Một thử nghiệm đa dấu ấn sinh học mới lạ để theo dõi định lượng không xâm lấn tổn thương thận

Drew Watson¹, Joshua YC Yang^1,2,3et al

Trừu tượng:Tiêu chuẩn hiện hành của các biện pháp chăm sóc choquả thậnhàm số, protein niệu, và creatinin huyết thanh (SCr) là những yếu tố tiên lượng kém của giai đoạn đầuquả thậndịch bệnh. Các biện pháp có thể phát hiệnmãn tínhquả thậndịch bệnhtrong các giai đoạn trước đó là cần thiết để cho phép can thiệp điều trị và giảm các kết quả bất lợi củamãn tínhquả thậndịch bệnh. Chúng tôi đã phát triển Xét nghiệm Chấn thương Thận (KIT) và một Điểm KIT mới dựa trên phép đo tổng hợp và xác nhận nhiều dấu ấn sinh học trên bộ 397 mẫu nước tiểu duy nhất. Thử nghiệm được thực hiện trên các mẫu nước tiểu không cần xử lý tại nơi lấy mẫu và không cần giải trình tự hoặc khuếch đại mục tiêu. Chúng tôi đã tìm cách xác minh rằng kiểm tra KIT trước khi bắt đầu, Điểm KIT và các ngưỡng lâm sàng tương quan vớimãn tínhquả thậndịch bệnh(Suy thận) và có thể cung cấp thông tin dự đoán về tình trạng tổn thương thận sớm ở trên và ngoài protein niệu và các phép đo chức năng thận đơn thuần. Các phân tích thống kê trên sáu dấu hiệu DNA, protein và chất chuyển hóa được thực hiện trên một tập hợp con các mẫu nước tiểu còn sót lại vớiSuy thậnđáp ứng các kiểm soát chất lượng về hiệu suất xét nghiệm từ các bệnh nhân tham dự phòng thí nghiệm lâm sàng tại Đại học California, San Francisco (UCSF) như một phần của nghiên cứu tiền cứu đang được IRB phê duyệt. Tiêu chí thu nhận bao gồm lựa chọn các bệnh nhân mắc bệnh liên quan đếnSuy thậnvà kiểm soát sức khỏe bình thường; tiêu chí loại trừ bao gồm thông tin không đầy đủ hoặc thiếu để phân loại mẫu, sự chậm trễ về mặt hậu cần trong việc vận chuyển / xử lý mẫu nước tiểu hoặc khối lượng mẫu thấp, và chấn thương thận cấp tính. Hồi quy logistic đa biến củaquả thậnvết thươngthống kê tỷ lệ trạng thái và khả năng xảy ra được sử dụng để đánh giá sự đóng góp của Điểm KIT để dự đoánquả thậnvết thươngtình trạng và giai đoạn của CKD cũng như đánh giá sự đóng góp tiềm năng của Điểm KIT để phát hiện giai đoạn sớmSuy thậntrên và ngoài các biện pháp truyền thống về chức năng thận. Các mẫu nước tiểu được xử lý bởi một vi khuẩn miễn dịch độc quyền để đo DNA không có tế bào (cfDNA), cfDNA được methyl hóa, clusterin, CXCL10, tổng số protein và creatinine. Điểm KIT và Nhóm Rủi ro Điểm KIT (cao so với thấp) có độ nhạy và thành phố cụ thể để phát hiện tình trạng chấn thương thận (khỏe mạnh hoặcSuy thận) là 97,3% (KTC 95%: 94,6–99,3%) và 94,1% (KTC 95%: 82,3–100%). Ngoài ra, ở những bệnh nhân có chức năng thận bình thường (tỷ lệ lọc cầu thận ước tính (eGFR)> 90), Điểm KIT xác định rõ ràng những người có các yếu tố nguy cơ dễ mắcSuy thận, không thể phát hiện được bằng eGFR hoặc protein niệu (p <0. 001).="" điểm="" kit="" cho="" thấy="" gánh="" nặng="" của="" chấn="" thương="" thận="" có="" thể="" chưa="" được="" nhận="" biết="" đầy="" đủ,="" mở="" ra="" cánh="" cửa="" cho="" việc="" phát="" hiện,="" can="" thiệp="" và="" bảo="" tồn="" chức="" năng="" thận="" sớm="">

Từ khóa:Thử nghiệm KIT; mãn tínhquả thậndịch bệnh; dấu ấn sinh học; không xâm lấn; nước tiểu; eGFR; cfDNA

Tiếp xúc:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

1. Giới thiệu

Mãn tínhquả thậndịch bệnh(CKD) là một vấn đề sức khỏe cộng đồng trên toàn thế giới, với gánh nặng toàn cầu là 850 triệu người.Suy thậnhiện đang được công nhận là một "dịch bệnh tiềm ẩn", vì hầu hết bệnh nhân mắc bệnh thận mạn giai đoạn đầu (~ 11% dân số trưởng thành trên thế giới) không được nhận biết, vì họ không có triệu chứng và không biết về nguy cơ gia tăng các vấn đề về tim, nhiễm trùng. , nhập viện, và suy thận. Do đó, CKD thường không được coi là một vấn đề sức khỏe lớn, mặc dù nó ảnh hưởng đến gấp đôi số bệnh nhân tiểu đường (422 triệu) và gấp hơn 20 lần số người bị ung thư (42 triệu) hoặc HIV / AIDS (36,7 triệu).

CKD is defined as a reduced renal reserve, persisting for >3 tháng và / hoặc chẩn đoán trước một tình trạng với nguy cơ đã biếtquả thậndamage [1]. CKD is defined in a five-stage classification system for the assessment of kidney injury as patients advance towards the need for dialysis or transplantation [2]. The current standard of care tests, the blood-based serum creatinine (SCr) assay (and its use to calculate the estimated glomerular filtration rate or eGFR [3]) and protein in the urine, detect CKD 3–5 (eGFR of s60 mL/min/1.73 m2 of body surface area). However, most cases of CKD 1–2 (CKD >60 mL / phút / 1,73 m2 diện tích bề mặt cơ thể) không bị phát hiện. EGFR có độ nhạy kém để phát hiện sớm CKD, vì sự dư thừa vốn có của dự trữ thận che lấp sự gia tăng sớm của SCr. Sinh thiết thận, thường được thực hiện với các giai đoạn tiến triển hơn của CKD, có giá trị đánh giá bệnh lý, nhưng xâm lấn, đắt tiền [4] và không thể được sử dụng để theo dõi tuần tự tiến triển của CKD.

Nhiều yếu tố kích hoạt và nguy cơ bắt đầu dòng thácquả thậnthiệt hại trongSuy thận, với sự tiến triển thành suy thận (CKD 5). Có hơn 10 triệu người trên toàn thế giới cần được điều trị cứu vãn thận với sự hỗ trợ suốt đời từ lọc máu hoặc ghép thận. Mặc dù lọc máu và cấy ghép cung cấp sự thay thế chức năng thận, cả hai vẫn bị cản trở bởi các tác động bất lợi khác nhau đến bệnh tật và tử vong của bệnh nhân. Cũng có một tác động rõ rệt của CKD đến các hệ thống cơ quan khác trong cơ thể;Suy thậnbệnh nhân có nguy cơ mắc các bệnh nhiễm trùng, tử vong do tim mạch và ung thư cao hơn [5].

