Tổng số Glycoside và Polysaccharides của Cistanche Deserticola ngăn ngừa loãng xương

Tiếp xúc:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Fujiang Wang 1, Pengfei Tu, Kewu Zeng *, Yong Jiang **

TRỪU TƯỢNG

Mức độ liên quan về dân tộc học:Thuốc Đông y Cistanche Desticola YC Ma có tác dụng “bổ thận tráng dương”. Tuy nhiên, các chất chiết xuất hoạt tính cụ thể của C. sa mạcla và cơ chế điều trị chứng loãng xương chưa rõ ràng.

Mục đích của nghiên cứu:Chúng tôi muốn xác định các chiết xuất thành phần hiệu quả của C. sa mạcza để điều trị loãng xương và các cơ chế tiềm năng.

Nguyên liệu và phương pháp:Nhóm của chúng tôi đã nghiên cứu các chất chiết xuất từ ​​C. sa mạc có hoạt tính chống loãng xương, bao gồm tổng số glycoside (TGs), polysaccharides (PS) và oligosaccharides (OSs) trên chuột 6 (SAMP6) được tăng tốc độ lão hóa. Các phương pháp nhuộm Trichrome của Goldner, Van Gieson (VG), Safranin O-Fast Green, và nhuộm von Kossa được thực hiện để điều tra sự hình thành cấu trúc xương và lắng đọng canxi. Huyết thanh được thu thập để phát hiện các dấu hiệu sinh hóa. Vi kiến ​​trúc xương được phát hiện bằng vi-CT. Biểu hiện của protein di truyền hình thái xương -2 (BMP -2), osteocalcin (OCN), osteoprotegerin (OPG), chất kích hoạt thụ thể của phối tử yếu tố hạt nhân-B (RANKL), p-glycogen synthetase kinase {{11 }} (p-GSK -3), và p - - catenin được phân tích bằng phương pháp thấm phương tây và hóa mô miễn dịch.

Kết quả:TGs và PSs cải thiện các tổn thương mô bệnh học xương, thúc đẩy sự hình thành xương mới, sợi collagenous, và tế bào chondrocytes, đồng thời đẩy nhanh quá trình lắng đọng canxi. Hơn nữa, họ đã thay đổi đáng kể các dấu ấn sinh học của sự luân chuyển xương và cải thiện vi kiến ​​trúc xương một cách hiệu quả. Các cơ chế nghiên cứu sâu hơn cho thấy TGs và PSs làm giảm đáng kể các biểu hiện của RANKL, p - - catenin, cũng như điều chỉnh tăng cường biểu hiện của BMP -2, OCN, OPG và p-GSK {{ 4}} (Ser9).

Sự kết luận:Các phát hiện của nghiên cứu này cho thấy TG và PS có thể thúc đẩy quá trình hình thành xương tạo cốt bào và cải thiện tổn thương vi cấu trúc xương ở chuột SAMP6, và tác dụng điều trị của chúng đối với bệnh loãng xương là thông qua việc kích hoạt đường truyền tín hiệu Wnt / -catenin.

Cistanche có thểthúc đẩy xương tạo cốt bàohình thành và cải thiệntổn thương vi cấu trúc xương.

1. Giới thiệu

Loãng xương là một căn bệnh phổ biến ở người cao tuổi gây nguy hiểm nghiêm trọng đến sức khỏe của nhân loại (Ye et al., 2020). Bệnh nhân loãng xương có thể hoàn toàn không có triệu chứng trước khi gãy xương, do đó việc phòng ngừa và điều trị loãng xương hiệu quả là điều tối quan trọng (Tella và Gallagher, 2014).

