Tác dụng có lợi của Thymelaea Hirsuta đối với sự thoái hóa đảo tụy, xơ hóa thận và tổn thương gan

Sanae Abid, Hassane Mekhfifi, Abderrahim Ziyyat, Abdekhaleq Legssyer, Mohammed Aziz và Mohamed Bnouham

Phòng thí nghiệm Nguồn sinh học, Công nghệ sinh học, Điện não và Sức khỏe, Khoa Sinh học, Khoa Khoa học,

Đại học Mohamed Ist, Bd: Mohamed VI, BP: 717, Oujda 60000, Maroc

Tiếp xúc:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Khách quan. Ở Maroc, cộng với ymelaea hirsute (T. hirsute) (Thymelaeacea) là một cây thuốc được sử dụng rộng rãi để điều trị và ngăn ngừa bệnh tiểu đường. Nghiên cứu này nhằm đánh giá tác dụng chống đái tháo đường trung hạn của chiết xuất nước (AqTh) và phân đoạn ethyl acetat (EaTh) của Th và để khảo sát tác dụng bảo vệ giả định của chúng đối với thoái hóa đảo tụy, bệnh thận do đái tháo đường và tổn thương gan trong streptozotocin (STZ) - chuột mắc bệnh tiểu đường. Các phương pháp. Bệnh tiểu đường thực nghiệm ở chuột được gây ra bằng một lần tiêm vào màng bụng 50 mg / kg STZ. Trong thời gian điều trị (4 tuần), 200 mg / kg AqTh và 50 mg / kg EaTh được dùng đường uống hàng ngày cho chuột mắc bệnh tiểu đường STZ. Một nhóm các thông số bao gồm đường huyết lúc đói, các thông số sinh hóa và sự ức chế men -glucosidase trong ruột đã được nghiên cứu. Hơn nữa, nghiên cứu mô học của tuyến tụy,quả thận, gan và động mạch chủ cũng đã được nhận ra. Kết quả. Vào cuối đợt điều trị, cả AqTh và EaTh đều bình thường hóa đường huyết lúc đói xuống 1,08 và 1,25 g / l, tương ứng. AqTh cũng đã làm giảm creatinin niệu và HbAc1. EaTh cho thấy hoạt động ức chế chống lại men -glucosidase trong ruột, trong khi AqTh không có tác dụng ức chế này. Hơn nữa, nhuộm hematoxylin và eosin tuyến tụy cho thấy AqTh hoặc EaTh ngăn chặn sự thoái hóa tế bào đảo tụy. Như nhauquả thận, Nhuộm ba màu của Masson đã cho thấy ngăn ngừa đáng kểthậnxơ hóa ở chuột tiểu đường được điều trị bằng AqTh- hoặc EaTh. Mặt khác, nhuộm hematoxylin và eosin ở gan cho thấy AqTh và EaTh ngăn ngừa tổn thương gan. Sự kết luận. Chúng tôi kết luận rằng việc sử dụng AqTh và EaTh trong thời gian dài có tác dụng hạ đường huyết đáng kể ở chuột mắc bệnh tiểu đường STZ có thể thông qua việc ức chế -glucosidase ruột và bảo vệ chống lại tổn thương tế bào đảo tụy. Hơn nữa, điều trị AqTh và EaTh ngăn ngừa bệnh thận và biến chứng gan ở chuột mắc bệnh tiểu đường STZ.

Cistanche herbacó thể điều trịxơ hóa thận

Giới thiệu

Đái tháo đường là bệnh nội tiết thường gặp nhất. Tỷ lệ mắc bệnh này đang gia tăng ở mức báo động (4-5 phần trăm) [1]. Bệnh tiểu đường loại 2 phụ thuộc vào noninsulin (DM2) không được điều trị hoặc không được kiểm soát có thể gây ra một số biến chứng như bệnh tim mạch và bệnh thận do tiểu đường, và nó có thể dẫn đến bệnh tiểu đường loại 1 phụ thuộc insulin (DM1).

Bệnh thận do đái tháo đường là một trong những biến chứng quan trọng của bệnh đái tháo đường, là nguyên nhân chính khiến số lượng bệnh nhân giai đoạn cuối ngày càng gia tăng.thậnbệnh (ESRD) [2], yêu cầuquả thậnlọc máu hoặc mộtquả thậncấy ghép để bệnh nhân sống.

Do đó, việc quản lý bệnh tiểu đường đang trở nên rất quan trọng để tránh các kết quả chuyển hóa nghiêm trọng của nó như bệnh thận.

Ngày nay, việc điều trị bệnh tiểu đường bao gồm kiểm soát chế độ ăn uống, tập thể dục, sử dụng insulin và / hoặc thuốc hạ đường huyết, và cũng có thể sử dụng cây thuốc như một loại thuốc thay thế bổ sung. Một số cây thuốc đã cho thấy tác dụng hạ đường huyết quan trọng với tác dụng phụ tối thiểu [3–5], Vì lý do này, Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) đã kêu gọi sự chú ý lớn đến việc sử dụng hợp lý các loại thuốc truyền thống và tự nhiên để điều trị bệnh tiểu đường [6].

Ở Maroc, hơn 100 cây thuốc được sử dụng để điều trị và ngăn ngừa bệnh tiểu đường [7–10]. Hoạt tính chống tăng đường huyết và chống đái tháo đường của nhiều chất chiết xuất và sản phẩm của những cây này (Ammi visnaga Lam., Globularia alum, Nigella sativa, và Olea europaea var.) Đã được xác nhận [9].

