Tác dụng chống lão hóa và ức chế Tyrosinase của chiết xuất butanolic hoa Cassia Fistula Phần 1

trừu tượng

Lý lịch: Các sản phẩm tự nhiên được làm từ các nguồn thực vật đã được sử dụng trong nhiều ứng dụng mỹ phẩm như một nguồn dinh dưỡng và như một chất làm trắng. Hoa của Cassia fistula L, họ Fabaceae, đã được sử dụng như một loại thuốc truyền thống để chữa các bệnh về da và chữa lành vết thương và đã được báo cáo là có đặc tính chống oxy hóa. Tác dụng chống lão hóa của chiết xuất hoa C. fistula trên nguyên bào sợi da người đã được nghiên cứu.

Glycoside của cistanche cũng có thể làm tăng hoạt động của SOD trong các mô tim và gan, đồng thời làm giảm đáng kể hàm lượng lipofuscin và MDA trong mỗi mô, loại bỏ hiệu quả các gốc oxy phản ứng khác nhau (OH-, H₂O₂, v.v.) và bảo vệ chống lại tổn thương DNA gây ra bởi gốc OH. Cistanche phenylethanoid glycoside có khả năng loại bỏ gốc tự do mạnh mẽ, khả năng khử cao hơn vitamin C, cải thiện hoạt động của SOD trong huyền phù tinh trùng, giảm hàm lượng MDA và có tác dụng bảo vệ nhất định đối với chức năng màng tinh trùng. Cistanche polysacarit có thể tăng cường hoạt động của SOD và GSH-Px trong hồng cầu và mô phổi của chuột lão hóa thực nghiệm do D-galactose gây ra, cũng như làm giảm hàm lượng MDA và collagen trong phổi và huyết tương, đồng thời tăng hàm lượng elastin, có tác dụng nhặt rác tốt đối với DPPH, kéo dài thời gian thiếu oxy ở chuột già, cải thiện hoạt động của SOD trong huyết thanh và làm chậm quá trình thoái hóa sinh lý của phổi ở chuột già thực nghiệm. Với sự thoái hóa hình thái tế bào, các thí nghiệm đã chỉ ra rằng Cistanche có khả năng chống oxy hóa tốt và có tiềm năng trở thành dược phẩm ngăn ngừa và điều trị các bệnh lão hóa da. Đồng thời, echinacoside trong Cistanche có khả năng đáng kể trong việc loại bỏ các gốc tự do DPPH và có thể loại bỏ các loại oxy phản ứng, ngăn chặn sự thoái hóa collagen do gốc tự do gây ra và cũng có tác dụng sửa chữa tốt đối với tổn thương anion gốc tự do của thymine.

Nhấp vào Lợi ích Cistanche sa mạc

【Để biết thêm thông tin:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

phương pháp: Quá trình chiết xuất butanol của hoa C. fistula đã hoàn tất và các hợp chất hoạt tính đã được phân loại. Khả năng gây độc tế bào của nguyên bào sợi được đánh giá bằng xét nghiệm SRB để chọn liều không độc cho các thí nghiệm tiếp theo. Sự tổng hợp collagen và axit hyaluronic (HA) sau đó được đo bằng cách sử dụng bộ collagen và ELISA tương ứng. Ngoài ra, hoạt động của enzyme, bao gồm collagenase, matrixmelloproteinase-2 (MMP-2) và tyrosinase, cũng được đánh giá.