Nghiên cứu cho thấy rằng sự gia tăng quá trình hủy xương và giảm sự hình thành xương làm phát sinh sự mất cân bằng trong quá trình tái tạo xương, dẫn đến loãng xương (Sims và Gooi, 2008). Nguyên bào xương và tế bào hủy xương là hai loại tế bào rất quan trọng cho quá trình hình thành và tiêu xương. Con đường wnt / -catenin cần thiết cho sự tăng trưởng, phát triển và duy trì mô xương (Cadigan và Nusse, 1997), và cũng đóng một vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh sự biệt hóa tế bào mô đệm tủy xương của chó beagle (BMSCs) (Jing et al. , 2018). GSK -3 ngăn chặn sự suy thoái của -catenin. -Catenin sau đó xâm nhập vào nhân, và sau đó nó có thể kết hợp với yếu tố liên kết yếu tố tế bào T / yếu tố tăng cường lymphoid và điều chỉnh sự biểu hiện của các gen mục tiêu Wnt. Trong khi đó, người ta thấy rằng tín hiệu Wnt / -catenin làm giảm sự biệt hóa của tế bào hủy xương bằng cách kích thích sản xuất và bài tiết OPG (Glass et al., 2005), là chất đối kháng tự nhiên của RANKL (Lacey et al., 1998). OPG đóng một vai trò điều tiết quan trọng trong quá trình hình thành xương và tiêu xương. Trong mọi trường hợp, việc loại bỏ -catenin trong tế bào hủy xương làm tăng số lượng tế bào hủy xương và quá trình tiêu xương và giảm khối lượng xương (Wei và cộng sự, 2011). Thuốc ức chế tiêu xương và chất thúc đẩy hình thành xương được sử dụng chủ yếu trong điều trị loãng xương. Xét thấy các phản ứng có hại của các loại thuốc hiện đang sử dụng trên lâm sàng với hiệu quả chính xác cũng là điều hiển nhiên, nên việc tìm kiếm các loại thuốc có ít tác dụng phụ hơn là điều cấp thiết.

Cistanche Desticola YC Ma (C. Desticola) là một trong những loài thực vật nguồn gốc của loại thảo mộc y học cổ truyền Trung Quốc được sử dụng rộng rãi Cistanches Herba, Roucongrong trong tiếng Trung Quốc, để điều trị một số bệnh, chẳng hạn như thiếu thận, vô sinh ở phụ nữ và táo bón tuổi già. hơn 1000 năm ở Trung Quốc (Ủy ban Dược điển Quốc gia, 2020). Theo lý thuyết của y học cổ truyền Trung Quốc (TCM), "thận chủ trị xương" và "bổ thận tráng dương", C. sa mạc được sử dụng để điều trị loãng xương. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng C. Desticola có thể cải thiện nồng độ phosphatase kiềm trong huyết thanh (ALP), osteocalcin và ion canxi, thúc đẩy sự biểu hiện của BMP -2 trong nguyên bào xương của chuột (Gang và cộng sự, 2018). Ngoài ra, các nghiên cứu đã chỉ ra rằng C. Desticola có tác dụng bảo vệ chống lại quá trình tạo tế bào xương do RANKL gây ra (Zhang và cộng sự, 2019). Mặc dù C. Desticola có tác dụng điều trị đối với bệnh loãng xương, nhưng các thành phần hoạt tính cụ thể của nó không được rõ ràng lắm. Việc khám phá các dạng thành phần hữu hiệu của C. sa mạc-la-môn để điều trị loãng xương và các cơ chế liên quan có ý nghĩa lớn.

Do đó, chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu này để xác định xem có một số tác dụng có lợi của các chất chiết xuất có chứa các loại thành phần hóa học khác nhau từ C. sa mạcza trên chuột SAMP6 hay không. Các kết quả nghiên cứu có thể cung cấp hướng dẫn chính xác cho ứng dụng lâm sàng của C. sa mạc-la-môn cũng như tiết lộ cơ sở vật chất của C. sa mạc-ni-a để điều trị loãng xương.

2. Vật liệu và phương pháp

2.1. Hóa chất và thuốc thử

Cistanche Desticola YC Ma được mua từ Công ty TNHH Công nghệ sinh học Mandela (Alashan, Nội Mông, Trung Quốc), và sau đó một người trong nhóm tác giả đã xác định chúng (PF Tu). TG, PS và OS được chuẩn bị như phương pháp đã đề cập trước đây (Gao và cộng sự, 2015). Theo báo cáo, phân tích thành phần của từng chiết xuất được thực hiện thông qua sử dụng HPLC. (Li và cộng sự, 2019; Wang và cộng sự, 2020). H&E, nhuộm ba màu của Goldner, nhuộm Van Gieson (VG) và bộ dụng cụ Safranin O-Fast Green được mua từ Boster (Hồ Bắc, Trung Quốc). BMP chống chuột thỏ -2 (ab14933), OCN (ab93876), OPG (ab183910) và RANKL (ab216484) đã được mua từ Abcam (Cambridge, Anh). Công nghệ tín hiệu di động là nguồn gốc của p-GSK chống chuột thỏ -3 (Ser9) (# 5558), GSK3 (# 12456), -catenin (# 13727) và p - - catenin (# 4176). Các kháng thể thứ cấp được mua từ Công nghệ sinh học Cầu Vàng Trung Sơn (Bắc Kinh, Trung Quốc).

