SNP Rs708727 liên quan đến bệnh Alzheimer trong SLC41A1 có thể làm tăng nguy cơ mắc bệnh Parkinson: Báo cáo từ nghiên cứu mở rộng ở Slovakia Phần 2

2.2. Phân tích di truyền

Các phân tích di truyền được thực hiện trên A1 SNPs rs11240569, rs708727 và rs823156 trong đoàn hệ gồm 508 bệnh nhân PD (so với 150 bệnh nhân trong nghiên cứu thí điểm) và đoàn hệ gồm 472 đối chứng (so với 120 đối chứng trong nghiên cứu thí điểm) [37]. Do đó, số lượng bệnh nhân PD và mẫu thử đối chứng đã tăng lên trong nghiên cứu này lần lượt là 3,{10}}gấp và 3,9 lần so với nghiên cứu thí điểm.

Nhiều người bị mất trí nhớ khi có tuổi, nhưng đối với những người mắc bệnh Parkinson, những thay đổi về trí nhớ có thể rõ rệt hơn. Tuy nhiên, chúng ta không nên nghĩ rằng những người mắc bệnh Parkinson chắc chắn sẽ bị suy giảm trí nhớ, bởi vì có những điều chúng ta có thể làm để giúp họ duy trì trí nhớ.

Đầu tiên, liên tục thực hiện một số hoạt động rèn luyện trí não có thể giúp những người mắc bệnh Parkinson cải thiện trí nhớ. Những hoạt động này có thể bao gồm: chơi Sudoku, chơi board game, giải câu đố, v.v. Thông qua các hoạt động này, họ có thể rèn luyện trí nhớ, tăng cường chức năng não và giúp duy trì trạng thái tinh thần.

Thứ hai, chế độ ăn uống cũng có tác động rất quan trọng đến trí nhớ của bệnh nhân mắc bệnh Parkinson. Trong chế độ ăn uống, chúng ta có thể bổ sung một số thực phẩm giàu protein và chất dinh dưỡng như cá, các loại đậu, các loại hạt,… Những thực phẩm này có thể giúp chúng ta khỏe mạnh và cải thiện trí nhớ.

Cuối cùng, tập thể dục thường xuyên cũng có thể giúp những người mắc bệnh Parkinson cải thiện trí nhớ. Tập thể dục không chỉ giúp chúng ta khỏe mạnh về thể chất mà quan trọng hơn là tăng cường chức năng não bộ. Thông qua tập thể dục thường xuyên, họ có thể tăng cường chức năng tim phổi, tăng cường độ đàn hồi của cơ và xương, đồng thời cải thiện trí nhớ.

Nói chung, việc những người mắc bệnh Parkinson có bị suy giảm trí nhớ hay không phụ thuộc vào lối sống và thói quen ăn uống của họ, cũng như liệu họ có chú ý đến những thứ như rèn luyện trí não và tập thể dục hay không. Chỉ cần chúng ta chú ý đến những khía cạnh này, tôi tin rằng trí nhớ của bệnh nhân mắc bệnh Parkinson có thể được cải thiện một cách hiệu quả. Có thể thấy rằng chúng ta cần phải cải thiện trí nhớ của mình. Cistanche Deserticola có thể cải thiện trí nhớ đáng kể vì Cistanche Deserticola là một dược liệu cổ truyền của Trung Quốc với nhiều tác dụng độc đáo, một trong số đó là cải thiện trí nhớ. Hiệu quả của thịt băm đến từ nhiều hoạt chất có trong nó, bao gồm axit cacboxylic, polysacarit, flavonoid, v.v. Những thành phần này có thể tăng cường sức khỏe não bộ thông qua nhiều kênh khác nhau.

Bấm vào biết cách cải thiện chức năng não

In the sub-cohort of 96 PD patients and 100 controls, we also examined A1 SNPs rs9438393, rs56152218, and rs61822602 (first identified in the PD sub-cohort by the Sanger sequencing and afterward by RFLP analysis of the sub-cohort of controls). They were not analyzed in the pilot study (37]. The allele and genotype count and frequencies (fq) for each particular A1 SNP in the PD and the control cohorts are summarized in Table 3. The minor allele fa was, for rs11240569 (C>A) trong tổng số đoàn hệ của chúng tôi (trường hợp PD + mẫu thử đối chứng), gần như có thể so sánh với phạm vi fq tổng dân số alen nhỏ (MATPFR) được báo cáo bởi cơ sở dữ liệu gnomAD và ExAC, như sau: fqo (được quan sát) so với for (được báo cáo) {{1 }}% ​​so với 29-30%.

Fq alen nhỏ cho rs708727 (G > A) trong tổng số đoàn hệ của chúng tôi cao hơn MATPFR trong cơ sở dữ liệu gnomAD và ExAC (fq, so với=40% so với 29-30%) nhưng có thể so sánh với fq alen nhỏ rs708727 được báo cáo cho dân số châu Âu trong cơ sở dữ liệu ALFA (41%). Fq alen nhỏ rs823156 (A > G) trong tổng số đoàn hệ của chúng tôi là 17% và do đó thấp hơn MATPFR trong cơ sở dữ liệu gnomAD và ExAC (23–30%) nhưng có thể so sánh với fq alen nhỏ rs823156 được báo cáo cho dân số Châu Âu ở cơ sở dữ liệu ALFA (18%).

Tần số của alen phụ của rs9438393 (A > G) trong tổng số đoàn hệ là 40% và do đó, cao hơn đáng kể so với MATPFR là 26–29% được báo cáo trong cơ sở dữ liệu gnomAD và TOPMED, nhưng có thể so sánh với rs9438393 nhỏ tần số alen được báo cáo trong cơ sở dữ liệu ALFA của dân số châu Âu (41%). Các alen nhỏ của rs56152218 (T > C) trong tổng số đoàn hệ có mặt với fq là 38%, nằm trong MATPFR là 32–46% được báo cáo bởi cơ sở dữ liệu ALSPAC, TOPMED và ALFA (dân số Châu Âu).

Điều thú vị là trong quần thể người Việt Nam, Hàn Quốc và Qatar, alen thứ yếu là T chứ không phải C như được quan sát thấy ở quần thể người Châu Âu [https://www.ncbi.nlm.nih.gov/snp/?term{{0} }rs56152218, truy cập vào ngày 2 tháng 8 năm 2021)]. Fq của alen phụ ở rs61822602 (G > T) được tìm thấy là 12%. Con số này có thể so sánh với tần số alen T được báo cáo bởi cơ sở dữ liệu ALSPAC và TWINSUK (lần lượt là 12% và 13%) nhưng cao hơn nhiều so với fq của alen T được báo cáo ở dân số Châu Âu trong cơ sở dữ liệu ALFA (6%).