Phát hiện sớm tổn thương thận là rất quan trọng, vì điều trị trongSuy thận1–2 có thể dẫn đến bảo tồn thận bằng cách đảo ngược hoặc làm chậm sự tiến triển của tổn thương thận [6]. Hiện tại, các xét nghiệm nước tiểu hiện có không thể phát hiện mức độ tổn thương thận thấp [7–14] và chủ yếu được đánh giá trong chấn thương thận cấp tính (AKI), với khả năng phân biệt kém đối với bệnh thận mạn [9]. Do đó, có một nhu cầu quan trọng chưa được đáp ứng để phát triển các chẩn đoán nhạy cảm, định lượng, không xâm lấn để phát hiện CKD 1-3. Phát hiện sớm và điều trị sớm CKD sẽ giảm thiểu gánh nặng bệnh tật toàn cầu và giảm gánh nặng tài chính khổng lồ đối với ngân sách chăm sóc sức khỏe quốc gia [15–21].

The primary aim of this study was to perform an assessment of multiple novels and known urine biomarker measurements to conduct an inexpensive, portable assay, called the Kidney Injury Test (KIT) in consecutive patients presenting with CKD at a large tertiary health care system, and develop and independently validate a quantitative KIT Score to reflect the diferent CKD stages. The KIT assay performance was also directly compared to the current standard of care tests (eGFR and proteinuria). A secondary aim was to explore the accuracy of the KIT assay to detect and quantitate kidney injury in CKD 1–2, i.e., subjects with normal eGFR (>60) nhưng với các yếu tố nguy cơ dễ mắc bệnh CKD. Báo cáo này mô tả quá trình lựa chọn dấu ấn sinh học, phát triển thuật toán và xác nhận độc lập Điểm KIT như một chẩn đoán mới cho việc đánh giá và định lượng lượng của cả giai đoạn đầu và giai đoạn cuốiquả thậnchấn thương.

2. Phần thực nghiệm

2.1. Lựa chọn bệnh nhân

Nước tiểu dư, chấm ngẫu nhiên được thu thập từ 1169 bệnh nhân tuần tự từ các phòng thí nghiệm lâm sàng tại Đại học California, San Francisco (UCSF), trong 3 tháng, từ tháng 10 năm 2016 đến tháng 1 năm 2017, như một phần của thử nghiệm lâm sàng thường quy tại Vịnh Parnassus và Mission. các phòng thí nghiệm lâm sàng trong khuôn viên trường. Việc lựa chọn mẫu để chẩn đoán CKD được làm phong phú hơn bằng cách chọn các mẫu nước tiểu lấy từ các phòng khám thận, tiểu đường hoặc tim mạch tại UCSF. Để tạo điều kiện thuận lợi cho sức mạnh thống kê, nghiên cứu đã được bổ sung thêm cho những bệnh nhân có nguy cơ cao mắc bệnh thận, sử dụng các tiêu chí sau: bệnh nhân được chẩn đoán chính xác là CKD (ICD10 mã N18 [22]), không có chẩn đoán CKD nhưng hiện có chẩn đoán đái tháo đường. , tăng huyết áp hoặc bệnh tự miễn, không mắc bệnh CKD nhưng có tiền sử gia đình mắc bệnh CKD, không mắc bệnh thận mạn nhưng trên 60 tuổi hoặc thuộc dân tộc thiểu số. Bệnh nhân bị AKI không được đưa vào nghiên cứu này, với lý do sau: (1) nghiên cứu đầu tiên về KIT tập trung vào việc phát triển và xác nhận các chỉ số chức năng và định lượng của Điểm KIT trong một quá trình tiến triển bệnh thận mãn tính liên tục. AKI có một quỹ đạo khác nhau với sự khởi phát và phân giải cấp tính; (2) AKI có thể giải quyết hoàn toàn hoặc không đầy đủ chấn thương, do đó việc giảm Điểm KIT sau khi giải quyết xong AKI sẽ có thể diễn giải được về mặt lâm sàng khi phạm vi Điểm KIT đã được thiết lập trong bài báo này cho các giai đoạn chức năng khác nhau của CKD; (3) AKI là một trong những nguyên nhân gây ra nguy cơ CKD, nhưng phần lớn các trường hợp CKD, chẳng hạn như đái tháo đường và tăng huyết áp, không bắt đầu với AKI. Một nghiên cứu về Điểm KIT trong AKI được lên kế hoạch như một nghiên cứu tiếp theo.

Đối với mục đích phát triển KIT Score, nguyên nhân liên quan của CKD hoặc yếu tố nguy cơ dẫn đến CKD được thu thập từ hồ sơ sức khỏe điện tử (EHR), cùng với các biến nhân khẩu học và SCr, để cho phép tính toán eGFR [23]. Đối với mỗi bệnh nhân, sự hiện diện và nguyên nhân của bệnh thận được xác định thông qua việc xem xét lâm sàng hồ sơ y tế và phòng thí nghiệm. Các nguyên nhân phổ biến nhất của CKD trong nhóm thuần tập này là: các bệnh hệ thống qua trung gian miễn dịch có thể gây tổn thương thận (như viêm thận lupus, viêm khớp dạng thấp, hội chứng Sjogren), tăng huyết áp, đái tháo đường (týp 1 và 2), bệnh cầu thận (những trường hợp này là sinh thiết liên quan đến bệnh thận IgA, viêm cầu thận tăng sinh màng hoặc xơ cứng cầu thận phân đoạn khu trú) và bệnh lý tắc nghẽn niệu quản (bàng quang thần kinh, van niệu đạo sau và thận ứ nước). Trong nhóm thuần tập bệnh nhân CKD, 74,8% bệnh nhân có từ 2 chẩn đoán lâm sàng trở lên có liên quan đến sự phát triển và tiến triển của CKD, trong khi 13,3% bệnh nhân bị đái tháo đường và tăng huyết áp là các yếu tố nguy cơ tổn thương thận kép trong trường hợp không có chẩn đoán lâm sàng là CKD. , do tỷ lệ phổ biến cao của các bệnh đi kèm này trong dân số nói chung. Nguyên nhân của CKD không được xác định, và tất cả các nguyên nhân góp phần gây ra CKD đã được thu thập.

To avoid degradation of the biomarkers in the KIT assay, urine samples were either processed within an hour of collection or stored at 4 C and processed within 24 h. Samples were discarded or not included for analysis in this study if the sample volume was less than 2 mL, there were insufficient data to confirm patient CKD diagnosis, or there was a>Chậm trễ 24 giờ trong quá trình xử lý mẫu vì lý do hậu cần. Sau quá trình lọc nước ở trên, chúng tôi đã chọn lọc cuối cùng 343 mẫu nước tiểu duy nhất từ ​​343 bệnh nhân. Chúng tôi cũng lấy thêm các mẫu nước tiểu từ 54 đối chứng khỏe mạnh được chọn từ những người tình nguyện có sức khỏe tốt, với SCr bình thường, không có protein niệu và không có yếu tố nguy cơ CKD có thể xác định. Nghiên cứu tuân thủ Tuyên bố của Helsinki và Istanbul và đã được phê duyệt bởi hội đồng đánh giá thể chế của UCSF (IRB 16-21108) và yêu cầu về sự đồng ý có đầy đủ thông tin đã được IRB từ bỏ.

2.2. Phương pháp thử nghiệm KIT

2.2.1. Xử lý mẫu

Các mẫu nước tiểu được thu thập trong các vật chứa vô trùng (hứng sạch, khoảng trống giữa dòng), không phân biệt tiểu máu vi thể hoặc đại thể hoặc protein niệu. Các mẫu nước tiểu được ly tâm ở 2 0 00 × g trong 30 phút ở 4 oC. Phần nổi phía trên được tách ra khỏi viên nước tiểu có chứa các tế bào và mảnh vỡ của tế bào. Độ pH của phần nổi phía trên được điều chỉnh đến 7,0 bằng Tris – HCl và được lưu trữ ở _80 oC trong Kho lưu trữ sinh học UCSF cho đến khi phân tích thêm.

