Mối quan hệ giữa chiết xuất Cistanche Tubulosa và mức độ hormone tình dục là gì?

Tian Wang1, Chen Chen2, Man Yang1,2, Taiwan Deng2, Gordon Michael Kirby3 và Xiaoying Zhang1

trừu tượng

Bối cảnh: Thực vật thuộc chiCistancheHoffman. et Link (Orobanchaceae) thường được sử dụng làm thuốc dân tộc ở Đông Á. Các nghiên cứu dược lý học đã chỉ ra rằngCistanchesở hữu một hiệu ứng giống như androgen; tuy nhiên, cơ chế chính xác vẫn chưa rõ ràng.

Mục tiêu: Nghiên cứu hiện tại xác định tác dụng của chiết xuất etanol củaCistanchetubulosa(Schenk) R. Wight stem (CTE) onhóc môncấp độvà các enzym steroid sinh tinh hoàn ở chuột. Vật liệu và phương pháp: Hàm lượng phenylethanoid glycoside của CTE được phát hiện bằng phép đo quang phổ UV. Chuột được cho ăn các liều CTE khác nhau ({{0}}. 2, 0. 4, và 0,8 g / kg) bằng đường tiêu hóa trong 20 ngày. Thông số tinh trùng được đo bằng phương pháp nhuộm và đếm. Mức độ progesterone và testosterone trong huyết thanh được định lượng bằng phương pháp radioimmunoassay. Mức độ biểu hiện của enzym phân cắt chuỗi bên cholesterol (CYP11A1), 17a-hydroxylase / 17, 20- lyase (CYP17A1) và một enzym chuyển hóa ở gan (CYP3A4) trong microsome được đánh giá bằng phương pháp nhuộm hóa mô miễn dịch hoặc / và phương pháp phân tích blot.

Kết quả: Nghiên cứu minh họa rằng việc sử dụng CTE ({{0}}. 4 và 0. 8 g / kg) đã làm tăng số lượng tinh trùng (2. 3- và 2. {{ 7}} nếp gấp) và khả năng di chuyển của tinh trùng (1. 3- và 1. 4- nếp gấp) và giảm tinh trùng bất thường (0. 76- và 0. {15} } nếp gấp). Nồng độ progesterone và testosterone trong huyết thanh ở chuột cũng tăng lên khi dùng CTE (p50.05). Kết quả hóa mô miễn dịch và phân tích Western blot xác nhận rằng sự biểu hiện của CYP11A1, CYP17A1 và CYP3A4 được tăng cường bởi CTE (p50.05). Người ta cũng phát hiện ra rằng liều cao CTE có thể gây phù gan nhẹ.

Kết luận: Kết quả của chúng tôi cho thấy sự gia tăng quan hệ tình dụchóc môn cấp độcó thể được thực hiện qua trung gian cảm ứng của các enzym steroid sinh tinh hoàn.

Tiếp xúc:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

cistanche tốt cho chức năng tình dục, bấm vào đây để lấy mẫu

Giới thiệu

CistancheHoffman. et Link (Orobanchaceae) là một chi cây thuốc đã được sử dụng ở Trung Quốc và các nước Đông Á khác từ thế kỷ XV để điều trị các chứng bệnh (theo lý luận y học cổ truyền Trung Quốc) như liệt dương, di tinh, vô sinh, suy nhược toàn thân. với các thăn lưng và đầu gối, và táo bón mãn tính (Wang et al., 2012). C.sa mạcYC Ma vàCistanchetubulosa(Schenk) R. Wight có các thành phần hóa học và hoạt tính dược lý tương tự, và chúng đã được ghi trong Dược điển Trung Quốc (Ủy ban Biên tập Dược điển Trung Quốc, 2010). Tác dụng của C.sa mạcvề sự gia tăng các chỉ số cơ quan của hệ thống sinh sản đực được đánh giá ở những con chuột khỏe mạnh (He et al., 1996a, b). Tinh hoàn là mô chính chịu trách nhiệm tiết androgen; hệ thống sinh sản của chuột thiến đã được cải thiện tốt nhờ C.sa mạcquản lý (He và cộng sự, 1996a, b). enzym (CYP11A1 và CYP17A1) và enzym chuyển hóa (CYP3A4) ở chuột đực.

