Căng thẳng oxy hóa là một trong những tiền đề quan trọng của các bệnh chuyển hóa khác nhau Phần 1

Xin vui lòng liên hệoscar.xiao@wecistanche.comđể biết thêm thông tin

Trừu tượng:Stress oxy hóa là một trong những tiền chất quan trọng của các bệnh chuyển hóa khác nhau như bệnh tiểu đường, bệnh Parkinson, bệnh tim mạch, ung thư, ... Các báo cáo khoa học khác nhau đã chỉ ra rằng các chất chuyển hóa thứ cấp của thực vật đóng một vai trò quan trọng trong việc ngăn ngừa stress oxy hóa và các tác hại của nó. Về mặt này, nghiên cứu này đã được lên kế hoạch để điều tra hồ sơ phenolic và khả năng chống oxy hóa và chống đái tháo đường của các chất chiết xuất từ ​​nước từ các loài Cistus Thổ Nhĩ Kỳ bằng cách sử dụng các phương pháp in vitro. Quy trình mô phỏng quá trình phân hủy trong ống nghiệm được áp dụng cho tất cả các chất chiết xuất để ước tính khả dụng sinh học của hàm lượng phenolic của chúng. Tổng hàm lượng phenolic, flavonoid, axit phenolic và proanthocyanidin được xác định cho tất cả các giai đoạn tiêu hóa. Ngoài ra, những thay đổi về số lượng của các flavonoid đánh dấu được chỉ định (salidroside, hyperoside và quercitrin) được theo dõi bằng phân tích Sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao (TLC). Các tiềm năng hoạt động chống oxy hóa của các chất chiết xuất đã được nghiên cứu bằng nhiều phương pháp khác nhau để tiết lộ hồ sơ hoạt động chi tiết của chúng. Mặt khác, các enzym a-amylase và a-glucosidase in vitro và các hoạt động ức chế sản phẩm cuối glycation tiên tiến (AGE) của các chất chiết xuất được xác định để đánh giá tiềm năng chống đái tháo đường của chất chiết xuất. Các kết quả cho thấy rằng chất chiết xuất từ ​​nước thu được từ các bộ phận trên không của các loài Cistus Thổ Nhĩ Kỳ có hàm lượng phenolic phong phú và các hoạt động chống tiểu đường và chống oxy hóa mạnh; tuy nhiên, cấu hình hoạt tính sinh học và nồng độ flavonoid đánh dấu của chúng có thể bị ảnh hưởng đáng kể bởi quá trình tiêu hóa của con người. Kết quả cho thấy rằng tổng hàm lượng phenol, hoạt động chống oxy hóa và ức chế enzym liên quan đến bệnh tiểu đường của các mẫu khả dụng sinh học thấp hơn so với các mẫu không được tiêu hóa trong tất cả các chất chiết xuất.

Từ khóa:Các loài Cistus của Thổ Nhĩ Kỳ; cistanche tubulosa inheritos; hoạt động chống oxy hóa; cistanche คือ; mô phỏng quá trình tiêu hóa của con người; HPTLC; Bệnh tiểu đường

1. Giới thiệu

Họ Cistaceae bao gồm cây bụi và cây thân thảo hàng năm hoặc lâu năm và chi Cistus là một trong những thành viên phân bố rộng rãi của họ này. Hơn 50 loài Cistus phân bố trên toàn thế giới, và chúng thường được gọi là "rockrose" [1]. Các cuộc điều tra in vitro và in vivo trước đây đã chứng minh rằng các loài Cistus có các hoạt tính kháng vi rút, chống đái tháo đường, chống oxy hóa, kháng khuẩn và chống viêm [23]. Các hợp chất phenolic khác nhau (axit phenolic, flavonoid, proanthocyanidins) và tecpen đã được phân lập từ các loài Cistus, và lợi ích điều trị của chúng nói chung là do các thành phần này [4,5].

