Các chiến lược dựa trên Aptamer để tăng cường liệu pháp miễn dịch trong TNBC Phần 2

Ngoài ra, aptamer chịu được một số biến đổi hóa học giúp cải thiện hiệu quả nhắm mục tiêu, hồ sơ dược động học và tính ổn định trong môi trường sinh học, vốn cần thiết cho các ứng dụng in vivo của chúng [47]. Như đã được xem xét rộng rãi ở nơi khác [27,48], các sửa đổi được sử dụng nhiều nhất áp dụng cho các aptamer, trong SELEX hoặc sau SELEX, để tăng khả năng chống lại các nuclease của chúng bao gồm (Hình 3): sự thay thế các nhóm 2 0 -OH của ribose với các nhóm fluoro, methoxy, thiol hoặc amino; giới hạn hoặc chu kỳ của các đầu oligonucleotide; sự thay thế xương sống phosphodiester bằng xương sống phosphorothioate; và sự ra đời của axit nucleic bị khóa. Hơn nữa, L-aptamer, được gọi là spiegelmer, có thể được tạo ra mà các nuclease không nhận ra được vì chúng là đồng phân đối quang của axit nucleic tự nhiên. Các biến đổi hóa học cũng được áp dụng để khắc phục quá trình lọc nhanh qua thận của các aptamer kích thước nhỏ bằng cách liên hợp chúng với các phân tử quá cồng kềnh, chẳng hạn như polyetylen glycol (PEG) hoặc cholesterol, do đó làm tăng thời gian lưu thông của chúng mà không ảnh hưởng đến khả năng tiếp cận mục tiêu. Các phương pháp tinh vi cũng đã được phát triển để liên hợp hóa học aptamer với liệu pháp thứ cấp trong liệu pháp kết hợp, và thật thú vị, các chiến lược đổi mới đã được khám phá để đưa các nhóm hóa học kỳ lạ vào phân tử aptamer để mở rộng chức năng của chúng và khắc phục tình trạng thiếu đa dạng hóa học trong axit nucleic [49 ].

Nuclease đề cập đến các enzyme có thể đẩy nhanh phản ứng thủy phân RNA hoặc DNA và có nhiều chức năng sinh học. Trong hệ thống miễn dịch, các hạt nhân là công cụ quan trọng để nhận biết và loại bỏ nhiễm virus. Sau khi virus lây nhiễm vào một tế bào, nó sẽ giải phóng RNA hoặc DNA vào tế bào. Các phân tử axit nucleic này sẽ được nhận biết và thủy phân bởi nuclease của tế bào bị nhiễm bệnh, do đó ngăn chặn sự nhân lên của vi rút và sự lây lan của nhiễm trùng.

Ngoài ra, các hạt nhân cũng tham gia vào việc điều chỉnh các phản ứng miễn dịch bẩm sinh và thích ứng. Các hạt nhân có thể điều chỉnh mức độ biểu hiện gen bằng cách điều chỉnh sự thoái hóa và ổn định của RNA hoặc DNA. Trong các tế bào miễn dịch, các hạt nhân điều chỉnh các phản ứng miễn dịch như chết theo chương trình, trình diện kháng nguyên và biệt hóa tế bào T.

Nhìn chung, các hạt nhân đóng một vai trò quan trọng trong phản ứng miễn dịch, nhận biết sự lây nhiễm của virus, điều chỉnh biểu hiện gen và điều chỉnh phản ứng miễn dịch. Do đó, tồn tại nhiều cơ chế tác động lên khả năng miễn dịch. Từ quan điểm này, cần phải chú ý đến việc cải thiện khả năng miễn dịch. Cistanche tăng cường khả năng miễn dịch. Cistanche rất giàu các chất chống oxy hóa khác nhau, chẳng hạn như vitamin C, vitamin C, carotenoid, v.v. Những thành phần này có thể loại bỏ các gốc tự do, giảm stress oxy hóa và cải thiện khả năng miễn dịch. sức đề kháng của hệ thống miễn dịch.

Nhấp vào lợi ích cistanche tubulosa

Một chiến lược khác để cải thiện ái lực liên kết, tính chọn lọc mục tiêu và khả dụng sinh học in vivo của aptamer được thể hiện bằng cách tạo ra các aptamer biến đổi tốc độ chậm (SOMAmers). Đây là các aptamer DNA mang các nucleotide biến đổi về mặt hóa học được chức năng hóa ở vị trí 5-của uridine với các gốc không chỉ có thể tham gia tương tác với protein mục tiêu mà còn hình thành các họa tiết cấu trúc bậc hai và bậc ba mới làm tăng đáng kể danh mục của các mục tiêu có thể tiếp cận đến aptamer [50].

