A ức chế sự biểu hiện của yếu tố 6 liên kết với thụ thể TNF (TRAF6), một phân tử ngược dòng được chia sẻ bởi cả chất tăng cường chuỗi nhẹ kappa của yếu tố hạt nhân của tế bào B hoạt hóa (NF-κB) và phosphatidylinositol 3- kinase ( Các con đường PI3K) / Akt và sau đó ức chế mức độ của các chất kích hoạt thụ thể của phối tử kappaB yếu tố hạt nhân (RANKL), điều chỉnh giảm sự biểu hiện của NF-κB và osteoprotegerin được điều chỉnh (OPG), PI3K và Akt, có nghĩa là Cis A sở hữu hoạt động chống loãng xương ở chuột đã được cắt noãn. thông qua TRAF 6- qua trung gian ngừng hoạt động NF-kappaB và kích hoạt PI3K / Akt. Tổng hợp lại, chúng tôi trình bày những phát hiện mới rằng Cis A, bằng cách điều chỉnh giảm TRAF6, điều phối sự ức chế NF-κB và kích thích các con đường PI3K / Akt để thúc đẩy sự hình thành xương và ngăn ngừa tiêu xương. Những dữ liệu này đã chứng minh tiềm năng của Cis A như một tác nhân đầy hứa hẹn để điều trịloãng xươngdịch bệnh.

Từ khóa: cistanoside A; chuột được tạo noãn; chống loãng xương; TRAF6; RANKL

Giới thiệu

Loãng xương, một "kẻ giết người thầm lặng" có hệ thống xương, đã trở thành một mối nguy hiểm lớn đối với sức khỏe của hơn 2000 triệu người trên toàn thế giới trong những năm gần đây [1]. Nó được đặc trưng bởi mật độ khối lượng xương thấp (BMD) và sự suy giảm cấu trúc vi mô, bắt nguồn từ sự tiêu xương quá mức trong quá trình hình thành xương và cuối cùng dẫn đến gãy xương do loãng xương [2,3]. Ngày nay, việc xác định các tác nhân để ngăn chặn sự biệt hóa và tái hấp thu của tế bào hủy xương là những chiến lược phổ biến và thành công để phát triển các loại thuốc điều trịloãng xương[4], và thực sự có nhiều tác nhân tổng hợp, bao gồm estradiol valerate và alendronate sodium, có thể ngăn ngừa và điều trịloãng xương. Tuy nhiên, các loại thuốc điều trị bệnh còn xa lý tưởng; một số loại thuốc này có thể làm tăng nguy cơ ung thư nội mạc tử cung và ung thư vú và cũng có một số tác dụng phụ, chẳng hạn như tăng calci huyết, tăng calci niệu, v.v. [5], làm hạn chế các ứng dụng lâm sàng của chúng. Do đó, trong hơn một thiên niên kỷ, các loại thuốc cổ truyền của Trung Quốc (TCM), đặc biệt là bệnh TCM ăn được với các hợp chất và phân đoạn hoạt tính sinh học được phân lập, đã được sử dụng rộng rãi một cách an toàn và hiệu quả ở các nước châu Á để ngăn ngừa và điều trị các bệnh khác nhau, bao gồmloãng xương[6,7].

Loãng xươngđược đặc trưng là tăng cường tiêu xương do tăng sinh tế bào hủy xương, và quá trình này liên quan đến sự cam kết của các bạch cầu đơn nhân tạo máu vào các tiền chất của tế bào hủy xương, hợp nhất để tạo ra các tế bào hủy xương đa nhân nhắm vào các vị trí xương đang được tu sửa [4]. Chất kích hoạt thụ thể đối với phối tử yếu tố hạt nhân-κB (RANKL), một yếu tố chính được tiết ra từ nguyên bào xương, kích thích sự biệt hóa monocyte thành tế bào hủy xương [8,9]. Sự tương tác của RANKL với RANK thụ thể của nó dẫn đến một loạt các sự kiện nội bào, bao gồm NF-κB, PI3K / Akt, kinase phụ thuộc canxi / calmodulin bằng cách sử dụng protein tín hiệu tiếp hợp yếu tố liên kết với thụ thể TNF (TRAF6). Kết quả là, một số gen đánh dấu liên quan đến tế bào hủy xương, bao gồm TRAP, cathepsin K và DPD, được điều chỉnh, và quá trình tiêu xương được đẩy nhanh.

