Chiến lược chống kích ứng chống lại Retinol dựa trên phân tích di truyền của dân số Hàn Quốc: Phương pháp tiếp cận từ trên xuống được hướng dẫn về mặt di truyền Ⅱ

3.3. Hiệu quả chống kích ứng của công thức; Thử nghiệm trên người

Dựa trênchất chống kích ứngxác minh từ thí nghiệm trong ống nghiệm được hướng dẫn bởi phân tích di truyền, chúng tôi đã chuẩn bị AF (Công thức chống kích ứng) chống kích ứng do retinol gây ra, bao gồm glucosamine 0.1% , trehalose 2% , ectoine 2% , sucralfat 0.1% , omega-9 1% và {{8 }}t-butyl cyclohexanol 0.7 phần trăm với retinol. (được chuẩn hóa thành nồng độ hoạt động) Đầu tiên, chúng tôi thực hiện một nghiên cứu thử nghiệm với bảy cá nhân để xác minh định lượng hiệu quả của AF. Khi tổng điểm kích ứng của từng loại kích ứng đối với từng cá nhân trong thời gian thử nghiệm, kết quả cho thấy so với kem retinol đối chứng, AF giảm kích ứng do retinol gây ra một cách hiệu quả, đặc biệt là bong vảy (giảm 66,67%), bỏng rát (68,42%). ) và châm chích (68,97 phần trăm ), và sự cải thiện các triệu chứng này có ý nghĩa thống kê (Hình4Một). Điều thú vị là các đối tượng thử nghiệm khẳng định họ không bị khô da trong thời gian thử nghiệm, mặc dù họ đã bị bong vảy và khô da đáng kể sau 10 ngày, thậm chí hơn 2 tuần. Quan sát này phù hợp với một nghiên cứu trước đây cho rằng axit retinoic gây khô da sau 9 ngày điều trị và kéo dài đến 18 ngày bằng cách cho thấy tỷ lệ luân chuyển của lớp sừng giảm (15,8 ngày) so với giả dược (18 ngày) [56]

Hình 4. Sơ đồ và đồ thị mô tả hiệu quả gây kích ứng của AF. Bảng điều khiển (quảng cáo) cho biết kết quả của nghiên cứu thí điểm nhỏ (n= 7). Sơ đồ bên trái cho thấy lịch trình và quy trình kiểm tra cũng như kết quả khu vực kiểm tra (chấm đỏ) của khuôn mặt được đánh giá để đo TEWL và đỏ da. (a) Điểm trung bình của các điểm khó chịu mà đối tượng thử nghiệm trải qua trong thời gian thử nghiệm. ( b ) Điểm kích thích tổng thể trên từng thời điểm. Điểm quá khó chịu " là tổng điểm của tất cả các loại khó chịu mà các cá nhân gặp phải. (C) Tổng điểm khó chịu của các cá nhân. Tổng điểm cho từng loại khó chịu mà cá nhân gặp phải trong thời gian thử nghiệm được tính trung bình. Điểm tổng thể " trên mỗi mốc thời gian được tính tổng. (d) Đỏ da và mất nước qua biểu bì (IEWL ) được đo bằng sắc kế và tewametei. Tỷ lệ tăng ( phần trăm ) đối với các cá nhân được tính trung bình, (e) Tỷ lệ xuất hiện kích ứng do retinol gây ra. Những người tham gia thử nghiệm được hỏi một câu hỏi phân đôi, liệu "kem chứa retinol có gây kích ứng hay không" dựa trên năm tiêu chí của đối tượng của họ. Một thử nghiệm chi bình phương đã được thực hiện để điều tra ý nghĩa thống kê. (giá trị p: 2,17906E-10): * giá trị p < 0,05** giá trị p< 0.001, AF,Công thức chống kích ứng chống kích ứng do retinol gây ra; thanh lỗi được hiển thị.