Tất cả các SNP A1 được thử nghiệm trong nhóm PD và nhóm đối chứng của chúng tôi đều ở trạng thái cân bằng Hardy–Weinberg (HWE; Bảng 4).

Tiếp theo, chúng tôi tính tỷ lệ chênh lệch (OR) của các alen phụ và kiểu gen chứa alen phụ cho mỗi SNP được thử nghiệm. Những kết quả này được tóm tắt trong Bảng 5. Kiểu gen GA ở rs708727 được liên kết với PD (OR=1.42 (1.08–1.87), p=0.01) trong quần thể của chúng tôi. Hơn nữa, chúng tôi đã thử nghiệm mối liên quan của các tổ hợp kiểu gen cụ thể cho từng SNP được thử nghiệm với PD trong các mô hình di truyền lặn, trội và trội hoàn toàn (Bảng 6). Phù hợp với dữ liệu trước đó, chúng tôi đã xác định được mối liên quan của alen thứ yếu rs708727 (A) với PD trội (GG so với GA + AA) và mô hình di truyền trội hoàn toàn (GG + AA so với GA) (ORD {{16} }.36 (1,05–1,77), p=0.02 và ORCOD=1.34 (1,04–1,72), p=0.02, tương ứng). Các SNP còn lại cho thấy không có mối liên hệ nào với PD trong các mô hình di truyền được thử nghiệm (Bảng 6).

Chúng tôi cũng đã kiểm tra sự bằng nhau về tỷ lệ dân số của bất kỳ sự kết hợp kiểu gen nào bao gồm các cặp sinh đôi, bộ ba, bộ tứ, bộ năm hoặc bộ sáu của SNP được thử nghiệm trong đoàn hệ PD (N {{0}}) và nhóm đối chứng ( N=100) để kiểm tra mức độ ảnh hưởng của sự tương tác giữa các SNP A1 được thử nghiệm đối với khả năng phát triển PD trong dân số của chúng ta. Tổng cộng, có tổng cộng 12 tổ hợp kiểu gen (hai cặp đôi, bảy bộ ba và ba bộ tứ, Bảng 7) với (p < 0.05, 10 kiểu gen; p < 0,06, hai kiểu gen ) số lượng khác nhau trong nhóm PD và nhóm đối chứng đã được xác định (Bảng 7). Theo tiêu chí của Cohen [39], mô tả sự khác biệt về tỷ lệ, chỉ bộ ba GG(rs708727) + AG(rs823156) + CC(rs61822602) trong số 12 kiểu gen cho thấy sự khác biệt kích thước "trung bình" được xác định bởi Cohen's h(2arcsin√ prp1 –2arcsin√ prp2) Lớn hơn hoặc bằng 0,5.

Giá trị h cho 11 kiểu gen còn lại nằm trong khoảng từ 0.32 đến 0.46 và do đó nằm trong khoảng h từ 0.2 đến 0.5, trong đó xác định những khác biệt nhỏ về tỷ lệ (Bảng 7) [39]. Do đó, bộ ba GG(rs708727) + AG(rs823156) + CC(rs61822602) có thể có ý nghĩa lâm sàng và nên tiến hành kiểm tra trong tương lai về kiểu gen này về tính nhạy cảm với PD. Đối với rs11240569, rs708727 và rs823156, chúng tôi đã thực hiện cùng loại phân tích với dữ liệu nguồn từ đoàn hệ gồm 508 bệnh nhân PD và đoàn hệ gồm 472 đối chứng. Bốn kiểu gen, hai bộ ba (GG(rs11240569) + AG(rs708727), GG(rs708727) + AG(rs823156)) và hai bộ ba (GG(rs11240569) + GG(rs708727) + AA(rs823156), (GG(rs11240569) + GG(rs708727) + AG(rs823156)), với số lượng khác nhau đáng kể (p < 0,05) trong nhóm PD và nhóm đối chứng, đã được xác định. Cohen's h tính cho từng kiểu gen trong số bốn kiểu gen nằm dưới ngưỡng 0,2 [39], và do đó, sự khác biệt giữa tỷ lệ dân số giữa các nhóm được thử nghiệm, trong cả bốn trường hợp, là không đáng kể.

Lão hóa, tiếp theo là giới tính nam, được coi là yếu tố nguy cơ nổi bật nhất dẫn đến khởi phát bệnh PD vô căn [37]. Trong nghiên cứu thí điểm của chúng tôi, độ tuổi khởi phát bệnh PD vô căn trong nhóm gồm 150 bệnh nhân PD không tương quan với sự hiện diện của bất kỳ tổ hợp kiểu gen nào đối với SNPs rs11240569, rs708727 và rs823156 [37]. Ở đây, chúng tôi đã so sánh độ tuổi khởi phát bệnh PD với (1) sự hiện diện của từng tổ hợp kiểu gen đối với SNPs rs11240569, rs708727 và rs823156 trong nhóm 508 bệnh nhân PD (Hình 2) và (2) với sự hiện diện của từng loại bệnh. sự kết hợp kiểu gen cho SNP rs11240569, rs708727, rs823156, rs9438393, rs56152218 và rs61822602, trong nhóm thuần tập phụ của bệnh nhân PD, được chọn ngẫu nhiên từ nhóm PD để giải trình tự trình khởi động A1 (Hình 3). Về độ tuổi khởi phát, phân tích ANOVA một chiều cho thấy rằng không có sự khác biệt đáng kể (p <0,05) giữa các quần thể kiểu gen đối với từng SNP được thử nghiệm trong cả đoàn hệ PD lớn và trong đoàn hệ phụ của PD người bệnh. Do đó, bất kỳ kiểu gen cụ thể nào trong SNP được thử nghiệm đều không ảnh hưởng đến độ tuổi khởi phát của dạng PD vô căn. Điều này hoàn toàn phù hợp với kết luận được rút ra trong nghiên cứu thí điểm của chúng tôi [37].

Chúng tôi cũng đã thực hiện loại phân tích tương tự cho từng SNP được thử nghiệm trong các quần thể phụ nữ và nam giới có nguồn gốc từ đoàn hệ lớn (N=508) và đoàn hệ phụ (N=96 ) của bệnh nhân PD. Như được minh họa trong các Hình bổ sung S1–S3, không có mối liên quan đáng kể (p < 0.05) giữa tuổi khởi phát và sự hiện diện của bất kỳ tổ hợp kiểu gen cụ thể nào trong các SNP được thử nghiệm rs11240569, rs708727, rs823156, rs9438393, rs56152218, và rs61822602 trong các nhóm phụ phân chia theo giới tính được lấy từ nhóm PD lớn (NM=306, NF=202) hoặc nhóm phụ PD được chọn cho trình tự trình khởi động A1 (NM {{20} }, NF=42).