Chiết xuất cistanche chất lượng caotừChengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd

2.2. Loài vật

Chuột 5- cái được tăng tốc độ tuổi lão hóa / chuột kháng 1 (SAMR1) và chuột SAMP6 được lấy từ Công nghệ Động vật Phòng thí nghiệm Sông Vital (Bắc Kinh, Trung Quốc). Tất cả các thao tác đối với động vật được thực hiện theo các hướng dẫn do Ủy ban chăm sóc và sử dụng động vật của Trung tâm Khoa học Sức khỏe Đại học Bắc Kinh ban hành.

2.3. Quản lý thuốc

Các con chuột được tách ngẫu nhiên thành năm nhóm sau: Nhóm SAMR1 (nước muối thường, n=10); Nhóm SAMP6 (nước muối thường, n {3}}); Nhóm TG (400 mg / kg, n=10); Nhóm PS (400 mg / kg, n=10) và nhóm OS (400 mg / kg, n=10) (Gao và cộng sự, 2015). Tất cả các loại thuốc đã được sử dụng và hàng ngày trong 12 tuần.

2.4. Nhuộm ba màu của Goldner, nhuộm H&E, nhuộm SafraninO-Fast Green và nhuộm Van Gieson (VG)

Sau 12 tuần, các con cái nhanh chóng được lấy ra và cố định bằng cách sử dụng axit tetraacetic ethylene diamine 10% (EDTA) trong 7 ngày ở 4 ◦C. Tiếp theo, các con cái được cắt thành một lát (5 μm) và nhuộm bằng cách nhuộm Goldner Trichrome, Van Gieson (VG), SafraninO-Fast Green và H&E theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Hình ảnh được quan sát bằng kính hiển vi ánh sáng (Leica, Solms, Đức).

2.5. Đo các mức BGP, BALP, P1NP, PICP, ALP, S-CTX, TRACP, U-CTX, U-NTX, D-Pyr và Pyr

Nồng độ của protein gla của xương (BGP), phosphatase kiềm đặc hiệu cho xương (BALP), procollagen loại 1, propeptit đầu N (P1NP), procollagen loại I - propeptit đầu C (PICP), phosphatase kiềm (ALP), S – C -telopeptide loại I-collagen (S-CTX), axit phosphatase kháng tatrate (TRACP), U – C-telopeptide của loại I-collagen (U-CTX), U – N-telopeptide của loại I- collagen (U-NTX), D-pyridinoline (D-Pyr) và pyridinoline (Pyr) được xác định bằng xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym (Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd, Jiangsu, China).

2.6. Nhuộm Von Kossa

Các lát xương đùi được ngâm trong nitrat bạc 1 phần trăm trong 3 0 phút dưới tia nắng mặt trời gay gắt và sau đó được rửa ba lần bằng nước khử ion. Sau đó, 5% natri thiosulfat được thêm vào trong 5 phút để loại bỏ bạc chưa phản ứng. Các muối canxi photphat được hình dung như màu đen. Để phân tích định lượng hàm lượng canxi trong xương đùi, phần mềm Image-Pro Plus phiên bản 6.0 và Adobe Photoshop đã được áp dụng.

2.7. Phân tích chụp cắt lớp vi tính

Tất cả các mẫu xương đùi được quét ở độ phân giải 9 μm bằng máy quét CT siêu nhỏ (PerkinElmer, MA, USA). Phân tích sâu hơn đã được thực hiện bằng phần mềm Analyze12. 0 để tính toán mật độ khoáng của xương (BMD), thể tích xương / tổng thể tích (BV / TV), số trabecular (Tb. N), phân tách trabecular (Tb. Sp), bề dày bề mặt (Tb. Th), và mật độ khoáng mô (TMD). Hình ảnh ba chiều được tái tạo bằng phần mềm CTVox (PerkinElmer, MA, USA).