Cho đến nay, một aptamer biến đổi hóa học rộng rãi (có tên là Macugen), nhắm mục tiêu isoform 165 của yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu, đã được phê duyệt để điều trị bệnh thoái hóa điểm vàng do tuổi tác và 11 aptamer đang được thử nghiệm lâm sàng để điều trị các bệnh khác nhau ở người. [51,52]. Trong số đó, aptamer kháng nucleolin AS1411 và aptamer chống yếu tố có nguồn gốc từ tế bào mô đệm 1 NOX-A12 đã hoàn thành các thử nghiệm lâm sàng giai đoạn II để điều trị ung thư. Hơn nữa, aptamer DNA tyrosine kinase-7 Sgc8 kháng protein, được dán nhãn 68 Ga, đang ở giai đoạn đầu I để đánh giá giá trị chẩn đoán của nó ở bệnh nhân đại trực tràng (ClinicalTrials.gov Mã định danh: NCT03385148).

3. Chiến lược miễn dịch dựa trên Aptamer để điều trị TNBC

Các đột biến di truyền và biểu sinh trong các tế bào ung thư dẫn đến sự hiện diện của nhiều kháng nguyên liên quan đến khối u mà IS nhận ra là không phải của bản thân và do đó, tiêu diệt các tế bào bị đột biến. Tuy nhiên, ai cũng biết rằng các tế bào ung thư phát triển một số cơ chế để thoát khỏi sự phá hủy miễn dịch và thay đổi môi trường vi mô xung quanh theo hướng có lợi cho chúng, dẫn đến sự phát triển, xâm lấn và di căn của khối u (53 55].

Mục tiêu của liệu pháp miễn dịch ung thư là tăng cường hoặc khôi phục khả năng phát hiện và tiêu diệt tế bào ung thư của IS bằng cách vượt qua các cơ chế mà khối u trốn tránh và ngăn chặn phản ứng miễn dịch. Các chiến lược nổi bật dựa trên aptamer đã được phát triển trong vài năm qua để khôi phục Is hướng tới tình trạng kháng ung thư ở TNBC. Như được thảo luận dưới đây, ngày càng có nhiều bằng chứng cho thấy khả năng của aptamer trong việc tăng cường hoạt động gây độc tế bào của các tế bào miễn dịch, chặn các điểm kiểm soát miễn dịch hoặc chiêu mộ các tế bào miễn dịch vào các tế bào ung thư (Hình 4).

3.1. Tế bào lympho thâm nhiễm khối u

Các loại tế bào miễn dịch chính trong môi trường vi mô TNBC là TIL và sự hiện diện của chúng có liên quan đáng kể đến kết quả sống sót tốt hơn ở những bệnh nhân có khối u không được điều trị ở giai đoạn đầu [56]. TIL bao gồm tất cả CD3 cộng với tế bào T, có thể thúc đẩy quá trình phá hủy khối u (CD8 cộng với tế bào T gây độc tế bào) và phản ứng chống khối u (CD4 cộng với T-helper 1) hoặc hạn chế phản ứng miễn dịch chống khối u (CD4 cộng với T-helper 2, bao gồm cả Forkhead box P3 ( FOXP3), CD4 cộng với các tế bào T điều hòa).

Gần đây, Zhao et al. đã đề xuất một chiến lược ban đầu khai thác khả năng nhắm mục tiêu của aptamer để xây dựng một "tế bào lympho T siêu độc tế bào" để tăng cường phản ứng chống khối u trong liệu pháp miễn dịch ung thư [59]. Họ đã tạo ra các hạt nano nhắm mục tiêu lysosome và dựa trên kim loại có khả năng phân hủy bằng axit, được nạp perforin và granzyme B, hai độc tố chống ung thư có trong lysosome của CD8 cộng với tế bào T và được chức năng hóa bằng một aptamer nhắm vào thụ thể CD63 trên lysosome. Ca2 plus đã được lắng đọng trên nền tảng nano để cải thiện khả năng tương thích sinh học và tính ổn định của nó cũng như tăng cường hoạt động của độc tố. Các tác giả đã thành công trong việc sử dụng một nền tảng hướng dẫn bằng aptamer như vậy (được đặt tên là LYS-NP) để làm phong phú hàm lượng chất gây độc tế bào của lysosome đối với tế bào CD8 cộng với tế bào T.

Khi được thử nghiệm trên mô hình chuột TNBC 4T1, các tế bào T được kích hoạt lại bằng các kháng nguyên đặc hiệu 4T1-đã xử lý và được các LYS-NP tái tổ hợp và giải phóng hàm lượng lysosomal vào các khớp thần kinh miễn dịch, kích hoạt phản ứng kháng khối u mạnh (Hình 4). Liệu pháp miễn dịch dựa trên aptamer được đề xuất có tiềm năng lớn để vượt qua những thách thức đáng kể trong liệu pháp miễn dịch tế bào T đối với các khối u rắn chủ yếu được biểu hiện bằng các tín hiệu ức chế miễn dịch mạnh, gây ra sự kích hoạt tế bào T thấp và giảm tổng hợp và giải phóng các protein gây độc tế bào [60].

