Làm thế nào để chiết xuất nước của Cistanche thúc đẩy nhu động ruột và cải thiện táo bón?

Shuai Yan, 1,2 Yin-zi Yue, 1 Xiao-peng Wang, 1 Hong-li Dong, 1 Shu-guang Zhen, 1 Ben-sheng Wu, 1 và Hai-hua Qian3

Y học cổ truyền Trung Quốc được báo cáo là có tác dụng tốt trong điều trị táo bón chức năng. Công trình này đã cố gắng chứng minh tác dụng của các chất chiết xuất từ ​​nước của HerbaCistanche(AEHC) về điều trị STC và xác định các cơ chế có thể xảy ra bằng mô hình táo bón vận chuyển chậm (STC) do loperamide gây ra. HPLC được thực hiện để xác định và xác nhận các thành phần hoạt tính sinh học trong AEHC. Người ta thấy rằng AEHC làm giảm phản ứng STC dựa trên sự gia tăng số lượng phân, độ ẩm và tốc độ vận chuyển của ruột, cũng như mức GAS, MTL, SS và CGRP trong huyết thanh. Mức độ protein và mRNA của c-kit, ghi nhãn của các tế bào kẽ của Cajal (ICC), cũng tăng lên. Trong khi đó, chỉ có mức độ protein của SCF, một phối tử của ckit, tăng lên. Việc phân tích dữ liệu của chúng tôi cho thấy rằng AEHC rõ ràng có thể cải thiện chức năng của ICC thông qua một con đường tín hiệu liên quan đến PI3K, SCF và c-kit và nâng cao các chỉ số về nhu động ruột kết như GAS, MTL, SS và CGRP. Điều thú vị là AEHC dường như có hiệu quả đối với chứng táo bón, vì vậy cần có các thí nghiệm sâu hơn để làm rõ các cơ chế chính xác liên quan.

Vui lòng liên lạc để biết thêm thông tin:Joanna.jia@wecistanche.com

acteoside trong cistanche có tác dụng tốt trong việc chống oxy hóa

1. Giới thiệu

Táo bón là một bệnh đường tiêu hóa chức năng phổ biến và vấn đề sức khỏe cộng đồng, đặc trưng bởi đại tiện khó liên tục, không thường xuyên hoặc không hoàn toàn [1]. Tỷ lệ táo bón thay đổi từ 0. 7 phần trăm đến 81 phần trăm trên khắp thế giới, đặc biệt là ở người cao tuổi [2, 3]. Táo bón vận chuyển chậm (STC) là một phàn nàn về đường tiêu hóa phổ biến ở 13–37 phần trăm bệnh nhân bị táo bón mãn tính kháng điều trị [4, 5]. Dữ liệu dịch tễ học cho thấy tỷ lệ mắc STC ở nữ thanh niên cao hơn nam [6]. STC gây táo bón khó chữa, ít đáp ứng với điều trị bảo tồn và có xu hướng rối loạn thoái hóa thần kinh. Không đơn giản như một bệnh chức năng, nó đòi hỏi phải điều trị xâm lấn và tích cực [7].

Một số loại thuốc hóa học hiện nay như thuốc nhuận tràng thẩm thấu hoặc bài tiết và chất tạo bọt được sử dụng phổ biến để

điều trị táo bón [8], mặc dù ứng dụng của chúng bị hạn chế do chi phí cao và các tác dụng phụ ở bụng như đau, chuột rút và đầy hơi [9]. Hiện nay, điều hòa đường tiêu hóa là trọng tâm hàng đầu của các liệu pháp điều trị táo bón. Cisaprid đầu tiên được tạo ra như một tác nhân thúc đẩy điều trị bệnh dạ dày nhưng sau đó đã bị thu hồi vì nguy cơ loạn nhịp tim [10].

Tegaserod là một chất đối kháng thụ thể 5- hydroxytryptamine có chọn lọc có thể kích thích nhu động ruột và bài tiết [11, 12]. Prucalopride là một dẫn xuất dihydro benzofuran carboxamide mới và 5- chất chủ vận thụ thể HT có tính chọn lọc và đặc hiệu cao, có thể tăng cường nhu động dạ dày, ruột non và ruột kết và hoạt động nhanh hơn về động lực học [13–15]. Là một dẫn xuất của prostaglandin E1, lubiprostone có thể kích hoạt chọn lọc kênh CIC để thúc đẩy bài tiết đường tiêu hóa và tăng tác dụng dẫn truyền qua đường ruột [16].

Táo bón là một vấn đề phổ biến, nhưng căn nguyên của nó vẫn chưa rõ ràng. Tuy nhiên, bằng chứng thuyết phục đã chứng minh sự đóng góp của các tế bào kẽ của Cajal (ICC) vào cơ chế bệnh sinh của táo bón [17]. ICC được tìm thấy giữa các đầu dây thần kinh và các tế bào cơ trơn trong đường tiêu hóa. ICC thường được thừa nhận là tế bào tạo nhịp tim cho hoạt động tiêu hóa và là chất trung gian dẫn truyền thần kinh-cơ [18]. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng mật độ ICC trong ruột kết của những bệnh nhân bị táo bón vận chuyển chậm thấp hơn đáng kể so với những bệnh nhân bình thường [19]. Do đó, số lượng ICC giảm có thể dẫn đến thiếu hoạt động của sóng chậm, do đó ảnh hưởng đến phản ứng co bóp và gây ra tình trạng chậm vận chuyển ở bệnh nhân táo bón do vận chuyển chậm. Đối với điểm này, việc khử ICC bằng cách sử dụng dược phẩm có thể là yếu tố quan trọng để chữa chứng táo bón do vận chuyển chậm.

Nhiều loại thuốc thảo dược khác nhau và for- Mula cổ truyền của Trung Quốc gần đây đã thu hút sự chú ý như một phương pháp trị liệu mới để điều trị chứng táo bón mãn tính do cải thiện sản xuất phân [20, 21]. HerbaCistanchelà một vị thuốc nam cổ truyền được sử dụng trong điều trị bệnh thận mãn tính, vô sinh nữ, rong kinh, liệt dương [22, 23]. HerbaCistanchengăn chặn quá trình chết rụng tế bào thần kinh não bằng cách biểu hiện các yếu tố liên quan đến quá trình chết rụng và các yếu tố dinh dưỡng thần kinh trong tế bào MES23.5 [24]. Herba Cistanche cũng đã chứng minh tiềm năng dược phẩm trong điều trị Hội chứng Thiếu dương-Khí Thận. Một nghiên cứu gần đây đã chứng minh rằng HerbaCistanchenâng cao khả năng hô hấp của ty thể và tình trạng chống oxy hóa glutathione trong tế bào cơ tim H9c2 [25].

