Đánh giá mối quan hệ giữa protein phản ứng C có độ nhạy cao và chức năng thận bằng phương pháp ngẫu nhiên hóa Mendelian trong nghiên cứu J-MICC dựa vào cộng đồng Nhật Bản

TRỪU TƯỢNG

Bối cảnh: Viêm được cho là mộtyếu tố nguy cơ mắc bệnh thận. Tuy nhiên, liệu tình trạng viêm là nguyên nhân hay kết quả củabệnh thận mãn tínhvẫn còn gây tranh cãi. Chúng tôi nhằm mục đích điều tra mối quan hệ nhân quả giữaprotein phản ứng C có độ nhạy cao(hs-CRP) vàtỷ lệ lọc cầu thận ước tính(eGFR) sử dụng phương pháp ngẫu nhiên hóa Mendel (MR).

Phương pháp:Tổng cộng có 10.521 người tham gia Nghiên cứu đoàn hệ hợp tác đa tổ chức của Nhật Bản đã được phân tích trong nghiên cứu này. Chúng tôi đã sử dụng các phương pháp MR hai mẫu (phương pháp trọng số nghịch đảo (IVW), trung bình có trọng số (WM) và phương pháp MR-Egger) để ước tính tác động của hs-CRP được xác định về mặt di truyền đối với chức năng thận. Chúng tôi đã chọn bốn và ba đa hình nucleotide đơn (SNP) liên quan đến hs-CRP làm hai biến công cụ (IV): IVCRP và IVAsian, dựa trên SNP được xác định trước đây ở dân số châu Âu và châu Á. IVCRP và IVAsian giải thích lần lượt 3,4% và 3,9% biến thể của hs-CRP.Kết quả:Sử dụng IVCRP, hs-CRP được xác định về mặt di truyền không liên quan đáng kể đếneGFRtrong phương pháp IVW và WM (ước tính trên mỗi lần tăng 1 đơn vị trong ln(hs-CRP), 0.000; khoảng tin cậy 95% [CI], −0.{{ 7}}19 đến 0.020 và −0.003; CI 95%, −{{23 }}.019 đến 0.014 tương ứng). Đối với IVAsian, chúng tôi nhận thấy kết quả tương tự khi sử dụng phương pháp IVW và WM (ước tính, 0.005; CI 95%, −0.{{44} }20 đến 0,010 và −0,004; KTC 95%, −0,020 đến 0,012, tương ứng). Phương pháp MR-Egger cũng cho thấy không có mối quan hệ nhân quả giữa hs-CRP và eGFR (IVCRP: −0,008; 95% CI, −0,058 đến 0,042; IVAsian: 0,001; 95% CI, −0,036 đến 0,036).

Kết luận:Các phân tích MR hai mẫu của chúng tôi với các IV khác nhau không chứng minh được tác động nhân quả của hs-CRP đối với eGFR.

Từ khóa: hs-CRP; eGFR; Nghiên cứu ngẫu nhiên Mendelian;dịch tễ học di truyền; viêm

NHẤP VÀO ĐÂY ĐỂ NHẬN CHIẾT XUẤT CISTANCHE HỮU CƠ TỰ NHIÊN VỚI 25% ECHINACOSIDE VÀ 9% ACTEOSIDE CHO CHỨC NĂNG THẬN

Dịch vụ hỗ trợ của Wecistanche-Nhà xuất khẩu cistanche lớn nhất ở Trung Quốc:

Email:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Điện thoại:+86 15292862950

Mua sắm để biết thêm thông số kỹ thuật

https://www.xjcistanche.com/cistanche-cửa hàng

GIỚI THIỆU

Viêm hệ thống được coi là một trong nhữngcác yếu tố nguy cơ của các bệnh mãn tính phổ biến, bao gồmđái tháo đường,1 tăng huyết áp,2 bệnh tim mạch,3 vàbệnh thận mãn tính(CKD).4 Nói chung,Protein phản ứng C(CRP) đã được sử dụng như một dấu ấn sinh học của tình trạng viêm toàn thân trong nghiên cứu lâm sàng và cơ bản. Mặc dù các nghiên cứu dài hạn trước đây đã xem xét mối liên quan giữa nồng độ CRP và bệnh thận mạn ở các quần thể khác nhau, nhưng bằng chứng về mối quan hệ nhân quả của mối liên quan này vẫn còn gây tranh cãi.5–7 Tuy nhiên, một số nhà nghiên cứu đã chứng minh tác động của các chức năng sinh học hướng CRP lên chức năng thận.8, 9 Một nhà nghiên cứu cũng đã công bố một phân tích tổng hợp cho thấy rằng việc bổ sung vitamin D có thể làm giảm mức CRP lưu thông.10 Kết hợp lại với nhau, những nghiên cứu này cho thấy rằng các biện pháp can thiệp vào CRP có thể giúp cải thiện chức năng thận.