3.2. Tế bào biểu hiện điểm kiểm tra miễn dịch

Nhóm của Alatrash đã báo cáo rằng sự biểu hiện của gen PD-L1 ở bệnh nhân TNBC cao hơn đáng kể so với bệnh nhân không phải TNBC (19). PD-L1, một trong những điểm kiểm tra miễn dịch liên quan đến tế bào khối u chính, được biểu hiện ở nhiều loại tế bào miễn dịch , chẳng hạn như đại thực bào, một số tế bào T đã hoạt hóa, tế bào B và trong nhiều tế bào khối u rắn, bao gồm cả tế bào BC. Thụ thể của nó là protein xuyên màng PD-1, được thể hiện trên bề mặt màng của TIL, tế bào NK, đại thực bào, tế bào đuôi gai và tế bào đơn nhân [61]. Sự gắn kết giữa PD-L1 và PD-1 gây ra sự ức chế CD8 cộng với TIL, biến chúng thành dạng dị ứng và do đó, trốn tránh miễn dịch ung thư.

Hơn nữa, trục PD-1/PD-L1 điều chỉnh bên trong tế bào khối u các con đường truyền tín hiệu sinh tồn và tăng sinh khác nhau như PI3K/AKT, MAPK và JAK/STAT [62], và rất quan trọng là trong TNBC, quá trình kích hoạt của trục này thúc đẩy quá trình chuyển đổi biểu mô-trung mô (EMT), một kiểu hình liên quan đến các khối u di căn và xâm lấn cao [63].

Các phương pháp tiếp cận dựa trên aptamer khác nhau trong TNBC hiện đang được khám phá để hoàn nguyên các hiệu ứng PD-1/PD-L1 (Hình 5).

Hình 5. Sơ đồ biểu diễn các chiến lược dựa trên aptamer để chặn trục PD-1/PD-L1 trong TNBC. ( a ) Các hạt nano được trang trí bằng aptamer TNBC được nạp siRNA chống PD-L1; ( b ) các liposome được trang trí bằng aptamer chống CD44 và antiPD-L1 được nạp cả siRNA doxorubicin và anti-IDO1; (c) aptamer antiPD-L1 kết hợp với paclitaxel; (d) aptamer kháng EGFR được liên kết cộng hóa trị với mAbs kháng PD-L1 hoặc kháng CTLA-4 (xem văn bản để biết chi tiết). Được tạo bằng BioRender.com (truy cập vào ngày 2 tháng 3 năm 2023).

Trong bối cảnh này, nhóm của chúng tôi lần đầu tiên đã điều tra sự kết hợp giữa aptamer kháng PD-L1 với aptamer thụ thể yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc từ tiểu cầu (PDGFR ), có tên là Gint4.T, trong TNBC [64]. Gint4.T là một aptamer RNA 20 -fluoropyrimidines (20F-Py) kháng nuclease liên kết và ức chế PDGFR biểu hiện trên bề mặt của các tế bào ung thư khác nhau ở người, bao gồm các tế bào TNBC [65] và các thành phần TNBC TME, bao gồm tế bào gốc trung mô [66] và tế bào T [64]. Điều thú vị là, khi tiêm tĩnh mạch vào chuột tổng hợp TNBC 4T1, aptamer tăng cường mạnh mẽ tác dụng của antiPD-L1 mAbs trong việc ức chế sự phát triển khối u và hình thành di căn phổi bằng cách tác động lên cả tế bào khối u và các thành phần TME [64].

Hơn nữa, sự phong tỏa kết hợp của PDGFR và PD-L1 gây ra sự cạn kiệt của FOXP3 cộng với các tế bào Treg và sự gia tăng CD8 cộng với các tế bào T và granzyme B ổn định hơn so với các liệu pháp đơn trị liệu. Những kết quả này đặt nền tảng để xây dựng một cơ chế kết hợp miễn dịch đặc hiệu kép bao gồm một kháng thể kháng PD-L1 được liên kết cộng hóa trị với Gint4.T aptamer, do đó tối ưu hóa hiệu quả của liệu pháp kết hợp. Các cấu trúc đặc hiệu kép thu được bằng cách liên kết cộng hóa trị một aptamer 20F-Py RNA thụ thể yếu tố tăng trưởng kháng biểu bì (EGFR) với các chất điều biến miễn dịch kháng PD-L1 (10_12) [67] hoặc kháng CTLA-4 (ipilimumab) [68] mAbs được tạo ra bởi Passariello et al. và được chứng minh là duy trì các chức năng sinh học của cả hai gốc bố mẹ, do đó gây ra hoạt động gây độc tế bào mạnh đối với các tế bào BC.

