Tiếp xúc:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Biến thể gen MicroRNA ‑ 499a (rs3746444A / G) và tính nhạy cảm với bệnh thận giai đoạn cuối liên quan đến bệnh tiểu đường loại 2

MANAL S. FAWZY và cộng sự

trừu tượng

Bệnh thận do đái tháo đường (DN) là một yếu tố nguy cơ chính cho giai đoạn cuốithậndịch bệnh(ESRD). Các microRNA (miRNA / miR) và các biến thể của chúng có thể liên quan đến sức khỏe và bệnh tật, bao gồm cả DN. Nghiên cứu hiện tại nhằm mục đích điều tra mối liên quan của gen miRNA ‑ 499a (MIR499A) biến thể vùng hạt giống A / G (rs3746444) với ESRD liên kết với DN(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)tính nhạy cảm ở bệnh nhân đái tháo đường và để xác định liệu có mối liên quan giữa các kiểu gen khác nhau với dữ liệu xét nghiệm và lâm sàng của bệnh nhân hay không. Một nghiên cứu thí điểm bệnh chứng đã được thực hiện trên 180 bệnh nhân người lớn mắc bệnh đái tháo đường týp 2. Tổng số 90 bệnh nhân bị ESRD (giai đoạn cuốithậndịch bệnh)chạy thận nhân tạo thường xuyên được coi là các trường hợp, và bệnh nhân tiểu đường 90 tuổi, giới tính và sắc tộc phù hợp với bệnh nhân đái tháo đường có albumin niệu thường được coi là đối chứng. Việc xác định kiểu gen MIR499A được thực hiện bằng xét nghiệm phân biệt alen Thời gian thực TaqMan. Kết quả chứng minh rằng biến thể MIR499A rs3746444 * G mang lại tính nhạy cảm đối với sự phát triển của ESRD dưới điều kiện đồng trội [(tỷ lệ chênh lệch (khoảng tin cậy 95%): 2,49 (1,41‑3,89) và 2,41 (1,61‑6,68) để so sánh dị hợp tử và đồng hợp tử, tương ứng], mô hình trội [2,30 (1,18‑3,90)] và alen [1,82 (1,17‑2,83)]. Các kiểu gen khác nhau của biến thể được chỉ định không thể hiện mối liên hệ đáng kể với dữ liệu phòng thí nghiệm tại phòng khám của bệnh nhân được nghiên cứu hoặc miR‑ đang lưu hành 499a nồng độ trong huyết tương. Kết luận, kết quả của nghiên cứu hiện tại cho thấy MIR499A rs3746444 có thể là một biến thể nhạy cảm với ESRD liên quan đến DN trong quần thể nghiên cứu. Tuy nhiên, các nghiên cứu cỡ mẫu lớn hơn với các dân tộc khác nhau được đảm bảo để xác minh những phát hiện này.

Cistanche có thể điều trịthậndịch bệnh

Giới thiệu

Bệnh thận do đái tháo đường (DN) ‑ giai đoạn cuối liên quan đếnthậndịch bệnh(ESRD) là một mối quan tâm ngày càng tăng về sức khỏe cộng đồng trên toàn thế giới (1). Trong ba thập kỷ qua, ESRD liên quan đến DN(giai đoạn cuốithậndịch bệnh) has been identified as a major cause for dialysis in several countries, including Saudi Arabia, in which type 2 diabetes mellitus (T2DM) accounts for >33 phần trăm của tất cả các trường hợp ESRD (1,2). Một số nghiên cứu đầy hứa hẹn đã xác định các gen liên quan đến sự xuất hiện và tiến triển của DN, bao gồm các gen liên quan đến microRNA (miRNAs / miRs) (3,4). Họ RNA không mã hóa này được bảo tồn cao, đặc hiệu cho mô và có chiều dài ngắn (20‑24 nucleotide). miRNA đóng vai trò quan trọng trong nhiều tình trạng sinh lý và bệnh lý ở các cơ quan của con người, bao gồmthận. Ví dụ: điều chỉnh tăng của miR ‑ 192, miR ‑ 194, miR ‑ 204, miR ‑ 215 và miR ‑ 216 và điều chỉnh giảm của miR ‑ 133a, miR ‑ 133b, miR ‑ 1d, miR ‑ 296, miR ‑ 1a, miR ‑122 và miR ‑ 124a đã được quan sát thấy ở ngườithận(5). Ngoài ra, miR ‑ 192 đã được báo cáo là cao hơn 20 lần so với biểu hiện ở vỏ nãoquả thậnmô so với tủyquả thậnmô, nơi nó có liên quan đến quy định vận chuyển natri; ngoài ra, miR-155 có thể ngăn chặn sự biểu hiện của thụ thể angiotensin II loại 1, có thể ảnh hưởng đến huyết áp (5,6). Bằng cách liên kết với các mục tiêu mRNA, miRNA có khả năng gây ra sự kìm hãm dịch mã, làm mất ổn định mRNA và / hoặc suy thoái (7). Nhiệt động lực học của các tương tác đích của miRNA-mRNA có thể bị ảnh hưởng bởi các đa hình nucleotide đơn (SNP) xảy ra trong tiền thân của miRNA (pre-miRNA), dẫn đến rối loạn điều hòa gen mục tiêu và sau đó, các biến thể kiểu hình hoặc tính nhạy cảm với bệnh (8). Gen miRNA ‑ 499a (MIR499A) nằm trong gen cơ tim chuỗi nặng 7B của người myosin trên nhiễm sắc thể 20q11. 22 34990376 - 34990497 (cộng) và bao gồm một exon duy nhất mã hóa cho một phiên mã duy nhất (MI0003183). Nó có chiều dài 122 cặp bazơ và được báo cáo là dấu hiệu của tổn thương tế bào cơ tim (9). Mặc dù số lượng các nghiên cứu tập trung vào vai trò chính xác của miR-499a trong cơ chế bệnh sinh và sự phát triển của ESRD do DN còn hạn chế, miR-499a đã được đề xuất là ảnh hưởng đến một số quá trình sinh học, chẳng hạn như lão hóa tế bào, viêm, apoptosis và miễn dịch phản hồi (10), có thể đóng vai trò trong ESRDbiogenesis (Bảng SI) (11‑14). Hơn nữa, trước đây đã có báo cáo rằng việc điều chỉnh miR-499a có thể điều chỉnh kháng insulin, tạo đường và điều chỉnh tín hiệu insulin bằng cách ức chế phosphatase và tensin tương đồng (15).