Những phát hiện trên chỉ ra rằng C.sa mạccó thể góp phần vào sự phát triển của hệ thống sinh sản nam giới thông qua hiệu ứng điều hòa hormone sinh dục hoặc giống androgen (He et al., 1996a, b). Các nghiên cứu trước đây cũng chỉ ra rằng C.sa mạccó thể góp phần tạo xương trong nguyên bào xương (Li và cộng sự, 2012). Androgen được biết đến với tác động có lợi đối với sự phát triển và duy trì hệ xương ở cả phụ nữ và nam giới (Hofbauer & Khosla, 1999).Cistanchetubulosađang được coi là một giải pháp thay thế cho C.sa mạc, vì nó đang trên đà tuyệt chủng do bị khai thác quá mức trong nhiều thập kỷ. Do đó, tác dụng của C.tubulosavề mức độ hormone sinh dục và đánh giá độ an toàn của nó là không thể thiếu. trên hai enzym sinh steroid chính (CYP11A1 và CYP17A1) và enzym chuyển hóa (CYP3A4) đã được đánh giá (Hanukoglu, 1992).

Nghiên cứu này khảo sát những ảnh hưởng trực tiếp của C.tubulosatrích xuất (CTE) về nồng độ progesterone và testosterone cũng như về sự biểu hiện của hai enzyme steroid (CYP11A1 và CYP17A1) và enzyme chuyển hóa (CYP3A4) ở chuột đực.

Nguyên liệu và phương pháp

Loài vật

Tổng số 60 con chuột Sprague – Dawley đực nặng 100–120 g đã được sử dụng trong nghiên cứu. Các con vật được giữ ở nhiệt độ ổn định (23 ± 1 ○ C) với chu kỳ sáng-tối 12 giờ trong lồng polypropylene và được phép tiếp cận tự do với nước và thức ăn. Tất cả các quy trình động vật được thực hiện theo hướng dẫn của trường đại học về việc chăm sóc và sử dụng động vật thí nghiệm.

Điều chế chiết xuất C. tubulosa

Thân cây củaC. tubulosađã được PGS.TS Jian-Jun Hu (Đại học Tarim, Tân Cương, Trung Quốc) vui lòng cung cấp và xác nhận. CácC. tubulosađược thu thập trong quá trình phát huỳnh quang (vào tháng 5) từ khu vực sa mạc ở phía Nam khu tự trị Tân Cương. Thân cây khô được nghiền thành bột và sàng qua rây lưới 200-. Bột Cistanche tubulosa (50 g) được chiết xuất hai lần bằng 250 mL ethanol 70% và cô đặc, sau đó đông lạnh ở 80 ○ C và đông khô đến khô. Bột được bảo quản ở 4 ○ C cho đến khi sử dụng tiếp.

Phenylethanoid glycoside (PhGs) là các hợp chất hoạt động chính củaC. tubulosavà nội dung được phát hiện bằng phép đo quang phổ tử ngoại (Wang và cộng sự, 2 0 {{2 0}} 8). Echinacoside (111670-200503, Viện Kiểm soát Thực phẩm và Dược phẩm Quốc gia, Trung Quốc) được sử dụng như một hợp chất tiêu chuẩn của PhGs trong việc phát hiện (Ủy ban Biên tập Dược điển Trung Quốc, 2 0 1 0). Dịch chiết của C. tubulosa (2 g) được hòa tan trong 100 mL nước cất và cho vào nhựa macroporous D101 để thu được nước cất (200 mL), 20% etanol (200 mL) và 70% etanol (200 mL). Phần etanol 70% sau đó được cô đặc đến 50 mL và được làm đông lạnh ở 80 C và làm khô thành bột ở 60 C. Bột được hòa tan trong 50 mL metanol cho đến khi sử dụng tiếp (dung dịch mẹ). Dung dịch ở độ pha loãng lần 40- được đo ở bước sóng 330 nm bằng máy quang phổ. Các dung dịch chuẩn được chuẩn bị bằng cách thêm các thể tích đã biết của echinacoside (0,04, 0,08, 0,16,0,32 và 0,64 mg) vào 5 mL metanol.