Phenylethanoid glycoside được đặc trưng bởi axit cinnamic và gốc hydroxyl phenyl ethyl được gắn vào a -glucopyranose (apiose, galactose, rhamnose, xylose, v.v.) thông qua liên kết glycosidic, được phân bố rộng rãi trong các cây thuốc [10]. Cistanoside A (Cis A) là một glycoside phenylethanoid hoạt động trongCistanche Desticola YC Ma. Theo ghi chép của dược điển Trung Quốc, theo truyền thống, C. sa mạc được sử dụng để điều trị chứng thiếu thận âm, suy nhược cơ, suy nhược cơ thắt lưng, v.v., và glycosid phenylethanoid là thành phần hoạt tính sinh học chính trong loại thảo mộc này [11]. Dựa trên lý thuyết 'thận' của bệnh TCM, thận có thể chi phối hệ thống xương, có nghĩa là sự phát triển và các chức năng của xương phụ thuộc vào tinh chất của thận, và tinh chất từ ​​thận này có thể chuyển hóa vào tủy xương để nuôi dưỡng xương, thúc đẩy sự phát triển và sửa chữa khung xương và tăng cường sức mạnh cho khung xương [12]. Vì C. Desticola có thể tăng cường sức mạnh cho thận, chúng tôi cho rằng Cis A có thể ngăn ngừa và điều trịloãng xương. Do đó, nghiên cứu hiện tại được thiết kế để xác nhận tiềm năng của Cis A trong việc ngăn ngừaloãng xươngbằng cách sử dụng mô hình chuột đã được phóng noãn, các dấu hiệu hình thành và tái hấp thu xương, cũng như các cơ chế tiềm năng liên quan, được xác định để ước tính hoạt tính sinh học chống loãng xương của tác nhân này.

Kết quả

Ảnh hưởng của Cis A đối với thử nghiệm uốn ba điểm của xương

Để phân tích xem điều trị bằng Cis A có làm cho xương chắc khỏe hơn hay không, chúng tôi đã cho xương đùi vào thử nghiệm uốn cong ba điểm. Như thể hiện trong Hình 1, tải trọng tối đa được áp dụng khi xương gãy là 21,5 phần trăm và 22. Cao hơn 0 phần trăm ở những động vật được điều trị bằng 2 0 mg / kg và 8 0 mg / kg Cis A, tương ứng, so với động vật trong nhóm noãn hoàng (OVX) (p <0. 0="" 5).="" trong="" khi="" đó,="" điều="" trị="" bằng="" cis="" a="" cũng="" giúp="" tăng="" cường="" độ="" cứng="" của="" xương;="" tất="" cả="" những="" con="" chuột="" được="" điều="" trị="" bằng="" cis="" a="" đều="" cho="" thấy="" độ="" cứng="" tăng="" lên="" đáng="" kể="" với="" dữ="" liệu="" là="" 121.="" 0="" ±="" 12,1="" (p=""><0,05), 124,1="" ±="" 16,2="" (p=""><0,05) và="" 127,7="" ±="" 9,6="" (p=""><0,01), tương="" ứng="" ,="" khi="" so="" sánh="" với="" 102,2="" ±="" 10,7="" của="" chuột="" ovx.="" kết="" quả="" chỉ="" ra="" rằng="" sức="" mạnh="" của="" xương="" tăng="" lên="" ở="" những="" con="" chuột="" ovx="" được="" điều="" trị="" bằng="" cis="" a="" là="" do="" lượng="" xương="" tăng="" lên="" và="" chất="" lượng="" xương="" được="" nâng="">

Ảnh hưởng của Cis A đối với vi kiến ​​trúc xương

Vi kiến ​​trúc xương ba chiều của những con chuột được đo bằng vi CT (Hình 2 và Bảng 1) cho thấy một cách trực quan rằng những con chuột trong nhóm OVX đã cho thấy sự giảm đáng kể về diện tích và số lượng bề mặt khi so sánh với nhóm giả, cho thấy rằng việc cắt bỏ buồng trứng có thể gây ra sự giảm đáng kể mật độ khối lượng xương (BMD, -46 phần trăm), hàm lượng khoáng chất trong xương (BMC, −66 phần trăm), hàm lượng khoáng chất trong mô (TMC, −85 phần trăm), phần thể tích xương (BVF, −82 phần trăm), số trabecular (Tb. N, -76 phần trăm) và sự gia tăng phân tách trabecular (Tb. Sp, cộng với 80 phần trăm) mà không có bất kỳ sự thay đổi nào trong tổng mật độ khoáng của mô (TMD) và độ dày của bề mặt (Tb. Th) sau hoạt động 12 hàng tuần.

