Myricetin cải thiện Ox LDL gây ra QUÁ TRÌNH chết rụng và viêm HUVECs qua LncRNA GAS5 Điều chỉnh sự biểu hiện của MiR 29a 3p

Vui lòng liên hệoscar.xiao@wecistanche.comđể biết thêm thông tin

Xơ vữa động mạch (AS) là một nguyên nhân đáng kể gây ra tỷ lệ mắc bệnh và tử vong trong các bệnh tim mạch, ban đầu được kích hoạt bởi rối loạn chức năng nội mô và được đặc trưng bởi một dòng các thành phần lipoprotein gây xơ vữa. Đây là yếu tố tiềm năng chính của hầu hết các bệnh gây tử vong, chẳng hạn như nhồi máu cơ tim, đau thắt ngực không ổn định, đột tử do tim và đột quỵ. Mặc dù nguyên nhân có liên quan, lý thuyết đáp ứng tổn thương cho thấy tổn thương tế bào nội mô mạch máu (EC) là cơ chế khởi đầu của AS vẫn được áp dụng rộng rãi3,4.Oxy hóalipoprotein mật độ thấp (ox-LDL) đã được chứng minh là có liên quan đến sự hình thành xơ vữa động mạch, và tổn thương nội mô mạch máu gây ra của nó là một trong những cơ chế bệnh sinh sớm của xơ vữa động mạch. Cho đến nay, việc kiểm soát sự phát triển của AS vẫn là một thách thức lớn vì các cơ chế phân tử của AS vẫn chưa được hiểu đầy đủ. Do đó, giảm tổn thương EC do ox-LDL gây ra và giải thích thêm về cơ chế của nó có thể là một chiến lược tiềm năng để phòng ngừa và điều trị AS. Myricetin (Myr) là một flavonoid tự nhiên phổ biến được tìm thấy trong nhiều loại trái cây, rau và thảo mộc. Myr đóng một vai trò quan trọng trong việc điều trị và ngăn ngừa một số bệnh, bao gồm loãng xương do tiểu đường, ung thư biểu mô tế bào gan8, gan do rượu³，và ung thư dal9，do khả năng chelating sắt mạnh mẽ của nó，chất chống oxy hóa và các hoạt động nhặt rác gốc tự do. Gần đây, chiếcbảo vệ tim mạchvai trò của Myr đã thu hút sự chú ý từ cộng đồng nghiên cứu. Myr cho thấy tác dụng bảo vệ đối với lipopolysaccharide (LPS) gây raviêm cơ timchấn thương, tim mạchsự nở tovà tổn thương cơ tim do thiếu máu cục bộ/tái tưới máu cục bộ(I/R)3. Tuy nhiên, tác dụng của Myr đối với chuyển hóa lipid và xơ vữa động mạch vẫn chưa được hiểu đầy đủ.

Vui lòng nhấp vào đây để biết thêm chi tiết

Vật liệu và phương pháp

Nuôi cấy tế bào, mô hình tổn thương do bò-LDL gây ra và tăng sinh.

Tế bào nội mô tĩnh mạch rốn của con người (HUVECs) từ Ngân hàng Tế bào của Viện Hàn lâm Khoa học Trung Quốc (Thượng Hải, Trung Quốc) đã được nuôi cấy trong DMEM được bổ sung với 10% FBS theoNormoxicđiều kiện ở 37 °C. Các HUVEC đã được điều trị với nồng độ khác nhau（50，100，200 μg/ml）của bò-LDL（Công nghệ Union-Bio，Trung Quốc）và được thu thập lúc 24h để đo lường thêm. Theo hướng dẫn của nhà sản xuất, tốc độ tăng sinh của các tế bào được đo bằng xét nghiệm CCK8 (Solarbio, Trung Quốc).

Cistanche có thể cải thiện khả năng miễn dịch

Phân tích tế bào học dòng chảy của quá trình apoptosis với PI và nhuộm kép annexin V.

Quá trình chết rụng tế bào được đánh giá bằng phương pháp tế bào học dòng chảy bằng bộ xét nghiệm quá trình chết rụng hai lớp PI và annexin V (Solarbio, Trung Quốc) theo hướng dẫn của nhà sản xuất.

Đo lường các loại oxy phản ứng (ROS). ROS nội bào được xác định bằng Bộ xét nghiệm ROS（Beyotime ·，Trung Quốc）. Ngắn gọn，các tế bào được ủ với 10 μM DCHF-DA trong 20 phút, và sau đó cường độ huỳnh quang được đánh giá dưới đầu đọc microplate.