Trong những năm gần đây,Sự ngẫu nhiên hóa Mendel(MR) đã thu hút nhiều sự chú ý trong dịch tễ học di truyền. Ưu điểm lớn nhất của phương pháp này là điều tra mối quan hệ nhân quả giữa mức phơi nhiễm (X) và kết quả (Y) từ tập dữ liệu quan sát sử dụng các biến thể di truyền làm biến công cụ (G: IV).11 Sự phát triển của phân tích MR liên tiếp xảy ra sau đór xác định đa hình nucleotide đơn(SNP) trong nghiên cứu kết hợp trên toàn bộ gen (GWAS). Cũng như các kết quả sức khỏe khác, GWAS trước đây đã xác định SNP liên quan đến mức CRP, bao gồm gen CRP trong nhiễm sắc thể 1.12,13. Điều thú vị là người ta biết rằng mức CRP huyết thanh bị ảnh hưởng bởi đa hình di truyền,14 cho thấy rằng SNP liên quan đến mức CRP có thể phản ánh tiếp xúc trong thời gian dài với mức CRP cao hơn=thấp hơn. Do đó, SNP liên quan đến nồng độ CRP huyết thanh phù hợp với IV để điều tra mối quan hệ nhân quả giữa CRP và một số tình trạng sinh lý bệnh và được sử dụng trong các nghiên cứu MR trước đây ở người trưởng thành ở các nước Châu Âu.15–17

Ở các nước châu Á, các nghiên cứu thuần tập quy mô lớn đã thu thập bộ gen người và thực hiện phân tích kiểu gen trong nhiều thập kỷ qua. Một số nhà nghiên cứu đã tiến hành GWAS và tìm thấy các locus mới liên quan đến mức độ CRP ở dân số châu Á.18–20 Những nghiên cứu này cho phép các nhà nghiên cứu tiến hành nghiên cứu MR sử dụng SNP liên quan đến CRP ở dân số châu Á, điều này dường như rất quan trọng xét về sự khác biệt về sắc tộc. Do đó, chúng tôi đã điều tra xem liệu mức độ hs-CRP được xác định về mặt di truyền bằng cách sử dụng hai IV khác nhau, dựa trên SNP được xác định ở dân số Châu Âu và Châu Á, có liên quan đến nguyên nhân hay không.chức năng thậntrong dân số Nhật Bản sử dụng phương pháp MR.

PHƯƠNG PHÁP

Môn học

The study subjects were participants of the Japan Multi-institutional Collaborative Cohort (J-MICC) Study which was conducted in 14 study areas throughout Japan. The purpose of the J-MICC study was to find out the risk factors of cancer and other diseases by examining the relationship between genetic variants, lifestyle habits, blood components, and disease. The eligibility for the J-MICC Study was adults aged 35–69 years living in each study area. The details of the J-MICC Study have been described previously elsewhere and the latest information is available on its website (http:==www.jmicc.com).21,22 The selection process of participants is shown in Figure 1. From the genotyped 14,539 subjects, 26 samples with inconsistent sex information between the questionnaire and an estimate from genotype were excluded. The identity-by-descent method implemented in the PLINK 1.9 software (https:==www.cog-genomics.org=plink2) identified 388 relative pairs (pi-hat >0.1875) and one sample of each pair was excluded. Principal component analysis with a 1,000 Genomes reference panel (phase 3) (http:==www. international genome.org= category=phase-3=) detected 34 subjects whose estimated ancestries were outliers from the Japanese population. The 34 samples were excluded. Among all the remaining 14,091 samples, five subjects withdrew their consent to participate, leaving 14,086 subjects for the final analyses. Of these, the values of serum hs-CRP were available only at three study sites. Therefore, we decided to use a two-sample MR study design, rather than a single sample MR for a smaller dataset. We divided the participants into two groups; 1) 2,503 participants (available for hs-CRP) and 2) 12,501 participants (non-overlapping participants), which are by a basic principle of two-sample MR (nonoverlapping populations with the same ethnicity, similar sex, and age distribution).23 After excluding participants who had an extremely high value for hs-CRP (hs-CRP >3.0 mg=dL, n = 828) and eGFR (eGFR >120 mL=phút=1,73 m2, n=3,647) và thấp hơn giới hạn định lượng của hs-CRP (n=8), tổng cộng là 10.521 người Nhật Bản (1.667 người có mối liên hệ di truyền với hs-CRP [được gọi là tập dữ liệu CRP] và 8,854 người có mối liên hệ di truyền với eGFR [được gọi là tập dữ liệu eGFR]) đã được phân tích trong MR hai mẫu của nghiên cứu này. Có sự đồng ý bằng văn bản từ tất cả những người tham gia nghiên cứu này. Nghiên cứu J-MICC được thực hiện với việc tuân thủ các Nguyên tắc đạo đức đối với Nghiên cứu trình tự gen và bộ gen người. Quy trình của nghiên cứu này đã được phê duyệt bởi Ủy ban đánh giá đạo đức của Trường Y sau đại học thuộc Đại học Nagoya (939-14), Trung tâm Ung thư Aichi và tất cả các viện nghiên cứu. Chúng tôi đã thực hiện phân tích bằng tập dữ liệu của phiên bản 20190728.