Kết quả: Người ta thấy rằng chiết xuất hoa không ảnh hưởng đến sự phát triển của tế bào nguyên bào sợi da (IC50 > 200 ug/mL). Kết quả cho thấy chiết xuất từ ​​hoa làm tăng đáng kể quá trình tổng hợp collagen và HA tùy theo liều lượng. Chiết xuất hoa (50–200 ug/mL) cũng ức chế đáng kể hoạt động của collagenase và MMP-2. Hơn nữa, chiết xuất hoa này có thể ức chế hoạt động tyrosinase gây ra chứng tăng sắc tố da, gây lão hóa da.

kết luận: Chiết xuất hoa C. fistula cho thấy tác dụng ngăn ngừa khi được sử dụng cho mục đích chống lão hóa trong nguyên bào sợi da người và có thể là lựa chọn thích hợp cho các sản phẩm mỹ phẩm nhằm mục đích mang lại hiệu quả làm trắng và được chỉ định là sản phẩm chăm sóc da mặt chống lão hóa .

từ khóa: Collagenase, tổng hợp Collagen, Glycosaminoglycan, Hyaluronic acid, Matrix metallicoproteinase

Lý lịch

Lão hóa da là một tiến trình sinh hóa phức tạp do nhiều yếu tố bên trong và bên ngoài của từng cá nhân như tuổi tác, nội tiết tố và tiếp xúc với tia UV [1]. Sự tiến triển xảy ra ở lớp biểu bì và trung bì và chủ yếu liên quan đến sự thoái hóa chất nền ngoại bào (ECM) [2]. Các enzyme tham gia vào quá trình phân hủy ECM là các metallicoproteinase ma trận (MMP) như gelatinase (MMP-2) và collagenase [3]. Da mất độ bền kéo do ảnh hưởng của sự suy giảm ECM bởi MMP. Trong quá trình này, nếp nhăn của da xảy ra, độ nhám và khô cũng phát sinh rõ rệt cùng với một số bất thường về sắc tố như giảm hoặc tăng sắc tố [2, 4]. Để điều trị tăng sắc tố, các chất ức chế tyrosinase đã được nghiên cứu. Tyrosinase là một loại enzyme giới hạn tốc độ chuyển đổi tyrosine thành melanin [5]. Do đó, chất ức chế tyrosine đóng vai trò quan trọng như chất làm sáng da [6] trong khi quá trình tổng hợp axit hyaluronic (HA) điều chỉnh quá trình hydrat hóa da và sự xuất hiện của nếp nhăn. HA, một glycosaminoglycan không sunfat (GAG), bao gồm các đơn vị disacarit lặp lại bao gồm axit D-glucuronic và N-acetyl-Dglucosamine [7]. HA cũng điều chỉnh việc sửa chữa các mô, bao gồm tăng cường phản ứng của hệ thống miễn dịch bằng cách kích hoạt các tế bào viêm và đáp ứng với tổn thương của nguyên bào sợi [8–10].

Các sản phẩm tự nhiên được làm từ các nguồn thực vật như Glycyrrhiza glabra [11] hoặc trà xanh [12] đã được sử dụng trong các ứng dụng mỹ phẩm như một nguồn dinh dưỡng và làm chất làm trắng. Một số lượng đáng kể các bằng chứng đã chỉ ra tác dụng có lợi của các chất phytochemical dùng đường uống hoặc bôi tại chỗ từ chiết xuất thực vật, đặc biệt là trong việc cải thiện tình trạng da. Một số ví dụ về tác dụng có lợi là có thể giảm lão hóa da và viêm da. C. fistula (vòi hoa vàng), họ Fabaceae, được tìm thấy ở nhiều nước châu Á như Thái Lan, Trung Quốc, Myanmar và Ấn Độ. Trong các nghiên cứu trước đây, chiết xuất hoa C. fistula được phát hiện có đặc tính chống oxy hóa, chống ung thư, kháng khuẩn, kháng nấm và trị đái tháo đường [13, 14]. Tác dụng của C. fistula trong y học Ayurveda được biết là có liên quan đến việc điều trị các rối loạn khác nhau bao gồm bệnh ngoài da, bệnh phong, nôn ra máu, ngứa và tiểu đường [15, 16]. Các bộ phận khác nhau của C. fistula đã thể hiện các đặc tính dược lý [17]. Hoa, hạt, quả và bột giấy đã được sử dụng để điều trị các bệnh ngoài da bao gồm cả bệnh phong [18]. Bột giấy đã được công nhận về đặc tính trị đái tháo đường [15] và đã được sử dụng trong một loại thuốc bổ đã được áp dụng trong điều trị bệnh gút và bệnh thấp khớp [19]. Theo truyền thống, lá và quả chín được sử dụng làm thuốc nhuận tràng [20, 21]. Các chất hóa học thực vật phenolics và flavonoid của C. fistula cũng đã được báo cáo là hữu ích trong việc điều trị các bệnh về da [14]. Do đó, trong nghiên cứu này, chúng tôi quan tâm đến vai trò của chiết xuất hoa C. fistula trong các ứng dụng mỹ phẩm. Tác dụng ngăn ngừa sự xuống cấp của ECM cùng với các enzym lão hóa da bao gồm các hoạt động của collagenase và MMP-2, cũng như tyrosinase, đã được kiểm tra. Hơn nữa, sự tổng hợp collagen và HA đã được xác định.

