Đánh giá thành phần axit béo, chất chống oxy hóa và hoạt tính dược lý của dầu hạt bí ngô (Cucurbita Moschata) từ chiết xuất bằng enzym trong nước Phần 1
May 08, 2023
Trừu tượng:Dầu hạt bí ngô là một sản phẩm phụ, giàu chất dinh dưỡng và các thành phần hoạt tính sinh học giúp thúc đẩy một số lợi ích sức khỏe. Nghiên cứu này nhằm mục đích so sánh các thành phần hóa học, chất chống oxy hóa và hoạt tính dược lý của dầu hạt bí ngô được chiết xuất từ Cucurbita moschata Duch. Ví dụ Poir. (PSO1) và Cucurbita moschata (bí ngô Nhật Bản) (PSO2) bằng phương pháp chiết xuất enzym trong nước. Một hỗn hợp enzyme bao gồm pectinase, cellulase và protease (1:1:1) đã được sử dụng trong quy trình chiết xuất bằng enzyme. Thành phần axit béo của dầu được xác định bằng phương pháp sắc ký khí khối phổ metyl este/khí của axit béo. Thử nghiệm hoạt tính chống oxy hóa được đo bằng cách sử dụng gốc tự do ổn định diphenylpicrylhydrazyl, gốc cation 2,20 -azinobis-(3- ethylbenzothiazoline-6-sulfonate, khả năng khử/chống oxy hóa sắt và thử nghiệm sắt thiocyanate. Sự ức chế enzyme liên quan đến quá trình lão hóa và làm trắng da đã được nghiên cứu. Axit linoleic là thành phần chính của tất cả các loại dầu hạt bí ngô. Ngoài ra, cũng có một lượng đáng kể axit oleic, axit palmitic và axit stearic được phát hiện. PSO2 sở hữu các hoạt động chống oxy hóa cao nhất so với PSO1 và dầu hạt bí ngô thương mại (COM1 và COM2). Cả PSO1 và PSO2 đều thể hiện tác dụng ức chế hyaluronidase, collagenase và tyrosinase cao hơn so với thương mại. Do đó, chiết xuất bằng enzym trong nước có thể tạo ra dầu hạt bí ngô có khả năng chống oxy hóa, chống lão hóa cao hơn và hoạt động làm trắng.Điều này có lợi cho các nghiên cứu dược lý tiếp theo và có thể được sử dụng như một loại thực phẩm chức năng có lợi cho da.
Theo các nghiên cứu liên quan,hột cálà một loại thảo mộc phổ biến được mệnh danh là “thần dược kéo dài tuổi thọ”. Thành phần chính của nó làcistanoside, có tác dụng khác nhau nhưchống oxy hóa, chống viêm, Vàxúc tiến chức năng miễn dịch. Cơ chế giữa cistanche vàda làm trắngnằm trong tác dụng chống oxy hóa của cistancheglycosid. Melanin trong da người được tạo ra bởi quá trình oxy hóa tyrosine được xúc tác bởityrosinaza, và phản ứng oxy hóa cần có sự tham gia của oxy nên các gốc oxy tự do trong cơ thể trở thành nhân tố quan trọng ảnh hưởng đến quá trình sản sinh melanin. Cistanche chứa cistanoside, một chất chống oxy hóa và có thể làm giảm sự hình thành các gốc tự do trong cơ thể, do đóức chế sản xuất melamin.

