Tác dụng chống lão hóa của Chitosan Oligosacarit đối với quá trình lão hóa bán cấp do D-Galactose gây ra ở chuộtⅡ
Apr 26, 2023
3. Thảo luận
Người ta đã chấp nhận rộng rãi rằng mô hình chuột lão hóa bán cấp do D-gal gây ra được sử dụng trong nghiên cứu hiện tại của chúng tôi là mô hình lão hóa thường được áp dụng dựa trên lý thuyết chuyển hóa của lão hóa, các triệu chứng tương tự như quá trình lão hóa tự nhiên. D-gal là một chất dinh dưỡng bình thường tồn tại tự nhiên trong cơ thể (21). Khi một liều D-gal nhất định được tiêm vào chuột trong một khoảng thời gian, nồng độ của nó trong tế bào sẽ quá cao để được xúc tác bởi galactose oxidase thành aldose và hydro peroxide cuối cùng tạo ra các anion superoxide (22). Cácoxy hóa trong cơ thểtạo ra một số lượng lớn các gốc tự do, vượt quá khả năng thu hồi của cơ thể và dẫn đếnperoxid hóa lipid; trong khi đó, các sản phẩm phân hủy cuối cùng (như MDA) có thể trực tiếp hoặc gián tiếp kết hợp với protein, axit nucleic, phospholipid và các chất khác, không chỉ phá hủy cấu trúc hóa học của các chất sống nội bào và phá vỡ chức năng của tế bào mà còn gây tổn hại cho các mô tế bào bình thường. như ảnh hưởng đến áp suất thẩm thấu bình thường, dẫn đến rối loạn chuyển hóa của các cơ quan quan trọng và cuối cùng làlão hóa sinh vật(23,24). Như vậy,Lão hóa bán cấp do D-gal gây ra in con chuột đã được chọn trong nghiên cứu hiện tại của chúng tôi để điều tratác dụng chống lão hóa có thể có của COSVàkhám phá cơ chế cơ bảnTrong nghiên cứu hiện tại, kết quả cho thấy những con chuột trong nhóm mô hình có sự khác biệt đáng kể trong các hành vi hàng ngày của chúng so với những con chuột trong nhóm bình thường. Ngoài ra, lá lách và tuyến ức của những con chuột mô hình bị teo đi đáng kể, trong khi các chỉ số về lá lách và tuyến ức của chúng thấp hơn đáng kể so với những con chuột bình thường. Hơn nữa, sức sống củaenzyme chống oxy hóa, chẳng hạn như GSH-Px, CAT và SOD trong gan và thận của chuột thí nghiệm đã giảm, trong khi điều ngược lại là đúng với mức độ MDA. Những kết quả này phù hợp với các nghiên cứu trước đây (6,7,22-24), chỉ ra rằng ở chuột đã được thiết lập thành công trong nghiên cứu hiện tại của chúng tôi.
Bấm vào đây để có thêm kiến thức về Cistanche choTác dụng chống lão hóa
vớităng tuổi tác, hệ thống miễn dịchcủa cơ thể chịu những thay đổi thoái hóa không chỉ làm giảm phản ứng miễn dịch đối với một kháng nguyên đặc hiệu lạ mà còn làm mất cân bằng chức năng miễn dịch nói chung, cuối cùng dẫn đến sự xuất hiện của nhiều bệnh khác nhau (25). Vì vậy điều hòa miễn dịch cơ thể là một trong những phương pháp chính trong nghiên cứu chống lão hóa. Ngoài ra, tuyến ức và lá lách là hai cơ quan miễn dịch quan trọng của cơ thể, chỉ số cơ quan này ban đầu có thể phản ánh sức mạnh của hệ thống miễn dịch không đặc hiệu, đồng thời cũng là chỉ số sơ bộ để ước tính chức năng miễn dịch không đặc hiệu của cơ thể. cơ thể (26,27. Kết quả hiện tại cho thấy so với nhóm bình thường, các cơ quan miễn dịch, chẳng hạn như tuyến ức và lá lách của những con chuột trong nhóm