Hiệu quả của liệu pháp hạ thân nhiệt chống lại chấn thương thận ở mô hình chuột bị ngừng tim do ngạt thở: Α Tập trung vào tỷ lệ sống sót, sinh lý bệnh và các enzym chống oxy hóa
Mar 25, 2022
VẬY EUN KIM1*, HA ‑ YOUNG SHIN2*, EUI ‑ YONG LEE2, YEO ‑ JIN YOO2, RYUN ‑ HEE KIM2, ET AL
Trừu tượng.
Mặc dù rối loạn chức năng đa cơ quan có liên quan đến tỷ lệ sống sót sau khi ngừng tim (ca), phần lớn các nghiên cứu cho đến nay tập trung vào tim và não, và một số nghiên cứu đã xem xét suy thận. Do đó, mục tiêu của nghiên cứu này là để kiểm tra tác động của hạ thân nhiệt điều trị đối với tỷ lệ sống sót, sinh lý bệnh và các enzym chống oxy hóa trong thận chuột sau khi bị ngạt thở CA. Chuột đã hy sinh một ngày sau khi theo CA. Tỷ lệ sống sót, được ước tính bằng cách sử dụng phân tích Kaplan ‑ Meier, là 42,9% một ngày sau ca. Tuy nhiên, hạ thân nhiệt, được gây ra sau ca làm tăng đáng kể tỷ lệ sống sót (71,4%). ở những con chuột bị nhiễm Ca, nồng độ nitơ urê huyết thanh tăng lên đáng kể sau ca một ngày. Ngoài ra, nồng độ creatinin huyết thanh đã tăng lên đáng kể sau CA một ngày. Tuy nhiên, ở những con chuột CA tiếp xúc với tình trạng hạ thân nhiệt, nồng độ urê nitơ và creatinin giảm đáng kể sau khi ăn. Nhuộm mô sinh học cho thấy sự gia tăng đáng kể tổn thương thận theo thời gian sau khi nhóm bệnh nhân ung thư máu bị ca. Tuy nhiên, tổn thương thận đã giảm đáng kể ở nhóm hạ thân nhiệt. phân tích hóa mô miễn dịch của thận cho thấy sự giảm đáng kể các enzym chống oxy hóa (đồng ‑ kẽm superoxide dismutase, mangan superoxide dismutase, glutathione peroxidase và catalase) theo thời gian ở nhóm bệnh noãn. Tuy nhiên, trong nhóm hạ thân nhiệt, các enzym này đã tăng lên đáng kể sau ca bệnh. Nói chung, các kết quả cho thấy rối loạn chức năng thận sau ca ngạt có liên quan chặt chẽ đến tỷ lệ sống sót sớm, và liệu pháp hạ thân nhiệt làm giảm tổn thương thận thông qua cơ chế chống oxy hóa hiệu quả.
Từ khóa: ngừng tim ngạt, hội chứng ngừng tim sau ngừng đập, điều trị hạ thân nhiệt, thận, mô bệnh học, các enzym chống oxy hóa
Tiếp xúc:joanna.jia@wecistanche.com
cistanche bị mất các loại thảo mộc đế chếngăn cảnbệnh thận, bấm vào đây để lấy mẫu
Giới thiệu
Ngừng tim (ca), còn được gọi là ngừng tim phổi hoặc ngừng tuần hoàn, liên quan đến việc ngừng đột ngột lưu thông máu bình thường do tim không thể bơm máu đầy đủ (1). ca gây thiếu máu cục bộ toàn bộ cơ thể, gây tổn thương nhiều cơ quan, bao gồm não, tim, thận và gan. Phần lớn các nghiên cứu liên quan đến ca trong nửa thế kỷ qua đã tập trung vào việc cải thiện tỷ lệ tái phát thành công của tuần hoàn tự phát (roSc), với những tiến bộ đáng kể (2‑4). Mặc dù hồi sức ngay lập tức có thể cải thiện roSc, tỷ lệ sống sót với tiên lượng xấu là một mối quan tâm (5‑7). Hội chứng sau ngừng tim (PcaS) đề cập đến hậu quả sinh lý bệnh của roSc sau khi hồi sinh tim phổi thành công (cPr) sau ca (8). PcaS là nguyên nhân chính làm giảm tỷ lệ sống sau roSc (9). Tỷ lệ sống sót sau PcaS thời kỳ đầu ở bệnh nhân chỉ là 30 phần trăm (5). Không còn nghi ngờ gì nữa, tim và não là những cơ quan quan trọng trong PcaS. Trong khi đó, các nghiên cứu hiếm khi khảo sát suy thận sau ca (1,10,11). Suy giảm chức năng thận thoáng qua thường gặp ở những bệnh nhân sống sót sau ca (12). Tỷ lệ và tác động của rối loạn chức năng thận sau ca không được mô tả rõ (13). Ngoài ra, nghiên cứu trước đây của chúng tôi cho rằng tỷ lệ sống sót sớm thấp sau roSc trong các nghiên cứu thực nghiệm (14) có thể liên quan nhiều đến suy thận như chấn thương thận cấp tính. một trong những nguyên nhân phổ biến nhất của chấn thương thận cấp tính là ca (15). chấn thương thận cấp tính là một PcaS phổ biến phát triển ở ~ 30 phần trăm bệnh nhân ở bệnh viện với ca (16).