2.8. Tích tụ tetracycline và calcein

Mỗi con vật được tiêm 25 mg / kg tetracycline trong màng bụng và 5 mg / kg calcein vào ngày thứ 13 và ngày thứ 3 trước khi chết. Sự tích tụ tetracycline và calcein được khảo sát bằng cách sử dụng Hệ thống chẩn đoán hình ảnh bệnh lý định lượng tự động Vectra® Polaris ™ (PerkinElmer, MA, USA). Khoảng cách giữa tetracycline và calcein có thể được quan sát bằng phần mềm Image-Pro Plus phiên bản 6. 0.

2.9. Phân tích Western blotting

Các mô xương đùi được đồng nhất và được phân giải trong đệm ly giải RIPA. Nồng độ protein được xác định bằng cách sử dụng bộ thuốc thử xét nghiệm axit bicinchoninic (BCA) (Beijing TransGen Biotech, Bắc Kinh, Trung Quốc). Tổng số protein được nạp vào gel SDS-PAGE 10% hoặc 12% và sau đó được chuyển vào màng nitrocellulose. Màng được chặn lại và sau đó được ủ qua đêm với kháng thể sơ cấp và GAPDH (Los Angeles, Hoa Kỳ) ở 4 ◦C sau đó ủ với kháng thể thứ cấp. Các dải phân tích protein được phân tích bằng Tanon 5200 Multi (Thượng Hải, Trung Quốc).

2.10. Phân tích hóa mô miễn dịch

Các phần mô xương đùi được ủ với các kháng thể chính ở 4 ◦C. Các kháng thể đa dòng chống lại BMP -2, OCN, OPG và RANKL được pha loãng tương ứng thành 1: 2 0 0 và 1: 100. Kháng thể thứ cấp của chuột chống thỏ IgG (1: 200) ở 37 ◦C trong 1 giờ. Sử dụng Hệ thống chẩn đoán hình ảnh bệnh lý định lượng tự động Vectra® Polaris ™ (PerkinElmer, MA, USA). Để phân tích định lượng sự biểu hiện của protein, phần mềm Image-Pro Plus phiên bản 6.0 và Adobe Photoshop đã được áp dụng.

2.11. Phân tích thống kê

Kết quả được biểu thị bằng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn. ANOVA một chiều được thực hiện khi so sánh các nhóm khác nhau. Phần mềm SPSS phiên bản 22. 0 được sử dụng để phân tích thống kê và P <0. 05="" được="" coi="" là="" có="" ý="" nghĩa="" thống="">

cistanche reddit

3. Kết quả

3.1. TGs và PSs cải thiện các tổn thương mô bệnh học xương và thúc đẩy sự hình thành sợi collagenous và tế bào chondrocytes ở chuột SAMP6

Tổn thương bệnh lý xương đùi có thể được quan sát bằng phương pháp nhuộm H&E. Các cấu trúc mô học của xương trong nhóm SAMR1 được sắp xếp đều đặn. Tuy nhiên, cấu trúc của xương được đề cập ở trên đã bị hư hại trong nhóm SAMP6. Sự thay đổi hình thái ở nhóm TGs và PSs ít hơn so với nhóm SAMP6. Tuy nhiên, nhóm điều trị OSs không cho thấy sự cải thiện đáng kể đối với những thay đổi hình thái (Hình. 1A). Phương pháp nhuộm Trichrome của Goldner, Van Gieson (VG) và Safranin O Fast Green được thực hiện để tiết lộ sự hình thành cấu trúc xương. Kết quả cho thấy xương mới, sợi collagenous và tế bào chondrocytes trong nhóm TGs và PSs đã được cải thiện so với nhóm SAMP6. Tuy nhiên, nhóm điều trị OSs không cho thấy sự cải thiện đáng kể đối với những thay đổi cấu trúc xương (Hình 1B – D).

Hình 1. TGs và PSs cải thiện tổn thương mô bệnh học ở chuột SAMP6.

3.2. TGs và PSs thay đổi các dấu ấn sinh học về sự luân chuyển xương ở chuột SAMP6

Khi bị loãng xương, mức độ của các dấu ấn sinh học tạo xương sẽ giảm đáng kể, chẳng hạn như BGP và PICP huyết thanh. Ngược lại, nồng độ dấu ấn sinh học liên quan đến quá trình tiêu xương tăng lên đáng kể, bao gồm TRACP và S-CTX huyết thanh (Hình 2). Các nhóm TG và PS có thể đảo ngược mức BGP, BALP, P1NP, PICP, ALP, S-CTX, TRACP, U-CTX, U-NTX, D-Pyr và Pyr, nhưng OS thì không.