Tuy nhiên, những con chuột OVX được điều trị bằng Cis A dẫn đến BMD tăng phụ thuộc vào liều lượng (cộng 43 phần trăm ~ 57 phần trăm), BMC (cộng với 65 phần trăm ~ 73 phần trăm), TMC (cộng với 83 phần trăm ~ 90 phần trăm), BVF (cộng với 80 phần trăm ~ 88 phần trăm), giảm Tb nhiều hơn. Sp (-79 phần trăm ~ 88 phần trăm) và Tb được nâng cao hơn nữa. N (cộng 73 phần trăm ~ 82 phần trăm) so với nhóm OVX. TMD dường như không bị ảnh hưởng bởi việc cắt bỏ buồng trứng nhưng đã tăng lên đáng kể khi điều trị bằng estradiol valerate (EV).

Ảnh hưởng của Cis A đối với cả sự hình thành xương và các dấu hiệu tái hấp thu

Ảnh hưởng của Cis A đối với các dấu hiệu tiêu xương, bao gồm TRAP, DPD, cathepsin K và chỉ số tạo xương ALP và Gla-protein xương (BGP), được thể hiện trong Hình 3. Sau 12 tuần phẫu thuật cắt buồng trứng, các hoạt động của TRAP, DPD và cathepsin K ở nhóm OVX tăng đáng kể, đặc biệt là DPD, tăng gần 55,6%; TRAP và cathepsin K lần lượt được tăng cường 43,5% và 38,1% so với nhóm giả. Cis A, được dùng bằng đường uống trong 12 tuần, đã chứng minh tiềm năng đáng chú ý trong việc ngăn ngừa tất cả các dấu hiệu tiêu xương nêu trên, đặc biệt là liều lượng cao (8 0 mg / kg) có tác dụng đáng kể trong việc ngăn chặn các hoạt động của DPD tương ứng là 45. 0 phần trăm, TRAP là 49. 0 phần trăm và cathepsin K là 44. 0 phần trăm (p <0. 01),="" so="" với="" nhóm="" ovx="" (hình="" 3).="" mặc="" dù="" xu="" hướng="" ngày="" càng="" tăng="" của="" các="" hoạt="" động="" alp="" và="" bgp="" đã="" được="" chứng="" minh="" trong="" nhóm="" ovx,="" nhưng="" không="" có="" thay="" đổi="" có="" ý="" nghĩa="" thống="" kê="" nào="" được="" quan="" sát="" thấy.="" tuy="" nhiên,="" sự="" cải="" thiện="" đáng="" kể="" hoạt="" động="" alp="" đã="" được="" quan="" sát="" thấy="" ở="" các="" nhóm="" được="" điều="" trị="" cis="" a="" thấp="" và="" cao="" so="" với="" nhóm="" giả="" (p=""><>

Ảnh hưởng của Cis A đến mức độ biểu hiện protein của TRAF6, NF-κB PI3K, Akt, OPG và RANKL