Nhận một chất chống kích ứngNguyên liệu mỹ phẩm Cistanche

Tiếp theo, điểm kích thích tổng thể theo thời gian đã được điều tra (Hình 4b). Đúng như dự đoán, hiện tượng kích ứng được quan sát thấy trong vòng vài phút sau khi thoa kem retinol và giảm sau vài giờ. Chúng tôi thấy rằng AF của chúng tôi giảm kích ứng một cách hiệu quả, đặc biệt là sau lần thoa kem thứ ba. Mặc dù mức độ kích ứng tăng lên ngay cả sau khi ngừng thoa kem retinol, tác dụng chống kích ứng của AF vẫn còn và làm giảm bớt kích ứng sau thủ thuật do retinol gây ra. Nói chung, AF đã giảm tổng điểm khó chịu của các cá nhân trong thời gian thử nghiệm xuống 58,3 phần trăm (Hình 4c).

Vào ngày thứ 7, chúng tôi đo TEWL và độ đỏ (Hình 4d). AF làm giảm cả sự gia tăng TEWL và mẩn đỏ do retinol gây ra. Mức tăng trung bình của vết đỏ (a*) là 8,31% đối với AF và 8,31% đối với kiểm soát. Đỏ da, một đặc điểm lâm sàng của giãn mạch da, là một dấu hiệu của viêm [57]. Các nghiên cứu trước đây đã chỉ ra rằng retinoid gây viêm da qua trung gian giải phóng MCP-1 và IL-8 từ nguyên bào sợi. Đáng chú ý là như đã trình bày trong phần trước, retinol kích hoạt các đại thực bào (biểu hiện quá mức IL-4R), là nguyên nhân chính gây giãn mạch da [9].

Trong phân tích TEWL, kem retinol dựa trên AF đã tăng TEWL lên 19,07 phần trăm cho từng đối tượng thử nghiệm, trong khi kem retinol đối chứng tăng TEWL lên 42,54 phần trăm. Quan sát lâm sàng này tương tự như quan sát của một báo cáo trước đây chỉ ra rằng retinoid tạm thời gây ra sự gia tăng TEWL in vivo ở chuột và người [42,58]. Mặc dù ý nghĩa thống kê thấp, nhưng tác động giảm nhẹ của AF đối với sự gia tăng TEWL và mẩn đỏ có thể được mong đợi.

Chúng tôi cũng đã đo ngưỡng đau áp suất bằng cách sử dụng máy đo độ cao có đầu có bán kính 1 mm (Hình S2, xem Tài liệu bổ sung). Da nhạy cảm của bệnh nhân vảy nến được báo cáo là có ngưỡng đau giảm áp lực so với người bình thường [59]. Sự khác biệt về giá trị ngưỡng của các cá nhân trước và sau khi điều trị bằng kem retinol được tính trung bình. Người ta quan sát thấy rằng retinol làm giảm ngưỡng đau áp lực (PPT) và AF làm tăng PPT giảm đáng kể so với đối chứng. Nó dường như được trung gian bởi tác dụng chống viêm và đối kháng của AF trên TRPV1. Các nghiên cứu trước đây đã chỉ ra rằng tình trạng viêm thần kinh có liên quan nhiều đến sự nhạy cảm cơ học của các cơ quan thụ cảm đau ở da [60] và những con chuột thiếu TRPV1 chức năng biểu hiện chứng tăng cảm giác đau cơ học suy yếu đối với các kích thích cơ học độc hại [61]. Một nghiên cứu lâm sàng ở người cũng chứng minh rằng chất đối kháng TRPV1 (V116517) làm tăng đáng kể PPT của da trong các điều kiện khác nhau [62].

Để xác minh tác dụng chống kích ứng của AF trong nhóm độc lập, chúng tôi đã nhóm tất cả các đối tượng là con người lại với nhau, bao gồm 44 nam và 47 nữ với độ tuổi từ 27 đến 50. Các đối tượng thử nghiệm được hỏi một câu hỏi lưỡng tính, liệu "kem chứa retinol có gây kích ứng hay không", dựa trên tiêu chí chủ quan của họ. Tỷ lệ đáp ứng này được so sánh với tỷ lệ đáp ứng của đánh giá lâm sàng quy mô lớn đầu tiên trên 173 cá nhân đã sử dụng kem retinol bình thường để thu được tác dụng chống kích ứng của AF. Tỷ lệ xảy ra kích ứng do retinol gây ra đã được tính toán và so sánh (Hình 4e).