Đối xử với động vật

Những con chuột được chia ngẫu nhiên thành bốn nhóm: (1) nhóm đối chứng (được điều trị bằng nước muối thông thường), (2) CTE liều thấp, (3) trung bình và (4) nhóm liều cao (được điều trị bằng 0 .2, 0. 4 và 0. 8 g / kg CTE, tương ứng). Vật liệu được cho chuột ăn bằng đường tiêu hóa trong 20 ngày. Vào ngày sau lần dùng thuốc cuối cùng, những con chuột được gây mê bằng pentobarbital, và máu được lấy bằng cách chọc tim. Các cơ quan, mô và tuyến, bao gồm gan, tinh hoàn, mào tinh hoàn, túi tinh, tuyến tiền liệt và tuyến tiền liệt, đã được cắt bỏ và cân. Các chỉ số nội tạng được tính bằng công thức sau:

Chỉ số nội tạng (phần trăm) ¼ 100 × (trọng lượng cơ quan / trọng lượng cơ thể)

Tinh hoàn một bên được cố định trong chất cố định của Bouin ở nhiệt độ phòng để nhuộm H&E và hóa mô miễn dịch, và các tinh hoàn khác được bảo quản ở 80 ○ C để chuẩn bị microsome. Lớp phủ được cố định trong formalin để nhuộm H&E.

Mẫu máu được thu thập và ủ ở tư thế thẳng đứng ở nhiệt độ phòng trong 30 phút để cho đông máu và sau đó ly tâm trong 15 phút với tốc độ 2000 vòng / phút. Huyết thanh được bảo quản ở -20 ○ C cho đến khi sử dụng tiếp.

Phát hiện các thông số tinh dịch

Để có được huyền phù tinh trùng, mào tinh của chuột được lấy và băm nhuyễn trong nước muối thông thường, sau đó được nuôi cấy trong 15 phút ở 37 ○ C. Hỗn dịch tinh trùng được thu thập để phát hiện các thông số tinh dịch.

Đối với xét nghiệm số lượng tinh trùng, tổng cộng 450 ml chất cố định 10% formalin đã được thêm vào 50 ml huyền phù tinh trùng. Sau đó 10 ml dung dịch được cho vào buồng đếm máu, các đầu tinh trùng được đếm và biểu thị bằng triệu / ml huyền phù.

Khả năng sống của tinh trùng được phát hiện bằng phương pháp nhuộm, 10 ml huyền phù tinh trùng được cho lên lam kính. Sau đó, 10 ml dung dịch nhuộm (eosin Y và nigrosin) được thêm vào và ủ trong 2 phút. Các phiến kính được quan sát bằng kính hiển vi quang học (độ phóng đại 400). Đối với mỗi mẫu, tổng số 200 tinh trùng được đánh giá và tính toán tỷ lệ phần trăm khả năng sống.

Tổng cộng 10 ml huyền phù tinh trùng được cho lên lam kính, độ di động của tinh trùng được quan sát bằng kính hiển vi quang học (độ phóng đại 400). Mười trường thị giác được chọn từ mỗi mẫu và 200 tinh trùng được đánh giá về khả năng vận động. Tiêu chuẩn phân loại như sau: (1) vận động tiến bộ (PR), khả năng thể thao tốt, di chuyển theo đường thẳng hoặc đường cong, tốc độ có thể bỏ qua; (2) khả năng vận động không tiến bộ (NP), khả năng thể thao kém, xoay người hoặc xoay người; (3) bất động (IM), không di chuyển.

Tổng cộng 50 ml huyền phù tinh trùng được cố định trên lam kính và nhuộm bằng dung dịch eosin 1% trong 10 phút. Hình thái tinh trùng được quan sát bằng kính hiển vi quang học (độ phóng đại 400). Tổng cộng 200 tinh trùng đã được đánh giá và tỷ lệ biến dạng của tinh trùng được tính toán.

Radioimmunoassay

Nồng độ progesterone và testosterone được định lượng trực tiếp từ huyết thanh đã chuẩn bị bằng cách sử dụng bộ dụng cụ xét nghiệm radioimmunoass (RIA) (Viện Công nghệ Sinh học Trung-Anh, Bắc Kinh, Trung Quốc) theo quy trình của nhà sản xuất.