T. hirsuta là một cây thuốc theo truyền thống được sử dụng để phòng ngừa và kiểm soát bệnh tiểu đường, ở đông bắc Maroc [8]. Các nghiên cứu dược lý trước đây đã chứng minh tác dụng hạ đường huyết cấp tính của AqTh và EaTh [11–13]. Tuy nhiên, tác dụng chống đái tháo đường trung hạn của hai chiết xuất T. hirsuta này vẫn chưa được thiết lập. Do đó, mục đích của nghiên cứu này là lần đầu tiên đánh giá hoạt động chống đái tháo đường trung hạn của AqTh và EaTh và để khảo sát tác dụng bảo vệ giả định của chúng đối với sự thoái hóa đảo tụy, bệnh thận do đái tháo đường, gan nhiễm mỡ và biến chứng động mạch chủ trong STZ- chuột mắc bệnh tiểu đường gây ra.

2. Vật liệu và phương pháp

2.1 Hóa chất và Thuốc thử.

Glucose Autokit được mua từ BioSystems (Tây Ban Nha). STZ được mua từ Sigma Aldrich (Trung Quốc). Acarbose (Glucor 50) được lấy từ Bayer Schering Pharma (Casablanca, Morocco). Sucrose đã được mua từ Prolabo (Rhone-Poulenc) (EEC). Pentobarbital được lấy từ CEVA Sante Animale (LaBallasti`ere). Anthrone (C14H10O) đã được mua từ các tổ chức khác. Sáp paraffiffiffin được mua từ FlukaChemika (Thụy Sĩ). Eosin (C20H6Br4Na2O5) được lấy từ Riedel-de Haen (Seelze), và hematoxylin được lấy từ BDH Chemicals Ltd. (Poole Anh). Axit fuchsin được mua từ Acros Organics (NewJersey, Mỹ), axit photphomolybdic được mua từ Sigma-Aldrich (PF, Steinheim), và màu xanh lục nhạt được mua từ Sigma-Aldrich (MO, Mỹ).

2.2. Loài vật.

Chuột Wistar ở cả hai giới, ban đầu nặng 150–250 g (8-9 tuần), được lấy từ nhà động vật thuộc Khoa Sinh học của Khoa Khoa học (Oujda, Maroc). Nghiên cứu đã được thực hiện cùng với "Nguyên tắc chăm sóc động vật trong phòng thí nghiệm" [14]. Chúng được duy trì trong các điều kiện phòng thí nghiệm tiêu chuẩn (chu kỳ sáng / tối 12/12 giờ và nhiệt độ 23 cộng 2 độ với 3 con chuột mỗi lồng được tiếp cận với thức ăn và nước uống. Để thu thập nước tiểu và xác định lượng nước và thức ăn, chuột được duy trì trong lồng trao đổi chất.

2.3. Cảm ứng bệnh tiểu đường.

Sau 14 giờ nhịn ăn, những con chuột được tiêm vào màng bụng một liều STZ (5 0 mg / kg BW), được chuẩn bị trong dung dịch đệm natri citrat mới và lạnh (0. 1 M axit xitric và 0,1 M trinatri citrat dihydrat) ở PH4,5, để gây bệnh tiểu đường [15]. Sau 1 tuần, những con chuột có đường huyết lúc đói từ 1,26–2 g / l được coi là bệnh tiểu đường loại 2 và chúng được đưa vào nghiên cứu.

2.4. Chuẩn bị mẫu thực vật.

T. hirsuta được mua từ một chợ truyền thống ở Oujda (Oriental Morocco) và được xác thực bởi một nhà thực vật học tại Khoa Sinh học (Khoa Khoa học, Oujda, Maroc), và một mẫu chứng từ (HUMPOM137) đã được gửi tại khu vực thực vật của Thủ hiến Mohamed của Đại học Herbarium của Oujda, Maroc (HUMPO).

Đầu tiên, các bộ phận trên không của T. hirsuta được làm sạch và rửa bằng nước, sau đó sấy khô ở nhiệt độ 40 độ qua đêm trong lò. Để điều chế AqTh, 140 g các bộ phận trên không của T. hirsuta được truyền trong 2 L nước cất trong 3 giờ. Lợi suất AqTh là 4,53 phần trăm. EaThwas được chuẩn bị như được mô tả trong nghiên cứu trước đây của chúng tôi [13].

2.5. Thiết kế thử nghiệm.

Những con chuột được chia ngẫu nhiên thành năm nhóm (5 hoặc 6 con chuột mỗi nhóm): chuột đối chứng bình thường (chỉ dùng nước cất), chuột kiểm soát bệnh tiểu đường (chỉ dùng nước cất), chuột mắc bệnh tiểu đường được điều trị bằng 1 0 mg / kg BW của acarbose (thuốc hạ đường huyết tiêu chuẩn), chuột bị tiểu đường được điều trị với 50 mg / kg EaTh, và chuột bị tiểu đường được điều trị với 200 mg / kg BW của AqTh. Liều tối ưu được xác định dựa trên các nghiên cứu trước đây của chúng tôi [13] và từ các thử nghiệm sơ bộ. Tất cả chuột được điều trị một lần mỗi ngày trong 4 tuần. Trọng lượng cơ thể được ghi lại mỗi ngày. Lượng nước và thức ăn và lượng nước tiểu được theo dõi trước và sau khi điều trị, và lượng đường niệu đã được đo khi kết thúc điều trị. Đường huyết lúc đói được kiểm tra trước khi điều trị (tuần 0) và sau 1, 2, 3 và 4 tuần điều trị. Sự ức chế -glucosidase, in vivo, đã được nghiên cứu một ngày trước khi chuột bị hiến tế. Sau 4 tuần điều trị, tất cả các con vật được gây mê bằng 50 mg / kg pentobarbital, sau 14 giờ nhịn ăn. Sau đó, máu được thu thập bằng cách chọc thủng tim, và ngay lập tức được ly tâm với tốc độ 3000 vòng / phút trong 10 phút. * Huyết thanh e sau đó được bảo quản ở -20 độ cho đến khi phân tích sinh hóa (tổng cholesterol và triglycerid). Cácquả thận, gan, động mạch chủ, tim và tuyến tụy đã được cắt bỏ, cân (quả thậngan và tim), và sau đó được cố định (thận, gan, động mạch chủ và tuyến tụy) trong 10% formalin cho nghiên cứu mô học. Một mẫu gan được lưu trữ ở -20 độ để xét nghiệm hàm lượng glycogen.

