Điều tra lên men vi sinh vật và hoạt động sinh học trong quá trình lên men vi khuẩn composite ⅱ
Oct 28, 2024
Chương 2 Đánh giá cảm giác xác định tỷ lệ tối ưu của các chủng.
Trong nghiên cứu này, táo được sử dụng làm nguyên liệu thô và Aspergillus oryzae, men, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus và Lactobacillus bulgaricus đã được thêm vào các tỷ lệ khác nhau, và hỗn hợp và lên men để thu được enzyme. Các enzyme được đánh giá cảm giác và tỷ lệ tối ưu của bốn chủng được xác định theo điểm số, để có được các enzyme táo chất lượng cao.
Các loại thảo mộc mới với sức mạnh chống oxy hóa nhiều hơn so với quá trình lên men của vi khuẩn
2.1 Vật liệu và Phương pháp
2.1.1 Vật liệu thử nghiệm
Aspergillus oryzae, men, streptococcus thermophilus và lactobacillus bulgaricus, được lưu trữ trong phòng thí nghiệm này; Táo, và Fuji màu đỏ hạng nhất được mua từ thị trường.
2.1.2 Môi trường nuôi cấy
(1) Phương tiện nuôi cấy Aspergillus oryzae
Môi trường khoai tây (PDA): 20% khoai tây 1L, glucose 20g, kh2po 4 3 G, MGSO4 · 7H2O 1.5G, Vitanib B1 Dấu vết 8mg, Agar 20g, pH tự nhiên, nồi hấp ở 115 độ trong 25min. .
(3) Môi trường nuôi cấy liên cầu khuẩn Thermophilic
Trích xuất men 1%, glucose 1,5%, chiết xuất thịt bò 0. 3%, peptone 0. 5%, caco 3 1.
(4) Phương tiện nuôi cấy Lactobacillus Bulgaria
Trích xuất men 1%, glucose 1,5%, chiết xuất thịt bò 0. 3%, peptone 0. 5%, caco 3 1.
2.1.3 Dụng cụ chính
Các công cụ chính và các mô hình của chúng được sử dụng trong thí nghiệm được thể hiện trong Bảng 2.1.
Tab.2.1 Tên, mô hình và nhà sản xuất của các công cụ chính
Bảy người đã được chọn làm đại diện của nhóm đánh giá. Trong cùng một môi trường và điều kiện, họ đã tính điểm đánh giá cảm giác của enzyme, bao gồm màu sắc, mùi và vị của enzyme. Điểm số được chia thành bốn cấp: rất tốt ở {{0}} điểm (bao gồm 8 0), tương đối tốt ở 70-80 điểm (bao gồm 7 {{27}) 6 0 điểm. Tổng số điểm là 100 điểm, đạt được bằng cách thêm điểm của ba loại. Tỷ lệ cụ thể là: Màu sắc chiếm 30%, Mùi chiếm 25%và hương vị chiếm 45%[51]. (7) Ảnh hưởng của các tỷ lệ khác nhau của Aspergillus oryzae tiêm đối với việc đánh giá cảm giác của các enzyme. Nói chung, lượng tiêm tĩnh mạch của Streptococcus và Lactobacillus Bulgaria trong sữa chua là 2%-3%. Khi tỷ lệ của các chủng là 1: 1 hoặc 2: 1, chất lượng và hương vị của sữa lên men là tốt nhất. Tỷ lệ thường được sử dụng là 1: 1 [52]. Thí nghiệm đã chọn lượng nấm men, Streptococcus và Lactobacillus của Bulgaria là 3,0%. Không thay đổi các điều kiện quy trình khác, lượng Aspergillus oryzae được thay đổi thành 0,5%, 1,0%, 1,5%, 2,0%, 2,5%và 3,0%, tương ứng. Sau 30 ngày lên men, chất lỏng lên men có chứa bột giấy và tất cả các enzyme được lấy mẫu và lọc để thu được phần nổi của enzyme. Chất nổi trên bề mặt enzyme được lấy làm mẫu thử nghiệm để đánh giá cảm giác.
. Không thay đổi các điều kiện quá trình khác, lượng nấm men được thay đổi thành 0. 5%, 1. 0%, 1,5%, 2. 0%, 2,5%và 3. Sau 30 ngày lên men, chất lỏng lên men có chứa bột giấy và tất cả các enzyme được lấy mẫu và lọc để thu được phần nổi của enzyme. Chất nổi trên bề mặt enzyme được lấy làm mẫu thử nghiệm để đánh giá cảm giác.
