Nhịn ăn và cho ăn quá mức ảnh hưởng đến sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm ở gan gia cầm thông qua Retrovirus nội sinh

TRỪU TƯỢNG

Người ta biết rằng dinh dưỡng và khả năng miễn dịch có mối liên hệ với nhau nhưng cơ chế này chưa rõ ràng lắm. Retrovirus nội sinh (ERV) chiếm 8 đến 10% bộ gen của người và chuột và đóng vai trò quan trọng trong một số quá trình sinh học của động vật. Các nghiên cứu gần đây chỉ ra rằng việc kích hoạt ERV có thể ảnh hưởng đến sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm và các hoạt động của ERV phải chịu sự điều chỉnh của nhiều yếu tố bao gồm các yếu tố dinh dưỡng. Do đó, chúng tôi đưa ra giả thuyết rằng tình trạng dinh dưỡng có thể ảnh hưởng đến sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm thông qua ERV. Để xác minh giả thuyết này, tình trạng dinh dưỡng của động vật đã được thay đổi khi nhịn ăn hoặc cho ăn quá nhiều và biểu hiện ERV nguyên vẹn (ERVK18P, ERVK25P) và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm (DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7, STAT3) trong gan được xác định bằng phương pháp PCR định lượng, sau đó là biểu hiện quá mức ERVK25P trong tế bào gan nguyên phát của ngỗng và xác định biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm. Dữ liệu cho thấy so với nhóm đối chứng (không nhịn ăn), biểu hiện của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm nhiễm đã tăng lên ở gan của gà nhịn ăn nhưng lại giảm ở gan của ngỗng nhịn ăn. Hơn nữa, so với nhóm đối chứng (cho ăn thường xuyên), biểu hiện của ERV và các gen liên quan đến khả năng miễn dịch hoặc viêm nhiễm đã tăng lên trong gan của những con ngỗng được cho ăn quá mức. Ngoài ra, sự biểu hiện quá mức của ERVK25P trong tế bào gan nguyên phát của ngỗng có thể gây ra sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm. Tóm lại, những phát hiện này cho thấy ERV làm trung gian tác động của việc nhịn ăn và cho ăn quá mức đối với sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm, sự điều hòa khác nhau tùy theo loài gia cầm, và ERV cũng như các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm có thể liên quan đến sự phát triển của gan nhiễm mỡ ngỗng. Nghiên cứu này cung cấp một cơ chế tiềm năng cho mối liên hệ giữa dinh dưỡng và khả năng miễn dịch.

Cistanche Deserticola ma-Duy trì gan

Từ khóa: dinh dưỡng, miễn dịch, gia cầm, gan nhiễm mỡ, retrovirus nội sinh

GIỚI THIỆU

Retrovirus nội sinh (ERV) được coi là tàn dư của retrovirus ngoại sinh (provirus). Hầu hết các trình tự 'hóa thạch' còn lại này chứa một số đột biến đã được tích lũy trong quá trình tiến hóa lâu dài kể từ khi chúng tích hợp vào bộ gen của vật chủ (Cañadas et al., 2018). Chúng tồn tại ở hầu hết các loài động vật có vú (như người, chuột, mèo và cừu) và các động vật có xương sống khác (như gà) (Melanie và Nair, 2014; Xu và cộng sự, 2014). Ở gà, ERV chiếm hơn 3% bộ gen của gà (Huda et al., 2008). Mặc dù ERV có rất nhiều trong bộ gen động vật nhưng nhiều ERV không còn nguyên vẹn. ERV nguyên vẹn đề cập đến những loại có cấu trúc không dễ phân biệt với các retrovirus ngoại sinh. Các ERV này thường chứa 2 đoạn lặp đầu cuối dài (LTR) có các yếu tố điều hòa phiên mã, trình tự mã hóa của protein virut (kháng nguyên đặc hiệu nhóm [Gag], enzyme phiên mã ngược [Pol] và protein vỏ [Env]), trình tự theo dõi polypurine và trình tự gen ngắn ở sườn của tế bào chủ (Jern và Coffin, 2008; Dolei và cộng sự, 2015; K€ury và cộng sự, 2018). Cho đến nay, có khoảng 500 ERV tương đối nguyên vẹn được tìm thấy trong bộ gen của gà (Bolisetty et al., 2012). Ngoài ERV tương đối nguyên vẹn, còn có các loại ERV khác, bao gồm ERV 'mảnh mai' thiếu một hoặc nhiều gen mã hóa cần thiết cho khả năng tự sao chép (thường là gen Env) và ERV 'solo LTR'. Số lượng ERV 'LTR đơn lẻ' gấp khoảng 60 lần số lượng ERV tương đối nguyên vẹn (Bolisetty và cộng sự, 2012). Phân tích phát sinh loài chỉ ra rằng các proretrovirus gia cầm (tức là ERV) có thể được phân thành các loại proretrovirus loại I (giống gamma), loại II (giống alpha và beta) và các loại proretrovirus loại III (khá giống spumalike). Các proretrovirus giống alpha đông hơn các proretrovirus giống beta, giống gamma và alpha (Bolisetty et al., 2012). So với proretrovirus ở động vật có vú, proretrovirus ở gia cầm không đồng nhất hơn. Các retrovirus chuyên nghiệp giống beta đã trải qua quá trình chuyển đổi tiến hóa từ giống beta sang giống bảng chữ cái và sau đó sang retrovirus chuyên nghiệp giống alpha, với sự mất dần các dấu hiệu retrovirus beta. Các proretrovirus trong bảng chữ cái là dạng trung gian giữa các loại giống alpha và giống beta, bao gồm một số proretrovirus gia cầm được công nhận trước đó. Các retrovirus chuyên nghiệp loại III dường như là loại lâu đời nhất, tiếp theo là các retrovirus chuyên nghiệp giống beta và giống gamma, trong khi các retrovirus chuyên nghiệp giống alpha và bảng chữ cái dường như là loại trẻ nhất. Hầu hết các proretrovirus được tích hợp vào gen chủ theo hướng cảm giác (Bolisetty và cộng sự, 2012).