2.2.2. KIT Biomarkers

Đầu vào KIT các phép đo chuẩn hóa của 6 dấu ấn sinh học nước tiểu chính. Dấu ấn sinh học đầu tiên là DNA không có tế bào (cfDNA): là thước đo tổng gánh nặng apoptotic của chấn thương thận [24], được đo bằng chất phản ứng miễn dịch phát quang hóa học bổ sung oligonucleotide độc ​​quyền 5 'để nhắm mục tiêu cụ thể vào các đoạn cfDNA trong chấn thương thận [25]. Cách tiếp cận này khắc phục những hạn chế của việc xử lý mẫu tốn thời gian, khuếch đại PCR tốn kém [26], phát hiện SNP ([27,28] hoặc phương pháp giải trình tự DNA [29], nếu không được sử dụng để đo cfDNA trong máu [27,30]. Phần bổ sung Các chất đánh dấu được đo bằng ELISA bao gồm cfDNA được methyl hóa (m-cfDNA) để xác định lại tỷ lệ cfDNA có thể liên quan nhiều hơn đến tổn thương nhu mô thận [31,32]; CXCL10, như một chất đánh dấu trong fl ammation [33–37]; clusterin, như một dấu hiệu tổn thương ống thận [38,39]; protein toàn phần, là dấu hiệu muộn của tổn thương cầu thận [40,41]; và creatinin, như dấu hiệu bình thường hóa vì nó có thể bị ảnh hưởng bởi khối lượng cơ thể, dinh dưỡng và / hoặc hydrat hóa và sử dụng để tránh phải lấy nước tiểu theo thời gian [42,43].

2.3. Phân tích thống kê

2.3.1. Phát triển điểm KIT

Lấy mẫu ngẫu nhiên được sử dụng để chia nhóm thuần tập bệnh nhân 397- thành một nhóm đào tạo (n=233, với 37 đối chứng khỏe mạnh), phân theo tình trạng chấn thương thận. Mô hình rừng ngẫu nhiên được sử dụng để xác định mối quan hệ giữa các dấu hiệu khác nhau để phát hiện CKD với độ nhạy cao. Các mô hình dự đoán đã được đào tạo bằng cách sử dụng các phương pháp thống kê và máy học để phát triển thuật toán Điểm KIT, trên tất cả sáu dấu ấn sinh học DNA và protein được chọn và phân vùng đa chiều của các phép đo xét nghiệm này dựa trên các ngưỡng lâm sàng được xác định bằng cách kết hợp SCr và nguy cơ đã biết bổ sung các biến số cho CKD như chủng tộc, giới tính và tuổi tác. Cuối cùng, một mô hình tuyến tính đơn giản kết hợp phân vùng kết quả đã được phát triển thành Điểm KIT với một ngưỡng bổ sung để đánh giá nguy cơ thấp và cao của CKD.

2.3.2. Xác thực điểm KIT

Sau đó, một tập hợp con xác nhận độc lập gồm 164 bệnh nhân, với 17 đối chứng khỏe mạnh, sau đó đã được sử dụng để xác nhận tiềm năng xét nghiệm KIT trước khi chỉ định và Điểm KIT. Hồi quy logistic được sử dụng để so sánh mô hình (đầy đủ) với tiêu chuẩn hiện tại của các xét nghiệm chăm sóc, chỉ riêng protein nước tiểu và eGFR. Giá trị p <0. 01="" cho="" kiểm="" tra="" tỷ="" lệ="" khả="" năng="" tương="" ứng="" được="" coi="" là="" không="" đáng="" kể.="" các="" phân="" tích="" hồi="" quy="" logistic="" được="" thực="" hiện="" để="" đánh="" giá="" độ="" chính="" xác="" của="" ngưỡng="" điểm="" kit="" đã="" được="" chỉ="" định="" trước="" cho="" các="" nhóm="" rủi="" ro="" điểm="" kit="" phân="" loại="" (thấp="" và="" cao).="" độ="" nhạy="" và="" thành="" phố="" cụ="" thể="" của="" điểm="" kit="" định="" lượng="" và="" định="" tính="" kết="" quả,="" cùng="" với="" khoảng="" thời="" gian="" kết="" quả="" 95%,="" đã="" được="" tính="">

T-test and logistic regression were used to compare the pre-defined KIT Score and model patient status (individuals predisposed to CKD versus healthy subjects), to assess its ability to distinguish subjects with early stages of CKD (eGFR 60–90, CKD 2) and normal eGFR but with predisposing risk factors for developing kidney damage (>9 0, CKD 1), từ những người tình nguyện khỏe mạnh (eGFR> 90), những người không có yếu tố nguy cơ nào được biết đến. Giá trị p <0,01 được="" coi="" là="" không="" đáng="">

3. Kết quả

Trong số 1169 bệnh nhân được tuyển chọn và lấy mẫu nước tiểu, 2 0 1 mẫu đáp ứng các tiêu chí loại trừ về lượng nước tiểu thấp và được loại bỏ để phân tích thêm, còn lại 968 bệnh nhân (nhân khẩu học trong Bảng 1). Sự phân bố của protein niệu ở 968 bệnh nhân này (0 đến 5469,73; trung vị (IQR) là 4,69 (0–39,11) mg / mmol) và phạm vi eGFR (được tính cho tất cả bệnh nhân CKD [23] (Hình 1C) ) làm nổi bật rằng chúng tôi đã nắm bắt được phổ của bệnh CKD (Hình 1A). Từ nhóm thuần tập này, 397 bệnh nhân và mẫu duy nhất sống sót sau tiêu chuẩn loại trừ (xem Phương pháp). Căn nguyên của chấn thương thận của họ bao gồm nhiều loại bệnh khác nhau, trong đó tăng huyết áp là nguyên nhân góp phần cho 42% bệnh nhân (Hình 1B). Hơn 60 phần trăm bệnh nhân có nhiều hơn một nguyên nhân góp phần vào chấn thương thận của họ. Cho rằng đây là một thực tế đối với hầu hết bệnh nhân CKD, đặc biệt là khi họ tiến triển đến các giai đoạn sau của CKD, Điểm KIT được lập mô hình để phát hiện chấn thương thận bất kể nguyên nhân cơ bản là gì. Mặc dù protein niệu là tiêu chuẩn vàng hiện tại để đánh giá chấn thương thận không xâm lấn, không có mối tương quan giữa eGFR và tỷ lệ protein / creatinin niệu (R 2=0. 0087) và như được chỉ ra bởi các nhà nghiên cứu khác [44 ], protein niệu kém ở các giai đoạn phân loại bệnh thận mạn (Hình 2).