các loại oxy phản ứng (roS) bao gồm một loạt các chất trung gian oxy, bao gồm anion gốc tự do superoxide (o2 • -), hydro peroxit phi kim loại (H2o2), gốc tự do hydroxyl phản ứng cao (OH •), peroxynitrit (onoo) , và oxy singlet (1o2) (17). roS đã được phát hiện là đóng một vai trò thiết yếu trong một số tình trạng thận thực nghiệm, chẳng hạn như suy thận cấp do thiếu máu cục bộ, thải ghép thận, viêm cầu thận cấp và các bệnh thận nhiễm độc (18). Có bằng chứng đáng kể hỗ trợ sự tổng hợp roS ngay sau đột quỵ do thiếu máu cục bộ cấp tính (19) và nhồi máu cơ tim cấp tính (20). roS được biết đến là chất quan trọng trong các bệnh thiếu máu cục bộ, chẳng hạn như đột quỵ và nhồi máu cơ tim. Ví dụ, Hackenhaar và cộng sự (21) báo cáo rằng roS được tạo ra trong máu của bệnh nhân PcaS; tuy nhiên, các nghiên cứu hiếm khi khảo sát sự hình thành roS trong thận sau giai đoạn đầu sau PcaS (22,23).
Vì lý do này, người ta đưa ra giả thuyết rằng roS rất quan trọng trong chấn thương thận sau ca và góp phần vào tỷ lệ sống sót thấp trong giai đoạn đầu của PcaS. Để kiểm tra giả thuyết này, ca ngạt đã được gây ra ở chuột và tỷ lệ sống sót trong giai đoạn đầu của PcaS được quan sát. Ngoài ra, hạ thân nhiệt ngay lập tức và chậm trễ đã được thực hiện để tăng tỷ lệ sống sót thấp liên quan đến PcaS sau roSc. Hơn nữa, rối loạn chức năng thận được phân tích mô bệnh học và những thay đổi do roS gây ra, chẳng hạn như đồng ‑ kẽm superoxide dismutase (Sod ‑ 1), mangan superoxide dismutase (Sod ‑ 2), catalase (caT) và glutathione peroxidase (GPX) đã được đánh giá thông qua phân tích mô hóa miễn dịch sau roSc.
cistanche pharma đặc biệt
Nguyên liệu và phương pháp
Động vật thí nghiệm và nhóm.Tổng số 62 con chuột Sprague-Dawley (Sd) đực (trọng lượng, 270‑300 g; tuổi, 10 tuần) được lấy từ trung tâm động vật thí nghiệm của trường đại học quốc gia Jeonbuk (iksan, Hàn Quốc). Chúng được nuôi ở nhiệt độ 23 ± 2˚C và độ ẩm 60 ± 10 phần trăm trong chu kỳ sáng / tối 12 ‑ h. Họ được cung cấp thức ăn và nước uống miễn phí. tất cả các quy trình thử nghiệm đã được phê duyệt dựa trên các quy trình đạo đức và chăm sóc khoa học bởi ủy ban chăm sóc và sử dụng động vật của trường đại học quốc gia Jeonbuk (phê duyệt số JBnu 2020‑084).
Động vật thí nghiệm được phân tầng thành ba loại [nhóm hoạt động giả tạo, ca trong điều kiện không phải mẹ đẻ, và điều trị bằng ca và hạ thân nhiệt (HT)] như sau: i) nhóm I, nhóm giả mạo (n =5) được duy trì trong điều kiện chăn nuôi bình thường không có ca; ii) nhóm ii, nhóm bệnh bình thường không được điều trị bằng phương pháp hạ thân nhiệt (33˚C) theo CA (n =17); và iii) nhóm iii (n =40), một nhóm đã trải qua giai đoạn sinh sản và được điều trị bằng HT sau ca trong 2 giờ (n =17), 4 giờ (n =13) và 6 giờ (n =10) sau roSc, trong đó tất cả các con chuột đã được làm nóng lại thành namen.
Cảm ứng CA và CPR.Ca và cPr được thực hiện như đã mô tả trước đây (24,25) với những sửa đổi nhỏ (Hình 1). Tóm lại, những con chuột được gây mê bằng 2‑3% isoflurane và được thở máy để duy trì hô hấp bằng máy thở cho loài gặm nhấm (thiết bị Harvard). Để theo dõi độ bão hòa oxy ngoại vi (Spo2), một đầu dò độ bão hòa oxy đo oxy xung (Nonin Medical, inc.) Đã được gắn vào bàn chân trái. Nhiệt độ cơ thể được duy trì ở 37 ± 0. 5˚C trong và sau ca phẫu thuật. Để theo dõi sự thay đổi điện tâm đồ (ecG), các đầu dò điện tâm đồ (cytiva) được đặt trên các chi để cung cấp dữ liệu ba đạo trình, được theo dõi liên tục. Động mạch đùi trái và tĩnh mạch đùi phải được đóng hộp riêng biệt để theo dõi áp lực động mạch trung bình (MaP) (MLT 1050 / d; ADInticments, ltd.) Và tiêm tĩnh mạch.