2.3. Học máy RandomForest (RF-ML)

Tất cả SNP A1 đã được kiểm tra khả năng phân biệt giữa bệnh nhân PD và đối chứng bằng RF-ML. Thuật toán RF-ML được đào tạo bằng cách sử dụng dữ liệu của chúng tôi và tầm quan trọng phân biệt đối xử của từng SNP theo cấu trúc kỹ thuật, được gọi là độ sâu biểu đồ, đã được đánh giá [37,40]. Như trong nghiên cứu thí điểm của chúng tôi [37], khả năng dự đoán của SNP được thử nghiệm đã được hình dung và định lượng tương ứng bằng các đường cong ROC (đặc tính vận hành máy thu) và bằng AUC (diện tích dưới đường cong ROC). Khả năng phân biệt đối xử của các yếu tố dự đoán được đưa ra trong khoảng AUC từ 100% (khả năng phân biệt đối xử tối đa) xuống đến 50% (khả năng phân biệt đối xử tối thiểu); AUC < 50% tương ứng với không có khả năng phân biệt.

Thuật toán RF được huấn luyện theo các chế độ sau: (1) với ba hoặc sáu (Bảng 8) SNP A1 cụ thể (mỗi SNP, ba kiểu gen (AMAM/AMAm/AmAm, trong đó AM là viết tắt của alen chính và Am là alen phụ), làm công cụ dự đoán (ba hoặc sáu mô hình RF, một mô hình cho mỗi SNP), (2) với các bộ đôi kiểu gen của các SNP được ghép nối làm công cụ dự đoán (ba mô hình RF (ba SNP) hoặc 15 mô hình RF (sáu SNP), một cho mỗi cặp SNP; Bảng 8), (3) với các bộ ba kiểu gen của ba SNP làm yếu tố dự đoán (một mô hình RF (ba SNP) hoặc 20 mô hình RF (sáu SNP), một cho mỗi bộ ba SNP; Bảng 8), (4) với bộ tứ kiểu gen của sáu SNP làm yếu tố dự đoán (15 mô hình RF, một mô hình cho mỗi bộ tứ; Bảng 8), (5) với các bộ tứ kiểu gen của sáu SNP làm yếu tố dự đoán (sáu mô hình RF, một cho mỗi bộ tứ; Bảng 8) và ( 6) với một bộ sáu kiểu gen (một mô hình RF, Bảng 8).

Do đó, khi các bộ đơn, bộ đôi, bộ ba, bộ tứ, bộ năm và bộ sáu của SNP A1 được sử dụng làm công cụ dự đoán, chúng không có khả năng phân biệt giữa bệnh nhân PD và đối chứng (Bảng 8). Do đó, theo phân tích RF-ML và phù hợp với nghiên cứu thí điểm [37], SNP A1 không có khả năng đóng vai trò là yếu tố phân biệt giữa bệnh nhân đối chứng và bệnh nhân PD và, về PD, không có giá trị chẩn đoán hoặc tiên đoán trong dân số Slovakia .

3. Thảo luận

Quỹ tích PARK16 đã thu hút được sự chú ý trong cộng đồng khoa học vì mối liên hệ của nó với PD và vai trò được thảo luận của nó trong việc xác định tính nhạy cảm đối với căn bệnh phức tạp này. Vào năm 2019, chúng tôi đã báo cáo một nghiên cứu thí điểm trong đó chúng tôi đã phân tích mối liên quan của ba SNP A1, cụ thể là rs11240569, rs708727 và rs823156, với dạng PD vô căn ở dân số Slovakia (người Slav phương Tây). Mối liên hệ được báo cáo giữa rs11240569 và rs823156 với tính nhạy cảm với PD chủ yếu ở người dân Châu Á/Phương Đông không được tìm thấy trong nghiên cứu của chúng tôi [37]. Không có mối liên hệ nào có thể được xác nhận bằng cách sử dụng số liệu thống kê thường xuyên (phân tích di truyền bảo thủ) hoặc bằng phân tích RF-ML [37].

Tuy nhiên, hạn chế chính của nghiên cứu thí điểm của chúng tôi là số lượng bệnh nhân/proband tương đối thấp trong nhóm PD và nhóm đối chứng (lần lượt là 150 và 120). Chúng tôi nhấn mạnh rằng, từ quan điểm thống kê, dữ liệu phải được diễn giải một cách thận trọng do cỡ mẫu nhỏ ở cả hai nhóm thuần tập và do khả năng thống kê thấp của các phân tích được thực hiện [37]. Tuy nhiên, bằng cách sử dụng phương pháp ML, yêu cầu cỡ mẫu nhỏ hơn đáng kể so với thống kê thường xuyên thông thường hoặc tính toán Bayes gần đúng, chúng tôi có thể tự tin kiểm tra khả năng phân biệt giữa bệnh nhân PD và đối chứng của các SNP A1 cụ thể. Trong mọi trường hợp, phương pháp ML cho thấy về cơ bản không có liên quan đến chẩn đoán và dự đoán của SNP rs11240569, rs708727 và rs823156 trong dân số Slovakia [37].

Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã kiểm tra không chỉ ba SNP nói trên mà còn cả ba SNP (rs9438393, rs56152218 và rs61822602) được bản địa hóa trong vùng quảng bá của A1. Các SNP này đã được xác định bằng cách giải trình tự 96 mẫu PD, sau đó là phân tích RFLP của các mẫu đối chứng và xác minh RFLP của các mẫu PD được giải trình tự. Các phân tích di truyền của chúng tôi về cơ bản cho thấy không có mối liên hệ nào giữa ba SNP mới được nghiên cứu với PD. Điều này cũng đúng với rs11240569 và rs823156, đã được phân tích trong nhóm PD và nhóm đối chứng (96/100) cũng như trong nhóm gồm 508 bệnh nhân PD và 472 nhóm đối chứng. Những kết quả này hoàn toàn phù hợp với kết quả của nghiên cứu thí điểm [37]. Tuy nhiên, trong các nhóm thuần tập lớn, rs708727 có liên quan đến việc tăng nguy cơ mắc bệnh PD ở dân số Slovakia.