Phân tích Western blot cho thấy rằng so với nhóm giả, mức protein của TRAF6, NF-κB và RANKL trong nhóm OVX đã tăng lên đáng kể (p <0. 0="" 5),="" trong="" khi="" opg,="" pi3k="" và="" akt="" đã="" giảm="" đáng="" kể="" (hình="" 4).="" cis="" a="" (2="" 0="" mg="" kg="" hoặc="" 8="" 0="" mg="" kg)="" được="" điều="" chỉnh="" giảm="" đáng="" kể="" biểu="" thức="" traf6="" (p=""><0. 0="" 5),="" theo="" sau="" là="" biểu="" thức="" rankl="" là="" giảm="" và="" opg="" tăng,="" có="" nghĩa="" là="" tỷ="" lệ="" opg="" rankl="" đã="" được="" điều="" chỉnh.="" do="" đó,="" các="" tầng="" tín="" hiệu="" của="" nf-κb="" được="" điều="" chỉnh="" giảm="" và="" pi3k="" akt="" được="" điều="" chỉnh="" bởi="" nghiệm="" thức="" cis="" a="" (p=""><0,05). phân="" tử="" 2017,="" 22,="" 197="" 5="" trong="" tổng="" số="" 11="" 2.="" 1.4.="" ảnh="" hưởng="" của="" cis="" a="" đến="" mức="" độ="" biểu="" hiện="" protein="" của="" traf6,="" nf-κb="" pi3k,="" akt,="" opg="" và="" rankl="" phân="" tích="" western="" blot="" cho="" thấy="" rằng="" so="" với="" nhóm="" giả,="" mức="" protein="" của="" traf6,="" nf-κb="" và="" rankl="" trong="" nhóm="" ovx="" là="" tăng="" đáng="" kể="" (p=""><0,05), trong="" khi="" opg,="" pi3k="" và="" akt="" giảm="" đáng="" kể="" (hình="" 4).="" cis="" a="" (20="" mg="" kg="" hoặc="" 80="" mg="" kg)="" điều="" chỉnh="" giảm="" đáng="" kể="" biểu="" hiện="" traf6="" (p=""><0,05), tiếp="" theo="" là="" biểu="" hiện="" rankl="" giảm="" và="" opg="" tăng,="" có="" nghĩa="" là="" tỷ="" lệ="" opg="" rankl="" đã="" được="" điều="" chỉnh.="" do="" đó,="" các="" tầng="" tín="" hiệu="" của="" nf-κb="" được="" điều="" chỉnh="" giảm="" và="" của="" pi3k="" akt="" được="" điều="" chỉnh="" bằng="" cách="" xử="" lý="" cis="" a="" (p=""><>

Thảo luận

Với những hạn chế của các lựa chọn điều trị hiện tại choloãng xươngbệnh tật, cần có sự thay thế từ thực phẩm hoặc cây thuốc tự nhiên ăn được. Là một phần trong nỗ lực không ngừng của chúng tôi nhằm phát hiện ra các tác nhân chống loãng xương hiệu quả từ TCM, chúng tôi đã tìm thấy một loạt các chất chiết xuất, phân đoạn và hợp chất có tác dụng chống loãng xương [13,14].Cistanche Desticolalà một bệnh TCM cổ điển quan trọng, được phát hiện có đặc điểm an toàn thuận lợi [15] và các chức năng y học rộng rãi để điều trị chứng thiếu thận, v.v. [16]. Theo lý luận của bệnh TCM, bệnh TCM có tác dụng bổ thận tráng dương thường được dùng để chữa bệnh.loãng xương; phenylethanoid glycoside là thành phần hoạt tính sinh học chính trong loại thảo mộc này, do đó ngụ ý rằng glycoside phenylethanoid chứa trong C. sa mạc có thể có đặc tính chống loãng xương. Người ta đã chứng minh rằng chiết xuất từ ​​C. sa mạc-la có thể ức chế đáng kể sự giảm BMD và ngăn chặn sự suy giảm vi kiến ​​trúc trabecular do OVX gây ra [17]. Trong thí nghiệm in vitro, nó cũng làm tăng đáng kể ALP, protein di truyền hình thái xương -2, và mRNA osteopontin, cũng như sự khoáng hóa xương của nguyên bào xương được nuôi cấy [18]. Echinacoside, một thành phần có hoạt tính sinh học chính trong C. sa mạc được ghi nhận chính thức trong dược điển Trung Quốc [11], thể hiện hoạt tính chống loãng xương với liều lượng cao 30 ~ 270 mg / kg thể trọng / ngày [19], và kết quả in vitro hơn nữa cho thấy rằng nó có thể thúc đẩy quá trình tái tạo xương bằng cách tăng tỷ lệ OPG / RANKL trong MC3T 3- E1 Subclone 14 tế bào [20]. Cis A là một trong những glycoside phenylethanoid được phân lập từ C. sa mạc, và một số báo cáo tiết lộ rằng hợp chất này có hoạt tính chống oxy hóa [21] và đặc tính chống viêm [22,23]. Một bài báo được xuất bản gần đây đã phát hiện ra rằng Cis A thể hiện các hoạt động bảo vệ trên cả CCl4 và độc tính trên gan do rượu ở chuột, và nó cũng cho thấy đặc tính bảo vệ đối với tổn thương do ethanol gây ra trong tế bào gan của chuột được nuôi cấy sơ cấp trong ống nghiệm [24]. Trong nghiên cứu hiện tại của chúng tôi, kết quả cho thấy Cis A sở hữu hoạt tính chống loãng xương ở liều lượng thấp (20 ~ 80 mg / kg thể trọng / ngày) bằng cách sử dụng mô hình chuột đã được phóng noãn, và hoạt tính sinh học này được thực hiện bằng cách điều chỉnh giảm mức TRAF6, ngăn chặn sự biểu hiện của RANKL và NF-κB và kích thích OPG, PI3K và Akt, có nghĩa là hiệu quả điều trị của Cis A trên chuột OVX thông qua cơ chế của TRAF 6- qua trung gian bất hoạt NF-kappaB và kích hoạt PI3K / Akt.