Nhấp vào Bổ sung Cistanche Tubulosa
Để biết thêm thông tin:
david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
1. Giới thiệu
Bí ngô thuộc chi Cucurbita và họ Cucurbitaceae, một loại cây phổ biến và nổi tiếng được trồng ở miền bắc Mexico và đã lan sang Châu Âu, Tây Mỹ và Châu Á [1]. Bí ngô được coi là một loại thực phẩm chức năng chứa dồi dào các chất dinh dưỡng như protein, carbohydrate, lipid, chất xơ… cùng các hợp chất hóa học thực vật như tocopherols, carotenoids và -sitosterol [2]. Các chất dinh dưỡng thực vật từ các bộ phận khác nhau của bí ngô đã được tìm thấy có hoạt tính dược lý [2]. Chiết xuất vỏ bí ngô cho thấy hiệu quả vết bỏng có lợi trên mô hình động vật [3]. Bột bí ngô đã chứng minh hoạt động chống oxy hóa, chống viêm và chống hình thành mạch [2], cũng như hoạt động chống mệt mỏi ở chuột [4]. Ngoài ra, hạt bí ngô là một nguồn axit béo thiết yếu và phytosterol tự nhiên tốt giúp giảm nguy cơ tử vong do tim mạch [5,6]. Dầu hạt bí ngô là sản phẩm phụ của quá trình chế biến hạt bí ngô, rất giàu axit béo và các hợp chất hoạt tính sinh học khác nhau như -caroten, -tocopherol, vitamin B, lutein, phytosterol và các khoáng chất khác [7,8]. Dầu có tác dụng chống oxy hóa, chống viêm, kháng khuẩn và chữa lành vết thương [1,9]. Hơn nữa, nó có một số lợi ích sức khỏe chống lại bệnh tật, chẳng hạn như tăng huyết áp, tiểu đường và ung thư [8,10].
Các phương pháp chiết xuất dầu hạt khác nhau đã được phát triển, bao gồm các phương pháp cơ học như ép lạnh [11] và chiết xuất áp suất cao [12]. Chiết xuất dung môi dầu hạt sử dụng các dung môi hữu cơ như hexan, etyl axetat, axeton và metanol cũng đã được ghi nhận [13,14]. Chiết xuất có sự hỗ trợ của enzyme là một phương pháp thay thế cho ngành công nghiệp dầu thực vật vì đây là một công nghệ an toàn và thân thiện với môi trường. Cơ chế chính của quá trình chiết xuất bằng enzym trong nước là thủy phân và phá vỡ thành tế bào của nguyên liệu thực vật, dẫn đến khả năng thẩm thấu cao hơn và giải phóng các thành phần hoạt tính sinh học, bao gồm cả pha dầu [15]. Các hỗn hợp enzyme khác nhau được sử dụng trong quá trình chiết xuất này bao gồm pectinase, cellulase, hemicellulase, arabinose, -glucanase và xylanase [16,17]. Các điều kiện tối ưu của hỗn hợp enzyme, ví dụ, nhiệt độ, pH, thời gian phản ứng, kích thước hạt và nồng độ enzyme, cũng giúp tăng cường hoạt động của enzyme [16]. Ngày nay, phương pháp này đã được sử dụng rộng rãi để chiết xuất dầu từ nhiều loại quả và hạt thực vật [18,19]. Một số nghiên cứu trước đây đã chứng minh điều kiện tối ưu của dầu hạt bí ngô để thu được năng suất cao và các hoạt động dược lý hiệu quả [20,21].
Hiện nay, người ta tiêu thụ dầu hạt bí ngô trong món tráng miệng hoặc trộn salad, và nó cũng là một thành phần phổ biến trong mỹ phẩm. Lão hóa da là một quá trình sinh học phức tạp được đặc trưng bởi nếp nhăn, mất tính đàn hồi, mất độ ẩm và kết cấu thô ráp do căng thẳng oxy hóa, tổn thương DNA và tích tụ sản phẩm cuối glycation tiên tiến [22]. Axit hyaluronic, collagen và elastin, là những thành phần quan trọng của da, có thể bị phân hủy bởi các enzyme hyaluronidase, collagenase và elastase tương ứng, dẫn đến lão hóa da. Một số loại dầu thực vật, chẳng hạn như dầu ô liu, dầu hạt hướng dương, dầu hạt nho và dầu jojoba đã được sử dụng cho các đặc tính mỹ phẩm da để giữ ẩm, cải thiện chức năng hàng rào bảo vệ da và ngăn ngừa lão hóa da [23]. Ngoài ra, sắc tố da là một kiểu hình có thể thay đổi và đáng chú ý ở người liên quan đến quá trình tạo hắc tố và được điều hòa bởi enzyme tyrosinase [24]. Hiện tại, nhiều chất chiết xuất từ thực vật đã được thử nghiệm cho mỹ phẩm và dược phẩm để giảm sản xuất melanin, hoạt động như chất làm trắng [25,26].