Một chiến lược thay thế cho mAbs chống PD-L1 để nhắm mục tiêu PD-L1 được thể hiện bằng cách ức chế PD-L1 thông qua làm im lặng gen, có khả năng khắc phục một số trở ngại định kỳ của các phương pháp điều trị dựa trên mAbs, chẳng hạn như thời gian và chi phí của chúng -Sản xuất tốn kém, khả năng sinh miễn dịch kém, tính ổn định thấp. Hơn nữa, chiến lược này cho phép ngăn chặn vai trò tiền sinh khối u nội tại của PD-L1 tế bào chất [69] mà thay vào đó, các kháng thể không thể truy cập được. Khả năng tổng hợp các aptamer nhắm mục tiêu tế bào ung thư với các nhóm chức năng ở cực của chúng, cho phép liên hợp với các vec tơ nano, là một phương pháp nổi bật để cung cấp, cụ thể là cho khối u, các hàng hóa RNA can thiệp nhỏ (siRNA), được nạp vào vec tơ nano , do đó khắc phục được tính dễ bị tổn thương của siRNA đối với các nuclease và khả năng chúng không thể xâm nhập vào các tế bào đích. Gần đây, các hạt nano dựa trên poly(lactic-co-glycolic)-block-PEG (PLGAb-PEG) đã được nạp siRNA kháng PD-L1 và được trang trí bằng aptamer RNA 20F-Py có thể liên kết và nội hóa cụ thể vào các tế bào TNBC [70,71].

Các vectơ nano liên hợp aptamer thu được, sau khi ủ 90 phút trên các tế bào TNBC, đã chuyển siRNA vào các tế bào đích một cách hiệu quả, có khả năng gây ra sự ức chế gần như hoàn toàn biểu hiện PD-L1 [72]. Đáng chú ý, các hạt nano được trang trí bằng aptamer cung cấp khả năng liên kết các phối tử khác nhau với bề mặt của các NP, do đó làm tăng tính đặc hiệu của việc nhắm mục tiêu và gói gọn trong nhiều phương pháp trị liệu của NP, do đó cho phép các liệu pháp kết hợp hiệu quả. Ví dụ: việc sử dụng đồng thời cisplatin [40] và siPD-L1 [72] bởi các hạt nano polyme PLGA, mà chúng tôi đã trang bị các aptamer TNBC, có thể không chỉ giúp giảm tác dụng phụ độc hại mà còn chống lại tác dụng phụ được báo cáo của cisplatin quản lý về việc làm giàu PD-L1 cộng với các tế bào TNBC trốn tránh miễn dịch [73].

Về vấn đề này, Kim et al. đã chuẩn bị một hệ thống nano đa chức năng có hai aptamer DNA được liên hợp trên bề mặt bên ngoài của liposome và hai phương pháp trị liệu khác nhau bên trong các vec tơ nano cho liệu pháp hóa miễn dịch tổng hợp trong TNBC [74]. Cụ thể, họ đã sử dụng, để nhắm mục tiêu các tế bào TNBC, aptamer DNA kháng CD44 [75] và kháng PD-L1 [76] đã được chọn trước đó, mỗi aptamer DNA được biến đổi thiol và liên hợp cộng hóa trị với nhóm maleimide của mixen PEGylated-DSPE bằng thiol–maleimide hoá học. Các liposome có kích thước nano được nạp cả doxorubicin và siRNA can thiệp vào sự biểu hiện của IDO1, một loại protein ủng hộ TME ức chế miễn dịch và được điều chỉnh bằng cách điều trị bằng doxorubicin. Khi tiêm tĩnh mạch vào chuột ghép tế bào khối u TNBC 4T1, vec tơ nano làm giảm mạnh sự phát triển của khối u và ức chế sự hình thành di căn bằng cách kết hợp hiệp đồng cảm ứng gây chết tế bào miễn dịch nhắm mục tiêu tế bào ung thư và đảo ngược ức chế miễn dịch [74].

Gần đây, các aptamer PD-L1 khác nhau đã được tạo ra và thử nghiệm dưới dạng chất đối kháng độc lập, liên hợp đặc hiệu kép và tác nhân phân phối liệu pháp trong mô hình chuột khối u phổi, gan và ruột kết, tương tự như kháng thể kháng PD-L1, can thiệp vào trục PD-1/PD-L1 bằng cách chặn PD-L1 (Bảng 2). Một aptamer, có tên là XQ-P3, đã được tạo ra bằng cách chọn lọc tích cực trên các tế bào -231 MDA-MB biểu hiện quá mức PD-L1 bằng cách sử dụng các tế bào loại bỏ PD-L1 để chọn lọc ngược [77]. Ngay cả khi chưa được thử nghiệm in vivo, nó có vẻ hiệu quả cao trong môi trường đồng nuôi cấy tế bào TNBC MDA-MB-231 và tế bào Jurkat miễn dịch bằng cách ngăn chặn sự tương tác với PD-1 và khôi phục chức năng tế bào T. Hơn nữa, liên hợp aptamer-paclitaxel XP-Q3 cho thấy hiệu quả chống tăng sinh trong các tế bào TNBC biểu hiện quá mức PD-L1 [77].

