Ibrutinib can thiệp vào khả năng miễn dịch bẩm sinh ở bệnh nhân mắc bệnh bạch cầu lymphocytic mãn tính trong quá trình nhiễm COVID-19
Apr 06, 2023
Hội chứng hô hấp cấp tính nặng do vi-rút corona 2 (SARS-CoV-2) là một loại vi-rút corona mới vào tháng 12 năm 2019 đang lan rộng khắp thế giới gây ra đại dịch Bệnh vi-rút corona 2019 (COVID-19). 1 COVID-19 được đặc trưng bởi sự kích hoạt nghiêm trọng của phản ứng viêm được cho là nguyên nhân chính dẫn đến mức độ nghiêm trọng của bệnh và tử vong. Phản ứng miễn dịch đối với nhiễm COVID-19 được cấu thành theo hai bước: trong giai đoạn ủ bệnh, phản ứng miễn dịch thích ứng có thể kiểm soát sự sinh sôi nảy nở của vi rút, ngăn chặn sự tiến triển của bệnh.
Việc sản xuất và hoạt động của interferon loại I (IFN-I) là cơ chế chính của phản ứng kháng vi-rút tế bào miễn dịch bẩm sinh và nó cũng là một trong những lĩnh vực nghiên cứu cốt lõi của khả năng miễn dịch bẩm sinh. Trong quá trình đồng tiến hóa lâu dài với vật chủ, vi-rút đã phát triển một cơ chế hoàn hảo để ức chế sản xuất IFN-I của vật chủ, khéo léo trốn tránh sự thanh thải miễn dịch và gây nhiễm trùng dai dẳng. Khám phá cách vi-rút tấn công hệ thống miễn dịch bẩm sinh của tế bào chủ giúp làm sáng tỏ cơ chế phân tử của khả năng miễn dịch bẩm sinh, đồng thời cung cấp manh mối cho việc nghiên cứu các mục tiêu của thuốc kháng vi-rút. Ngoài những điều này, chúng ta cũng cần cải thiện khả năng miễn dịch của mình. Ngoài chế độ ăn uống lành mạnh, chúng tôi cũng phát hiện ra rằng Cistanche có thể tăng cường khả năng miễn dịch. Polysacarit Cistanche là cơ sở vật chất để Cistanche đóng vai trò điều hòa miễn dịch. Nó có thể thúc đẩy sự gia tăng của tế bào lympho, cải thiện chức năng miễn dịch của cơ thể và kích hoạt các tế bào miễn dịch. Tăng cường miễn dịch tế bào T, đồng thời cải thiện rõ rệt chức năng thực bào và bài tiết của đại thực bào, từ đó hoạt hóa đại thực bào và điều hòa hoạt động miễn dịch.
Trong giai đoạn sau, phản ứng viêm không kiểm soát được có thể xác định các biến chứng lâm sàng chính. Phản ứng này, được gọi là cơn bão cytokine, được gây ra bởi sự kích hoạt của tế bào T, tế bào giết người tự nhiên (NK), bạch cầu đơn nhân/đại thực bào, bạch cầu trung tính và bất kỳ tế bào nào xâm nhập vào chính vi-rút hoặc làm suy giảm các sản phẩm vi-rút.
Trong cơn bão cytokine TNF- , IFN- , IL-1b, IL-6, IL-12 và IL-17 có tầm quan trọng đặc biệt. 2 Do phản ứng bất thường của các tế bào miễn dịch đối với nhiễm vi-rút, hội chứng suy hô hấp cấp tính dường như là sự kiện cấp tính và gây tử vong nhất của bệnh này. COVID-19 đặt ra một số thách thức đối với việc quản lý bệnh nhân có khối u ác tính về huyết học vì bệnh nhân có vẻ dễ bị nhiễm COVID-19. 3 Bệnh bạch cầu lymphocytic mãn tính (CLL) là bệnh bạch cầu phổ biến nhất ở các nước phương Tây, chủ yếu ảnh hưởng đến người lớn tuổi. CLL được đặc trưng bởi một số biến chứng lâm sàng liên quan đến sự thay đổi trong hệ thống miễn dịch. Khuynh hướng nhiễm trùng ở bệnh nhân CLL bao gồm cả tình trạng suy giảm miễn dịch liên quan đến chính bệnh bạch cầu và kết quả ức chế miễn dịch tích lũy do điều trị gây ra.
