Chiết xuất từ ​​lá nhãn Lantana Camara thể hiện đặc tính chống lão hóa trong Drosophila Melanogaster: Nghiên cứu về tỷ lệ sống sót và tuổi thọ

Xin vui lòng liên hệoscar.xiao@wecistanche.comđể biết thêm thông tin

trừu tượng

Trong bài viết này, chúng tôi nhằm mục đích điều tra hoạt động chống lão hóa của chiết xuất từ ​​lá ethanolic Lantana camara trong Drosophila melanogaster: sự tồn tại và tuổi thọ (tuổi thọ). , và được chiết bằng phương pháp maceration sử dụng etanol làm dung môi. Kiểm tra hóa chất thực vật đã được thực hiện. LCso 168- giờ được xác định bằng cách cho ruồi giấm tiếp xúc với nồng độ từ 5 đến 5000 mg / 10 g chế độ ăn trong 7- ngày. Các nghiên cứu về khả năng sống sót và tuổi thọ trong 28 ngày được thực hiện bằng cách cho ruồi giấm 1-3 ngày tuổi sử dụng chiết xuất lá ethanolic ở mức 5,10 và 20 mg / 10 g. Mỗi nồng độ được lặp lại bốn lần với 50 con ruồi giấm, tỷ lệ xuất hiện của những con ruồi giấm non từ những quả trứng được đẻ ra bởi các chất chiết xuất từ ​​lá L.camara cũng được thực hiện. Tổng sản lượng khai thác được xác định là 18 phần trăm. Phân tích phytochemical cho thấy sự hiện diện của alkaloid, Flavonoid, Phenol, steroid, glycoside tim và carbohydrate. 168- giờ LCso của L. camara cũng được xác định là 1135 mg / 10 g chế độ ăn uống. Camara kéo dài đáng kể (P<0.05)survival rate="" and="" extended=""><0.05)d.melanogaster life="" span="" compared="" with="" control.l.camara="" significantly="" increased=""><().05) emergence="" rate="" of="" young="" fruit="" flies="" from="" eggs="" laid="" by="" fruit="" flies="" administered="" l.="" camara="" ethanolic="" leaves="" extracts.="" from="" the="" experimental="" results,it="" can="" be="" concluded="" that="" the="" ethanol="" extract="" of="" l.camara="" leaves="" extended="" the="" life="" span="" of="" d.melanogaster="" at="" these="" concentrations.="" due="" to="" similarities="" of="" conserved="" genes="" between="" humans="" and="" fruit="" flies,="" the="" use="" of="" l.camara="" ethanolic="" leaves="" extract="" at="" these="" concentrations="" is="" safe="" and="" may="" be="" recommended="" as="" herbal="" medicine="" in="">

Từ khóa:tỷ lệ sống sót, tuổi thọ, 168- giờ LCso, chống lão hóa, L.camara

Giới thiệu

Lão hóa là một quá trình tự nhiên ở tất cả các sinh vật nhưng tốc độ của nó bị ảnh hưởng bởi các yếu tố môi trường độc hại, sự hấp thụ và đồng hóa của các chất nguy hiểm và bệnh tật [1]. Da là mô bị ảnh hưởng nhiều nhất bởi quá trình lão hóa ở con người; nếp nhăn của da có thể nhìn thấy trong quá trình lão hóa tự nhiên [1]. Gốc tự do là một trong những công cụ yếu tố và chi phí hợp lý của nó và bảo trì trong phòng thí nghiệm [3] .D. melanogaster đã được sử dụng như một mô hình trong nghiên cứu về sự lão hóa [1,2]. Nghiên cứu về tuổi thọ là thước đo quan trọng của tốc độ lão hóa ở drosophila do thời gian thế hệ nhanh và các tế bào sau phân bào đã làm cho loài này trở thành một mô hình tốt cho nghiên cứu lão hóa [4].