3.3. đại thực bào

Các đại thực bào liên quan đến khối u (TAM) là một trong những tế bào miễn dịch phong phú nhất trong TME của nhiều loại ung thư và có thể hoạt động để thúc đẩy hoặc ngăn chặn các phản ứng miễn dịch chống khối u [86,87]. Thật vậy, do mức độ dẻo cao, chúng chuyển sang hai kiểu hình đa dạng để đáp ứng với các kích thích môi trường vi mô khác nhau: M1 được kích hoạt cổ điển, tiền viêm và M2 chống viêm được kích hoạt xen kẽ, hiển thị cấu hình biểu hiện khác biệt với các dấu hiệu bề mặt tế bào và sản xuất cytokine và chemokine khác nhau. Đại thực bào M1 thường phát huy chức năng chống khối u, trong khi đại thực bào M2 thúc đẩy sự phát triển của khối u. Trong hầu hết các khối u xâm lấn, bao gồm cả TNBC, TAM có xu hướng giống kiểu hình M2-, phần lớn là nguyên nhân dẫn đến sự thất bại của các liệu pháp thông thường và liệu pháp ức chế điểm kiểm soát miễn dịch. Vì lý do này, một số phương pháp trị liệu miễn dịch sáng tạo nhằm mục đích nhắm mục tiêu và làm cạn kiệt các đại thực bào M2 hoặc lập trình lại chúng thành kiểu hình mong muốn [88,89].

Để chọn aptamer nhắm vào các đại thực bào giống M2-của con người, phương pháp tiếp cận tế bào-SELEX đầu tiên được áp dụng cho các đại thực bào của con người có nguồn gốc từ các tế bào đơn nhân của một số người cho và được phân cực thành kiểu hình giống M2- [90]. Mặc dù aptamer DNA nhắm mục tiêu M2-tốt nhất đến từ sự lựa chọn không thể phân biệt các tế bào đích với các tế bào đơn nhân và M0-like không phân biệt và cũng được liên kết ở mức độ thấp hơn với M1-like đại thực bào, nó nhanh chóng được nội hóa thành CD14 cộng với bạch cầu đơn nhân, do đó có tiềm năng cho các ứng dụng phân phối thuốc nhắm mục tiêu đơn nhân.

Một ứng dụng nổi bật khác của aptamer cho liệu pháp miễn dịch khối u rắn bao gồm tăng cường tính đặc hiệu của đại thực bào M1 đối với các tế bào khối u bằng cách chế tạo chúng với các aptamer nhắm mục tiêu tế bào ung thư. Liệu pháp miễn dịch tế bào T (CAR-T) thụ thể kháng nguyên khảm, truyền cho bệnh nhân tế bào CAR-T, đã cho thấy hiệu quả tuyệt vời trong điều trị một số bệnh bạch cầu và u lympho nhưng chỉ mang lại kết quả khiêm tốn đối với các khối u rắn do khối u khó thâm nhập [91] . Do khả năng nội tại của đại thực bào trong việc thâm nhập vào các mô khối u, một số phương pháp gần đây đã được đề xuất rằng biến đổi gen chúng để biểu hiện CARs khảm (CAR-M) để nhắm mục tiêu các tế bào khối u và bắt đầu phản ứng chống khối u có mục tiêu [92]. Để khắc phục những hạn chế lớn liên quan đến các liệu pháp CAR-M truyền thống, chẳng hạn như khả năng tái sản xuất thấp của các protein được thiết kế và các vấn đề an toàn, Qian et al. đề xuất một phương pháp CAR-M mới dựa trên việc sử dụng aptamer [93].

Dòng tế bào đại thực bào ổn định ở chuột, RAW 264.7, lần đầu tiên được ủ với thuốc thử ghi nhãn glycoprotein chuyển hóa có chứa azide và lipopolysacarit để tạo ra đường azido trên bề mặt tế bào M1. Sau đó, các tế bào M1 được kết hợp bằng phản ứng hóa học nhấp chuột với cả aptamer AS1411, aptamer này liên kết với nucleolin biểu hiện trên một số tế bào ung thư và aptamer PD-L1, để nhắm mục tiêu khối u đồng thời và phong tỏa điểm kiểm tra miễn dịch. Điều quan trọng là in vivo, hình ảnh của những con chuột mang 4T1 TNBC và được tiêm vào tĩnh mạch các tế bào M1, được chức năng hóa bằng các aptamer huỳnh quang, cho thấy sự tích tụ nhiều hơn trong các khối u so với các tế bào M1 không biến đổi. Hơn nữa, khi được thử nghiệm về hoạt tính chống khối u, M1 được thiết kế bằng aptamer kép đã làm giảm mạnh sự phát triển khối u và hình thành di căn, đi kèm với việc tái lập trình TME miễn dịch với sự gia tăng thâm nhiễm tế bào T trong khối u và tăng cường khả năng gây độc tế bào T.