Hình 2. Ảnh hưởng của TGs và PS trên các dấu ấn sinh học của sự luân chuyển xương ở chuột SAMP6.

3.3. TG và PS thúc đẩy quá trình hình thành xương mới và lắng đọng canxi ở chuột SAMP6

Để kiểm tra xem liệu quá trình hình thành xương và lắng đọng các khoáng chất phosphate có thể được thúc đẩy bằng cách điều trị TGs, PS và OSs hay không, người ta đã tiến hành ghi nhãn tetracycline calcein và nhuộm Von Kossa. Kết quả cho thấy sự hình thành xương mới ở chuột SAMP6 thấp hơn đáng kể so với chuột SAMR1, trong khi TGs và PSs thúc đẩy đáng kể sự hình thành xương mới (Hình 3A). Phương pháp nhuộm Von Kossa cho thấy rất nhiều canxi đã được lắng đọng trong các nhóm điều trị TGs và PSs (Hình 3B).

Hình 3. TGs và PSs thúc đẩy quá trình hình thành xương mới và lắng đọng khoáng chất ở chuột SAMP6.

3.4. TGs và PSs cải thiện vi kiến ​​trúc xương ở chuột SAMP6

Vi kiến ​​trúc xương được phát hiện bằng vi-CT. So với chuột SAMR1, chuột SAMP6 có cấu trúc vi mô xấu hơn, trong khi tình trạng xương ở chuột được điều trị bằng TG và PS trong 12 tuần được cải thiện (Hình 4). Chúng tôi cũng nhận thấy rằng các chỉ số BMD, BV / TV, Tb.N và Tb. Th đã giảm và các chỉ số của Tb. Sp và TMD tăng lên ở chuột SAMP6, so với chuột SAMR1. TGs và PSs làm tăng đáng kể BMD, BV / TV, Tb. N, Tb. Th và giảm Tb. Sp và TMD so với chuột SAMP6. Tuy nhiên, không có thay đổi đáng kể nào được quan sát thấy trong nhóm OS.

3.5. TG và PS thay đổi các biểu thức BMP -2, OCN, OPG và RANKL trong chuột SAMP6

Chúng tôi đã kiểm tra các biểu thức protein của BMP -2, OCN, OPG và RANKL. TG và PS gây ra sự điều chỉnh đáng kể của BMP -2, OCN và OPG, trong khi biểu hiện của RANKL được điều chỉnh thấp hơn (Hình 5). Tuy nhiên, không có sự khác biệt đáng kể trong nhóm điều trị bằng OSs.

Hình 4. Ảnh hưởng của TGs và PSs lên mật độ khoáng xương và vi kiến ​​trúc xương.

3.6. TG và PS thay đổi biểu thức catenin p-GSK -3 (Ser9) và p - - trong chuột SAMP6

Để hiểu cơ chế của TG và PS thúc đẩy quá trình tạo nguyên bào, các biểu hiện của p-GSK -3 (Ser9) và p - - catenin trong các mô xương của chuột SAMP6 đã được đo bằng phương pháp Western blotting (Hình 6). Kết quả cho thấy rằng các phương pháp điều trị TGs và PSs đã cải thiện đáng kể sự biểu hiện của p-GSK -3 (Ser9) và giảm sự biểu hiện của p - - catenin ở xương đùi so với nhóm SAMP6. Tuy nhiên, nhóm điều trị OSs không có thay đổi đáng kể.

4. Thảo luận

Trong nghiên cứu hiện tại bằng cách sử dụng chuột SAMP6 và SAMR1 để tìm ra các thành phần hiệu quả từ C. sa mạc phủ chống lại bệnh loãng xương. Ba chiết xuất từ ​​C. sa mạc được sử dụng để đánh giá hiệu quả điều trị, cũng như các cơ chế có thể có. Ngoài ra, các biểu hiện của RANKL, OPG, OCN và BMP -2 cũng như các chất điều hòa tiêu xương khác cũng được phân tích. So với nhóm SAMP6, TGs và PSs có thể cải thiện tổn thương mô bệnh học của xương, cũng như thúc đẩy sự hình thành xương mới, sợi collagen, chondrocyte và lắng đọng canxi. Trong khi đó, cả hai đều có thể thay đổi các dấu ấn sinh học của chu chuyển xương và cải thiện hiệu quả cấu trúc vi mô của xương. Tuy nhiên, không có tác dụng bảo vệ nào được quan sát thấy đối với điều trị OS.

