Chương 1: Phản ứng miễn dịch đối với nhiễm trùng SARS-CoV-2 và tiêm chủng ở bệnh nhân lọc máu và người nhận ghép thận

Để biết thêm thông tin. sự tiếp xúctina.xiang@wecistanche.com

Trừu tượng: Bệnh nhân lọc máu vàghép thận(KTX) người nhận bị suy giảm hệ thống miễn dịch và cho thấy phản ứng giảm đối với hội chứng hô hấp cấp tính nghiêm trọng coronavirus loại 2 (SARS-CoV-2) tiêm chủng. Chúng tôi đã thực hiện phân tích hồi cứu 1505 phép đo SARS-CoV-2 huyết thanh học thu được từ 887 bệnh nhân lọc máu và 86 người nhận KTX. Kết quả được phân tách bởi các phân nhóm bệnh nhân (lọc máu/KTX) cũng như tình trạng SARS-CoV-2. Tiêu chí thứ hai bao gồm những bệnh nhân chưa ngây thơ với SARS-CoV-2 đã hoặc chưa tiêm vắc-xin COVID-19 và bệnh nhân hồi phục được tiêm nhắc lại. Huyết thanh của 27 người khỏe mạnh được tiêm chủng đóng vai trò là nhóm tham khảo. Phản ứng miễn dịch tế bào do vắc-xin gây ra đã được định lượng bằng xét nghiệm phóng thích interferon-γy ở 32 người nhận KTX. Chúng tôi xác định tỷ lệ chuyển đảo huyết thanh lần lượt là 92,6%, 93,4% và 71,4% ở những bệnh nhân lọc máu được tiêm BNT162b2, mRNA-1273 hoặc AZD1222. Chuẩn độ kháng thể kháng SARS-CoV-2 do tiêm chủng thấp hơn ở những bệnh nhân lọc máu so với những người khỏe mạnh và tiêm vắc-xin bằng mRNA-1273 gây ra chuẩn độ cao hơn BNT162b2. Tỷ lệ chuyển đảo huyết thanh ban đầu là 39,5% ở những người nhận KTX được tiêm BNT162b2. Một mô hình hồi quy tuyến tính đã xác định thuốc có axit mycophenolate-mofetil/mycophenolic là một yếu tố nguy cơ độc lập đối với việc thiếu chuyển đảo huyết thanh. Trong một nhóm gồm 32 người nhận KTX, phản ứng miễn dịch tế bào và dịch thể đối với SARS-CoV-2 chỉ có thể được phát hiện ở ba bệnh nhân. Tóm lại, tỷ lệ chuyển đảo huyết thanh do vắc-xin gây ra ở bệnh nhân lọc máu tương tự nhau so với những người khỏe mạnh nhưng bị suy giảm mạnh ở những người nhận KTX. Chuẩn độ lgG chống SARS-CoV-2 do tiêm chủng tích cực kép thấp hơn đáng kể ở cả hai nhóm so với những người khỏe mạnh và phản ứng miễn dịch với tiêm chủng biến mất nhanh chóng.

Từ khoá: COVID-19;ức chế miễn dịch; bảo vệ; chuẩn độ; kháng thể; bệnh thận

Nhấp vào đây để tìm hiểu về cistanche được sử dụng để làm gì

1. Giới thiệu

Bệnh nhân chạy thận nhân tạo (HD) và người được ghép thận (KTX) có nguy cơ mắc bệnh coronavirus nặng-19 (COVID-19) [1,2]. Đáng ngạc nhiên, mặc dù số lượng hạn chế, các nghiên cứu quan sát đã cho thấy không có sự khác biệt trong phản ứng miễn dịch đối với hội chứng hô hấp cấp tính nghiêm trọng coronavirus loại 2 (SARS-CoV-2) sau khi nhiễm trùng tự nhiên ở những bệnh nhân bị ức chế miễn dịch mãn tính và những người có sức đề kháng bình thường [3]. Rõ ràng, tuổi tác và sự yếu đuối cũng như số lượng và mức độ nghiêm trọng của các bệnh đi kèm từ trước — nhiều hơn ức chế miễn dịch dược lý — là những yếu tố tiên lượng cho một bệnh đi kèm nghiêm trọngBệnh COVID-19diễn biến ở cả bệnh nhân suy giảm miễn dịch và có sức đề kháng bình thường [4,5]. Mặc dù vậy, dữ liệu sức khỏe cộng đồng châu Âu cho thấybệnh thận mãn tính(CKD ·) và lọc máu như các bệnh đồng mắc tiên lượng quan trọng liên quan đến tăng tỷ lệ tử vong khi nhiễm SARS-CoV-2 [6]. Ngoài ra, suy giảm chuyển đảo huyết thanh và tuổi thọ của SARS-CoV-2phản ứng miễn dịchsau khi nhiễm bệnh tiếp tục đe dọa bệnh nhân HD và KTX [4,7,8].