Vui lòng bấm vào đây để biết thêm

Lantana Camara còn được gọi là "lá cờ Tây Ban Nha hoặc WestIndian Lantana"; và đôi khi được biết đến với cái tên "Red Sage." Camara là một loại "cỏ dại trang trí" với lá thơm, hoa màu xanh, đỏ, vàng và đỏ tươi, và quả màu xanh đen và đen (drupes) [5]. L. Camara đặc biệt là lá đã được sử dụng như một chất chống khối u, kháng khuẩn, chống tăng huyết áp, thuốc bổ và long đờm trong khi rễ được biết đến để điều trị bệnh thấp khớp, mẩn ngứa ngoài da và sốt rét [5-7]. Phương pháp truyền dịch chiết xuất từ ​​lá và các bộ phận khác được biết đến với đặc tính chống viêm và được thêm vào bồn tắm như một chất chống thấp khớp [6]. Nước sắc từ lá L. camara hầu hết được dùng làm thuốc nam để chữa vết thương, trị sốt, trị ho, trị cảm cúm, đau dạ dày, sốt rét, ... [8].lợi ích của cistanche salsaNó cũng đã được ghi nhận có thể được sử dụng để điều trị ung thư, thủy đậu, bệnh thấp khớp do sởi và loét [9] L. camara cũng hiển thị các hoạt động sau đây như chống oxy hóa, chống nấm, chống tiểu đường, giảm đau và chống viêm [8].

Có rất ít hoặc không có thông tin về các hoạt động chống lão hóa của L.dương vật cistanche phát triểnCamara. Công việc này nhằm tạo ra dữ liệu khoa học về tác dụng chống lão hóa của loài thực vật này trong mô hình D. melanogaster. Chúng tôi đã nghiên cứu ảnh hưởng của chiết xuất ethanol từ lá L. camara đối với tỷ lệ sống sót và tuổi thọ của ruồi giấm.

Vật liệu và phương pháp Thu hái và khai thác thực vật

Lá L. Camara được thu thập từ khu nhân viên cấp cao của Đại học Jos vào tháng 8 năm 2019 và rửa sạch để loại bỏ cát và các hạt khác dưới vòi nước chảy. Lá được phơi khô ở nhiệt độ phòng trong 7 ngày, sau đó dùng cối và chày nghiền thành bột. Khoảng 110 g bột lá của L. Camara được chiết xuất trong etanol trong 72 giờ bằng phương pháp ngâm nước và tiếp tục cô đặc đến khô bằng cách sử dụng nồi cách thủy (50 độ) như mô tả của Alexander và cộng sự [10]. Phần trăm tổng sản lượng là được tính theo công thức dưới đây [11].

Trong đó Wo=trọng lượng của mẫu đã làm khô ban đầu, Wi=trọng lượng của riêng vật chứa và Wz=trọng lượng của dịch chiết và vật chứa.

Cistanche có thể chống lão hóa

Các chủng Fly Strain D. melanogaster Harwich từ Trung tâm Xuất sắc Châu Phi được lai tạo và duy trì trên một chế độ ăn uống đơn giản được chế biến bằng cách sử dụng 100g bột ngô, 20 men làm bánh, 12 g Agar-agar, 1 g metyl-paraben trong 5 ml etanol, và 1700 ml nước. Nhiệt độ phòng thí nghiệm Fly được giữ không đổi ở 25 độ.

Độc tính cấp tính 168- giờ của L. Camara Ethanolic Leaves Extract

Thử nghiệm độc tính cấp tính của L.camara được thực hiện theo phương pháp được mô tả bởi Alexander et al. [10]. Ruồi giấm từ 1 đến 3 ngày tuổi được gây mê, đếm và cho tiếp xúc với chế độ ăn 5,10,20, 50,100,250,500 và 5000 mg / 10 g trong 2 lần lặp lại, mỗi lần lặp lại có 30 ruồi trưởng thành. Ruồi giấm được phép di thực trong 24 giờ. Tỷ lệ tử vong được ghi lại sau mỗi 24h trong 7 ngày liên tiếp.

Nghiên cứu về sự sống còn và tuổi thọ trong 28- ngày

Các nghiên cứu về khả năng sống sót và tuổi thọ được thực hiện theo phương pháp được mô tả bởi Abolaji và cộng sự. [12].cistanche tubulosa liều lượng redditRuồi giấm từ 1 đến 3 ngày tuổi được gây mê trên đá bào nhẹ, đếm và cho tiếp xúc với chế độ ăn 5,10 và 20 mg / 10 g trong bốn lần với 50 con ruồi mỗi con. Ruồi giấm đang được xử lý được chuyển sang nồng độ mới chuẩn bị (chế độ ăn uống trộn với dịch chiết) vào khoảng thời gian 3- ngày. Tỷ lệ tử vong được ghi lại sau mỗi 24h trong 28 ngày như trong tỷ lệ sống sót và thời gian sống như trong nghiên cứu tuổi thọ.