2. Vật liệu và phương pháp
2.1. Nguyên liệu thực vật
2.2. Hóa chất và thuốc thử
2.3. Chiết xuất enzyme nước
Dầu hạt bí ngô từ cả C. moschata Duch. Ex Poir và C. moschata (bí ngô Nhật Bản) được chiết xuất bằng phương pháp chiết xuất enzyme trong nước sử dụng các thông số thủy phân enzyme từ một nghiên cứu trước đây của Kanopka et al. (2016), bao gồm nồng độ enzyme, tỷ lệ enzyme-cơ chất, nhiệt độ phản ứng, pH và thời gian phản ứng [21]. Ba loại enzyme khác nhau, bao gồm pectinase, cellulase và protease, được kết hợp theo tỷ lệ trọng lượng 1:1:1 để tạo ra hỗn hợp enzyme đậm đặc. Sau đó, cocktail cô đặc thu được được pha loãng trong nước DI để tạo ra hỗn hợp enzym chứa nước 2 phần trăm w/w. Hạt bí ngô không có vỏ sau đó được thêm vào hỗn hợp nước chứa enzym thu được theo tỷ lệ trọng lượng là 1:1. Hỗn hợp này sau đó được nghiền mịn bằng máy xay Moulinex DB81 ở nhiệt độ phòng cho đến khi đồng nhất. Độ pH của huyền phù thu được sau đó được điều chỉnh thành 4,7 bằng cách sử dụng HCl 0,1 M và ủ ở 54 ◦C trong 15 giờ. Sau khi bùn được làm lạnh xuống nhiệt độ phòng, nó được ly tâm ở 11.500 × g trong 10 phút. Lớp trên cùng của chất nổi trên bề mặt, đó là pha dầu, đã được thu thập. Kem được tạo ra trong quá trình chiết xuất không được nhũ hóa mà được loại bỏ bằng cách hút bằng micropipette. Phần bã của hạt bí ngô được loại bỏ bằng cách lọc qua giấy lọc Whatman No.1 trong chân không [21]. Dầu hạt bí ngô từ C. moschata Duch. Ex Poir (PSO1) và C. moschata (bí ngô Nhật Bản) (PSO2) được giữ trong các vật chứa đậy kín, chống ánh sáng ở nhiệt độ phòng cho đến khi thử nghiệm thêm.
2.4. Xác định thành phần hóa học của dầu hạt bí ngô bằng phương pháp axit béo Methyl Ester/khí sắc ký khối phổ (FAME/GC/MS)

2.5. Xác định hoạt tính chống oxy hóa
2.5.1. 2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl (DPPH) Thử nghiệm nhặt gốc tự do
Hoạt động nhặt gốc tự do DPPH (DPPH• ) được xác định bằng cách sử dụng phương pháp được thiết lập bởi Chaiyana et al. (2017) [27]. Tóm lại, 20 µL mẫu dầu (PSO1, PSO2, COM1, COM2) và axit linoleic hòa tan trong DMSO được trộn với 180 µL dung dịch etanol 167 µM DPPH trong đĩa giếng 96-và sau đó ủ trong 30 phút ở nhiệt độ phòng trong bóng tối. Axit ascoricic (1 mg/mL) đã được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Mật độ quang học (OD) được đo ở bước sóng 520nm bằng cách sử dụng đầu đọc vi bản (Microplate reader EZ Read 2000, Biochrom, England). Các thí nghiệm đã được thực hiện ba lần và được thực hiện trong ba lần độc lập. Tỷ lệ phần trăm ức chế DPPH được tính bằng Công thức (1):