Đo hs-CRP và eGFR

Các mẫu huyết thanh được thu thập từ tất cả những người tham gia. Chúng tôi đã đo hs-CRP bằng phương pháp đo thận tăng cường latex. Creatinine huyết thanh được đo bằng phương pháp enzym. Một số viện đo creatinine huyết thanh bằng phương pháp Jaffe và sau đó chuyển nó thành giá trị tương đương với phương pháp enzyme. eGFR được tính toán bằng phương trình Nhật Bản do Hiệp hội Thận học Nhật Bản đề xuất: eGFR (mL= phút=1.73 m2 )=194 × creatinine huyết thanh (mg=dL) −1.{{10}}94 × tuổi−0,287 (× 0,739 đối với nữ).24

Lựa chọn các biến công cụ

Danh sách các SNP ứng cử viên cho IV được trình bày trong bảng 1. Đầu tiên, chúng tôi chọn bốn SNP (rs3093077, rs1205, rs1130864 và rs1800947) trong gen CRP được sử dụng làm IV trong các nghiên cứu MR trước đây.15 Trong nghiên cứu này, những SNP này đã được chọn làm tập hợp con tối thiểu để đạt được sự đa dạng ở gen CRP trong quần thể châu Âu và được gọi là IVCRP. Tiếp theo, chúng tôi cho rằng cần phải chọn SNP và phát triển IV ban đầu ở người dân châu Á vì IVCRP được phát triển dựa trên SNP được xác định ở những người gốc châu Âu. Do đó, chúng tôi đã tìm kiếm từ 'CRP' trong danh mục GWAS (https:==www.ebi.ac.uk= gwas=) ​​và thu hẹp các nghiên cứu theo tiêu chí sau: 1) một nghiên cứu được thực hiện ở người châu Á và 2) một nghiên cứu với cả giai đoạn khám phá và nhân rộng. Sau khi lựa chọn dựa trên web, cuối cùng chúng tôi đã chọn được 13 SNP. Đối với 151233628, do chất lượng cắt bỏ thấp (MAF<0.05 and r2 < 0.3), this SNP was not included in the original J-MICC dataset. Of the remaining 12 SNPs, 6 SNPs (rs12133641, rs9375813, rs2097677, rs79802086, rs2393791, and rs1169284) were excluded because these SNPs were not significantly associated with hs-CRP in our dataset (P > 0.0042 = 0.05=12). Next, rs814295 (GCKR) and rs429358 (APOE) were likely to have pleiotropic effects on kidney function. rs3093059 was excluded due to the high linkage disequilibrium (LD) with rs3093068 in the CRP dataset (r2 > 0.9). Finally, three SNPs (rs30933068, rs7553007, and rs7310409) were included in our analysis and were called as IVAsian (Table 2).

Phân tích thống kê

To confirm the cross-sectional association between hs-CRP and eGFR, multiple linear regression analysis was performed with adjustments for sex, age, and study sites. We performed two-sample MR approaches after dividing the participants into two datasets (CRP and eGFR datasets) as described above. Methods for two-sample MR were different from the one-sample MR method, which was described in previous methodological papers.25–27 The inversevariance weighted method (IVW) is a conventional approach to estimating a causal effect on a study outcome from different studies in meta-analysis.25 In the setting of MR analysis, the IVW method can provide a combined estimate weighted using the inverse variances of the causal effect of per-allele. However, this method can be biased when a genetic variant violates the assumptions of MR (eg, pleiotropic effect).27 Therefore, we also performed two other methods (the weighted median (WM) and the MR-Egger method) which can provide consistent estimates even under the weaker assumption.25 The MR-Egger analysis is also useful to detect either both directional pleiotropy or violation of the Instrument Strength Independent of Direct Effect (InSIDE) assumption. Additionally, the F-statistic was calculated for each IV from linear regression analyses to test whether IVs are strongly associated with exposure (referred to as relevance assumption).28 We performed linear regression analyses using the lm function in R and included all SNPs used in each IV in models. An arbitrary threshold of F-statistic >10 đã được sử dụng để tránh sử dụng các công cụ di truyền yếu trong nghiên cứu này.29 Tất cả các phân tích thống kê được thực hiện bằng phần mềm R phiên bản 3.5.0 (R Foundation for Statistical Computing, Vienna, Austria). Đặc biệt, gói R của "MendelianRandomization" đã được sử dụng để phân tích MR hai mẫu.30