cistachevìchức năng thận

2.6. Ước tính đường huyết lúc đói.

Trong thời gian điều trị, đường huyết lúc đói được định lượng hàng tuần. Sau 14 giờ nhịn ăn, máu được lấy ra khỏi tĩnh mạch đuôi, gây mê nhẹ bằng ête, sử dụng vi mao quản. Sau đó, nó được ly tâm ở 5000 × g trong 10 phút, và glycemia được ước tính trong huyết thanh bằng cách sử dụng kit glucose thương mại (BioSystems, Tây Ban Nha) dựa trên phương pháp peroxidase glucose oxidase [16].

2.7. -Glucosidase Ức chế, Nghiên cứu in vivo.

Một ngày trước khi hiến tế, những con chuột bị thiếu thức ăn trong 14 giờ được sử dụng để theo dõi sự ức chế -glucosidase, in vivo. 3 0 phút trước khi bổ sung đường uống (2 g / kg), mỗi nhóm được sử dụng theo liều lượng tương ứng với điều trị của nhóm đó. Máu được lấy, từ đuôi, tĩnh mạch bằng cách sử dụng vi mao quản, ngay trước khi dùng liều thử nghiệm (−30 phút), ngay trước khi tải sucrose (0 phút), và ở 30, 60 và 120 phút sau khi tải sucrose. Sau khi ly tâm ở 5000 × g / 10 phút, mức glucose trong huyết tương được xác định bằng phương pháp peroxidase glucose oxidase [17].

2.8. Chiết xuất và xác định Glycogen trong gan.

Các mẫu mô gan đã cân ({{0}}. 3–0,5 g) từ tất cả các nhóm được sử dụng để chiết xuất glycogen theo Ong và Khoo [18]. Các mẫu gan đầu tiên được nghiền nát, đồng nhất với 2 ml kali hydroxit (KOH) 30%, và đun sôi ở 100 độ / 30 phút. Sau đó, để kết tủa glycogen, hỗn hợp được xử lý hai lần với 4 ml etanol 95%, và mỗi lần, hỗn hợp được bảo quản ở 4 độ / 30 phút. Sau khi ly tâm ở 3000 vòng / phút / 15 phút, viên được rửa bằng 8 ml etanol 95% và sau đó được ly tâm với tốc độ 3000 vòng / phút / 15 phút. Glycogen thu được được hòa tan trong 1 ml nước cất. Nồng độ glycogen được theo dõi bằng thuốc thử anthrone. Mật độ quang được đọc ở bước sóng 625 nm.

2.9. Các xét nghiệm Hóa sinh.

Đường niệu được đo bằng Autokit thương mại (BioSystems, Tây Ban Nha) dựa trên phương pháp peroxidase glucose oxidase. Hemoglobin glycosyl hóa (HbA1c) được ước tính bằng cách sử dụng một bộ công cụ thương mại (chẩn đoán công nghệ Cal, INC, Hoa Kỳ), và cholesterol được xác định bằng bộ dụng cụ xét nghiệm thương mại (SGM-Italia, Roma, Ý). Triglycerid và creatinin niệu được ước tính bằng cách sử dụng các bộ xét nghiệm thương mại (Bio Sud Diagnostic SRL, Ricerca, Ý).

2.10. Mô bệnh học.

Sau khoảng thời gian 3 ± 1 ngày cố định trong 10 phần trăm formalin, tuyến tụy,quả thận, gan và mô động mạch chủ được rửa bằng nước cất trong 20 phút. Sau đó, chúng được khử nước với tiêu đề etanol tăng dần (30% trong 30 phút, 70% trong 30 phút, 95% trong 30 phút và 2 × 100% trong 60 phút, tương ứng). Sau bước khai sáng trong toluen (2 × 120 phút), các cơ quan được bao gồm bởi hỗn hợp parafintoluene (1V / 1V) trong 90 phút, sau đó bằng parafin (2 × 120 phút). Cuối cùng, các cơ quan được nhúng vào parafin trước khi phân cắt ở 7 μm (microtome Leitz 1512). Các phần tụy và gan được nhuộm bằng hematoxylin và eosin.Quả thậnvà các đoạn động mạch chủ được nhuộm bằng trichrome của Masson để cho thấy xơ hóa / collagen.

