Sự ức chế Enteropeptidase Cải thiện chức năng thận ở mô hình chuột mắc bệnh thận do tiểu đường
Mar 13, 2022
GIỚI THIỆU
Đái tháo đường týp 2 là một bệnh rối loạn chuyển hóa mãn tính, đặc trưng bởi tăng đường huyết, kháng insulin và suy giảm insulin tương đối. Đây là một vấn đề lâm sàng toàn cầu dẫn đến các biến chứng tiểu đường mạch máu và vi mạch. bệnh thận(DKD) là một biến chứng tiểu đường vi mạch lớn dẫn đến mãn tínhbệnh thận(CKD) và giai đoạn cuốibệnh thận. Tại Hoa Kỳ, hơn 40 phần trăm bệnh nhân đái tháo đường týp 2 có ĐKD.2 ĐKD được xác định bởi albumin niệu vi lượng, sau đó là protein niệu, phản ánh tổn thương cầu thận do tăng lọc máu do tăng đường huyết, tăng huyết áp và tổn thương tế bào podocyte. tải đến các tế bào hình ống gần gây rathậnviêm và xơ hóa mô kẽ, các con đường quan trọng trongsuy thậntiến triển.4 Phong tỏa hệ thống renin-angiotensin (RAS) bằng thuốc ức chế men chuyển hoặc thuốc chẹn thụ thể angiotensin II (ARB) được sử dụng trên lâm sàng như một phương pháp điều trị tiêu chuẩn cho bệnh nhân DKD.5 Gần đây, chất đồng vận chuyển natri-glucose { Các chất ức chế {6}} đã được giới thiệu như một nhóm thuốc bảo vệ mới.chức năng thận vẫn còn, và các loại thuốc mới với cơ chế hoạt động mới được yêu cầu để cải thiệnthậntrạng thái bệnh lý.Chế độ ăn uống dư thừa protein được coi là sẽ đẩy nhanh sự tiến triển củasuy thậnbằng cách gây ra sự tăng lọc cầu thận, tích tụ độc tố uraemic và ức chế quá trình tự động của cầu thận.8 Người ta đã báo cáo rằng việc tăng lượng protein trong chế độ ăn có tương quan thuận với việc tăng nguy cơ tiến triển đến giai đoạn cuối.suy thậnở bệnh nhân CKD; 9 tuy nhiên, ý nghĩa điều trị của việc giảm lượng protein trong khẩu phần ăn đối vớichức năng thậnvẫn còn tranh cãi, 10 và hiệu quả của các can thiệp dược lý trong việc điều chỉnh các dòng tiêu hóa protein là không rõ ràng.
CISTANCHE SẼ CẢI THIỆN KIDNEY / RENAL THẤT BẠI
Enteropeptidase là một protease serine xuyên màng loại II, biểu hiện nhiều ở mặt bên của tế bào ruột trên đường viền bàn chải của tá tràng. Nó chuyển đổi trypsinogen không hoạt động thành trypsin hoạt động thông qua sự phân cắt tại vị trí kích hoạt trypsinogen, và trypsin được hoạt hóa sau đó kích hoạt các hợp tử tiêu hóa khác được tiết ra từ tuyến tụy, bao gồm chymotrypsinogen, proelastase và procarboxypeptidases. AA). Vì vậy, enteropeptidase đóng một vai trò quan trọng trong quá trình tiêu hóa protein và hấp thụ AA. SCO -792 là một chất ức chế enteropeptidase mới, có sẵn bằng đường uống với nồng độ ức chế nửa tối đa là<10 nm="" against="" rat="" and="" human="" enteropeptidase="" in="" vitro.14="" in="" mouse="" models,="" enteropeptidase="" inhibition="" improves="" obesity="" and="" diabetes.15="" how="" ever,="" the="" pharmacological="" effects="" of="" enteropeptidase="" inhibition="" on=""> quả thậncác biến chứng phần lớn không được biết. Xem xét rằng enteropeptidase là thượng nguồn xa nhất của các enzym liên quan đến quá trình tiêu hóa và hấp thụ protein, việc khảo sát hiệu quả điều trị của việc ức chế enteropeptidase đối với tình trạng DKD có thể rất hữu ích.Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã kiểm tra tác dụng của chất ức chế enteropeptidase, SCO -792, trênquả thận các biến ở chuột Wistar béo (WF), một mô hình động vật có DKD.16 Đầu tiên, chúng tôi đánh giá các tác động chuyển hóa và tái bảo vệ của SCO -792 ở chuột WF. Tiếp theo, sự đóng góp của những thay đổi trong sự hấp thụ AA vào hiệu quả của SCO -792 đã được đánh giá. Các thí nghiệm bổ sung đã được thực hiện để tiết lộ ảnh hưởng của SCO 792 đối với hoạt động tự động của cầu thận và kiểm tra tác động kết hợp của SCO -792 với ARB.