Lợi ích của cistanche tubulosa-Duy trì gan

Giống như các transposon không phải LTR (ví dụ, các nguyên tố hạt nhân xen kẽ dài hoặc ngắn), ERV là các nguyên tố di động có thể tự chuyển vị dưới dạng trình tự DNA từ vị trí này sang vị trí khác trong bộ gen chủ. Sự chuyển vị này được thực hiện qua trung gian RNA. Mặc dù ERV dưới dạng retrotransposon có khả năng chuyển vị mạnh trong giai đoạn đầu của quá trình tiến hóa, nhưng hầu hết chúng hiện đã mất khả năng này (Jern và Coffin, 2008). Hơn nữa, các nghiên cứu giải trình tự sâu chỉ ra rằng nhiều ERV thường im lặng. Ví dụ, chỉ có khoảng 20% ​​ERV được phiên mã trong nguyên bào sợi phôi gà và một tập hợp con trong số này cũng được phiên mã in vivo (Bolisetty et al., 2012). Ngoài ra, các nghiên cứu gần đây cho thấy một số ERV thầm lặng có thể được kích hoạt và biểu hiện trong những điều kiện nhất định (Crichton và cộng sự, 2014), và biểu hiện của chúng bị ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố, chẳng hạn như loại tế bào hoặc loại mô (đặc biệt là nhau thai và tế bào mầm). , quá trình biệt hóa và lão hóa tế bào, cytokine, các yếu tố phá vỡ chức năng bình thường của tế bào và các yếu tố dinh dưỡng (Taruscio và Mantovani, 2004; Denner, 2016; Elaheh et al., 2018). Trong những thập kỷ gần đây, các chức năng sinh học của ERV dần được khám phá: 1) Sự chuyển vị của ERV có thể làm mất ổn định bộ gen của vật chủ, nhưng ERV với tư cách là vật liệu di truyền ban đầu cho phép động vật chủ tăng cường sự đa dạng giữa và trong loài, tăng cường khả năng thích ứng với môi trường và duy trì liên tục. tiến hóa (Zhang và cộng sự, 2008); 2) Các chất xúc tiến và chất tăng cường trong vùng LTR của ERV có thể ảnh hưởng đến quá trình phiên mã của các gen lân cận của chúng và làm thay đổi trạng thái biểu sinh của các vùng lân cận (chẳng hạn như quá trình methyl hóa DNA và sửa đổi histone) (Thompson và cộng sự, 2016); 3) Bằng cách liên kết protein Env với thụ thể của vật chủ, ERV có thể ngăn chặn sự liên kết của vi rút ngoại sinh với cùng các thụ thể, do đó cung cấp cho tế bào chủ khả năng chống lại vi rút ngoại sinh (Nadeau và cộng sự, 2015); 4) Các bản phiên mã ERV có thể kích hoạt hệ thống miễn dịch bẩm sinh và tạo ra sự sản xuất các cytokine như IFN thông qua con đường truyền tín hiệu TLR3/MDA5 phụ thuộc RNA chuỗi kép, do đó ức chế các khối u (Chiappinelli và cộng sự, 2015); và 5) ERV cũng liên quan đến sự xuất hiện và phát triển của một số bệnh như lão hóa, tự miễn dịch và các bệnh thoái hóa thần kinh (Mager và Stoye, 2015; Nadeau và cộng sự, 2015).

Nhóm retrovirus nội sinh K (ERVK) là nhóm được nội sinh hóa gần đây nhất trong số các nhóm ERV khác nhau (ERVW, ERVH, ERVK, v.v.). Nó chứa trình tự mã hóa cho các protein chức năng, do đó được coi là nhóm ERV nguyên vẹn và có hoạt tính sinh học nhất (Hohn và cộng sự, 2013). Sự biểu hiện điều chỉnh tăng của ERVK có liên quan đến bệnh viêm, bệnh thần kinh, bệnh tự miễn, v.v. (Haraguchi và cộng sự, 1992; Tolosa và cộng sự, 2012). Các nghiên cứu gần đây cho thấy rằng hoạt hóa ERVK bằng chất ức chế methyltransferase DNA, 5-aza-2-deoxycytidine, có thể tăng cường khả năng miễn dịch bẩm sinh của tế bào (Nogues và cộng sự, 2018). So với ERVK của con người có nhiều thành viên, ERVK của chim chỉ có một số thành viên được chú thích trong GenBank. Các thành viên ERVK được chú thích được chia sẻ bởi gà và ngỗng chỉ là ERVK18P (LOC106029425) và ERVK25P (LOC106046236). Hiện tại, vai trò sinh học hoặc bệnh lý của ERVK ở gia cầm vẫn chưa được biết rõ. Tình trạng dinh dưỡng và năng lượng là những yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến sự tăng trưởng, sinh sản và khả năng miễn dịch của động vật. Như đã đề cập trước đây, các yếu tố dinh dưỡng có thể kích hoạt sự biểu hiện của ERV và ERV có thể điều chỉnh sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm theo nhiều cách. Do đó, chúng tôi suy đoán rằng mức độ dinh dưỡng hoặc năng lượng có thể ảnh hưởng đến sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm thông qua ERV. Để xác minh suy đoán này, tình trạng dinh dưỡng đã được thay đổi bằng cách nhịn ăn hoặc cho ăn quá nhiều ở gà hoặc ngỗng thí nghiệm, sau đó biểu hiện của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm ở gan đã được xác định. Ngoài ra, sự biểu hiện quá mức ERVK25P trong tế bào gan nguyên phát của ngỗng cũng được thực hiện để giải quyết mối quan hệ giữa ERV và các gen liên quan đến miễn dịch (hoặc viêm). Nghiên cứu này cung cấp một cái nhìn sâu sắc mới về cơ chế kết nối giữa dinh dưỡng và khả năng miễn dịch.

cistanche tubulosa-cải thiện hệ thống miễn dịch

Nhấn vào đây để xem các sản phẩm Tăng cường miễn dịch Cistanche

【Hỏi thêm] Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

Động vật thí nghiệm

Tất cả các quy trình dành cho động vật đều tuân theo hướng dẫn của tổ chức về việc sử dụng động vật nông nghiệp trong nghiên cứu và được Ủy ban Chăm sóc và Sử dụng Động vật tại Đại học Dương Châu, Trung Quốc phê duyệt.