Ai cũng biết rằng việc cắt bỏ buồng trứng có thể gây raloãng xươngvới sự suy giảm rõ ràng về BMD, sức mạnh cơ sinh học, chất lượng xương và vi kiến ​​trúc xương, và những thay đổi trên một phần là do thiếu hụt estrogen [25]. Bây giờ, trong thí nghiệm in vivo hiện tại, nghiên cứu của chúng tôi chứng minh rằng việc cắt bỏ buồng trứng gây raloãng xươngdẫn đến giảm đáng kể sức mạnh cơ sinh học và các thông số cấu trúc bề mặt, bao gồm BMD, BMC, TMC và Tb. N, và tăng Tb. Sp; và điều trị Cis A đã cải thiện đáng kể các đặc tính cơ học của xương bao gồm tải trọng và độ cứng tối đa, nâng cao BMD và cải thiện hầu hết các thông số cấu trúc vi kiến ​​trúc của xương so với những con chuột trong nhóm OVX, cho thấy rằng Cis A có hiệu quả trong việc cải thiện chất lượng xương và vi kiến ​​trúc trabecular trong chuột OVX.

Bên cạnh chỉ số BMD tổng, kiểm tra uốn cong ba điểm và đo vi kiến ​​trúc xương có thể chẩn đoán trực tiếploãng xương, các dấu hiệu hình thành xương, bao gồm ALP và BGP, và chỉ số tiêu xương, bao gồm TRAP, DPD và cathepsin K, cũng được sử dụng để làm sáng tỏ các cơ chế chống loãng xương liên quan của Cis A. Trong nghiên cứu của chúng tôi, hoạt động ALP ở chuột nhóm OVX cho thấy một xu hướng gia tăng không đáng kể, cho thấy tốc độ tăng chu chuyển xương [26,27] ở giai đoạn sau mãn kinhloãng xương; liều lượng cao (80 mg / kg thể trọng / ngày) và thấp (20 mg / kg thể trọng / ngày) của phương pháp điều trị Cis A cho thấy sự tăng cường đáng kể hoạt động ALP so với nhóm giả, trong khi hoạt động của BGP dường như không bị ảnh hưởng bởi cắt bỏ buồng trứng ở tất cả các nhóm được điều trị; TRAP, DPD và cathepsin K tăng lên đáng kể ở nhóm OVX, và việc dùng Cis A làm giảm đáng kể cả ba dấu hiệu tiêu xương. Dữ liệu trên ngụ ý rằng Cis A sở hữu hoạt động chống loãng xương tiềm tàng và tác dụng này được thực hiện bởi sự điều chỉnh của quá trình trao đổi chất của xương, bao gồm cả việc ngăn chặn quá trình tiêu xương và tăng sự hình thành xương.