Trước khi nhuộm với hematoxylin và eosin, các phần được khử muối và ủ trong toluen (2 × 5 phút), sau đó được hydrat hóa bằng cách giảm tiêu đề etanol (tương ứng 100%, 95% và 70%) trong 5 phút. Sau đó, đối với nhuộm hematoxylin và eosin, sau 20 phút rửa, nhân tế bào được nhuộm bằng cách ngâm trong hematoxylin trong 5 phút, tiếp theo là 15 phút rửa bằng nước. Để nhuộm tế bào chất, các phần được ngâm trong eosin 1% trong 5 phút, sau đó rửa trong 2 phút. Sau khi tạo màu, các phần được khử nước bằng 100% etanol (2 x 1/2 phút) và toluen (2 x 2 phút). Quá trình nhuộm ba màu của Masson, sau khi hydrat hóa,quả thận, và các phần động mạch chủ đã được cố định lại trong dung dịch của Bouin trong 1 giờ / 56 độ. Sau đó, sau 10 phút rửa, các phần được nhuộm trong hematoxylin sắt của Weigert trong 2 phút. Sau khi rửa 10 phút, các phần được ngâm trong axit fuchsin trong 3 phút, và sau 10 phút rửa, chúng được axit photphomolybdic phân biệt trong 15 phút. Để nhuộm collagen, các phần được chuyển trực tiếp sang màu xanh lục nhạt trong 15 phút. Sau 2 phút phân biệt trong axit axetic 1 phần trăm, các phần được khử nước thông qua 95 phần trăm và 100 phần trăm etanol trong 1 phút và sau đó được làm sạch trong toluen (2 × 1 phút) [19–21].

Cuối cùng, các phần được nhuộm trên lamellas đã được gắn kết tối quan trọng. Sau khi làm khô, việc quan sát bằng kính hiển vi được thực hiện bằng vật kính 40x của kính hiển vi ánh sáng OlympusTokyo (Nhật Bản).

Để xác định tác dụng của thuốc trên mô tuyến tụy, số lượng và đường kính tế bào đảo tụy đã được tính toán. Để định lượng collagen trongquả thậncác phần, kết quả được cho điểm từ 0 đến 3 (0: không có collagen, 1: collagen yếu, 2: collagen trung bình và 3: collagen mạnh) [22]. Hiệu quả điều trị trên động mạch chủ được đánh giá bằng cách đo đường kính động mạch chủ, và tổn thương gan được làm sáng tỏ bằng sự phát triển của các giọt lipid.

2.11. Phân tích thống kê.

Tất cả các giá trị được biểu thị bằng giá trị trung bình ± SEM. Phân tích thống kê và so sánh các phương tiện được thực hiện bằng cách sử dụng bài kiểm tra Sinh viên không ghép đôi để so sánh phương tiện của hai nhóm và bài kiểm tra học sinh được ghép nối để so sánh hai phương tiện trong cùng một nhóm. Để xác định tác dụng của thuốc bảo vệ đối vớithậnvà gan, thử nghiệm chi-square đã được sử dụng. giá trị p<0.05 were="" considered="">

3. Kết quả

3.1. Ảnh hưởng của điều trị bằng thuốc đối với đường huyết lúc đói ở STZ-

Chuột tiểu đường gây ra. Ở chuột đối chứng đái tháo đường không được điều trị, đã quan sát thấy sự gia tăng đường huyết lúc đói đáng kể so với chuột đối chứng bình thường. Điều trị với 2 0 0 mg / kg AqTh làm giảm mức đường huyết từ tuần đầu tiên dùng thuốc và hiệu quả này là đáng kể ở lần thứ 3 (p <0. 001)="" và="" thứ="" 4="" tuần="" (p=""><0,05) so="" với="" chuột="" đái="" tháo="" đường="" không="" được="" điều="" trị.="" điều="" trị="" với="" 50="" mg="" kg="" eath="" làm="" giảm="" tăng="" đường="" huyết="" từ="" tuần="" thứ="" 2,="" và="" hiệu="" quả="" này="" có="" ý="" nghĩa="" (p=""><0,05) trong="" tuần="" thứ="" 3="" và="" thứ="" 4.="" vào="" ngày="" thứ="" 2,="" thứ="" 3="" và="" thứ="" 4="" hàng="" tuần,="" hiệu="" ứng="" ea="" *="" tương="" tự="" về="" mặt="" thống="" kê="" với="" 10="" mg="" kg="" acarbose="" (hình="">

3.2. Ảnh hưởng của thuốc đối với hoạt động -Glucosidase, nghiên cứu in vivo.

Ở chuột đối chứng bình thường, đường huyết tăng lên 1,48 g / l. 3 0 phút sau khi nạp đường sucrose và sau đó trở về giá trị bình thường ở mức 12 0 phút trong khi ở chuột mắc bệnh tiểu đường không được điều trị, đường huyết là tăng lên 2,76 g / l ở 30 phút nạp sucrose để đạt được 2,85 g / l ở 120 phút. 50 mg / kg EaTh đã ngăn ngừa đáng kể (p <0,05) ngăn="" ngừa="" sự="" tăng="" đường="" huyết="" do="" nạp="" sucrose="" ở="" 30="" và="" 60="" phút="" so="" với="" chuột="" tiểu="" đường="" không="" được="" điều="" trị.="" ở="" nhóm="" 200="" mg="" kg="" aqth,="" tác="" dụng="" chống="" tăng="" đường="" huyết="" đã="" được="" hiển="" thị.="" mức="" đường="" huyết="" lần="" lượt="" đạt="" 2,63="" g="" l="" và="" 2,70="" g="" l="" ở="" 30="" phút="" và="" 60="" phút,="" và="" chúng="" giảm="" xuống="" 2,21="" g="" l="" sau="" 120="" phút.="" 10="" mg="" kg="" acarbose="" đã="" ngăn="" ngừa="" đáng="" kể="" (p=""><0,01) ngăn="" ngừa="" sự="" tăng="" đường="" huyết="" do="" nạp="" sucrose="" ở="" 30,="" 60="" và="" 120="" phút="" so="" với="" kiểm="" soát="" bệnh="" tiểu="" đường.="" hiệu="" quả="" của="" acarbose="" tương="" tự="" về="" mặt="" thống="" kê="" với="" eaththeffffect="" (hình="">