TCM cho rằng táo bón có mối quan hệ mật thiết với thận. Mở ở cơ quan sinh dục ngoài và hậu môn, thận chi phối quá trình tiểu tiện và đại tiện. Sự vận chuyển chất thải dựa vào việc thúc đẩy thận khí và nuôi dưỡng thận âm. Nếu thận dương thiếu hụt hoặc hỏa sinh tiêu tắt, ruột già tắc lạnh dẫn đến phế tích ứ trệ. Táo bón cũng là do nhu động ruột bị khô vì sự thiếu hụt chất của thận không thể tạo ra đủ chất lỏng [26].

HerbaCistanchelà một loại thảo mộc thống nhất thông thường, có vị ngọt và mặn, tính ấm. Thuộc tính của ruột già và kinh lạc thận, nó có thể bổ thận dương và làm ẩm ruột để giảm táo bón. Loại thảo mộc duy nhất này và các chế phẩm dược phẩm của Trung Quốc đã được sử dụng rộng rãi để điều trị táo bón với hiệu quả rõ rệt [27].

Ở Trung Quốc, tác dụng của HerbaCistancherễ của bệnh táo bón đã được ghi nhận [28, 29] và được gọi trong Trung Quốc của Thần Nông Medica là "thân cây mọng nước khô củaCistancheloài "[30]; tuy nhiên, bằng chứng khoa học về tác dụng của HerbaCistancherễ trị táo bón vẫn chưa tồn tại cho đến nay, liều có hiệu quả lâm sàng là 20 g mỗi ngày trong Dược điển Trung Quốc, và tác dụng lâm sàng không tăng thêm theo liều lượng.

Kể từ khi HerbaCistanchequá khan hiếm [31], việc tiêu chuẩn hóa liều lượng lâm sàng của nó để điều trị STC bằng nghiên cứu thực nghiệm không chỉ ngăn ngừa việc điều trị thất bại do không đủ liều lượng mà còn giúp bệnh nhân tránh khỏi thiệt hại về kinh tế và thậm chí là sử dụng sai thuốc do lạm dụng. Chung ta hy vọng

kết quả có thể đặt nền tảng khoa học cho các loại thuốc mới trị táo bón. Vì vậy, điều quan trọng là phải điều tra Herba trong nướcCistanche'schức năng thúc đẩy ruột và hành động của nó đối với ICC trong nghiên cứu này.

2. Vật liệu và phương pháp

2.1. Chuẩn bị chiết xuất nước của Herba Cistanche.

Tất cả HerbaCistancheđược mua từ Nanjing Haichang Chinese Medicine Group Co., Ltd. Giáo sư Tu Lin Lu thuộc Đại học Y khoa Nam Kinh, Nam Kinh, Trung Quốc đã xác định được danh tính của loài cây này về mặt hình thái. Một mẫu chứng từ (NUCMCHS -2015628) đã được gửi tại Trường Cao đẳng Khoa học Y tế, Đại học Trung Y Nam Kinh, Nam Kinh, Trung Quốc.

Lát HerbaCistanche, nặng 500 g, được nghiền thành bột bằng máy xay điện và chiết trong 5000 ml nước cất, sau đó dịch chiết dạng nước được tinh chế ở 100 C trong 2 giờ bằng thiết bị chiết tuần hoàn.

lỗ màng (Millipore, Billerica, MA, USA), và cặn thu được từ các chất chiết xuất được hòa tan trong nước 4000 ml. Sau khi chiết hồi lưu, các chất chiết được thu lại và làm bay hơi để thu được sản phẩm mẫu cuối cùng. Chất chiết xuất từ ​​nước được cô đặc thành viên khô (1 g / ml) bằng cách sử dụng

để sử dụng tiếp theo. Các mẫu rắn được hoàn nguyên trong nước cất để có các liều lượng cần thiết là 10, 20 và 40 mg / kg thể trọng cho thí nghiệm.

2.2. Loài vật.

Quy trình thử nghiệm được sử dụng trong nghiên cứu này đã được xem xét và phê duyệt dựa trên các quy trình đạo đức và chăm sóc khoa học bởi Ủy ban chăm sóc và sử dụng động vật thuộc viện y học cổ truyền Trung Quốc Tô Châu, Tô Châu, Trung Quốc (SHTCM-IACUC; số phê duyệt: PNU {{2} }). Tất cả chuột đực (dòng Sprague Dawley) với ag được mua từ Trung tâm Nghiên cứu Động vật Phòng thí nghiệm Thượng Hải theo hướng dẫn của Viện Y tế Quốc gia. Các con vật được tiếp cận miễn phí với chế độ ăn tiêu chuẩn (AIN -93 M) và nước máy và được nuôi riêng trong môi trường độ ẩm tương đối phần trăm bằng thép không gỉ và tiếp xúc với ánh sáng tự nhiên 12 giờ và 12 giờ tối hàng ngày.

2.3 Thiết kế thử nghiệm.

Loperamide được sử dụng để gây táo bón ở chuột theo các nghiên cứu trước đây [32, 33]. Tổng số 60 con chuột được chia ngẫu nhiên thành 5 nhóm (mỗi nhóm): A: nhóm bình thường (NG), B: nhóm mô hình (Lop cộng với nhóm được điều trị bằng phương tiện), C: nhóm chuột bị táo bón được điều trị bằng chiết xuất nước thấp của Herba Cistanche (nhóm được điều trị bằng Lop cộng với LAEHC), D: một nhóm chuột bị táo bón được điều trị bằng chiết xuất nước trung bình của Herba Cistanche (nhóm được điều trị bằng Lop cộng với MAEHC), và E: nhóm chuột bị táo bón được điều trị bằng chiết xuất nước cao của Herba Cistanche (nhóm điều trị Lop cộng với HAEHC). Nhóm A được điều trị bằng nước muối thông thường (10 ml / kg); Nhóm B được điều trị bằng loperamide

(4 mg / kg); Nhóm C được xử lý bằng loperamide (4 mg / kg) và chiết xuất nước thấp của Herba Cistanche (1 g / kg); Nhóm D được xử lý bằng loperamide (4 mg / kg) và chiết xuất nước trung bình của Herba Cistanche (2 g / kg), và Nhóm E được xử lý bằng loperamide (4 mg / kg) và chiết xuất nước cao của Herba Cistanche (4 g / Kilôgam). Tất cả những con chuột từ nhóm bình thường được tiêm 0. 9% natri clorua, trong khi những con khác được tiêm loperamide trong 0. 9% natri clorua hai lần một ngày trong 3 ngày liên tiếp để gây táo bón. Chiết xuất dạng nước của Herba Cistanche lơ lửng trong nước và được dùng đường uống một lần mỗi ngày từ ngày thứ 4 đến ngày thứ 18 ở Nhóm C, Nhóm D và Nhóm E, trong khi Nhóm A và B nhận được một lượng nước nhất quán qua thiết bị đo.