Hình 5. TGs và PSs thúc đẩy các biểu thức của BMP -2, OCN và OPG và giảm biểu thức của RANKL.

TCM đã được sử dụng rộng rãi để làm giảm các triệu chứng của nhiều bệnh như loãng xương. giảm bớt các triệu chứng khác nhau của bệnh bao gồm cả loãng xương. Nhiều hợp chất hoạt tính sinh học chống loãng xương đã được xác định từ hàng chục loại dược liệu tự nhiên của Trung Quốc thường được sử dụng để bổ thận cũng như bảo tồn bản chất của thận (Xu et al., 2017; Liu et al., 2018). C. Desticola có độ an toàn tương đối cao và một loạt các chức năng trị liệu để điều trị chứng thiếu thận. Nhiều nghiên cứu đã phát hiện ra tác dụng điều trị của chiết xuất từ ​​C. sa mạc đen đối với bệnh loãng xương (Li và cộng sự, 2012; Liang và cộng sự, 2013; Song và cộng sự, 2018).

Các nguyên bào tạo xương và hủy cốt bào phục hồi xương, là từ sự biệt hóa của các tế bào gốc trung mô đa năng (MSC), là các tế bào đã biệt hóa giai đoạn cuối có tuổi thọ ngắn (Teitelbaum và Ross, 2003). Cả hai đều cần được thay thế liên tục bằng những tế bào mới có nguồn gốc từ tế bào gốc (Long, 2011). Con đường tín hiệu Wnt / -catenin, đóng một vai trò quan trọng trong sự biệt hóa của các mô xương, kích thích sản xuất nguyên bào xương bằng cách thúc đẩy sự định hướng và biệt hóa của MSC đa năng thành nguyên bào xương (Rodda và McMahon, 2006). Ngoài ra, Wnts còn ngăn chặn quá trình apoptosis của các nguyên bào xương trưởng thành và do đó kéo dài tuổi thọ của chúng bằng cả hai con đường độc lập và phụ thuộc -catenin (Almeida et al., 2005). Vì vậy, con đường tín hiệu Wnt / -catenin đóng vai trò quan trọng trong việc làm rõ cơ chế bệnh sinh của bệnh loãng xương. Trong thí nghiệm này, chuột SAMP6 đã được sử dụng để kiểm tra hiệu quả chống loãng xương từ các chất chiết xuất từ ​​C. sa mạc phủ khác nhau. TG và PS đã điều chỉnh giảm đáng kể mức RANKL và p - - catenin và điều chỉnh lên các biểu thức BMP -2, OCN, OPG và p-GSK -3. Tóm lại, hiệu quả điều trị của TGs và PS trên chuột SAMP6 chủ yếu thông qua việc kích hoạt con đường tín hiệu Wnt / -catenin.

Vì hấp thụ quá mức tế bào hủy xương là nguyên nhân quan trọng gây loãng xương, các yếu tố liên quan đến sự hoạt hóa và biệt hóa của tế bào hủy xương có thể được coi là mục đích quan trọng để ngăn ngừa mất xương (Takatsuna và cộng sự, 2005). Trong nghiên cứu của chúng tôi, biểu hiện của RANKL được điều chỉnh một cách rõ ràng, đồng thời mức OPG có thể được điều chỉnh lên bởi TG và PS. Người ta đã ghi nhận đầy đủ rằng quá trình hình thành xương và tái tạo lại sự biệt hóa của tế bào nguyên bào xương được đặc trưng chủ yếu bởi sự gia tăng các biểu hiện của BMP -2 và OPN (Canalis, 2009). Trong nghiên cứu này, chúng tôi nhận thấy rằng TGs và PSs của C. sa mạc phủ làm tăng các biểu hiện BMP -2 và OPG và tăng cường quá trình khoáng hóa xương. Do đó, TG và PS làm trung gian tạo xương bằng cách điều chỉnh BMP -2 và OPN và hạ thấp RANKL.