Một biến thể phổ biến (rs3746444), nằm trong vùng hạt giống miR ‑ 499a ‑ 3p AC (A / G) UCAC ở vị trí 20: 34.990.448 (GRCh38), đã được báo cáo là có liên quan đến một số bệnh, đặc biệt là ở Trung Đông dân số, chẳng hạn như bệnh tim mạch (9), bệnh tự miễn dịch (16) và ung thư (17). Trong nghiên cứu trước đây của chúng tôi, sự rối loạn điều hòa đáng kể mức miR-499a lưu hành đã được xác định trong ESRD liên quan đến DM hiện tại(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)đoàn hệ (18). Do đó, nghiên cứu hiện tại nhằm mục đích khám phá mối liên quan của biến thể vùng hạt MIR499A (A / G) (rs3746444) với tính nhạy cảm với ESRD liên quan đến DN ở bệnh nhân ĐTĐ típ 2 và để xác định liệu có mối liên quan giữa các kiểu gen khác nhau và bệnh nhân. phòng khám, dữ liệu phòng thí nghiệm. Theo hiểu biết tốt nhất của chúng tôi, đây là nghiên cứu đầu tiên điều tra mối liên quan tiềm ẩn của biến thể được chỉ định với tính nhạy cảm với ESRD trong một mẫu bệnh nhân Trung Đông.

Nguyên liệu và phương pháp

Nghiên cứu dân số.

Tổng số 90 bệnh nhân liên tiếp mắc bệnh đái tháo đường típ 2 kèm theo ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)chạy thận nhân tạo thường xuyên (ba lần / tuần) được chọn làm nhóm bệnh nhân của nghiên cứu hiện tại. Các bệnh nhân đang đến Trung tâm Thận học của Mohammed bin Saud Al ‑ Kabeer để lọc thận tại Bệnh viện Trung tâm Arar (Arar, Ả Rập Xê Út). Các tiêu chí bao gồm / loại trừ để lựa chọn nhóm bệnh nhân ESRD đã được mô tả chi tiết trong công trình trước đây của chúng tôi về cùng một ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)thuần tập bệnh nhân (18). Bệnh nhân mắc bất kỳ bệnh mãn tính nào, rối loạn tự miễn dịch, ung thư vàthậndịch bệnhngoại trừ bệnh thận liên quan đến DM (được chẩn đoán bằng sinh thiết thận theo các quy trình tiêu chuẩn địa phương được áp dụng từ các tiêu chuẩn quốc tế để chẩn đoán không mắc bệnh tiểu đườngthậndịch bệnh) (19) đã bị loại trừ. Vì có khả năng cao là cuối cùng, một tỷ lệ đáng kể bệnh nhân được chẩn đoán mắc bệnh tiểu đường sớm sẽ phát triển ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh), bệnh nhân ĐTĐ típ 2 có thời gian đái tháo đường và albumin niệu tương ứng (tỷ lệ albumin / creatinin niệu,<30 µg/mg)="" (20,21)="" were="" considered="" as="" the="" control="" group.="" all="" biomedical="" research="" involving="" human="" participants="" conformed="" to="" the="" guidelines="" of="" the="" helsinki="" declaration.="" the="" protocol="" of="" the="" present="" study="" was="" approved="" by="" the="" research="" ethics="" committees="" of="" northern="" border="" university="" (approval="" no.="" 6/340/h),="" and="" written="" informed="" consent="" was="" obtained="" from="" all="">

Cistanche có thể điều trịthậndịch bệnh

Phân tích trong phòng thí nghiệm.

Các mẫu tĩnh mạch lúc đói được thu thập trên ống chân không thường và ethylenediaminetetraacetic acid ‑ trước khi chạy thận lần thứ hai được chỉ định cho bệnh nhân ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh). Huyết thanh được tách bằng cách ly tâm trong 12 phút ở 1.300 xg ở nhiệt độ phòng, ngay lập tức từ ống cũ để phân tích sinh hóa bằng cách sử dụng bộ dụng cụ bán sẵn cho glucose (cat. Số 44044831190),quả thậnxét nghiệm chức năng [creati ‑ nine (cat. no. 4810716190) và urê (cat. no. 4460715190)] và lipid profiling [tổng cholesterol (cat. no. 3039773190), triacyl ‑ glycerol (cat. no. 20767107322), HDL‑ c (mèo. số 7528566190) và LDL ‑ c (mèo. số 7005717190)] trên máy phân tích Sinh hóa Cobas Integra (tất cả Roche Diagnostics GmbH).