DPPH ức chế ( phần trăm )={[(ODA − ODB) − (ODC − ODD)]/(ODA − ODB)} × 100, (1)
2.5.2. 2,20 -Xét nghiệm Azino-Bis-3-Ethylbenzthiazoline-6-Axit Sulphonic (ABTS)
Hoạt động nhặt rác gốc cation ABTS (ABTS• plus ) được đo bằng phương pháp so màu theo Chaiyana et al. (2017) và Paradee et al. (2019) [27,28] với sửa đổi nhỏ. ABTS• plus được tạo ra bằng cách thêm 2 mL ABTS 7 mM với 3 mL kali persunfat 2,45 mM và ủ trong 16–24 giờ ở nhiệt độ phòng trong bóng tối. ABTS• plus thu được sau đó được pha loãng với etanol để thu được OD là 0,7 ± 0,1 ở 750 nm. Tóm lại, 20 µL mẫu dầu (PSO1, PSO2, COM1, COM2) và axit linoleic hòa tan trong DMSO được trộn với 180 µL ABTS• cộng với dung dịch etanol trong đĩa giếng 96-và ủ trong 5 phút ở nhiệt độ phòng . OD được đo ở bước sóng 750nm bằng cách sử dụng đầu đọc vi bản (Microplate reader EZ Read 2000, Biochrom, England). Axit ascoricic (1 mg/mL) đã được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Đường chuẩn được tạo ra bằng cách vẽ đồ thị độ hấp thụ ở bước sóng 750 nm so với các nồng độ Trolox khác nhau nằm trong khoảng từ 2,5–30 µg/mL. ABTS• cộng với hoạt tính nhặt rác được tính toán từ đường chuẩn Trolox (R2=0.9922) và được biểu thị bằng khả năng chống oxy hóa tương đương Trolox (TEAC). Các thí nghiệm đã được thực hiện ba lần và được thực hiện trong ba lần độc lập.
2.5.3. Xét nghiệm năng lượng chống oxy hóa giảm sắt (FRAP)
Khả năng chống oxy hóa khử sắt (FRAP) của từng mẫu được xác định bằng cách sử dụng xét nghiệm FRAP như được mô tả trong nghiên cứu trước đây của Chaiyana et al. (2017) đã được sửa đổi một chút từ Saeio et al. (2011) [27,29]. Thuốc thử FRAP mới được tạo ra bằng cách trộn dung dịch đệm axetat 300 mM (pH 3,6), 10 mM 2,4,6 tripyridyl-s-triazine (TPTZ) trong HCl 40 mM và FeCl3 20 mM theo tỷ lệ 10:1:1. Trong nghiên cứu này, 20 µL mẫu dầu (PSO1, PSO2, COM1, COM2) và axit linoleic được trộn với 180 µL thuốc thử FRAP trong đĩa giếng 96-và ủ trong 5 phút ở nhiệt độ phòng trong bóng tối. OD được đo ở bước sóng 595nm bằng cách sử dụng đầu đọc vi bản (Microplate reader EZ Read 2000, Biochrom, England). Axit ascoricic (1 mg/mL) đã được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Đường chuẩn được tạo ra bằng cách vẽ đồ thị độ hấp thụ ở bước sóng 595 nm so với các nồng độ khác nhau của sắt sunfat (FeSO4) nằm trong khoảng từ 0,003–0,5 mM. Giá trị FRAP được tính toán từ đường chuẩn FeSO4 (R2=0.9965) và được biểu thị bằng dung lượng tương đương (EC1). Các thí nghiệm đã được thực hiện ba lần và được thực hiện trong ba lần độc lập.