Mục đích chính của nghiên cứu này là phát triển thang điểm KIT tổng hợp từ {{0}} (nguy cơ thấp) đến 100 (nguy cơ cao) và đánh giá tiềm năng khả năng của Điểm KIT định lượng trong việc phát hiện chấn thương thận với độ nhạy cao và thành phố cụ thể. Chúng tôi cho thấy rằng, mặc dù các phép đo chức năng thận hiện tại (eGFR và protein niệu) là dự đoán CKD giai đoạn muộn (Bảng 2), thang điểm KIT định lượng từ 0 (nguy cơ thấp nhất) đến 100 (nguy cơ cao nhất) cung cấp thông tin dự đoán

về tình trạng tổn thương thận trên và ngoài protein niệu và chỉ riêng chức năng thận (tỷ lệ khả năng xảy ra x {{0}}. 507, p-value <0,0001), và="" tốt="" hơn="" tiêu="" chuẩn="" hiện="" tại="" của="" các="" xét="" nghiệm="" chăm="" sóc="" (bảng="" 3).="" creatinine="" nước="" tiểu="" được="" sử="" dụng="" cho="" mục="" đích="" bình="" thường="" hóa="" trong="" thuật="" toán="" kit="" và="" kiểm="" soát="" các="" biến="" thể="" trong="" ngày="" và="" hydrat="" hóa="" (do="" đó="" làm="" giảm="" nhu="" cầu="" lấy="" mẫu="" nước="" tiểu="" theo="" thời="" gian)="" và="" không="" có="" ý="" nghĩa="" đối="" với="" giai="" đoạn="" ckd="" trong="" các="" phân="" tích="" đa="" biến="" (giá="" trị="" p="0.">

We also developed a qualitative KIT Score, an approach that can have important implications for population kidney risk assessment. A pre-defined risk threshold of 18.5 was established in the training data, allowing the separation of the KIT Scores into low (s18.5) and high risk (>18.5) nhóm chấn thương thận. Điều này đã được thiết lập trong bộ thử nghiệm để cung cấp thông tin dự đoán về tình trạng tổn thương thận trên và ngoài protein niệu và eGFR (tỷ lệ khả năng xảy ra là x=44. 244, p-value <0.>

Độ nhạy ước tính và thành phố cụ thể của Điểm KIT để phát hiện CKD lần lượt là 97,3% (bootstrap 95% CI: 94,6, 99,3%) và 94,1% (bootstrap 95% CI: 82,3, 100%). Ngược lại, độ nhạy và thành phố cụ thể của protein niệu lần lượt là 46,9% (bootstrap 95% CI: 38,8, 55,8%) và 88,2% (bootstrap 95% CI: 70,6, 100%) đối với cùng một mẫu. Tương tự, độ nhạy của SCr là 65,6 phần trăm (bootstrap 95 phần trăm CI: 57,4, 73,8 phần trăm). Việc ước tính các giá trị dự báo âm và dương của Điểm KIT phụ thuộc vào tỷ lệ lưu hành của bệnh, do đó tỷ lệ hiện mắc của bệnh tăng huyết áp có thể được lấy làm ví dụ. Tỷ lệ tăng huyết áp trong dân số Hoa Kỳ nói chung là khoảng 33 phần trăm. Do đó, giá trị dự đoán dương tính và tiêu cực ước tính của Điểm KIT định lượng cho tăng huyết áp sẽ lần lượt là ~ 89,1% và 98,2%.

Chúng tôi cho thấy sự đóng góp của các dấu ấn sinh học cá nhân vào Điểm KIT bên dưới (Bảng 4). Sự phong phú của cfDNA trong nước tiểu rất khác nhau giữa các loại bệnh thận khác nhau và không tương quan độc lập với giai đoạn CKD. Mối tương quan giữa các dấu ấn sinh học riêng lẻ là nhỏ (mối tương quan lớn nhất R 2=0. 14 là giữa eGFR và protein), cho thấy rằng mỗi dấu ấn sinh học đang cung cấp thông tin độc lập để dự đoán tình trạng tổn thương thận. Các phân tích thành phần chính (PCA) (Hình 2B) làm sáng tỏ mối quan hệ của các tổ hợp tuyến tính độc lập của các dấu ấn sinh học với tổng độ biến thiên trong các phép đo xét nghiệm và làm nổi bật sự đóng góp quan trọng của m-cfDNA, cf-DNA và CXCL10 khi cung cấp giá trị độc lập trong tạo Điểm KIT tổng hợp. Clusterin là dấu hiệu sinh học tình trạng chấn thương thận duy nhất không có ý nghĩa trong các phân tích đa biến (giá trị p=0. 1671). Những yếu tố này làm nổi bật rằng, mặc dù dữ liệu đã được công bố về mối tương quan giữa sự phong phú của cfDNA trong máu và rối loạn chức năng thận [27,28], cfDNA trong nước tiểu ở những cơ sở này sẽ không thành công và có giá trị trong việc bao gồm nhiều dấu ấn sinh học để phát triển điểm KIT tổng hợp cho Đánh giá CKD.

CXCL10 is a key inflammatory cytokine dysregulated in immune-mediated renal injury [45–51]. To evaluate where CXCL10 identifies a specific cause of CKD, such as immune-mediated causes of renal injury from systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, antineutrophil cytoplasmic antibody (ANCA)-positive vasculitis, we evaluated which CKD categories had a high abundance of urinary CXCL10. Interestingly, only ~30% of the immune-mediated cohort had very high CXCL10 values (>100 pg / mL), trong khi, trong nhiều mẫu tổn thương thận qua trung gian miễn dịch, các giá trị này thấp và có thể làm thuyên giảm bệnh hoặc tiếp xúc với liệu pháp miễn dịch. Trước sự ngạc nhiên của chúng tôi, ~ 30% nhóm thuần tập tăng huyết áp và tiểu đường cũng có nồng độ CXCL10 trong nước tiểu cao, mà không có bất kỳ bệnh qua trung gian miễn dịch hệ thống nào được xác định. Không có mối liên quan giữa nồng độ CXCL10 trong nước tiểu và giai đoạn suy thận.

Figure 2C displays the KIT Score, shown here as a function of CKD stage (based on the eGFR) and matched with presence (red dots) or absence (black dots) of proteinuria (threshold cut of urine protein/creatinine ratio of >0.2). The healthy controls are marked in green and are shown in a pre-CKD 1 or CKD 0 stage where the eGFR is >90 mL / phút / 1,73 m2 như ở CKD 1, không có protein niệu hoặc xác định nguy cơ chấn thương thận. Điều quan trọng cần lưu ý là ~ 15 phần trăm đối chứng khỏe mạnh được kiểm tra ở đây có điểm KIT tăng nhẹ (ngay trên ngưỡng nguy cơ cao là 18,5). Ở giai đoạn nghiên cứu này, chúng tôi không thể xác định được liệu những đối chứng khỏe mạnh có Điểm KIT cao hơn này có các yếu tố nguy cơ gây chấn thương thận không bị phát hiện hay không, vì tất cả các đối tượng đều đã được xác định danh tính.

Bảng 5 cho thấy sự phân tích của Điểm KIT trung bình theo giai đoạn CKD và đối với những người tình nguyện khỏe mạnh, và chúng tôi lưu ý rằng một quỹ đạo đáng kể là không thể tăng Điểm KIT bằng cách tiến lên giai đoạn CKD. Điểm KIT có thể dễ dàng phân biệt CKD 1 và 2 (28,9; 95% CI: 27,9, 29,9) với những người tình nguyện khỏe mạnh không bị CKD (11. 0; 95% CI: 9,5, 12,6); p-value <0. 0="" 0="" 0="" 01).="" khi="" so="" sánh="" với="" nhóm="" chứng="" khỏe="" mạnh,="" có="" mối="" liên="" hệ="" chặt="" chẽ="" giữa="" điểm="" kit="" và="" khuynh="" hướng="" chấn="" thương="" thận,="" ngay="" cả="" ở="" những="" đối="" tượng="" có="" chức="" năng="" thận="" bình="" thường="" trong="" ckd="" 1="" (egfr=""> 90), với tỷ lệ khả năng xảy ra là x=148. 4 (LR p-value <0,0001) và="" ngưỡng="" xét="" nghiệm="" 18,5="" có="" độ="" nhạy="" và="" thành="" phố="" cụ="" thể="" là="" 92,9="" (ktc="" 95%="" chính="" xác:="" 87,0%,="" 96,7%)="" và="" 94,4%="" (ktc="" 95%="" chính="" xác:="" 84,6,="" 98,8%),="" tương="" ứng.="" sự="" hoàn="" hảo="" tương="" tự="" này="" đã="" được="" khuếch="" đại="" hơn="" nữa="" cho="" khả="" năng="" xét="" nghiệm="" kit="" để="" phát="" hiện="" cả="" ckd="" 1="" và="" 2,="" với="" tỷ="" lệ="" khả="" năng="" x="196." 5="" (lr="" p-value=""><0,0001),>