Tiêm chủng tích cực chống lại SARS-CoV-2, đặc biệt là bằng vắc-xin axit ribonucleic (mRNA) thông tin, được coi là chiến lược phòng ngừa hiệu quả nhất để bảo vệ những người dễ bị tổn thương khỏi nhiễm trùng và các khóa học COVID-19 nghiêm trọng [9]. Tuy nhiên, cả cường độ và thời gian đáp ứng miễn dịch sau khi tiêm vắc-xin ở các nhóm bệnh nhân cụ thể đều chưa được đặc trưng đầy đủ. So với dân số nói chung, bệnh nhân HD được coi là có biểu hiện chuẩn độ kháng thể SARS-CoV-2 giảm và có đáp ứng miễn dịch chậm [10-12]. Sau lần tiêm thứ hai, tỷ lệ chuyển đảo huyết thanh có thể cao tới 90% và phản ứng miễn dịch của tế bào có thể được phát hiện ở khoảng 80% người được tiêm chủng [13-15]. Dữ liệu có sẵn ngày càng tăng từ các nghiên cứu khác nhau về hiệu quả của việc tiêm vắc-xin SARS-CoV-2 ở những người nhận ghép tạng rắn (SOT) cho thấy phản ứng miễn dịch thể dịch và tế bào bị suy giảm mạnh so với dân số nói chung, với chuyển đảo huyết thanh được báo cáo dưới 45% và ngoài ra còn có phản ứng tế bào bị suy yếu [16-19].

Cho đến nay, định nghĩa về hiệu giá kháng thể mang lại sự bảo vệ vẫn đang được nghiên cứu chuyên sâu và việc xác định nồng độ kháng thể không được thực hiện thường xuyên [20]. Chúng tôi đã phân tích một cách có hệ thống tỷ lệ chuyển đảo huyết thanh và hiệu giá kháng thể ở 681 bệnh nhân HD và 86 người nhận KTX để mô tả phản ứng dịch thể đối với cả nhiễm trùng và tiêm chủng SARS-CoV-2 đã được PCR xác nhận (BNT162b2 (BioNTech / Pfizer, Mainz, Đức / New York, NY, Hoa Kỳ), mRNA-1273 (Moderna, CA, Hoa Kỳ) và AZD1222 (AstraZeneca / Đại học Oxford, Cambridge / Oxford, Vương quốc Anh)) theo cách hồi cứu. Huyết thanh của 27 người khỏe mạnh được tiêm chủng mRNA đóng vai trò là nhóm tham khảo. Hơn nữa, phản ứng miễn dịch của tế bào đã được định lượng tiềm năng ở 32 người nhận KTX để mô tả đầy đủ đặc điểm bảo vệ do vắc-xin mRNA gây ra.

2. Vật liệu và phương pháp

2.1. Thiết kế nghiên cứu, bệnh nhân và tuyên bố đạo đức

Để mô tả phản ứng hài hước đối với cả nhiễm trùng và tiêm chủng, chúng tôi đã phân tích hồi cứu huyết thanh SARS-CoV-2 từ bệnh nhân lọc máu và KTX được thực hiện tại Bệnh viện Đại học Cologne, Đức, bắt đầu từ đầu đại dịch COVID-19 vào tháng 2020 năm 2021 cho đến tháng XNUMX năm XNUMX. Nhóm thuần tập này bao gồm 206 bệnh nhân lọc máu ngây thơ SARS-CoV-2, trong đó kháng thể chống SARS-CoV-2 được sàng lọc ba tháng một lần trong một năm từ tháng 2020 năm 2021 đến tháng XNUMX năm XNUMX. Về tiêm chủng, các phép đo kháng thể đã thu được từ tháng 2021 năm 627 đến tháng 2021 năm 627 từ 1625 bệnh nhân lọc máu chưa ngây thơ SARS-CoV-2, trong đó 138 người đã nhận được BNT162b2 (BNT162b2 (BioNTech / Pfizer, Mainz, Ger-many / New York, NY, Hoa Kỳ), lần lượt là 138 mRNA-1273 (Moderna, CA, Hoa Kỳ) và 14 AZD1222 (AstraZeneca / Đại học Oxford, Cambridge / Oxford, Vương quốc Anh). Ngoài ra, huyết thanh của 54 bệnh nhân lọc máu đã khỏi bệnh SARS-CoV-2

đã thu được, trong đó 38 người đã nhận được một mũi tiêm tăng cường (tất cả đều là BNT162b2). Liên quan đến những người nhận KTX ngây thơ với SARS-CoV-2, huyết thanh được lấy từ 86 bệnh nhân để theo dõi tiêm chủng BNT162b2. Huyết thanh của 27 người khỏe mạnh được tiêm mRNA-1273 được phục vụ như một nhóm đối chứng. Tất cả các loại vắc-xin đã được sử dụng trong thói quen lâm sàng theo quyết định của bác sĩ điều trị và theo lời khuyên của các nhà sản xuất. Tất cả các phép đo được thực hiện theo thói quen lâm sàng và được phân tích hồi cứu sau khi được hội đồng đánh giá thể chế địa phương phê duyệt (Ủy ban Đạo đức của Khoa Y thuộc Đại học Cologne, Đức, EK21-1398). Ngoài ra, các phản ứng miễn dịch thể dịch và tế bào đã được kiểm tra tiềm năng ở 32 người nhận KTX ngây thơ với SARS-CoV-2 trong khoảng thời gian từ tháng 2021 đến tháng XNUMX năm XNUMX. Nghiên cứu này cũng đã được Ủy ban Đạo đức của Khoa Y thuộc Đại học Cologne, Đức (EK21-1112) phê duyệt và được thực hiện theo Tuyên bố của Helsinki.