Nhuộm hóa mô miễn dịch

Các mô cố định được cắt thành các đoạn parafin (5 mm) và hóa mô miễn dịch được thực hiện để đánh giá sự biểu hiện của CYP11A1 và CYP17A1 bằng bộ dụng cụ thương mại (Fuzhou Maixin Biotechnology Co., Ltd., Fuzhou, China) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Các kháng thể chống lại CYP11A1 và CYP17A1 được pha loãng trong PBS (1: 200) và kháng thể thứ hai có sẵn trong bộ dụng cụ. Bốn phần được chọn từ mỗi nhóm, 10 trường hình ảnh được chọn từ mỗi phần và các tế bào dương tính được đếm định tính bởi một nhà nghiên cứu bệnh học.

Chuẩn bị protein microomal ở tinh hoàn và gan

Việc chuẩn bị vi thể được thực hiện về cơ bản như mô tả của Jiang et al. (2 0 12). Các mẫu tinh hoàn hoặc gan được băm nhỏ và đồng nhất trong bốn thể tích đệm TMS lạnh đá (2 0 mM Tris – HCl, 5 mM MgCl2 và 0,25 M sucrose, pH 7,5). Các chất đồng nhất được ly tâm ở 9000g trong 20 phút ở 4 ° C. Phần nổi phía trên được loại bỏ và trộn với dung dịch CaCl2 88 mM (10: 1, v / v), được ly tâm ở 27 000 g trong 20 phút ở 4 ○ C. Các viên có chứa các phần màng thô được lơ lửng trong dung dịch đệm 0,1 M Tris với 20% glycerol. Các microsome được bảo quản ở 80 ○ C cho đến khi sử dụng tiếp. Nồng độ protein được xác định bằng phương pháp nhuộm màu xanh lam rực rỡ Coomassie sử dụng albumin huyết thanh bò làm chất chuẩn.

Phân tích Western blot

Các biểu hiện CYP11A1, CYP17A1 và CYP3A4 được đánh giá bằng phân tích Western blot. Các protein siêu nhỏ trong tinh hoàn hoặc gan được SDS-PAGE tách trên gel 12% và chuyển sang màng polyvinylidene fluoride (PVDF). Các màng được chặn trong sữa bột ít béo 5 phần trăm (w / v) trong nước muối đệm Tris với 0. 05 phần trăm Tween -20 (TBST) trong 2 giờ và được ủ thêm với thỏ chống chuột CYP11A1 và CYP17A1 (Boster Biological Technology, Wuhan, China) và CYP3A4 (Beijing Biosynthesis Biotechnology Co., Ltd., Beijing, China) polyclonal anti-body (1: 200) trong TBST ở 4 ○ C trong 8 giờ, tiếp theo là kháng thể thứ cấp peroxidase chống thỏ (1: 3000) peroxidase của dê (Tianjin Sungene Biotech Co., Ltd., Tianjin, China) được pha loãng trong TBST ở 37 ○ C trong 1 giờ. Phát hiện hóa chất phát quang được thực hiện bằng Hệ thống hình ảnh Bio-Rad ChemiDocTM MP (Phòng thí nghiệm Bio-Rad, Hercules, CA). Giá trị xám của các dải được phân tích bằng phần mềm Image J2 (Viện Y tế Quốc gia, Bethesda, MA).

Xét nghiệm độc tính trên gan

Để phát hiện độc tính trên gan của CTE ở chuột, người ta đánh giá chỉ số gan, mô bệnh học gan, nồng độ alanin aminotransferase (ALT). Các phần parafin được chuẩn bị theo quy trình tiêu chuẩn và các đặc điểm mô học được quan sát bằng kính hiển vi ánh sáng sau khi nhuộm H&E. Các bộ phận đã được kiểm tra bởi một nhà nghiên cứu bệnh học, người mù quáng trong việc xác định các mẫu. Nồng độ ALT trong huyết thanh được đo bằng kit ALT / GPT (Biosino Biotechnology and Science Inc. Bắc Kinh, Trung Quốc) theo quy trình của nhà sản xuất.