2.5.4. Xét nghiệm Ferric Thiocyanate (FTC)
2.6. Xác định các hoạt động chống lão hóa
2.6.1. Hoạt động chống hyaluronidase
Phép đo hoạt động chống hyaluronidase đã được thực hiện như được mô tả trước đây bởi Chaiyana et al. (2020) [31]. Đầu tiên, 20 µL mẫu dầu (PSO1, PSO2, COM1, COM2) được trộn với 100 µL dung dịch hyaluronidase 15 U/mL và ủ ở 37 ◦C trong 10 phút. Sau khi ủ, 100 µL axit hyaluronic 0,03% w/v được hòa tan trong dung dịch đệm 20 mM phosphate (pH 5,35) được thêm vào, sau đó ủ ở 37 ◦C trong 45 phút. Sau đó, 1 mL albumin huyết thanh bò 0,1 phần trăm đã được thêm vào và ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút. OD được xác định ở bước sóng 600nm bằng máy dò đa chế độ (Beckman Coulter DTX880, Fullerton, CA, USA). Axit oleanolic (0,25 phần trăm w/v) đã được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Các thí nghiệm đã được thực hiện ba lần và được thực hiện trong ba lần độc lập. Tỷ lệ phần trăm ức chế hyaluronidase được tính bằng Công thức (3):
2.6.2. Hoạt động chống Collagenase
Phép đo hoạt động chống collagenase được thực hiện theo quy trình được thiết lập bởi Chaiyana et al. (2019) và Thring et al. (2009) với những sửa đổi nhỏ [32,33]. Tóm lại, 20 µL mẫu dầu (PSO1, PSO2, COM1, COM2) được trộn với 20 µL dung dịch collagenase 0,1 U/mL từ Clostridium histolyticum và ủ ở 37 ◦C trong 15 phút. Sau khi ủ, 80 µL dung dịch đệm tricine 50 mM (400 mM NaCl và 10 mM CaCl2, pH 7,5) và 40 µL N-[3-(2-furyl) acryloyl]-Leu-Gly- Dung dịch cơ chất Pro-Ala (FALGPA) đã được thêm vào. OD ngay lập tức được phát hiện ở bước sóng 340nm và sau đó được đo liên tục trong 20 phút bằng cách sử dụng đầu đọc vi bản (Đầu đọc vi bản EZ Read 2000, Biochrom, Anh). Axit oleanolic (1 phần trăm w/v) đã được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Các thí nghiệm đã được thực hiện ba lần và được thực hiện trong ba lần độc lập. Tỷ lệ phần trăm ức chế collagenase được tính bằng Công thức (4):
2.6.3. Hoạt động chống Elastase
Phép đo hoạt động chống elastase được thực hiện theo quy trình được thiết lập bởi Chaiyana et al. (2019) và Thring et al. (2009) với một chút sửa đổi [32,33]. Tóm lại, 10 µL mẫu dầu (PSO1, PSO2, COM1, COM2) được trộn với 40 µL dung dịch elastase 0,03 U/mL từ tuyến tụy lợn, sau đó 50 µL dung dịch đệm Tris-HCL 200 mM (pH 8,0) và 100 µL dung dịch Dung dịch cơ chất 0,8 mM N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN) đã được thêm vào. OD ngay lập tức được phát hiện ở bước sóng 410nm và sau đó được đo liên tục trong 20 phút bằng cách sử dụng đầu đọc vi bản (Đầu đọc vi bản EZ Read 2000, Biochrom, Anh). Axit oleanolic (1 phần trăm w/v) đã được sử dụng như một biện pháp kiểm soát tích cực. Các thí nghiệm đã được thực hiện ba lần và được thực hiện trong ba lần độc lập. Tỷ lệ phần trăm ức chế elastase được tính bằng Công thức (5):
2.7. Xác định các hoạt động chống Tyrosinase
Tác dụng làm trắng của chiết xuất tự nhiên được thiết lập bằng phép đo hoạt tính chống tyrosinase được thực hiện theo Saeio et al. (2011) và Laoirisathian et al. (2020) [29,34]. L-tyrosine và L-DOPA là chất nền của enzyme tyrosinase trong nghiên cứu này. Tóm lại, 10 µL mẫu dầu (PSO1, PSO2, COM1, COM2) được trộn với 30 µL tyrosinase trong đĩa giếng 96-, sau đó ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút. Sau khi ủ, 100 µL chất nền, là 2,5 mM L-tyrosine hoặc L-DOPA, được thêm vào và ủ trong 30 phút. OD được xác định ở bước sóng 450nm bằng đầu đọc vi bản (Microplate reader EZ Read 2000, Biochrom, England). Axit Kojic (20 µg/mL) được sử dụng như một biện pháp kiểm soát dương tính. Các thí nghiệm đã được thực hiện ba lần và được thực hiện trong ba lần độc lập. Tỷ lệ phần trăm ức chế tyrosinase được tính bằng Công thức (6):
2.8. Phân tích thống kê
Tất cả dữ liệu được thể hiện dưới dạng trung bình ± độ lệch chuẩn (SD). Ý nghĩa thống kê được phân tích bằng phân tích phương sai một chiều (ANOVA), sau đó là bài kiểm tra hậu kiểm của Tukey bằng cách sử dụng GraphPad Prism (phiên bản 8.0, Phần mềm GraphPad) và p < 0.05 đã được xem xét ý nghĩa thống kê.