Các dấu hiệu tạo xương phản ánh hoạt động của các tế bào tạo xương, các dấu hiệu hủy xương giống nhau phản ánh hoạt động của các tế bào hủy xương. Vi kiến ​​trúc xấu đi do các dấu hiệu chu chuyển xương bị thay đổi. Trong nghiên cứu của chúng tôi, các dấu hiệu tiêu xương (S-CTX, TRACP, U-CTX, D-Pyr, U-NTX, Pyr) giảm đáng kể trong nhóm TGs và PSs, ngược lại, các dấu hiệu hình thành xương (BGP, BALP , P1NP, PICP, ALP) tăng đáng kể. Do đó, người ta có thể thấy rằng TGs và PSs của C. Desticola thúc đẩy quá trình tái tạo xương bị loãng xương.

Con đường Wnt / -catenin kích thích sự biểu hiện của các dấu hiệu biệt hóa và khoáng hóa nguyên bào xương, đồng thời nó kích hoạt sự biểu hiện của yếu tố tạo xương chủ BMP -2 trong nguyên bào xương (Zhang và cộng sự, 2013). Ngoài ra, -catenin làm tăng sự biểu hiện của OPG trong nguyên bào xương, gián tiếp ngăn chặn sự biệt hóa của tế bào hủy xương bằng cách ức chế quá trình tiêu xương (Baron và Kneissel, 2013). Nghiên cứu hiện tại của chúng tôi cho thấy rằng TGs và PSs điều chỉnh đáng kể p-GSK -3 và điều chỉnh giảm mức độ catenin của p - -. Những kết quả này hỗ trợ kết luận rằng chức năng của TGs và PSs chống loãng xương được điều chỉnh thông qua việc kích hoạt con đường tín hiệu Wnt / -catenin.

Phân tích HPLC trước đây của chúng tôi cho thấy rằng 5 phenylethanoid glycoside bao gồm echinacoside, cistanoside A, acteoside, isoacteoside và 2′-acetylacteoside là những thành phần chính trong TGs (Li và cộng sự, 2019; Shi và cộng sự, 2019). Các cấu trúc của năm glycoside phenylethanoid ở trên đều giàu nhóm hydroxyl phenolic, chịu trách nhiệm cho đặc tính chống oxy hóa của C. sa mạc (Chen et al., 2016). Người ta đã báo cáo rằng việc cải thiện hệ thống chống oxy hóa có thể ngăn ngừa mất xương, do đó, những glycoside phenylethanoid này có thể là thành phần hoạt tính tiềm năng của C. sa mạcza chịu trách nhiệm cho hoạt động chống loãng xương. Có những báo cáo rằng echinacoside và acteoside có thể cải thiện các đặc điểm bệnh lý điển hình của loãng xương, chẳng hạn như, cải thiện chất lượng xương và BMD toàn bộ xương đùi, thúc đẩy sự hình thành xương và ức chế tiêu xương (Chen và cộng sự, 2020). Ngoài ra, echinacoside có tác dụng chống loãng xương nổi bật (Li và cộng sự, 2013). Các nghiên cứu trước đây cho thấy cistanoside A có thể thúc đẩy quá trình hình thành xương và ngăn chặn quá trình tiêu xương thông qua việc ức chế NF-κB và kích hoạt các con đường PI3K / Akt (Xu và cộng sự, 2017). Tác dụng chống loãng xương của polysaccharides C. sa mạc phủ chưa được báo cáo. Tuy nhiên, các nghiên cứu khác đã chứng minh rằng polysaccharides xương cựa có thể ngăn chặn sự biểu hiện của RANKL, tăng mức OPG trong huyết thanh và cuối cùng là ngăn chặn sự biệt hóa của tế bào hủy xương (Huo và Sun, 2016; Hwang và cộng sự, 2018). OSs của C. Desticola chủ yếu bao gồm mannitol, betaine, fructose, glucose và sucrose (Shi và cộng sự, 2019), không có báo cáo về hoạt động chống loãng xương, do đó, OSs không có tác dụng điều trị đối với bệnh loãng xương. Tóm lại, TGs và PSs là những thành phần tích cực trong C. sa mạc-la có tác dụng chống loãng xương.

Cistanche herba bổ sung bộtcó mộttác dụng chống loãng xương.

Để biết thêm thông tin, xin vui lòng bấm vào đây.

5. Kết Luận

Kết luận, TGs và PSs từ C. sa mạcticola có thể tăng cường sự hình thành xương ở chuột SAMP6 thông qua việc điều chỉnh con đường tín hiệu Wnt / -catenin nhưng không phải OSs. Trong tương lai, TGs và PSs có thể trở thành những chất điều trị bảo vệ xương đầy hứa hẹn đối với chứng loãng xương.