Sau thời gian ổn định 5 phút, vecuronium bromide (2 mg / kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.) Được tiêm tĩnh mạch, ngừng gây mê và ngừng thở máy. MaP dưới 25 mm ‑ Hg và hoạt động điện không xung tiếp theo được sử dụng để xác định CA (25,26). CA được xác nhận sau 3‑4 phút sau khi tiêm vecuronium bromide. 5 phút sau ca sau, cPr được bắt đầu bằng cách tiêm tĩnh mạch epinephrine (0. 005 mg / kg; Sigma ‑ Aldrich;
Merck KGaa) và sodium bicarbonate (1 meq / kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa) sau đó là thở máy với oxy 100% và ép ngực bằng tay với tốc độ 300 / phút cho đến khi MaP đạt 60 mm ‑ Hg và hoạt động điện tâm đồ được quan sát thấy . một khi con vật ổn định về huyết động và thở tự nhiên (thường là lúc 1 giờ sau roSc), các ống thông được rút ra và con vật được rút nội khí quản.
Quản lý nhiệt độ giữa các nhóm.Thân nhiệt của nhóm chuột cống được duy trì ở 37 ± 0. 5˚C trong và sau khi phẫu thuật CA và duy trì cho đến khi chuột bị hiến tế theo lịch trình thời gian. trong nhóm hạ thân nhiệt, ca được thiết lập ở nhiệt độ bình thường; sau đó, nhiệt độ cơ thể được duy trì bằng túi nước đá và quạt ở 33 ± 0. 5˚C ngay sau khi hô hấp nhân tạo trong 2, 4 và 6 giờ và chúng được làm ấm nhanh chóng bằng đệm sưởi cho đến nhiệt độ mong muốn ( Đã đạt được 37 ± 0. 5˚C). Những con chuột sau đó được đưa trở lại lồng của chúng cho đến khi chúng bị hiến tế một ngày sau khi hô hấp nhân tạo / roSc. Nhiệt độ cơ thể được theo dõi bằng cảm biến nhiệt độ trực tràng (27).
Phân tích sinh hóa huyết thanh.Tiêm vào màng bụng 30 mg / kg natri pentobarbital (JW Pharm co., Ltd.) Đã được sử dụng để gây mê tất cả các động vật. Máu được lấy từ tĩnh mạch bụng của mỗi con trong mỗi nhóm. Huyết thanh được thu thập bằng cách ly tâm máu (2,774 xg, 15 phút, 4˚C) và được bảo quản ở ‑80˚C cho đến khi phân tích. Nồng độ nitơ urê máu (Bun) và creatinine trong huyết thanh được xác định theo các phương pháp do Liên đoàn hóa học lâm sàng quốc tế (28) đưa ra bằng cách sử dụng máy phân tích hóa học tự động Hitachi 2070 (Hitachi, ltd.). tất cả các thử nghiệm được tiến hành ba lần bằng cách sử dụng huyết thanh tươi.
Xử lý mô.Những con chuột được gây mê sâu bằng cách tiêm vào màng bụng 2 0 0 mg / kg pentobarbital natri (JW Pharm co., Ltd.) Và chúng được truyền dịch qua tim với 0. 1 M dung dịch muối đệm phosphat (PBS; pH 7,4), tiếp theo là 4% paraformaldehyde trong 0,1 M dung dịch đệm phosphat (PB; pH 7,4). Thận của mỗi con vật được phân lập và cố định bằng 4% paraformaldehyde trong 0,1 M PB (pH 7,4) ở nhiệt độ phòng trong 1 tuần, sau đó cắt lát mỏng, nhúng vào parafin, và cắt nhỏ (6 µm).
Hematoxylin và eosin (H&E), Axit chu kỳ ‑ Schiff (PAS), và nhuộm trichrome Masson.Phương pháp nhuộm H & e được thực hiện để kiểm tra những thay đổi bệnh lý ở thận theo một quy trình đã mô tả trước đây (29). Phương pháp nhuộm PaS được thực hiện để kiểm tra những thay đổi trong cầu thận theo các quy trình đã mô tả trước đây (30‑32). Phương pháp nhuộm màu trichrome của Masson được sử dụng để xác định tổn thương ống thận, xem xét sự giãn nở ống, teo ống, hình thành bó ống, hút chân không, thoái hóa, xơ hóa mô kẽ và bong tróc tế bào biểu mô ống, hoặc dày màng đáy ống theo các quy trình đã mô tả trước đây (33 (34).
có tổng cộng 2 nhà bệnh học có kinh nghiệm đã đánh giá những thay đổi về mô bệnh học theo cách mù đôi. hình ảnh của 1 0 phần / con chuột bị nhuộm màu được chụp ở độ phóng đại x400 bằng kính hiển vi ánh sáng Leica dM 2500 (Leica Microsystems GmbH). Tổng cộng có 10 trường được phân tích trong mỗi phần. Phân tích mô bệnh học của các tổn thương thận được thực hiện theo các quy trình đã mô tả trước đây (35,36). Một cách ngắn gọn, các tổn thương được phân loại là không có tổn thương vi thể đáng kể (nSMl), tổn thương tối thiểu, nhẹ, trung bình, hoặc rõ rệt, tương ứng, được phân loại theo thang điểm sau với test mù: bình thường, 0 điểm;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">
Tổn thương cầu thận được xác định bằng sự mất các yếu tố tế bào, sự sụp đổ của lòng mao mạch, chất hyalin vô định hình có hoặc không dính vào bao Bowman (3 0 - 32) và cho điểm bằng các thang số sau: không có tổn thương, { {7}} điểm; rất nhẹ, 1 điểm; nhẹ, 2 điểm; vừa phải, 3 điểm; và nghiêm trọng, 4 điểm. Tổn thương ống thận được chấm theo hệ thống tính điểm sau: không chấn thương ống thận, 0 điểm; 1‑9 phần trăm các ống bị thương, 1 điểm; 10‑25 phần trăm các ống bị thương, 2 điểm; 26‑50 phần trăm các ống bị thương, 3 điểm; 51‑75 phần trăm ống bị thương, 4 điểm; và ít nhất 76 phần trăm các ống bị thương, 5 điểm (33,34).