3.3. Ảnh hưởng của thuốc

Điều trị về Trọng lượng cơ thể, Thức ăn và lượng nước uống vào. Sự tăng trọng cơ thể của những con chuột mắc bệnh tiểu đường không được điều trị đã giảm đáng kể (p <{{0}}. 0="" 5)="" so="" với="" những="" con="" chuột="" bình="" thường.="" aqth="" đã="" ngăn="" ngừa="" đáng="" kể="" (p=""><0. 0="" 5)="" ngăn="" ngừa="" sự="" sụt="" giảm="" trọng="" lượng="" cơ="" thể="" so="" với="" những="" con="" chuột="" mắc="" bệnh="" tiểu="" đường="" không="" được="" điều="" trị.="" những="" con="" chuột="" được="" điều="" trị="" bằng="" eath="" và="" acarbose="" không="" thay="" đổi="" đáng="" kể="" (p=""> 0. 0 5) làm thay đổi sự tăng trọng của cơ thể so với những con chuột bị tiểu đường không được điều trị. Khi kết thúc điều trị, lượng nước uống vào không thay đổi ở nhóm chuột bị tiểu đường không được điều trị, AqTh, EaTh và nhóm acarbose so với dữ liệu trước khi điều trị, trong khi lượng thức ăn tăng lên đáng kể ở chuột bị tiểu đường và chuột được điều trị bằng AqTh-, EaTh-, và acarbose (p <0,05, p=""><0,05, p=""><0,05, a="" dp=""><0,01, tương="" ứng)="" so="" với="" trước="" khi="" dùng="" thuốc="" (bảng="">

3.4. Ảnh hưởng của thuốc điều trị đến các thông số tiết niệu.

Sau thời gian điều trị {{0}} tuần, creatinin niệu và đường niệu đã tăng lên đáng kể (p <0. 0="" 5="" vàp=""><0,001, tương="" ứng)="" ở="" chuột="" mắc="" bệnh="" tiểu="" đường="" không="" được="" điều="" trị="" khi="" so="" sánh="" với="" chuột="" bình="" thường.="" uống="" aqth="" đã="" làm="" giảm="" đáng="" kể="" (p=""><0,05) creatinin="" niệu="" so="" với="" chuột="" đái="" tháo="" đường="" không="" được="" điều="" trị,="" nhưng="" không="" có="" sự="" khác="" biệt="" đáng="" kể="" về="" đường="" niệu="" khi="" so="" sánh="" với="" chuột="" đái="" tháo="" đường="" không="" được="" điều="" trị.="" điều="" trị="" bằng="" eath="" đã="" ngăn="" chặn="" sự="" gia="" tăng="" creatinin="" niệu="" so="" với="" chuột="" bình="" thường;="" tuy="" nhiên,="" eath="" không="" thay="" đổi="" đáng="" kể="" đường="" niệu.="" mặt="" khác,="" tác="" dụng="" của="" aqth="" và="" eath="" trên="" creatinin="" niệu="" và="" đường="" niệu="" tương="" tự="" về="" mặt="" thống="" kê="" với="" liều="" 10="" mg="" kg="" acarbose.="" cuối="" cùng,="" không="" có="" sự="" khác="" biệt="" đáng="" kể="" về="" thể="" tích="" nước="" tiểu="" khi="" so="" sánh="" dữ="" liệu="" trước="" và="" sau="" khi="" điều="" trị="" với="" aqth,="" eath,="" hoặc="" acarbose="" (bảng="">

3.5. Ảnh hưởng của điều trị bằng thuốc đối với các thông số sinh hóa.

Sau thời gian điều trị {{0}} tuần, HbA1c đã tăng lên đáng kể (p <0. 05)="" ở="" chuột="" mắc="" bệnh="" tiểu="" đường="" không="" được="" điều="" trị="" so="" với="" chuột="" bình="" thường.="" uống="" aqth="" đã="" ngăn="" chặn="" sự="" gia="" tăng="" hba1c="" so="" với="" chuột="" cống="" bình="" thường.="" vào="" cuối="" thời="" gian="" điều="" trị,="" số="" lượng="" glycogen="" gan="" giảm="" đáng="" kể="" (p=""><0,05) ở="" chuột="" mắc="" bệnh="" tiểu="" đường="" không="" được="" điều="" trị="" so="" với="" chuột="" bình="" thường.="" phương="" pháp="" điều="" trị="" aq="" *="" và="" ea="" *="" cho="" thấy="" không="" có="" ảnh="" hưởng="" đáng="" kể="" đến="" glycogen="" gan="" so="" với="" những="" con="" chuột="" mắc="" bệnh="" tiểu="" đường="" không="" được="" điều="" trị="" trong="" khi="" điều="" trị="" acarbose="" không="" làm="" thay="" đổi="" lượng="" glycogen="" gan="" so="" với="" những="" con="" chuột="" bình="" thường.="" cuối="" cùng,="" kết="" quả="" tổng="" cholesterol="" và="" triglycerid="" cho="" thấy="" không="" có="" sự="" thay="" đổi="" đáng="" kể="" sau="" khi="" điều="" trị="" aqth,="" eath,="" hoặc="" acarbose="" so="" với="" chuột="" bình="" thường="" và="" chuột="" bị="" tiểu="" đường="" (bảng="">

3.6. Ảnh hưởng của điều trị bằng thuốc đối với cơ quan nội tạng.