Phân tích thống kê

Tất cả dữ liệu được biểu thị dưới dạng giá trị trung bình ± SD và được phân tích với các phép đo lặp lại một chiều, phân tích phương sai (ANOVA). Tất cả các tham số thống kê được tính toán bằng phần mềm SPSS phiên bản 19. 0 (SPSS Inc., Chicago, IL). Sự khác biệt với giá trị p nhỏ hơn 0. 05 được coi là có ý nghĩa thống kê.

Kết quả

Nội dung của glycoside phenylethanoid trong chiết xuất C. tubulosa

Đường cong chuẩn thể hiện mối quan hệ tuyến tính tốt giữa độ hấp thụ và nồng độ echinacoside từ {{0}}. 0 08 đến 0,128 mg / mL (Y 14,39 x cộng 0,08125, R 2 0. 9982 )

(Hình 2). Theo tính toán, hàm lượng PhG trong CTE là 41,52%.

Ảnh hưởng của chiết xuất C. tubulosa đối với các chỉ số nội tạng

Sự khác biệt của các chỉ số cơ quan sinh sản nam giữa nhóm chứng và tất cả các nhóm điều trị không khác nhau có ý nghĩa thống kê (Bảng 1). Một sự khác biệt đáng kể (p5 0. 05) của chỉ số gan đã được quan sát thấy giữa nhóm đối chứng và nhóm điều trị CTE liều cao (0,8 g / kg).

Ảnh hưởng của chiết xuất C. tubulosa đến các thông số tinh dịch

Như thể hiện trong Bảng 2, số lượng tinh trùng của chuột đã tăng lên khi điều trị 0. 4 và 0. 8 g / kg CTE (p50.05), trong khi khả năng sống sót của tinh trùng không có sự khác biệt đáng kể giữa mỗi nhóm. Quản trị với CTE cũng cho thấy đáng kể

Độc tính trên gan của chiết xuất C. tubulosa

Chỉ số gan của nhóm điều trị CTE liều cao đã giảm và ALT huyết thanh tăng lên khi so sánh với nhóm chứng (Hình 7). CTE liều cao gây phù gan nhẹ (Hình 8). Cấu trúc gan của nhóm chứng bình thường; tế bào gan duy trì hình thái tế bào và được sắp xếp trong các dây gan có thể nhìn thấy được (Hình 8a). Ngược lại, các tế bào gan trong nhóm CTE liều cao (Hình 8b) nằm rải rác và hơn 50 phần trăm tế bào gan cho thấy các mức độ phù nề khác nhau. Một vài tế bào gan có biểu hiện thoái hóa mỡ. Một số tế bào gan có biểu hiện chết tế bào với nhân pyknotic và các bằng chứng khác về hoại tử tế bào bao gồm phân giải karyolysis và các mảnh vụn tế bào lan tỏa.

Cistanche tubulosa đã được chứng minh là có tác dụng hạ cholesterol trong máu (Shimoda et al., 2009; Xiong et al., 2013). Mức mRNA của CYP11A1 được điều chỉnh bởi CTE (400 mg / kg) (Shimoda và cộng sự, 2009), phù hợp với các báo cáo trước đây; tuy nhiên, cơ chế điều hòa phiên mã không rõ ràng. Cũng như các P450s gây steroid khác, sự điều hòa của CYP11A1 và CYP17A1 tương đối phức tạp, và sự cảm ứng của chúng đã được biết là do con đường tín hiệu cAMP gây ra (Guo và cộng sự, 2003; Kosˇir và cộng sự, 2012). Các chất xúc tiến của CYP11A1 và CYP17A1 chứa các trình tự liên kết với yếu tố sinh steroid (SF -1), đến lượt nó lại đóng một vai trò quan trọng trong sự biểu hiện cụ thể của mô và được điều chỉnh nội tiết tố của các gen sinh steroid (Ortiz de Montellano, 2005). Các yếu tố khác, bao gồm liên kết phần tử phản ứng cAMP (CREB), protein hoạt hóa 1 (AP -1), protein đặc hiệu (SP -1, SP -3), cũng tham gia vào việc kích hoạt CYP11A1 và phiên mã CYP17A1. Sự tập hợp của các yếu tố phiên mã khác nhau tạo thành phức hợp protein-DNA dường như là một bước quan trọng trong phiên mã CYP11A1 và CYP17A1 (Ortiz de Montellano, 2005). Protein mục tiêu của CTE ảnh hưởng đến sự biểu hiện CYP11A1 và CYP17A1 cần được nghiên cứu thêm.