3. Kết quả và thảo luận
3.1. Nhân vật dầu hạt bí ngô
Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã sử dụng phương pháp chiết xuất bằng enzym trong nước thay vì chiết xuất bằng dung môi hữu cơ để chiết xuất dầu hạt bí ngô từ C. moschata Duch. Ex Poir (PSO1) và C. moschata (PSO2) vì đây là một quy trình đơn giản, hiệu quả và năng suất cao [15,21]. PSO1 là chất lỏng màu nâu sẫm với độ nhớt thấp, trong khi đó, PSO2 là chất lỏng màu nâu xanh với độ nhớt thấp. Cả hai loại dầu hạt bí ngô đều có mùi đặc trưng. Sản lượng của PSO1 và PSO2 lần lượt là 17,7% v/w và 15,6% v/w. Ngoài dầu, hạt bí ngô đã được báo cáo là có chứa nhiều hợp chất dinh dưỡng. Thành phần gần đúng của C. moschata chủ yếu là carbohydrate (39,51 % ), tiếp theo là chất béo (28,49 %), protein (19,23 %), nước (7,67 % ) và tro (5,18 % ), tương ứng [35]. Tuy nhiên, so với các nghiên cứu trước đây sử dụng dung môi và ép cơ học, nghiên cứu hiện tại cho thấy sản lượng dầu C. moschata thấp hơn. Mặc dù chiết xuất bằng dung môi đã được mô tả là phương pháp chiết xuất dầu hiệu quả nhất, chiết xuất tới 98% dầu từ hạt, vẫn có một số vấn đề liên quan đến dư lượng dung môi và độ tinh khiết của dầu được sản xuất [36]. Ngoài ra, dung môi được sử dụng trong quá trình chiết xuất ảnh hưởng đến sản lượng dầu được tạo ra. Chiết xuất bằng hexan, ete dầu mỏ, benzen dầu mỏ, cyclohexan, isopropyl ete, etyl axetat, tetrahydrofuran, propan-2-ol và axeton thu được 43,4–64,4 phần trăm [37,38]. Do đó, phương pháp ép lạnh được ưa chuộng hơn phương pháp chiết xuất bằng dung môi. Tuy nhiên, máy ép nguội có thể gây ra một số phức tạp trong giai đoạn đầu sử dụng máy ép trục vis [39]. Do đó, chiết xuất bằng enzym trong nước có thể là một phương pháp chiết xuất thay thế vì nó mang lại hàm lượng dầu hạt bí ngô cao hơn (36,0 phần trăm) khi so sánh với dầu ép lạnh (33,5 phần trăm) [21]. Mặc dù quy trình chiết xuất enzyme dạng nước phức tạp hơn so với ép lạnh, nhưng nó bao gồm chi phí đầu tư tương đối rẻ hơn, chi phí cho các chế phẩm enzyme thương mại tiếp tục giảm, khả năng cô lập đồng thời các thành phần hóa học độc đáo và có giá trị, cũng như xử lý mong muốn phổ biến về việc thực hiện các công nghệ xanh [21]. Các nghiên cứu sơ bộ đã mô tả rằng một số enzyme như cellulase, pectinase, hemicellulase và protease thường được sử dụng để phá hủy cấu trúc thành tế bào thực vật nhằm tăng cường chiết xuất hoạt tính sinh học từ thực vật [16,17]. Do đó, chúng tôi đã thiết kế nghiên cứu này để chiết xuất dầu hạt bằng cách sử dụng hỗn hợp enzyme có chứa pectinase, cellulase và protease (1:1:1) như mô tả trước đây của Kanopka et al. (2016), người đã tối ưu hóa các điều kiện thủy phân bằng enzyme để thu được sản lượng dầu hạt bí ngô cao nhất [21]. Hơn nữa, phương pháp này cho thấy các giải pháp thay thế an toàn hơn và bền vững hơn với môi trường để chiết xuất bằng dung môi, ở đây được gọi là "chiết xuất xanh".