Bảng 4 cho thấy gan,quả thận, và trọng lượng tim vào cuối thời gian điều trị. Kết quả chỉ ra rằngquả thậncân nặng đã tăng lên đáng kể ở chuột mắc bệnh tiểu đường không được điều trị so với chuột bình thường. Điều trị với 200 mg / kg AqTh hoặc 50 mg / kg EaTh không làm thay đổi trọng lượng gan, thận và tim khi so sánh với những con chuột bị tiểu đường không được điều trị trong khi có sự gia tăng đáng kể về trọng lượng gan và tim của những con chuột được điều trị bằng acarbose so với những con chuột bị tiểu đường không được điều trị .

3.7. Quan sát mô bệnh học

3.7.1. Thay đổi tuyến tụy.

Quan sát bằng kính hiển vi ánh sáng của các tế bào đảo tụy từ chuột bình thường cho thấy hình dạng mô học bình thường với đường kính lớn và mật độ hạt cao (Hình 3). Ở chuột bị tiểu đường không được điều trị, đường kính và số lượng tế bào đảo nhỏ giảm đáng kể (p <0. 0="" 0="" 1="" và="" p=""><0. 0="" 1,="" tương="" ứng="" )="" đã="" được="" quan="" sát.="" xử="" lý="" chuột="" bằng="" 2="" 0="" 0="" mg="" kg="" aqth="" đã="" ngăn="" chặn="" đáng="" kể="" sự="" giảm="" đường="" kính="" và="" số="" lượng="" tế="" bào="" của="" đảo="" langerhans="" (p=""><0,01 và="" p=""><0,05, tương="" ứng).="" đồng="" thời,="" 50="" mg="" kg="" eath="" đã="" bảo="" vệ="" đáng="" kể="" (p=""><0,05) đường="" kính="" và="" số="" lượng="" tế="" bào="" chống="" lại="" sự="" giảm="" sút.="" điều="" trị="" với="" 10="" mg="" kg="" acarbose="" đã="" ngăn="" chặn="" đáng="" kể="" (p=""><0,05) sự="" giảm="" số="" lượng="" tế="" bào="" đảo="">

3.7.2. Những thay đổi về thận.

Nhuộm Masson đánh dấu trong các sợi collagen xanh lam / xanh lục, trong nhân nâu, trong tế bào chất của sợi cơ màu đỏ và trong các tế bào máu cam. Collagen mô kẽ tối thiểu được quan sát thấy ở nhóm bình thường (Hình 4). Sự gia tăng đáng kể (p <0. 0="" 1)="" của="" collagen="" mô="" kẽ="" được="" phát="" hiện="" ở="" chuột="" mắc="" bệnh="" tiểu="" đường="" không="" được="" điều="" trị.="" điều="" trị="" bằng="" 2="" 0="" {{1="" 0}}="" mg="" kg="" aqth="" và="" 50="" mg="" kg="" eath="" đã="" ngăn="" chặn="" đáng="" kể="" (p=""><0,001 và="" p=""><0,05, tương="" ứng)="" collagen="" mô="" kẽ="" so="" với="" chuột="" mắc="" bệnh="" tiểu="" đường="" không="" được="" điều="" trị,="" nhưng="" điều="" trị="" acarbose="" 10="" mg="" kg="" không="" thay="" đổi="" đáng="" kể="" (p=""> 0,05) collagen mô kẽ này. Mặt khác, collagen cầu thận được quan sát thấy ở 33,3% chuột bình thường. Ở chuột mắc bệnh tiểu đường, collagen cầu thận được phát hiện ở tất cả chuột (100%). Điều trị với 200 mg / kg AqTh đã làm giảm đáng kể (p <0,05) collagen="" cầu="" thận="" xuống="" 40%,="" nhưng="" ea="" *="" và="" acarbose="" thì="" không="" (hình="">

3.7.3. Thay đổi gan.

Kiểm tra các mặt cắt nhuộm hematoxylin và eosin cho thấy chuột cống bình thường có biểu hiện mô học bình thường. Ở những con chuột mắc bệnh tiểu đường không được điều trị, một thay đổi thoái hóa quan trọng trong mô gan đã được quan sát thấy. Các giọt lipid đã xuất hiện ở tất cả các con chuột (1 0 0 phần trăm). Điều trị với 200 mg / kg AqTh và 50 mg / kg EaTh đã làm giảm đáng kể tác dụng này (p <0,05). tỷ="" lệ="" bảo="" vệ="" lần="" lượt="" là="" 60="" và="" 50="" phần="" trăm.="" tuy="" nhiên,="" điều="" trị="" acarbose="" 10="" mg="" kg="" không="" làm="" giảm="" tổn="" thương="" gan="" này="" (hình="">

3.7.4. Thay đổi động mạch chủ.

Quan sát bằng kính hiển vi ánh sáng cho thấy những con chuột bị tiểu đường không được điều trị có đường kính động mạch chủ bình thường so với những con chuột bình thường. Điều trị với 200 mg / kg AqTh, 50 mg / kg EaTh, hoặc 10 mg / kg acarbose không làm thay đổi đáng kể đường kính động mạch chủ so với chuột bình thường và chuột đái tháo đường (Hình 6).

4. Thảo luận

Trong nghiên cứu này, lần đầu tiên chúng tôi đã chứng minh tác dụng chống tiểu đường của việc sử dụng T. hirsuta trung hạn (4 tuần) và ngăn ngừathậnvà các biến chứng gan ở chuột tiểu đường do STZ gây ra.