Theo hiểu biết tốt nhất của chúng tôi, chưa có nghiên cứu nào liên quan trực tiếp đến A1 SNP rs708727 với nguy cơ phát triển PD [19,37]. Trong nghiên cứu mở rộng của chúng tôi (khi so sánh với nghiên cứu thí điểm [37]), alen thứ A trong rs708727 có liên quan đến việc tăng nguy cơ khởi phát PD khi được thử nghiệm ở trạng thái trội [40] (ORD=1.36 (1,05– 1.77), p=0.02) hoặc mô hình vượt trội hoàn toàn [41] (ORCOD=1.34 (1.04–1.72), p=0.02) (Bảng 5). Do đó, sự hiện diện của alen thứ yếu (A) trong rs708727 có thể làm tăng nguy cơ phát triển bệnh PD. Trong khi đó Sanchez-Mut et al. [27] và Wang và cộng sự. [42] đã chỉ ra rõ ràng rằng sự hiện diện của alen thứ A trong rs708727 làm thay đổi quá trình methyl hóa chất kích thích PM20D1 (và do đó, biểu hiện của nó) theo cách phụ thuộc vào liều (định lượng), mô hình di truyền phù hợp nhất trong nghiên cứu của chúng tôi chỉ ra rằng sự hiện diện của một alen rs708727 A là đủ để thay đổi tính nhạy cảm đối với sự khởi phát của PD. Tính nhạy cảm với PD (kiểu hình), về việc liệu một hoặc hai bản sao của alen thứ yếu có mặt trong rs708727 (kiểu gen) hay không, vẫn chưa được làm rõ thêm một cách chi tiết.
Sanchez-Mut và cộng sự. đã xác định PM20D1 (được định vị trong locus PARK16 và mã hóa miền peptidase M20-chứa protein một enzyme có cả hoạt tính hydrolase và peptidase; tổng hợp axit amin N-fatty acyl synthase/hydrolase) là một đặc tính định lượng biểu hiện và methyl hóa locus (mQTL) được ghép nối với một haplotype liên quan đến nguy cơ AD, hiển thị các đặc điểm giống như chất tăng cường và tiếp xúc với chất kích thích PM20D1 thông qua vòng nhiễm sắc thể qua trung gian yếu tố phiên mã phụ thuộc haplotype, CTCF (liên kết CCCTC-) [27]. Bằng cách so sánh các mẫu từ các đối chứng khỏe mạnh và bệnh nhân mắc AD giai đoạn nâng cao, họ đã phát hiện ra rằng PM20D1 luôn thể hiện tình trạng tăng methyl hóa chất xúc tác ở bệnh nhân mắc AD [27]. A1 SNP rs708727 tương quan với mức độ methyl hóa DNA PM20D1 ở vỏ não trước trán và đồi hải mã của con người [27], cũng như SNP rs960603 [27]. Wang và các đồng nghiệp, trong nghiên cứu về máu ngoại vi, đã thu được dữ liệu xác nhận rằng PM20D1 là một mQTL qua trung gian chủ yếu là A1 SNP rs708727 liên quan đến nguy cơ AD [42].

Hơn nữa, dữ liệu theo chiều dọc của họ chứng minh rằng quá trình giảm methyl xảy ra trước khi khởi phát triệu chứng của AD, có thể hình dung là để tạo điều kiện thuận lợi cho sự biểu hiện ngày càng tăng của PM20D1 để kích hoạt chức năng bảo vệ của nó [42]. Sự tiến triển của AD được đánh dấu bằng mức độ methyl hóa ngày càng tăng ở các đảo CpG trong DMR (vùng bị methyl hóa khác biệt) của chất kích thích PM20D1 ở bệnh nhân AD, cuối cùng dẫn đến ức chế phiên mã và biểu hiện gen [27,42,43]. PM20D1 cũng có liên quan đến bệnh tiểu đường [44], béo phì [45] và bệnh đa xơ cứng [46], và vì nó nằm trong locus PARK16 nên có thể giả định rằng nó có liên quan/liên quan đến PD [47].

Mặc dù thiếu các phân tích cơ học phân tử, chúng tôi suy đoán, dựa trên dữ liệu hiện tại của chúng tôi, rằng AD và PD (và các bệnh thoái hóa thần kinh ít gặp hơn khác) không chỉ có chung các cơ chế sinh lý bệnh "nổi tiếng" (ví dụ, rối loạn giảm phân, retromer và proteasome). chức năng), mà còn cả các cơ chế biểu sinh, chẳng hạn như sự điều hòa phụ thuộc A1 rs{2}} của biểu hiện PM20D1 [27,42]. Công việc của chúng tôi gián tiếp bổ sung vào nhu cầu làm sáng tỏ chi tiết về vai trò của axit amin N-acyl (NAA) nội sinh được chuyển hóa bởi PM20D1 trong sinh bệnh học của PD và các rối loạn thoái hóa thần kinh khác. NAA và liên hợp N-acyl của chất dẫn truyền thần kinh (NAAN) hiện được biết là có vai trò quan trọng trong điều hòa thần kinh [48,49]. Bằng chứng liên kết biểu hiện PM20D1 với N-acyl dopamine (NADA) đã được cung cấp bởi công trình gần đây của Song et al. Các tác giả này đã chỉ ra rằng việc loại bỏ kir6.2 (một tiểu đơn vị hình thành lỗ chân lông của các kênh K+ nhạy cảm với ATP) dẫn đến giảm số lượng ty thể và giảm sản xuất ATP thông qua việc tăng mức độ PM20D1 và các tác nhân tách cặp hô hấp ty thể. , bao gồm NADA, ở não giữa của chuột [49].

NADA là chất ức chế mạnh mẽ 5-lipoxygenase (5-LOX) và có sự phân bố giới hạn ở não với mức độ cao nhất ở thể vân và rất thấp ở những nơi khác [48,50,51]. 5-LOX xúc tác quá trình tổng hợp leukotriene hoặc 5-HpETE (5-axit hydroperoxy eicosatetraenoic) từ axit arachidonic và có liên quan đến thoái hóa thần kinh (AD và PD) thông qua sự liên quan của nó đến tình trạng viêm thần kinh [51, 52]. Do đó, chúng tôi cho rằng biểu hiện PM20D1 giảm, lượng NADA dồi dào sau đó thấp hơn và hoạt động tăng lên của 5-LOX góp phần đáng kể vào bệnh lý của PD (và các bệnh thoái hóa thần kinh khác).

Sanchez-Mut và đồng nghiệp đã chứng minh rằng sự biểu hiện quá mức của PM20D1 ở vùng đồi thị AD ở chuột giúp cải thiện khả năng học tập, trong khi việc loại bỏ nó làm tăng tải lượng mảng bám amyloid [27]. Cả hai bệnh lý loại Lewy và loại Alzheimer đều quan trọng trong bệnh sa sút trí tuệ liên quan đến PD [53]. Một nhóm đáng kể bệnh nhân PD bị chứng mất trí nhớ ngày càng trầm trọng trong thời gian mắc bệnh [54]. Khi cân nhắc những quan sát này, chúng tôi suy đoán xem liệu hoạt động liên kết rs{10}}làm im lặng PM20D1 có góp phần vào việc khởi phát chứng sa sút trí tuệ PD hay không và liệu việc theo dõi hoạt động PM20D1 có thể đóng vai trò là thông số tiên lượng cho sự khởi phát của chứng sa sút trí tuệ PD hay không.