Tỷ lệ xuất hiện

Ruồi giấm trưởng thành được sử dụng chế độ ăn 5,10 và 20 mg / 10 g L.camara làm ba lần với mỗi lọ chứa 50 con ruồi trong 7 ngày. Ruồi giấm đực và ruồi cái, mỗi con 5 con được sắp xếp để giao phối và đẻ trứng theo chế độ ăn mới chế biến không có chiết xuất (lá L.camera) trong 24 giờ. Sau 24 giờ, ruồi trưởng thành (bố mẹ) được chuyển đi và hiến tế trong khi Lọ (chứa trứng mới đẻ) được giữ trong nhiệt độ ổn định ở 25 độ, và quan sát sự xuất hiện của ruồi non (con) [10].

Sàng lọc Phytochemical L. Chiết xuất từ ​​lá Camara Ethanolic. Sàng lọc Phytochemical Định tính được thực hiện bằng cách sử dụng quy trình tiêu chuẩn như được mô tả bởi Phần mềm [13]. Chiết xuất lá etanolic của L. camara đã được sàng lọc để tìm ra sự hiện diện của Alkaloids, Phenolic acid, Tannin, Flavonoid, Saponin, Carbohydrate, Cardiac glycoside, Terpenoids, Anthroquinone và steroid.

Phân tích thống kê

Dữ liệu được biểu thị và trình bày dưới dạng Mean ± SEM (sai số chuẩn của giá trị trung bình), phân tích phương sai một chiều được thực hiện trên tỷ lệ xuất hiện sau đó là kiểm định posthoc của Thổ Nhĩ Kỳ. Các đường cong sống sót và LCso được phân tích bằng cách sử dụng Log-rank (Mentel-Cox) và hồi quy phi tuyến tính; Dose-response-X tương ứng là log (liều lượng) (phần mềm thống kê Graphpad Prism phiên bản 7.04). Các kết quả được coi là có ý nghĩa thống kê ở P<>

Kết quả

Tổng số phần trăm năng suất và chất phytochemical của L. Camara Ethanolic Leaf Extract

Trọng lượng ban đầu của nguyên liệu L.camaraleaves là 110 trong khi trọng lượng của dịch chiết sau khi loại bỏ dung môi (etanol) của quá trình chiết là 20 g. Năng suất phần trăm được tính là 18 phần trăm w / w. Kết quả sàng lọc phytochemical của dịch chiết lá L.camara ethanolic được trình bày trong Bảng 1.

168- giờ LCso của L. camara Ethanolic Leaf Extract trong D. melanogaster

Kết quả cho thấy L.camara không gây chết đến 1000mg / 10g nhưng từ 100 đến 500 mg / g, tỷ lệ tử vong trở nên đáng kể (P<0.05) compared="" with="" the="" negative="" control.="" the="" mortality="" rate="" 28-day="" survival="" rate="" of="" d.="" melanogaster="" administered="" l.="" camara="" ethanolic="">

The survival rate of fruit flies administered L. Camara ethanolic leaf extract ranged from 50 to 59%. The highest survival rate was recorded in 10 mg/10 g diet while the lowest survival rate was recorded in the negative control.L. camara increased non-significantly (P>0. 05) tỷ lệ sống sót của ruồi giấm ở 5,10 và 20 mg / 10 g so với đối chứng âm tính như trong Hình 2. Kết quả này ngụ ý rằngL. Chiết xuất từ ​​lá camara ethanolic có thể có một số hoạt động bảo vệ D. melanogaster.

Tuổi thọ (Life Span) của Ruồi ăn Quả được Quản lý Chất chiết xuất từ ​​lá Camara Ethanolic

Tuổi thọ của ruồi giấm được sử dụng chiết xuất từ ​​lá L. Camara ethanolic sống lâu hơn đáng kể (P<0.05) the="" negatively="" controlled="" flies.l.="" camara="" ethanolic="" leaf="" extracts-treated="" flies="" lived="" up="" to="" 50days="" with33.5,33.6,and44.5%percentage="" increase="" at="" 5,10,and="" 20="" mg/10="" g="" diet="" respectively="" whereas="" the="" negatively="" controlled="" flies="" lived="" up="" to="" 39="" days="" as="" shown="" in="" fig.3.this="" result="" implies="" that="" l.="" camara="" ethanolic="" leaf="" extracts="" may="" have="" some="" anti-aging="" properties="" or="" activities="" in="" d.="">