Từ khóa:thuốc chống đái tháo đường, bệnh thận đái tháo đường, phát triển thuốc; bệnh thận; suy thận; thận
NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
Vật liệuTất cả các thuốc thử đều được mua từ FUJIFILM Wako Pure ChemicalCor Corporation (Osaka, Japan), trừ khi có chỉ định khác. SCO -792 được tổng hợp bởi Takeda Pharmaceutical Co. Ltd (Tokyo, Nhật Bản). Pioglitazone hydrochloride được mua từ Tokyo Chemical Industry (Tokyo, Nhật Bản). Irbesartan được mua từ LKT Laboratories, Inc. (St Paul, Minnesota).
Loài vậtChuột WF đực và chuột Wistar nạc (WL) không định hình tương ứng được lấy từ RABICS Ltd (Kanagawa, Nhật Bản). Tất cả động vật được nuôi trong phòng có nhiệt độ được kiểm soát (23 độ C), độ ẩm (55 phần trăm) và ánh sáng (đèn được bật từ 7: {3}} SA đến 7: 00 CH), với quyền ra vào miễn phí theo chế độ ăn chow tiêu chuẩn trong phòng thí nghiệm (CE -2; CLEA Japan, Inc., Tokyo, Japan) và nước máy. Các quy trình chăm sóc động vật và quy trình thí nghiệm động vật được sử dụng trong các nghiên cứu này đã được phê duyệt bởi Ủy ban Chăm sóc và Sử dụng Động vật của Tổ chức (Công viên Đổi mới Sức khỏe Shonan), được công nhận bởi Hiệp hội Công nhận Chăm sóc Động vật Phòng thí nghiệm Hoa Kỳ.
CISTANCHE SẼ CẢI THIỆN CHỨC NĂNG KIDNEY / RENAL
Nghiên cứu liều lượng lặp lại trong hai tuần ở chuột WFChuột WF đực, 31 tuần tuổi, với trọng lượng cơ thể ban đầu là 693,5 ± 22,5 g và mức hemoglobin glycated là 7,4 ± 0. 4 phần trăm, được chia ngẫu nhiên thành năm nhóm (xe, 6, 2 0 và 6 0 mg / kg SCO -792 và 1 mg / kg pioglitazone hydrochloride; n=7), xem xét tỷ lệ albumin / creatinine trong nước tiểu ban đầu (UACR), hemoglobin glycated, glucose huyết tương, insulin huyết tương và trọng lượng cơ thể. Chuột WL được sử dụng làm đối chứng (n=5). Chuột được dùng đường uống (0,5% [w / v] methylcellulose), SCO -792 hoặc pioglitazone hydrochloride một lần mỗi ngày trong 15 ngày. Ngày điều trị đầu tiên được chỉ định là ngày 0. Trọng lượng cơ thể và lượng thức ăn được theo dõi sau mỗi 1 đến 4 ngày, và phân được thu thập vào ngày thứ 7. Các mẫu máu được thu thập trước khi phân nhóm ngẫu nhiên và vào ngày 14 để đánh giá các biến số máu. Các mẫu nước tiểu được thu thập trước khi phân nhóm ngẫu nhiên và vào các ngày 3, 7 và 13 để đo các biến số nước tiểu. Vào ngày 15,quả thậnCác mô được phân lập từ chuột đã được kích thích và được bảo quản ở -80C cho đến khi sử dụng.