. Không thay đổi các điều kiện quá trình khác, lượng streptococcus nhiệt được thay đổi thành 0. 5%, 1. {{1 0}}%, 1,5%, 2. Sau 3 0 ngày lên men, các mẫu được lấy để thu được chất lỏng lên men chứa bột giấy và tất cả các enzyme, và chất nổi trên bề mặt enzyme được lọc. Chất nổi trên bề mặt enzyme được lấy làm mẫu thử nghiệm để đánh giá cảm giác. . Streptococcus là 1,5%. Không thay đổi các điều kiện quy trình khác, lượng tiêm của Lactobacillus Bulgaricus đã được thay đổi thành 0,5%, 1,0%, 1,5%, 2,0%, 2,5%và 3,0%, tương ứng. Sau 30 ngày lên men, chất lỏng lên men có chứa bột giấy và tất cả các enzyme được lấy mẫu và lọc để thu được phần nổi của enzyme. Chất nổi trên bề mặt enzyme được lấy làm mẫu thử nghiệm để đánh giá cảm giác.
(11) Thiết kế trực giao tỷ lệ biến dạng vi khuẩn
Dựa trên thí nghiệm yếu tố duy nhất, bốn yếu tố đã được chọn: Aspergillus oryzae lượng tiêm (A), lượng tiêm nấm men (B), lượng nhiễm trùng streptococcus (C) và lượng lactobacillus Bulgaria (D). Mỗi yếu tố được chọn ở 3 cấp độ cho thí nghiệm trực giao.
Hình.2.1 Sơ đồ hình thái tăng trưởng vi khuẩn trên tấm hoặc nghiêng
Tab.2.2 Đánh giá cảm giác của quá trình lên men chủng đơn sau một tháng.
Từ các kết quả thử nghiệm trong Bảng 2.2, chúng ta có thể thấy rằng các chủng khác nhau rất tốt để cải thiện chất lượng của chất lỏng enzyme, nhưng tác dụng của chúng là khác nhau. Nếu chúng ta trộn và lên men bốn chủng, liệu nó có thuận lợi hơn để thu được các enzyme chất lượng cao không? Vì vậy, chúng tôi đã làm các nghiên cứu sau đây.
2.2.3 Ảnh hưởng của Aspergillus oryzae khác nhau về đánh giá cảm giác enzyme
Lượng tiêm chủng của nấm men, streptococcus nhiệt và Lactobacillus Bulgaria đều là 3. 0%. Không thay đổi các điều kiện quy trình khác, lượng Aspergillus oryzae đã được thay đổi. Sau 30 ngày lên men, điểm đánh giá cảm giác của chất nổi trên bề mặt enzyme được thể hiện trong Hình 2.2.
Hình.2.2 Ảnh hưởng của đường cong của Aspergillus oryzae số lượng tiêm đối với đánh giá cảm giác.
Như được hiển thị trong Hình 2.2, khi lượng nấm men, streptococcus và lactobacillus của Bulgaria là 3. số lượng tiêm chủng. Khi lượng tiêm chủng là 2. 0%~ 3. 0%, điểm đánh giá cảm giác cho thấy xu hướng giảm. Do đó, thí nghiệm cho thấy rằng khi số lượng tiêm chủng Aspergillus oryzae là 2. 0%, điểm đánh giá cảm giác là cao nhất, và màu sắc, hương vị và mùi của enzyme là cao nhất.
2.2.4 Ảnh hưởng của lượng nấm men khác nhau đối với đánh giá cảm giác của enzyme
Số lượng tiêm chủng của Aspergillus oryzae là 2. Không thay đổi các điều kiện quy trình khác, lượng nấm men đã được thay đổi. Điểm đánh giá cảm giác của chất nổi trên bề mặt enzyme sau 30 ngày lên men được thể hiện trong Hình 2.3.
Hình.2.3 Ảnh hưởng của đường cong của lượng nấm men đến đánh giá cảm giác.
Như được hiển thị trong Hình 2.3, khi số lượng tiêm chủng Aspergillus oryzae là 2. Điểm đánh giá cảm giác enzyme tăng theo mức tăng của lượng tiêm chủng và khi lượng tiêm chủng nằm trong khoảng 1. 0% và 2. 0%, điểm đánh giá cảm giác cho thấy xu hướng giảm. Sau khi lượng tiêm chủng đạt 2. 0%, có một sự phục hồi ngắn, và sau đó nó giảm. Do đó, thí nghiệm cho thấy rằng khi lượng nấm men là 1. 0%, điểm đánh giá cảm giác là cao nhất và enzyme có đánh giá toàn diện về màu sắc, hương vị và mùi cao nhất.
2.2.5 Ảnh hưởng của các loại nhiệt khác nhau
Streptococcus tiêm vào đánh giá cảm giác của enzyme số lượng tiêm chủng của Aspergillus oryzae là 2. 0%, lượng nấm men là 1. {3}}}%. Không thay đổi các điều kiện quy trình khác, lượng liên cầu khuẩn nhiệt được thay đổi. Điểm đánh giá cảm giác của chất nổi trên bề mặt enzyme sau 30 ngày lên men được thể hiện trong Hình 2.4.
Hình.2.4 Ảnh hưởng của đường cong của Streptococcus thermophilus số lượng trong đánh giá cảm giác.