Malondialdehyde (MDA).Nồng độ Mda trong vỏ thận được đánh giá theo một quy trình đã mô tả trước đây (23,37,38). Tóm lại, quá trình đồng nhất và ly tâm của các mô thận được thực hiện ở 8.832 xg trong 10 phút ở 4˚C, và phần nổi phía trên được thu thập và lưu trữ ở ‑80˚C để phân tích MDA. Hàm lượng MDA được xác định theo hướng dẫn của bộ xét nghiệm TBarS (cat. Số 10009055; công ty hóa chất cayman).
Hóa mô miễn dịch (IHC) cho các enzym chống oxy hóa. iHc được thực hiện với Sod ‑ 1, Sod ‑ 2, caT và GPX để nghiên cứu những thay đổi trong hoạt động miễn dịch chống oxy hóa trong thận. iHc được thực hiện theo phương pháp đã mô tả trước đây của chúng tôi (22). Tóm lại, các phần (6 µm) được ủ với dê anti ‑ Sod1 (1: 5 0 0; cat. No. SaB2500976; Sigma ‑ Aldrich; Merck KGaa), dê anti ‑ Sod2 (1: 1 , 000; cat. No. SaB2501676; Sigma ‑ Aldrich; Merck KGaa), thỏ anti ‑ caT (1: 1, 000; cat. No. Ab16731; Abcam) và thỏ anti ‑ GPX ( 1: 1, 000; cat. No. Ab22604; Abcam) qua đêm ở 4˚C, tiếp theo là thỏ phản liên hợp được đánh dấu sinh học (1: 250; cat. No. Ba ‑ 1000‑1,5; phòng thí nghiệm Vector , inc.) và kháng thể thứ cấp chống dê liên hợp được đánh dấu sinh học (1: 250; cat. no. Ba ‑ 5000‑1,5; Vector Laboratories, Inc.) trong 2 giờ ở 24˚C và được phát triển bằng cách sử dụng Vectastain aBc (Phòng thí nghiệm Vector , inc.). Sau đó, chúng được hình dung bằng dung dịch 3,3' ‑ diaminobenzidine (trong dung dịch đệm Tris ‑ HCl 0,1 M).
Kính hiển vi Leica dM 2500 được sử dụng để hình ảnh các mặt cắt ở độ phóng đại x400. Tổng cộng 10 phần / con chuột được chọn và 10 khu vực được bắt. Phần mềm phân tích ngưỡng hình ảnh phiên bản 1.52a (Viện Y tế Quốc gia) được sử dụng để đo phần trăm (phần trăm) của mật độ quang học tương đối (que).
Phân tích thống kê.Tất cả các thí nghiệm được lặp lại ba lần. Graph Pad Prism phiên bản 5. 0 (GraphPad Software, inc.) Được sử dụng để phân tích dữ liệu, được biểu thị dưới dạng trung bình ± sai số chuẩn của các giá trị trung bình (SeM). Sự sống còn được phân tích bằng cách sử dụng thống kê Kaplan ‑ Meier và bài kiểm tra xếp hạng nhật ký. MaP và oxy ngoại vi được so sánh bằng cách sử dụng các phép đo lặp lại một chiều và hai chiều phân tích phương sai để đánh giá ảnh hưởng của thời gian. Để xác định tầm quan trọng của sự khác biệt, các phân tích hậu kỳ đã được thực hiện bằng cách sử dụng thử nghiệm của Tukey cho tất cả các so sánh nhiều cặp. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Kết quả
Thay đổi sinh lý, tỷ lệ sống sót và các biến số sinh hóa huyết thanh. Không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các nhóm về các đặc điểm cơ bản, bao gồm trọng lượng cơ thể, MaP và Spo2 (Bảng i và Hình 2). Cảm ứng ca xảy ra 3‑4 phút sau khi tiêm vecuronium bromide (2 mg / kg) vào tĩnh mạch. CA đã được xác nhận với ecG đẳng điện, Spo2 và MaP, và những thay đổi này đã thay đổi như mong đợi theo giao thức thử nghiệm (Hình 2a ‑ c). như được tiết lộ trong Hình 2d, nhiệt độ cơ thể khác nhau giữa tất cả các nhóm theo roSc, như được tiết lộ trong Hình 3, tỷ lệ sống sót của mỗi nhóm được đánh giá sau một ngày sau ca. Tỷ lệ của Nhóm ii là 42,9 phần trăm.