Tỷ lệ xảy ra là 64,43% được quan sát thấy ở nhóm sử dụng kem retinol bình thường, trong khi tỷ lệ xảy ra chỉ là 21,35% được quan sát thấy ở nhóm đã sử dụng kem AF-retinol, cho thấy tỷ lệ này giảm 65,80%.

3.4. Mô hình dự đoán rủi ro đa gen đối với kích ứng do retinol gây ra

Vì các chất chống kích ứng trong AF được sàng lọc từ các gen liên quan, chúng tôi đã xây dựng một mô hình dự đoán rủi ro đa gen để đánh giá tác động di truyền tích lũy của kích ứng do retinol gây ra ở nhiều vị trí. Một mô hình dự đoán rủi ro đa gen đã được xây dựng bằng cách sử dụng 26 SNP quan trọng được chọn sau khi phân tích LD dựa trên |D'| và các giá trị r2 (hệ số biểu thị mức độ mà một alen của một SNP được di truyền hoặc tương quan với alen của một SNP khác) giữa các SNP.

Then, the risk scores of all 159 samples were visualized. The test subjects of the second large-scale clinical test were arbitrarily categorized into three groups: high (>75, 31 cá nhân), trung bình (65–75, 33 cá nhân) và điểm rủi ro thấp (<65, 27 individuals) (Figure S3, see Supplementary Materials). As characteristics of retinol-induced irritation in each group, the high-risk score group exhibited dryness and desquamation after the last third treatment of retinol compared to the other groups (Figure S4, see Supplementary Materials). This result supports our hypothesis that skin barrier disruption with increased TEWL plays an important role in retinoid-induced irritation, as SLS exhibited similar clinical features and anatomical changes [63].

Như được hiển thị trong Hình 5a, nhóm có điểm rủi ro cao bao gồm những người tham gia có kinh nghiệm khó chịu nhất trong số các nhóm khác. "Ngứa" là loại kích ứng chiếm ưu thế nhất đối với nhóm có điểm rủi ro cao so với các nhóm khác. Những người tham gia trong nhóm có điểm rủi ro cao bị ngứa thường xuyên nhất vào ngày đầu tiên điều trị bằng retinol và mức độ ngứa giảm dần theo thời gian. Nhóm có điểm rủi ro cao dường như gặp phải các triệu chứng giống như dị ứng liên quan đến hệ thống trung gian tế bào và tế bào mast (Hình S4, xem Tài liệu bổ sung).

Figure 5. Bar plots illustrating polygenic risk score model and validation. 3300 IU retinol cream with AF to 91 individuals lest subjects were categorized into three groups: high-risk score (>75, 31 cá nhân), điểm rủi ro trung bình (65-75, 33 cá nhân) và điểm rủi ro thấp (<65,27 individuals) (a) irritation score of each type of irritation for three risk score groups. The scores for types of irritation of individuals during the test period were summed and averaged by risk score groups. (b) The total score during the test period. (c) Comparison of the occurrence rate of irritation in each risk-score group. The dichotomous question of whether retinol cream is irritant: Y/N was asked to test subjects. In the first clinical evaluation, retinol without AF was given. Retinol with AF was given in the second clinical evaluation.

Tổng số điểm trong thời gian thử nghiệm được tính lần lượt là 6,370 và 10,161 cho các nhóm điểm có rủi ro thấp, trung bình và cao (Hình 5b). Hiệu quả của AF đã được nghiên cứu theo mô hình điểm rủi ro đa gen.

Kết quả đã chứng minh rằng AF làm giảm kích ứng do retinol gây ra và hiệu quả có thể được dự đoán bằng cách sử dụng mô hình điểm rủi ro đa gen (Hình 5c).