2.4. Điều kiện sắc ký.

Hồ sơ HPLC được thực hiện trong Hệ thống Sắc ký lỏng Shimadzu (Tokyo, Nhật Bản), bao gồm một máy bơm LC -20 AT và một

được theo dõi ở 33 0 nm ở 3 0 C. Pha động đẳng cấp bao gồm metanol 0,1% axit formic (80: 20, v / v) và chạy ở tốc độ dòng 1,0 ml / phút . Tách sắc ký cũ là

cỡ hạt 5 m, Công ty TNHH Khoa học và Công nghệ Dikma Bắc Kinh, Bắc Kinh, Trung Quốc).

2.5. Phân tích tập thể dục, lượng thức ăn, lượng nước hấp thụ, cơ thể

Kẹo cao su (dung dịch nước chứa 20% than và 10% kẹo cao su) được dùng bằng đường uống với thể tích 25 ml / kg của mỗi con. Sau 30 phút, những con vật được hiến tế nhân đạo bằng cách mổ xẻ cổ tử cung. Ruột non từ môn vị đến manh tràng được cắt ngang và đo khoảng cách bao phủ bởi bột than và tổng chiều dài của ruột non. Đối với một con chuột riêng lẻ, phần trăm vận chuyển trong ruột được tính bằng phần trăm quãng đường di chuyển của bột than so với tổng chiều dài của ruột non. Phương trình sau đây tính toán tỷ lệ vận chuyển của ruột (phần trăm): khoảng cách di chuyển của than / khoảng cách từ môn vị đến manh tràng 100 phần trăm.

2.6. Lấy Mẫu Máu và Mô. Vào cuối giai đoạn thử nghiệm, chuột phải nhịn ăn 12 giờ nhưng được phép tiếp cận miễn phí với nước. Tất cả chuột sau đó được gây mê 30 phút sau đó bằng cách tiêm natri pentobarbital vào màng bụng (50 mg / kg) và đặt trên bàn điều chỉnh nhiệt độ. Mẫu máu được thu thập và ly tâm ở tốc độ 3500 vòng / phút trong 15 phút để thu được huyết thanh. Đại tràng được tách ra ngay lập tức và rửa bằng nước muối sinh lý thường ở 4 C rồi chia thành hai mảnh. Một đoạn được cố định trong 10% formalin và được xử lý trong parafin tách để phân tích hóa mô miễn dịch (IHC) tiếp theo, trong khi đoạn kia là Cân nặng và Tóc. Thay đổi trong tập thể dục, lượng thức ăn, nước uống

được bảo quản ở 80 C cho đến khi chúng được thử nghiệm. lượng ăn vào, trọng lượng cơ thể và tóc được quan sát và ghi lại hàng ngày trong suốt thời gian thí nghiệm. Chúng tôi quan sát thấy "những thay đổi trong bài tập" theo các bước cụ thể: hộp tự tạo (cao 60 cm, dài 50 cm và rộng 80 cm với thành ngoại vi tối) được sử dụng để thử nghiệm hiện trường mở; mặt đất trắng bị vạch đen chia thành những viên kim cương (12 cm) trong một căn phòng tối và yên tĩnh; một bóng đèn 100 W treo cao hơn tâm hộp 1 m; những con chuột được đặt vào giữa hộp vào các ngày thứ 4, 6, 12 và 18 của quá trình mô hình hóa. Số ô vuông mà chuột đi qua trong vòng 5 phút được dùng làm điểm chuyển động ngang và thời gian thẳng đứng của chuột trong vòng 5 phút được dùng làm điểm chuyển động dọc. Điểm số theo chiều ngang và điểm di chuyển cộng với điểm số chuyển động theo chiều dọc cho biết mức độ tập thể dục của chuột. Mỗi con chuột được đo một lần [34, 35].

2.7. Đo thông số phân.

Vào ngày cuối cùng của quá trình uống, các viên phân tươi từ mỗi con chuột SD được thu thập vào các ống có nút đáy tròn trong 6 giờ và tổng trọng lượng của mỗi nhóm được ghi lại. Để xác định độ ẩm của phân, chúng tôi sử dụng cân điện để làm khô các viên phân cho đến khi đạt được khối lượng không đổi và đo khối lượng khô. Độ ẩm

2.8. Đánh giá GAS, MTL, SS và CGRP.

Nồng độ của gastrin (GAS), motilin (MTL), somatostatin (SS) và peptide liên quan đến gen calcitonin (CGRP) trong huyết thanh được ELISA ước tính bằng cách sử dụng các bộ dụng cụ bán sẵn trên thị trường.

2.9. Phân tích mô học.

Dấu hai chấm ngang được thu thập từ chuột SD được cố định với 10% formalin trong 12 giờ, được nhúng

m lát dày được nhuộm bằng hematoxylin và eosin (H&E, Sigma- Aldrich, MO, USA). Các đặc điểm hình thái của các phần này được quan sát dưới kính hiển vi ánh sáng, sau đó chiều dài nhung mao, độ dày lớp lông và độ dày cơ được đo bằng Bộ ứng dụng Leica (Leica Microsystems, Switzer-land).

2.10. Phân tích hóa mô miễn dịch.

Chúng tôi đã làm theo phương pháp của Zhu et al. (2016) [36]; các đoạn 5 m không bị ố

Được nhuộm bằng kit chống c-cho thỏ (1: 100) ở 4 C qua đêm. Phương pháp tạo kháng thể thứ cấp và phương pháp tạo phức hợp avidin-biotin-peroxidase được sử dụng theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Đối chứng âm tính với immunoglobulin được sử dụng để loại bỏ sự gắn kết không đặc hiệu. Các cấp độ biểu hiện của c-kit

2.11. Phân tích tỷ lệ vận chuyển đường ruột.

Tỷ lệ vận chuyển đường ruột được thực hiện theo các giao thức đã báo cáo trước đây [36]; Trong thời gian ngắn, sau 14 ngày điều trị, tất cả chuột SD phải nhịn ăn 12 giờ nhưng được phép tiếp cận miễn phí với nước.