Những con ngỗng con Jurong Siji trong cùng một lứa nở được nuôi trên mặt đất dưới ánh sáng tự nhiên và quản lý chăn nuôi thông thường tại Trang trại Thực nghiệm Mali (Jurong, Giang Tô, Trung Quốc). Ở tuổi 70 ngày, 16 con ngỗng khỏe mạnh được chia ngẫu nhiên thành 2 nhóm: nhóm nhịn ăn (ngỗng nhịn ăn trong 24 giờ và được tiếp cận với nước miễn phí) và nhóm đối chứng (không nhịn ăn, tiếp cận thức ăn và nước uống tùy ý). Sau 24 giờ nhịn ăn, tất cả các cá thể thí nghiệm đều bị giết và các mẫu gan được thu thập, đông lạnh nhanh trong nitơ lỏng và chuyển ở nhiệt độ 270 C để bảo quản. Tương tự, mười sáu con gà Rhode Island Red khỏe mạnh mười sáu tuần tuổi đã bị hiến tế cho một thí nghiệm nhịn ăn. Ngược lại với việc nhịn ăn, mười sáu con ngỗng Landes khỏe mạnh 70-ngày tuổi (được cung cấp bởi Lichen Animal and Poultry Co., Ltd., Huaian, Jiangsu, China) được chia ngẫu nhiên và bằng nhau thành các đợt cho ăn quá mức (24 ngày cho ăn quá mức) và nhóm đối chứng (cho ăn thường xuyên). Quy trình cho ăn quá mức đã được Geng và cộng sự, 2016a mô tả trước đây. Vào ngày thứ 24 cho ăn quá mức, các mẫu gan được thu hoạch từ cả nhóm đối chứng và nhóm cho ăn quá mức và bảo quản ở nhiệt độ 270 C.

Phân lập và nuôi cấy tế bào gan nguyên phát của ngỗng và sự biểu hiện quá mức của ERV

Các tế bào gan nguyên phát của ngỗng được phân lập và nuôi cấy từ phôi ngỗng vào ngày thứ 22 hoặc 23 sau khi nở như được mô tả trước đây bởi Osman và cộng sự, 2016. Vectơ biểu hiện quá mức tùy chỉnh của gen LOC106046236 của ngỗng (hoặc thành viên ERVK 25 giống protein Pol, ERVK25P ) và vectơ trống được mua từ Công ty TNHH Tô Châu Jima Gene (Tô Châu, Trung Quốc). Vectơ biểu hiện quá mức được tạo ra bằng cách sử dụng vectơ pcDNA3.1 chứa trình tự khởi đầu CMV và đoạn DNA được chèn vào là trình tự mã hóa của gen ERVK25 polymerase. Vectơ biểu hiện quá mức và vectơ trống được chuyển nhiễm riêng biệt vào tế bào gan nguyên phát của ngỗng đã được phân lập và nuôi cấy trong 24 giờ với Lipofectamine 2000 (cat# 11,668-019, Invitrogen, Co., Ltd., Camarillo). Sau 32 giờ truyền máu, các tế bào được thu thập để phân tích biểu hiện gen bằng phương pháp PCR huỳnh quang định lượng. Việc truyền máu được tiến hành như mô tả trước đây của Geng và cộng sự, 2013.

Tinh chế RNA và tổng hợp cDNA

Tổng RNA được phân lập từ các mẫu gan bằng bộ TRIzol (cat # DP424; Tiangen Biotech (Bắc Kinh) Co., Ltd., Bắc Kinh, Trung Quốc). Các mẫu RNA tinh khiết được sao chép ngược thành cDNA bằng cách sử dụng bộ phiên mã ngược HiS criptTM Q RTSuperMix (cat# R123-01; Vazyme Biotech Co., Ltd., Nam Kinh, Trung Quốc). Phiên mã ngược được thực hiện theo hướng dẫn của nhà sản xuất.

Lợi ích của cistanche tubulosa-Duy trì gan

Phân tích PCR định lượng

Dựa trên trình tự tham chiếu của từng gen trong GenBank, các đoạn mồi PCR định lượng cho các gen quan tâm và gen tham chiếu nội bộ, GAPDH được thiết kế bằng phần mềm Primer 3.{1}} trực tuyến (Viện nghiên cứu y sinh Whitehead, Cambridge) và phần mềm tính đặc hiệu của trình tự đã được xác nhận bằng chương trình Primer-BLAST (Trung tâm thông tin công nghệ sinh học quốc gia, Bethesda) trên trang web NCBI. Trình tự mồi được liệt kê trong Bảng 1. Theo hướng dẫn của nhà sản xuất, PCR định lượng được thực hiện bằng cách sử dụng bộ Vazyme AceQ qPCR SYBR Green Master Mix (cat# Q111-02/03; Vazyme Biotech Co., Ltd., Nanjing, Trung Quốc) và mẫu cDNA. Sự biểu hiện tương đối của các gen quan tâm được tính toán bằng phương pháp 22OOCT như được mô tả trước đây bởi Geng và cộng sự, 2016b.

Phân tích miễn dịch

Các mẫu mô gan được ly giải trong dung dịch đệm chứa 50 mmol Tris, pH 7,5, 120 mmol NaCl, 1 mmol EDTA, 15 mmol Na4P2O7, 20 mmol NaF, 1% Nonidet , 0,1% phenylmethyl sulfluoride và chất ức chế protease (0,08 mmol aprotinin, 0,02 mmol leupeptin, 0,04 mmol bestatin và 15 mmol pepstatin). Hàm lượng protein trong mỗi lysate được xác định bằng bộ xét nghiệm protein Bio-Rad RC DC (cat no. 500-0119; Bio-Rad, Hercules) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Protein (10 mg) từ dịch ly giải mô được phân tách bằng TRANG SDS và sau đó được chuyển đến màng nitrocellulose, được ủ qua đêm trong sữa 5% trong PBS chứa 0,1% Tween 20. Các màng này sau đó được ủ với kháng thể chính qua đêm ở 4 C. các kháng thể sau đây đã được sử dụng với độ pha loãng 1:1000 trong nghiên cứu này: anti-STAT3 (cat no. bs- 1141R; Beijing Biosynthesis Biotechnology Co., Ltd., Beijing, China), anti-IFIH1 (mèo số bs-18740R; Công ty TNHH Công nghệ sinh học tổng hợp Bắc Kinh, Bắc Kinh, Trung Quốc), chất chống actin (mèo số. bsm-33036M; Công ty TNHH Công nghệ sinh học tổng hợp Bắc Kinh, Bắc Kinh, Trung Quốc) và anti-GAPDH (mèo số NB300-221; Novus Sinh học Co., Ltd., CO). Kháng thể thứ cấp kết hợp với peroxidase củ cải ngựa được sử dụng ở độ pha loãng 1:10.000. Protein được phát hiện bằng phương pháp tăng cường phát quang hóa và hệ thống phát hiện vết rạn da của phương Tây (Amersham Bioscatics, Bắc Kinh, Trung Quốc).