Xét nghiệm kết tủa miễn dịch RNA (RIP).

RIP được thực hiện bằng Magna RIP Kit (Millipore, Hoa Kỳ) theo giao thức của nhà sản xuất18. Trong thời gian ngắn, các tế bào HUVEC đã được thu thập và ly giải trong một bộ đệm ly giải RIP hoàn chỉnh. Chiết xuất protein toàn tế bào sau đó được ủ với bộ đệm RIP có chứa các hạt từ tính liên hợp với kháng thể chống AGO2 của con người hoặc IgG chuột bình thường kiểm soát âm tính. RNA được truy xuất sau đó được phát hiện bằng qRT-PCR.

Xét nghiệm RNA Huỳnh quang tại chỗ (FISH). Các đầu dò cụ thể cho chuỗi GAS5 và miR-29a-3p được thiết kế và tổng hợp bởi RiboBio.A FISH Kit (RiboBio) được sử dụng để phát hiện tín hiệu thăm dò theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Các hạt nhân đã được nhuộm bằng DAPI.

Xét nghiệm phóng viên dual-luciferase. Xét nghiệm phóng viên dual-luciferase đã được sử dụng để phát hiện sự tương tác giữa GAS5 và khu vực quảng bá miR-29a-3p.

Các chuỗi loại hoang dã và đột biến của các vị trí liên kết (WT-GAS5 và MUT-GAS5) đã được thiết kế và tổng hợp. HUVECcells đã được chuyển hóa kết hợp với vectơ WT (Mut) GAS5 và miR-NC hoặc miR-29a-3p bằng thuốc thử chuyển đổi Lipofectamine 2000 (Invitrogen). Sau 48h chuyển vị, một hệ thống xét nghiệm phóng viên Dual-Luciferase (Promega) đã được sử dụng để tiến hành xét nghiệm luciferase.

Xác định VCAM-1, IL-6 và MCP-1.

Mức độ protein hấp dẫn hóa học siêu tế bào đơn bào-1 (MCP-1), interleukin-6 (IL-6) và phân tử bám dính tế bào mạch máu 1 (VCAM-1) được xác định bởi bộ dụng cụ ELISA. Bộ DỤNG CỤ ELISA IL-6 (ab178013), bộ ELISA MCP-1 (ab179886) và bộ ELISA VCAM-1 (ab223591) đã được sử dụng theo hướng dẫn của nhà sản xuất.

REAL-Time Định lượng PCR (gRT-PCR).

Tổng RNA được phân lập bằng thuốc thử Trizol (Takara Bio Inc., Nhật Bản）theo quy trình của nhà sản xuất. cDNA được tạo ra từ tổng RNA（2 μg）với Bộ phiên mã ngược cDNA (Applied Biosystems, Hoa Kỳ) và PCR thời gian thực dựa trên SYBR đã được thực hiện để phát hiện tổng số bản sao mRNA trên hệ thống PCR thời gian thực nhanh Applied Biosystems (ABI) 7300. Các chuỗi mồi đã được liệt kê dưới đây.

Xét nghiệm blot phương Tây.

Biểu hiện protein của Bax, Bcl-2, caspase3, CD31, SM22a, p-p65, p65, p-IkBa, IkBa và TLR4, được đo bằng phương Tây blotting. Các mẫu protein được phân lập từ các tế bào HUVEC (25 ug)) được giải quyết bằng SDS-PAGE và sau đó được chuyển đến màng polyvinylidene fluoride (PVDF) (Millipore, Hoa Kỳ) với đầu dò với GAPDH (# 2118,1: 5000, Tín hiệu tế bào), Bax (#2772S, 1: 1000, Tín hiệu tế bào), Bcl-2 (#15071S, 1: 1000, Tín hiệu tế bào), caspase3 (#9662S, 1: 1000, Tín hiệu tế bào), CD31 (ab9498,1: 1000, Abcam), SM22a (ab14106,1: 1000, Abcam), p-p65 (10745-1-AP 1: 1000, Proteintech), p65 (66535-1-Ig, 1: 1000, Protein-tech), p-IkBa (10268-1-AP, 1: 1000, Proteintech), IkBa (66418-1-Ig, 1: 1000, Proteintech) và TLR4 (66350-1-Ig, 1: 1000, Proteintech) kháng thể theo sau là kháng thể thứ cấp thích hợp. Tất cả các đốm màu phương Tây đã được lặp lại ít nhất ba lần. Cuối cùng, biểu hiện protein đã được hình dung với tăng cường phát quang hóa học (ECL) sys-tem.

Xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang.

Các tế bào phát triển trên các slide đã được cố định, thẩm thấu, bị chặn và miễn dịch qua đêm với các kháng thể CD31 (ab9498, 1: 200, Abcam) và SM22a (ab14106,1: 200, Abcam). Sau khi rửa, các kháng thể IgG có nhãn FITC thứ hai cụ thể được ủ liên tục với các tế bào. Cuối cùng, những hình ảnh được thu được dưới kính hiển vi (Olympus, Nhật Bản) với độ phóng đại thích hợp.

Phân tích thống kê. Tất cả các kết quả được hiển thị dưới dạng phương tiện±đánh lệch chuẩn của giá trị trung bình (SEM). Các kết quả có ý nghĩa thống kê được xác định bằng cách sử dụng ANOVA một chiều, tiếp theo là bài kiểm tra Student-Newman-Keuls (S-N-K) q. Giá trị p<0.05 was="" considered="" to="" be="">

Kết quả

Myricetin làm giảm quá trình chết rụng do bò-LDL gây ra và ROS trong HUVEC.

Trước hết, 100 lần ủ ox-LDL ug / ml trong 24 giờ đã dẫn đến giảm đáng kể khả năng sống sót của tế bào phụ thuộc vào liều lượng. Tiền xử lý với l uM Myr trong 2 giờ không có ảnh hưởng đáng kể đến khả năng tồn tại của tế bào. Tuy nhiên，2,5 và 5 μM Myr đã làm giảm đáng kể khả năng tồn tại của tế bào (Hình 1A và B). Ngoài ra, chúng tôi nhận thấy rằng việc tăng cường ROS gây ra bởi ox-LDL trong HUVEC đã bị giảm bởi Myr (Hình 1C). Chúng tôi cũng đã kiểm tra tác dụng của Myr đối với quá trình apoptosis. Hơn nữa, tế bào học dòng chảy và kết quả protein liên quan đến quá trình apoptosis cũng tiết lộ rằng quá trình chết rụng HUVEC do HUVEC gây ra 100 ug / ml ox-LDL đã đảo ngược đáng kể các tế bào được xử lý trước MYR phụ thuộc vào liều lượng (Hình 1D và E).

Myricetin ức chế phản ứng viêm và EndMT trong các tế bào HUVEC do ox-LDL gây ra. Nhuộm miễn dịch huỳnh quang cho thấy việc ủ HUVEC bằng ox-LDL làm giảm biểu hiện của dấu hiệu nội mô CD31, và tăng biểu hiện của dấu hiệu trung mô SM22a, chỉ ra rằng tình trạng ox-LDL kích hoạt EndMT. Nhưng những tác động này được giảm thiểu bởi MYR. Một cách nhất quán, western blot cho thấy Myr đã làm giảm mức protein SM22a được điều chỉnh trong HUVEC gây ra bởi ox-LDL (Hình, 2A và B). Với sự hiện diện của ox-LDL, nồng độ mRNA của IL-6, MCP-1, VCAM-1 rõ ràng đã được kiểm soát trong HUVEC, trong khi điều trị Myr đã đảo ngược những thay đổi bất thường này (Hình 2C). Tương tự như vậy, kết quả tương tự đã được xác nhận thêm bởi ELISA (Hình 2D).

Biểu hiện quá mức GAS5 làm giảm tác dụng bảo vệ myricetin chống lại bảo hiểm HUVEC qua trung gian ox-LDL.

Chúng tôi đã phát hiện thêm biểu hiện của GAS5 trong HUVEC bằng gRT-PCR. Như thể hiện trong Hình 3A, mức GAS5 cao hơn đáng kể đã được quan sát thấy trong nhóm ox-LDL so với trong đối chứng. Ngược lại, nồng độ mRNA của GAS5 đã giảm trong nhóm được xử lý Myr theo cách phụ thuộc vào liều lượng. Những dữ liệu này chỉ ra rằng GAS5 có thể liên quan đến ảnh hưởng của Myr lên các tế bào nội mô. Để hiểu các cơ chế mà GAS5 có thể liên quan đến tác dụng bảo vệ của Myr, chúng tôi đã sử dụng pcDNA-GAS5 để thể hiện quá mức sự biểu hiện của GAS5 trong HUVEC. Sự biểu hiện của GAS5 đã được tăng cường bởi pcDNA-GAS5, ban đầu được Myr giảm trong huvec do ox-LDL gây ra (Hình 3B). Các thí nghiệm sâu hơn cho thấy khả năng tồn tại của các tế bào HUVEC với biểu hiện quá mức GAS5 đã giảm đáng kể và quá trình apoptosis tăng cao rõ rệt dưới sự điều trị của Myr (Hình 3C và D). Ngoài ra, việc biểu hiện quá mức GAS5 trong các HUVEC được xử lý bằng ox-LDL cho thấy hàm lượng ROS cao hơn so với điều khiển phù hợp (Hình 3E). Những dữ liệu này cho thấy rằng việc điều chỉnh lại sự biểu hiện của GAS5 làm giảm tác dụng bảo vệ Myr chống lại chấn thương HUVEC qua trung gian ox-LDL.