Công trình được xuất bản trước đây đã đề xuất sự tham gia của các chất vận chuyển Mg2+ vào sinh bệnh học của PD [18–22,55]. A1, là nhân tố chính trong cân bằng nội môi Mg của tế bào soma, đã được liên kết trực tiếp với PD [20–22]. Đột biến điểm ở A1 dẫn đến sự thay thế p.A350V, p.R244H và p.R285Q được cho là có liên quan đến PD, và cả việc thiếu chức năng và mất đột biến chức năng ở A1 đều được cho là có hậu quả bất lợi ở tế bào thần kinh, do đó góp phần tạo nên kiểu hình PD [20–22]. Công việc này gián tiếp chỉ ra một khả năng là không chỉ sự nhiễu loạn của chức năng cốt lõi A1 (trao đổi Na+/Mg{16}}) mà còn cả sự điều hòa biểu sinh liên kết A (rs708727) của biểu hiện (và hoạt động) PM20D1, góp phần vào sinh bệnh học của PD.

Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã xác định bộ ba kiểu gen GG(rs708727) + AG(rs823156) + CC(rs61822602) có khả năng có ý nghĩa lâm sàng (h Lớn hơn hoặc bằng 0,5). Điều thú vị là rs708727 có kiểu gen GG là một phần của bộ ba. Tuy nhiên, theo nghiên cứu trước đây, kiểu gen chứa alen thứ A trong rs708727 được cho là có liên quan đến nguy cơ PD tiềm ẩn liên quan đến bộ ba này. Hiện tại, chúng tôi không thể bình luận về bất kỳ tương tác phân tử/di truyền/biểu sinh nào liên quan đến SNP trong bộ ba GG(rs708727) + AG(rs823156) + CC(rs61822602), và do đó, về bất kỳ đóng góp giả định nào của bộ ba này vào tổng về nguy cơ khởi phát PD.

Trong nghiên cứu thí điểm của chúng tôi, chúng tôi đã sử dụng RF-ML để đánh giá và giải thích dữ liệu của mình [37]. Ưu điểm chính của phân tích dữ liệu RF-ML là gấp đôi, như sau: (1) nó cho phép định lượng khả năng phân biệt của SNP giữa bệnh nhân PD và các biện pháp kiểm soát [37] và (2) nó yêu cầu cỡ mẫu thấp hơn để đánh giá tầm quan trọng phân biệt đối xử của từng SNP riêng lẻ hoặc sự kết hợp của chúng [37]. Hơn nữa, RF-ML bỏ qua vấn đề giá trị p thường liên quan đến các mẫu lớn hơn, ngay cả khi chúng có sẵn [56]. Như trong báo cáo trước đây của chúng tôi, không có SNP A1 nào được thử nghiệm được chứng minh là có khả năng phân biệt giữa bệnh nhân PD và những người thử nghiệm không PD trong đoàn hệ của chúng tôi (Bảng 8). Do đó, chúng ta có thể giả định rằng không có SNP A1 nào được thử nghiệm phù hợp để đóng vai trò là người phân biệt đối xử PD/không PD trong dân số Slovakia.

Liên quan đến mối liên quan của A1 rs708727 với rủi ro thay đổi đối với PD, kết quả phân tích RF-ML của chúng tôi thoạt nhìn có vẻ mâu thuẫn (Bảng 5 và 6 so với Bảng 8). Jakobsdottir và cộng sự. trong phân tích hồi quy logistic và đường cong ROC của họ cho thấy rằng ngay cả các mối liên hệ di truyền mạnh mẽ cũng không tự động đảm bảo sự phân biệt hiệu quả giữa các trường hợp và đối chứng [57]. Mặc dù là phân loại kém, SNP có OR đáng kể có thể rất có giá trị để thiết lập các giả thuyết căn nguyên [57]. Trong trường hợp của chúng tôi, A1 SNP rs708727 không có khả năng phân loại liên quan đến PD, do đó, nó không có tầm quan trọng về mặt lâm sàng. Tuy nhiên, mối liên hệ yếu nhưng có ý nghĩa của nó với nguy cơ thay đổi đối với PD cho phép chúng tôi suy đoán về sự liên quan của rs708727 trong sinh lý học của PD theo cách tương tự hoặc tương tự như nó liên quan đến AD [27].

4. Vật liệu và phương pháp

4.1. Người tham gia nghiên cứu (Đặc điểm cơ bản)

Tổng cộng, 980 mẫu thử đã được đưa vào nghiên cứu (508 bệnh nhân PD và 472 đối chứng, đáp ứng các tiêu chí bao gồm). Dạng PD vô căn được các nhà thần kinh học ở năm trung tâm chẩn đoán PD (ở Martin, Bratislava, Trencin, Zvolen và Kosice) chẩn đoán theo tiêu chuẩn chẩn đoán PD của MDS (Hiệp hội Rối loạn Vận động). Tất cả bệnh nhân được điều trị bằng liệu pháp chống PD tiêu chuẩn. Độ tuổi trung bình của bệnh nhân PD là 68,4 ± 9,6 tuổi. Độ tuổi trung bình khởi phát bệnh là 61,7 ± 10,7 tuổi. Trường hợp trẻ nhất được chẩn đoán ở tuổi 34 và trường hợp lớn tuổi nhất là 89 tuổi. Nhóm PD bao gồm 202 bệnh nhân nữ (F) và 306 bệnh nhân nam (M), và do đó, tỷ lệ F:M là 1:1,5.

Nhóm đối chứng của các proband bao gồm các bệnh nhân hướng ngoại và hướng nội từ Phòng khám Y học Nghề nghiệp và Độc chất (Bệnh viện Đại học Martin (UHM)) và Phòng khám Thần kinh (UHM). Chỉ những bệnh nhân trước đây chưa được chẩn đoán mắc bất kỳ bệnh thoái hóa thần kinh và tâm thần kinh nào, chẳng hạn như đái tháo đường hoặc loãng xương (tất cả các bệnh lý được cho là liên quan đến thay đổi biểu hiện A1 và mất điều hòa chức năng A1), mới được ghi danh vào nhóm nghiên cứu đối chứng. Tuổi trung bình của mẫu đối chứng là 68,3 ± 11,6 tuổi. Nhóm đối chứng bao gồm 208 cá thể nữ và 264 cá thể nam, do đó tỷ lệ F:M là 1:1,3 ở nhóm đối chứng.