Ở Thổ Nhĩ Kỳ, năm loài Cistus mọc tự nhiên là C. salvifolius L., C. paroiflorus Lam, C.monspeliensis L., C.laurifolius L. và C.creticus L. [6]. Trong các ghi chép dân tộc học của y học dân gian Thổ Nhĩ Kỳ, các cơ quan khác nhau của loài Cistus thường được ghi nhận như một phương thuốc. Dịch truyền được chuẩn bị từ các nhánh của C. laurifolius, C. salviifolius và C. creticus được sử dụng bằng đường uống để chống lại bệnh tiểu đường ở quận Edremit (Balkesir) [7]. Nước sắc được chế biến từ hoa của C.creticus và C. salviifolius được sử dụng trong nội bộ chống loét dạ dày tá tràng ở Marmaris (Mugla) [8], trong khi nước sắc từ nụ hoa chưa mở của C. laurifolius cũng được sử dụng cho mục đích tương tự. Ở Tây Anatolia, nước sắc của lá C. laurifolius được sử dụng bên trong để chống sốt và đau dạ dày và bên ngoài, thông qua việc tắm, chống lại các cơn đau thấp khớp [9].

Vui lòng bấm vào đây để biết thêm

Một thực tế đã được chứng minh rõ ràng rằng sự kết hợp cao của các loại oxy phản ứng (ROS) gây ra stress oxy hóa, là một trong những tiền chất quan trọng của các rối loạn chuyển hóa khác nhau như ung thư, tiểu đường, các vấn đề tim mạch, bệnh Alzheimer, v.v. [10] Do đó, sử dụng chất chống oxy hóa đã trở thành một cách tiếp cận tổng thể phổ biến để ngăn ngừa hoặc điều trị các tình trạng như vậy trong thực hành khoa học hiện nay. Các hoạt động chống oxy hóa của các chất chiết xuất từ ​​thực vật đã được báo cáo bởi một số lượng lớn các nhà nghiên cứu [11-14]. Như một cách tiếp cận thông thường, tiềm năng chống oxy hóa của các chất chiết xuất từ ​​thực vật thường được dành cho hàm lượng phenolic của chúng. Nhiều bằng chứng có sẵn trong các tài liệu khoa học rằng các loài Cistus cũng rất giàu thành phần phenolic và cuối cùng có một mức độ hoạt động chống oxy hóa đáng kể. Tuy nhiên, khái niệm sinh khả dụng của các chất phytochemical này trong cơ thể đã không được xem xét trong hầu hết các nghiên cứu này.

Một thực tế nổi tiếng là tình trạng đường tiêu hóa ảnh hưởng đến các hợp chất phenolic do các điều kiện pH khác nhau,cistanche và tongkat ali reddithoạt động của enzym và hệ vi sinh vật. Mặt khác, cấu trúc hóa học của các hợp chất phenolic và chất nền thực vật cũng là những yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến sinh khả dụng của chúng [15]. Do đó, trong nghiên cứu hiện tại, phương pháp mô phỏng quá trình phân hủy trong ống nghiệm đã được áp dụng cho tất cả các chất chiết xuất để ước tính khả năng sinh học của hàm lượng phenolic. Để theo dõi quá trình chuyển đổi, tổng hàm lượng phenolic, flavonoid, axit phenolic và proanthocyanidin được xác định trong tất cả các giai đoạn của quá trình tiêu hóa. Hơn nữa, các hoạt động chống oxy hóa của các chất chiết xuất đã được nghiên cứu bằng các phương pháp đo quang phổ khác nhau về cơ học để tiết lộ các cấu hình hoạt động toàn diện của chúng. Các tiềm năng chống oxy hóa của tất cả các mẫu thu được bằng quá trình phân hủy đã được khảo sát bằng các thử nghiệm DPPH và DMPD (loại bỏ gốc tự do), FRAP và CUPRAC (khả năng khử kim loại), và TOAC (tổng khả năng chống oxy hóa). Trước đây, salidroside, hyperoside và quercitrin đã được xác định là flavonoid đánh dấu của các loài Cistus bởi Guzelmeric et al. [16] Do đó, việc xác định định tính và định lượng các glycoside flavonol này được thực hiện với hệ thống Sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao và các chỉ số sinh khả dụng của chúng đã được ước tính.