Phân tích thống kê

Bài kiểm tra t của Sinh viên được sử dụng để phân tích ý nghĩa thống kê về sự khác biệt trong biểu hiện gen giữa nhóm điều trị và nhóm đối chứng, đồng thời P,0.05 được đặt làm tiêu chí về ý nghĩa thống kê. Tất cả dữ liệu được trình bày dưới dạng trung bình 6 SEM.

KẾT QUẢ

Nhịn ăn ngăn chặn sự biểu hiện của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch ở gan ngỗng

Các mồi PCR định lượng cho gen ERV của ngỗng (ERVK18P hoặc LOC1{{10}}6029425, ERVK25P hoặc LOC106046236) được thiết kế dựa trên các trình tự tham chiếu trong GenBank. Phân tích PCR định lượng cho thấy mức độ biểu hiện của ERVK18P ở gan ngỗng tương tự như ERVK25P (Hình 1A). So với nhóm đối chứng (không nhịn ăn), biểu hiện của ERVK18P và ERVK25P bị ức chế đáng kể ở gan của những con ngỗng được nhịn ăn trong 24 giờ (P, 0,05 hoặc 0,01) (Hình 1B). Theo đó, sự biểu hiện mRNA của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm (DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7, STAT3) cũng bị ức chế, với sự khác biệt về biểu hiện mRNA của DDX41 và IFNG giữa ngỗng nhịn ăn và ngỗng đối chứng đạt đến mức có ý nghĩa thống kê. (P, 0,05) (Hình 1B). Phân tích miễn dịch cho thấy mức protein IFIH1 trong gan của ngỗng nhịn ăn dường như thấp hơn so với ngỗng đối chứng (Hình bổ sung 1).

Bảng 1. Danh sách trình tự mồi cho PCR định lượng.

Nhịn ăn gây ra biểu hiện ERV và các gen liên quan đến miễn dịch ở gan gà

Phân tích PCR định lượng cho thấy rằng so với nhóm đối chứng (không nhịn ăn), biểu hiện mRNA do nhịn ăn của ERVK18P và ERVK25P ở gan gà và cảm ứng đã đạt đến mức có ý nghĩa thống kê (P, 0.{{5} }5 hoặc 0.01) (Hình 2). Tương tự, việc nhịn ăn cũng gây ra biểu hiện mRNA của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm nhiễm này, với sự khác biệt về biểu hiện mRNA của IFIH1, IFNG, IRF7 và STAT3 giữa các nhóm đạt đến mức có ý nghĩa thống kê (P, 0,05 hoặc 0,01) (Hình 2 ). Phân tích miễn dịch cho thấy mức protein IFIH1 trong gan của ngỗng nhịn ăn dường như cao hơn so với ngỗng đối chứng (Hình bổ sung 1).

Cho ăn quá nhiều gây ra biểu hiện ERV và các gen liên quan đến miễn dịch ở gan ngỗng

Phân tích PCR định lượng cho thấy rằng so với nhóm đối chứng (cho ăn thường xuyên), biểu hiện mRNA của ERVK18P và ERVK25 P trong gan của những con ngỗng được cho ăn quá mức trong 24 ngày đã tăng lên, với sự khác biệt về biểu hiện mRNA của ERVK18P giữa nhóm đối chứng và những con ngỗng được cho ăn quá mức đạt được mục tiêu. đến mức có ý nghĩa thống kê (P, 0.05) (Hình 3). Theo đó, sự biểu hiện mRNA của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm trong gan của những con ngỗng được cho ăn quá mức cũng tăng lên, với sự khác biệt về biểu hiện mRNA của IRF7 giữa những con ngỗng đối chứng và những con ngỗng được cho ăn quá mức đạt đến mức có ý nghĩa thống kê (P, 0,05) ( Hình 3). Phân tích miễn dịch cho thấy mức protein IFIH1 trong gan của những con ngỗng được cho ăn quá mức dường như cao hơn so với những con ngỗng đối chứng (Hình bổ sung 1).

Hình 1. Sự biểu hiện của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch ở gan ngỗng bị ức chế khi nhịn ăn. Sự biểu hiện tương đối của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch được xác định bằng phương pháp PCR định lượng. (A) Sự biểu hiện của ERVK18P và ERVK25P trong gan của ngỗng trưởng thành bình thường. (B) Biểu hiện của ERVK18P, ERVK25P, DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7 và STAT3 trong gan của những con ngỗng nhịn ăn được trình bày dưới dạng sự thay đổi nếp gấp so với đối chứng (không nhịn ăn), n 5 6. *,** lần lượt biểu thị P, 0.05, 0,01 so với đối chứng. Tất cả dữ liệu được hiển thị dưới dạng trung bình 6 SEM. Viết tắt: ERV, retrovirus nội sinh.

Sự biểu hiện quá mức của Retrovirus nội sinh gây ra sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch

Sau 32 giờ truyền nhiễm tế bào gan nguyên phát của ngỗng với các vectơ trống hoặc các vectơ biểu hiện quá mức chứa trình tự mã hóa gen Pol của ngỗng ERVK25P, sự biểu hiện mRNA của gen Pol trong các tế bào được thay thế bằng các vectơ biểu hiện quá mức cao hơn khoảng 97 lần so với mức đó. trong các ô được thay thế bằng các vectơ trống (P, 0.01) (Hình 4). Đúng như dự đoán, sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm đã được gây ra bởi sự biểu hiện quá mức ERVK25P và việc tạo ra IFIH1, IFNG, IRF7 và STAT3 đã đạt đến mức có ý nghĩa thống kê (P, 0.05 hoặc 0,01) (Hinh 4).