Với bằng chứng này, bệnh nhân CLL có thể đại diện cho nhóm có nguy cơ cao nhiễm SARSCoV-2 và kết quả của những bệnh nhân cần nhập viện là kém với tỷ lệ tử vong cao. 4 Theo giả định của các nghiên cứu khác nhau, thuốc ức chế BTK (BTKi), đặc biệt là ibrutinib, có thể có tác dụng bảo vệ chống lại tổn thương phổi ở bệnh nhân mắc COVID-19, làm giảm tình trạng viêm quá mức. 5,6 Một số nghiên cứu hồi cứu khác nhau, cụ thể là một nghiên cứu quan sát được thực hiện ở Châu Âu đã xác định việc điều trị bằng ibrutinib hoặc BTKi là yếu tố liên quan đến kết quả tốt hơn trong thời gian điều trị COVID-19, với thời gian nhập viện ngắn hơn của bệnh nhân CLL.
Ngược lại, một nghiên cứu tương tự được thực hiện ở Mỹ đã không xác nhận quan sát này. Điều quan trọng là việc điều trị BTKi đã bị gián đoạn khi bắt đầu mắc COVID-19 trong phần lớn các trường hợp. 4,7 Theo hướng này, mặc dù việc sử dụng acalabrutinib ngoài hướng dẫn ở những bệnh nhân mắc COVID-19 nặng đã chứng minh giảm phản ứng miễn dịch viêm nhiễm của vật chủ và cải thiện kết quả lâm sàng, thử nghiệm CALAVI giai đoạn II đối với acalabrutinib ở những bệnh nhân nhập viện với các triệu chứng hô hấp không đáp ứng tiêu chí hiệu quả chính là tăng tỷ lệ bệnh nhân còn sống và không bị suy hô hấp. 8 Ibrutinib thực hiện tác dụng điều hòa miễn dịch, cả về miễn dịch bẩm sinh và miễn dịch thích nghi, duy trì sự phân cực Th1 và đồng thời, sự phân cực chống viêm của đại thực bào. 9,10.
Trong nghiên cứu hiện tại, chúng tôi đã kiểm tra sự biến đổi của phương pháp điều trị bằng ibrutinib đối với sự giải phóng cytokine bởi các tế bào T và bạch cầu đơn nhân ở bệnh nhân CLL trong quá trình nhiễm SARSCoV-2.
Các mẫu máu của bệnh nhân phù hợp với tiêu chuẩn chẩn đoán CLL được lấy từ Đơn vị Huyết học của Bệnh viện Modena, Ý với một giao thức được phê duyệt bởi Hội đồng Đánh giá Thể chế địa phương và tuân thủ các nguyên lý của Tuyên bố Helsinki. Tế bào đơn nhân máu ngoại vi (PBMC) được phân lập và sử dụng tươi hoặc bảo quản lạnh cho đến khi sử dụng. Nghiên cứu này được thực hiện trên các mẫu phân lập từ bệnh nhân CLL chưa bị nhiễm SARS-CoV-2. PBMC được phân lập từ các bệnh nhân CLL được điều trị bằng ibrutinib hoặc phương tiện sau đó được kích thích bằng SARS-CoV-2 Peptide Pools Protein S, S1, S plus , N và M (Miltenyi Biotech) và được phân tích bằng xét nghiệm bài tiết cytokine (CSA) cho TNF- và IFN- (Công nghệ sinh học Miltenyi).