Cistanche có thể cải thiện khả năng miễn dịch

Đái tháo đường (Đái tháo đường) là một bệnh rối loạn chuyển hóa phổ biến và được mô tả bởi sự giảm bài tiết insulin của các tế bào tuyến tụy hoặc cơ thể thiếu phản ứng với insulin. Có hai loại DM: Phụ thuộc insulin (Loại I) và không phụ thuộc insulin (Loại II) [17]. （lấy bao nhiêu cistanche） Một trong những chiến lược điều trị đối với loại DM là kiểm soát tình trạng tăng đường huyết sau ăn, được định nghĩa là "sự gia tăng đáng kể nồng độ đường huyết trong máu sau bữa ăn". glucosidase, là chất cần thiết để kiểm soát tăng đường huyết sau ăn. (cistanche tubulosa trong tiếng Trung Quốc) Trong hệ tiêu hóa, o-amylase tiêu hóa tinh bột thành các loại đường khử như cyclodextrin, lactose và maltose, và -glucosidase phân hủy các loại đường này thành glucose. Do đó, ức chế các enzym tiêu hóa được coi là một phương thức hành động có thể thực hiện để điều trị tăng đường huyết sau ăn [18] Mặt khác, mức đường huyết tăng cao có thể kích hoạt sự hình thành các AGE được định nghĩa là "các hợp chất được hình thành do phản ứng glycation của enzym. ". Aminoguanidine, tưởng tượng và metformin là những ví dụ về chất ức chế tổng hợp AGEs, và acarbose, miglitol, và voglibose là những chất ức chế tổng hợp đối với các enzym tiêu hóa và đã được sử dụng trong nhiều thập kỷ qua [20,21]. Tuy nhiên, các thử nghiệm lâm sàng và thí nghiệm in vivo đã chứng minh các tác dụng phụ của các chất ức chế tổng hợp này, chẳng hạn như độc tính trên gan, chướng bụng, đầy hơi, sao băng, thiếu máu, nôn mửa, suy tim, v.v. [21,22]. Do những tác động có hại như vậy, nhiều nghiên cứu đã liên quan đến khả năng ức chế của các chất chiết xuất từ ​​thực vật đối với AGEs [23-25]. Người ta đã báo cáo rằng các chất phytochemical, đặc biệt là các hợp chất phenolic như axit phenolic, flavonoid và proanthocyanidins, đã ức chế đáng kể sự hình thành AGEs và các hoạt động của enzyme liên quan, tức là, x-amylase và -glucosidase [26-28].

Vì chiết nước (truyền hoặc sắc) là kỹ thuật bào chế phổ biến trong y học cổ truyền,người thụ hưởng cistanchenghiên cứu này được thực hiện trên các chất chiết xuất từ ​​nước từ các loài Cistus Thổ Nhĩ Kỳ trước và sau khi mô phỏng quá trình tiêu hóa đường tiêu hóa trong ống nghiệm. Về mặt này, cấu hình phenol và khả năng chống oxy hóa và chống đái tháo đường của các chất chiết xuất từ ​​nước và các chất chuyển hóa tiêu hóa của chúng đã được nghiên cứu một cách tương đối. Theo khảo sát tham khảo, hoạt động ức chế của chiết xuất Cistus trên AGEs được nghiên cứu lần đầu tiên trong nghiên cứu này. Ngoài ra, phân tích định lượng flavonoid đánh dấu cũng được thực hiện bằng phân tích HPTLC. Kỹ thuật mô phỏng quá trình phân hủy in vitro được áp dụng cho tất cả các chất chiết xuất để theo dõi sự thay đổi nồng độ và cấu trúc hoạt tính sinh học của các hợp chất phenol trong điều kiện tiêu hóa.