mô hình được tiêm D-gal trong 8 tuần, rõ ràng đã bị thu nhỏ lại, và tuyến ức và các chỉ số lá lách đã giảm rõ rệt.Khi so sánh với nhóm mô hình, mặc dù, để điều trị, không có tác động thúc đẩy rõ ràng đối với việc giảm các chỉ số tuyến ức và lá lách do D-gal gây ra, chỉ số của hai cơ quan này trong COS thấp-trung bình- nhóm liều cao tăng dần (đặc biệt là đối với chỉ số lá lách), cho thấy COS có thể cải thiện các chỉ số chất lượng lá lách và tuyến ức của chuột già, ức chế sự thoái hóa của các cơ quan miễn dịch và cuối cùng là tăng cường khả năng miễn dịch không đặc hiệu ở một mức độ nào đó. Mặt khác, là một trong những yếu tố miễn dịch không đặc hiệu của cơ thể, hệ thống kháng thể đóng vai trò quan trọng trong đáp ứng miễn dịch và thích ứng miễn dịch của cơ thể, trong khi globulin miễn dịch (lg) là một chỉ số thường được sử dụng để đánh giá tình trạng miễn dịch dịch thể ({{12 }}].Lg huyết thanh bao gồm lgG, IgM, IgA, IgD và IgE, trong đó lgG và IgM là thành phần chính của kháng thể huyết thanh, vì hàm lượng của chúng có thể phản ánh khả năng đáp ứng miễn dịch và miễn dịch dịch thể của cơ thể (31). Kết quả trong nghiên cứu này cho thấy nồng độ lgG trong huyết thanh ở chuột nhóm mô hình thấp hơn đáng kể so với nồng độ ở chuột nhóm bình thường. nồng độ lgG và lgM do D-gal tạo ra trong huyết thanh chuột, trong khi nồng độ IgG' và lgM trong huyết thanh của chuột già được điều trị bằng COS tăng đáng kể, cho thấy COS có thể cải thiện khả năng đáp ứng miễn dịch và tăng cường chức năng miễn dịch thể dịch của cơ thể . Tóm lại, COS có vai trò điều tiết tốt đối với chức năng miễn dịch của chuột lão hóa do D-gal gây ra, được cho là có tác dụng trì hoãn quá trình lão hóa.
Ngoài ra, nội sinhhệ thống enzyme chống oxy hóa, chủ yếu bao gồmCỎ NHÂN TẠO(một loại enzimdành chonhặt rác các gốc anion superoxideVàgiảm sản xuất peroxid hóa lipid), CON MÈO(enzim chuyên khử H2O2 để bảo vệperoxy hóa lipid và lipoprotein của thành tế bào), và GSH-Px (enzym tập trung xúc tác GSH thành GSSG và kích thích quá trình peroxide hóa độckhử thành các hợp chất hydroxyl không độc hại), là một hệ thống phòng thủ quan trọng chống lại gốc tự dotổn thương trong cơ thể, chức năng chính là duy trì cân bằng nội môi của ROS trong nội bộmôi trường và để loại bỏ nồng độ ROS quá cao [4,5,32,33]. Nhiều vật chứng trưng bàyrằng việc sản xuất quá nhiều ROS trong các hệ thống sinh học có thể gây ra tổn thương oxy hóa cho các mô,làm suy giảm chức năng của màng, ảnh hưởng đến quá trình trao đổi chất của tế bào và thụ động hóa protein và enzyme, đặc biệt làở các cơ quan có quá trình trao đổi chất nhanh như gan, thận [34–36]. Phù hợp với nhữngnghiên cứu, chúng tôi thấy rằng lặp đi lặp lạiD-gal-tiêm gây ra sự suy giảm đáng kể trong các hoạt động củacác enzym chống oxy hóa quan trọng này (SOD, CAT và GSH-Px) và quá trình peroxy hóa lipid trầm trọng hơn rõ rệt,biểu hiện là sự tích tụ MDA, cho thấy tổn thương oxy hóa xảy ra ở gan chuộtvà thận. Hơn nữa, nồng độ ALT, AST và ALP trong huyết thanh được sử dụng rộng rãi để đánh giá chức năng