Kết quả của chúng tôi chỉ ra rằng điều trị trung hạn với 200 mg / kg AqTh hoặc 50 mg / kg EaTh làm giảm đáng kể đường huyết lúc đói ở chuột tiểu đường được điều trị bằng STZ so với chuột tiểu đường không được điều trị bằng STZ. EaTh đã cho thấy hoạt động ức chế -glucosidase tương tự khi so sánh với 10 mg / kg acarbose, nhưng AqTh đã không ức chế hoạt động -glucosidase sau khi tải sucrose. Những kết quả này chỉ ra rằng tác dụng hạ đường huyết trung hạn của Ea * có liên quan đến sự ức chế men -glucosidase ở ruột. Vì vậy, phát hiện này khẳng định kết quả trước đây của chúng tôi [13] trong khi tác dụng chống đái tháo đường của Aq * dường như liên quan đến một cơ chế khác ngoài con đường -glucosidase. Ngoài ra, chúng tôi đã quan sát thấy sự giảm mức HbAc1 ở những con chuột bị tiểu đường được điều trị Aq * trong khi điều trị bằng Ea * không làm thay đổi mức HbAc1 khi so sánh với những con chuột bị tiểu đường không được điều trị. Điều này giải thích tại sao các chất ức chế -glucosidase thường được kê chung với các loại thuốc trị đái tháo đường khác trong điều trị đái tháo đường.

Nghiên cứu mô bệnh học của các phần của tuyến tụy cho thấy rằng việc sử dụng AqTh và EaTh trong 4 tuần làm tăng đáng kể đường kính và số lượng tế bào ở đảo nhỏ Langerhans. Các nghiên cứu tương tự đã chứng minh rằng nhiều chất chiết xuất từ ​​thực vật đã khôi phục đáng kể đường kính của các đảo nhỏ và số lượng tế bào ở chuột mắc bệnh tiểu đường [23–25].

Do đó, cơ chế hoạt động hợp lý của AqTh trong việc kiểm soát mức đường huyết có thể là tăng cường bài tiết insulin từ các tế bào tuyến tụy. Cũng như các cơ chế khả thi khác, AqTh có thể làm nhạy cảm thụ thể insulin với insulin hoặc kích thích tế bào gốc của đảo Langerhans trong tuyến tụy của chuột mắc bệnh tiểu đường do STZ gây ra [25].

Do đó, chúng tôi kết luận rằng các hợp chất chống tăng đường huyết có trong AqTh khác với trong EaTh.

Nhiều nghiên cứu đã chứng minh rằng các chất chuyển hóa thứ cấp như flavonoid, tannin và terpenoid có khả năng ức chế men alpha-glucosidase [26–28]. Trong một nghiên cứu trước đây của nhóm chúng tôi, một phần giàu polyphenol của T. hirsutahas đã chứng minh tác dụng chống tiểu đường mạnh ở chuột bị tiểu đường [29]. Do đó, hoạt động ức chế -glucosidase của EaTh có lẽ là do sự hiện diện của flavonoid.

Ai cũng biết rằng bệnh tiểu đường có liên quan đến các biến chứng mạch máu vĩ mô và vi mạch như bệnh thận. Thống kê cho thấy trong số tất cả bệnh nhân lọc máu, bệnh nhân tiểu đường chiếm 20,6% năm 2001 so với 13,1% năm 1995 và 6,9% năm 1989. Tỷ lệ tử vong của bệnh nhân lọc máu ở bệnh nhân tiểu đường cao hơn không đáng kể so với người không bị tiểu đường (241,4 / 1000 so với 153,99 / 1000 người-năm) [30]. Thời gian sống thêm trung bình của bệnh tiểu đường loại 2 khi chạy thận nhân tạo là khoảng 3 năm [31, 32]. Bệnh thận do đái tháo đường được đặc trưng bởi sự tích tụ của một số protein như collagen trong trung bì cầu thận và trong không gian kẽ thận dẫn đếnthậnxơ hóa và như vậy đểthậnthất bại [33–35]. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã chứng minh rằng dùng đường uống trung hạn 200 mg / kg AqTh hoặc 50 mg / kg EaTh ngăn ngừa tăng creatinin niệu và collagen thận mô kẽ khi so sánh với chuột mắc bệnh tiểu đường không được điều trị như thể hiện trongquả thậnkết quả mô bệnh học. Những phát hiện này chứng minh rằng AqTh và EaThcould bảo vệ chống lại sự xơ hóa thận thông qua việc ức chế sự tích tụ protein ma trận ngoại bào (ECM). Những kết quả này cũng tương tự như các nghiên cứu dân tộc học khác đã chứng minh rằng tỏi và Sclerocaryabirrea cải thiện quá trình xơ hóa thận ở bệnh thận do đái tháo đường [36, 37]. Tác dụng bảo vệ chống lại sự tích tụ protein ECM ở thận là do sự ức chế của protein kinase B / đích của động vật có vú đối với con đường truyền tín hiệu rapamycin (PKB / mTOR) [38]. Các nghiên cứu gần đây đã chứng minh rằng sự hoạt hóa của PKB gây ra sự hoạt hóa của mTORC1 và protein hạ lưu của nó làp70S6K, là những chất điều hòa quan trọng đối với sự phát triển tế bào, tăng sinh tế bào và tổng hợp protein [39, 40].