Đo mức lọc cầu thậnChuột WF đực, 3 0 tuần tuổi, được chia ngẫu nhiên thành hai nhóm (n=7) dựa trên mức lọc cầu thận ban đầu (GFR), UACR, hemoglobin glycated và trọng lượng cơ thể và sau đó được sử dụng bằng đường uống xe (0,5 phần trăm metylcellulose) hoặc 60 mg / kg SCO -792 trong 4 ngày. Chuột WL được sử dụng làm đối chứng (n=5). GFR được đo bằng cách sử dụng fluorescein isothiocyanate (FITC) -inulin (F3272; Sigma-Aldrich, St Louis, Missouri). FITC-inulin hòa tan trong nước muối được tiêm vào tĩnh mạch đuôi chuột ở mức 36 mg / kg, và máu được lấy ở 20, 40, 60 và 80 phút sau khi tiêm để đo nồng độ FITC-inulin. GFR được tính từ độ thanh thải FITC-inulin.17
Đánh giá việc bổ sung AA ở chuột WFChuột WF đực, 24 tuần tuổi, được chia ngẫu nhiên thành bốn nhóm (n=5) dựa trên UACR ban đầu, hemoglobin glycated, glucose huyết tương và trọng lượng cơ thể của chúng. Chuột nhận được chế độ ăn uống hoặc chế độ ăn uống CE -2 dạng bột bao gồm tăng 51,8 phần trăm AAs (với cùng tỷ lệ CE -2) sau khi bổ sung 18 L-AA (axit aspartic, threonine, serine, glutamic axit, glycine, alanin, valine, isoleucine, leucine, tyrosine, phenylalanine, lysine, histidine, arginine, proline, cysteine, methionine và tryptophan). Phương tiện (0. 5 phần trăm methylcellulose) hoặc 60 mg / kg SCO - 792 được dùng bằng miệng cho chuột một lần mỗi ngày trong 11 ngày. Để đánh giá sự thay đổi của mức AA trong huyết tương, các mẫu máu được thu thập trước và vào 3, 8 và 13 giờ sau khi dùng SCO -792 vào ngày 9. Mẫu nước tiểu được thu thập vào ngày 11 để đo UACR.
Đo các dấu hiệu autophagy cầu thậnChuột WF đực, 29 tuần tuổi, được chia ngẫu nhiên thành hai nhóm dựa trên UACR, mức hemoglobin glycated, mức glucose huyết tương và trọng lượng cơ thể (n=7) và sau đó được dùng đường uống (0. 5 phần trăm metylcellulose) hoặc 60 mg / kg SCO -792. Sau 3 giờ,quả thậncác mô được phân lập từ những con chuột bị kích thích, và sau đó các cầu thận được phân lập bằng phương pháp sàng lọc.18 Mức độ của các protein đích, bao gồm LC3A / B, p62, p-S6, S6, khối u Wilms 1 (WT1) và -actin, trong các cầu thận được phát hiện bằng phương pháp thấm phương Tây.
CISTANCHE SẼ CẢI THIỆN NHIỄM SẮC KIDNEY / RENAL
Điều trị kết hợp bốn tuần SCO -792 với irbesartan ở chuột WFChuột WF đực, 32 tuần tuổi, có trọng lượng cơ thể ban đầu là 675,7 ± 31,2 g và hemoglobin glycated là 7. 0 phần trăm ± 0. 3 phần trăm được chia ngẫu nhiên thành sáu nhóm (xe, {{ 9}}. 0 2 phần trăm SCO -792, 0. {{2 0}} 5 phần trăm SCO -792, 15 mg / kg irbesartan, { {29}}. 0 2 phần trăm SCO -792 cộng với 15 mg / kg irbesartan và 0,05 phần trăm SCO -792 cộng với 15 mg / kg irbesartan; n=7) dựa trên UACR, hemoglobin glycated, glucose huyết tương và trọng lượng cơ thể. Chuột WL được sử dụng làm đối chứng bình thường (n=5). Chuột có quyền truy cập miễn phí vào chế độ ăn bột CE -2 có chứa mỗi hợp chất (w / w: 0,02 và 0,05% SCO -792) hoặc chế độ ăn bột CE -2 một mình. Phương tiện (0,5% methylcellulose) hoặc irbesartan (15 mg / kg) được dùng đường uống một lần mỗi ngày. Các mẫu máu được thu thập vào ngày 28 để xác định các biến số của máu. Các mẫu nước tiểu được thu thập trước khi phân nhóm ngẫu nhiên và vào ngày 7 và 30 để xác định các biến số của nước tiểu.Quả thậnCác mô được phân lập từ những con chuột bị kích thích vào ngày thứ 33 và được bảo quản ở -80C cho đến khi sử dụng.