miR-29a-3p là mục tiêu của GAS5 trong HUVEC.

Mục tiêu GAS5 được xác định thông qua RegRNA 2.0 và Star-Base, kết quả tìm kiếm được hiển thị trong Hình. Điều 4A. Trong số các miRNA này, miR-29a-3p là sự giảm đáng kể nhất trong chấn thương HUVEC qua trung gian ox-LDL (Hình 4B). Các phân tích tin sinh học đã được thực hiện để dự đoán các vùng liên kết giữa GAS5 và miR-29a-3p (Hình 4C). Để xác nhận dự đoán tin sinh học này, các xét nghiệm gen phóng viên luciferase kép chỉ ra rằng GAS5-WIpresented hoạt động luciferase thấp hơn so với nhóm MUT tương ứng, xác nhận mối quan hệ ràng buộc của GAS5 và miR-29a-3p (Hình 4D). Trong khi đó, mức độ GAS5 được làm giàu bởi Ago2 RIP cao hơn trong các tế bào được chuyển hóa bằng miR-29a-3p so với nhóm miR-NC (Hình 4E). Trong khi đó, phân tích FISH trong HUVECcells cho thấy GAS5 được đồng bản địa hóa với miR-29a-3p chủ yếu ở hạt nhân (Hình 4F). Những phát hiện này cho thấy GAS5 nhắm vào miR-29a-3p.

MiR-29a-3p bắt chước đã giải cứu tác động của GAS5 trong HUVEC do bò-LDL gây ra được điều trị bằng Myricetin.

Như thể hiện trong Hình 5A, biểu hiện của miR-29a-3p đã tăng đáng kể trong nhóm bắt chước ox-LDL + Myr + pcDNA-GAS5 + miR-29a-3p so với nhóm điều khiển bắt chước ox-LDL + Myr + pcDNA-GAS5 + (Hình 5A). Hơn nữa, GAS5 được kiểm soát đã làm tăng đáng kể khả năng tồn tại của huvec do ox-LDL gây ra được điều trị bởi Myr, trong khi sự đồng truyền pcDNA-GAS5andmiR-29a-3p bắt chước thành HUVEC đã bãi bỏ các hiệu ứng này (Hình 5B). Ngoài ra, quá trình sản xuất ROS và quá trình apoptosis trong huvec do ox-LDL gây ra được Myr xử lý sau khi biểu hiện quá mức GAS5, trong khi miR-29a-3p bắt chước đã vô hiệu hóa các hiệu ứng này (Hình 5C và D).

bắt chước sh-GAS5 hoặc miR-29a-3p có thể đẩy nhanh vai trò bảo vệ của Myricetin trong tế bào HUVEC do ox-LDL gây ra.

Để khám phá xem LIỆU GAS5 và miR-29a-3p có tham gia vào cơ chế điều tiết qua trung gian Myr hay không, HUVEC đã được chuyển đổi với NC, sh-GAS5 bắt chước điều khiển, miR-29a-3p bắt chước. Biểu hiện của GAS5 đã giảm đáng kể trong nhóm sh-GAS5 so với nhóm NC (Hình 6A). Sau khi chuyển hóa, ox-LDL + Myr làm tăng khả năng tồn tại so với nhóm ox-LDL và ức chế GAS5 hoặc miR-29a-3p được kiểm soát làm tăng khả năng tồn tại của huvec do ox-LDL gây ra được điều trị bởi Myr (Hình 6B). Ngoài ra, Myr đã hạn chế quá trình chết rụng tế bào do ox-LDL gây ra, sau đó đã bị thay đổi bởi các mô phỏng sh-GAS5 và miR-29a-3p (Hình 6C). Hơn nữa, mức độ protein của CD31 và SM22a đã được tăng lên