Để xác định quần thể tế bào đơn nhân và tế bào T, PBMC được nhuộm bằng kháng thể CD14 và CD3 tương ứng. Đối với phân tích ex vivo, PBMC từ bệnh nhân CLL trước và sau 3 tháng điều trị bằng ibrutinib được thu thập và bảo quản trong nitơ lỏng. PBMC được kích thích bằng SARS-CoV-2 Peptide Pools và bạch cầu đơn nhân hoặc tế bào T được xác định bằng cách nhuộm với CD14 hoặc CD3. Sự bài tiết TNF- và IFN- đã được phân tích bởi CSA. Môi trường đã ổn định được thu thập bằng cách ly tâm ở tốc độ 1.600 vòng/phút trong 10 phút và bảo quản ở -20 độ trước khi thử nghiệm. Mức IL-6 được xác định bằng bộ xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym của con người có độ nhạy cao (Abcam). Tất cả dữ liệu được trình bày dưới dạng trung bình ± sai số chuẩn của giá trị trung bình. Thử nghiệm xếp hạng có chữ ký cặp đối sánh t-test hoặc Wilcoxon đã được sử dụng để xác định ý nghĩa thống kê (GraphPad v6, GraphPad Software Inc).
CLL thường được đặc trưng bởi sự rối loạn của hệ thống miễn dịch, liên quan đến cả phản ứng miễn dịch bẩm sinh và thích nghi. Đầu tiên, chúng tôi đã kiểm tra tác động của việc lây nhiễm SARS-CoV-2 trong ống nghiệm đối với khả năng miễn dịch thích nghi và bẩm sinh trong CLL được thu thập từ những bệnh nhân chưa được điều trị. Như được hiển thị trong Hình 1, sau khi kích thích bằng peptide-2 của SARS-CoV, chúng tôi đã đo được sự giải phóng đáng kể và mạnh mẽ của các cytokine tiền viêm bởi cả CD3 cộng với tế bào T và CD14 cộng với bạch cầu đơn nhân được đặc trưng bởi sự gia tăng đáng kể của TNF- và IFN- bài tiết (*P<0.05; **P<0.01).
Sau đó, chúng tôi đã phân tích xem việc điều trị bằng ibrutinib có thể thay đổi phản ứng miễn dịch trong quá trình lây nhiễm hay không. Ibrutinib nhắm mục tiêu các tế bào T bằng cách liên kết không thể phục hồi họ Tec kinase, ITK, nghiêng về kiểu hình Th1 và ảnh hưởng đến khả năng miễn dịch Th2. 9 ITK có liên quan nghiêm trọng đến phản ứng miễn dịch qua trung gian tế bào T và sự cạn kiệt biểu hiện của nó làm suy yếu sự nhân lên của vi rút cúm. 11 Như được minh họa trong Hình 1A và B và Hình bổ sung trực tuyến S1, ibrutinib không xác định được sự thay đổi đáng kể trong quá trình bài tiết TNF- dù có hay không có sự kích thích với các peptide-2 SARS-CoV (P= không đáng kể [ns]), ngoài ra, sự tiết IFN- , không bị thay đổi bởi ibrutinib và sau khi kích thích, chúng tôi đã phát hiện ra sự gia tăng nhẹ (*P<0.05). Ibrutinib targets BTK in CLL-derived macrophages (nurse-like cells [NLC]) potentiating its immunosuppressive M2-skewed features. 10 BTK inhibition hampered the inflammatory response of NLC during A. fumigatus infection. 12 According to this evidence, we aimed to characterize the response of CLL monocytes to SARS-CoV-2 in the presence of ibrutinib.
Như đã báo cáo trong Hình 1C và D và Hình bổ sung trực tuyến S1, ibrutinib làm suy yếu mạnh quá trình giải phóng TNF- và IFN- bởi các bạch cầu đơn nhân CLL do SARS-CoV gây ra-2 (*P<0.05). IL-6 is one of the key mediators of inflammation and cytokine storm in COVID-19 patients. Therefore, we measured the amount of secreted IL-6 in conditioned media collected after stimulation with sSARS-CoV-2 peptides either in the presence or absence of ibrutinib treatment. As shown in Figure 1E, SARSCoV-2 caused an increased release of IL-6 in the conditioned media (*P<0.05) that was significantly mitigated by BTK inhibition (*P<0.05).
Hơn nữa, chúng tôi đã lên kế hoạch phân tích các mẫu phù hợp ex vivo được phân lập từ bệnh nhân CLL trước khi điều trị và sau 3 tháng điều trị bằng ibrutinib để so sánh phản ứng của các tế bào CD3 plus và CD14 plus với SARS-CoV-2. Dữ liệu của chúng tôi không cho thấy bất kỳ sửa đổi đáng kể nào trong việc giải phóng các cytokine tiền viêm do CD3 trong quá trình điều trị bằng ibrutinib (Hình 2A và B; Hình S2 bổ sung trực tuyến; P=ns). Ngược lại, sự bài tiết TNF- và IFN- bởi bạch cầu đơn nhân đo được trong 3 tháng đầu điều trị đã giảm đáng kể so với tình trạng trước điều trị (Hình 2C và D; Hình bổ sung trực tuyến S2; *P<0.05).