Phân tích thống kêÝ nghĩa thống kê lần đầu tiên được phân tích bằng cách sử dụng thử nghiệm của Bartlett về tính đồng nhất của các phương sai, tiếp theo là thử nghiệm của Williams (P> {{0}}. 0 5) và thử nghiệm Shirley-Williams (P Nhỏ hơn hoặc bằng 0. {{1 0}} 5) cho các nghiên cứu phụ thuộc vào liều lượng, thử nghiệm Dunnett (P> 0. 0 5) và thử nghiệm Thép (P Nhỏ hơn hoặc bằng 0. 0 5) để so sánh nhiều so với đối chứng hoặc kiểm tra Tukey (P> 0,05) cho tất cả các so sánh theo cặp. Ngoài ra, ý nghĩa thống kê được phân tích bằng cách sử dụng kiểm định F về tính đồng nhất của các phương sai, sau đó là kiểm định t của Student (P> 0,2) hoặc kiểm tra Aspin-Welch (P nhỏ hơn hoặc bằng 0,2). Các thử nghiệm của Williams và Shirley-William được thực hiện bằng cách sử dụng mức ý nghĩa một phía là 2,5 phần trăm (0,025). Các thử nghiệm khác được thực hiện bằng cách sử dụng mức ý nghĩa hai phía là 1 phần trăm (0,01) và 5 phần trăm (0,05). Để đánh giá xem điều trị kết hợp với SCO -792 và irbesartan có tác dụng cộng hưởng hoặc hiệp đồng đáng kể hay không, ANOVA hai chiều đã được thực hiện, cung cấp các tác dụng chính và tác dụng tương tác của SCO -792 và irbesartan. Tất cả dữ liệu được trình bày dưới dạng trung bình ± SD. Phương pháp định lượng hàm lượng protein trong phân, đo các biến số máu và nước tiểu, phân tích biểu hiện gen, phân lập cầu thận, tiến hành Western blotting và đothậnhàm lượng collagen được mô tả trong Phụ lục S1.
KẾT QUẢ
SCO -792 đã cải thiện các biến số trao đổi chất ở chuột WFĐể đánh giá tiềm năng chống DKD của việc ức chế enteropeptidase, SCO -792 được dùng đường uống cho chuột WF một lần mỗi ngày trong 2 tuần. Chuột WF được tạo ra bằng cách lai giữa chuột Wistar Kyoto và chuột béo Zucker19 và lý tưởng để sử dụng làm mô hình DKD vì các kiểu hình chuyển hóa đại diện của chúng (tăng đường huyết, kháng insulin kèm theo béo phì nặng, protein niệu tiến triển từ 12 tuần tuổi 16). Mức protein trong phân, là một dấu hiệu dược lực học của việc giảm tiêu hóa protein sau khi ức chế enteropeptidase trong ruột, đã tăng lên tùy thuộc vào liều lượng ở chuột được điều trị bằng SCO -792- (Hình 1A). Việc giảm lượng thức ăn được quan sát thấy trong quá trình nghiên cứu và lượng thức ăn tích lũy được giảm đáng kể bởi SCO -792 (Hình 1B). Nhất quán, trọng lượng cơ thể thấp hơn ở những con chuột được xử lý SCO -792- (Hình 1C). Các biến số của bệnh tiểu đường như glucose huyết tương, hemoglobin glycated, insulin huyết tương và nồng độ glucagon huyết tương đã giảm sau 2- tuần dùng SCO lặp lại -792 (Hình 1D – G). Mức lipid huyết tương cũng giảm do SCO -792 (Hình 1H, I).