the >18.5 KIT Score threshold having a sensitivity of 95.8% (exact 95% CI: 92.2, 98.1%) for early CKD detection. A total of 60% of patients in CKD 1 have elevated KIT Scores >18,5, mặc dù họ có chức năng thận "bình thường" và không có protein niệu. Đây chính xác là những bệnh nhân mục tiêu mà chúng tôi muốn nắm bắt bằng xét nghiệm KIT vì CKD giai đoạn đầu của họ sẽ không thể phát hiện được bằng các xét nghiệm chăm sóc tiêu chuẩn hiện hành. Trên thực tế, KIT Score xác định 92% bệnh nhân ở CKD 1 không có protein niệu là bị chấn thương thận sớm. Ở CKD 2-3, mặc dù khoảng 60% bệnh nhân không có protein niệu, KIT Score phát hiện tất cả các bệnh nhân có nguy cơ cao và đưa ra các biện pháp định lượng khác nhau cho gánh nặng tổn thương CKD của mỗi bệnh nhân. Ở CKD 4–5, protein niệu và Điểm KIT tương đồng hơn khi tổn thương thận tiến triển nặng và protein niệu được công nhận là dấu hiệu muộn của tổn thương thận.

Do đó, các kết quả chung này chứng minh rõ ràng rằng xét nghiệm đạt được các mục tiêu chính và phụ là dự đoán chấn thương thận với độ nhạy cao hơn so với tiêu chuẩn hiện tại của các xét nghiệm chăm sóc (eGFR, SCr, protein niệu) và, không giống như các xét nghiệm lâm sàng hiện tại của chúng tôi, Điểm KIT có thể xác định chính xác các giai đoạn rất sớm của CKD trong sàng lọc dân số.

4. Thảo luận

Động lực thúc đẩy sự phát triển của xét nghiệm KIT và Điểm KIT là sự thừa nhận gánh nặng của chấn thương thận không được phát hiện ngày càng lớn [52], kết hợp với sự yếu kém của tiêu chuẩn xét nghiệm chăm sóc hiện tại [53] trong việc phát hiện ra gánh nặng thực sự và “tiềm ẩn” của bệnh thận. Theo dõi tổn thương thận ở các cá nhân bằng cách lấy mẫu nước tiểu luôn là một mục tiêu rất được mong đợi, vì tín hiệu sinh học từ nước tiểu có thể cung cấp một cửa sổ thông tin cao về sức khỏe của thận. Tuy nhiên, xét nghiệm nước tiểu để dự đoán chấn thương thận, bất kể nguyên nhân cơ bản là gì, vẫn là một nhu cầu chưa được đáp ứng về mặt lâm sàng và là một thách thức sinh hóa để thực hiện, vì có nhiều chất gây nhiễu trong nước tiểu như protease [54,55], dẫn đến suy thoái dấu ấn sinh học và Phương sai pH nước tiểu giữa các cá thể cao — tất cả đều có thể cản trở sự phát triển của một xét nghiệm mạnh mẽ trong phòng thí nghiệm. Các nghiên cứu về protein được nhắm mục tiêu [56–59], được thúc đẩy bằng cách lấy mẫu nước tiểu theo quy trình từ các thử nghiệm lâm sàng tiềm năng, kéo dài một thập kỷ (trong các phòng thí nghiệm của chúng tôi tại Đại học Stanford và UCSF), đã dẫn đến việc phát triển các quy trình vận hành tiêu chuẩn (SOP) để thu thập, ổn định nước tiểu , xử lý, đánh giá các chất gây nhiễu, bảo quản và vận chuyển từ các địa điểm xa đến phòng thí nghiệm xử lý trung tâm [60]. Ngoài ra, hơn một thập kỷ nghiên cứu protein nước tiểu dựa trên phiên mã và LC-MS / MS [48,50,58,61–64] đã dẫn đến hiểu biết sinh học sâu hơn về chấn thương thận do các nguyên nhân khác nhau của CKD, dẫn đến việc lựa chọn của các dấu ấn sinh học để đưa vào xét nghiệm KIT để biểu thị tổn thương trên các ngăn khác nhau trong thận.

Tìm kiếm toàn diện này đã đưa chúng tôi đến sáu dấu ấn sinh học: cDNA, cfDNA được methyl hóa, clusterin, CXCL10, creatinine và protein niệu. DNA không tế bào đã được công nhận là một dấu hiệu nhạy cảm của gánh nặng bệnh tật trong huyết tương của bệnh nhân mắc bệnh tự miễn [65,66] và khối u [67]. Tuy nhiên, tiện ích của chúng trong huyết tương bị hạn chế trong việc tạo ra nhiều bệnh tật và bệnh tật, vì tổng gánh nặng cfDNA sẽ tạo ra các quá trình tích lũy của các bệnh khác nhau, trong khi phép đo DNA không có tế bào cơ quan hoặc vị trí cụ thể trong huyết tương đòi hỏi công nghệ giải trình tự tiên tiến và tin sinh học [68,69]. Tuy nhiên, vì cfDNA trong đặc điểm nước tiểu thực sự đóng góp từ thận, xét nghiệm KIT cfDNA cho phép phát hiện chấn thương thận cực kỳ nhạy thông qua xét nghiệm dựa trên ELISA rẻ tiền. Phép đo các đoạn cfDNA được methyl hóa cung cấp thêm thành phố cụ thể về loại tổn thương. Trong khi sự tăng methyl hóa toàn cầu có liên quan đến tổn thương thận liên quan đến miễn dịch và tăng chứng trào ngược máu, thì tình trạng giảm methyl hóa toàn cầu có liên quan đến suy giảm chức năng thận liên quan đến lão hóa và tổn thương do thiếu máu cục bộ do tái tưới máu ở thận [31,32,70]. Cũng như cơ sở lý luận của chúng tôi trong việc đo lường cfDNA, chúng tôi nhận thấy rằng những thay đổi toàn cầu trong trạng thái methyl hóa của cfDNA cho phép phân biệt chính xác giữa các trạng thái bệnh thận mà không cần giải trình tự locus hoặc PCR.

CXCL10 đã được thiết lập tốt như một dấu hiệu của tổn thương qua trung gian miễn dịch trong nhiều bối cảnh khác nhau do vai trò của nó như một phối tử cho thụ thể CXCR3 [33,34,37,45,51,71]. Trước đây, chúng tôi đã chỉ ra rằng CXCL10 và cfDNA, được đo bằng xét nghiệm KIT, có thể phát hiện rối loạn chức năng phổi mãn tính trong ghép phổi cũng như đào thải trong ghép thận [35,72,73]. Đáng chú ý, những gì chúng tôi phát hiện trong nghiên cứu này là có một số lượng đáng kể bệnh nhân mắc các bệnh thận không có miễn dịch truyền thống, chẳng hạn như tăng huyết áp và tiểu đường loại 2, có CXCL10 cao, có khả năng cho thấy một tiện ích rộng rãi hơn trong việc phát hiện sớm- chấn thương thận giai đoạn. Các nghiên cứu trước đây đã xác định bệnh tiểu đường loại 2 có thành phần trung gian CXCL 10- đáng kể [74] và đã xác định CXCL10 do tế bào nội mô sản xuất như một yếu tố góp phần gây tăng huyết áp cơ bản [75]. Kết luận của chúng tôi cho thấy CXCL10 không chỉ có thể xác định bệnh nhân bị tổn thương thận qua trung gian miễn dịch mà còn xác định được các nguyên nhân khác, những nguyên nhân có xu hướng biểu hiện ngấm ngầm với các triệu chứng lâm sàng muộn liên quan đến tiến triển của bệnh.