và chất gây ung thư. Kết quả cho thấy enzyme chuyển hóa hormone chính (CYP3A4) cũng được cảm ứng bởi CTE. Ở những con chuột khỏe mạnh, có một quy định phản hồi của các hormone. Các tác giả đưa ra giả thuyết rằng sự biểu hiện CYP3A4 được tăng lên trong nghiên cứu này để chuyển hóa các hormone quá mức. Đó có thể là lý do mà sự gia tăng nồng độ progesterone và testosterone không đáng kể. Nếu CTE được sử dụng cho những con chuột có nồng độ hormone sinh dục thấp, hiệu quả có thể rõ ràng hơn.

Độc tính toàn thân và đánh giá an toàn của CTE chưa được nghiên cứu đầy đủ, và nghiên cứu hiện tại của chúng tôi cho thấy CTE liều cao gây phù gan. Kim và cộng sự. (2012) phát hiện ra rằng Cistanche herba gây ra tổn thương tinh hoàn bao gồm giảm số lượng tinh trùng và nồng độ testosterone, làm hỏng cấu trúc mô học của tinh hoàn; tuy nhiên, trong nghiên cứu của chúng tôi, cấu trúc tinh hoàn vẫn bình thường khi kiểm tra mô học (dữ liệu không được hiển thị). Mặc dù liều lượng sử dụng trong nghiên cứu này tương tự như báo cáo của Kim et al. (2012), các loài cây thảo dược là khác nhau. Điều kiện sinh trưởng, mùa thu hoạch và phương pháp chế biến không rõ ràng có thể dẫn đến chất lượng hoặc tác dụng dược lý lâm sàng khác nhau (Wang et al., 2012).

Sự kết luận

Điều trị bằng CTE cho thấy mức độ kích thích tố sinh dục ở chuột đực có thể cảm ứng đáng kể, điều này có thể được đóng góp bởi tác động kích hoạt các biểu hiện CYP11A1 và CYP17A1. Là một loại thuốc truyền thống của Trung Quốc và chất kích thích thực phẩm, C. tubulosa có thể được phát triển thêm thành các loại thuốc mới, thực phẩm chức năng hoặc thực phẩm bổ sung trong tương lai, tuy nhiên, cần đánh giá điều tra một cách có hệ thống về tính an toàn của C. tubulosa và nguy cơ an toàn có thể xảy ra. Sự xem xét.

1 Đại học Thú y, Đại học Northwest A&F, Dương Lăng, Trung Quốc, 2 Đại học Khoa học Sinh học và Kỹ thuật, Đại học Công nghệ Thiểm Tây, Hanzhong, Trung Quốc, và Phòng Khoa học Y sinh, Đại học Guelph, Guelph, Ontario, Canada

Sự nhìn nhận

Các tác giả cảm ơn Giáo sư Jian-Jun Hu đã giúp đỡ trong việc thu thập và xác nhận thân của Cistanche tubulosa.

Khai báo lãi suất

Công trình được hỗ trợ bởi Chương trình Dự án Mở của Phòng thí nghiệm Trọng điểm Nhà nước về Thuốc Tự nhiên, Đại học Dược Trung Quốc (Số SKLNMKF201221), Bộ Giáo dục và Cục Quản lý Nhà nước về Chuyên gia Nước ngoài Dự án '' Giáo viên Nước ngoài '' (Số MS2011XBNL057), Trung Quốc , Chương trình Tuyển dụng Chuyên gia Nước ngoài Cấp cao (GDW20146100228), Trung Quốc và được Hỗ trợ bởi Chương trình Xây dựng Trọng điểm Cơ sở Hợp tác Quốc tế tại Khoa học & Công nghệ, Tỉnh Thiểm Tây (2015SD0018), Trung Quốc.

Người giới thiệu

Bosmann HB, Hales KH, Li X, và cộng sự. (1996). Sự ức chế cấp tính in vivo của testosterone bởi endotoxin song song với việc mất protein điều hòa cấp tính steroidogenic (StAR) trong tế bào Leydig. Nội tiết 137: 4522–5.