Định kiểu gen cho MIR499A (rs3746444). DNA bộ gen được chiết xuất từ ​​máu toàn phần bằng bộ công cụ lọc DNA bộ gen Wizard (mèo số A1120; tập đoàn Promega) theo quy trình của nhà sản xuất, sau đó là đánh giá nồng độ và độ tinh khiết của ADN bằng máy quang phổ NanoDrop ND ‑ 1000 (NanoDrop Technologies; Thermo Fisher Điện di Scientific, Inc.) và gel agarose (2%) để đánh giá tính toàn vẹn của DNA. Các mẫu sau đó được bảo quản ở ‑20˚C cho đến thời điểm tạo kiểu gen. Một xét nghiệm đa hình MIR499A (rs3746444, ID xét nghiệm: C _2142612_30) ​​đã được thực hiện bằng cách sử dụng PCR thời gian thực phân biệt alen TaqMan với các biện pháp chất lượng như đã mô tả trước đây (16). Tóm lại, PCR được chạy trong thể tích phản ứng 25 ‑ µl chứa gDNA (20 ng) được pha loãng thành 11,25 µl với nước không chứa nucleases, 12,5 µl TaqMan Universal PCR Master Mix (2X) và 1,25 µl 20 x TaqMan SNP Xét nghiệm được cung cấp từ cùng một nhà cung cấp. Mỗi lần chạy mẫu không có tiêu bản và không có enzym ‑ polymerase với các mẫu nghiên cứu là đối chứng âm tính. Việc xác định kiểu gen được thực hiện theo cách làm mù trường hợp / tình trạng đối chứng. Quá trình khuếch đại PCR được thực hiện trên Hệ thống PCR thời gian thực StepOne (Hệ thống sinh học ứng dụng; Thermo Fisher Scientific, Inc.), sử dụng các điều kiện sau: Hai pha giữ ban đầu (2 phút ở 50˚C và 10 phút ở 95˚C) , tiếp theo là PCR hai bước 40 ‑ chu kỳ (biến tính trong 15 giây ở 95˚C và ủ / kéo dài trong 1 phút ở 60˚C). Sự phân biệt allelic được xác định bằng cách phân tích các tệp dữ liệu huỳnh quang từ mỗi lần chạy bằng phần mềm gọi allele tự động (SDS phiên bản 1.3.1; Hệ thống sinh học ứng dụng; Thermo Fisher Scientific, Inc; Hình S1). Tỷ lệ cuộc gọi kiểu gen tổng thể là 100 phần trăm.

Phân tích thống kê.

Kích thước mẫu và tính toán công suất bằng phần mềm G power ‑ 3 (http://www.gpower.hhu.de/) đã chứng minh rằng, với thiết kế nghiên cứu cụ thể, tỷ lệ lỗi cho phép, lỗi =0. 05, một hiệu ứng trung bình kích thước =0. 5 và kích thước mẫu là 90 / nhóm, có thể mang lại 91 phần trăm sức mạnh của nghiên cứu. Phân phối dữ liệu và tính đồng nhất của phương sai được đánh giá lần lượt bằng phép thử Shapiro ‑ Wilk và phép thử Levene. Dữ liệu liên tục được biểu thị dưới dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn và các biến phân loại được biểu thị dưới dạng số lượng tần suất. Dữ liệu được so sánh bằng cách sử dụng thử nghiệm χ2, trong khi thử nghiệm t ‑ của Học sinh không được ghép nối, thử nghiệm ANOVA một chiều hoặc Kruskal ‑ Wallis được áp dụng để so sánh các biến liên tục. Độ lệch của phân bố kiểu gen quan sát được từ điểm cân bằng Hardy ‑ Weinberg được phân tích bằng cách sử dụng χ2 độ tốt ‑ ‑ phù hợp bằng cách sử dụng Bách khoa toàn thư trực tuyến về Dịch tễ học Di truyền (http://www.oege.org/). Tỷ lệ chênh lệch được điều chỉnh cụ thể theo kiểu gen (OR) và khoảng tin cậy (CI) 95 phần trăm được tính toán cho các mô hình di truyền khác nhau. Các biến số nghiên cứu, bao gồm tuổi, giới tính, số lần chạy thận nhân tạo, sự hiện diện của tăng huyết áp và thời gian của bệnh, đã được điều chỉnh. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="" difference.="" spss="" version="" 23="" (ibm="" corp.)="" was="" used="" for="" the="" statistical="">

Biến thể MIR499A (rs3746444) trong phân tích silico.

Biến thể MIR499A (rs3746444) trong phân tích silico. Phân tích cấu trúc và chức năng gen được thực hiện bằng cách sử dụng cơ sở dữ liệu Ensembl Genomic (ensembl.org) và miRBase.org; dự đoán mục tiêu được thực hiện bằng DIANA ‑ micro T ‑ CDS v5. 0 (http: //diana.imis.athena Innovation.gr/DianaTools/index.php?r=microT_ CDS / index), miRBase (http://www.mirbase.org/) và DIANA ‑ TarBase v7. {7}} thuật toán (http://diana.imis.athena‑innovation.gr/DianaTools/index.php cơ sở dữ liệu? r=tarbase / index); và phân tích phân nhóm chú thích và làm giàu đường dẫn được thực hiện bằng cách sử dụng miRPath v3. 0 (http://www.microrna.gr/miRPathv3) và tất cả đều được trình bày chi tiết trong các nghiên cứu trước đây của chúng tôi (8,12). Mục tiêu miR ‑ 499a dự đoán được so sánh với sự hiện diện của cả alen A và G bằng cách sử dụng chương trình miR2Go (http://compbio.uthsc.edu/miR2GO) ở mức lọc phân cấp trung bình (P<>

Kết quả

Đặc điểm của quần thể nghiên cứu.