SCO -792 đã cải thiện các biến số thận ở chuột WFNgoài việc cải thiện các biến số bệnh tiểu đường, SCO -792 làm giảm UACR kịp thời và hiệu quả này được duy trì trong quá trình dùng thuốc lặp lại (Hình 2A). Ngược lại, UACR không thay đổi ở những con chuột được sử dụng pioglitazone, một chất chủ vận thụ thể kích hoạt peroxisome tăng sinh, mặc dù mức độ glucose huyết tương giảm mạnh.
tương đương với SCO -792 (Hình 1D, 2A). Vào cuối nghiên cứu,thậnnồng độ mRNA của Col1a1, một dấu hiệu xơ hóa, 20 và Ccl2, một dấu hiệu viêm, 21 đã giảm ở những con chuột được sử dụng SCO -792 (Hình 2B). Tiết niệuquả thậnphân tử chấn thương -1 (KIM -1), là dấu ấn sinh học củaquả thậntổn thương ống thận, 22 cũng giảm ở chuột được điều trị bằng SCO -792- (Hình 2C). Đo GFR bằng FITC-inulin cho thấy trạng thái tăng lọc cầu thận ở chuột WF so với chuột WL. Tuy nhiên, sau 4- ngày sử dụng SCO -792, tình trạng quá tải cầu thận ở chuột WF đã được bình thường hóa hoàn toàn (Hình 2D).
Việc bổ sung AA trong chế độ ăn uống đã đảo ngược việc giảm UACR bởi SCO -792 ở chuột WFSự gia tăng nồng độ protein trong phân được quan sát thấy sau khi xử lý SCO -792 đã xác nhận rằng sự ức chế enteropeptidase đã ngăn cản quá trình tiêu hóa protein (Hình 1A). Do đó, SCO -792 đã làm giảm sự tạo AA từ các protein trong lòng ruột. Để điều tra vai trò của việc hấp thụ AA trong tác động tái bảo vệ của SCO -792, những con chuột được cho ăn bằng phương tiện hoặc SCO -792 đã được nuôi để được tiếp cận miễn phí với một loại chow bình thường hoặc một loại chow bổ sung AA. Như dự đoán, ở những con chuột được cho ăn chow bình thường, SCO - 792 đã làm giảm mức AA tổng trong huyết tương (Hình 3A, C). Tuy nhiên, việc bổ sung AA vào chế độ ăn đã phủ nhận sự thay đổi do enteropeptidase gây ra (Hình 3B, C). Trong khi mức huyết tương của các axit amin chuỗi nhánh (BCAAs) như valine, leucine và isoleucine đặc biệt giảm bởi SCO -792 ở chuột được cho ăn chow bình thường, một lần nữa, những thay đổi này bị phủ nhận khi bổ sung AA (Hình 3D – F ). Phù hợp với những thay đổi quan sát được về mức AA trong huyết tương, sự giảm UACR do SCO -792- gây ra phần lớn bị suy giảm ở những con chuột được cho ăn chow được bổ sung AA (Hình 3G).
SCO -792 đã kích hoạt tín hiệu autophagy trong cầu thận của chuột WFCác axit amin hoạt động như một chất điều hòa chính của cân bằng nội môi protein trong tế bào, do đó điều chỉnh sự cân bằng giữa quá trình đồng hóa (tổng hợp protein) và quá trình dị hóa (autophagy ).23 Điều này đạt được thông qua các protein cảm nhận AA, chẳng hạn như mục tiêu rapamycin (mTOR) của động vật có vú, và kiểm soát chung của kinase không biểu hiện 2. Để kiểm tra xem SCO -792 có ảnh hưởng đến con đường tự động trong cầu thận hay không, sự biểu hiện của các protein LC3A / BI và LC3A / B-II trong cầu thận của chuột WF là
đo bằng phương pháp thấm phương Tây. LC3A / B là một dấu hiệu autophagosome, trong khi LC3A / BI được chuyển đổi thành LC3A / B-II bằng cách lipid hóa ở đầu C trong quá trình autophagy. Do đó, tỷ lệ biểu hiện protein của LC3A / B-II so với LC3A / BI được sử dụng như một chỉ số của quá trình tự động. LC3A / BI trong cầu thận của chuột WF (Hình 4A, B). Ngược lại, mức protein của p62, một chất đánh dấu autophagy thay thế cung cấp chất nền autophagic cho autophagosomes và bị phân hủy bởi autophagy, 25 đã bị giảm bởi SCO -792 (Hình 4A, C). Ngoài ra, SCO -792 làm giảm đáng kể mức độ phosphoryl hóa của protein S6; điều này cho thấy sự ngừng hoạt động của tín hiệu mTOR (Hình 4A, D). Ngược lại, mức độ biểu hiện của WT1, một chất đánh dấu podocyte, và -actin, kiểm soát tải cho Western thấm, không thay đổi giữa các nhóm (Hình 4A, E, F).