phương pháp

Hóa chất và thuốc thử

Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM), DQ gelatin và penicillin-streptomycin được cung cấp từ Gibco (Grand Island, NY, USA). Huyết thanh bò bào thai (FBS) được cung cấp từ Thermo Science (Hoa Kỳ). Sirius Red / Fast Green Collagen Staining Kit được mua từ Chondrex, Inc. (Redmond, WA, USA). Thuốc thử Sulforhodamine B, axit hyaluronic và tyrosinase của nấm được lấy từ Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Hoa Kỳ).

Nguyên liệu thực vật

Hoa C. lỗ rò được lấy từ Khu bảo tồn thảo mộc Lampang, tỉnh Lampang, Thái Lan. Mẫu chứng từ số (023197) đã được chứng nhận bởi Wannaree Charoensup, Nhà thực vật học tại phòng tiêu bản của Hệ thực vật Thái Lan, Khoa Dược, Đại học Chiang Mai, Thái Lan.

Chuẩn bị chiết xuất hoa Cassia fistula

Hoa C. fistula được sấy khô trong phòng thoáng khí và sau đó nghiền mịn 500 g hoa khô thành bột. Sau đó, bột được ngâm trong 50% ethanol và sau đó lắc ở tốc độ 70 vòng / phút trong 24 giờ. Sau 24h, lọc mẫu qua giấy lọc để tách cặn. Phần cặn được ngâm trong etanol 50% và lắc ở tốc độ 70 vòng/phút trong 24 giờ và bước này được lặp lại 2 lần. Các mẫu đã lọc được gộp lại với nhau và được làm bay hơi bằng thiết bị cô quay chân không (BUCHI, Thụy Sĩ) để thu được phần nước. Hexan được thêm vào phần nước theo tỷ lệ hexan 2:1. Các mẫu được lắc và để tách trong hơn 30 phút. Các mẫu được tách thành hai phần, đó là phần hexan và nước. Sau đó, phần nước được thu thập và 10 phần trăm than củi được thêm vào trong khoảng thời gian 30 phút với sự khuấy nhẹ ở nhiệt độ phòng. Các mẫu được lọc qua giấy lọc và celite để tách than. Các mẫu được trộn với butanol bão hòa theo tỷ lệ butanol bão hòa 2:1 và các mẫu được để tách trong khoảng thời gian 12 giờ và bước này được lặp lại 3 lần. Các mẫu được tách thành hai phần, bao gồm các phần nước và butanol. Nước tiếp tục được bổ sung vào các phân đoạn butanol với một thể tích bằng nhau và các phân đoạn này được phép bay hơi bằng cách sử dụng thiết bị cô quay chân không. Các mẫu đã bay hơi được đông khô để thu được bột chiết xuất hoa C. fistula.