Các đặc điểm cơ bản của các đối tượng nghiên cứu được tóm tắt trong Bảng I. Tuổi trung bình của bệnh nhân ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)là 46,6 ± 12,3 tuổi đối với nam và 47. 0 ± 14,7 tuổi đối với nữ. Thời gian lọc máu trung bình là tương đương đối với cả hai giới trong những người tham gia nghiên cứu. Không có sự khác biệt cụ thể về giới tính trong các đặc điểm lâm sàng và sinh hóa của những người tham gia, ngoại trừ những khác biệt liên quan đến các thông số hồ sơ lipid, ở bệnh nhân nữ kém hơn so với nam giới (Bảng I).

Biến thể MIR499A (rs3746444) trong quần thể nghiên cứu.

Trong quần thể nghiên cứu, tần số kiểu gen của MIR499A (rs3746444) SNP tuân theo trạng thái cân bằng Hardy ‑ Weinberg (P =0. 149 ở nhóm chứng và P =0. 398 bệnh nhân nội trú). Các tần số alen phụ cho rs3746444 * G là 0. 28 và 0. 42 ở nhóm chứng và bệnh nhân mắc chứng ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh), tương ứng. Một sự khác biệt đáng kể về kiểu gen MIR499A đã được quan sát thấy giữa các nhóm nghiên cứu. Tần suất của kiểu gen GG là 11,1% ở nhóm chứng, so với 20% ở bệnh nhân ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)(Tr =0. 030). Mang alen rs3746444 * G làm tăng độ nhạy cảm với sự phát triển của ESRD gần gấp 2 lần(giai đoạn cuốithậndịch bệnh), với OR (95% CI) là 1,82 (1,17‑2,83) theo mô hình liên kết di truyền alen. Nhất quán, các cá thể đồng hợp tử / dị hợp tử (rs3746444 * GG / AG) có nhiều khả năng phát triển ESRD hơn trong các mô hình so sánh đồng hợp tử / dị hợp tử và các mô hình trội [GG so với AA: OR =2. 41, 95 phần trăm CI: 1,61‑6,68 ; AG so với AA: HOẶC =2. 49, 95 phần trăm CI: 1,41‑3,89; (AG cộng với GG) so với AA: HOẶC =2. 30, 95 phần trăm CI: 1,18‑3,90; Bảng II].

Biến thể MIR499A (rs3746444) và đặc điểm phòng thí nghiệm tại phòng khám của bệnh nhân ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh). Khi điều tra mối liên quan giữa các kiểu gen khác nhau của biến thể được chỉ định với các đặc điểm lâm sàng và sinh hóa của nhóm bệnh nhân, không có mối liên quan đáng kể nào được chứng minh, như được trình bày trong Bảng III.

Ảnh hưởng của MIR499A (rs3746444) đến cấu trúc và chức năng của gen.

Mặc dù miR ‑ 499a tạo thành một vòng kẹp tóc thứ cấp với các trình tự bổ sung trong cấu trúc của nó (Hình S2), các gen khác nhau đã được dự đoán là mục tiêu của cả hai dạng trưởng thành được tổng hợp từ một trong hai cánh tay. Tổng số 1.890 gen được dự đoán sẽ bị ảnh hưởng bởi miR ‑ 499a (919 gen 3p, 810 gen 5p và 161 gen cho cả hai), như đã nêu chi tiết trước đây (8). Các con đường quan trọng nhất trong Bách khoa toàn thư Kyoto về gen và bộ gen (KEGG) liên quan đến các mục tiêu miR ‑ 499a có thể liên quan đến sự tiến triển của DN thành ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)được tóm tắt trong Bảng IV.

Sự hiện diện của rs3746444 SNP trong vùng hạt của sợi hành khách miR ‑ 499a có thể dẫn đến phá vỡ các mục tiêu và tạo ra một bộ gen khác (8,16). Ngoài ra, nó có thể rút ngắn cấu trúc vòng lặp gốc; do đó, ảnh hưởng đến quá trình xử lý của toàn bộ miRNA.

Nghiên cứu trước đây của chúng tôi đã báo cáo sự rối loạn điều hòa mức độ tuần hoàn của miR ‑ 499a trong cùng một nhóm bệnh nhân (18); do đó, nghiên cứu hiện tại tập trung vào việc xác định xem các mức tuần hoàn này có biểu hiện các biến thể đáng kể giữa các kiểu gen khác nhau của cùng một gen hay không. Tuy nhiên, các phát hiện không cho thấy mối liên quan đáng kể giữa các kiểu gen khác nhau của MIR499A (rs3746444) và nồng độ miR-499a trong huyết tương được phát hiện trước đây bằng phương pháp Livak (22) (P =0. 173; Hình 1) .