Nhóm phụ gồm các bệnh nhân PD, trong đó vùng quảng bá A1 được sắp xếp theo trình tự, bao gồm 96 đối tượng được chọn ngẫu nhiên. Tỷ lệ F:M là 1:1,3 (42 nữ và 54 nam). Độ tuổi trung bình của bệnh nhân trong nhóm thuần tập PD là 67.{{10}} ± 9,5 tuổi. Nhóm đối chứng bao gồm 41 con cái và 59 con đực, do đó tỷ lệ F:M là 1:1,4. Độ tuổi trung bình của các mẫu thử trong nhóm đối chứng là 59,8 ± 5,0 tuổi.

Nghiên cứu này đã được phê duyệt bởi Ủy ban đạo đức tại Khoa Y Jessenius, Đại học Comenius (JFM CU). Phê duyệt được ghi lại theo ID: EK 66/2019. Tất cả những người tham gia nghiên cứu đã ký vào các mẫu đơn đồng ý.

4.2. Xử lý mẫu

Các mẫu máu được thu thập vào các ống BD Vacutainer® đã xử lý bằng EDTA (Becton, Dickinson and Company, Franklin Lakes, NJ USA). DNA bộ gen được phân lập từ mẫu máu tươi (UHM) hoặc đông lạnh (các trung tâm PD khác) bằng cách sử dụng Bộ lọc DNA bộ gen Wizard® (Promega Corporation, Maddison, WI, USA) theo giao thức của nhà sản xuất. Các mẫu DNA phân lập được bảo quản ở -80 ◦C.

4.3. Kiểu gen

Kiểu gen được thực hiện trên 358 mẫu PD và 352 mẫu đối chứng. Kết quả từ các thí nghiệm này đã được phân tích cùng với các kết quả được báo cáo trước đó bởi Cibulka et al. [37]. SNP rs11240569, rs708727 và rs823156 được phân tích bằng cách sử dụng các đầu dò kiểu gen TaqMan® C_34251_20/rs11240569, C_375742_10/rs823156 và C_9238453_10/rs708727 (tất cả đều là Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA USA) theo cách tương tự như đã báo cáo trước đây [37].

4.4. Trình tự sanger

Vùng quảng bá được chia thành bốn đoạn/bộ khuếch đại chồng chéo nhau, vì nó quá dài để chạy một lần giải trình tự. Trước khi được giải trình tự, các vùng mục tiêu đã được khuếch đại. Các đoạn mồi được thiết kế bằng cách sử dụng công cụ trực tuyến Primer3Plus [https:// Primer3plus.com/cgi--bin/dev/primer3plus.cgi (truy cập vào ngày 3 tháng 5 năm 2018)]. Mỗi cặp mồi được kiểm tra sự hiện diện của nhiều sản phẩm khuếch đại bằng công cụ PCR trực tuyến UCSC [http://www.genome.ucsc.edu/cgi--bin/hgPcr (truy cập vào ngày 3 tháng 5 năm 2018)].

Các chương trình mồi và PCR được sử dụng để khuếch đại bốn đoạn được tóm tắt trong Bảng bổ sung S1 và S2. Thành phần của hỗn hợp chính cho từng mảnh được tóm tắt trong SA3. Đoạn 3 và 4 có hàm lượng nucleotide G và C cao (lần lượt là 67,4% và 71,9%). Hiệu suất phản ứng được tăng lên bằng cách bổ sung Chất tăng cường giàu 10× GC (Solis Biodyne, Tartu, Estonia). Sản phẩm PCR được tinh chế bằng cách sử dụng NucleoSpinTM Gel và bộ làm sạch PCR (Macherey-Nagel GmbH&Co. KG, Düren, Đức). Ở bước tiếp theo, sản phẩm PCR tinh khiết được pha loãng đến nồng độ thích hợp cho PCR tiền giải trình tự (SA4, SA5). Chỉ các mồi chuyển tiếp (fw) mới được sử dụng trong PCR giải trình tự trước. Hỗn hợp phản ứng còn bao gồm BigDye Terminator v3.1 (Hệ sinh học ứng dụng, Waltham, MA, Hoa Kỳ) và dideoxynucleotide.

Kết quả là chúng tôi thu được hỗn hợp các sản phẩm có kích thước khác nhau được kết thúc bằng các dideoxynucleotide được đánh dấu bằng huỳnh quang. Các sản phẩm sau đó đã được tinh chế bằng cách sử dụng bộ làm sạch phản ứng giải trình tự SigmaSpin (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) theo giao thức của nhà sản xuất. Một thể tích 3 µL sản phẩm đã tinh chế được chuyển vào đĩa 96-giếng cùng với 12 µL formamide khử ion hóa cao cấp (Applied Biosystems, Waltham, MA, USA). Hỗn hợp này được biến tính trong 5 phút ở 95 ◦C trong máy điều nhiệt. Các mảnh được tách ra trên 8-thiết bị vi mao quản ABI 3500 (Applied Biosystems, Waltham, MA, USA). Các chuỗi được xuất và hiển thị bằng phần mềm Chromas (Technelysium Pty Ltd., South Brisbane, Australia). Các tệp FASTA đã được tải lên BLAST (Công cụ tìm kiếm căn chỉnh cục bộ cơ bản) và được căn chỉnh theo bộ gen người tham chiếu (phiên bản GRCh38.p12).

Dự đoán các vị trí liên kết yếu tố phiên mã và những thay đổi của chúng được thực hiện bởi công cụ trực tuyến ConSite [có sẵn tại: http://consite.genereg.net/ (truy cập vào ngày 3 tháng 9 năm 2020)] [38]. Các trình tự có alen chính và alen phụ được tải lên và quang phổ của các yếu tố phiên mã (TF) được tạo ra. Phân tích được thực hiện mà không cài đặt trước độ đặc hiệu tối thiểu. Những thay đổi trong cấu hình liên kết TF dựa trên sự hiện diện của các biến thể được tóm tắt trong Bảng 2.

4.5. Phân tích RFLP (Đa hình độ dài đoạn giới hạn)

Các thành phần hỗn hợp phản ứng và điều kiện PCR của PCR khuếch đại được tóm tắt trong SA6 và SA7. Công cụ silico trực tuyến NEBCutter 2.0 [http://nc2.neb.com/NEBcutter2 / (truy cập vào ngày 14 tháng 2 năm 2020)] đã được sử dụng để thiết kế các hạn chế của bộ khuếch đại. Các enzyme hạn chế sau đây được chọn để phân tích RFLP: Hpy166II (phát hiện rs9438393), NIaIII (phát hiện rs56152218) và BmrI (phát hiện rs61822602). Tất cả các enzyme được mua từ New England Biolabs. Đối với biến thể rs144056491, chúng tôi không thể thiết kế thí nghiệm RFLP vì không có sẵn enzyme phù hợp. Theo hạn chế, chúng tôi mong đợi các đoạn được tóm tắt trong SA8 sẽ tạo thành sản lượng. Sau khi hạn chế, các sản phẩm được phân tách bằng điện di trên gel agarose (gel NIaIII và Hpy166II 1%; gel BmrI 2%) và sau đó hiển thị trên thiết bị PharosFX (Phòng thí nghiệm Bio-Rad). Kiểu gen cho mỗi SNV đã được xác định.