Trong nhóm iii, tỷ lệ sau 2 giờ HT là 42,9%, tỷ lệ sau 4 giờ HT là 57,1% và tỷ lệ sau 6 giờ HT là 71,4%. trong thí nghiệm này, không có sự khác biệt giữa những con chuột ở Nhóm ii và những con chuột có 2 giờ HT ở Nhóm iii.
như được chứng minh trong Hình 4B, nồng độ Bun huyết thanh ở Nhóm i là 13,8 mg / dl sau ca một ngày. trong nhóm ii, mức độ Bun tăng lên đáng kể lên 35,3 mg / dl. trong Nhóm iii, mức Bun là 3 {{1 0}}. 7 mg / dl sau 2 giờ HT, 25. 0 mg / dl sau 4 giờ HT và 22,7 mg / dl sau 6 h ‑ HT. ngoài ra, như được tiết lộ trong Hình 4c, mức creatinine huyết thanh trong Nhóm I là {{2 0}}. 23 mg / dl. trong nhóm ii, mức creatinine đã tăng đáng kể lên 0. 43 mg / dl. trong nhóm iii, mức creatinine thấp hơn so với quan sát ở Nhóm ii như sau: 0,39 mg / dl sau 2 giờ HT, 0,37 mg / dl sau 4 giờ HT và 0,36 mg / dl sau 6 giờ HT.
Các phát hiện mô bệnh học. trong Nhóm I (giả), các cấu trúc mô học còn nguyên vẹn đã được tiết lộ bằng phương pháp nhuộm H & e, PaS và Masson trichrome (Hình 5A). Xơ hóa mô kẽ không được phát hiện ở tất cả các nhóm, trong khi đó, ở Nhóm ii, mô bệnh học thận gây ra được kiểm tra vào một ngày sau roSc bằng phương pháp nhuộm H & e, PaS và Masson trichrome. Tổn thương thận nặng do CA gây ra đã tăng lên đáng kể ở các ống gần và cầu thận; đặc biệt là các đường viền bàn chải của các tế bào biểu mô ống thận bị xói mòn nghiêm trọng (Hình 5a và B). Ngoài ra, trong nhóm này, các mao mạch cầu thận bị giãn ra với các tế bào viêm, và phù nề kẽ và hoại tử ống thận cấp tính nghiêm trọng so với những gì được quan sát trong nhóm I (Hình 5a).
trong Nhóm iii, chấn thương thận đã giảm độc lực vào một ngày sau roSc (Hình 5a và B). đặc biệt, tổn thương gây ra ca ở các ống lượn gần đã giảm đáng kể sau 6 giờ HT so với khi quan sát thấy ở Nhóm ii. Ngoài ra, sự giãn nở cục bộ của các ống lượn gần đã giảm so với sự mở rộng cục bộ của các ống lượn gần đã được tiết lộ trong Nhóm ii (Hình 5A). Đối với cầu thận, tổn thương cầu thận trong 6 giờ HT làm giảm đáng kể tổn thương cầu thận so với tổn thương được tiết lộ trong Nhóm ii (Hình 5a và B).
Mức MDA. như được tiết lộ trong Hình 4a, mức Mda trong vỏ thận đã tăng lên đáng kể vào một ngày sau khi ở Nhóm ii so với Nhóm i. Tuy nhiên, trong Nhóm III, mức MDA đã giảm đáng kể sau 4 giờ và 6 giờ HT. nó cũng giảm trong 2 giờ HT, nhưng không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê so với Nhóm ii.
Các phát hiện về hoạt động miễn dịch enzym chống oxy hóa.
Trong Nhóm I, các hoạt động miễn dịch Sod ‑ 1, Sod ‑ 2, GPX và caT bình thường được đánh giá, cho thấy rằng chúng chủ yếu nằm trong các ống (Hình 6a). trong Nhóm ii, khả năng hoạt động miễn dịch của Sod ‑ 1, Sod ‑ 2, GPX và CAT đã giảm đáng kể vào một ngày sau roSc so với những hoạt động được tiết lộ trong Nhóm i (Hình 6a và B).
trong Nhóm iii, khả năng hoạt động miễn dịch của Sod ‑ 1, Sod ‑ 2, GPX và caT sau 2 giờ HT không khác biệt đáng kể so với những phản ứng được quan sát ở Nhóm ii (Hình 6a và B). trong trường hợp 4 giờ HT, bốn hoạt động miễn dịch cao hơn đáng kể so với những hoạt động được tiết lộ trong Nhóm ii (Hình 6a và B), chứng tỏ rằng, đặc biệt, hoạt động miễn dịch GPX cao hơn đáng kể so với các hoạt động miễn dịch khác. trong trường hợp 6 giờ HT, tất cả các hoạt động miễn dịch đều cao hơn so với những con chuột nhận được 4 giờ HT, cho thấy rằng que của mỗi hoạt động miễn dịch Sod ‑ 1, Sod ‑ 2, GPX, và caT là 78,4, 67,4, 86. 5 và 79,5 phần trăm tương ứng so với Nhóm i (Hình 6a và B).