2. Kết quả

2.1. Đánh giá hàm lượng phenolic của các mẫu

Theo kết quả thể hiện trong Bảng 1, chiết xuất trong nước của C. saloifolius có tổng hàm lượng flavonoid, phenolic và axit phenolic cao hơn các loài được nghiên cứu khác, trong khi các mẫu ND (không tiêu hóa) của C.creticus và C.laurifolius có hàm lượng proanthocyanidin cao nhất. các nội dung. Sự giảm đáng kể nhất được phát hiện trong tổng hàm lượng proanthocyanidins của tất cả các chất chiết xuất. Không thể phát hiện được lượng proanthocyanidin của mẫu IN (khả dụng sinh học) trong tất cả các dịch chiết dạng nước. Kết quả là, hàm lượng phenolic trong các chất chiết xuất từ ​​nước bị ảnh hưởng tiêu cực bởi quy trình mô phỏng quá trình tiêu hóa ở người trong ống nghiệm.

Chữ viết tắt của các mẫu là ND: Không tiêu hóa; PG: Postgastri; IN: Khả dụng sinh học; BAvI: Chỉ số sinh khả dụng; Kết quả BR được công bố là giá trị trung bình của số ba lần ± độ lệch chuẩn (SD) và là mg đương lượng axit gallic (GAE) trong 1 g mẫu; Kết quả được biểu thị bằng giá trị trung bình của ba lần ± độ lệch chuẩn (SD) và như mg quercetin đương lượng (QE) trong 1 g mẫu; D Kết quả được biểu thị bằng giá trị trung bình của ba lần ± độ lệch chuẩn (SD) và như mg đương lượng axit caffeic (CAE) trong 1g mẫu; "Các kết quả được biểu thị bằng giá trị trung bình của ba lần 士 độ lệch chuẩn （SD） và tương đương mg catechin （CE） trong mẫu lg; Monspeliensis, CPA cho C.parviflorus, CSA cho C.salviifolius. Các chữ cái khác nhau trong cùng một hàng biểu thị ý nghĩa (p<>

Như được trình bày trong Bảng 2, hàm lượng salidroside và hyperoside trong dịch chiết nước của C. salviifolius tương đối cao hơn so với các loài khác, trong khi quercitrin không được tìm thấy. Mặt khác, quercitrin được tìm thấy ở nồng độ cao nhất trong tất cả các mẫu mô phỏng của dịch chiết nước từ C. creticus, nhưng nồng độ của nó giảm đáng kể trong các mẫu khả dụng sinh học. Ngoài ra, sắc ký đồ HPTLC và phổ UV lớp phủ của các chất chuẩn và các điểm tương ứng trong các vết của tất cả các chất chiết xuất được trình bày trong Hình 1.

Hình 1. (A) Lớp phủ phổ UV của salidroside và các điểm tương ứng trong các vết của tất cả các chất chiết xuất. (B) Phủ phổ UV của hyperoside và các điểm tương ứng trong các vết của tất cả các chất chiết xuất. (C) Phủ phổ UV của quercitrin và các điểm tương ứng trong các vết của tất cả các chất chiết xuất. (D) Sắc đồ HPTLC của: 1. VÀ 2. CCA PG, 3. CAIN, 4. CLA ND, 5.CLA PG, 6.CLAIN, 7.Tiliroside （Rf ≈ 0. 65）, 8.Hyperoside （Bf ≈ 0. 35）, 9.Quercitrin （Rf × {{ 14}}. 45）, 10. CMA ND, 11. CMAPG, 12.CHAIN, 13.AND, 14. CPA PG, 15.CPA IN, 16.CSAND, 17.CSAPG, 18.CSA IN. Pha động: EtOAc / CHCh / CHCOOH / HCOOH / H2O (100: 25: 10: 10: 10: 10: 11); Derivatization : Thuốc thử NPR. Hình dung: 366 nm.