Việc tiếp tục điều trị bằng Ibrutinib ở những bệnh nhân CLL bị ảnh hưởng bởi COVID-19 đang gây ra một cuộc tranh luận khoa học và lâm sàng quan trọng về cơ hội duy trì hoặc ngừng điều trị khi có nhiễm SARS-CoV-2. Trong trường hợp này, một số lo ngại liên quan đến bằng chứng cho thấy hoạt động ức chế miễn dịch của ibrutinib có liên quan đến sự xuất hiện của nhiễm nấm xâm lấn khởi phát sớm ở những bệnh nhân được điều trị.
Vì lý do này, việc lựa chọn ngừng ibrutinib có thể liên quan đến khả năng tăng nguy cơ nhiễm trùng thứ phát và suy giảm miễn dịch dịch thể. 13 Kết quả của chúng tôi chứng minh cách ibrutinib có thể có tác dụng bảo vệ đối với COVID-19 ở bệnh nhân CLL bằng cách hạn chế cơn bão cytokine ngăn ngừa tổn thương phổi. Một mặt, ibrutinib có thể ảnh hưởng đến chức năng của tế bào T, bằng cách chuyển các tế bào T từ Th2-thống trị thành Th1 và CD8 cộng với quần thể gây độc tế bào thúc đẩy miễn dịch Th1.
Mặt khác, BTK có liên quan đến việc điều chỉnh cam kết của dòng đại thực bào đối với sự phân cực của M1 và ibrutinib có thể nghiêng về kiểu hình ức chế miễn dịch cũng như phản ứng với các kích thích tiền viêm như nhiễm nấm. 12 Sự ức chế BTK, được thể hiện bởi các tế bào miễn dịch myeloid, ảnh hưởng đến việc tạo ra các cytokine gây viêm thông qua con đường NFkB và ở chuột khi tiêm RNA can thiệp nhỏ BTK vào khí quản giúp bảo vệ mạnh mẽ chống lại tổn thương phổi cấp tính do nhiễm trùng huyết với việc giảm đáng kể phù phổi, các cytokine gây viêm và thâm nhiễm bạch cầu trung tính trong các mô phổi. 14 Trong bối cảnh nhiễm cúm A, ibrutinib giảm nhẹ tình trạng viêm và cải thiện khả năng giải quyết tình trạng nhiễm trùng. 15 Kết quả của chúng tôi dường như hỗ trợ mạnh mẽ cho hành động bảo vệ của ibrutinib làm giảm thiểu cơn bão cytokine đáng sợ, duy trì gợi ý rằng không có lý do rõ ràng nào để ngừng dùng ibrutinib sớm ở những bệnh nhân này như đề xuất gần đây. 13
Dựa trên những quan sát này, vì ibrutinib dường như không làm trầm trọng thêm-19-phản ứng miễn dịch đặc hiệu với COVID, nên nghiên cứu của chúng tôi cung cấp cơ sở sinh học hợp lý cho việc tiếp tục dùng BTKi ở những bệnh nhân CLL phát triển COVID-19. Đáng chú ý, tổng quan tốt hơn về khả năng sử dụng BTKi chống lại COVID-19 đang được đánh giá trong các thử nghiệm lâm sàng (Clinicaltrials.gov Mã định danh: NCT04439006, NCT04375397) được tiến hành ở những bệnh nhân không bị ảnh hưởng bởi khối u ác tính tế bào B.
Người giới thiệu
1.Zhou P, Yang XL, Wang XG, et al. Một đợt bùng phát bệnh viêm phổi liên quan đến một loại coronavirus mới có thể có nguồn gốc từ dơi. Thiên nhiên. 2020; 579(7798):270-273.