Sự kết hợp của SCO -792 với irbesartan làm giảm thêm UACR ở chuột WFVì chất ức chế RAS được sử dụng rộng rãi như là phương pháp điều trị tiêu chuẩn cho bệnh nhân DKD, nên cần có tác dụng bổ sung cho chất ức chế RAS đối với các loại thuốc chống DKD mới. Để đánh giá hiệu quả tổng hợp của SCO -792 với ARB, SCO -792 (0. 0 2 phần trăm và 0. 0 5 phần trăm trong chế độ ăn kiêng) và irbesartan (15 mg / kg liều uống một lần mỗi ngày) một mình hoặc kết hợp được dùng cho chuột WF trong 4 tuần. Điều quan tâm là đánh giá hiệu quả của việc ức chế enteropeptidase bền vững trên các biến số của bệnh; do đó quản lý chế độ ăn kiêng SCO -792 đã được thực hiện trong nghiên cứu này. Liều SCO -792 được tính toán (mg / kg / d) cho mỗi nhóm là 6,81 đối với nhóm 0. 0 2 phần trăm SCO -792, 13,10 cho 0,05 phần trăm SCO Nhóm -792, 6,59 cho 0,02 phần trăm SCO -792 cộng với nhóm irbesartan và 11,44 cho 0,05 phần trăm SCO -792 cộng với nhóm irbesartan. Trong khi SCO -792 đơn lẻ và irbesartan đơn lẻ làm giảm UACR, sự kết hợp của SCO -792 và irbesartan làm giảm thêm UACR. Một tác dụng phụ đáng kể đối với việc giảm UACR đã được quan sát thấy sau khi sử dụng SCO - 792 kết hợp với irbesartan (Hình 5A, B). Ngược lại,irbesartan không ảnh hưởng đến tác dụng chống tiểu đường hoặc chống béo phì mà SCO -792 (Hình 5C-F) đạt được. Đáng chú ý, SCO -792 đã giảm đáng kểthậnhàm lượng collagen (Hình 5G).
THẢO LUẬNTrong nghiên cứu này, chúng tôi đã đánh giá tác động của một chất ức chế enteropeptidase mới, SCO -792, đối với tình trạng bệnh trên mô hình DKD của chuột tiền lâm sàng. Dùng đường uống SCO -792 cho chuột WF đã làm giảm nhanh chóng albumin niệu chỉ sau 3 ngày điều trị và tác dụng này được duy trì trong suốt thời gian dùng thuốc. Hơn nữa, tác dụng này có lẽ không phụ thuộc vào việc kiểm soát glucose. Ngoài ra, làm giảm các dấu hiệu xơ hóa, viêm và tổn thương ốngquả thậnđã được quan sát thấy ở những con chuột được điều trị bằng SCO -792-. Liều lượng SCO -792 gây ra bổ sungquả thậntác dụng bảo vệ, bao gồm giảm sự tăng lọc ở cầu thận và kích hoạt quá trình tự động ở cầu thận. SCO -792- gây ra giảm UACR phần lớn bị giảm đi khi bổ sung AA vào chế độ ăn. Cuối cùng, kết hợp SCO -792 và irbesartan làm giảm UACR một cách hiệu quả Các axit amin là một chất cảm ứng đã biết của quá trình siêu lọc.26 Ở người, một bữa ăn giàu protein đơn lẻ hoặc một dịch truyền AA làm tăng nhanh GFR. 27,28 Trạng thái siêu lọc gây ra bởi giàu proteinchế độ ăn kiêng được cho là để đẩy nhanh sự suy giảm tiến triển trongchức năng thậnở bệnh nhân CKD.29 Trong nghiên cứu này, chuột WF cho thấy GFR tăng, cho thấy tăng lọc cầu thận có khả năng làm tăng UACR. Trong khi điều trị SCO -792 làm giảm mức AA trong huyết tương và giảm UACR ở chuột WF, tác dụng này bị phủ nhận sau khi bổ sung AA vào chế độ ăn. Ngoài ra, điều trị SCO -792 đã bình thường hóa GFR ở chuột WF. Tổng hợp lại, sự giảm SCO -792- gây ra trong AAs tuần hoàn có thể đóng một vai trò trong việc cải thiện sự tăng lọc cầu thận và giảm UACR ở chuột WF. Hơn nữa, SCO -792 cải thiện các dấu hiệu xơ hóa, viêm và tổn thương ống thận trongquả thận.Protein dư thừa trong dịch lọc cầu thận có thể tạo rathậnviêm và xơ hóa mô kẽ trong các tế bào ống gần.4 Giảm albumin niệu do đó có thể bảo vệ cầu thận vàthậntế bào hình ống trong SCO -792- đã xử lý chuột khỏi sự tiến triển củathậnsự suy giảm.