Định lượng tổng hàm lượng phenolic trong chiết xuất hoa C. fistula bằng máy quang phổ UV-nhìn thấy

Tổng hàm lượng phenolic trong chiết xuất hoa C. fistula được xác định bằng xét nghiệm Folin-Ciocalteu. Tóm lại, 0.4 mL chiết xuất hoa C. fistula được trộn với 0.3 mL thuốc thử Folin-Ciocalteau 10 phần trăm và ủ trong bóng tối ở nhiệt độ phòng trong 3 phút . Sau đó, 0.3 mL dung dịch natri cacbonat được thêm vào và tiếp tục ủ dung dịch này trong bóng tối ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. Độ hấp thụ được đánh giá ở bước sóng 765nm bằng máy quang phổ UV-có thể nhìn thấy. Nồng độ của tổng hàm lượng phenolic đã được tính toán và so sánh với một đường cong chuẩn cho axit galic (GA) ở mức 0–20 ug/mL. Tổng hàm lượng phenolic được báo cáo là miligam đương lượng GA trên gam C. fistula. chiết xuất hoa (mg GAE/g chiết xuất).

Định lượng các hợp chất phenolic trong chiết xuất hoa C. fistula bằng phân tích HPLC

Nhiều loại hợp chất phenolic trong chiết xuất hoa C. fistula đã được phân tích bằng phân tích HPLC và sau đó được so sánh với axit gallic tiêu chuẩn, catechin, axit protocatechuic, axit vanillic, axit chlorogenic, axit ferulic và axit coumaric. Dịch chiết hoa được hòa tan trong etanol 50 phần trăm và được đánh giá thêm bằng HPLC (Agilent Technologies, CA, USA) bằng cách sử dụng cột C18 pha đảo ngược (WATER, MA, USA). Pha động bao gồm metanol (A) và 0.1 phần trăm axit trifluoroacetic (TFA) trong nước (B) với điều kiện gradient. Tốc độ dòng chảy được đặt ở mức 1,0 mL/phút và bước sóng phát hiện được ghi lại ở 280 bằng máy dò UV. Mức nồng độ của các hợp chất phenolic đã được tính toán và so sánh với đường chuẩn có xét đến nồng độ chuẩn và diện tích pic (mg/g dịch chiết).

Định lượng tổng hàm lượng flavonoid trong chiết xuất hoa C. fistula bằng xét nghiệm so màu

Tổng hàm lượng flavonoid được xác định bằng xét nghiệm đo màu nhôm clorua (AlCl3) biến tính như đã được mô tả trước đây [22]. Tóm lại, 0.25 mL chiết xuất hoa được trộn với 0.125 mL natri nitrit 5 phần trăm (NaNO2) và dung dịch này được ủ trong 5 phút ở nhiệt độ phòng. Sau đó, 0.125 mL AlCl3 10 phần trăm được trộn vào hỗn hợp và giữ trong bóng tối trong 5 phút. Sau đó, 1 mL natri hydroxit (NaOH) được thêm vào và dung dịch được ủ trong 15 phút ở nhiệt độ phòng trong bóng tối. Độ hấp thụ được đo ở bước sóng 510nm bằng máy quang phổ UV-có thể nhìn thấy. Tổng hàm lượng flavonoid đã được tính toán và so sánh với các giá trị catechin tiêu chuẩn và được biểu thị bằng mg catechin tương đương trên mỗi gam dịch chiết (mg CE/g dịch chiết).

Nuôi cấy tế bào

Các nguyên bào sợi sơ cấp ở da người được phân lập một cách vô trùng từ vết sẹo ở bụng sau một quy trình phẫu thuật liên quan đến sinh mổ tại khoa phẫu thuật của Bệnh viện CM Maharaj, Đại học Chiang Mai (Chiang Mai, Thái Lan) (Mã nghiên cứu: BIO-2558-03549 đã được Bộ Y tế phê duyệt Ủy ban Đạo đức Nghiên cứu, Đại học Chiang Mai). Chất béo đã được loại bỏ khỏi nguyên liệu ban đầu và nó được ngâm trong DMEM có chứa chất kháng penicillin và streptomycin. Sau đó, da được ngâm trong DMEM chứa 1% protease (Dispase, Gibco, Grand Island, NY, USA) trong 48 giờ ở 4 độ. Các lớp biểu bì đã được loại bỏ và các nguyên bào sợi bình thường được phân lập từ lớp hạ bì. Các nguyên bào sợi được nuôi cấy trong DMEM bổ sung 10% FBS, 2 mM L-glutamine, penicillin 50 U/mL và streptomycin 50 ug/mL. Các tế bào được duy trì trong tủ ấm có độ ẩm 5% CO2 ở 37 độ.