Sự phối hợp giữa nguyên bào xương và tế bào hủy xương là một yếu tố quan trọng trong việc duy trì tính toàn vẹn của bộ xương. Các tế bào xương, biểu hiện TRAP, gắn vào bề mặt của xương thông qua sự hình thành các vùng niêm phong liên kết với actin, trong đó các enzym phân giải protein, chẳng hạn như cathepsin K, được giải phóng, dẫn đến sự hình thành các hố tái hấp thu. Sự điều biến của quá trình tạo xương bởi các tế bào chưa trưởng thành của dòng tạo xương được thực hiện qua trung gian của RANKL và OPG [28]. OPG là một thụ thể mồi nhử ức chế sự hoạt hóa RANKL của quá trình tạo xương, do đó làm giảm quá trình tiêu xương. RANKL, cung cấp một tín hiệu quan trọng cho tế bào tạo cốt bào, là một phân tử liên kết màng của họ phối tử yếu tố hoại tử khối u, thúc đẩy sự hình thành của tế bào hủy xương. Tỷ lệ biểu hiện OPG / RANKL được cho là thông số chính của hoạt động tạo cốt bào, và các dòng tín hiệu được kích hoạt bởi RANKL bao gồm các con đường NF-κB và PI3K [29]. Tầm quan trọng của con đường NF-κB đối với quá trình tạo cốt bào được chứng minh bằng thực tế rằng việc loại bỏ NF-κB ở chuột dẫn đến sự vắng mặt của các tế bào hủy xương trưởng thành [30]. TRAF6 đã được chứng minh là một mục tiêu đầy hứa hẹn cho các loại thuốc chống loãng xương mới. Những con chuột bị thiếu TRAF 6- biểu hiện quá trình tạo xương bị khiếm khuyết và quá trình tạo xương nghiêm trọng, do đó đã chứng minh tầm quan trọng của TRAF6 trong chuyển hóa xương. Bằng chứng mới nổi chỉ ra một chức năng điều tiết quan trọng đối với TRAF6 trong các tầng tín hiệu qua trung gian RANKL / RANK [4,31]. Dữ liệu của nghiên cứu hiện tại chỉ ra rằng điều trị Cis A trên chuột OVX dẫn đến điều chỉnh giảm mức độ biểu hiện protein TRAF6, giảm RANKL và tăng biểu hiện OPG và do đó ngăn chặn sự kích hoạt RANKL của NF-κB hạ lưu và kích hoạt các đường dẫn tín hiệu PI3K / Akt , gợi ý rằng Cis A ức chế sự biệt hóa của tế bào hủy xương bằng cách bất hoạt TRAF 6- NF-kappaB qua trung gian và kích hoạt PI3K / Akt và tăng tỷ lệ OPG / RANKL, sau đó ức chế quá trình tạo xương và thúc đẩy hình thành xương.

Người giới thiệu

1. Lane, NE Dịch tễ học, căn nguyên và chẩn đoánloãng xương. Là. J. Sản khoa. Gynecol 2006, 194 (Bổ sung S2), S3 – S11. [CrossRef] [PubMed]

2. Kanis, JA; McCloskey, EV; Harvey, NC; Johansson, H.; Leslie, Ngưỡng can thiệp của WD và chẩn đoánLoãng xương. J. Bone Miner. Res. 2015, 30, 1747–1753. [CrossRef] [PubMed]

3. Jiang, J.; Li, J .; Jia, X. Hoạt tính chống loãng xương của icaridin trung ương (CIT) trên chuyển hóa xương của chuột đã được cắt noãn. Phân tử 2014, 19, 18690–18704. [CrossRef] [PubMed]

4. Li, J.; Zeng, L.; Xie, J .; Yue, Z .; Đặng, H.; Ma, X.; Zheng, C.; Ngô, X.; Luo, J .; Liu, M. Ức chế tạo xương và hấp thu xương in vitro và in vivo bởi một prenyl flavonoid xanthohumol từ hoa bia. Khoa học. Bản tái bản 2015, 5, 1–14.