gan.chức năng, trong đó ALP đóng vai trò rất quan trọng trong quá trình khử phospho của các enzyme protein,trong khi ALT và AST là những chỉ số sớm nhất và nhạy cảm nhất của tổn thương gan. Trong khi đó, UA vàCREA là chỉ số chính của chức năng thận, sẽ được lọc ra ngoài qua dịch cầu thậnvào máu với số lượng lớn khi tổn thương thận xảy ra trong quá trình lão hóa [37,38]. Cùng với tổn thương mô oxy hóa ở gan và thận của chuột, nồng độ ALT, AST và huyết thanhALP, cũng như CREA và UA ở chuột nhóm mô hình, cao hơn đáng kể so với chuột bình thườngnhóm chuột. Tuy nhiên, COS, từ chitosan vỏ tôm bằng phương pháp thủy phân enzyme, không chỉ thể hiệnđặc tính chống oxy hóa thuận lợi bằng cách tăng cường hoạt động của các chất chống oxy hóa này và giảmmức độ MDA, cho thấy hiệu ứng đối nghịch trênD-gal gây ra thiệt hại oxy hóa cho gan chuột vàthận, nhưng cũng làm giảm nhẹ sự gia tăng đặc biệt này của nồng độ ALT, AST, ALP, CREA và UA trong huyết thanhở một mức độ thấp hơn so với nhóm mô hình, cho thấy một vai trò quan trọng trong việc duy trì bình thườngchức năng của gan và thận. Trong khi đó, VE cũng thể hiện, ở một mức độ nhất định, một chất chống oxy hóatác dụng chủ yếu bằng cách tăng cường hoạt động của SOD trong gan và thận của chuột, cũng như giảmmức MDA, để thực hiện một mức độ tác dụng bảo vệ đối với chức năng gan và thận của chuột.Ngoài ra, kiểm tra mô học cho thấy mức độ thâm nhiễm tế bào viêm vàhoại tử tế bào gan, cũng như teo cầu thận được tăng cường trong mô hìnhnhóm, trong khi việc áp dụng COS và VE đã cải thiện những tổn thương cấu trúc gan và thận nàygây ra bởi quản lý mãn tính vớiD-gal ở một mức độ nhất định, và tình trạng mô học trongNhóm COS-H gần giống với nhóm bình thường. Những kết quả đánh giá mô họctương ứng tốt với phân tích sinh hóa.
Tóm lại, VE, monome thường được sử dụng làm đối chứng dương cho các nghiên cứulão hóa bán cấp ở chuột gây ra bởiD-gal, là một loại vitamin tan trong chất béo nổi tiếng với tác dụng tuyệt vờihoạt động chống oxy hóa [37,39,40]. Cho rằng VE cho thấy không có tác dụng thúc đẩy nổi bật nào đối với việc giảm sản xuất D-gal nàyvề các chỉ số chức năng miễn dịch của chuột, thật hợp lý khi suy luận rằngtác dụng bảo vệ nhất định của VE đối với gan và thận củaD-gal-gây ra lão hóa chuột có thể là chủ yếudo chất lượng chống oxy hóa của nó. Một cách tương đối, COS, có nguồn gốc từ vỏ tôm, vỏ cua trongđại dương, sở hữu một loạt các hiệu ứng sinh học, chẳng hạn như hiệu ứng ngày càng tăng đối với sự giảm D-gal gây ra nàycủa các chỉ số chức năng miễn dịch của chuột, vàD-gal-gây ra giảm trong các hoạt động của chínhenzyme chống oxy hóa ở gan và thận chuột [12,15–17]. Để kết luận toàn diện kết quả của chúng tôi,có thể coi COS có tác dụng bảo vệ gan và bảo vệ thận trênD-gal gây rachuột lão hóa bán cấp để nhận ra hoạt động chống lão hóa của nó, có thể liên quan đến chất chống oxy hóakhả năng của COS, cũng như vai trò điều tiết tốt của nó đối với chức năng miễn dịch của chuột ở mức độ lớn hơn.
4.1. Vật liệu và Hóa chất
nghiên cứu thuộc loại phân tích.