Myricetin đã bất hoạt đường dẫn tín hiệu TLR4 / NF-KB trong HUVEC được xử lý bằng ox-LDL bằng cách giảm điều chỉnh GAS5 hoặc điều chỉnh lại miR-29a-3p. Đường dẫn tín hiệu TLR4 / NF-KB tham gia chặt chẽ vào quá trình AS. Để khám phá xem Liệu Myr có ngăn chặn con đường tín hiệu TLR4 / NF-B hay không, TLR4 và một số protein hạ lưu quan trọng, ví dụ: p-p65, p65, p-IkBa, IkBa và TLR4, đã được xác định trong các tế bào HUVEC thông qua phân tích western blot. Hình 6 cho thấy Myr đã giảm quy định biểu hiện của p-p65, p-IkBa và TLR4 so với nhóm ox-LDL, trong khi mức protein của p-p65, p-IkBa. và TLR4 đã giảm trong các nhóm bắt chước ox-LDL + Myr + sh-GAS5 và ox-LDL + Myr + miR-29a-3p so với nhóm ox-LDL + Myr (Hình 7). Tổng hợp lại, những kết quả này gợi ý rằng con đường GAS5/miR-29a-3p/TLR4/NF-KB có thể là một trong những cơ chế cơ bản mà qua đó Myr làm giảm viêm tế bào HUVEC và EndMT. Sự thảo luận

AS là một tình trạng viêm dai dẳng được bắt đầu bởi sự lắng đọng cũng như tích tụ các lipoprotein mật độ thấp trong thành động mạch19. Mặc dù có những tiến bộ to lớn trong cả nghiên cứu cơ bản và khoa học, vẫn là một trong những lý do hàng đầu dẫn đến cái chết trên thế giới2. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã khám phá cơ chế phân tử của Myr đối với thiệt hại do bò-LDL gây ra của HUVEC, cho thấy vai trò quan trọng của lncRNA GAS5 trong trường hợp này. Kết quả của chúng tôi cho thấy Myr điều chỉnh khả năng tồn tại của tế bào HUVEC, ROS, quá trình chết rụng, viêm và EndMT thông qua con đường GAS5 / miR-29a-3p / TLR4 / NF-KB, làm rõ một cơ chế mới của Myr trong việc bảo vệ chống lại AS.

Ox-LDL đã được chứng minh là tạo ra một thế hệ ROS nâng cao, đóng một vai trò quan trọng trong sự tiến triển của AS. Bằng chứng đáng kể cho thấy rằng stress oxy hóa gia tăng đóng một vai trò nổi bật trong cơ chế bệnh sinh của rối loạn chức năng nội mô mạch máu cùng với EndMT tế bào nội mô, viêm và quá trình chết rụng. Chúng tôi đã sử dụng ox-LDL đã kích thích HUVEC để mô phỏng sự xuất hiện của chứng xơ vữa động mạch sớm, và phản ứng viêm và EndMT của HUVEC đã tăng lên, và Myr đã ức chế đáng kể phản ứng viêm và EndMT đối với HUVEC được kích thích bằng ox-LDL. Myr được biết là có tác dụng bảo vệ tế bào chống oxy hóa trong các tế bào khác nhau, bao gồm cả dòng tế bào HUVEC21. Một nghiên cứu trước đây cho thấy Myr thể hiện tác dụng tăng sinh và chống apoptotic trong tế bào cơ tim do LPS gây ra tổn thương tế bào H9c22. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã kiểm tra kết quả của Myr trên phiên bản tế bào xơ vữa động mạch do bò-LDL gây ra. Kết quả của chúng tôi cho thấy rằng tiền xử lý Myr 5 μM có thể xoay chuyển đáng kể sự điều hòa do bò-LDL gây ra về khả năng tồn tại của tế bào trong HUVEC. Kết quả của chúng tôi đã chứng minh rằng ox-LDL, liệu pháp có thể quảng cáo tình trạng viêm và EndMT của HUVEC thông qua việc điều chỉnh CD31, SM22a và các cytokine gây viêm (IL-6, MCP-1, VCAM-1), có thể được đảo ngược bằng tiền xử lý Myr. Một số yếu tố xác định rằng viêm và EndMT đi kèm với xơ vữa động mạch23. Một nghiên cứu trước đây cho thấy sự ức chế biểu hiện của VCAM-1 và ICAM-1 đã được công nhận là một chiến lược thiết yếu chống lại chứng xơ vữa động mạch24. Hơn nữa, vắc-xin đã ức chế EndMT nội mô do ox-LDL gây ra thông qua việc giảm kiểm soát dấu hiệu nội mô CD31 và điều chỉnh lại dấu ấn trung mô SM22a25. Những phát hiện của chúng tôi rất phù hợp với những nghiên cứu này.