5. Barzel, US Estrogen trong phòng ngừa và điều trị sau mãn kinhloãng xương: Đánh giá. Là. J. Med. 1988, 85, 847–850. [CrossRef]

6. Zhu, Z .; Xue, LM; Hán, T.; Jiao, L.; Tần, LP; Li, YS; Zheng, HC; Zhang, QY Hiệu ứng chống loãng xương và mô tả đặc tính protein của mục tiêu và cơ chế của Thuốc sắc Er-Xian trên UMR tạo xương -106 và tế bào hủy xương gây ra từ RAW264.7. Phân tử 2010, 15, 4695–4710. [CrossRef] [PubMed]

7. Ngô, YB; Zheng, CJ; Tần, LP; CN, LN; Hán, T.; Jiao, L.; Zhang, QY; Wu, JZ Hoạt động chống loãng xương của anthraquinones từ Morinda Officinalis trên nguyên bào xương và tế bào hủy xương. Phân tử 2009, 14, 573–583. [CrossRef] [PubMed]

8. Bonewald, LF Tế bào xương tuyệt vời. J. Bone Miner. Res. 2011, 26, 229–238. [CrossRef] [PubMed]

9. Banin Hirata, BK; Oda, JM; Losi Guembarovski, R .; Ariza, CB; de Oliveira, CE; Watanabe, MA Dấu hiệu phân tử cho ung thư vú: dự đoán về hành vi của khối u. Dis. Điểm đánh dấu 2014, 2014, 1–12. [CrossRef] [PubMed]

10. Alipieva, K.; Korkina, L.; Orhan, IE; Georgiev, MI Verbascoside — Đánh giá về sự xuất hiện, tổng hợp (sinh học) và ý nghĩa dược lý của nó. Công nghệ sinh học. Tiến lên 2014, 32, 1065–1076. [CrossRef] [PubMed]

11. Dược điển, Ủy ban biên tập Dược điển Trung Quốc. Dược điển của Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa; Nhà xuất bản Khoa học và Công nghệ Y tế Trung Quốc: Bắc Kinh, Trung Quốc, 2015.

12. Zhang, H.; Xing, WW; Li, YS; Zhu, Z .; Wu, JZ; Zhang, QY; Zhang, W .; Qin, LP Ảnh hưởng của một chế phẩm thảo dược truyền thống của Trung Quốc lên nguyên bào xương và tế bào hủy xương. Maturitas 2008, 61, 334–339. [CrossRef] [PubMed]

13. Ma, X.-Q.; Zheng, C.-J.; Zhang, Y. Hu, C.-L.; Bing, L.; Fu, X.-Y .; Han, L.-Y.; Xu, L.-S .; Rahman, K .; Qin, L.-P. Flflavonoid chống loãng xương từ Podocarpium podocarpum. Phytochem. Lett. 2013, 6, 118–122. [CrossRef]

14. Ye, Q; Ma, XQ; Hu, CL; Lin, B.; Xu, LS; Zheng, CJ; Qin, LP Hoạt động chống loãng xương và các thành phần của Podocarpium podocarpus. Phytomedicine 2015, 22, 94–102. [CrossRef] [PubMed]

15. Gao, Y.; Tần, G.; Ôn, P.; Vương, Y. Fu, W .; Anh ấy, L.; Yao, S .; Zhao, P. Đánh giá an toàn của bộtCistanche Desticola YCMabằng thử nghiệm cho ăn 90- ngày ở chuột Sprague-Dawley. Thuốc Chem. Toxicol. 2016, 1–7. [CrossRef] [PubMed]

16. Hoàng, ZX; Chen, GM; Zhao, KT; Chen, R.; Lin, CF Nghiên cứu về độc tính củaCistanche Deserticola. Cái cằm. J. Phòng thí nghiệm sức khỏe. Technol. 2014, 24, 1098–1100.

17. Zhang, L.; Yue, X.; Zhang, L. .; Zhao, J .; Chen, Y. Cao, Z .; Liu, Y. Tác dụng chống loãng xương củaChiết xuất Cistanche Desticola Maở chuột đã rụng trứng. Chốt. J. Pharm. Res. 2016, 15, 1929–1933. [CrossRef]

18. Li, TM; Hoàng, HC; Sử, CM; Hồ, TY; Ngô, CM; Chen, WC; Fong, YC; Tang, CHChiết xuất Cistanche Desticolatăng tạo xương ở nguyên bào xương. J. Pharm. Pharmacol. 2012, 64, 897–907. [CrossRef] [PubMed]

19. Li, F.; Yang, X.; Yang, Y. Guo, C.; Zhang, C.; Yang, Z .; Li, P. Hoạt tính chống loãng xương của echinacoside ở chuột đã cắt noãn. Phytomedicine 2013,