Xét nghiệm khả năng sống của tế bào

Xét nghiệm khả năng sống của tế bào chiết xuất hoa C. fistula đối với các tế bào nguyên bào sợi da được đo bằng cách sử dụng xét nghiệm sulforhodamine B (SRB) như đã được mô tả trước đây [23]. Tóm lại, các tế bào (8x103 tế bào/giếng) được cấy vào đĩa giếng 96-và được ủ ở 37 độ , 5% CO2 trong 24 giờ. Sau đó, các tế bào được xử lý có hoặc không có các nồng độ khác nhau (0–200 ug/mL) chiết xuất hoa C. fistula trong 48 giờ. Sau 48 giờ, 10 phần trăm (w/v) axit Trichloroacetic (TCA) đã được thêm vào các tế bào, và các tế bào này sau đó được ủ ở 4 độ trong 1 giờ. Môi trường đã được loại bỏ và các tế bào được rửa sạch bằng nước máy chảy chậm. Dung dịch SRB 0,057 phần trăm (w/v) (100 μL) được thêm vào từng giếng và các tế bào được ủ trong 30 phút ở nhiệt độ phòng. Dung dịch SRB được loại bỏ và sau đó tế bào được rửa 4 lần bằng axit axetic 1 phần trăm (v/v) và chúng được để khô ở nhiệt độ phòng. Thuốc nhuộm được hòa tan với dung dịch bazơ Tris 10 mM (pH 10,5) và độ hấp thụ được đo ở bước sóng 510nm bằng đầu đọc vi bản.

xét nghiệm tổng hợp collagen

Tổng số collagen nội bào trong các tế bào nguyên bào sợi được xác định bằng cách sử dụng Bộ nhuộm màu Sirius Red / Fast Green Collagen (Chondrex, Inc, Redmond, WA, USA) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Tóm lại, các tế bào nguyên bào sợi da được cấy vào 24 đĩa giếng trong 24 giờ ở 37 độ, 5% CO2. Sau đó, các tế bào được xử lý trước bằng môi trường DMEM không có huyết thanh trong 24 giờ. Môi trường được loại bỏ và các tế bào sau đó được ủ có hoặc không có chiết xuất hoa C. fistula (0-150 ug/mL) trong 48 giờ. Sau 48 giờ, môi trường nuôi cấy được loại bỏ. Sau đó, các tế bào được rửa bằng PBS và cố định bằng chất cố định Kahle trong 10 phút. Chất cố định đã được loại bỏ và các tế bào được rửa bằng PBS. Dung dịch thuốc nhuộm Sirius Red/Fast Green được thêm vào từng giếng và các mẫu được ủ trong 30 phút ở nhiệt độ phòng. Thuốc nhuộm được loại bỏ và các tế bào được rửa bốn lần bằng nước DI hoặc cho đến khi chất lỏng không màu. Cuối cùng, dung dịch đệm chiết được thêm vào và độ hấp thụ được đo ở bước sóng 540 nm và 605 nm bằng máy quang phổ tử ngoại khả kiến.