herba epimedium sagittatum
Thảo luận
Trong các nghiên cứu trên động vật, tim và não là những cơ quan bị ảnh hưởng nhiều nhất sau chấn thương do thiếu máu cục bộ / tái tưới máu (i / r) sau ca (39,40). tuy nhiên, một số nghiên cứu đã báo cáo rằng chấn thương thận cấp tính có tác động đến sự phục hồi thần kinh (41,42). Do đó, điều quan trọng là phải điều tra chấn thương thận cấp sau ca và cPr. Trong nghiên cứu này, chuột đực Sd đực trưởng thành được sử dụng để chữa ngạt bằng cách tiêm vecuronium bromide. CA được xác nhận 3‑4 phút sau khi gây ngạt và cPr được thực hiện 5 phút sau ca. MaP, ecG và Spo2 đã được thay đổi như mong đợi trong ca và sau roSc. trong nghiên cứu hiện tại của chúng tôi, tỷ lệ sống sót ở Nhóm iii là 42,9% một ngày sau roSc ở chuột tiếp xúc với 2 giờ HT, 57,1% ở chuột được điều trị với 4 giờ HT và 71,4% ở chuột được tiếp xúc với 6 giờ HT. che và cộng sự (26) báo cáo rằng tỷ lệ sống sót là 40% trong hai ngày sau roSc trong mô hình chuột bị ngạt. Ngoài ra, Wang và cộng sự (43) báo cáo rằng ở chuột, sự kết hợp giữa hạ thân nhiệt và levosimendan (một chất làm nhạy cảm canxi và mở kênh kali) sau roSc đã làm tăng đáng kể tỷ lệ sống sót. Dựa trên những phát hiện này, HT ở chuột mắc ca có thể làm tăng tỷ lệ sống sót trong vài ngày sau roSc. Tuy nhiên, ở người, HT sau ca hầu như không làm tăng tỷ lệ sống sót sau roSc (44).
rối loạn chức năng thận được báo cáo ở 12‑28% bệnh nhân mắc ca sau khi hồi sức thành công (13). Ngoài ra, chấn thương thận cấp tính phát triển ở 43 phần trăm bệnh nhân được hồi sức sau ca, và hơn 75 phần trăm các đợt này xảy ra trong vòng ba ngày sau ca (45). ở các mô hình động vật, tổn thương thận cấp tính do i / R (tức là ROSC theo sau CA) bị giảm đáng kể bởi HT (43,46,47). Ví dụ, Tissier và cộng sự (47) đã báo cáo mức độ suy giảm đáng kể của tổn thương thận do HT trên mô hình thỏ ca, dựa trên mô bệnh học và kính hiển vi điện tử, so với nhóm chứng. trong nghiên cứu hiện tại của chúng tôi, điểm số tổn thương mô bệnh học cầu thận và ống thận ở Nhóm ii rõ ràng đã được nâng cao một ngày sau roSc. trong nhóm này, nồng độ Bun và creatinin huyết thanh tăng đáng kể sau ROSC khi so sánh với nhóm giả (Nhóm i). Các kết quả này tương tự như kết quả của các nghiên cứu trước đây liên quan đến mô hình ca chó, thỏ và heo con (47-49). Do đó, tổn thương thận đã gia tăng nghiêm trọng trong giai đoạn đầu sau ca ở động vật thí nghiệm. trong nghiên cứu hiện tại của chúng tôi, các tổn thương cầu thận và ống thận và điểm số mô bệnh học ở Nhóm iii đã giảm đáng kể sau 4 giờ và 6 giờ HT một ngày sau roSc so với Nhóm ii. Ribeiro và cộng sự (46) và Souza và cộng sự (50) báo cáo rằng HT có hiệu quả trên các mô hình động vật bị tổn thương thận. Islam và cộng sự (23) và Jawad và cộng sự (22) xác định rằng HT làm giảm mức độ nghiêm trọng của tổn thương thận và tăng tỷ lệ sống sót trong mô hình ca ngạt. Các phát hiện cho thấy HT có tác dụng bảo vệ thận đáng kể, có liên quan đến việc tăng tỷ lệ sống sót.
Các enzym chống oxy hóa nội sinh chủ yếu bao gồm Sods, CAT và GPX. Các enzym này cung cấp tuyến phòng thủ đầu tiên chống lại o2 • - và OH •. SOD ‑ 1 và SOD ‑ 2 cung cấp khả năng bảo vệ chống lại stress oxy hóa bằng cách xúc tác quá trình chuyển hóa o2 • - thành o2 và H2o2 (51). stress oxy hóa là một yếu tố quan trọng trong tổn thương cơ quan và rối loạn chức năng huyết động trong quá trình PcaS và sự tạo ra roS trong quá trình chấn thương i / r. Hoạt động của các enzym chống oxy hóa bị thay đổi do tổn thương i / r sau ca (21). nghiên cứu của chúng tôi cho thấy rằng mức độ Sod ‑ 1, Sod ‑ 2, GPX và caT đã giảm sau roSc trong Nhóm ii so với Nhóm i. Mức độ của các enzym chống oxy hóa này bị giảm sau i / r, gây ra tổn thương và chết tế bào do tiêu thụ các chất chống oxy hóa nội sinh do giải phóng roS (52).
Xia và cộng sự (53) báo cáo hoạt động chống oxy hóa tăng lên trong các mô thận của những con chuột tiếp xúc với HT trong tình trạng tổn thương i / r thận. Hackenhaar và cộng sự (21) đã quan sát thấy sự gia tăng đáng kể hoạt động của Sod ‑ 1, Sod ‑ 2, GPX và caT sau 6, 12, 36 và 72 ‑ giờ HT ở người sau roSc. Trong các nghiên cứu trước đây sử dụng mô hình chuột bị ngạt, Islam và cộng sự (23) báo cáo rằng HT sau ca làm giảm stress oxy hóa ở thận, và Jawad và cộng sự (22) báo cáo rằng HT sau ca bảo vệ thận chống lại tổn thương do ca gây ra, chứng tỏ rằng nrf2 / Ho ‑ 1 được tăng lên trong thận. trong nghiên cứu hiện tại của chúng tôi, các hoạt động miễn dịch của Sod ‑ 1, Sod ‑ 2, GPX và caT đã tăng lên đáng kể sau 4 giờ HT và 6 giờ HT ở Nhóm iii khi so sánh với Nhóm ii, cho thấy HT đã kích hoạt các enzym chống oxy hóa và giảm ứng suất oxy hóa.