CUỘC THẢO LUẬN

Mức dinh dưỡng và năng lượng là những yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến sự tăng trưởng, sinh sản và khả năng miễn dịch của động vật. Đói (hoặc nhịn ăn) và cho ăn là 2 trạng thái điển hình ảnh hưởng đến mức độ dinh dưỡng hoặc năng lượng nên thường được sử dụng làm mô hình nghiên cứu để làm sáng tỏ sự điều hòa dinh dưỡng hoặc năng lượng lên các chức năng sinh lý của động vật. Ví dụ, việc nhịn ăn hoặc cho ăn có thể ảnh hưởng đến sự biểu hiện của các gen liên quan đến tăng trưởng, sinh sản và khả năng miễn dịch (Volkoff và cộng sự, 2016; Smati và cộng sự, 2020). Tuy nhiên, vẫn chưa rõ liệu nhịn ăn hay cho ăn có thể kích hoạt ERV và ảnh hưởng đến sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm thông qua ERV hay không. Ngoài ra, cho ăn quá nhiều trong thời gian ngắn (3–4 tuần) có thể dẫn đến hình thành gan nhiễm mỡ ngỗng (thường được gọi là gan ngỗng), tương tự như bệnh gan nhiễm mỡ không do rượu (NAFLD) ở người và động vật gặm nhấm (Nahum et al. , 2010; Wang và cộng sự, 2019), nhưng vẫn chưa biết liệu ERV có được kích hoạt khi cho ăn quá nhiều và có liên quan đến sự phát triển của gan nhiễm mỡ ngỗng hay không. Trong nghiên cứu này, sự biểu hiện của ERV và một số gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm trong gan của ngỗng hoặc gà được xác định sau khi thay đổi tình trạng dinh dưỡng hoặc năng lượng của động vật bằng cách nhịn ăn hoặc cho ăn quá mức, sao cho mối quan hệ giữa tình trạng dinh dưỡng (hoặc năng lượng) và sự biểu hiện của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch (hoặc viêm) có thể được làm rõ. Hơn nữa, sự biểu hiện quá mức ERVK25P trong tế bào gan nguyên phát của ngỗng cũng được thực hiện để xác minh xem liệu biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm có bị ảnh hưởng bởi ERV hay không. Thật vậy, các kết quả đã cung cấp bằng chứng mạnh mẽ ủng hộ quan điểm cho rằng tình trạng dinh dưỡng hoặc năng lượng có thể điều chỉnh sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm thông qua ERV ở gia cầm. Điều thú vị là, tác động của việc nhịn ăn lên biểu hiện mRNA của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm ở gan khác nhau tùy theo loài gia cầm, nghĩa là biểu hiện mRNA của các gen ở gan gà trái ngược với biểu hiện ở gan ngỗng. . Hơn nữa, biểu hiện mRNA của các gen trong gan của những con ngỗng nhịn ăn trái ngược với biểu hiện của những con ngỗng ăn quá nhiều. Ngoài ra, dữ liệu cho thấy các gen liên quan đến khả năng miễn dịch hoặc viêm có thể làm trung gian điều hòa ERV đối với sự phát triển của gan nhiễm mỡ ngỗng (hoặc gan ngỗng).

Hình 2. Biểu hiện của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm ở gan gà được tạo ra bằng cách nhịn ăn. Sự biểu hiện tương đối của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch được xác định bằng phương pháp PCR định lượng. Mức độ biểu hiện của ERVK18P, ERVK25P, DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7 và STAT3 trong gan của gà nhịn ăn được thể hiện dưới dạng sự thay đổi nếp gấp so với nhóm đối chứng (không nhịn ăn), n {{10}} . *,** lần lượt biểu thị P, 0.05, 0,01 so với đối chứng. Tất cả dữ liệu được hiển thị dưới dạng trung bình 6 SEM. Viết tắt: ERV, retrovirus nội sinh.

Hình 3. Biểu hiện của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm ở gan ngỗng được gây ra do cho ăn quá nhiều. Sự biểu hiện tương đối của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch được xác định bằng phương pháp PCR định lượng. Mức biểu hiện của ERVK18P, ERVK25P, DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7 và STAT3 trong gan của những con ngỗng được cho ăn quá mức được thể hiện dưới dạng sự thay đổi nếp gấp so với đối chứng (cho ăn thường lệ), n {{10}} . * biểu thị P, 0,05 so với đối chứng. Tất cả dữ liệu được hiển thị dưới dạng trung bình 6 SEM. Viết tắt: ERV, retrovirus nội sinh.

Hình 4. Sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm được gây ra bởi sự biểu hiện quá mức ERV trong tế bào gan nguyên phát của ngỗng. Sự biểu hiện tương đối của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch được xác định bằng phương pháp PCR định lượng. Sự biểu hiện của ERVK25P, DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7 và STAT3 trong các tế bào gan nguyên phát của ngỗng được truyền các vectơ biểu hiện quá mức ERVK25P được trình bày dưới dạng sự thay đổi nếp gấp so với đối chứng (các tế bào gan được thay thế bằng các vectơ trống), n {{1{{11 }}}}. *,** lần lượt biểu thị P, 0.05, 0,01 so với đối chứng. Tất cả dữ liệu được hiển thị dưới dạng trung bình 6 SEM. Viết tắt: ERV, retrovirus nội sinh.

Các nghiên cứu trước đây đã chứng minh rằng ERV thường bị bất hoạt thông qua quá trình methyl hóa DNA trong tế bào chủ, nhưng ERV có thể được kích hoạt bởi MER48 (Walsh và cộng sự, 1998; Gibb và cộng sự, 2015). Việc tạo ra ERV cũng được thể hiện ở một số bệnh, bao gồm một số bệnh chuyển hóa như bệnh đa xơ cứng, trong đó có liên quan đến các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm (Perron và cộng sự, 2000). Các nghiên cứu cơ học chỉ ra rằng tình trạng viêm đóng vai trò quan trọng trong cơ chế bệnh sinh của các bệnh chuyển hóa thường do cung cấp quá mức dinh dưỡng hoặc năng lượng (Eo và cộng sự, 2017). Hơn nữa, người ta phát hiện ra rằng việc nhịn ăn hoặc cho ăn quá mức có thể làm thay đổi mức độ methyl hóa DNA của các gen thụ thể kích hoạt chất tăng sinh peroxisome (Jacobsen và cộng sự, 2014; Hjort và cộng sự, 2017). Dựa trên những phát hiện này, có thể sự thay đổi về dinh dưỡng sẽ kích hoạt biểu hiện mRNA của ERV thông qua điều hòa biểu sinh. Mặt khác, sự thay đổi về dinh dưỡng có thể tạo ra biểu hiện mRNA của một số gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm nhiễm (Smati và cộng sự, 2020). Phù hợp với những phát hiện này, nghiên cứu này cho thấy rằng việc nhịn ăn hoặc cho ăn quá mức ảnh hưởng đến biểu hiện mRNA của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm và biểu hiện mRNA của ERV có liên quan chặt chẽ với biểu hiện mRNA của liên quan đến miễn dịch hoặc viêm. gen.