Cistanche có thể điều trịthậndịch bệnh

Thảo luận

SNP đã được báo cáo là loại biến thể di truyền phổ biến nhất liên quan đến sự đa dạng của quần thể, tính nhạy cảm với bệnh tật và các phản ứng điều trị của từng cá nhân (23). SNP có thể ảnh hưởng đến sự biểu hiện và / hoặc trưởng thành của miRNA ở mức độ phiên mã của bản sao chính, quá trình xử lý sau phiên mã của bản sao chính hoặc tiền miRNA, hoặc ảnh hưởng đến tương tác của miRNA với mRNA (24).

Nghiên cứu hiện tại đã chứng minh rằng việc mang alen rs3746444 * G gây ra tính nhạy cảm với ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)in patients with DM compared with non‑carriers under the allelic, co‑dominant, and dominant genetic association models. Results of our previous study demonstrated that the rs3746444 polymorphism results in an A>G không phù hợp trong vùng gốc tiền thân miR ‑ 499a (nằm đối diện với trình tự trưởng thành), ảnh hưởng đến vùng hạt trưởng thành miR ‑ 499a ‑ 3p liên quan đến liên kết miRNA ‑ mRNA chính xác, với sự gián đoạn sau đó và tạo ra một số đích (8). Người mang kiểu gen đồng hợp tử (AA hoặc GG) mang lại hai dạng trưởng thành, tương ứng là miR ‑ 499a ‑ 5p và miR ‑ 499a ‑ 3p * A hoặc * G, với mỗi dạng có bảng gen mục tiêu cụ thể. Trong khi so sánh, những người mang gen dị hợp tử (AG) tạo ra ba dạng trưởng thành, miR ‑ 499a ‑ 5p, ‑3p * A và ‑3p * G, với ba tập con của gen mục tiêu. Các phân tích về silicon của nghiên cứu này cho thấy sự hiện diện của các alen khác nhau này có thể phá vỡ và tạo ra các mục tiêu gen 667 và 744 tương ứng. Trong số các mục tiêu gen đã được xác nhận đã được nghiên cứu là protein nucleolar 4, protein tương tác với thụ thể hạt nhân ‑ 1, Bcl ‑ 2 ‑ như protein 14, phối tử chemokine (C ‑ C motif) 8 và vùng xác định giới tính Y ‑ hộp 4 (20) . Theo hiểu biết tốt nhất của chúng tôi, đây là nghiên cứu đầu tiên điều tra biến thể MIR499A rs3746444 về tính nhạy cảm với ESRD ở bệnh nhân DM trong một mẫu dân số Trung Đông. Phù hợp với những phát hiện của nghiên cứu này, Misra và cộng sự (25) báo cáo rằng kiểu gen dị hợp tử và đồng hợp tử của MIR ‑ 499A rs3746444 gây ra nguy cơ phát triển ESRD, được gây ra bởi các rối loạn khác ngoài DN và có thể liên quan đến Tăng gần 3 lần nguy cơ bị đào thải allograft cấp tính ở dân số Bắc Ấn Độ (25).

Cho rằng SNP trong tiền miRNA có thể thay đổi quá trình xử lý và / hoặc biểu hiện của miRNA, khi phân tích mối liên hệ của tính đa hình MIR499A với nồng độ miR-499a trong huyết tương lưu hành và các đặc điểm phòng thí nghiệm khác nhau của bệnh nhân, không có mối liên quan đáng kể nào được quan sát thấy, như đã mô tả trước đây. Người ta giả thuyết rằng sự hiện diện của một biến thể miR-499a có thể ảnh hưởng đến nhiệt động lực học của các tương tác RNA-RNA và ái lực của miRNA này bằng cách can thiệp vào liên kết tối ưu với mRNA đích, do đó dẫn đến rối loạn điều hòa các gen mục tiêu làm trung gian cho tính nhạy cảm với bệnh ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)mà không ảnh hưởng đến biểu hiện tương đối và / hoặc kiểu hình bệnh (22). Các phân tích trong silico của nghiên cứu này đã tiết lộ một số con đường KEGG quan trọng hàng đầu liên quan đến các mục tiêu miR-499a có thể liên quan đến sự tiến triển của DN thành ESRD (26‑32). Ví dụ, con đường (TGF‑ 1) có liên quan đến bệnh nguyên của DN (26,28). Con đường TGF‑ 1 kích hoạt các con đường tín hiệu quan trọng, bao gồm con đường PI3K / AKT làm trung gian cho quá trình phosphoryl hóa và bất hoạt FOXO phiên mã, dẫn đến stress oxy hóa, mở rộng tế bào trung bì và tích tụ các protein nền ngoại bào, các thành phần chính của DN mãn tính liên quanquả thậnbệnh (26). Điều chỉnh hoạt động của tyrosine kinase thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì (ErbB) rất quan trọng trong việc điều hòa một số biến chứng của bệnh tiểu đường, bao gồm bệnh lý thận, xơ hóa tim và rối loạn chức năng mạch máu (29). Hơn nữa, vai trò của con đường TNF trong sự tiến triển của DN ở chuột mắc bệnh tiểu đường và mô hình chuột là rõ ràng. Ví dụ, sử dụng protein dung hợp thụ thể TNF hòa tan ‑ 2 đã được báo cáo để cải thiện giai đoạn đầu của DN trong mô hình DM của chuột KK ‑ Ay (30). Ngoài ra, chất ức chế TNF-Fc TNF đã được tìm thấy để làm giảm chứng phì đại thận mà không ảnh hưởng đến cấu trúc trao đổi chất ở chuột mắc bệnh tiểu đường (31). mTOR có liên quan đến việc duy trì chức năng của tế bào podocyte cầu thận; tăng hoạt động góp phần làm phì đại cầu thận và tăng lọc liên quan đến DN tiến triển (32).