2.2.Xét nghiệm huyết thanh học để phát hiện kháng thể kháng SARS-CoV-2

IgG chống SARS-CoV-2 nhắm vào protein gai (S) được phát hiện bởi ELISA IgG kháng sars-CoV-2 euroimmun bán tự nhiên bằng cách sử dụng Elisa Euroimmun Analvzer I (Eu-roimmun Diagnostik, Lübeck, Đức) và bởi định lượng IDKeanti-SARS-CoV-2 IgG ELISA (Immundiagnostik AG, Bensheim, Đức) sử dụng DYNEX DSX (Dynex Technologies, Chantilly, VA, Hoa Kỳ), cả hai đều sử dụng kháng nguyên S1 tái tổ hợp của protein gai hoặc xét nghiệm miễn dịch vi hạt phát quang hóa học của Abbott cho định lượng phát hiện RBD chống tăng đột biến (miền liên kết thụ thể)IgG (SARS-CoV-2 IgG II Quant)bằng hệ thống tự động Alinity i (Abbott, Abbott Park, IL, Hoa Kỳ). Kết quả của các xét nghiệm IgG định lượng nhắm vào S1 hoặc RBD được thể hiện bằng BAU / mL (đơn vị kháng thể liên kết) bằng cách sử dụng hệ số chuyển đổi được tạo ra từ tiêu chuẩn nội bộ của Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) và được cung cấp bởi mỗi nhà sản xuất. Ngoài ra, 29 bệnh nhân từ nhóm chạy thận nhân tạo đã được kiểm tra song song bằng cách sử dụng hai xét nghiệm Định lượng SARS-CoV-2 IgG này để xác định xem họ có cung cấp chuẩn độ IgG tương đương hay không. Các kháng thể nhắm mục tiêu protein nucleocapsid (NC) được phát hiện bởi xét nghiệm miễn dịch pan-immunoglobulin Elecsys Elecsys xét nghiệm miễn dịch điện phát quang chống SARS-CoV-2 (ECLIA) bằng cách sử dụng Cobas 8000 (Roche Diagnostics, Mannheim, Đức). Tất cả các xét nghiệm đã được giải thích theo khuyến nghị của nhà sản xuất.

2.3.Xác định đáp ứng của tế bào T đối với SARS-CoV-2

Phản ứng qua trung gian tế bào T CD4+ và CD8+ đối với SARS-CoV-2 được đo bằng xét nghiệm phóng thích interferon-γ máu toàn phần thương mại (IFN-γ) (IGRA) QuantiFERON(8) SARS-CoV-2 RUO(QIAGEN GmbH, Hilden, Đức). Các tế bào T được kích thích với các biểu mô của các tiểu đơn vị S1 và S2 của protein gai SARS-CoV-2 (kháng nguyên 1 và 2). Nồng độ IFN-y được đo bằng xét nghiệm miễn dịch phát quang hóa học (CLIA), như được mô tả trước đây [21]. Mức IFN-y > 0,15 IU / mL được ghi là phản ứng [22].

2.4.Thống kê

Các phân tích thống kê được thực hiện bằng phần mềm GraphPad Prism phiên bản 5 (Graph-Pad Prism Software Inc.San Diego, CA, USA) và SPSSversion 27.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, Hoa Kỳ). Sự phân bố không bình thường của chuẩn độ kháng thể được biểu thị dưới dạng phạm vi trung bình ± xen kẽ và được so sánh bằng cách sử dụng các xét nghiệm Kruskal-Wallis / Mann-Whitney U và Tương quan Spearman. Về đặc điểm bệnh nhân, các biến phân loại được tóm tắt bằng số và tần số tuyệt đối, và các biến số theo phạm vi trung bình và xen kẽ, tương ứng. Các biến phân loại được phân tích bằng cách sử dụng kiểm tra chi-square và các biến số sử dụng thử nghiệm Mann-Whitney U theo cách mô tả. Các mối tương quan — được điều chỉnh cho xét nghiệm, tuổi tác và thời gian đã sử dụng giữa sự kiện và mẫu máu — được tính toán bằng cách sử dụng mô hình hồi quy tuyến tính với phân tích Spearman. p<0.05 was="" considered="" statistically="" significant.="" to="" examine="" the="" comparability="" of="" the="" two="" immunoassays,="" a="" passing-bablok="" regression="" was="" carried="" out="" using="" the="" software="" analyze-it="" v5.50(analyse-it="" software,="" ltd.="" leeds,="">