lợi ích cistanche cho nam giới - tăng cường hệ thống miễn dịch

Vì ERV có nhiều trong bộ gen động vật nên vai trò của ERV trong việc điều hòa dinh dưỡng hoặc năng lượng đối với khả năng miễn dịch hoặc tình trạng viêm có thể bị đánh giá thấp. Nghiên cứu này chủ yếu đề cập đến ERVK18 và ERVK25 làm trung gian tác động của việc nhịn ăn hoặc cho ăn quá mức đối với biểu hiện mRNA của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm. Các gen ERVK hiện chỉ là các ERV tương đối nguyên vẹn được chú thích trong cả bộ gen của ngỗng và gà. Bên cạnh những ERV tương đối nguyên vẹn này, ERV 'mảnh mai' và ERV 'LTR solo' có thể được kích hoạt bằng cách nhịn ăn hoặc cho ăn quá mức và do đó cũng góp phần vào tác động của việc nhịn ăn hoặc cho ăn quá mức đối với biểu hiện mRNA của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm. Vì ERV 'mảnh mai' và 'LTR đơn lẻ' thường nằm gần một số gen chủ (Thompson và cộng sự, 2016), việc nhịn ăn hoặc cho ăn quá mức có thể điều chỉnh biểu hiện mRNA của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm thông qua tác dụng cis của ERV được kích hoạt Từ quan điểm này, việc duy trì khả năng miễn dịch ở mức cơ bản có thể một phần là do một phần nhỏ ERV hoạt động. Các nghiên cứu trước đây đã chỉ ra rằng một số ERV được phiên mã thường xuyên trong cả nguyên bào sợi phôi gà (khoảng 20% ​​ERV) và in vivo (Bolisetty et al., 2012). Việc điều chỉnh việc nhịn ăn hoặc cho ăn quá mức đối với biểu hiện mRNA của ERV rất có thể là thông qua sửa đổi biểu sinh (ví dụ, methyl hóa DNA) như đã đề cập trước đây. Đã có báo cáo rằng AZA, một chất ức chế DNA methyltransferase, có thể tạo ra đáng kể biểu hiện mRNA của ERV trong tế bào (Jaenisch và cộng sự, 1985; Deborah và Bestor, 2004). Biểu hiện mRNA của ERV được điều hòa khác nhau ở gan gà so với gan ngỗng bằng cách nhịn ăn, cho thấy rằng có một mức độ sửa đổi biểu sinh khác nhau để kiểm soát biểu hiện ERV giữa gà và ngỗng. Suy luận này được hỗ trợ bởi bằng chứng cho thấy biểu hiện mRNA của ERV phụ thuộc vào loại tế bào (Nogues et al., 2018). Tuy nhiên, việc nhịn ăn hoặc cho ăn quá mức ảnh hưởng đến quá trình methyl hóa DNA của ERV như thế nào vẫn chưa được làm rõ. Hơn nữa, sự khác biệt về di truyền giữa gà và ngỗng có thể góp phần vào sự khác biệt trong biểu hiện ERV giữa 2 loài, chẳng hạn như phản ứng khác nhau của các yếu tố phiên mã với các kích thích bên trong hoặc bên ngoài. Thật vậy, các kết quả trước đây của chúng tôi cho thấy biểu hiện mRNA của nhiều gen ở gan ngỗng béo so với gan bình thường trái ngược với biểu hiện ở người mắc (hoặc chuột) NAFLD so với gan bình thường (Liu và cộng sự, 2016). Ngoài ra, môi trường và các yếu tố khác, chẳng hạn như tuổi tác, thức ăn, ánh sáng và các điều kiện chăn nuôi khác, cũng có thể là nguyên nhân gây ra biểu hiện khác nhau của ERV giữa gà và ngỗng.

Trong nghiên cứu này, sự biểu hiện quá mức ERVK25P đã làm tăng biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm, điều này cung cấp bằng chứng mạnh mẽ ủng hộ quan điểm cho rằng nhịn ăn hoặc cho ăn quá mức điều chỉnh biểu hiện mRNA của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm trong gan thông qua ERV. Có 2 cơ chế tiềm tàng trong đó sự biểu hiện quá mức của ERV tương đối nguyên vẹn đã làm tăng biểu hiện mRNA của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm: 1) RNA chuỗi kép được hình thành trong các bản phiên mã ERV hoặc bằng cách lai với các RNA antisense có thể kích hoạt tín hiệu NFkB con đường khiến RNA sợi đôi liên kết với các thụ thể của nó (ví dụ: TLR3) và từ đó tạo ra sự biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm (Chiappinelli et al., 2015); 2) ERV tương đối nguyên vẹn cũng có thể biểu hiện các protein hoặc polypeptit được mã hóa của chúng, dẫn đến kích hoạt các con đường truyền tín hiệu xuôi dòng và biểu hiện các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm. Mặc dù nghiên cứu này không thể phát hiện biểu hiện protein của ERVK18P và ERVK25P do thiếu kháng thể thích hợp, nhưng các nghiên cứu trước đây đã chứng minh rằng một số ERV, đặc biệt là ERVK, có thể tổng hợp protein của chúng và tạo ra biểu hiện của các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm trong tế bào thần kinh. tế bào (Manghera và cộng sự, 2015). Những protein này có thể được cảm nhận bởi các thụ thể ở động vật như RIG-1, protein kinase K và phân tử cơ thể gây viêm NLRP3 (Mitoma và cộng sự, 2013; Mu và cộng sự, 2016). Mối liên quan giữa dinh dưỡng (hoặc năng lượng) và khả năng miễn dịch (hoặc viêm) đã được thể hiện trong một số rối loạn liên quan đến dinh dưỡng hoặc năng lượng, đặc biệt là trong các bệnh liên quan đến béo phì bao gồm tiểu đường và NAFLD. Béo phì được coi là tình trạng viêm mãn tính vì nhiều gen liên quan đến tình trạng viêm (ví dụ, yếu tố hoại tử khối u cytokine tiền viêm, MCP1 và IL6) được tạo ra ở những bệnh nhân béo phì so với nhóm thuần tập khỏe mạnh (Ferreira và cộng sự, 2016). Những cytokine này có thể dẫn đến tình trạng kháng insulin và do đó làm trầm trọng thêm các rối loạn chuyển hóa liên quan đến béo phì (Li và cộng sự, 2019). Trong nghiên cứu này, dữ liệu cho thấy ERV và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm được tạo ra ở gan nhiễm mỡ ngỗng so với gan bình thường. Gan là một cơ quan cực kỳ phức tạp, không chỉ đóng vai trò trung tâm trong việc chuyển hóa chất dinh dưỡng và năng lượng mà còn có chức năng giải độc và điều hòa miễn dịch. Gan chứa một số lượng lớn các tế bào miễn dịch, chẳng hạn như tế bào Kupffer (đại thực bào thường trú), tế bào diệt tự nhiên và tế bào T diệt tự nhiên. Gan cũng tổng hợp các thành phần bổ sung và một số lượng lớn các thụ thể nhận biết mầm bệnh hòa tan khác (Keith và cộng sự, 2007). Do đó, gan hiện được coi là cơ quan miễn dịch quan trọng và đóng vai trò trong khả năng miễn dịch bẩm sinh (hoặc tình trạng viêm) (Xia và cộng sự, 2008; Trigger, 2010). ERV và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm do chúng tạo ra có thể cần thiết cho các chức năng sinh lý của gan và đóng vai trò là mối liên kết giữa chuyển hóa dinh dưỡng và khả năng miễn dịch (hoặc viêm). Trong nghiên cứu này, mặc dù sự thay đổi về dinh dưỡng (hoặc năng lượng) gây ra biểu hiện mRNA của ERV và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm ở gan ngỗng béo so với gan bình thường, nhưng điều đáng chú ý là các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm do ERV gây ra. phản hồi có thể điều chỉnh quá trình trao đổi chất dinh dưỡng (Volkman và Stetson, 2014; Cañadas và cộng sự, 2018). Do đó, nghiên cứu này cung cấp một số bằng chứng ủng hộ quan điểm cho rằng ERV tham gia vào quá trình phát triển bệnh gan nhiễm mỡ ngỗng thông qua các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm.