Phản ứng chuỗi polymerase thời gian thực. Mức độ biểu hiện gen của mRNA c-kit, SCF và PI3K trong ruột kết được xác định bằng cách sử dụng bộ tách chiết RNA tổng số (TIANGEN Biotech,

Bắc Kinh, Trung Quốc) theo giao thức của nhà sản xuất. PCR thời gian thực được thực hiện với Hệ thống PCR thời gian thực ABI StepOnePlus (ABI). SYBR Green I Real-Time PCR Master Mix (QPK2 0 1, Toyobo, Nhật Bản) được sử dụng để phát hiện các sản phẩm PCR. Phản ứng được thực hiện trong ba lần chạy. Sau đó, mô ruột kết của chuột tươi nặng 0,5 g là tương đồng-

l) được chiết xuất theo hướng dẫn của nhà sản xuất bằng thuốc thử TRIzol (Invitrogen, USA). Một bộ PCR phiên mã ngược (Takara Biotechnology Co., Inc.) đã được sử dụng để tổng hợp chuỗi cDNA đầu tiên theo quy trình của nhà sản xuất. Tất cả các thông số được nhắm mục tiêu được thể hiện trong Bảng 1. Quy trình quay vòng trong các điều kiện sau: 95 C trong 5 phút (biến tính DNA), tiếp theo là 40 chu kỳ 95 C trong 15 giây, 60 C trong 20 giây và 72 C trong 40 giây. Một phân tích đường cong nóng chảy được thực hiện ở cuối các chu kỳ khuếch đại.

2.12. Phân tích Western Blot.

Hàm lượng protein của c-kit và SCF trong các mẫu ruột kết đồng nhất được đánh giá bởi Western blot. Tóm lại, tổng số protein của các chất đồng nhất được xác định bằng xét nghiệm axit bicinchoninic (Công nghệ sinh học Pierce, Rockford, IL, Hoa Kỳ). Gel natri dodecyl sulfat-polyacrylamide (SDS-PAGE) được sử dụng để phân tách thanh thiếu niên trong hệ thống điện di BioRad (Phòng thí nghiệm BioRad, Hercules, CA, Hoa Kỳ). Protein sau đó được chuyển sang màng polyvinylidene difluoride (PVDF). Sau 2 giờ xử lý với đệm chặn trong TBS có chứa 5% sữa không béo ở nhiệt độ phòng, màng PVDF được ủ qua đêm với bộ chống c pha loãng 1: 1000 (Santa Cruz, CA, Hoa Kỳ), chất chống c pha loãng 1: 500 SCF (Sigma, MO,

Hoa Kỳ), và kháng thể kháng actin pha loãng 1: 8000 (Kangchen, Thượng Hải, Trung Quốc), tương ứng. Sự gắn kết của kháng thể chính được phát hiện bằng cách sử dụng kháng thể thứ cấp liên hợp HRP tương ứng (Beyotime, Jiangsu, Trung Quốc). Một bộ dụng cụ phát quang hóa học nâng cao (Pierce Biotechnology Inc., Rockford, IL, Hoa Kỳ) và Hệ thống Hình ảnh Hồng ngoại Odyssey (Gene Company Ltd., Hồng Kông) đã được sử dụng để phát hiện hóa học phát quang. Prolactin của dịch vụ nội trợ được sử dụng như một chất kiểm soát tải trọng. Số lượng biểu hiện của protein được trình bày tương ứng với mức actin.

2.13. Phân tích thống kê.

Dữ liệu đo lường được báo cáo là sai số chuẩn trung bình của giá trị trung bình (SEM) và được phân tích bởi SPSS

16. 0 phần mềm (SPSS, Chicago, IL, Hoa Kỳ). Phân tích phương sai một chiều (ANOVA) theo sau là kiểm tra nhiều phạm vi của Duncan đã được sử dụng để xác định sự khác biệt đáng kể trong tất cả các tham số. Các giá trị được coi là có ý nghĩa thống kê tại

3. Kết quả

3.1. Thành phần và các thành phần chức năng của Herba Cistanche.

Như trong hình 1, rễ của Herba Cistanche chứa nồng độ cao của một số thành phần hoạt tính sinh học liên quan đến tác dụng nhuận tràng. Nồng độ của tổng số echina cosit và tổng số verbacosit lần lượt là 0. 64 mg / g và 0. 16 mg / g. Hai đỉnh biểu thị mức echinacoside và verbascoside cao được phát hiện trong LP ở thời gian lưu thích hợp bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC).

3.2. Quan sát chung.

Chuột SP không chết trong suốt quá trình thử nghiệm, cho thấy khả năng bảo mật và hoạt động tốt hơn của mô hình động vật. So với nhóm A, chuột trong nhóm mô hình có bộ lông mượt mà, cục mịch, phân khô và

trở nên tồi tệ hơn với việc kéo dài thời gian lập mô hình.

3.3. Ảnh hưởng của AEHC đến số lượng phân và độ ẩm ở chuột táo bón do Loperamide.

So với phân bình thường, phân ở các nhóm B, C, D và E khô, nhỏ, cứng và không có váng trước khi điều trị.

Rốt cuộc, chuột được tiêm loperamide (được điều trị bằng thuốc đã làm giảm các triệu chứng như cơ thể và 3 (b)).

trọng lượng không có sự khác biệt đáng kể giữa tất cả các nhóm thí nghiệm, mặc dù Nhóm E có trọng lượng cơ thể thấp hơn một chút so với các nhóm khác (Hình 2 (a)). Ngoài ra, chuột SD bị táo bón ăn ít thức ăn hơn đáng kể so với Nhóm A (), trong khi sự khác biệt giữa các Nhóm B, C, D và E (Hình 2 (b)) là không đáng kể. Mức tiêu thụ nước cũng không thay đổi giữa Nhóm A và Nhóm B. Hơn nữa, không có sự gia tăng đáng kể nào về lượng nước tiêu thụ được phát hiện trong

rằng điều trị với AEHC không tạo ra bất kỳ thay đổi nào. Mặc dù tỷ lệ vận chuyển đường ruột ở Nhóm C, D và cũng cao hơn đáng kể Nhóm C, D và E có tỷ lệ thấp hơn đáng kể so với Nhóm A.

3.4. Ảnh hưởng của AEHC đến tỷ lệ vận chuyển ruột nhỏ ở chuột táo bón do Loperamide.