Biểu hiện của GAS5 được thể hiện cao trong cả mô hình người và động vật26,27.Trong nghiên cứu này, chúng tôi nhận thấy rằng GAS5 đã được điều chỉnh lại và miR-29a-3p đã được kiểm soát trong chấn thương HUVEC do bò-LDL gây ra. Điều trị myr có thể đảo ngược những tác động này. Một nghiên cứu trước đây cho thấy Mvr đã ức chế các biểu hiện HMGB1, TLR4 và MyD88 trong các tế bào thần kinh, và nó đã khôi phục tổn thương và viêm tế bào thần kinh do kích hoạt các con đường tín hiệu NF-KB và MAPK * 8.Trong nghiên cứu này, việc điều chỉnh tăng lncRNA GAS5 và giảm quy định miR-29a-3p đã dẫn đến giảm quá trình chết rụng tế bào, viêm và EndMT, cũng như giảm hoạt động của con đường tín hiệu TLR4 / NF-KB. Theo phát hiện của chúng tôi, Myr làm giảm p-p65, p-IkBa và TLR4 trong HUVEC bằng cách điều chỉnh GAS5 / miR-29a-3p làm giảm phản ứng viêm và EndMT trong tổn thương HUVEC do ox-LDL gây ra. Cuối cùng, nghiên cứu của chúng tôi đã chỉ ra rằng Myr có khả năng cải thiện quá trình chết rụng tế bào, viêm tế bào và EndMT thông qua con đường GAS5 / miR-29a-3p / TLR4 / NF-KB (Hình 8), cho thấy Myr là một tác nhân điều trị tiềm năng cho AS. Ngoài ra, GAS5 được đề xuất là một phân tử đích đầy hứa hẹn liên quan đến các quá trình sinh lý bệnh học của AS.

Tham khảo

1. Kondapalli, L., Bottinor, W.&Lenneman, C. Bằng cách giải phóng phanh bằng liệu pháp miễn dịch, chúng ta có đang đẩy nhanh quá trình xơ vữa động mạch không?.

Lưu hành 142 (24), 2312-2315 (2020).

2. Libby, P.Ridker, P.M.&Hansson, G.K.Progress và những thách thức trong việc dịch sinh học của chứng xơ vữa động mạch. Thiên nhiên 473 (7347),

317-325 (2011).

3. Couto, N. F.et al. Sự thay đổi oxLDL trong động lực học màng tế bào nội mô dẫn đến những thay đổi trong việc buôn bán túi và tăng

nhạy cảm tế bào với chấn thương. Biochim.Biophys.Acta Biomembranes 1862,183139 (2019).

4. Yamagata, K.Tác dụng bảo vệ của epigallocatechin gallate đối với rối loạn nội mô trong xơ vữa động mạch. J. Cardiovasc (bằng tiếng Anh). Dược phẩm.75,

292-298(2019).

5. Gao, S.&Liu, J.Hiệp hội giữa lipoprotein mật độ thấp oxy hóa lưu hành và bệnh tim mạch xơ vữa động mạch.

Chronic Dis. Transl. Med. 3(2),89-94 (2017).

6. Torisu, K. và cộng sự. Cần có autophagy nội mô nguyên vẹn để duy trì cân bằng nội môi lipid mạch máu. Tế bào lão hóa15 (1), 187-191 (2016).

7. Pan, X. và cộng sự. Kích hoạt tín hiệu Nrf2 / HO-1 bằng Myricetin để làm suy giảm sự thoái hóa ECM ở tế bào chondrocytes ở người và làm dịu ame-meliorating viêm xương khớp murine. Quốc tế Immunopharmacol. 75,105742 (2019).

8.Li, M.et cộng sự. Myricetin ngăn chặn sự lan truyền của ung thư biểu mô tế bào gan thông qua biểu hiện điều chỉnh xuống của YAP. Các ô 8 (4),

358(2019).

9. Guo, C.et al. Myricetin Ameliorates tích tụ lipid do ethanol gây ra trong tế bào gan bằng cách giảm sinh tổng hợp axit béo. Mol

Nutr (bằng tiếng Anh). Thực phẩm Res. 63 (14), e1801393 (2019).