Đáng chú ý, các con đường nói trên đã được nhắm mục tiêu trong nhiều cuộc điều tra thử nghiệm để xác nhận hàm ý điều trị của chúng trong DN (29,30,33,34). Ziyadeh và cộng sự (33) đã báo cáo sự cải thiện mức lọc cầu thận do kháng thể đơn dòng kháng TGF‑ gây ra ở chuột mắc bệnh tiểu đường db / db (33). Hơn nữa, việc điều trị dài hạn chuột mắc bệnh tiểu đường do streptozotocin gây ra với AG825, một chất ức chế cụ thể của thụ thể tyrosine-protein kinase ErbB-2, được báo cáo là đã điều chỉnh đáng kể tình trạng tăng nồng độ của mạch mạc treo được tưới máu thành norepinephrine và đáp ứng giảm độc lực đối với carbachol (29). Sự ức chế TNF‑ với protein dung hợp thụ thể TNF (TNFR) 2 hòa tan, etanercept, đã cải thiện sự tiến triển của giai đoạn đầu của DN ở mô hình đái tháo đường được thiết lập ở chuột KK-A (y), chủ yếu thông qua ức chế kháng viêm hoạt động của con đường TNF‑ ‑TNFR2 ở thận (30). Hơn nữa, rapamycin, hợp chất được báo cáo đầu tiên để ức chế mTOR, ức chế quá trình phosphoryl hóa p70S6 kinase gây ra glucose và cơ chất của nó, protein ribosome S6, trong tế bào trung bì, làm giảm các rối loạn về hình thái và chức năng của bệnh nhân tiểu đường.thậntrong mô hình chuột T2DM (34).

Phù hợp với những phát hiện của nghiên cứu này, Ciccacci và cộng sự (35) đã tiết lộ sự liên quan của miR-499a trong tính nhạy cảm với DN trong một nhóm thuần tập ĐTĐ típ 2 ở Ý (35). Kết quả của nghiên cứu nói trên cho thấy mối liên quan này là do tác động của miR ‑ 499a lên hai người chơi apoptotic, calcineurin và protein liên quan đến động năng, do đó sự rối loạn điều hòa miR ‑ 499a gây ra rối loạn chức năng ty thể và quá trình chết tế bào, có thể góp phần gây ra bệnh dễ mắc bệnh. (33). Đáng chú ý, các quy trình sau có liên quan đến DN (36,37), một phần có thể hỗ trợ sự liên kết của biến thể miR ‑ 499a với ESRD(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)tính nhạy cảm trong nhóm hiện tại. Tuy nhiên, số lượng nghiên cứu ngày càng tăng liên quan đến các nhóm độc lập lớn hơn với các dân tộc khác nhau được yêu cầu để xác nhận các phát hiện của nghiên cứu này

Tóm lại, theo hiểu biết tốt nhất của chúng tôi, nghiên cứu hiện tại là nghiên cứu đầu tiên đề xuất tác động của biến thể vùng hạt giống MIR499A A / G (rs3746444) đối với ESRD liên quan đến DN(giai đoạn cuốithậndịch bệnh)tính nhạy cảm. Nó có thể được đưa vào danh sách các gen nhạy cảm phân tử có thể hỗ trợ phân tầng nguy cơ bệnh nhân và triển khai các biện pháp phòng ngừa sớm. Tuy nhiên, cần lưu ý rằng không thể loại trừ một cách dứt khoát hàm ý của các yếu tố gây nhiễu tiềm ẩn khác, chẳng hạn như tiếp xúc với các yếu tố môi trường khác nhau (chẳng hạn như kiểu điều trị hoặc dinh dưỡng) và các yếu tố di truyền bổ sung. Kích thước mẫu lớn hơn và các nghiên cứu nhân rộng dài hạn theo dõi dài hạn, đặc biệt là ở các quần thể với các sắc tộc khác nhau, được đảm bảo. Các nghiên cứu chức năng cũng được yêu cầu để xác nhận vai trò của miR-499a trong bệnh nguyên ESRD liên quan đến DN.

Cistanche có thể điều trịthậndịch bệnh

Người giới thiệu:

1. Sattar A, Argyropoulos C, Weissfeld L, Younas N, Fried L, Kellum JA, và Unruh M: Tử vong do mọi nguyên nhân và nguyên nhân cụ thể liên quan đến bệnh tiểu đường ở những bệnh nhân chạy thận nhân tạo phổ biến. BMC Nephrol 13: 130, năm 2012.
2. Al ‑ Sayyari AA và Shaheen FA: mãn tính giai đoạn cuốiquả thậnbệnh ở Ả Rập Xê Út. Một cảnh thay đổi nhanh chóng. Saudi Med J 32: 339‑346, năm 2011.
3. Mooyaart AL: Các liên kết di truyền trong bệnh thận do đái tháo đường. Clin Exp Nephrol 18: 197‑200, năm 2014.
4. Lu Z, Liu N và Wang F: Quy định biểu sinh trong bệnh thận do đái tháo đường. J Diabetes Res 2017: 7805058, 2017.
5. Schena FP, Serino G và Sallustio F: MicroRNA trongquả thậnbệnh: các dấu ấn sinh học hứa hẹn mới để chẩn đoán và theo dõi. Cấy ghép quay số Nephrol 29: 755-763, năm 2014.
6. Felekkis K, Touvana E, Stefanou Ch, và Deltas C: MicroRNAs: Một lớp phân tử mã hóa mới được mô tả có vai trò đối với sức khỏe và bệnh tật. Hippokratia 14: 236‑240, năm 2010.
7. Mashayekhi S, Saeidi Saedi H, Salehi Z, Soltanipour S và Mirzajani E: Ảnh hưởng của đa hình miR ‑ 27a, miR ‑ 196a2 và miR ‑ 146a đối với nguy cơ ung thư vú. Br J Khoa học y sinh 75: 76‑81, năm 2018.