Protein tổng số trong nước tiểu và clusterin là những dấu hiệu xác định rõ ràng về rối loạn chức năng thận [38,40,41] và creatinine được xác nhận rõ ràng trong lĩnh vực này như một dấu ấn sinh học bình thường hóa [42,43]. Đáng ngạc nhiên là chúng tôi nhận thấy rằng clusterin, sau khi phân tích đa biến, không có ý nghĩa trong mô hình chấn thương thận của chúng tôi trong bối cảnh của các dấu ấn sinh học khác của chúng tôi. Điều này có thể do một số nguyên nhân, bao gồm mối tương quan của nó với tỷ lệ tổng số protein trên creatinine, các thành phần đã được đưa vào mô hình [38], cũng như sự biến đổi điểm cao do nhịp điệu ultradian chặt chẽ. tương quan nồng độ clusterin trong huyết tương và niệu [76,77].

Việc phát hiện sớm chấn thương thận có vai trò rất quan trọng trong việc hạn chế tốc độ tiến triển của bệnh thận mạn và tác động tích cực đến việc chăm sóc sức khỏe trên toàn thế giới. Vì những thay đổi huyết động của thận rất nhạy cảm với những xáo trộn toàn thân, việc cải thiện việc kiểm soát các nguyên nhân cơ bản chính của CKD sẽ là một lợi ích tức thì, đặc biệt là cải thiện và kiểm soát chặt chẽ huyết áp [78], ổn định và kiểm soát chặt chẽ tăng đường huyết [79], và phát hiện sớm và điều hòa miễn dịch kịp thời để cắt bỏ thận và tổn thương trong các bệnh hệ thống qua trung gian miễn dịch như lupus ban đỏ hệ thống [80] và viêm khớp dạng thấp [81]. Điểm số tăng liên tục và sớm có thể kích hoạt hình ảnh chụp thận để đánh giá bệnh lý u xơ tắc nghẽn, với sự can thiệp kịp thời để ngăn ngừa áp lực trong thận cao và bệnh lý kẽ thận tiến triển và bỏ ống thận. Việc phát hiện sớm tổn thương thận rất có thể xảy ra ở cơ sở chăm sóc ban đầu, nơi có sẵn thông lượng nhanh, xét nghiệm đơn giản với điểm số rủi ro thận định lượng có thể kích hoạt giới thiệu sớm hơn đến bác sĩ chuyên khoa thận để kiểm soát huyết áp, chế độ ăn uống. phương pháp điều trị, điều trị bệnh mạch vành và / hoặc mạch ngoại vi, nguyên nhân cơ bản của CKD và cân nhắc các liệu pháp bảo tồn thận [82,83]. Khả năng theo dõi định lượng độ phân giải của Điểm KIT theo thời gian mang lại cơ hội theo dõi độ phân giải chấn thương thận. Ngoài các lựa chọn sử dụng thuốc hoặc hỗ trợ để kiểm soát bệnh toàn thân tốt hơn, các loại thuốc bảo vệ tái tạo mới, chẳng hạn như thuốc ức chế SGLT2 và các thuốc khác [84], làm nổi bật thêm tầm quan trọng của việc có thể phát hiện sớm chấn thương thận, điều trị. và đảo ngược nó.

Sự chậm trễ trong việc phát hiện tổn thương thận và do đó việc chuyển tuyến bệnh nhân là một trở ngại đáng kể để đưa bệnh nhân mới vào phác đồ điều trị hiệu quả trong khi họ vẫn có cơ hội tối đa hóa lợi ích của các liệu pháp bảo tồn thận. Để nhấn mạnh rằng có bao nhiêu bệnh nhân "bỏ lỡ" cơ hội chẩn đoán CKD trong các giai đoạn sớm của bệnh, bệnh nhân ESRD sử dụng phòng cấp cứu với tỷ lệ cao hơn sáu lần so với tỷ lệ trung bình quốc gia đối với người lớn Hoa Kỳ — một nửa trong số đó dẫn đến nhập viện. [85]. Do đó, ngoài việc sử dụng Điểm KIT để theo dõi sự hồi phục của thận, việc sử dụng xét nghiệm này cũng có giá trị to lớn để theo dõi sự tiến triển của tổn thương thận để có thể thực hiện các biện pháp can thiệp khi cần thiết để ổn định tiến trình của quỹ đạo Điểm KIT. Quan sát rằng một phần ba bệnh nhân mắc bệnh thận mạn do tăng huyết áp hoặc đái tháo đường cũng có hệ miễn dịch mạnh / trong tình trạng bệnh lý do chấn thương thận của họ cho thấy rằng sự đánh giá cao tính không đồng nhất sinh học của các bệnh phân loại khác nhau theo các giá trị dấu ấn sinh học riêng lẻ trong xét nghiệm KIT, và các nghiên cứu thẩm vấn khác, sẽ cho phép các phương pháp điều trị tùy chỉnh hơn cho bệnh nhân CKD.

Các nghiên cứu đang thực hiện được lên kế hoạch và đang tiến hành, theo đó việc đánh giá nối tiếp Điểm KIT trước khi kết thúc với xét nghiệm KIT trước khi kết thúc sẽ cho phép chúng tôi đánh giá giá trị của các dấu ấn sinh học riêng lẻ trong xét nghiệm trong quá trình tổn thương thận và phục hồi thận. Ngoài ra, chúng tôi đang thiết lập sự hợp tác với các đối tác dược phẩm, nơi đánh giá hàng loạt xét nghiệm KIT có thể được sử dụng như một phương tiện để theo dõi không xâm lấn và chính xác tổn thương thận sớm do độc tính trên thận của thuốc, vốn có đối với nhiều chất điều biến miễn dịch, chẳng hạn như calcineurin chất ức chế [86] và chất chống TNF [87]; các tác nhân hóa trị liệu như cisplatin [88], aminoglycosid [89], và các liệu pháp miễn dịch mới hơn [90], cũng như tiếp xúc với môi trường tương phản hạt nhân phóng xạ cho mục đích hình ảnh [91]. Các nhóm thuần tập bổ sung đang được tập hợp để phân tích trong đó bệnh nhân đã được theo dõi dọc theo quá trình tiến triển của CKD, điều này sẽ cho phép chúng tôi hiểu rõ hơn về quỹ đạo chi tiết của Điểm KIT và có thể giúp tái tạo các giai đoạn CKD.