2. Riva G, Castillo V, Tagliafico E, Trenti T, Comoli P, Luppi M. COVID-19: không chỉ là một cơn bão cytokine. Chăm sóc chí mạng. 2020;24(1):549.
3. Passamonti F, Cattaneo C, Arcaini L, et al. Các đặc điểm lâm sàng và các yếu tố rủi ro liên quan đến mức độ nghiêm trọng của COVID-19 ở những bệnh nhân có khối u ác tính về huyết học ở Ý: một nghiên cứu đoàn hệ hồi cứu, đa trung tâm. Lancet Hematol. 2020;7(10):e737-e745.
4. Mato AR, Roeker LE, Lamanna N, et al. Kết quả của COVID-19 ở bệnh nhân mắc CLL: trải nghiệm quốc tế đa trung tâm. Máu. 2020;136(10):1134-1143.
5.Treon SP, Castillo JJ, Skarbnik AP, et al. Chất ức chế BTK ibrutinib có thể bảo vệ chống lại tổn thương phổi ở bệnh nhân-19-bị nhiễm COVID. Máu. 2020;135(21):1912-1915.
6. Thibaud S, Tremblay D, Bhalla S, Zimmerman B, Sigel K, Gabrilove J. Vai trò bảo vệ của thuốc ức chế tyrosine kinase Bruton ở bệnh nhân mắc bệnh bạch cầu lymphocytic mãn tính và COVID-19. Anh J Hamatol. 2020;190(2):e73-e76.
7. Scarfò L, Chatzikonstantinou T, Rigolin GM, et al. Mức độ nghiêm trọng và tỷ lệ tử vong của COVID-19 ở bệnh nhân mắc bệnh bạch cầu lymphocytic mãn tính: một nghiên cứu chung của ERIC, Sáng kiến nghiên cứu châu Âu về CLL và Cơ sở CLL. Bệnh bạch cầu. 2020;34(9):2354-2363.
8. Roschewski M, Lionakis MS, Sharman JP, et al. Ức chế Bruton tyrosine kinase ở bệnh nhân mắc COVID nặng-19. Khoa học miễn dịch. 2020;5(48):eabd0110.
9. Dubovsky JA, Beckwith KA, Natarajan G, et al. Ibrutinib là chất ức chế phân tử không thể đảo ngược của ITK tạo ra áp suất chọn lọc Th1-trong tế bào lympho T. Máu. 2013;122(15):2539-2549.
10. Fiorcari S, Maffei R, Audrito V, et al. Ibrutinib điều chỉnh chức năng của quần thể bạch cầu đơn nhân/đại thực bào trong bệnh bạch cầu lymphocytic mãn tính. mục tiêu. 2016;7(40):65968–65981.
11. Fan K, Jia Y, Wang S, et al. Vai trò của tín hiệu Itk trong sự tương tác giữa vi rút cúm A và tế bào T. Tướng J Virol. 2012;93(Pt 5):987- 997.
12. Fiorcari S, Maffei R, Vallerini D, et al. Ức chế BTK làm suy yếu phản ứng bẩm sinh chống lại nhiễm nấm ở bệnh nhân mắc bệnh bạch cầu lymphocytic mãn tính. Miễn dịch phía trước. 2020;11:2158.
13. Chong EA, Roeker LE, Shadman M, Davids MS, Schuster SJ, Mato AR. Thuốc ức chế BTK ở bệnh nhân ung thư mắc COVID-19: "Người chiến thắng sẽ là người kiểm soát được sự hỗn loạn đó" (Napoleon Bonaparte). Ung thư lâm sàng Res. 2020;26(14):3514-3516.
14. Zhou P, Ma B, Xu S, et al. Knockdown tyrosine kinase của Burton giúp bảo vệ mạnh mẽ chống lại tổn thương phổi cấp tính do nhiễm trùng huyết. Sinh hóa tế bào. 2014;70(2):1265-1275.
15. Florence JM, Krupa A, Booshehri LM, Davis SA, Matthay MA, Kurdowska AK. Ức chế tyrosine kinase của Bruton cứu chuột khỏi tổn thương phổi cấp tính do cúm gây chết người. Có phải tế bào phổi J Physiol Mol Physiol không? 2018;315(1):L52-L58.
For more information:1950477648nn@gmail.com