Dựa trên các kết quả về tỷ lệ sống sót, mô bệnh học, sinh hóa và mô miễn dịch của nghiên cứu này, người ta xác định rằng rối loạn chức năng thận là phổ biến và liên quan đến tỷ lệ tử vong trong giai đoạn đầu của PcaS sau roSc, trong mô hình chuột của chúng tôi về ca ngạt. Tuy nhiên, 4 giờ hoặc 6 giờ HT sau ROSC làm giảm đáng kể tổn thương thận, cho thấy HT kích hoạt các enzym chống oxy hóa, chẳng hạn như Sod ‑ 1, Sod ‑ 2, GPX và caT, dẫn đến giảm stress oxy hóa ở thận. kết quả là giả thuyết HT làm giảm tổn thương thận bằng cơ chế chống oxy hóa và tăng tỷ lệ sống sót sớm. Tuy nhiên, cần phải có phân tích Western blot để làm sáng tỏ cơ chế tổn thương thận và HT trong ca sau roSc. Đây là một hạn chế tiềm ẩn của nghiên cứu hiện tại và nhấn mạnh sự cần thiết của các nghiên cứu sâu hơn.
myricetin
1 khoa cấp cứu, viện nghiên cứu y học lâm sàng của trường đại học quốc gia Jeonbuk, Jeonju, Jeollabuk ‑ do 54907;
2 trường đại học thú y và viện nghiên cứu an toàn sinh học, đại học quốc gia Jeonbuk, san, Jeollabuk ‑ do 54596;
3phòng Khoa học Y sinh và viện nghiên cứu Khoa học Sinh học và Công nghệ Sinh học, Đại học Hallym, chuncheon, Gangwon ‑ do 24252;
4 Khoa Phẫu thuật, Bệnh viện Đại học Quốc gia Kangwon,
Trường Y, Đại học quốc gia Kangwon, chuncheon, Gangwon ‑ do 24289; 5 Khoa Sinh học Thần kinh, Trường Y, Đại học Quốc gia Kangwon, Chuncheon, Gangwon ‑ do 24341, Cộng hòa Hàn Quốc
Sự nhìn nhận
không áp dụng.
Kinh phí
Nghiên cứu này được hỗ trợ bởi Chương trình Nghiên cứu Khoa học Cơ bản thông qua Quỹ nghiên cứu quốc gia của Hàn Quốc do Bộ Giáo dục tài trợ (cấp số. NrF ‑ 2019r1c1c1002564, nrF ‑ 2019r1F1a1062696 và nrF -2021 r1F1a1059992).
Sự sẵn có của dữ liệu và vật liệu
Các bộ dữ liệu được sử dụng và / hoặc phân tích trong nghiên cứu hiện tại có sẵn từ tác giả tương ứng theo yêu cầu hợp lý.
Tác giả đóng góp
SeK, HYS, MHW và HJT chịu trách nhiệm thiết kế thử nghiệm, thu thập dữ liệu, phân tích dữ liệu và viết bản thảo. eYl, YJY, rHK, JHc và TKl đã thực hiện các thí nghiệm và phân tích dữ liệu. dca, BYP, JcY, SKH và iSK đã thực hiện phân tích dữ liệu và đưa ra các nhận xét quan trọng về toàn bộ quá trình nghiên cứu. Tất cả các tác giả đã đọc và chấp thuận bản thảo cuối cùng. HYS và HJT xác nhận tính xác thực của tất cả các dữ liệu thô.
Phê duyệt đạo đức và đồng ý tham gia
tất cả các quy trình thử nghiệm đã được phê duyệt dựa trên các quy trình đạo đức và chăm sóc khoa học bởi Ủy ban chăm sóc và sử dụng động vật của trường đại học quốc gia Jeonbuk (phê duyệt số JBnu 2020‑084; Jeonju, Hàn Quốc).
Sự đồng ý của bệnh nhân để xuất bản
không áp dụng.
Lợi ích cạnh tranh
Nhiều tác giả tuyên bố rằng họ không có hứng thú với việc cạnh tranh.
Người giới thiệu
1. Girotra S, chan PS, và Bradley SM: Chăm sóc hồi sức sau khi ngừng tim ngoài bệnh viện và trong bệnh viện. Trái tim 101: 1943‑1949, 2015.
2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS và Cha KC: Khoảng thời gian khử rung tim ngắn hơn thúc đẩy kết quả khử rung tim và hồi sức thành công. hồi sức 143: 100‑105, 2019.
3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a và Papadimitriou l: Ischaemia ‑ albumin sửa đổi dự đoán kết quả của hồi sinh tim phổi: một nghiên cứu thử nghiệm. hồi sức 81: 591‑595, 2010.