Khi các dấu ấn sinh học của xét nghiệm được chọn và xét nghiệm được phát triển với mục đích cụ thể để phát hiện tổn thương thận rất sớm, chúng tôi cũng quan sát thấy rằng xét nghiệm KIT có thể phát hiện ra rằng một tỷ lệ nhỏ các đối chứng "bình thường" hiển thị Điểm KIT nước tiểu lơ lửng ở mức cao- ngưỡng rủi ro 18,5. Mặc dù không được xác định, có thể đây không phải là nhiễu xét nghiệm và những trường hợp này là dương tính thực sự với dấu hiệu nhận biết rất sớm về nguy cơ chấn thương thận trong giai đoạn tiền CKD 1 hoặc CKD 0. Vì 96% người mắc bệnh CKD không nhận ra mình mắc bệnh [92], một thách thức không nhỏ trong việc phát triển các mô hình tổn thương thận là khả năng cao những bệnh nhân được tuyển chọn làm nhóm chứng khỏe mạnh thực sự mắc bệnh thận giai đoạn đầu. Ví dụ, dự án kéo dài tuổi thọ của con người, do Craig Venter dẫn đầu với thử nghiệm Hạt nhân Sức khỏe, đã giải trình tự rộng rãi và thực hiện các xét nghiệm sàng lọc bổ sung ở những người trưởng thành không có triệu chứng và tìm thấy các mối tương quan lâm sàng về bệnh tiềm ẩn ở 21 phần trăm những người tham gia nghiên cứu "khỏe mạnh" của họ bao gồm cả tiết niệu. / bệnh thận, cho thấy sự cần thiết phải tăng cường tầm soát. Điều này đặc biệt đúng với những bệnh mà can thiệp sớm có thể trì hoãn hoặc thậm chí đảo ngược sự tiến triển của bệnh. Chúng ta coi CKD và chấn thương thận nói chung là một căn bệnh điển hình trong đó điều này là đúng, vì nhiều can thiệp điều trị và lối sống có thể ngăn chặn sự tiến triển thêm của suy giảm chức năng thận [6,82,83,92].

Một hạn chế của thiết kế nghiên cứu hiện tại là việc sử dụng dân số được làm giàu cho các đối tượng CKD từ một địa điểm chăm sóc cấp ba. Các đối tượng thu được từ các cơ sở khám nghiệm và cộng đồng nhiều hơn có thể đại diện hơn cho dân số nói chung, đặc biệt để phát hiện CKD giai đoạn sớm. Ngoài ra, nghiên cứu này là cắt ngang và có thể không đại diện đầy đủ cho CKD giai đoạn sớm và giai đoạn muộn. Các nghiên cứu dọc theo dõi bệnh nhân có dấu hiệu CKD giai đoạn sớm được lên kế hoạch để đánh giá cải thiện khả năng phát hiện sớm của Điểm KIT và tác động của việc phát hiện sớm đối với sự tiến triển của CKD. Cuối cùng, có thể tăng thêm Điểm KIT với các dấu ấn sinh học bổ sung để cho phép cải thiện chẩn đoán phân biệt với CKD và giảm thiểu nhu cầu đo creatinin huyết thanh và protein niệu.

Không thể nhấn mạnh tác động kinh tế tích cực của việc phát hiện sớm và điều trị chấn thương thận. Gần một phần ba ngân sách Medicare được dành cho việc quản lý bệnh tật và chấn thương thận ở Hoa Kỳ. Việc mất chức năng thận trong CKD 5 làm tăng thêm gánh nặng trị giá ~ $ 80, 000 mỗi năm do hỗ trợ lọc máu. Mặc dù ghép thận giúp bệnh nhân có thể chạy thận nhân tạo, nhưng sự thiếu hụt người hiến thận, cả ghép thận sống và xác, với chi phí thủ thuật ban đầu là ~ 100 đô la, 000, tiếp theo là chi phí thuốc duy trì là ~ 20 đô la, {{ 6}} / năm, dẫn đến ngân sách Medicare lọc máu chỉ có một khoản chênh lệch nhỏ [93]. Quỹ đạo của số lượng bệnh nhân CKD dự kiến ​​sẽ tiếp tục tăng trên toàn thế giới, với xu hướng béo phì ngày càng lớn, dẫn đến số lượng người bị tăng huyết áp và đái tháo đường ngày càng tăng [94]. Ngoài ra, sự khác biệt về sắc tộc trong các bệnh thận dẫn đến các vấn đề chăm sóc sức khỏe quốc gia, đòi hỏi phải sàng lọc dân số bằng sinh thiết thận để phát hiện sớm tổn thương thận do bệnh thận IgA ở Đông Nam Á [95], nơi bệnh thận IgA là nguyên nhân chính gây suy thận . Việc đưa vào một xét nghiệm không xâm lấn nhạy cảm đối với tổn thương thận, để thay thế các thủ thuật sinh thiết xâm lấn, chi phí cao, tỷ lệ mắc bệnh cao, sẽ mang lại lợi ích kinh tế xã hội lớn cho những nhóm dân số có nguy cơ này.

Cistanche tubulosa ngăn ngừa bệnh thận và chấn thương, bấm vào đây để lấy mẫu

Kết luận, nghiên cứu này cung cấp bản thiết kế cho các dấu ấn sinh học trong xét nghiệm KIT, quy trình phát triển thuật toán xét nghiệm KIT, điểm KIT và hiệu suất của nó để phát hiện sớm chấn thương thận và so sánh trực tiếp với tiêu chuẩn hiện tại của các xét nghiệm chăm sóc. Nghiên cứu này đề xuất rằng xét nghiệm KIT có thể được sử dụng (1) như một xét nghiệm sàng lọc khi có lo ngại về các bệnh đồng mắc được biết là làm tăng nguy cơ mắc bệnh thận mạn, chẳng hạn như bệnh tim mạch, béo phì, tiểu đường mà không có tài liệu về thận bất thường. chức năng của các xét nghiệm hiện tại; (2) như một xét nghiệm bổ trợ để theo dõi gánh nặng và tiến triển chính xác của CKD ở những bệnh nhân mà tiêu chuẩn xét nghiệm chăm sóc hiện tại đã phát hiện tổn thương thận, tức là những bệnh nhân đã biết trước CKD ở các giai đoạn khác nhau của bệnh thận; (3) cho phép đánh giá nhạy cảm về khả năng hồi phục sau chấn thương thận khi tiếp xúc với các liệu pháp bảo vệ cải tạo và các lựa chọn quản lý khác nhau. Cần có những nghiên cứu sâu hơn và được lên kế hoạch để tầm soát dọc bệnh nhân theo thời gian để hiểu rõ hơn về lịch sử tự nhiên của sự tiến triển của CKD, lợi ích của việc phát hiện, can thiệp và theo dõi sớm và các điểm nhiễm trùng nơi tổn thương CKD trở nên và tiến triển .

Sự đóng góp của tác giả:MMS, JYCY, DW và TKS đã thiết kế nghiên cứu và thử nghiệm; JML, ID, VL, SS, DL, KS, RS, AC, PC.L. và ML, đã thực hiện các thử nghiệm; DW, JYCY, RDS và MMS đã phân tích dữ liệu; DW, JYCY và MMS đã thực hiện các thiết bị đo; JYCY, DW, RDS, TKS và MMS đã soạn thảo và sửa đổi bài báo; tất cả các tác giả đã sửa đổi bản thảo một cách phê bình về nội dung trí tuệ quan trọng và chấp thuận phiên bản cuối cùng của bản thảo. MMS có toàn quyền truy cập vào tất cả dữ liệu trong nghiên cứu và chịu trách nhiệm về tính toàn vẹn của dữ liệu và tính chính xác của việc phân tích dữ liệu.

Kinh phí:MMS và TKS có sự hỗ trợ nghiên cứu từ NIH (NIAID và NIDDK). Các nhà tài trợ không có vai trò gì trong việc thiết kế nghiên cứu, thu thập dữ liệu, phân tích, quyết định xuất bản hoặc chuẩn bị bản thảo.

Sự nhìn nhận:Chúng tôi rất biết ơn sự giúp đỡ từ các bác sĩ, điều phối viên lâm sàng, nhân viên nghiên cứu, bệnh nhân và gia đình bệnh nhân.