3.2. Thành phần hóa học của dầu hạt bí ngô
Đối với phân tích thành phần axit béo, dầu hạt bí ngô sử dụng phương pháp chiết xuất enzym trong nước (PSO1 và PSO2) được so sánh và phân tích cùng với dầu hạt bí ngô thương mại (COM1 và COM2) được sản xuất bằng phương pháp chiết xuất ép lạnh. Thành phần axit béo của PSO1, PSO2, COM1 và COM2 được trình bày trong Bảng 1. Tất cả các mẫu dầu hạt bí ngô bao gồm axit béo không bão hòa đa (PUFA), không bão hòa đơn (MUFA) và axit béo bão hòa. Axit Cis-linoleic (C18:2) là thành phần chính trong tất cả các mẫu dầu. COM2 chứa hàm lượng axit béo cao nhất (51,74 phần trăm ), tiếp theo là COM1 (48,00 phần trăm), PSO1 (39,09 phần trăm) và PSO2 (37,63 phần trăm ), tương ứng. Tương tự, axit cis-oleic (C18:1) có mặt với tỷ lệ cao, đặc biệt là trong PSO2 (37,45 phần trăm ), tiếp theo là COM1 (33,39 phần trăm ), PSO1 (31,22 phần trăm) và COM2 (28,64 phần trăm ). Các axit béo bão hòa như axit palmitic (C16:0) và axit stearic (C18:0) chỉ được tìm thấy với một lượng nhỏ trong mỗi mẫu dầu. Lượng vết của PUFA, MUFA và axit béo bão hòa khác cũng được quan sát và xác định.
Trong tài liệu, axit linoleic còn được gọi là omega-6, một loại axit béo thiết yếu mà cơ thể con người không thể tổng hợp được, chỉ nhận được qua chế độ ăn uống. Axit linoleic là một chất dinh dưỡng quan trọng đối với các chức năng sức khỏe ở người, liên quan đến tiền thân của ceramides, thành phần chính của màng tế bào, vitamin D và nhiều loại hormone [40,41]. Các nghiên cứu trên động vật đã chỉ ra rằng sự thiếu hụt axit linoleic có thể gây ra vảy và ngứa da [23]. Ngoài ra, axit linoleic từ dầu thực vật đã hỗ trợ chữa lành vết thương trên da, đồng thời ngăn ngừa viêm da và mụn trứng cá [23]. Hơn nữa, axit oleic, hay omega-9, có lợi trong việc ngăn ngừa ung thư, các bệnh tự miễn dịch và viêm nhiễm [42]. Thật vậy, axit oleic làm giảm đáng kể quá trình sản xuất oxit nitric tại vị trí vết thương, giúp vết thương đóng lại nhanh hơn [43]. Những dữ liệu này chứng minh rằng dầu hạt bí ngô, làm giàu axit linoleic (omega-6) và axit oleic (omega-9), thể hiện những lợi ích sức khỏe tiềm ẩn.