Như được hiển thị trong Hình 2.4, khi lượng tiêm của Aspergillus oryzae là 2. 0}%, lượng nấm men là 1. Điểm đánh giá cảm giác enzyme càng cao, khi lượng tiêm chủng nằm trong khoảng từ 1,5% đến 3. 0%, điểm đánh giá cảm giác cho thấy xu hướng giảm chậm với sự gia tăng của lượng tiêm chủng. Do đó, thí nghiệm đã kết luận rằng khi lượng streptococcus nhiệt là 1,5%, điểm đánh giá cảm giác là cao nhất và đánh giá toàn diện về màu sắc, hương vị và mùi của enzyme là cao nhất.
Hình.2.5 Ảnh hưởng của đường cong của Lactobacillus Bulgaricus số lượng trong đánh giá cảm giác.
Như được hiển thị trong Hình.2.5, khi lượng tiêm của Aspergillus oryzae là 2. 0%, lượng nấm men là 1. Điểm đánh giá cảm giác của enzyme càng cao, khi lượng tiêm chủng nằm trong khoảng từ 1. 0}% và 3. Do đó, thí nghiệm cho thấy rằng khi số lượng tiêm lactobacillus bulgaricus là 1. 0%, điểm đánh giá cảm giác là cao nhất và đánh giá toàn diện về màu sắc, hương vị và mùi của enzyme là cao nhất.
2.2.7 Thiết kế trực giao tỷ lệ biến dạng
Để cuối cùng xác định công thức biến dạng tối ưu cho việc sản xuất các enzyme vi sinh vật bằng cách lên men chủng hỗn hợp, lượng tiêm của Aspergillus oryzae (A), lượng nấm men (B), lượng máu streptococcus nhiệt (C). Ba điều kiện mức hợp lý đã được tìm thấy theo thí nghiệm yếu tố duy nhất và bảng thử nghiệm trực giao đã được thiết kế. Các điều kiện môi trường khác được giữ không thay đổi và điểm số toàn diện của đánh giá cảm giác trên được sử dụng làm chỉ số tốt hoặc xấu để cuối cùng xác định công thức biến dạng tối ưu của enzyme vi sinh vật. Bảng cấp yếu tố được thiết kế cho thí nghiệm trực giao được thể hiện trong Bảng 2.3.
Như thể hiện trong Bảng 2.4, yếu tố chính ảnh hưởng đến việc đánh giá cảm giác của các enzyme là lượng tiêm của Aspergillus oryzae, tiếp theo là Streptococcus thermophilus, sau đó là Lactobacillus bulgaricus, và cuối cùng là men. Khi lượng tiêm của Aspergillus oryzae là 1,5%, lượng nấm men là 1. 0%, lượng tiêm của streptococcus thermophilus là 1. Được sản xuất bởi quá trình lên men hỗn hợp là cao nhất.
2.2.8 Kiểm tra xác minh
Theo kết quả phân tích của thử nghiệm trực giao, thử nghiệm xác minh đã được thực hiện. Lượng tiêm của Aspergillus oryzae là 1,5%, lượng nấm men là 1. Các điều kiện quá trình khác vẫn không thay đổi. Điểm đánh giá cảm giác của chất lỏng enzyme thu được là 92,3, tốt hơn bất kỳ nhóm nào trong thử nghiệm trên. Do đó, sự kết hợp trên được sử dụng làm tỷ lệ tốt nhất của tác nhân lên men.
Các loại thảo mộc mới với sức mạnh chống oxy hóa nhiều hơn so với quá trình lên men của vi khuẩn
2.3 Tóm tắt chương này
Chương này nghiên cứu tỷ lệ tối ưu của các chủng kết hợp để sản xuất các enzyme vi sinh vật bằng cách lên men hỗn hợp. Lấy điểm đánh giá cảm giác làm chỉ số, tỷ lệ có thể đạt được điểm đánh giá cảm giác cao nhất được chọn.
Đầu tiên, một thí nghiệm tiêm chủng duy nhất đã được tiến hành. Sau khi enzyme táo được lên men tự nhiên trong một tháng, nó được khử trùng bởi nhiệt độ cao và áp suất cao, và sau đó được tiêm Aspergillus oryzae, men, streptococcus nhiệt và lactobacillus của Bulgaria. Các kết quả thí nghiệm cho thấy rằng việc đánh giá cảm giác của enzyme cao hơn so với nhóm kiểm soát trống khi bốn chủng này được tiêm một mình. Thứ hai, thông qua một thí nghiệm yếu tố duy nhất, lượng tiêm của một trong các chủng đã được thay đổi mà không thay đổi các điều kiện quá trình khác và mối quan hệ giữa bốn chủng có số lượng tiêm chủng khác nhau và đánh giá cảm giác trong các điều kiện yếu tố đơn lẻ. Cuối cùng, dựa trên kết quả của thí nghiệm yếu tố duy nhất, một thí nghiệm trực giao được thiết kế để có được tỷ lệ biến dạng tối ưu, nghĩa là khi mức độ tiêm của Aspergillus oryzae là 1,5%, lượng nấm men là 1. Lactobacillus Bulgaricus là 1. 0%, điểm đánh giá cảm giác của enzyme là cao nhất, với tối đa 92,3 điểm.