CISTANCHE SẼ CẢI THIỆN ĐAU KIDNEY / RENAL
Những thay đổi trong tỷ lệ LC3AB-II thành LC3AB-I và mức protein p62 đã chứng minh sự hoạt hóa autophagy SCO -792- trong phần cầu thận củaquả thậnmô ở chuột WF. Điều thú vị là SCO -792 làm giảm đáng kể mức BCAA trong huyết tương ở chuột WF. BCAAs, đặc biệt là leucine, là những chất điều hòa chính của con đường tự thực với tín hiệu mTOR và ức chế sự hình thành các thể thực quản. 4}}, chỉ ra rằng mức BCAA trong huyết tương giảm do ức chế men enteropeptidase có thể liên quan đến quá trình hoạt hóa autophagy ở cầu thận thông qua việc bất hoạt con đường mTOR. Autophagy nói chung là một phản ứng đối với sự thiếu hụt chất dinh dưỡng, nhưng nó cũng liên quan đến các quá trình sinh lý khác nhau và sự phát triển của bệnh, bao gồmbệnh thận.31 Trong cầu thận, autophagy là cần thiết để bảo vệ podocytes khỏi sự căng thẳng của lưới nội chất và duy trì chức năng của podocyte, do đó, có một mức độ cơ bản cao của hoạt động autophagy trong podocytes. vai trò quan trọng của autophagy trong cơ chế lọc cầu thận.32,33 Do đó, việc kích hoạt autophagy ở cầu thận có thể là một trong những cơ chế liên quan đến AA, nhờ đó SCO -792 cải thiện albumin niệu ở chuột WF.
Tăng đường huyết mãn tính được báo cáo là có liên quan đến nguồn gốc của DKD bằng cách gây ra sự hoạt hóa của con đường polyol, tạo ra các sản phẩm cuối glycation nâng cao, căng thẳng oxy hóa và viêm.34 Trong nghiên cứu này, pioglitazone, giúp cải thiện tình trạng tăng đường huyết, không làm giảm UACR ở chuột WF. Điều này cho thấy rằng cải thiện tình trạng tăng đường huyết không phải là yếu tố chính trong việc giảm nhanh chóng UACR bởi SCO -792 trong mô hình này. RAS là một con đường quan trọng cho sự phát triển củasuy thận, và tác dụng có lợi của việc ức chế nó với ARB ở bệnh nhân DKD đã được thiết lập rõ ràng.5 Một nghiên cứu kết hợp cho thấy rằng thời gian bắt đầu hạ UACR là khác nhau giữa SCO -792 và irbesartan, và những cân nặng này có tác dụng cộng thêm để cải thiện UACR ở chuột WF. Những kết quả này chỉ ra rằng cơ chế tạo nên tác dụng chống albumin niệu của SCO -792 là không phụ thuộc vào RAS. Chuột WF không cao huyết áp và SCO -792 không ảnh hưởng đến huyết áp ở chuột WF; do đó, hiệu quả quan sát được của SCO -792 có thể không phụ thuộc vào việc kiểm soát huyết áp (Hình S1). Do đó, SCO -792 có thể được sử dụng như một liệu pháp bổ sung cho các chất ức chế RAS trong bất kỳ bối cảnh lâm sàng nào trong tương lai. Hơn nữa, sự ức chế bền vững của enteropeptidase đã được cho là có hiệu quả hơn trong việc điều trị các biến số bệnh vì sử dụng SCO trong chế độ ăn uống -792 cho thấy hiệu quả điều trị mạnh mẽ hơn ở liều hàng ngày thấp hơn so với dùng đường uống một lần mỗi ngày