8. Toraih EA, Hussein MH, Al Ageeli E, Riad E, Abdallah NB, Helal GM, và Fawzy MS: Tác động cấu trúc và chức năng của biến thể vùng hạt trong họ gen MIR ‑ 499 trong bệnh hen phế quản. Respir Res 18: 169, năm 2017.

9. Fawzy MS, Toraih EA, Hamed EO, Hussein MH và Ismail HM: Hiệp hội biểu hiện MIR ‑ 499a và biến thể vùng hạt (rs3746444) với bệnh tim mạch ở bệnh nhân Ai Cập. Acta Cardiol 73: 131‑140, năm 2018.

10. Wang WJ, Cai GY và Chen XM: Lão hóa tế bào, kiểu hình bài tiết liên quan đến lão hóa, và mãn tínhquả thậndịch bệnh. Mục tiêu 8: 64520‑64533, năm 2017.
11. Sluijter JP, van Mil A, van Vliet P, Metz CH, Liu J, Doevendans PA, và Goumans MJ: MicroRNA ‑ 1 và ‑499 điều chỉnh sự biệt hóa và tăng sinh trong các tế bào tiền thân bạch cầu có nguồn gốc từ người. Arterioscler Thromb Vasc Biol 30: 859 - 868, 2010.
12. Ling TY, Wang XL, Chai Q, Lau TW, Koestler CM, Park SJ, Daly RC, Greason KL, Jen J, Wu LQ, et al: Điều chỉnh kênh SK3 bằng microRNA ‑ 499 ‑ vai trò tiềm năng trong rung nhĩ . Nhịp tim 10: 1001‑1009, 2013.
13. Xu Z, Han Y, Liu J, Jiang F, Hu H, Wang Y, Liu Q, Gong Y và Li X: MiR ‑ 135b ‑ 5p và MiR ‑ 499a ‑ 3p thúc đẩy tăng sinh tế bào và di chuyển trong xơ vữa động mạch bằng cách trực tiếp nhắm mục tiêu MEF2C. Đại diện khoa học 5: 12276, 2015.
14. Gene Ontology Consortium: Tài nguyên Gene Ontology: Làm giàu thêm một mỏ GOld. Axit nucleic Res 49: D325 ‑ D334, năm 2021.
15. Wang L, Zhang N, Pan HP, Wang Z và Cao ZY: MiR ‑ 499‑5p góp phần chống lại insulin ở gan bằng cách ức chế PTEN. Cell Physiol Biochem 36: 2357‑2365, năm 2015.
16. Toraih EA, Ismail NM, Toraih AA, Hussein MH và Fawzy MS: Tiền thân miR ‑ 499a Biến thể nhưng không phải miR ‑ 196a2 có liên quan đến tính nhạy cảm với bệnh viêm khớp dạng thấp ở người Ai Cập. Mol Diagn Ther 20: 279‑295, năm 2016.
17. Toraih EA, Fawz MS, Elgazzaz MG, Hussein MH, Shehata RH và Daoud HG: Phân tích kiểu gen kết hợp của các biến thể tiền thân miRNA196a2 và 499a có tính nhạy cảm với ung thư gan và thận là một nghiên cứu sơ bộ. Bệnh ung thư Châu Á Pac J Trước 17: 3369‑3375, 2016.

18. Fawzy MS, Abu AlSel BT, Al Ageeli E, Al ‑ Qahtani SA, Abdel ‑ Daim MM và Toraih EA: Cấu hình biểu hiện RNA dài không mã hóa MALAT1 và microRNA ‑ 499a ở bệnh nhân ESRD đái tháo đường đang chạy thận: Một dấu chéo sơ bộ‑ phân tích mặt cắt. Arch Physiol Biochem 126: 172‑182, năm 2020.

19. Ghani AA, Al Waheeb S, Al Sahow A, và Hussain N: Sinh thiết thận ở bệnh nhân đái tháo đường týp 2: Chỉ định và tính chất của tổn thương. Ann Saudi Med 29: 450‑453, năm 2009.