Như đã thấy từ Hình 4, không có sự khác biệt nào được phát hiện về thời gian vận chuyển cơ bản của ruột non giữa năm nhóm. Nhóm B có tỷ lệ đẩy bột than thấp hơn rõ ràng so với Nhóm A (𝑃 <0. 0="" 1).="" mặc="" dù="" tỷ="" lệ="" vận="" chuyển="" đường="" ruột="" ở="" nhóm="" c,="" d="" và="" e="" cũng="" cao="" hơn="" đáng="" kể="" so="" với="" nhóm="" b="" (𝑃=""><0,05), nhóm="" c,="" d="" và="" e="" có="" tỷ="" lệ="" này="" thấp="" hơn="" đáng="" kể="" so="" với="" nhóm="">

3.5. Sự can thiệp với AEHC Nâng cao Một phần Chức năng Chỉ số Tính vận động của Đại tràng.

Nồng độ GAS và MTL trong huyết thanh thu được từ chuột nhóm B giảm đáng kể so với nồng độ từ chuột nhóm A (𝑃 <{{0}}. 0="" 1,="" tương="" ứng).="" mặt="" khác,="" nhóm="" c,="" d="" và="" e="" (𝑃=""><0. 0="" 5,="" tương="" ứng)="" có="" mức="" gas="" và="" mtl="" hiệu="" quả="" cao="" hơn="" từ="" việc="" sử="" dụng="" chiết="" xuất="" herba="" cistanche="" so="" với="" nhóm="" b="" .="" giá="" trị="" ss="" ở="" chuột="" nhóm="" b="" cao="" hơn="" so="" với="" chuột="" nhóm="" a="" (𝑃=""><0. 01);="" các="" nhóm="" c,="" d="" và="" e="" có="" mức="" độ="" giảm="" độc="" lực="" của="" ss="" (𝑃=""><0,05) (hình="" 5).="" so="" với="" chuột="" bị="" táo="" bón,="" mức="" cgrp="" ở="" chuột="" bình="" thường="" nhóm="" a="" (𝑃=""><0,01) và="" ở="" nhóm="" c,="" d="" và="" e="" do="" herba="" cistanche="" quản="" lý="" là="" không="" đổi="" (𝑃=""> 0,05).

3.6. Thay đổi mô học của ruột kết.

Để điều tra xem liệu điều trị AEHC có thể gây ra sự thay đổi cấu trúc của mô ruột kết hay không, chiều dài nhung mao, độ dày lớp mật và độ dày cơ đã được đo ở ruột kết ngang của chuột trong năm nhóm sau khi nhuộm H&E. Bằng cách so sánh bệnh lý đại tràng của chuột ở mọi nhóm, niêm mạc đại tràng nhẵn và chứa các động mạch nhỏ và tĩnh mạch nhỏ ở lớp dưới niêm mạc và một số lượng lớn các tế bào mỡ. Ngoài ra, lớp cơ bao gồm các tế bào cơ trơn và lớp cơ hoàn chỉnh. Chiều dài trung bình của nhung mao ở Nhóm B ngắn hơn đáng kể so với Nhóm A (𝑃 <{{0}}. 0="" 1).="" tuy="" nhiên,="" chiều="" dài="" trung="" bình="" của="" nhung="" mao="" ở="" nhóm="" c="" tăng="" hơn="" 30%="" khi="" so="" sánh="" với="" nhóm="" b="" (hình="" 6="" và="" 7)="" (𝑃=""><0,05). trong="" khi="" đó,="" chiều="" dài="" trung="" bình="" của="" nhung="" mao="" tăng="" lên="" rất="" nhiều="" ở="" nhóm="" d="" và="" e="" khi="" so="" sánh="" với="" nhóm="" b="" (hình="" 6="" (a)="" và="" 6="" (b))="" (𝑃=""><0,01). hơn="" nữa,="" sự="" thay="" đổi="" độ="" dày="" của="" cơ="" rất="" giống="" với="" độ="" dài="" của="" nhung="" mao.="" trong="" nhóm="" b,="" độ="" dày="">

mỏng hơn đáng kể khi so sánh với Nhóm A. Tuy nhiên, mức độ dày cơ ở Nhóm C, D và E tăng 30–35 phần trăm so với Nhóm B (Hình 6 và 7). Nhìn chung, những phát hiện này chỉ ra rằng AEHC có thể làm tăng chiều dài nhung mao và độ dày cơ trong ruột kết của những con chuột bị táo bón.

3.7. Quản lý điều trị AHEC Tăng biểu hiện protein của c-Kit và SCF.

Tính phản ứng miễn dịch của nó được phát hiện trong ruột kết khi các tế bào ở tất cả các nhóm đều có kết quả xét nghiệm dương tính với c-kit. Như trong Hình 8, mức độ biểu hiện của c-kit trong Nhóm B thấp hơn trong Nhóm A (𝑃 <0. 0="" 5).="" mức="" độ="" biểu="" hiện="" của="" c-kit="" trong="" nhóm="" c="" cao="" hơn="" trong="" nhóm="" b="" (𝑃=""><0. {{2="" 0}}="" 5),="" trong="" khi="" có="" nhiều="" c-kit="" hơn="" trong="" nhóm="" d="" và="" e="" hơn="" nhóm="" b="" (𝑃=""><0. 05).="" sau="" khi="" điều="" trị="" với="" các="" nồng="" độ="" khác="" nhau="" của="" chiết="" xuất="" herba="" cistanche="" trong="" nước="" trong="" 2="" tuần,="" mức="" độ="" biểu="" hiện="" protein="" của="" c-kit="" và="" scf="" được="" phát="" hiện="" bằng="" phân="" tích="" western="" blot.="" phân="" tích="" western="" blot="" cho="" thấy="" mức="" độ="" biểu="" hiện="" c-kit="" và="" scf="" thấp="" hơn="" đáng="" kể="" sau="" khi="" điều="" trị="" bằng="" loperamide="" ở="" ruột="" kết="" của="" chuột="" (hình="" 9).="" hình="" 8="" (e)="" chứng="" minh="" rằng="" c-kit="" giảm="" ở="" những="" con="" chuột="" bị="" táo="" bón="" đã="" tăng="" lên="" đáng="" kể="" 31,2%="" sau="" khi="" điều="" trị="" những="" con="" chuột="" với="" 500="" 𝜇g="" ml="" aehc="" (𝑃=""><0,05). ngoài="" ra,="" điều="" trị="" với="" aehc="" 100="" và="" 200="" g="" ml="" aehc="" làm="" tăng="" mức="" độ="" biểu="" hiện="" protein="" c-kit.="" sự="" biểu="" hiện="" của="" protein="" scf="" tăng="" lên="" đáng="" kể="" 20,1,="" 24,7="" và="" 8,4%="" khi="" xử="" lý="" với="" aehc="" 100,="" 200="" và="" 500="" 𝜇g="" ml="" tương="" ứng="" (hình="" 9).="" 3.8.="" ảnh="" hưởng="" của="" aehc="" đến="" mrna="" biểu="" hiện="" của="" c-kit,="" scf="" và="" pi3k.="" để="" điều="" tra="" xem="" điều="" trị="" aehc="" có="" thể="" ảnh="" hưởng="" đến="" sự="" điều="" hòa="" của="" mrna="" liên="" quan="" đến="" co="" cơ="" hay="" không,="" người="" ta="" đã="" quan="" sát="" thấy="" những="" thay="" đổi="" về="" mức="" độ="" biểu="" hiện="" c-kit,="" scf="" và="" pi3k="" ở="" ruột="" chuột="" bị="" táo="" bón="" bằng="" cách="" sử="" dụng="" mồi="" cụ="" thể.="" kết="" quả="" cho="" thấy="" mức="" mrna="" của="" c-kit="" ở="" nhóm="" b="" thấp="" hơn="" đáng="" kể="" so="" với="" nhóm="" a="" (𝑃=""><0,05), trong="" khi="" mức="" mrna="" ở="" nhóm="" c,="" d="" và="" e="" cao="" hơn="" ở="" nhóm="" b="" (𝑃=""><0,05) (hình="" 10).="" chúng="" tôi="" cũng="" đã="" kiểm="" tra="">