4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se, và Angelos MG: nhu cầu oxy trong quá trình hồi sức tim phổi (cPr) để tác động trở lại tuần hoàn tự phát. hồi sức 80: 951‑955, 2009.
5. lópez ‑ Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez ‑ calvo a, cecchetti c, rodríguez ‑ núnez a và carrillo Á; iberoamerican Nhi khoa ngừng tim Mạng lưới nghiên cứu riBePci: Hậu quả của các yếu tố tuần hoàn tự phát liên quan đến tỷ lệ tử vong ở trẻ em trong bệnh viện ngừng tim: một nghiên cứu quan sát đa quốc gia đa trung tâm tiềm năng. chăm sóc crit 18: 607, 2014.
6. Mongardon n, Dumas F, trở thành S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F và cariou a: Hội chứng ngừng tim: Từ hồi sức tức thì đến kết cục lâu dài. năm chăm sóc đặc biệt 1: 45, 2011.
7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC, et al: Hội chứng ngừng tim sau: dịch tễ học, sinh lý bệnh, điều trị và tiên lượng. một tuyên bố đồng thuận từ ủy ban liên lạc quốc tế về hồi sức (Hiệp hội Tim mạch Hoa Kỳ, Hội đồng Úc và New Zealand về hồi sức, Hội đồng hồi sức Châu Âu, Tổ chức Tim và Đột quỵ của Canada, Tổ chức Tim mạch Mỹ, Hội đồng hồi sức Châu Á và Hội đồng Hồi sức Nam Phi ); Ủy ban chăm sóc tim mạch khẩn cấp của Hiệp hội Tim mạch Hoa Kỳ; hội đồng phẫu thuật tim mạch và gây mê hồi sức; hội đồng về chăm sóc tim phổi, ngoại phẫu và nguy kịch; hội đồng tim mạch lâm sàng; và Hội đồng Đột quỵ. phát hành 118: 2452‑2483, 2008.
8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG, et al: Hội chứng ngừng tim sau: dịch tễ học, sinh lý bệnh, điều trị và tiên lượng. Một Tuyên bố Khoa học của Ủy ban Liên lạc Quốc tế về hồi sức; Ủy ban chăm sóc tim mạch khẩn cấp của Hiệp hội Tim mạch Hoa Kỳ; hội đồng phẫu thuật tim mạch và gây mê hồi sức; hội đồng về chăm sóc tim phổi, ngoại phẫu và nguy kịch; hội đồng tim mạch lâm sàng; hội đồng về đột quỵ. hồi sức 79: 350‑79, 2008. DOI: 10.1016 / j.resuscitation .2008.09.017
9. Jentzer Jc, thay đổi Md và dezfulian c: Rối loạn chức năng cơ tim và sốc sau ngừng tim. BioMed res int 2015: 314796, 2015.
10. Madl c và Holzer M: Chức năng não sau khi hồi sức do ngừng tim. chăm sóc crit curropin 10: 213‑217, 2004.
11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je, và Trzeciak S: Rối loạn chức năng nhiều cơ quan sau khi tuần hoàn tự phát trở lại trong hội chứng ngừng tim. crit care Med 41: 1492‑1501, 2013.
12. Zeiner a, Sunder ‑ Plassmann G, Sterz F, Holzer M, thua H, laggier an và Müllner M: Tác dụng của hạ thân nhiệt điều trị nhẹ đối với chức năng thận sau khi hồi sức tim phổi ở nam giới. hồi sức 60: 253‑261, 2004.
13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW và Rittenberg Jc; Dịch vụ sau ngừng tim: rối loạn chức năng thận thường xảy ra sau khi hồi sức từ ngừng tim ra khỏi bệnh viện. hồi sức 84: 1371‑1374, 2013.
14. lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB, et al: những thay đổi về mô bệnh học và mức độ yếu tố hoại tử khối u‑ trong tim của chuột sau đây ngừng tim ngạt. Clin Exp khẩn cấp Med 4: 160‑167, năm 2017.
15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo e, et al; Bắt đầu và kết thúc Điều trị viên hỗ trợ cho thận (BeST Kidney): suy thận cấp ở bệnh nhân nặng: một nghiên cứu đa quốc gia, đa trung tâm. JAMA 294: 813-818, năm 2005.
16. Mattana J và Singhal Pc: Tỷ lệ lưu hành và yếu tố quyết định suy thận cấp sau hồi sức tim phổi. thực tập vòm Med 153: 235‑239, 1993.
17. Sachse a và Wolf G: angiotensin ii ‑ loại oxy phản ứng gây ra và thận. J am Soc Nephrol 18: 2439‑2446, 2007.
18. Baud l và ardaillou r: các loại oxy phản ứng: Sản xuất và đóng vai trò trong thận. am J Physiol 251: F765 ‑ F776, 1986.
19. rodrigo r, Fernández ‑ Gajardo r, Gutiérrez r, Matamala JM, carrasco r, Miranda ‑ Merchak a và Feuerhake W: stress oxy hóa và sinh lý bệnh của đột quỵ do thiếu máu cục bộ: cơ hội điều trị mới. Mục tiêu Thuốc gây rối loạn CNS Neurol 12: 698-714, năm 2013.
20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n và Moin S: tổn thương dna tăng cao, stress oxy hóa và suy giảm hệ thống phòng thủ phản ứng gây ra ở bệnh nhân nhồi máu cơ tim. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780-789, 2018.