Ủy ban biên tập Dược điển Trung Quốc. (2010). Dược điển của Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa. Bắc Kinh, Trung Quốc: Nhà xuất bản Khoa học và Công nghệ Y tế Trung Quốc.

Ge RS, Nghị sĩ cứng rắn. (2007). Quy định của tế bào Leydig trong quá trình phát triển dậy thì. Trong: Payne AH, Hardy MP, eds. Tế bào Leydig trong Sức khỏe và Bệnh tật. Totowa: Humana Press, 55–70.

Guo IC, Hu MC, Chung BC. (2003). Điều hòa phiên mã của CYP11A1. J Khoa học y sinh 10: 593–8.

Hanukoglu L. (1992). Các enzym steroid: Cấu trúc, chức năng và vai trò trong việc điều hòa sinh tổng hợp hormon steroid. J Steroid Biochem Mol Biol 43: 779–804.

He W, Shu XF, Zong GZ, et al. (1996a). Các nghiên cứu về bổ thận tráng dương hỗ trợ tác dụng của Cistanche Desticola YC Ma trước và sau khi bào chế. Chin J Chin Mater Med 21: 534–7.

He W, Zong GZ, Wu GL, Chen MH. (1996b). Nghiên cứu sơ bộ về chức năng giống nội tiết tố nam của Cistanche Desticola. Chin J Chin Mater Med 21: 5.

Hofbauer LC, Khosla S. (1999). Androgen ảnh hưởng đến chuyển hóa xương: Những tiến bộ và tranh cãi gần đây. Eur J Endocrinol 140: 271 - 86.

Jiang B, Cai F, Gao SH, et al. (2012). Cảm ứng cytochrome P 450 3 A bởi Shexiang Baoxin Pill và các thành phần chính của nó. Tương tác Chem Biol 195: 105–13.

Kim SW, Yoo SH, Lee HJ, et al. (2012). Cistanches herba gây độc tế bào viêm tinh hoàn ở chuột đực. Bull Môi trường gây ô nhiễm Toxicol 88: 112–17.

Kosˇir R, Zmrzljak UP, Bele T, và cộng sự. (2012). Biểu hiện theo kiểu Circadian của

steroidogenic cytochromes P450 trong tuyến thượng thận của chuột có sự tham gia của bộ điều biến yếu tố đáp ứng cAMP trong điều hòa biểu sinh của Cyp17a1. FEB J 279: 1584–93.

Li TM, Huang HC, Su CM, et al. (2012). Chiết xuất Cistanche Desticola làm tăng sự hình thành xương trong nguyên bào xương. J Pharm Pharmacol 64: 897–907.

Ortiz de Montellano PRO. (2005). Cấu trúc, Cơ chế và Hóa sinh của Cytochrome P450. New York: Kluwer Academic / Plenum Publishers.

Payne AH, O'Shaughnessy PJ. (1996). Cấu trúc, chức năng và quy định của các enzym steroid trong tế bào Leydig. Trong: Payne AH, Hardy MP, Russell LD, eds. Tế bào Leydig. Vienna: Cache River Press, 259 - 86.

Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, et al. (2009). Tác dụng hạ cholesterol máu của chiết xuất Cistanche tubulosa, một loại thuốc thô truyền thống của Trung Quốc, ở chuột. Am J Chin Med 37: 1125–38.

Wang T, Zhang XY, Xie WY. (2012). Cistanche Desticola YC Ma, '' Nhân sâm sa mạc '': Một đánh giá. Am J Chin Med 40: 1123–41.

Wang LN, Chen J, Yang MH, et al. (2008). Định lượng glycoside phenylethanoid tổng số ở Cistanche Destiola. Northwest Pharm J 23: 67–9.

Xiong WT, Gu L, Wang C, et al. (2013). Tác dụng chống tăng đường huyết và giảm lipid huyết của Cistanche tubulosa trên chuột db / db đái tháo đường týp 2. J Ethnopharmacol 150: 935–45.

Yamazaki H, Shimada T. (1997). Sự hydroxyl hóa progesterone và testosterone bởi các cytochromes P 450 2 C19, 2C9 và 3A4 trong microsome gan người. Arch Biochem Biophys 346: 161–9.