biểu thức của SCF, một phối tử của kit. Biểu hiện mRNA của SCF ở chuột Nhóm B thấp hơn đáng kể so với Nhóm A, trong khi điều trị với AEHC ở Nhóm C, D và E làm tăng biểu hiện mRNA của SCF (Hình 1 0). Ngoài ra, chúng tôi đã kiểm tra ảnh hưởng của AEHC đến biểu hiện gen PI3K. Vào ngày 14, mức độ biểu hiện gen PI3K ở Nhóm C, D và E cao hơn đáng kể so với Nhóm B (𝑃 <>

4. Thảo luận

Táo bón là một rối loạn rất phổ biến, đặc trưng bởi nhu động ruột kém. Nó làm giảm đáng kể chất lượng cuộc sống và mang lại gánh nặng kinh tế to lớn cho cả bệnh nhân và bảo hiểm y tế quốc gia [32]. Các sản phẩm tự nhiên và thực phẩm làm thuốc ngày nay thu hút sự chú ý ngày càng tăng vì chúng có tiềm năng trở thành những loại thuốc mới được sử dụng để điều trị táo bón [37, 38]. Do đó, chúng tôi đã nghiên cứu tác dụng điều trị của AEHC trên chuột bị táo bón do loperamide. Loperamide, atropine-diphenoxylate và morphine được sử dụng rộng rãi để gây táo bón ở động vật thí nghiệm. Trong số ba loại thuốc, loperamide gây ra thời gian di chuyển phân kéo dài và làm chậm quá trình vận chuyển chất lỏng trong ruột, vì nó ức chế cả bài tiết nước và chuyển động trơn tru trong thành ruột [39]. Phân tích trọng lượng cơ thể trong nghiên cứu này không tìm thấy bất kỳ sự khác biệt nào trong mỗi nhóm. Sau khi thử nghiệm, không có sự khác biệt nào được tìm thấy. Nhóm sử dụng liều lượng thấp AEHC vẫn có trọng lượng cơ thể thấp nhất, nhưng nhóm người mẫu và nhóm bình thường lại có trọng lượng cơ thể cao nhất. Táo bón nói chung là một bệnh cơ năng. Táo bón do vận chuyển chậm gây ra trong nghiên cứu này không ảnh hưởng đến sự hấp thu chất dinh dưỡng của chuột và trọng lượng cơ thể của chúng trong quá trình thử nghiệm. Sự khác biệt về lượng phân của chuột và độ ẩm của chúng không tồn tại giữa các nhóm trước khi làm mô hình; tuy nhiên, cả hai đều giảm đáng kể sau khi làm mô hình và độ ẩm của phân tăng lên sau khi sử dụng AEHC ở các liều lượng khác nhau. Sau khi nghiên cứu tỷ lệ đẩy bột cacbon của ruột kết.

của chuột, nhóm mô hình đã thấy tỷ lệ giảm rõ rệt, trong khi tỷ lệ này vẫn bình thường ở các nhóm AEHC liều lượng thấp, liều lượng trung bình và liều lượng cao. Kết quả cho thấy táo bón mãn tính do loperamide được điều trị bằng các liều lượng khác nhau của Herba Cistanche có thể phục hồi chức năng đẩy của ruột kết ở các mức độ khác nhau. Hormone tiêu hóa là những chất có hiệu suất sinh học cao do các tế bào nội tiết của niêm mạc ống tiêu hóa và tuyến tụy tiết ra, có tác dụng hưng phấn và ức chế để điều hòa chức năng vận động của ống tiêu hóa [40, 41], trong đó GAS, MTL và SS có tác dụng chính. Hai kích thích tố trước đây kích thích bài tiết dịch tiêu hóa, co thắt cơ trơn đường tiêu hóa, thúc đẩy chuyển động của các chất trong đường tiêu hóa và kích thích nhu động ruột của khí. Ngược lại, SS ức chế sự bài tiết dịch tiêu hóa, co bóp cơ trơn đường tiêu hóa và làm rỗng đường tiêu hóa [42]. Mức GAS và MTL trong mô ruột kết của nhóm mô hình được tìm thấy là thấp nhất, cho thấy rằng phương pháp mô hình hóa chắc chắn đã làm giảm nồng độ GAS và MTL trong mô ruột kết. Là các hormone đường tiêu hóa chính của nhu động ruột kết, nồng độ GAS và MTL tăng lên do các liều lượng AEHC khác nhau và do đó tăng cường nhu động ruột kết. Ngược lại, mức SS trong mô ruột kết của nhóm mô hình là cao nhất, cho thấy rằng phương pháp mô hình hóa có thể thúc đẩy nồng độ SS trong mô ruột kết. CGRP là một trong những thuốc giãn mạch mạnh nhất và tác dụng thư giãn của nó mạnh hơn 10- lần so với tác dụng co bóp. Là một chất dẫn truyền thần kinh hoặc chất điều hòa thần kinh quan trọng giúp điều chỉnh các chức năng tiêu hóa, CGRP có thể ức chế phần lớn nhu động đường tiêu hóa và sự bài tiết các loại dịch tiêu hóa khác nhau [43]. Nồng độ CGRP trong nhóm mô hình cao hơn nhóm A, cho thấy phương pháp mô hình hóa có thể làm tăng nồng độ CGRP trong mô ruột kết, đây cũng có thể là một trong những yếu tố làm giảm nhu động ruột kết, dẫn đến táo bón. Nồng độ CGRP trong mô ruột kết của nhóm AEHC thấp hơn so với nhóm mô hình, cho thấy AEHC có tác dụng ức chế tương đối yếu đối với chuyển động của ruột kết. c-Kit là một protein xuyên màng. Yếu tố tế bào gốc (SCF) của phối tử của nó được tạo ra bởi các tế bào thần kinh và tế bào cơ trơn. Nó thúc đẩy sự phát triển và biệt hóa của ICC và duy trì chức năng sinh lý bình thường của nó. Ghi nhãn c-Kit phản ánh gián tiếp số lượng và mật độ của ICC [44, 45]. Ngoài ra, tế bào ICC đóng một vai trò quan trọng trong việc điều hòa nhu động đường tiêu hóa và hoạt động như máy điều hòa nhịp tim của chuyển động đường tiêu hóa. Vì vậy, một số rối loạn về nhu động đường ruột có thể làm suy giảm số lượng và chức năng của các tế bào ICC. Theo các nghiên cứu trước đây, số lượng tế bào trong ruột kết của những bệnh nhân mắc chứng rối loạn vận chuyển mãn tính đã giảm xuống. Do đó, nghiên cứu này đã quan sát các tế bào ruột kết của chuột bằng cách sử dụng các kỹ thuật hóa mô miễn dịch và biểu hiện cụ thể. So với nhóm bình thường, số lượng tế bào trong nhóm mô hình giảm rõ rệt nhưng lại tăng lên sau khi điều trị. Nghiên cứu chỉ ra rằng các tế bào ICC và các yếu tố tế bào gốc (SCF) có liên quan chặt chẽ đến con đường tín hiệu c-kit / SCF. SCF là phối tử tự nhiên của c-kit được biểu hiện trong các mô khác nhau của cơ thể nhưng chủ yếu là