Từ những phát hiện của chúng tôi, dầu hạt bí ngô (PSO1, PSO2, COM1 và COM2) bao gồm nhiều axit béo bao gồm axit linoleic (C18:2), axit oleic (C18:2), axit palmitic (C16:0) và axit stearic (C18:0) là những thành phần phổ biến được tìm thấy trong dầu hạt bí ngô [44]. Axit linoleic (omega-6) và axit oleic (omega-9) chiếm ưu thế trong tất cả các mẫu dầu. Lượng axit linoleic cao nhất là COM2, tiếp theo là COM1, PSO1 và PSO2 tương ứng. Ngoài ra, lượng axit oleic cao nhất là PSO2, tiếp theo là COM1, PSO1 và COM2. Những kết quả này giải thích rằng quá trình chiết xuất dầu hạt bí ngô bằng enzyme trong nước có axit linoleic thấp hơn một chút, nhưng không phải là axit oleic so với chiết xuất bằng máy ép lạnh. Lý do khiến hàm lượng axit linoleic trong hạt bí ngô từ quá trình chiết xuất bằng enzym trong nước thấp hơn so với trong các mẫu dầu thương mại là do sự khác biệt trong quá trình chiết xuất. Các nghiên cứu trước đây đã phát hiện ra sự không nhất quán về lượng axit béo không bão hòa, đặc biệt là axit oleic và axit linoleic, trong dầu hạt bí ngô từ các chiết xuất khác nhau [39]. Hàm lượng axit oleic dao động từ 28,19 phần trăm trong dầu hạt bí ngô ép lạnh đến 30,56 phần trăm trong dầu hạt bí ngô được chiết xuất bằng pentane, trong khi hàm lượng axit linoleic dao động từ 43,86 phần trăm trong dầu hạt bí ngô được chiết xuất bằng pentane đến 46,67% trong dầu hạt bí ngô ép lạnh [39]. Ngoài các phương pháp chiết xuất khác nhau, dung môi được sử dụng trong quá trình chiết xuất và nhiệt độ trong quá trình trưởng thành của hạt cũng ảnh hưởng đến hàm lượng axit linoleic trong hạt thực vật. Một nghiên cứu trước đây đã nhấn mạnh rằng ete dầu mỏ tạo ra dầu hạt lanh có hàm lượng linoleic thấp (26,2 phần trăm ), trong khi n-hexan mang lại kết quả trái ngược với hàm lượng axit linoleic là 46,5 phần trăm [45]. Ngoài ra, axit linoleic tỷ lệ nghịch với nhiệt độ trong quá trình trưởng thành của hạt hướng dương [46].
Ngoài ra, một nghiên cứu tương đối đã phát hiện ra rằng thành phần hóa học xét về thành phần axit béo tiết lộ rằng axit linoleic và oleic có mặt lần lượt là 47,45% và 35% trong dầu hạt bí ngô (C. maxima) được chiết xuất bằng dietyl ete [47] . Theo Akin et al. (2018), hàm lượng axit linoleic dao động từ 53,19% đến 53,27% , tiếp theo là axit oleic, cũng có hàm lượng cao từ 27,52% đến 27,59% trong chiết xuất dầu hạt C. pepo L. ép lạnh [48 ]. Do đó, chiết xuất bằng enzym trong nước trong nghiên cứu này cũng thu được sản lượng axit béo thấp hơn so với chiết xuất bằng dung môi và chiết xuất bằng phương pháp ép lạnh được đề cập trong các nghiên cứu trước đây. Khi so sánh giữa các giống cây trồng, chúng tôi thấy rằng PSO1 (C. moschata Duch. Ex Poir) cho thấy lượng axit linoleic cao hơn PSO2 (C. moschata, hay bí ngô Nhật Bản). Đa dạng, PSO2 có lượng axit oleic cao hơn PSO1. Điều quan trọng là, các biến thể về thành phần axit béo và lượng dầu hạt bí ngô phụ thuộc vào nguồn gốc của các giống cây trồng cụ thể, điều kiện khí hậu và quản lý sau thu hoạch [49]. Ngoài sự khác biệt về thành phần axit béo của dầu hạt bí ngô thu được từ các phương pháp chiết xuất khác nhau, dầu từ công nghệ enzym hóa nước được báo cáo là giàu phytosterol và tocopherol [50]. Do đó, PSO1 và PSO2, được sản xuất từ phương pháp chiết xuất xanh, được đề xuất làm dầu hạt bí ngô thay thế cho các ứng dụng tiếp theo.
Để biết thêm thông tin: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501