Ảnh hưởng củacistanchecải thiện chức năng thận

Do đó, việc quản lý bệnh đái tháo đường bằng các hợp chất AqTh và EaTh có thể có những tác dụng hữu ích đối vớithậnchức năng ở bệnh nhân tiểu đường

Bằng chứng cho thấy rằng ở chuột mắc bệnh tiểu đường, một sự thay đổi phức tạp trong hoạt động của các enzym chống oxy hóa đã được quan sát [41]. Sự thay đổi này dẫn đến tổn thương mô và đóng một vai trò quan trọng trong cơ chế bệnh sinh của các biến chứng tiểu đường. Trong nghiên cứu này, kết quả mô bệnh học gan cho thấy những con chuột mắc bệnh tiểu đường không được điều trị sẽ bị nhiễm mỡ gan đặc trưng bởi các giọt lipid. Các nghiên cứu khác cho thấy gan đã bị hoại tử ở chuột mắc bệnh tiểu đường do STZ [42]. STZ được coi là một mô hình cảm ứng bệnh tiểu đường cổ điển vì nó gây ra độc tính đối với tế bào tuyến tụy và làm chết tế bào [43], dẫn đến giảm natri huyết và tăng đường huyết. Insulin đóng một vai trò chuyển hóa quan trọng như một chất ức chế sự phân giải lipid trong mô mỡ [44]. Do đó, giảm insulin máu trong bệnh tiểu đường dẫn đến tăng giải phóng axit béo tự do (FFAs) trong máu [45] và dòng axit vào gan. Sự tích tụ triglycerid trong gan xảy ra khi lượng lipid đến gan vượt quá khả năng gan để xuất triglycerid vào máu [45], nguyên nhân gây ra nhiễm mỡ gan như một biến chứng của bệnh tiểu đường [46].

Trong nghiên cứu này, dữ liệu mô bệnh học cho thấy rằng việc uống trung hạn 200 mg / kg AqTh hoặc 50 mg / kg EaTh bảo vệ đáng kể gan dưới tình trạng nhiễm mỡ thông qua việc giảm tích tụ giọt lipid. Các phát hiện tương tự đã được báo cáo bởi Eliza et al. [47] nơi Costus speciosus giảm rối loạn gan. Ngoài ra, các nghiên cứu khác cho thấy Camellia oleifera seedamel chống nhiễm mỡ gan thông qua cơ chế điều hòa FFA [48] và curcumin làm giảm viêm gan nhiễm mỡ và lắng đọng lipid thông qua việc là một chất chống oxy hóa và có vai trò chống viêm và loại bỏ gốc tự do [49]. Tuy nhiên, điều trị acarbose không có tác dụng bảo vệ gan thích hợp này. Điều này khẳng định tác dụng phụ của thuốc này trên gan [50].

Hơn nữa, T. hirsuta chứa sterol, coumarin, tecpen, tannin, rượu béo, lacton, ankan và ankan [51]. Điều thú vị là, tác dụng chống tăng đường huyết và chống đái tháo đường của AqTh và EaTh có thể là do sự hiện diện của các chất phytochemical này hoặc các hợp chất chưa biết khác.

5. Kết Luận

Kết luận, nghiên cứu của chúng tôi đã chỉ ra rằng việc sử dụng AqTh và EaTh của T. hirsuta trong thời gian dài có khả năng làm giảm lượng glucose trong máu ở chuột mắc bệnh tiểu đường do STZ gây ra. Tác dụng hạ đường huyết của EaTh có thể được giải thích một phần là do ức chế hoạt động của men -glucosidase trong ruột. Và hoạt động hạ đường huyết AqTh có thể là do sự kích thích tiết insulin từ các tế bào đảo tụy. Ngoài ra, AqTh và EaTh đã cho thấy tác dụng phòng ngừa quan trọng đối vớithậnxơ hóa và biến chứng gan nhiễm mỡ. Do đó, những phát hiện này cho thấy AqTh và EaTh có thể được coi là một phương pháp điều trị đái tháo đường bằng đường uống hiệu quả. Hiện tại, các nghiên cứu của chúng tôi đang tập trung vào việc phân lập và xác định các hợp chất hoạt động của EaTh và AqTh, chịu trách nhiệm về tác dụng chống đái tháo đường củaT. hirsuta.

Các từ viết tắt

AqTh: Chiết xuất nước của cộng với ymelaea hirsuta

DM1: Bệnh tiểu đường loại 1

DM2: Bệnh tiểu đường loại 2

EaTh: Phần etyl axetat của cộng với ymelaea hirsuta

ECM: Ma trận ngoại bào

ESRD: Giai đoạn cuốithậndịch bệnh

FFA: Axit béo tự do

mTOR: Động vật có vú mục tiêu sử dụng rapamycin

PKB: Protein kinase B

STZ: Streptozotocin

T. hirsuta: cộng với ymelaea hirsuta

UMPO: Thủ hiến Mohamed của Đại học Herbarium University of

Oujda, Maroc

WHO: Tổ chức Y tế Thế giới.

Tính sẵn có của dữ liệu

Dữ liệu được sử dụng để hỗ trợ các phát hiện của nghiên cứu này có sẵn theo yêu cầu của các tác giả.

Xung đột lợi ích

Các tác giả tuyên bố rằng không có xung đột lợi ích.

Sự nhìn nhận

Các tác giả muốn bày tỏ sự đánh giá cao của họ tới Ramdaoui Karim và Badraoui Mustapha vì sự hỗ trợ kỹ thuật của họ.

cistanche bienfaitsvìquả thận

Từ: 'Tác dụng có lợi của Thymelaea hirsuta đối với sự thoái hóa đảo tụy, xơ hóa thận và tổn thương gan' Sanae Abid

--- Tạp chí Khoa học Thế giới