Tỷ lệ xuất hiện của ruồi non từ trứng

của D. melanogaster được sử dụng Dịch chiết từ lá L. camara Tỷ lệ xuất hiện của ruồi giấm non từ trứng của ruồi giấm trưởng thành được sử dụng dịch chiết từ lá L. camara ethanolic dao động từ 91 đến 100%. Tỷ lệ xuất hiện cao nhất được ghi nhận ở chế độ ăn 20 mg / 10 g trong khi tỷ lệ xuất hiện thấp nhất được ghi nhận ở đối chứng âm tính.cistanche แอ ม เว ย์The extracts,at 5,10,and 20mg/10 g diet increased emergence rate non-significantly (P>0. 05) được so sánh

Thảo luận

Các hợp chất phenolic là các chất chuyển hóa thứ cấp được tạo ra thông qua quá trình chuyển hóa phenylpropanoid của Penrose phosphate. Chúng cũng được tạo ra trong axit shikimic của thực vật [14]. Các hợp chất phenolic (flavonoid, axit phenolic, tannin, Glycoside tim, Steroid, Saponin và ancaloit) có đặc tính chống lão hóa, chống viêm, chống tăng sinh, chống oxy hóa a-glycosidase và các hoạt động ức chế a-amylase [{{6 }}]. Glycoside tim đã được báo cáo là có khả năng ức chế bốn gen của tế bào ung thư tuyến tiền liệt biểu hiện quá mức bao gồm các chất ức chế của chất ức chế apoptosis Survivin và các yếu tố phiên mã [17]. Các hợp chất phenolic được đánh giá cao về khả năng chữa bệnh và phòng ngừa trong một số tình trạng bệnh tật; Ung thư, Tiểu đường, bệnh tim mạch, Béo phì, Nhiễm trùng do vi khuẩn và nấm [14-18].Cần bao nhiêu cistancheMàn hình định tính phytochemical của chiết xuất lá etanolic của L. Camara cho thấy sự hiện diện của Alkaloids, Phenolic acid, flavonoid, glycoside tim, Carbohydrate và Steroid đồng ý với [19]. Các hợp chất này có thể dẫn đến hiện tượng chống lão hóa ở Drosophila riêng lẻ hoặc kết hợp với nhau.

D. melanogaster as a model is mostly appreciable in drug screening and toxicity studies due to the conserved genes and biochemical pathways between the species and humans. European Centre for the Validation of Alternative Methods (ECVAM) has approved this species as an alternative model having met the standard for validation of the alternative model known as 3Rs: Reduction, Refinement, and Replacement of laboratory animal [20]. Our 168-hour also revealed that this plant leaves extract is safe for use since its LCso is 1135 mg/10 g diet in D. melanogaster which agrees with Pour and Sasidharan [21], who reported a high value for LCso of L. Camara in the Artemia salina model and no obvious acute toxicity in adult mice. It has been recorded that plants with a high value of LCso are less or non-toxic while plants with a low value of LCso are considered to be very toxic and shorten or reduce life expectancy [22]. The survival rate result further supported the claim that L. Camara ethanolic leaves extract is safe to use in folk medicine as it increased through the non-significantly (P>0. 05) tỷ lệ sống sót của ruồi giấm khi sử dụng các chất chiết xuất. Kết quả này đồng ý với Pour và Sasidharan [21], những người đã báo cáo độc tính in vivo rất thấp của chiết xuất lá L. Camara trong mô hình Artemia salina.

Ảnh hưởng của L. Camara đối với sự lão hóa đã được nghiên cứu bằng cách sử dụng một thử nghiệm tuổi thọ. Nhóm ruồi giấm được sử dụng chiết xuất lá L. Camara ethanolic sống lâu hơn đáng kể (P <0. 05)="" so="" với="" nhóm="" ruồi="" được="" kiểm="" soát="" tiêu="" cực.="" điều="" này="" ngụ="" ý="" rằng="" chiết="" xuất="" lá="" l.="" camara="" ethanolic="" không="" chỉ="" an="" toàn="" để="" sử="" dụng="" trong="" y="" học="" dân="" gian="" mà="" còn="" kéo="" dài="" thời="" gian="" tồn="" tại="" và="" kéo="" dài="" tuổi="" thọ="" bằng="" cách="" hoạt="" động="" theo="" cách="" chống="" lão="">

The emergence rate revealed that L. Camara ethanolic leaf extracts had no toxic effect on the emergence rate at the concentration tested in D.melanogaster as it increased the emergence rate of young flies with no significance(P>0. 05) so với kiểm soát phủ định.

Bài viết này được trích từ doi: 10.1093 / toxres / tfaa098 Advance Access Ngày xuất bản: 12 tháng 1 năm 2021 Giấy