lợi ích bổ sung cistanche-làm thế nào để tăng cường hệ thống miễn dịch

Trong nghiên cứu này, chúng tôi cũng xác định mức protein của IFIH1 trong gan của ngỗng nhịn ăn so với ngỗng đối chứng, gà nhịn ăn so với gà đối chứng và ngỗng ăn quá nhiều so với ngỗng đối chứng. Mặc dù mô hình mức độ protein IFIH1 tương tự như mô hình mức độ protein IFIH1, nhưng sự khác biệt về mức độ protein giữa nhóm điều trị và nhóm đối chứng không rõ ràng như ở mức độ mRNA. Những lời giải thích có thể bao gồm mức độ protein của IFIH1 có thể được điều chỉnh sau phiên mã. Tóm lại, tình trạng dinh dưỡng hoặc năng lượng ảnh hưởng đến sự biểu hiện của một số gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm thông qua ERV, điều này cung cấp một cơ chế tiềm năng làm cơ sở cho mối liên hệ giữa dinh dưỡng (hoặc năng lượng) và miễn dịch (hoặc viêm). Tình trạng dinh dưỡng hoặc năng lượng có thể điều chỉnh sự biểu hiện của ERV thông qua quá trình methyl hóa DNA. Có sự khác biệt trong quy định biểu sinh này giữa các loài gia cầm và cơ chế cụ thể cần được nghiên cứu thêm. Các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm nhiễm bị ảnh hưởng bởi tình trạng dinh dưỡng hoặc năng lượng có thể không chỉ tham gia vào phản ứng miễn dịch bẩm sinh mà còn đóng vai trò trong quá trình viêm, tăng trưởng của động vật và chết theo chương trình cũng như điều hòa phản hồi về chuyển hóa dinh dưỡng hoặc năng lượng. Ngoài ra, nghiên cứu này cũng lần đầu tiên tiết lộ rằng ERV và các gen liên quan đến miễn dịch hoặc viêm liên quan đến sự phát triển của gan nhiễm mỡ ngỗng.

NGƯỜI GIỚI THIỆU

Bolisetty, M., J. Blomberg, F. Benachenhou, G. Sperber và K. Beemon. 2012. Sự đa dạng và biểu hiện bất ngờ của retrovirus nội sinh ở gia cầm. mBio 3 e{2}}.

Cañadas, I., R. Thummalapalli, JW Kim, S. Kitajima, RW Jenkins, CL Christensen, M. Campisi, Y. Kuang, Y. Zhang, E. Gjini, G. Zhang, T. Tian, ​​DR Sen, D . Miao, Y. Imamura, T. Thái, B. Piel, H. Terai, AR Aref, T. Hagan, S. Koyama, M. Watanabe, H. Baba, AE Adeni, CA Lydon, P. Tamayo, Z. Wei, M. Herlyn, TU Barbie, R. Uppaluri, LM Sholl, E. Sicinska, J. Sands, S. Rodig, KK Wong, CP Paweletz, H. Watanabe và DA Barbie. 2018. Khả năng miễn dịch bẩm sinh của khối u được tạo ra bởi các retrovirus nội sinh cụ thể được kích thích bằng interferon. Nat. Med. 24:1143–1150.

Chiappinelli, KB, PL Strissel, D. Alexis, HL Li, H. Christine, A. Benjamin, H. Alexander, NS Rote, LM Cope, S. Alexandra, M. Vladimir, B. Sadna, JS Dennis, DW Jedd, Nghị sĩ Drew, WB Matthias, AZ Cynthia, M. Taha, AC Timothy, BB Stephen và S. Reiner. 2015. Ức chế quá trình methyl hóa DNA gây ra phản ứng interferon trong bệnh ung thư thông qua DSRNA bao gồm cả retrovirus nội sinh. Ô 162: 974–986.

Crichton, JH, DS Dunican, M. Marie, RR Meehan và IR Adams. 2014. Bảo vệ bộ gen khỏi kẻ thù bằng cơ chế ức chế retrotransposon trong dòng mầm của chuột. Tế bào. Mol. Khoa học cuộc sống. 71:1581–1605.

Deborah, BH và TH Bestor. 2004. Thảm họa giảm phân và tái kích hoạt retrotransposon ở tế bào mầm nam thiếu Dnmt3L. Thiên nhiên 431:96–99.

Denner, J. 2016. Biểu hiện và chức năng của retrovirus nội sinh trong nhau thai. APMIS 124:31–43.