được sản xuất bởi các tế bào mô đệm trong tủy xương. Mọi đơn phân c-kit kết hợp với SCF thông qua các miền ngoại bào 1–3. Sau quá trình đồng phân hóa SCF, cấu trúc của monome c-kit thay đổi và tạo ra quá trình homodime hóa, sau đó dẫn đến quá trình tự phosphoryl hóa dư lượng axit amin trong màng tế bào và kích thích các phân tử tín hiệu thứ hai khác nhau để điều chỉnh các chức năng tế bào của ICC. Phân tử tín hiệu thứ hai là phosphatidylinositol 3- kinase (PI3K), một apolipoprotein chuyển 4, 5- diphosphoinositide thành 3,4, 5- triphosphoinositide thông qua sự kết hợp với tyrosine 721 của c-kit. Nghiên cứu trước đây cho thấy rằng các chất ức chế PI3K Wortmannin và LY294002 đã làm phát triển ICC bất thường bằng cách ngăn chặn tín hiệu [46]. Thí nghiệm của chúng tôi phát hiện ra rằng biểu hiện protein c-kit và SCF và mRNA trong nhóm mô hình giảm lúc đầu nhưng sau đó tăng lên ở các nhóm AEHC với liều lượng khác nhau, mặc dù ở mức dưới bình thường. biểu hiện mRNA của PI3K tăng lên đáng kể. Do đó, SCF / c-kit có thể có hiệu lực thông qua PI3K. Kết quả cho thấy AEHC có thể điều chỉnh cơ trơn của đường tiêu hóa bằng cách tăng số lượng tế bào ICC. Liều lượng thấp AEHC không có tác dụng đáng kể đối với táo bón, trong khi liều lượng trung bình và liều lượng cao của nó giúp rút ngắn thời gian đại tiện đầu tiên của chuột, tăng độ ẩm của phân, cải thiện tốc độ đẩy của ruột kết, tinh chỉnh số lượng phân, tăng GAS , MTL và CCK, và tăng cường sự co bóp của ruột kết. Liều lượng hiệu quả của AEHC ban đầu là 20 g / ngày sau khi chuyển đổi, tương đương với liều lượng trung bình và liều lượng cao trong nghiên cứu này.

5. Kết Luận

AEHC thúc đẩy nhu động ruột bằng cách cải thiện chức năng ICC và điều chỉnh chất dẫn truyền thần kinh. Nghiên cứu này đã chứng minh rằng AEHC có khả năng điều trị và ngăn ngừa táo bón. Các chất chiết xuất đã cải thiện sự sản xuất sóng chậm của ruột kết và điều chỉnh nhịp điệu của hoạt động co bóp Số lượng mRNA SCF Số lượng mRNA PI3K Số lượng mRNA c-Kit 12 Thuốc thay thế và bổ sung dựa trên bằng chứng của cơ trơn bằng cách tăng số lượng ICC thông qua PI3K / SCF / đường dẫn tín hiệu c-kit. Tuy nhiên, các nghiên cứu thực nghiệm chi tiết hơn nữa có thể cải thiện hiểu biết về các con đường phân tử khác của AEHC trong việc chữa STC và giúp hướng dẫn các nghiên cứu lâm sàng tiềm năng đánh giá tác dụng và độ an toàn của nó.

Xung đột lợi ích

Các tác giả tuyên bố rằng không có xung đột lợi ích.

Tác giả đóng góp

Shuai Yan và Yin-Zi Yue đã đóng góp không kém vào tác phẩm này. Tất cả các tác giả đã thông qua bài báo cuối cùng.

Sự nhìn nhận

Công trình này được hỗ trợ bởi một khoản tài trợ từ Quỹ Khoa học Tự nhiên Quốc gia Trung Quốc (NSFC) và được tài trợ bởi Chính phủ Trung Quốc (81573979). Nghiên cứu cũng được hỗ trợ bởi dự án công nghệ của Cục Quản lý Y học Cổ truyền Trung Quốc tỉnh Giang Tô, Trung Quốc (số YB2017061), Chương trình Phát triển Khoa học và Công nghệ Tô Châu, Trung Quốc (số SYSD2015172), Dự án Đổi mới Công nghệ Công nghiệp Tô Châu, Trung Quốc ( số SYSD2016136, số SYS201775 và số SYS201776), và Dự án Cao đẳng của Bệnh viện Y học Cổ truyền Trung Quốc Tô Châu, Trung Quốc (YQN2015007). Các tác giả chân thành cảm ơn sự hỗ trợ tài chính từ một dự án được tài trợ bởi Quỹ Khoa học Sau Tiến sĩ Trung Quốc (2017M620220).