Ngoài ra, Chen et al. các aptamer hình cầu đa hóa trị (PSA) được đề xuất như một chiến lược kỹ thuật đại thực bào [94]. PSA được tạo ra thông qua chức năng hóa của các hạt nano vàng với cả aptamer AS1411 được biến đổi thiol và trình liên kết DNA mang, ở đầu tự do, một nhóm chức năng để phản ứng với các thẻ azide được tạo trên đại thực bào M0 thông qua quá trình trao đổi chất đã đề cập ở trên ghi nhãn và phản ứng nhấp chuột trực giao (Hình 6). Sự biến đổi kiểu hình của các đại thực bào không phân cực được thao tác di truyền thành phân nhóm M1 được kích hoạt bằng tia X trong ống nghiệm và được xác nhận ở những con chuột mang mô ghép ngoại lai khối u 4T1, gây ra khả năng tiêu diệt đặc hiệu khối u mạnh mẽ mà không có dấu hiệu nhiễm độc toàn thân.

3.4. Tế bào tiêu diệt tự nhiên

Tế bào NK là tế bào lympho gây độc tế bào thuộc IS bẩm sinh, có khả năng sản xuất các cytokine và chemokine gây viêm. Chúng được gọi là "tuyến phòng thủ đầu tiên" bởi vì, khác với các tế bào lympho T, chúng không biểu hiện các thụ thể tế bào T đặc hiệu với kháng nguyên mà hoạt động chống lại các tế bào bị đột biến mà không cần mẫn cảm trước hoặc mở rộng dòng vô tính [95]. Liệu pháp miễn dịch nuôi dưỡng tế bào NK không cho thấy hiệu quả trong điều trị khối u rắn, một phần là do TME ức chế miễn dịch và thiếu tính đặc hiệu của tế bào NK đối với khối u [96].

Do đó, trong số các phương pháp để cải thiện hiệu quả điều trị chống ung thư của tế bào NK, một nỗ lực lớn tập trung vào việc tạo ra tính đặc hiệu của bệnh ung thư thông qua sự biểu hiện của CAR hoặc sự kết hợp của các phối tử nhắm mục tiêu khối u [97]. Zu và các đồng nghiệp đã khám phá aptamer như là tác nhân nhắm mục tiêu ung thư tích cực bằng cách liên kết một aptamer, có khả năng nhận biết cụ thể thụ thể CD30, trên các tế bào ung thư hạch với bề mặt của dòng tế bào thương mại NK hoặc tế bào NK thu được từ ba người hiến tặng khỏe mạnh [98]. Aptamer loại DNA này trước đây đã được chọn bởi cùng một nhóm thông qua phương pháp lai SELEX, trong đó các bước chọn lọc trên tế bào CD30 cộng với tế bào ung thư hạch được theo sau bởi các bước chọn lọc trên protein tái tổ hợp CD30 [99]. Aptamer đã được biến đổi ở 30 đầu với chuỗi hydrocacbon C18 kép ưa béo để neo vào màng tế bào NK, được hướng dẫn cụ thể đến các tế bào ung thư hạch để tiêu diệt chúng [98]. Gần đây hơn, cùng các tác giả đã áp dụng phương pháp tương tự trong TNBC bằng cách gắn một aptamer DNA có khả năng liên kết một protein chưa được biết đến biểu hiện trên các tế bào TNBC với bề mặt của các tế bào NK. Các tế bào NK được thiết kế theo công nghệ Aptamer đã ức chế sự di căn phổi từ các tế bào-231 MDA-MB được tiêm vào tĩnh mạch ở chuột mà không gây độc tính phụ cho các mô bình thường [100].