Dolei, A., E. Uleri, G. Ibba, M. Caocci, C. Piu và C. Serra. 2015. Người ngoài hành tinh bên trong DNA của con người: HERV-W/MSRV/syncytin-1 retrovirus nội sinh và thoái hóa thần kinh. J. Lây nhiễm. Dev. Đếm. 9:577–587.

Elaheh, K., N. Farzaneh, P. Mirshokraei, SE Tabatabaeizadeh và H. Dehghani. 2018. Biểu hiện của retrovirus nội sinh ở giai đoạn tiền làm tổ của phôi bò. Trả lời. Trong nước. Hoạt hình. 53:1405–1414.

Eo, H., JE Park, YJ Jeon và Y. Lim. 2017. Tác dụng cải thiện của chiết xuất polyphenol cava thuộc địa đối với chứng viêm thận liên quan đến chuyển hóa năng lượng bất thường và stress oxy hóa ở chuột béo phì do chế độ ăn nhiều chất béo. J. Agric. Hóa chất thực phẩm. 65:3811–3818

Ferreira, PS, LC Spolidorio, JA Manthey và TB Cesar. 2016. Flavanone trong cam quýt ngăn ngừa tình trạng viêm toàn thân và cải thiện tình trạng căng thẳng oxy hóa ở chuột C57BL/6J được cho ăn chế độ ăn nhiều chất béo. Chức năng thực phẩm. 7:2675–2681.

Geng, TY, W. Hu, MH Broadwater, JM Snider, J. Bielawski, SB Russo, JH Schwacke, J. Ross và LA Cowart. 2013. Các axit béo điều chỉnh sự đề kháng insulin một cách khác nhau thông qua việc gây ra căng thẳng qua trung gian lưới nội chất của các chất tương đồng 3: mối liên hệ tiềm năng giữa thành phần chất béo trong chế độ ăn uống và kết quả sinh lý bệnh của bệnh béo phì. Bệnh tiểu đường 56:2078–2087.

Geng, TY, B. Yang, FY Li, LL Xia, Q. Wang, X. Zhao và DQ Gong. 2016a. Xác định các thành phần bảo vệ ngăn ngừa tình trạng trầm trọng của gan nhiễm mỡ ngỗng: đặc điểm, biểu hiện và điều hòa các thụ thể adiponectin. Comp. Hóa sinh. Physiol. Hóa sinh B. Mol. Biol. 194:32–38.

Geng, TY, X. Zhao, LL Xia, L. Liu, FY Li, B. Yang, Q. Wang, S. Montgomery, HM Cui và DQ Gong. 2016b. Bổ sung đường trong khẩu phần thúc đẩy sự kháng insulin không phụ thuộc vào căng thẳng của lưới nội chất và gan nhiễm mỡ ở ngỗng. Hóa sinh. Sinh lý. Res. Cộng đồng. 476:665–669.

Gibb, EA, RL Warren, GW Wilson, SD Brown, GA Robertson, GB Morin và RA Holt. 2015. Kích hoạt RNA không mã hóa dài liên quan đến retrovirus nội sinh trong ung thư biểu mô tuyến ở người. Bộ gen Med. 7:22.

Haraguchi, S., RA Good, GJ Cianciolo và Ngày NK. 1992. Một peptide tổng hợp tương đồng với protein vỏ retrovirus điều chỉnh giảm sự biểu hiện mRNA của TNF-a và IFN-g. J. Leukoc. Biol. 52:469–472.

Hjort, L., SW Jørgensen, L. Gillberg, E. Hall, C. Brøns, J. Frystyk, AA Vaag và C. Ling. 2017. Việc nhịn ăn trong 36 giờ của nam thanh niên ảnh hưởng đến quá trình methyl hóa DNA mô mỡ của LEP và ADIPOQ theo cách phụ thuộc vào cân nặng khi sinh. Phòng khám. Biểu sinh 9:40.

Hohn, O., K. Hanke và N. Bannert. 2013. HERV-K (HML{2}}), họ HERV được bảo tồn tốt nhất: nội sinh hóa, biểu hiện và những tác động đối với sức khỏe và bệnh tật. Đằng trước. Oncol. 3:246.

Huda, A., N. Polavarapu, IK Jordan và JF McDonald. 2008. Retrovirus nội sinh của bộ gen gà. Biol. Trực tiếp 3:9.

Jacobsen, SC, L. Gillberg, J. Bork-Jensen, R. Ribel-Madsen, E. Lara, V. Calvanese, C. Ling, AF Fernandez, MF Fraga, P. Poulsen, C. Brøns và A. Vaag . 2014. Những nam thanh niên có cân nặng khi sinh thấp có biểu hiện giảm tính linh hoạt của quá trình methyl hóa DNA cơ trên toàn bộ gen do cho ăn quá nhiều chất béo. Bệnh tiểu đường 57:1154–1158.

Jaenisch, R., A. Schnieke và K. Harbers. 1985. Điều trị chuột bằng 5-azacytidine kích hoạt hiệu quả bộ gen retrovirus im lặng trong các mô khác nhau. Proc. Natl. Học viện. Khoa học. Hoa Kỳ 82:1451–1455.

Jern, P. và JM Coffin. 2008. Ảnh hưởng của retrovirus đến chức năng bộ gen của vật chủ. Annu. Mục sư Genet. 42:709–732.

Keith, EG, RB Jones, DA Meiklejohn, N. Anwar, LC Ndhlovu, JM Chapman, AL Erickson, A. Agrawal, G. Spotts, FM Hecht, NS Rakoff, J. Lenz, MA Ostrowski và DF Nixon. 2007. Phản ứng của tế bào T với retrovirus nội sinh ở người khi nhiễm HIV{1}}. PLoS Pathog. 3:e165.

K€ury, P., A. Nath, A. Creange, A. Dolei, P. Marche, J. Gold, G. Giovannoni, HP Hartung và H. Perron. 2018. Retrovirus nội sinh ở người trong các bệnh thần kinh. Xu hướng Mol. Med. 24:379–394.

Li, JY, YD Wang, XY Qi, L. Ran, T. Hong, J. Yang, B. Yan, ZZ Liao, JH Liu và XH Xiao. 2019. Nồng độ CCN3 trong huyết thanh tăng lên ở bệnh nhân đái tháo đường týp 2 và có liên quan đến béo phì, kháng insulin và viêm. Phòng khám. Chim. Acta 494:52–57.