4.2. Động vật
chu kỳ chiếu sáng trong thời gian thử nghiệm tám tuần. Họ có thể truy cập vào viên tiêu chuẩnăn kiêng và uống nước tự do trong suốt thời gian nghiên cứu.
4.3. Chuẩn bị mô hình chuột lão hóa bán cấp và điều trị COS
Sau khi thích nghi trong một tuần, những con chuột được chia ngẫu nhiên thành sáu nhóm, mỗi nhóm tám contheo bảng3. Để thiết lập một con chuột mô hình lão hóa tự nhiên,D-gal (250 mg/kg/ngày) làtiêm dưới da vào sau gáy chuột mỗi ngày một lần trong 56 ngày liên tục. Trong khinhững con chuột trong nhóm bình thường nhận được lượng nước muối sinh lý bằng nhau mỗi ngày một lần thay vìD-gal.Sau khi tiêm dưới daD-gal ở chuột trong một giờ, chuột ở nhóm bình thường và mô hình làxử lý bằng nước cất bằng gavage (20 mL/kg/ngày); trong khi đó, những con chuột trong nhóm VE được điều trịvới VE bằng ống thông (50 mg/kg/ngày) như một biện pháp kiểm soát tích cực theo các báo cáo gần đây [37,39,40]. Chuộttrong các nhóm COS-L, COS-M và COS-H được xử lý bằng các dung dịch mẫu (ba liều khác nhauCOS) mỗi ngày bằng ống, tương ứng, được dùng hàng ngày theo lịch trình điều trịhiển thị trong Bảng3.
4.4. Quan sát chuột hàng ngày
Trong thời gian thí nghiệm, thể trọng của chuột được đo bằng cân điện tửmỗi tuần một lần. Ngoài ra, sự thèm ăn, ngoại hình, tình trạng tinh thần và hoạt động hành vi của chuộttrong mỗi nhóm được quan sát và ghi lại mỗi tuần, tương ứng.
4.5. Chuẩn bị chuột và lấy mẫu
được tính là chỉ số nội tạng. Sau đó, gan và thận được bảo quản ngay tại−80 ◦C chophân tích sinh hóa liên tục. Không có dấu hiệu ngộ độc thông thường hoặc rõ ràng trong suốt quá trìnhquá trình thí nghiệm và tất cả những con chuột tham gia đều sống sót.
4.6. Xác định các chỉ số huyết thanh
Huyết thanh được tách ra khỏi máu toàn phần bằng cách ly tâm ở 4000 vòng / phút trong 15 phút ở 4◦C và sau đó được lưu trữ tại−80 ◦C để phân tích sinh học. Máy phân tích sinh hóa tự động (MindaryBS-480, Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd., Shenzhen, China) được sử dụng để đo lườngnồng độ ALT, AST, ALP, CREA, UA, IgG và IgM trong huyết thanh của chuột theo xét nghiệmhướng dẫn bộ.
4.7. Đo lường hoạt động chống oxy hóa ở gan và thận chuột
Để phân tích sinh hóa, các mô cơ quan của từng con chuột bao gồm gan và thận đã được nhanh chóngloại bỏ để chuẩn bị 10 phần trăm (w/v) đồng nhất trong dung dịch NaCl 0.9 phần trăm lạnh như băng, sau đó ly tâmở tốc độ 3000 vòng / phút trong 15 phút ở 4◦C, sau đó phần nổi phía trên được giữ đông lạnh ở−70 ◦C cho đến khi sinh hóaPhân tích. Nồng độ protein được đo bằng phương pháp axit bicinchoninic (BCA) sử dụng bòalbumin huyết thanh làm chất chuẩn. Các hoạt động của SOD, CAT và GSH-Px, cũng như mức độ của MDAtrong gan và thận, được xác định bằng bộ xét nghiệm.
4.8. Kiểm tra mô học của gan và thận
Sau khi hiến tế, các mẫu mô tạng, trong đó có gan, thận nhanh chóng bị tước bỏ, cố định trong4 phần trăm paraformaldehyde trong 24 giờ, khử nước trong các loại rượu tăng dần, sau đó nhúng vào parafin,và cuối cùng được cắt ở độ dày 5µm. Những mẫu này được nhuộm bởi HE để kiểm tra định kỳcủa các mô này.