20, 549–557. [CrossRef] [PubMed] 20. Li, F.; Yang, Y. Zhu, P.; Chen, W .; Qi, D.; Shi, X.; Zhang, C.; Yang, Z .; Li, P. Echinacoside thúc đẩy quá trình tái tạo xương bằng cách tăng tỷ lệ OPG / RANKL trong các tế bào MC3T 3- E1. Fitoterapia 2012, 83, 1443–1450. [CrossRef] [PubMed]

21. Xiong, Q.; Kadota, S .; Tani, T.; Namba, T. Tác dụng chống oxy hóa của phenylethanoids từCistanche Desticola. Biol. Dược phẩm. Bò đực. Năm 1996, 19, 1580–1585. [CrossRef] [PubMed]

22. Nan, ZD; Zeng, KW; Shi, SP; Zhao, MB; Giang, Y .; Tu, PF Phenylethanoid glycoside với các hoạt động chống viêm từ thân cây củaCistanche Desticolađược nuôi cấy ở sa mạc Tarim. Fitoterapia 2013, 89, 167–174. [CrossRef] [PubMed]

23. Xiong, Q.; Tezuka, Y. Kaneko, T.; Li, H.; Tran, LQ; Hase, K. Namba, T.; Kadota, S. Sự ức chế nitric oxide bởi phenylethanoids trong các đại thực bào hoạt hóa. Eur. J. Pharmacol. 2000, 400, 137–144. [CrossRef]. Luo, H.; Cao, R.; Vương, L.; Zhu, L. Tác dụng bảo vệ của Cistanchis A đối với tổn thương do ethanol gây ra ở tế bào gan chuột nuôi cấy sơ cấp. Sinh học. Dược phẩm khác. 2016, 83, 1071–1079. [CrossRef] [PubMed]

25. Nian, H.; Ma, MH; Nian, SS; Xu, LL Hoạt động chống loãng xương của icariin ở chuột đã cắt buồng trứng. Phytomedicine 2009, 16, 320–326. [CrossRef] [PubMed]

26. Swaminathan, R. Dấu hiệu sinh hóa của chu chuyển xương. Clin. Chim. Acta 2001, 313, 95–105. [CrossRef]

27. Lim, DW; Kim, JG; Lee, Y .; Chà, SH; Kim, YT Tác dụng phòng ngừa của chiết xuất vỏ cây Eleutherococcus senticosus trong OVX gây raloãng xươngở chuột. Phân tử 2013, 18, 7998–8008. [CrossRef] [PubMed]

28. Bord, S.; Ireland, DC; Beavan, SR; Compston, JE Ảnh hưởng của estrogen đối với sự biểu hiện của osteoprotegerin, RANKL và thụ thể estrogen trong nguyên bào xương của con người. Bone 2003, 32, 136–141. [CrossRef]

29. Takayanagi, H. Osteoimmunology: chia sẻ cơ chế và nhiễu xuyên âm giữa hệ thống miễn dịch và xương. Nat. Rev. Immunol. 2007, 7, 292–304. [CrossRef] [PubMed]

30. Franzoso, G.; Carlson, L.; Xing, L.; Poljak, L .; Bờ, EW; Màu nâu, KD; Leonardi, A. .; Trần, T.; Boyce, BF; Siebenlist, U. Yêu cầu đối với NF-kappaB trong quá trình hủy cốt bào và phát triển tế bào B. Gene Dev. 1997, 11, 3482–3496. [CrossRef] [PubMed]

31. Tân, EM; Li, L.; Indran, IR; Nhai, N.; Yong, EL TRAF6 làm trung gian ức chế quá trình tạo xương và ngăn ngừa mất xương do phẫu thuật cắt buồng trứng bằng một prenyl flavonoid mới. J. Bone Miner. Res. 2016. [CrossRef] [PubMed]

32. Jiao, L.; Cao, DP; Tần, LP; Hán, T.; Zhang, QY; Zhu, Z .; Yan, F. Hoạt động chống loãng xương của các hợp chất phenolic từ Curculigoosystemoides. Phytomedicine 2009, 16, 874–881. [CrossRef] [PubMed]