Để nâng cao hơn nữa tính đặc hiệu của tế bào NK đối với khối u trong các khối u rắn, các tế bào NK được trang bị aptamer kép đã được tạo ra bằng cách sử dụng cả aptamer nhắm vào tế bào ung thư biểu mô tế bào gan và aptamer AptPD-L1 [81]. Kết quả là các tế bào NK được xử lý công nghệ hiệu quả hơn so với các tế bào không liên hợp hoặc liên hợp chỉ với một trong hai aptamer trong việc ức chế sự phát triển của ung thư biểu mô tế bào gan ở chuột được chuyển giao thông qua nuôi dưỡng. Một giới hạn khác đối với hiệu quả của liệu pháp miễn dịch với các tế bào NK là sự xâm nhập không đủ của chúng vào các khối u rắn. Một lần nữa, aptamer đã chứng tỏ là công cụ tuyệt vời để khắc phục vấn đề này. Nhóm của Hock đã tạo ra một liên hợp đặc hiệu kép dựa trên aptamer có khả năng liên kết đồng thời với c-Met, một thụ thể được biểu hiện cao trên một số tế bào khối u và với thụ thể Fcg III (CD16a), một protein được biểu hiện trên các tế bào NK [101]. Liên hợp được tạo thành từ hai aptamer DNA c-Met và CD16a đặc hiệu cao được hợp nhất bởi các trình tự liên kết khác nhau, duy trì khoảng cách lý tưởng ∼65 Å để liên kết đồng thời với hai thụ thể. Hợp chất này có thể bắt chước hiệu quả khả năng gây độc tế bào phụ thuộc vào kháng thể bằng cách tuyển dụng tế bào NK vào tế bào ung thư. Sau đó, cùng một aptamer CD16 được hợp nhất với một aptamer DNA PD-L1 để tạo ra một cấu trúc có thể thu nạp cả tế bào NK vào PD-L1 cộng với tế bào khối u và làm suy yếu trục ức chế miễn dịch PD-1/PD-L1 bằng cách kích hoạt lại TILs chống lại các tế bào khối u ở chuột mang khối u [82]. Cách tiếp cận này đặc biệt được chỉ định cho những khối u rắn có nồng độ PD-L1 cao, chẳng hạn như TNBC.

4.Kết luận

Các nghiên cứu gần đây được thảo luận ở đây đã chứng minh rõ ràng tiềm năng to lớn của các aptamer oligonucleotide để khuếch đại IS của chúng ta nhằm chống lại bệnh ung thư. Aptamer có thể được sử dụng làm tác nhân chống ung thư theo cách tương tự như mAbs nhưng rẻ hơn, được sản xuất nhanh hơn và có khả năng sinh sản cao hơn, đồng thời ít gây miễn dịch hơn so với kháng thể. Tuy nhiên, phải công nhận rằng sự xuất hiện của aptamer trong phòng khám đang chậm hơn dự kiến; trên thực tế, mặc dù đã hơn 30 năm trôi qua kể từ SELEX đầu tiên [25,26], nhưng chỉ có ba aptamer hiện đang được thử nghiệm lâm sàng để điều trị ung thư [51].

Sự chậm lại này chủ yếu là do một số thách thức hạn chế hiệu quả của aptamer ở ​​bệnh nhân, chẳng hạn như độ ổn định và thời gian bán hủy không chắc chắn của chúng, đặc biệt là trong môi trường vi mô phức tạp và liên tục phát triển bao quanh khối u. Tuy nhiên, các chiến lược đáng kinh ngạc đã được phát triển trong vài năm qua để khắc phục các vấn đề hạn chế nêu trên và tiến bộ gần đây trong việc phát hiện và sửa đổi aptamer để điều chỉnh chúng cho phù hợp với bất kỳ ứng dụng mong muốn nào khiến cho việc sử dụng aptamer trong thực tế sẽ sớm trở nên hợp lý. được thực hiện đối với các bệnh ung thư như TNBC, loại bệnh đang rất cần các lựa chọn điều trị mới.

Sự đóng góp của tác giả:

Khái niệm hóa, LC; viết—chuẩn bị hối phiếu gốc, LC; viết— xem xét và chỉnh sửa LA, Ad, RN, MF, SC và LC Tất cả các tác giả đã đọc và đồng ý với phiên bản đã xuất bản của bản thảo.

Kinh phí:

Nghiên cứu này được tài trợ bởi Fondazione AIRC per la Ricerca sul Cancro, IG 23052, cho LCLA được hỗ trợ bởi học bổng AIRC cho Ý.

Tuyên bố của Ủy ban Đánh giá Thể chế:

Không áp dụng.

Tuyên bố về tính khả dụng của dữ liệu:

Không áp dụng.

Sự nhìn nhận:

Chúng tôi rất biết ơn A. Caliendo vì những cuộc thảo luận sâu sắc.

Xung đột lợi ích:

Các tác giả tuyên bố không có xung đột lợi ích.

Người giới thiệu

1. Vết lõm, R.; Trudeau, M.; Pritchard, KI; Hanna, WM; Kahn, Hồng Kông; Cưa, CA; Lickley, LA; Rawlinson, E.; CN, P.; Narod, SA Ung thư vú bộ ba âm tính: Đặc điểm lâm sàng và mô hình tái phát. lâm sàng. Ung thư Res. 2007, 13, 4429–4434. [Tham khảo chéo]

2. Derakhshan, F.; Reis-Filho, JS Sinh bệnh học của Ung thư vú Bộ ba Âm tính. hàng năm. Mục sư Pathol. 2022, 17, 181–204. [Tham khảo chéo]

3. Lu, JY; Alvarez Soto, A.; Anampa, JD Bối cảnh của liệu pháp hệ thống đối với bệnh ung thư vú bộ ba âm tính giai đoạn đầu. Ý kiến ​​chuyên gia. Dược sĩ. 2022, 23, 1291–1303. [Tham khảo chéo]