4.9. Phân tích thống kê
Tất cả dữ liệu định lượng được trình bày dưới dạng phương tiện± SD. Các giá trị thực nghiệm được phân tích bởiANOVA một chiều. một giá trị củap < 0.05 was considered to be statistically signifificant. All analyses were được thực hiện bằng Phần mềm Phân tích Thống kê (SPSS 17.0).
Xung đột lợi ích:Các tác giả tuyên bố không có xung đột lợi ích.
Người giới thiệu
1. Sergiev, PV; Dontsova, viêm khớp; Berezkin, GV Các lý thuyết về lão hóa: Một lĩnh vực không ngừng phát triển.Acta Nat.2015, 7, 9–18.
2. Ristow, M.; Schmeisser, S. Kéo dài tuổi thọ bằng cách tăng stress oxy hóa.Radic tự do. sinh học. y tế.2011, 51, 327–336. [Tham chiếu chéo] [PubMed]
3. Kuilman, T.; Michaloglou, C.; Mooi, WJ; Peeper, DS Bản chất của tuổi già.Nhà phát triển gen2010, 24, 2463–2479. [Tham chiếu chéo] [PubMed]
4. Harman, D. Lão hóa: Một lý thuyết dựa trên gốc tự do và hóa học bức xạ.J. Gerontol.1956, 11, 298–300. [Tham chiếu chéo] [PubMed]
5. Schieber, M.; Chandel, NS ROS có chức năng truyền tín hiệu oxy hóa khử và ứng suất oxy hóa.Curr. sinh học.2014, 24, R453–R462. [Tham chiếu chéo] [PubMed]
6. Lý, SS; Lưu, M.; Trương, C.; Thiên, CY; Vương, XX; Bài hát, XL; Cảnh, HJ; Gao, Z.; Ren, ZZ;Liu, WR; et al. thanh lọc,trong ống nghiệmchống oxy hóa vàtrong cơ thể sốnghoạt động chống lão hóa của polysaccharid hòa tanbằng phương pháp chiết xuất có sự hỗ trợ của enzyme từAgaricus bisporus. quốc tế J. Sinh học. Macromol.2018, 109, 457–466. [Tham chiếu chéo] [PubMed]
7. Triệu, HJ; Lý, J.; Trương, JJ; Vương, XX; Hảo, L.; Jia, L. Thanh lọc,trong ống nghiệmchống oxy hóa vàtrong cơ thể sốngcác hoạt động chống lão hóa của exopolysacarit bằng cáchAgrocybe cylindracea. quốc tế J. Sinh học. Macromol.2017, 102, 351–357. [Tham chiếu chéo] [PubMed]
8. Deursen, JM Vai trò của các tế bào lão hóa trong quá trình lão hóa.Thiên nhiên2014, 509, 439–446. [Tham chiếu chéo] [PubMed]
9. Ginter, E.; Simko, V.; Panakova, V. Chất chống oxy hóa trong sức khỏe và bệnh tật.Bratisl. Lek. liệt kê2014, 115, 603–606. [Tham chiếu chéo] [PubMed]
10. Jasiulionis, MG Điều hòa biểu sinh bất thường của hệ thống miễn dịch trong quá trình lão hóa.Đằng trước. miễn dịch.2018, 9, 197. [Tham chiếu chéo] [PubMed]
11. Kim, SK; Rajapakse, N. Sản xuất enzyme và hoạt động sinh học của chitosan oligosacarit (COS):Đánh giá.Cacbohydrat polyme.2005, 62, 357–368. [Tham chiếu chéo]
12. Trâu, P.; Dương, X.; Vương, J.; Lý, YF; Yu, HL; Trương, YX; Liu, GY Những tiến bộ trong đặc tính và sinh họchoạt động của chitosan và chitosan oligosacarit.Hóa chất thực phẩm2016, 190, 1174–1181. [Tham chiếu chéo] [PubMed]
Hỏi thêm:
Email:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: cộng với 86 15292862950