2.2. Đánh giá hoạt động chống oxy hóa của các mẫu

Như được trình bày trong Bảng 3, các mẫu chiết xuất từ ​​Cistus khả dụng sinh học thể hiện hoạt tính chống oxy hóa nhặt gốc yếu hơn so với các mẫu không tiêu hóa và sau dạ dày của chúng. Các mẫu ND và PG của tất cả các chất chiết xuất trong nước cho thấy hoạt động thu gom DPPHradical đáng kể và có giá trị ECso thấp hơn so với hợp chất đối chứng BHT (Giá trị ECso: 5,83 ± 0. 2 ug / mL）. Tuy nhiên, tất cả các chất chiết xuất đều hiển thị mức độ quét gốc DMPD yếu hơn hoạt tính hơn hợp chất tham chiếu Trolox (5,82 ± 0. 37 ug / mL) .ND, PG và IN các mẫu CPA có hoạt tính DMPD tốt hơn so với các mẫu chiết xuất khác.

Tương tự như các thử nghiệm hoạt động nhặt rác triệt để, các mẫu chất chiết xuất từ ​​Cistus khả dụng sinh học cũng cho thấy các hoạt động khử kim loại và tổng số chất chống oxy hóa yếu hơn so với các mẫu không tiêu hóa và sau dạ dày. Tất cả các mẫu ND của chất chiết cho thấy hoạt tính chống oxy hóa khử sắt đáng kể, mạnh hơn hợp chất đối chứng BHT (4. 0 6 ± 0. 42mM FeSO4 tương đương). Trong số các mẫu PG, chỉ có CSA (tương đương 44 ± 0,16mM FeSO4) có hoạt tính tốt hơn BHT. Trong thử nghiệm CUPRAC, các mẫu ND và PG của CSA được phát hiện là có hiệu quả nhất trong số các mẫu của các loài khác. Rõ ràng, mẫu IN của CCA có hoạt tính CUPRAC tốt hơn so với các mẫu có khả năng sinh học của các chất chiết xuất dạng nước khác.

2.3 Hoạt động ức chế enzym liên quan đến bệnh tiểu đường

Như được chỉ ra trong Bảng 4, hoạt động ức chế enzym phụ thuộc vào nồng độ đã được thấy trong tất cả các chất chiết xuất từ ​​nước （thảo mộc siêu nhân cistanche）. Trong khi các mẫu ND của CPA và CSA (75,89 phần trăm ± 0. 62,8 0. 34 phần trăm ± 0. 19, tương ứng) thể hiện hoạt tính ức chế -amylase cao hơn một chút so với acarbose (75,80 phần trăm ± 0,02) ở nồng độ 1 mg / mL; chỉ có mẫu ND của CSA thể hiện hoạt tính ức chế -glucosidase cao hơn so với hợp chất tham chiếu quercetin ở cả hai nồng độ.

Tóm lại, chất chiết xuất từ ​​nước của C. saloifolius thể hiện hoạt động ức chế enzym tiêu hóa tốt hơn so với chất chiết xuất của các loài khác. Ngoài ra, các mẫu IN của tất cả các chất chiết xuất từ ​​nước cho thấy các hoạt động ức chế enzym thấp hơn so với các mẫu ND. 2.4. Hoạt động ức chế củaAGEs

Như được trình bày trong Bảng 4, hoạt động ức chế AGE phụ thuộc vào nồng độ đã được quan sát thấy trong tất cả các chất chiết xuất từ ​​nước. Các mẫu ND của CCA, CPA và CSA thể hiện hoạt tính ức chế tốt hơn so với hợp chất đối chứng quercetin ở cả hai nồng độ 0. 5 và 1 mg / mL. Tuy nhiên, chỉ có chiết xuất C.salvifolius thể hiện hoạt tính ức chế tốt hơn quercetin trong số IN mẫu của chiết xuất. Các mẫu có khả năng sinh học của chiết xuất nước cho thấy các hoạt động ức chế AGE thấp hơn so với các mẫu không được tiêu hóa. Theo kết quả, mẫu ND chiết xuất từ ​​nước của C. salvifolius có hoạt tính ức chế AGE cao nhất. Tuy nhiên, mẫu IN của chiết xuất nước C. Monspeliensis cho thấy tiềm năng ức chế AGE yếu nhất trong các nồng độ được thử nghiệm.

Bài viết này được trích từ Molecules 2021, 26, 5322. https://doi.org/10.3390/molecules26175322 https://www.mdpi.com/journal/molecules