Người giới thiệu

[1] JY Chang, GR Locke, MA McNally, và cộng sự, "Tác động của rối loạn tiêu hóa chức năng đến khả năng sống sót trong cộng đồng," American Journal of Gastroenterology, vol. 105, không. 4, trang 822– 832, 2010. [2] SM Mugie, M. A Bennington, và C. Di Lorenzo, "Dịch tễ học về táo bón ở trẻ em và người lớn: tổng quan hệ thống," Best Practice & Research Clinical Gastroenterology, vol. 25, không. 1, tr. 18, 2011. [3] NC Suares và AC Ford, "Tỷ lệ và các yếu tố nguy cơ gây táo bón mãn tính vô căn trong cộng đồng: tổng quan hệ thống và phân tích tổng hợp," American Journal of Gastroenterology, vol. 106, không. 9, trang 1582–1591, 2011. [4] A. Lembo và M. Camilleri, “Táo bón mãn tính,” Tạp chí Y học New England, tập. 349, không. 14, trang 1360–1368, 2003. [5] S. Singh, S. Heady, E. Coss-Adame, và SSC Rao, "Tiện ích lâm sàng của phương pháp đo đại tràng trong táo bón vận chuyển chậm," Neurogastroenterology & Motility, vol. 25, không. 6, trang 487–495, 2013. [6] DM Preston và JE Lennard-Jones, "Táo bón mãn tính trầm trọng ở phụ nữ trẻ: táo bón chậm vận chuyển vô căn", Gut, vol. 27, không. 1, trang 41–48, 1986. [7] P. Kashyap, PJ Gomez-Pinilla, MJ Pozo, và cộng sự, "Hoạt động miễn dịch đối với Ano1 phát hiện sự suy giảm tế bào kẽ Kit dương tính của Cajal ở những bệnh nhân bị táo bón vận chuyển chậm , "Neurogastroenterology & Motility, vol. 23, không. 8, trang 760–765, 2011. [8] JD Belsey, M. Geraint, và TA Dixon, "Đánh giá hệ thống và phân tích tổng hợp: Polyethylene glycol ở người lớn bị táo bón không hữu cơ", Tạp chí Quốc tế về Thực hành Lâm sàng, vol . 64, không. 7, trang 944–955, 2010. [9] AC Ford và NC Suares, "Tác dụng của thuốc nhuận tràng và liệu pháp dược lý trong táo bón vô căn mãn tính: tổng quan hệ thống và phân tích tổng hợp," Gut, vol. 60, không. 2, trang 209–218, 2011. [10] OM Aboumarzouk, T. Agarwal, R. Antakia, U. Shariff, và RL Nelson, "Cisapride trị táo bón ruột," Cơ sở dữ liệu Cochrane về Đánh giá có hệ thống, vol. 19, không. 1, tr. CD007780, 2011. [11] MA Kamm, S. Muller-Lissner, NJ Talley, và cộng sự, "Tegaserod để điều trị táo bón mãn tính: Một nghiên cứu đa quốc gia ngẫu nhiên, mù đôi, có đối chứng với giả dược," American Journal of Khoa tiêu hóa, tập. 100, không. 2, trang 362–372, 2005. [12] A. Shin, M. Camilleri, G. Kolar, P. Erwin, CP West và MH Murad, "Đánh giá có hệ thống với phân tích tổng hợp: Có tính chọn lọc cao {{80} } Chất chủ vận HT4 (prucalopride, velusetrag hoặc naronapride) trong chứng táo bón mãn tính, "Ali bổ sung Pharmacology & Therapeutics, vol. 39, không. 3, trang 239–253, 2014. [13] J.-H. Chen, Q. Zhang, Y. Yu và cộng sự, "Đặc tính sinh thần kinh và sinh cơ của các mô hình vận động liên đại tràng và tổ chức không gian của chúng ở chuột," PLoS ONE, vol. 8, không. 4, ID bài viết e60474, 2013. [14] VL Serebruany, ME Mouelhi, H.-J. Pfannkuche, K. Rose, M. Marro, và DJ Angiolillo, "Điều tra về biểu hiện của 5- thụ thể HT4 và ảnh hưởng của tegaserod đối với sự kết tập tiểu cầu ở người trong ống nghiệm", Tạp chí Điều trị Hoa Kỳ, vol. 17, không. 6, trang 543–552, 2010. [15] HS Winter, C. Di Lorenzo, MA Benninga, et al., "Uống prucalopride ở trẻ em bị táo bón chức năng," Tạp chí Nhi khoa Tiêu hóa và Dinh dưỡng, vol. 57, không. 2, trang 197–203, 2013. [16] A. Bove, F. Puccini, M. Bellini, và cộng sự, "Tuyên bố đồng thuận AIGO / SICCR: Chẩn đoán và điều trị táo bón mãn tính và đại tiện bị tắc nghẽn (phần I: Chẩn đoán ), "Tạp chí Tiêu hóa Thế giới, vol. 18, không. 14, trang 1555–1564, 2012. [17] GL Lyford, C.-L. Ông, E. Soffer, và cộng sự, "Sự giảm liên kết đại tràng trong các tế bào kẽ của Cajal ở những bệnh nhân bị táo bón vận chuyển chậm," Gut, vol. 51, không. 4, trang 496–501, 2002. [18] J.-P. Wang, G.-F. Ding và Q.-Z. Wang, "Tế bào kẽ của Cajal làm trung gian dẫn truyền thần kinh giao cảm kích thích ở tuyến tiền liệt chuột lang," Nghiên cứu Tế bào và Mô, tập. 352, không. 3, trang 479–486, 2013. [19] W.-D. Tong, B.-H. Liu, L.-Y. Zhang, S.-B. Zhang và Y. Lie, "Giảm các tế bào kẽ của Cajal trong đại tràng sigma của những bệnh nhân bị táo bón vận chuyển chậm", Tạp chí Quốc tế về Bệnh Đại trực tràng, tập. 19, không. 5, trang 467–473, 2004. [20] D. Wu, X. Wang, J. Zhou, et al., "Công thức truyền thống của Trung Quốc, thuốc bôi trơn đường ruột, cải thiện chứng táo bón do loperamide ở chuột liên quan đến việc tăng cường Cl- bài tiết qua biểu mô ruột kết xa, "Tạp chí Ethnopharmacology, vol. 130, không. 2, trang 347–353, 2010. [21] D.-Y. Anh ấy và S.-M. Dai, "Tác dụng chống viêm và điều hòa miễn dịch của Paeonia lactiflora Pall., Một loại thuốc thảo dược truyền thống của Trung Quốc," Frontiers in Pharmacology, vol. 2, điều 10, 2011. [22] Z. Li, H. Lin, L. Gu, J. Gao, and C.-M. Tzeng, "Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): Một trong những món quà dược phẩm tốt nhất của y học cổ truyền Trung Quốc," Frontiers in Pharmacology, vol. 7, điều 41, 2016.