20. Nah EH, Cho S, Kim S và Cho HI: So sánh tỷ lệ albumin-creatinine trong nước tiểu (ACR) giữa xét nghiệm dải ACR và xét nghiệm định lượng trong tiền tiểu đường và tiểu đường. Ann Lab Med 37: 28‑33, năm 2017.
21. Fawzy MS và Beladi FIA: Hiệp hội biểu hiện thụ thể vitamin D, VDBP, và vitamin D lưu hành với mức độ nghiêm trọng của bệnh thận do đái tháo đường ở một nhóm bệnh nhân đái tháo đường týp 2 Ả Rập Xê Út. Phòng thí nghiệm Clin 64: 1623‑1633, năm 2018.
22. Livak KJ và Schmittgen TD: Phân tích dữ liệu biểu hiện gen tương đối bằng cách sử dụng PCR định lượng thời gian thực và phương pháp 2 (‑Delta Delta C (T)). Phương pháp 25: 402‑408, 2001.
23. Shastry BS: SNPs: Tác động đến chức năng gen và kiểu hình. Phương pháp Mol Biol 578: 3‑22, 2009.
24. Hoffman AE, Zheng T, Yi C, Leaderer D, Weidhaas J, Slack F, Zhang Y, Paranjape T và Zhu Y: MicroRNA miR ‑ 196a ‑ 2 và ung thư vú: Một nghiên cứu liên quan đến di truyền và biểu sinh và phân tích chức năng. Ung thư Res 69: 5970‑5977, 2009.
25. Misra MK, Pandey SK, Kapoor R, Sharma RK và Agrawal S: Các biến thể di truyền của các gen liên quan đến MicroRNA về tính nhạy cảm và tiên lượng giai đoạn cuốithậndịch bệnhvà kết quả allograft thận ở người bắc Ấn Độ. Pharmacogenet Genomics 24: 442‑450, năm 2014.
26. Kato M, Yuan H, Xu ZG, Lanting L, Li SL, Wang M, Hu MC, Reddy MA và Natarajan R: Vai trò của con đường Akt / FoxO3a Rối loạn chức năng tế bào trung bì qua trung gian TGF ‑ beta1 ‑: Một cơ chế mới liên quan cho bệnh nhân tiểu đườngquả thậndịch bệnh. J Am Soc Nephrol 17: 3325‑3335, năm 2006.
27. Qin G, Zhou Y, Guo F, Ren L, Wu L, Zhang Y, Ma X và Wang Q: Sự biểu hiện quá mức của FoxO1 cải thiện tình trạng rối loạn chức năng tế bào trung bì ở chuột đực mắc bệnh tiểu đường. Mol Endocrinol 29: 1080‑1091, năm 2015.
28. Chang AS, Hathaway CK, Smithies O, and Kakoki M: Transforming growth factor‑ 1 và bệnh thận do tiểu đường. Am J Physiol Renal Physiol 310: F689 ‑ F696, 2016.
29. Akhtar S, Yousif MH, Dhaunsi GS, Sarkhouh F, Chandrasekhar B, Attur S và Benter IF: Kích hoạt ErbB2 và tín hiệu xuôi dòng qua Rho kinases và ERK1 / 2 góp phần vào rối loạn chức năng mạch máu do bệnh tiểu đường. PLoS One 8: e67813, 2013.

30. Omote K, Gohda T, Murakoshi M, Sasaki Y, Kazuno S, Fujimura T, Ishizaka M, Sonoda Y và Tomino Y: Vai trò của con đường TNF trong sự tiến triển của bệnh thận đái tháo đường ở chuột KK ‑ A (y). Am J Physiol Renal Physiol 306: F1335 ‑ F1347, 2014.

31. Al ‑ Lamki RS và Mayadas TN: Thụ thể TNF: Đường dẫn tín hiệu và góp phần vào rối loạn chức năng thận.Quả thậnInt 87: 281‑296, 2015.
32. Gödel M, Hartleben B, Herbach N, Liu S, Zschiedrich S, Lu S, Debreczeni ‑ Mór A, Lindenmeyer MT, Rastaldi MP, Hartleben G, et al: Vai trò của mTOR trong chức năng podocyte và bệnh thận tiểu đường ở người và chuột . J Clin Đầu tư 121: 2197‑2209, năm 2011.

33. Ziyadeh FN, Hoffman BB, Han DC, Iglesias ‑ De La Cruz MC, Hong SW, Isono M, Chen S, McGowan TA và Sharma K: Phòng ngừa dài hạn suy thận, biểu hiện gen dư thừa và ma trận trung cầu cầu thận mở rộng bằng cách điều trị bằng kháng thể đơn dòng chống yếu tố tăng trưởng beta ‑ ở chuột bị tiểu đường db / db. Proc Natl Acad Sci Hoa Kỳ 97: 8015‑8020, 2000.

34. Mori H, Inoki K, Masutani K, Wakabayashi Y, Komai K, Nakagawa R, Guan KL, và Yoshimura A: Con đường mTOR được kích hoạt mạnh trong bệnh thận do tiểu đường và rapamycin có tiềm năng điều trị mạnh mẽ. Biochem Biophys Res Commun 384: 471‑475, năm 2009.
35. Ciccacci C, Latini A, Greco C, Politi C, D'Amato C, Lauro D, Novelli G, Borgiani P, và Spallone V: Mối liên quan giữa bệnh đa hình MIR499A và bệnh thần kinh đái tháo đường ở bệnh tiểu đường loại 2. J Các biến chứng của bệnh tiểu đường 32: 11‑17, 2018.
36. Forbes JM và Thorburn DR: Rối loạn chức năng ty thể ở bệnh nhân tiểu đườngquả thậndịch bệnh. Nat Rev Nephrol 14: 291‑312, năm 2018.
37. Flemming NB, Gallo LA, và Forbes JM: Rối loạn chức năng ty thể và tín hiệu ở bệnh nhân tiểu đườngquả thậnbệnh: Stress oxy hóa và hơn thế nữa. Semin Nephrol 38: 101‑110, năm 2018.