Xung đột lợi ích:MMS, DW và JYCY là những người sáng lập KIT Bio, Inc. (Los Altos, CA, USA), IP thuộc sở hữu độc quyền của Regents, Đại học California San Francisco và được cấp phép cho KIT Bio. Tất cả các tác giả khác tuyên bố không quan tâm

1. KIT Bio, 665 3 rd Street, San Francisco, CA 94107, USA; drew@kit.bio (DW); joshua.yang@ucsf.edu (JYCY)

2. Khoa Phẫu thuật, Đại học California San Francisco, San Francisco, CA 94143, Hoa Kỳ;

reuben.sarwal@ucsf.edu (RDS); tara.sigdel@ucsf.edu (TKS); juliane.liberto@ucsf.edu (JML);

izabella.damm@ucsfmedctr.org (ID); victorialouie11@gmail.com (VL); shristisigdel@gmail.com (SS); peichen@berkeley.edu (P.-CL)

3. Chương trình Thạc sĩ Y học Dịch thuật, Đại học California Berkeley, Berkeley, CA 94720, Hoa Kỳ; devonlivingstone@berkeley.edu (DL); katherine _ soh@berkeley.edu (KS); archakra@berkeley.edu (AC); liangmichael@berkeley.edu (ML)

Người giới thiệu

1. KDIGO 2012. Hướng dẫn thực hành lâm sàng để đánh giá và quản lý bệnh thận mãn tính; KDIGO: Brussels, Bỉ, 2013.

2. Levin, A.; Stevens, Chuyên gia sản xuất Tóm tắt về Hướng dẫn CKD KDIGO 2012: Hậu trường, cần hướng dẫn và một khuôn khổ để tiến về phía trước. Thận Int. 2014, 85, 49–61. [CrossRef]

3. Levey, AS; Stevens, LA; Schmid, CH; Zhang, YL; Castro, AF; Feldman, HI; Kusek, JW; Trứng, P.; Van Lente, F.; Greene, T.; et al. Một phương trình mới để ước tính tỷ lệ lọc cầu thận. Ann. Thực tập sinh. Med. 2009, 150, 604–612. [CrossRef] [PubMed]

4. Khati, NJ; Gorodenker, J.; Hill, MC Sinh thiết bụng có hướng dẫn siêu âm. Siêu âm Q. 2011, 27, 255–268. [CrossRef] [PubMed]

5. Chiên, thận LF Chức năng như một dự báo về tử vong không do tim mạch. Mứt. Soc. Nephrol. 2005, 16, 3728–3735. [CrossRef]

6. Qaseem, A.; Hopkins, RH; Ngọt ngào, DE; Starkey, M.; Shekelle, P. Sàng lọc, theo dõi và điều trị CKD giai đoạn 1 đến 3: Hướng dẫn thực hành lâm sàng từ CGC của ACP. Ann. Thực tập sinh. Med. 2013, 159, 835–847. [PubMed]

7. Mishra, J.; Nha sĩ, C.; Tarabishi, R .; Mitsnefes, MM; Ma, Q.; Kelly, C.; Ruf, SM; Zahedi, K .; Shao, M.; Đậu, J .; et al. Lipocalin liên kết với gelatinase của bạch cầu trung tính (NGAL) như một dấu ấn sinh học cho chấn thương thận cấp tính sau phẫu thuật tim. Lancet 2005, 365, 1231–1238. [CrossRef]

8. Parikh, CR; Jani, A. .; Melnikov, VY; Faubel, S.; Edelstein, CL U interleukin -18 là một dấu hiệu của bệnh hoại tử ống thận cấp tính ở người. Là. J. Thận Dis. 2004, 43, 405–414. [CrossRef] [PubMed]

9. Hán, WK; Bailly, V .; Abichandani, R .; Thadhani, R .; Bonventre, JV Phân tử Tổn thương Thận -1 (KIM -1): Một dấu ấn sinh học mới cho tổn thương ống thận gần ở người. Thận Int. 2002, 62, 237–244. [CrossRef] [PubMed]

10. Matteucci, E.; Carmellini, M.; Bertoni, C.; Boldrini, E.; Mosca, F.; Giampietro, O. Tỷ lệ bài tiết nước tiểu của nhiều chỉ số thận sau khi ghép thận: Dấu hiệu lâm sàng cho kết quả ghép sớm. Ren. Thất bại. 1998, 20, 325–330. [CrossRef]

11. Lybarger, JA; Lichtveld, MY; Amler, RW Suy thận Xét nghiệm y sinh học về thận cho những người tiếp xúc với các chất độc hại trong môi trường. Ren. Thất bại. 1999, 21, 263–274. [CrossRef]

12. Donadio, C.; Tramonti, G.; Lucchesi, A.; Giordani, R .; Lucchetti, A.; Bianchi, C. Gamma-glutamyltransferase là một chất đánh dấu đáng tin cậy cho tác dụng hình ống của phương tiện tương phản. Ren. Thất bại. 1998, 20, 319–324. [CrossRef] [PubMed]

13. Nouwen, EJ; De Broe, ME Phosphatase kiềm ở ruột so với mô-nonspeci như chất chỉ điểm bổ sung cho nước tiểu cho ống lượn gần. Thận Int. Suppl. 1994, 47, S43 – S51. [PubMed]

14. Gatta, A.; Mazzella, G.; Amodio, P.; Menon, F.; Angeli, P.; Schiaffino, E.; Schmid, C.Phát hiện các bước ban đầu của bệnh thận do Cadmium — So sánh các hình thái vi thể ánh sáng và điện tử với sự bài tiết enzyme trong nước tiểu. Nephron 1989, 51, 20–24. [CrossRef] [PubMed]

15. Locatelli, F.; Del Vecchio, L.; Pozzoni, P. Tầm quan trọng của việc phát hiện sớm bệnh thận mãn tính. Nephrol. Quay số. Cấy. 2002, 17 (Bổ sung 11), 2–7. [CrossRef]

16. Máy tạo sóng, G.; Ruggenenti, P.; Perico, N. Bệnh thận mãn tính: Cải thiện lợi ích của việc ức chế hệ thống renin-angiotensin. Ann. Thực tập sinh. Med. 2002, 136, 604–615. [CrossRef]

17. Gansevoort, RT Thận hư quá nhiều? Dịch bệnh CKD là có thật và đáng lo ngại. Một chế độ xem CHUYÊN NGHIỆP. Nephrol. Quay số. Cấy. 2018, 34, 577–580. [CrossRef]

18. Coresh, J.; Byrd-Holt, D.; Astor, BC; Briggs, JP; Máy đánh trứng, PW; Lacher, DA; Hostetter, TH Nhận thức về bệnh thận mãn tính, tỷ lệ hiện mắc và xu hướng ở người lớn Hoa Kỳ, 1999 đến 2000. J. Am. Soc. Nephrol. 2005, 16, 180–188. [CrossRef] [PubMed]

19. Coresh, J.; Wei, GL; McQuillan, G.; Brancati, FL; Levey, AS; Jones, C.; Klag, MJ Tỷ lệ cao huyết áp và tăng nồng độ creatinin huyết thanh ở Hoa Kỳ: Kết quả từ Khảo sát Kiểm tra Dinh dưỡng và Sức khỏe Quốc gia lần thứ ba (1988–1994). Vòm. Thực tập sinh. Med. 2001, 161, 1207–1216. [CrossRef] [PubMed]

20. McClellan, WM; Hiệp sĩ, DF; Karp, H.; Brown, WW Phát hiện sớm và điều trị bệnh thận ở bệnh nhân đái tháo đường và tăng huyết áp nhập viện: Sự khác biệt quan trọng giữa thực hành và các hướng dẫn đã được công bố. Là. J. Thận Dis. 1997, 29, 368–375. [CrossRef]