4.6. Phân tích dữ liệu

Dữ liệu được khám phá và phân tích bằng R [R Core Team (2021); R: ngôn ngữ và môi trường cho tính toán thống kê. Tổ chức R về tính toán thống kê, Vienna, Áo. URL https://www.R-project.org/, ver. 4.0.5 (2021-03-31)]. Một nghiên cứu liên kết di truyền (GAS) và phân tích công suất đã được thực hiện bằng thư viện R HardyWeinberg [Jan Graffelman (2015); Khám phá các dấu hiệu di truyền song song: Gói HardyWeinberg. Tạp chí Phần mềm Thống kê, 64(3), 1-23. URL https://www.jstatsoft.org/v64/i03/], DescTools [Andri Signorelli et al. (2021); DescTools: Công cụ thống kê mô tả. Phiên bản gói R 0.99.41.], epitools [Tomas J. Aragon (2020); epitools: Công cụ dịch tễ học. Gói R phiên bản 0.5-10.1. URL https://CRAN.R-project.org/package=epitools], pwr [Stephane Champely (2020); pwr: Các hàm cơ bản để phân tích năng lượng. Gói R phiên bản 1.3-0. URL https://CRAN.R-project.org/package=pwr] và mã được phát triển nội bộ. Mô hình dự đoán RandomForest được thực hiện với thư viện R RandomForestSRC [Ishwaran H. và Kogalur UB (2021); Rừng ngẫu nhiên thống nhất nhanh để tồn tại, hồi quy và phân loại (RF-SRC), gói R phiên bản 2.11.0.]. Dữ liệu được trực quan hóa bởi thư viện R beeswarm [Aron Eklund (2021); beeswarm: Âm mưu bầy ong, một giải pháp thay thế cho Stripchart. Gói R phiên bản 0.3.1. URL https://CRAN.R-project.org/package=beeswarm]. ANOVA một chiều đã được sử dụng để kiểm tra giả thuyết khống về sự bình đẳng của tuổi khởi phát trung bình của quần thể đối với ba quần thể kiểu gen cho mỗi SNP. Những phát hiện có giá trị p dưới 0,05 được coi là có ý nghĩa thống kê.

5. Kết Luận

Tóm lại, dữ liệu của chúng tôi cho thấy mối liên hệ yếu nhưng có ý nghĩa giữa A1 SNP rs708727 với PD trong các mô hình di truyền trội và vượt trội trong quần thể Slovakia. Không có SNP A1 nào được thử nghiệm khác (rs11240569, rs823156, rs9438393, rs56152218 và rs61822602) có liên quan đến căn bệnh này trong bất kỳ mô hình di truyền nào được thử nghiệm. Các phân tích RF-ML đã xác định tất cả các SNP A1 được thử nghiệm là các công cụ phân loại/dự đoán kém về PD, do đó việc sử dụng chúng trong thực hành lâm sàng như các dấu hiệu chẩn đoán hoặc tiên lượng vẫn không đáng kể. Tuy nhiên, sự liên kết của rs708727 với PD cho phép chúng tôi suy đoán rằng các alen nhỏ liên quan đến nguy cơ PD (G > A) trong rs708727 góp phần vào sự khởi phát và tiến triển của bệnh thông qua việc làm xáo trộn quy định biểu sinh của biểu hiện PM20D1, cơ chế được biết là có vai trò trong sinh bệnh học của AD. Giả thuyết này cần được kiểm tra thêm để đưa ra kết luận cuối cùng. Hơn nữa, mối liên quan có thể có giữa chứng mất trí nhớ liên quan đến PD và rs708727 cần được làm sáng tỏ.

Sự đóng góp của tác giả:

Khái niệm hóa, MK; phương pháp, MK, MC, MG (Marian Grendar) và MB; phần mềm, MG (Marian Grendar); xác nhận, MC, MB và MK; phân tích chính thức, MK, MG (Marian Grendar), MC, AS, ZL, ZP, TS, SS và MG (Milan Grofik); điều tra, MC và MB; quản lý dữ liệu, MC, MB, MG (Marian Grendar), MG (Milan Grofik), JN, VN và EK; viết—chuẩn bị bản thảo gốc, MK; viết—đánh giá và biên tập, MC, MG (Marian Grendar) và ZP; hình dung, MK, MC và MG (Marian Grendar); giám sát, MK; quản lý dự án, MC, MK, MG (Milan Grofik), JN, JB, VH, VN, EK, MS và BV; mua lại tài trợ, MK Tất cả các tác giả đã đọc và đồng ý với phiên bản đã xuất bản của bản thảo.

Kinh phí:

Công trình này được hỗ trợ bởi Cơ quan Nghiên cứu và Phát triển Slovakia, số cấp APVV-19-0222 và Cơ quan tài trợ khoa học của Bộ Giáo dục, Khoa học, Nghiên cứu và Thể thao Cộng hòa Slovakia và Viện Hàn lâm Khoa học Slovakia, số cấp VEGA 1/0554/19, cả hai đều tới MK

Tuyên bố của Ban Đánh giá Thể chế:

Nghiên cứu đã được phê duyệt bởi Ủy ban đạo đức tại Khoa Y Jessenius, Đại học Comenius (JFM CU). Giấy phê duyệt được ghi theo ID: EK 66/2019.

Tuyên bố đồng ý sau khi được thông báo:

Có được sự đồng ý từ tất cả các đối tượng tham gia vào nghiên cứu.

Tuyên bố về tính sẵn có của dữ liệu:

Bộ dữ liệu đầy đủ có trong bài viết. Bản chất và mức độ của dữ liệu được bao gồm cho phép phân tích tổng hợp sâu hơn. Mọi thông tin liên quan đến nghiên cứu đều có sẵn theo yêu cầu từ tác giả tương ứng.

Sự nhìn nhận:

Chúng tôi cảm ơn tất cả những người tham gia nghiên cứu và các thành viên gia đình của họ. Chúng tôi cũng xin gửi lời cảm ơn tới Martin Marak (JFM CU) vì sự hỗ trợ kỹ thuật thành thạo của anh ấy cho dự án, tới Jan Radvanszky và Rastislav Hekel (cả hai đều là GENETON sro) vì những lời khuyên hữu ích về phân tích trình khởi động A1 và tới Theresa Jones về việc chỉnh sửa ngôn ngữ của tài liệu này. bản thảo.