4. Lehmann, BD; Bauer, JA; Chen, X.; Sanders, TÔI; Chakravarthy, AB; Nhút nhát, Y.; Pietenpol, JA Xác định các phân nhóm ung thư vú bộ ba âm tính ở người và các mô hình tiền lâm sàng để lựa chọn các liệu pháp nhắm mục tiêu. J. Lâm sàng. điều tra. 2011, 121, 2750–2767. [Tham khảo chéo]

5. Lehmann, BD; Jovanovic, B.; Chen, X.; Estrada, MV; Johnson, KN; Nhút nhát, Y.; Môsê, HL; Sanders, TÔI; Pietenpol, JA Sàng lọc các phân nhóm ung thư vú âm tính ba lần: Ý nghĩa đối với việc lựa chọn hóa trị tân bổ trợ. PLoS MỘT 2016, 11, e0157368. [Tham khảo chéo]

6. Burstein, MD; Tsimelzon, A.; Poage, GM; Covington, KR; Tương phản, A.; Fuqua, SA; Dã man, MI; Osborne, CK; Hilsenbeck, SG; Chang, JC; et al. Phân tích bộ gen toàn diện xác định các phân nhóm mới và mục tiêu của ung thư vú bộ ba âm tính lâm sàng. Ung thư Res. 2015, 21, 1688–1698. [Tham khảo chéo]

7. Công viên, JH; An, JH; Kim, SB Chúng ta sẽ điều trị ung thư vú bộ ba âm tính sớm (TNBC) như thế nào: Từ tiêu chuẩn hiện tại đến các chiến lược phân tử miễn dịch sắp tới. ESMO Mở 2018, 3, e000357. [Tham khảo chéo]

8. Lý, S.; Bảo, C.; Hoàng, L.; Wei, JF Các chiến lược điều trị hiện tại đối với ung thư vú âm tính bộ ba di căn: Từ quan điểm của dược sĩ. J. Lâm sàng. y tế. 2022, 11, 6021. [CrossRef]

9. MROSS, K.; Kratz, F. Giới hạn của hóa trị liệu ung thư thông thường. Trong Phân phối thuốc trong ung thư: Từ nghiên cứu cơ bản đến điều trị ung thư; Kratz, F., Senter, P., Steinhagen, H., Eds.; John Wiley & Sons, Ltd.: Hoboken, NJ, USA, 2011; Tập 1, trang 1–31.

10. Ferrari, P.; Scatena, C.; Ghilli, M.; Bargagna, tôi.; Lorenzini, G.; Nicolini, A. Cơ chế phân tử, dấu ấn sinh học và liệu pháp mới nổi cho TNBC kháng hóa trị. quốc tế J. Mol. Khoa học. 2022, 23, 1665. [CrossRef]

11. Gonzalez-Angulo, AM; Tim, KM; Lưu, S.; Chen, H.; Litton, JK; Đồ gốm, J.; Lanchbury, JS; Stemke-Hale, K.; Hennessy, BT; Arun, BK; et al. Tỷ lệ mắc và kết quả của đột biến BRCA ở những bệnh nhân không được chọn lọc với ung thư vú âm tính thụ thể ba. lâm sàng. Ung thư Res. 2011, 17, 1082–1089. [Tham khảo chéo]

12. Robson, M.; Im sa; Senkus, E.; Từ, B.; Domchek, SM; Masuda, N.; Delaloge, S.; Lý, W.; Tùng, N.; Armstrong, A.; et al. Olaparib cho bệnh ung thư vú di căn ở bệnh nhân có đột biến gen BRCA. N. Anh. J. Med. 2017, 377, 523–533. [CrossRef] [PubMed]

13. Eikesdal, HP; Yndestad, S.; Elzawahry, A.; Llop-Guevara, A.; Gilje, B.; Blix, ES; Espelid, H.; Lundgren, S.; Geisler, J.; Vagstad, G.; et al. Olaparib đơn trị liệu như điều trị chính trong ung thư vú bộ ba âm tính không được chọn lọc. Ann. ung thư. 2021, 32, 240–249. [CrossRef] [PubMed]

14. Litton, JK; Rugo, HS; Ettl, J.; Hurvitz, SA; Gonçalves, A.; Lý, KH; Fehrenbacher, L.; Yerushalmi, R.; Mina, LA; Martin, M.; et al. Talazoparib ở bệnh nhân ung thư vú tiến triển và đột biến gen BRCA ở mầm bệnh. N. Anh. J. Med. 2018, 379, 753–763. [Tham khảo chéo]

15. Keung, MỸ; Ngô, Y.; Badar, F.; Vadgama, JV Phản ứng của các tế bào ung thư vú đối với các chất ức chế PARP không phụ thuộc vào tình trạng BRCA. J. Lâm sàng. y tế. 2020, 9, 940. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com