Xét nghiệm hoạt động collagenase

Hoạt tính collagenase được đo bằng cách sử dụng xét nghiệm fluorogen DQ™-gelatin đã được sửa đổi như đã được mô tả trước đây [24]. Tóm lại, các nồng độ khác nhau của chiết xuất hoa C. fistula (0–200 ug/mL) đã được bổ sung vào 96 đĩa giếng. Một U/ml collagenase được thêm vào mỗi giếng (100 μL/giếng). Sau đó, 15 ug/mL gelatin (DQ gelatin) được thêm vào và ủ hỗn hợp trong 10 phút. Tốc độ phân giải protein được xác định bằng cách đo độ hấp thụ trong khoảng thời gian 2 phút trong 20 phút bằng đầu đọc vi bản ở bước sóng kích thích 485 nm và bước sóng phát xạ 528 nm. Hoạt tính của enzyme được ước tính bằng cách kiểm tra độ dốc của hồi quy tuyến tính giữa thời gian và độ hấp thụ trong khoảng thời gian tối thiểu 2-6.

Xét nghiệm hoạt động MMP-2

Hoạt động của MMP{{0}} được xác định bằng phương pháp ghi hình học gelatin như đã được mô tả trước đây [25]. Các tế bào nguyên bào sợi được nuôi cấy trong môi trường không có huyết thanh DMEM trong 24 giờ. Sau đó, phần nổi phía trên nền văn hóa được thu thập. Dịch nuôi cấy nổi phía trên được cho vào gel polyacrylamit 10% chứa 0.1% w/v gelatin trong các điều kiện không khử. Gel được rửa hai lần với Triton X-100 2,5% trong 30 phút ở nhiệt độ phòng để loại bỏ SDS. Tấm gel được cắt thành các lát tương ứng với các làn và sau đó các lát này được đưa vào các bể khác nhau và ủ với dung dịch đệm kích hoạt (50 mM Tris-HCl, 200 mM NaCl, 10 mM CaCl2, pH 7,4) chứa các nồng độ khác nhau của C .chiết xuất hoa lỗ rò (0–200 ug/mL) ở 37 độ trong 18 giờ. Sau đó, một dải gel được rửa và nhuộm bằng Coomassie Brillant Blue R (0,1 phần trăm w/v) và sau đó được khử trong 30 phần trăm metanol và 10 phần trăm axit axetic. Hoạt động MMP-2 xuất hiện dưới dạng một dải rõ ràng trên nền xanh lam. Các dải tiêu hóa được định lượng bằng chương trình Image J.

Xét nghiệm tổng hợp Hyaluronic Acid (HA) bằng ELISA

Tác dụng của chiết xuất hoa C. fistula đối với quá trình tổng hợp HA được xác định bằng cách sử dụng bộ ELISA như đã mô tả trước đây [26]. Các tế bào nguyên bào sợi (5.0 × 104 tế bào/giếng) được cấy vào 24-các đĩa giếng trong 24 giờ ở nhiệt độ 37 độ , 5% CO2. Các tế bào được xử lý trước trong môi trường không có huyết thanh trong 6 giờ và sau đó được xử lý có hoặc không có nồng độ chiết xuất hoa C. fistula khác nhau (0–200 ug/mL) trong 48 giờ. Môi trường nuôi cấy được thu thập và tổng hợp HA được đo bằng ELISA. Độ hấp thụ được đo ở 450 và 570nm bằng đầu đọc vi bản. Nồng độ HA trong dịch nổi nuôi cấy thu được từ các tế bào nguyên bào sợi được xử lý đã được tính toán và so sánh với đường cong chuẩn của HA.

Xét nghiệm ức chế tyrosinase

Xét nghiệm ức chế tyrosinase được xác định như mô tả trước đây [27]. Các nồng độ khác nhau của chiết xuất hoa C. fistula đã được thêm vào đĩa giếng 96-. Phản ứng được thực hiện trong dung dịch đệm natri (pH 6,4) chứa 100 U/mL nấm tyrosinase. Chất nền L-DOPA (1 mM) đã được thêm vào hỗn hợp phản ứng và sau đó nó được ủ trong 10 phút ở nhiệt độ phòng. Sự thay đổi độ hấp thụ ở 490nm được đo cứ sau 1,5 phút trong 15 phút bằng đầu đọc vi bản. Phần trăm ức chế tyrosinase được tính theo công thức sau:

Thử nghiệm hoạt động chống oxy hóa

Hoạt tính chống oxy hóa của chiết xuất hoa C. fistula được xác định bằng cách sử dụng 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)- hoạt tính gốc tự do, như đã mô tả trước đây [28]. Các nồng độ khác nhau của dịch chiết hoa (0–100 ug/mL) được điều chế trong metanol. 1 mL 0,002 phần trăm DPPH đã được thêm vào 1 mL dung dịch chiết xuất hoa và hỗn hợp này được giữ trong bóng tối trong 30 phút. Độ hấp thụ được đo ở bước sóng 517nm bằng máy đo quang phổ. Phần trăm ức chế được tính toán và so sánh với vitamin E tiêu chuẩn (1–100 ug/mL) bằng công thức sau:

Hoạt tính chống oxy hóa của chiết xuất hoa C. fistula đã được xác nhận bằng xét nghiệm ABTS, như đã được mô tả trước đây [29]. Cation gốc ABTS [2, 2′-azino-bis (ethylbenzthiazoline-6-axit sulfonic)] được điều chế bằng cách trộn dung dịch gốc ABTS 7 mM với kali persunfat (K2S2O8) 2,45 mM (1/1, v/v). Hỗn hợp được ủ trong bóng tối trong 12–16 giờ cho đến khi phản ứng kết thúc. Thử nghiệm được tiến hành trên 990 μL dung dịch ABTS và 10 μL dịch chiết hoa (0–4 ug/mL). Sau 6 phút, độ hấp thụ được ghi lại ngay lập tức ở bước sóng 734nm bằng máy đo quang phổ. Phần trăm ức chế hoạt động ABTS của chiết xuất hoa được tính theo phương trình sau:

Phân tích thống kê

Tất cả dữ liệu được trình bày dưới dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (SD). Phân tích thống kê được phân tích bằng phần mềm Prism phiên bản 6.0 sử dụng ANOVA một chiều với thử nghiệm của Dunnett. Ý nghĩa thống kê được xác định tại * p < 0.05, ** p < 0.01, ***p < 0,001 hoặc **** p < 0,0001.

Kết quả

Đặc tính hóa học của chiết xuất hoa C. fistula

Sau bước làm đông khô mẫu vật, chiết xuất hoa C. fistula được cân và tiếp tục được nghiên cứu về hóa học và sinh học. 18.08 g chiết xuất hoa C. fistula thu được từ 500 g nguyên liệu thô và hiệu suất phần trăm của dịch chiết hoa là 3,62. Dấu vân tay HPLC của chiết xuất hoa C. fistula được xác định bằng phân tích HPLC (Hình 1). Hồ sơ HPLC cho thấy đỉnh của các hợp chất phenolic được dán nhãn theo các thành phần riêng lẻ tại mỗi thời gian lưu. Đặc tính của các hợp chất phenolic của dịch chiết hoa C. fistula được trình bày trong Bảng 1. Tổng hàm lượng phenolic trong dịch chiết hoa là 275,32 ± 14,21 mg GAE/g dịch chiết. Các dẫn xuất của axit hydroxybenzoic, bao gồm axit vanillic và axit protocatechuic, được tìm thấy là {{20}}.95 ± 0.09 và 2,56 ± 0. tương ứng là 42 mg/g chiết xuất, trong khi axit gallic được ghi ở {{30}}.60 ± 0.02 mg/g chiết xuất. Các dẫn xuất của axit hydroxycinnamic, bao gồm axit coumaric, axit ferulic và axit chlorogenic, được phát hiện ở mức chiết xuất lần lượt là 0,39 ± 0,08, 0,80 ± 0,09 và 0,83 ± 0,03 mg/g. Hàm lượng flavonoid là 27,62 ± 3,56 mg CE/g dịch chiết. Catechin, như một dẫn xuất flavonol, được đo ở mức 1,10 ± 0,00 mg/g chiết xuất.

【Để biết thêm thông tin:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】