Xung đột lợi ích:

Các tác giả tuyên bố không có xung đột lợi ích.

Người giới thiệu

1. Tatarkova, Z.; de Baaij, JHF; Grendar, M.; Aschenbach, JR; Racay, P.; Bos, C.; Sponder, G.; Hoenderop, JGJ; Röntgen, M.; Turcanova Kopruskova, M.; et al. Lượng Mg2+ trong chế độ ăn uống và chất trao đổi Na+/Mg2+ SLC41A1 Các thành phần ảnh hưởng của năng lượng ty thể trong tế bào cơ tim của chuột. Int. J. Mol. Khoa học. 2020, 21, 8221. [CrossRef] [PubMed]

2. Yamanaka, R.; Tabata, S.; Shindo, Y.; Hotta, K.; Suzuki, K.; Soga, T.; Oka, K. Sự cân bằng nội môi của ty thể Mg2+ quyết định quá trình chuyển hóa năng lượng của tế bào và khả năng dễ bị căng thẳng. Khoa học. Dân biểu 2016, 6, 30027. [CrossRef] [PubMed]

3. Dudev, T.; Grauffel, C.; Lim, C. Các cation kim loại bản địa và ngoài hành tinh liên kết với ATP như thế nào: Ý nghĩa của Lithium như một tác nhân trị liệu. Khoa học. Dân biểu 2017, 7, 42377. [CrossRef] [PubMed]

4. Kolisek, M.; Zsurka, G.; Samaj, J.; Weghuber, J.; Schweyen, RJ; Schweigel, M. Mrs2p là thành phần thiết yếu của hệ thống dòng điện di Mg2+ chính trong ty thể. EMBO J. 2003, 22, 1235–1244. [CrossRef] [PubMed]

5. Schindl, R.; Weghuber, J.; Romanin, C.; Schweyen, RJ Mrs2p tạo thành kênh chọn lọc Mg2+ có độ dẫn cao trong ty thể. Sinh lý. J. 2007, 93, 3872–3883. [CrossRef] [PubMed]

6. Kolisek, M.; Sponder, G.; Pilchova, tôi.; Cibulka, M.; Tatarkova, Z.; Werner, T.; Racay, P. Magiê Extravaganza: Bản tóm tắt quan trọng của nghiên cứu hiện tại về các chất vận chuyển Mg2+ trong tế bào ngoài TRPM6/7. Linh mục Physiol. Hóa sinh. Dược phẩm. 2019, 176, 65–105. [Tham khảo chéo]

7. Kubota, T.; Shindo, Y.; Tokuno, K.; Komatsu, H.; Ogawa, H.; Kudo, S.; Kitamura, Y.; Suzuki, K.; Oka, K. Ty thể là nơi dự trữ magie nội bào: Điều tra bằng hình ảnh huỳnh quang đồng thời trong tế bào PC12. Biochim. Sinh lý. Acta 2005, 1744, 19–28. [Tham khảo chéo]

8. Trả lời, G.; Abdulhanan, N.; Fröhlich, N.; Mastrototaro, L.; Aschenbach, JR; Röntgen, M.; Pilchova, tôi.; Cibulka, M.; Racay, P.; Kolisek, M. Sự biểu hiện quá mức của bộ trao đổi Na+/Mg2+ SLC41A1 làm suy giảm tín hiệu ủng hộ sự sống còn. Mục tiêu cụ thể 2017, 9, 5084–5104. [CrossRef] [PubMed]

9. Yamaguchi, H.; Wang, HG Protein kinase PKB/Akt điều chỉnh sự sống sót của tế bào và quá trình tự hủy của tế bào bằng cách ức chế sự thay đổi về hình dạng Bax. Gen gây ung thư 2001, 20, 7779–7786. [Tham khảo chéo]

10. Vauzour, D.; Vafeiadou, K.; Rice-Evans, C.; Williams, RJ; Spencer, JP Kích hoạt các đường truyền tín hiệu Akt và ERK1/2 ủng hộ sự sống sót làm cơ sở cho tác dụng chống apoptotic của flavanone trong các tế bào thần kinh vỏ não. J. Hóa thần kinh. 2007, 103, 1355–1367. [Tham khảo chéo]

11. Muddapu, VR; Dharshini, SAP; Chakravarthy, VS; Gromiha, MM Bệnh thoái hóa thần kinh—Có phải sự thiếu hụt chuyển hóa là nguyên nhân gốc rễ? Đằng trước. Khoa học thần kinh. 2020, 14, 213. [CrossRef] [PubMed]

12. Pathak, D.; Berthet, A.; Nakamura, K. Suy giảm năng lượng: Nó có góp phần gây thoái hóa thần kinh không? Ann. Thần kinh. 2013, 74, 506–516. [CrossRef] [PubMed]

13. Dharshini, SAP; Taguchi, YH; Gromiha, MM Điều tra cuộc khủng hoảng năng lượng ở bệnh Alzheimer bằng cách sử dụng nghiên cứu bảng điểm. Khoa học. Dân biểu 2019, ngày 9, 18509. [CrossRef] [PubMed]

14. Cành cây, G.; Shirihai, OS Sự tương tác giữa động lực của ty thể và bệnh thiểu năng. Chống oxy hóa. Tín hiệu oxi hóa khử 2011, 14, 1939–1951. [CrossRef] [PubMed]

15. Triệu, W.; Trương, W.; Mã, H.; Yang, M. NIPA2 điều chỉnh chức năng nguyên bào xương bằng cách điều chỉnh chứng loãng xương ở bệnh loãng xương do tiểu đường loại 2. Khoa học. Dân biểu 2020, 10, 3078. [CrossRef]
16. Nadler, MJ; Hermosura, MC; Inabe, K.; Perraud, AL; Chu, Q.; Stokes, AJ; Kurosaki, T.; Kinet, Nhật Bản; Penner, R.; Scharenberg, AM; et al. LTRPC7 là một Mg. Kênh cation hóa trị hai do ATP điều chỉnh cần thiết cho khả năng tồn tại của tế bào. Thiên nhiên 2001, 411, 590–595. [Tham khảo chéo]

17. Kolisek, M.; Nestler, A.; Vormann, J.; Schweigel-Röntgen, M. Gen SLC41A1 của con người mã hóa cho bộ trao đổi Na+/Mg2+. Là. J. Physiol. Vật lý tế bào. 2012, 302, C318–C326. [Tham khảo chéo]

For more information:1950477648nn@gmail.com