Do đó, những kết quả và quan sát thử nghiệm này không chỉ chứng minh tác dụng chống kích ứng của AF mà còn ngụ ý rằng việc đề xuất một liều lượng thích hợp của retinol bằng cách ước tính mức độ nhạy cảm với kích ứng do retinol gây ra dựa trên thông tin di truyền của từng cá nhân là có thể áp dụng, điều này cuối cùng có thể mang lại hiệu quả về mặt di truyền. giao thức sử dụng tối ưu nhất cho bệnh nhân tuân thủ cao hơn.

3.5. Xem xét thêm; Kích ứng cấp tính và mãn tính?

Như đã đề cập trước đó, các phản ứng giống như dị ứng, bao gồm cảm giác nóng rát và châm chích nhanh, ngứa, phù và phát ban lan tỏa nhanh chóng đã được quan sát thấy ở những người nhạy cảm với retinol. Những phản ứng này xảy ra trong vòng vài phút, đôi khi thậm chí vài giây, không thể giải thích rõ ràng bằng các nghiên cứu cơ chế retinoid trước đây chủ yếu tập trung vào việc sản xuất cytokine bởi tế bào sừng hoặc nguyên bào sợi [9] hoặc hệ thống miễn dịch trong đó tế bào T, Các tế bào B, hoặc kích hoạt bổ sung chủ yếu tham gia. Mặc dù không thể phủ nhận rằng sự phá vỡ hàng rào bảo vệ da là nguyên nhân chính gây kích ứng, nhưng nó không giải thích đầy đủ về tình trạng kích ứng cấp tính nhanh chóng xảy ra.

Trong lần đánh giá lâm sàng đầu tiên, người ta quan sát thấy rằng khoảng 5% đối tượng thử nghiệm đã trải qua các phản ứng dữ dội và nghiêm trọng nêu trên và bị loại khỏi cuộc thử nghiệm. Tuy nhiên, các nghiên cứu chi tiết chưa được thực hiện về khả năng dung nạp retinoids tùy thuộc vào chủng tộc, giới tính hoặc độ tuổi và đã có báo cáo rằng dân số châu Á dễ bị các phản ứng này hơn, điều này thúc đẩy sự cần thiết phải xem xét khả năng kích ứng nhanh chóng đối với sự phát triển hơn nữa của các sản phẩm dựa trên retinoid. Kết quả thử nghiệm trên người của chúng tôi cho thấy rằng tình trạng viêm thần kinh, hoặc một cơ chế tức thời tương tự, cũng liên quan đến kích ứng do retinol gây ra. Cảm giác bỏng rát và châm chích chủ yếu được quan sát thấy ở mỗi lần điều trị bằng retinol trong vòng vài phút ở cả ba nhóm và bị giảm dần theo thời gian.

Ở đây, đây là một số điểm đáng được xem xét.

1. Như đã báo cáo trước đó, retinol có thể được chuyển đổi thành retinaldehyd (võng mạc) và axit retinoic để có khả dụng sinh học liên quan đến liên kết RAR hoặc RXR.

2. Tuy nhiên, cân bằng nội môi của retinoids trong da được kiểm soát rất chặt chẽ [64] và nghịch lý thay, chưa có bằng chứng nào chứng minh bằng thực nghiệm rằng retinol chuyển hóa thành axit retinoic trong ống nghiệm và ngoài cơ thể [65,66].

3. Khi điều trị bằng retinol, nguyên bào sợi hoặc tế bào sừng kích hoạt hệ thống miễn dịch xung quanh da nhanh nhất trong vòng vài phút bằng cách sản xuất IL-1 hoặc IL-6 thông qua sự tương tác giữa RAR và axit retinoic, mà retinol nên được chuyển đổi.

Dựa trên những cân nhắc này, có vẻ hợp lý hơn là kích ứng cấp tính trong vòng vài phút có thể được thúc đẩy bởi hệ thống tế bào histamin-mast hoặc viêm thần kinh gây ra ngay lập tức, sau đó gây ra viêm lan rộng và lan rộng, dẫn đến kích ứng lâu dài.

4.Kết luận