Như đã đề cập ở trên, mức BCAA trong huyết tương đặc biệt giảm ở các AA bởi SCO -792 ở chuột WF. Mối quan hệ giữa các bệnh chuyển hóa và BCAA có tương quan rộng rãi với tình trạng kháng insulin.35 Ngoài ra, việc tiêu thụ protein gây ra đề kháng insulin ở cơ thể ở người.36 Do đó, giảm BCAA trong huyết tương do sử dụng SCO -792 có thể cải thiện tình trạng kháng insulin và cải thiện tình trạng kiểu hình bệnh tiểu đường ở chuột WF. Điều này phù hợp với kết quả nghiên cứu trước đây trên chuột mắc bệnh tiểu đường cho thấy rằng SCO -792 làm tăng độ nhạy insulin (chủ yếu ở cơ) trong một nghiên cứu kẹp tăng insulin huyết-euglycaemic.15 Hơn nữa, mức AA giảm bởi SCO {{7} } có thể tham gia vào quá trình giảm glucagon trong huyết tương thông qua một chu kỳ phản hồi lẫn nhau giữa glucagon và AAs.37 Điều thú vị là sự cải thiện mạnh mẽ của các biến số bệnh tiểu đường đã được quan sát thấy ngay cả ở liều lượng chỉ có tác động nhỏ đến trọng lượng cơ thể trong 2- tuần lặp lại nghiên cứu liều lượng của SCO -792. Chỉ số này đề cập đến các cơ chế phụ thuộc AA, bao gồm cải thiện khả năng kháng insulin và giảm nồng độ glucagon trong huyết tương có thể liên quan đến tác dụng chống tiểu đường của SCO -792 bên cạnh tác dụng giảm phụ thuộc vào trọng lượng cơ thể.
Hạn chế chính của nghiên cứu này là ảnh hưởng của SCO -792 đến giai đoạn muộn của DKD không được đánh giá. Chuột WF cho thấy có albumin niệu với GFR tăng cao, một tình trạng bệnh đại diện cho giai đoạn tương đối sớm của DKD. Để giải quyết hạn chế này, các mô hình CKD khác thể hiện sự suy giảm lũy tiến trong GFR sẽ được yêu cầu để đánh giá dài hạnthậnkết quả sau điều trị SCO -792. Gần đây, ruột–quả thậntrục đã trở thành một trong những chủ đề được quan tâm và mối liên hệ của hệ vi sinh vật đường ruột và các chất chuyển hóa của nó vớibệnh thậnĐã được nghiên cứu.38 Xem xét vai trò sinh lý của enteropeptidase, sự ức chế của nó có thể điều chỉnh thành phần hệ vi sinh vật đường ruột. Do đó, các phân tích bổ sung tập trung vào các thay đổi gây ra SCO -792- trong hệ vi sinh vật cũng cần thiết.
Kết luận, đây là nghiên cứu đầu tiên chứng minh rằng chất ức chế enteropeptidase SCO -792 cải thiện hiệu quảquả thậnbiến trong mô hình chuột DKD. Sự ức chế phân hủy protein trong ruột, sau đó là giảm hấp thu AA, có thể là con đường chính dẫn đến tác dụng tái bảo vệ của SCO -792, có tác dụng làm giảm quá trình tăng lọc ở cầu thận và kích hoạt quá trình tự động ở cầu thận. Tổng hợp lại, các kết quả cho thấy rằng SCO -792 có tiềm năng là một lựa chọn điều trị mới cho bệnh nhân DKD.